3_Pesquiza e Identificacion de Anticuerpos DIAMED

PESQUIZA E IDENTIFICACIÓN DE

ANTICUERPOS IRREGULARES

ALOINMUNIZACIÓN

Diagnóstico de aloinmunización

Exposición a antígenos eritrocitarios

30 sistemas / 257 antígenos

(DANIELS, 2005)

(MOREIRA et al, 1996; GIBLETT, 1961)

Inmunogenicidad del antígeno

D > K > c > E > Fya > Jka Dia (?!)

Origen étnica

Frecuencia de los antígenos

Frecuencia de las transfusiones

ALOINMUNIZACIÓN

•Características del

anticuerpo

Temperatura de reactividad

“in vitro”

Naturaleza (natural o

inmune)

Ativación de C “in vitro”

Clase Ig

Autoinmune

Características del antígeno

Sensibilidad a enzimas

proteolíticas

Efecto de dosis

Imunogenicidad

Forma de coneción y

expresión en la membrana,

ex: Dombrock e Wrb-GPA.

Genética, ej:

FYB x FY

CARACTERÍSTICAS DE LOS ANTÍGENOS Y

ANTICUERPOS

Antígeno Frecuencia %

Cauc. africanos

D 85 92

C 68 27

c 80 96

E 29 22

e 98 98

Características

Anticuerpos Naturales, inmunes

(IgG e IgM)

RT / DHRN

autoanticuerpos

T.A., AGH e ENZIMA

Efecto de dosis

Genes RHD e RHCE (cromosoma 1)

2 Proteínas altamente homólogas

Proteínas intergrales con 417 aa,

48 antígenos

Antígenos mas comunes: D, C, c, E, e

417 aa

NH2

COOH

C/c

103ser>pro

E/e

226pro>ala

Sistema Rh (004-ISBT)

Gen KEL (cromosoma 7)

Proteína: 732 aa

24 antígenos

Características

Clase IgG, raramente IgM

activa complemento

RT / DHR

AGH

Imunogenicidad

COOH

NH2

K/k (Met>Thr)193

Kpa/Kpb (Trp/Arg)281

Jsa/Jsb (Pro/Leu)597antígenos Frecuencia%

Cauc. africanos

K 9 2

k 100 100

Kpa 2 <1

Kpb 100 100

Jsa <1 20

Jsb 100 99

Sistema Kell (006-ISBT)

Gen FY (cromosoma 1)

Proteína: 338 aa

6 antígenos

Características:

Clase IgG, raramente IgM

Activa complemento

RT / DHR

AGH

Fya e Fyb (sensíbles a enzimas)

antígenos Frequencia %

Cauc. africanos

Fya 66 10

Fyb 83 23

Fy3 100 32

El fenotipo Fy(a-b-) en africanos es debido a mutaciones de punto 33t>c,

em el sítio GATA1, que impide la expresión eritróide del alelo FYB (gen Fy).

COOH

NH2

Fya/Fyb

(Gly/Asp)

42

Anti-Fy3

Sistema Duffy (008-ISBT)

Gen HUT11 (cromosoma 18)

Proteína: 391 aa

3 antígenos

Características:

Efecto de dosis (Jka)

Classe IgG

Activa complemento

RT / DHR

AGH y enzima

Antígenos Frecuencia%

Cauc. Afr.

Jka 77 92

Jkb 74 49

Jk3 100 100

COOHNH2

Jka/Jkb (Asp/Asn)280

Sistema Kidd (009-ISBT)

Genes GYPA e GYPB

(cromosoma 4)

43 antígenos

GPA importante para la expresión

de Wrb

Características:

T. A. y AGH. ( IgM e IgG)

RT e DHR (rara)

Efecto de dosis

Sensibilidad a enzimas

(excepción Ag U)

antígenos Frecuencia%

Dadores africanos

M 78 74

N 72 75

S 55 31

s 89 93

U 100 100

Ena 100 100

Mk 100 100

M

Ser

Ser

Thr

Thr

Gly

1

5

N

Leu

Ser

Thr

Thr

Glu1

29Met/Thr S/s

UPapaína

Tripsina -quimiotripsina

72

72

40

131Glicoforina B

Glicoforina A

N’

Leu

Ser

Thr

Thr

Glu

5

65

Sistema MNS (002-ISBT)

Gen DI (cromosoma 17)

Proteína: 911 aa

21 antígenos

anticuerpos

Clase IgG

Aactiva complemento

RT / DHR

AGH

Inmunogenicidad

Antígenos Frecuencia%

Dadores Asiáticos

Dia 3 13

Dib 100 100

Wra 1 1

Wrb 100 100

COOHNH2

Dia/Dib

(854Leu/Pro)

400-408

Wra/Wrb

(658Lys/Glu)

Sistema Diego (0010-ISBT)

La expresión de Wrb depende

de la presencia de GPA.

Telen et al, 1990; Spring et al, 1994 ; Rios et al, 2002

gen DO (cromosoma 12)

Glicoproteína (GPI): 314 aa

4 antígenos (fenótipo nulo: Gya-)

HPN

antígenos Frecuencia%

caucasianos africanos

Doa 67 55

Dob 82 89

Joa 100 100

Hy 100 100

Gya 100 100

características

Clase IgG

RT: inmediata / tardía

AGH, Enzima

108

117

Hy (Gly)

Joa (Thr)

265 Doa/Dob

Asn/Asp

NH2

Sistema Dombrock (0014-ISBT)

PESQUIZA DE ANTICUERPOS IRREGULARES

(HEDDLE et al, 1995; REDMAN et al, 1996; ISSIT & ANSTEE, 1998; SCHONEWILLE et al, 2000; CHARACHE et al, 1990)

•AloiNmunización: Riesgo / frecuencia

2,6% - 8,4% receptores eventuales

+ 60% receptores crônicos

•Persistencia del anticuerpo (26% / 10 meses)

Anticuerpos Kidd: < tiempo de detección

30 – 60% RTH

•Respuesta inmune 7 dias después de la transfusión

Anti-Jka (4dias)

PREVENIR

REACCIONES HEMOLÍTICAS TRANSFUSIONALES AGUDAS O

TARDÍAS

Discrepancias entre la tipificación directa y reversa ABO

Acs (anti-A1; anti-I; anti-IH; anti-N y otros)

Panel compuesto por dos o tres células grupo O fenotipadas para los

principales antígenos eritrocitarios

Antígenos con efecto de dosis

R1R1; R2R2; Jk(a+b-) e M+N-

PESQUIZA DE ANTICUERPOS IRREGULARES

•Soluciones potencializadoras de las reaciones PAI

Macromoléculas (proteínas o polímeros - ↓ potencial de

repulción)

Ex: Albumina bovina (*) o Polietilenglicol

Soluciones de baja fuerza iônica (LISS)

Enzimas proteolíticas (↓ nube iônica)

•Test Indirecto da Antiglobulina Humana

Tubo

Gel centrifugación

Microplaca (?)

PESQUIZA DE ANTICUERPOS IRREGULARES

Castilho, 1997

PESQUIZA DE ANTICUERPOS IRREGULARES

IDENTIFICACIÓN DE ANTICUERPOS

IRREGULARES

IDENTIFICACIÓN DE ANTICUERPOS

IRREGULARES

PAI POSITIVO

1 ou + Aloanticuerpo(s)

PAI (P)

auto-control y CD (N)

PAI (P) y auto-control (P)

Ag alta frecuenncia

Fenotipo Nulo

Efecto de dosis

IDENTIFICACIÓN DE ANTICUERPOS

IRREGULARES

PAI POSITIVO

PAI (P)

auto-control y CD (N)

PAI (P) y auto-control (P)

Auto frio interferencias

CD

negativopositivo

Auto-anticuerpo(s) Auto + Aloanticuerpo(s)

complemento

PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS

PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS

•Panel de identificación

AGH X Enzimático

•Panel de células seleccionadas

R1R1; R2R2; fenotipos raros (Mk, Tja, k, Rh17, Kpb)

• Adsorcióno Seleción células o técnicas

Tratamiento enzimático de células seleccionadas

•Congelamiento de hematíes

Nitrógeno líquido

•Fenotipificación / genotipificación

RECURSOS IMUNOHEMATOLÓGICOS

Caso 1

PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS

Paciente/donante: nº de la muestra:

Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado Obs

fenótipo D C E c e Cw K k Fya Fyb Jka Jkb M N S s LISS ENZ

1 R1wR1 + + 0 0 + 0 0 + 0 + + 0 + 0 0 + 1+ 0

2 R1R1 + 0 + + + 0 + + + + + + 0 + + + 1+ 2+

Caso 1) Identificación en muestras conteniendo + de 1 anticuerpo.

Paciente/donante: nº de la muestra:

Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado Obs

fenótipo D C E c e Cw K k Fya Fyb Jka Jkb M N S s LISS

1 R1wR1 + + 0 0 + + 0 + + + + 0 0 + 0 + 1+

2 R1R1 + + 0 0 + 0 + + + 0 0 + + + + + 0

3 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + 0 + 1+

4 R2R2 + 0 + + 0 0 0 + + 0 + 0 + + + 0 1+

5 r’r 0 + 0 + + 0 0 + + + + + 0 + 0 + 1+

6 r”r 0 0 + + + 0 0 + 0 + + + 0 + 0 + 1+

7 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + 0 0 + 1+

8 rr 0 0 0 + + 0 0 + + + + + + 0 + + 1+

9 rr 0 0 0 + + 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0 0

10 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + + + + + 0 + 1+

11 auto 0

X X X X X X X X X X XX X

OBS: antígeno Fyb y sensible a enzimas proteolíticas.

PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS

Paciente/donante: nº de la muestra:

Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado

fenótipo D C E c e Cw K k Fya Fyb Jka Jkb M N S s LISS ENZ

1 R1wR1 + + 0 0 + + 0 + + + + 0 0 + 0 + 1+ 0

2 R1R1 + + 0 0 + 0 + + + 0 0 + + + + + 0 0

3 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + 0 + 1+ 0

4 R2R2 + 0 + + 0 0 0 + + 0 + 0 + + + 0 1+ 3+

5 r’r 0 + 0 + + 0 0 + + + + + 0 + 0 + 1+ 0

6 r”r 0 0 + + + 0 0 + 0 + + + 0 + 0 + 1+ 3+

7 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + 0 0 + 1+ 0

8 rr 0 0 0 + + 0 0 + + + + + + 0 + + 1+ 0

9 rr 0 0 0 + + 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0 0 0

10 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + + + + + 0 + 1+ 0

11 auto 0 0

Caso 1) Identificación en muestras conteniendo + de 1 anticuerpo.

X X X X X X X X X X XX XX

Anticuerpos identificados: anti- Fyb, - E

PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS

Caso 2

PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS

Paciente/donante: nº de la muestra:

Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado Obs

fenótipo D C E c e Cw K k Fya Fyb Jka Jkb M N S s Liss ENZ

1 R1wR1 + + 0 0 + 0 0 + 0 + + 0 + 0 0 + 1+ 0

2 R1R1 + 0 + + + 0 + + + + + + 0 + + + 0 0

Paciente/donante: nº de la muestra:

Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado Obs

fenótipo D C E c e Cw K k Fya Fyb Jka Jkb M N S s Liss 18º

1 R1wR1 + + 0 0 + + 0 + + + + 0 0 + 0 + 0 0

2 R1R1 + + 0 0 + 0 + + + 0 0 + + + + + 0 2+

3 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + 0 + 0 2+

4 R2R2 + 0 + + 0 0 0 + + 0 + 0 + + + 0 0 2+

5 r’r 0 + 0 + + 0 0 + + + + + 0 + 0 + 0 0

6 r”r 0 0 + + + 0 0 + 0 + + + 0 + 0 + 0 0

7 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + 0 0 + 2+ 3+

8 rr 0 0 0 + + 0 0 + + + + + + 0 + + 2+ 3+

9 rr 0 0 0 + + 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0 2+ 3+

10 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + + + + + 0 + 0 2+

11 auto 0 0

Caso 2) Efecto de dosis.

Anticuerpo identificado: anti-M

PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS

Caso 3

PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS

Paciente/donante: nº de la muestra:

Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado

fenótipo D C E c e Cw K k Kpa Kpb Fya Fyb Jka Jkb M N S s Liss ENZ

1 R1wR1 + + 0 0 + 0 0 + 0 + 0 + + 0 + 0 0 + 3+ 4+

2 R1R1 + 0 + + + 0 + + 0 + + + + + 0 + + + 3+ 4+

Paciente/donanter: O Rh negativo nº de la muestra:

Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado

fenótipo D C E c e Cw K k Kpa Kpb Fya Fyb Jka Jkb M N S s LISS ENZ

1 R1wR1 + + 0 0 + + 0 + 0 + + + + 0 0 + 0 + 3+ 4+

2 R1R1 + + 0 0 + 0 + + 0 + + 0 0 + + + + + 3+ 4+

3 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 0 + + + + + + + 0 + 3+ 4+

4 R2R2 + 0 + + 0 0 0 + 0 + + 0 + 0 + + + 0 3+ 4+

5 r’r 0 + 0 + + 0 0 + 0 + + + + + 0 + 0 + 3+ 4+

6 r”r 0 0 + + + 0 0 + 0 + 0 + + + 0 + 0 + 3+ 4+

7 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + 0 + + 0 0 + 3+ 4+

8 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + + + + + + 0 + + 3+ 4+

9 rr 0 0 0 + + 0 + + 0 + + 0 + 0 + 0 + 0 3+ 4+

10 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + 0 + 3+ 4+

11 auto 0 0

Caso 3) antígeno de alta frecuencia poblacional.

Fenotipificación: Kp(a+b-)

PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS

Caso 3) antígeno de alta frecuencia poblacional alo-adsorción con rr

Anti- Kpb, - D, - C

PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS

Paciente/donanter: O Rh negativo nº de la muestra:

Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado

fenótipo D C E c e Cw K k Kpa Kpb Fya Fyb Jka Jkb M N S s LISS ENZ

1 R1wR1 + + 0 0 + + 0 + 0 + + + + 0 0 + 0 + 3+ 4+

2 R1R1 + + 0 0 + 0 + + 0 + + 0 0 + + + + + 3+ 4+

3 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 0 + + + + + + + 0 + 3+ 4+

4 R2R2 + 0 + + 0 0 0 + 0 + + 0 + 0 + + + 0 3+ 4+

5 r’r 0 + 0 + + 0 0 + 0 + + + + + 0 + 0 + 3+ 4+

6 r”r 0 0 + + + 0 0 + 0 + 0 + + + 0 + 0 + 0 0

7 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + 0 + + 0 0 + 0 0

8 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + + + + + + 0 + + 0 0

9 rr 0 0 0 + + 0 + + 0 + + 0 + 0 + 0 + 0 0 0

10 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + 0 + 0 0

11 auto 0 0

Caso 4

PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS

Paciente/donante: nº de la muesstra:

Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado

fenótipo D C E c e Cw K k Kpa Kpb Fya Fyb Jka Jkb M N S s Liss ENZ

1 R1wR1 + + 0 0 + 0 0 + 0 + 0 + + 0 + 0 0 + 2+ 0

2 R1R1 + 0 + + + 0 + + 0 + + + + + 0 + + + 1+ 0

Caso 4) antígeno de alta frecuencia poblacional.

Fenotipificación:Fy(a-b+) M-N-S-s-

PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS

Paciente/donante: O Rh negativo nº de la muestra:

Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado

fenótipo D C E c e Cw K k Kpa Kpb Fya Fyb Jka Jkb M N S s LISS 18°

1 R1wR1 + + 0 0 + + 0 + 0 + + + + 0 0 + 0 + 2+ 3+

2 R1R1 + + 0 0 + 0 + + 0 + + 0 0 + + + + + 1+ 3+

3 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 0 + + + + + + + 0 + W 3+

4 R2R2 + 0 + + 0 0 0 + 0 + + 0 + 0 + + + 0 1+ 3+

5 r’r 0 + 0 + + 0 0 + 0 + + + + + 0 + 0 + W 3+

6 r”r 0 0 + + + 0 0 + 0 + 0 + + + 0 + 0 + 1+ 3+

7 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + 0 + + 0 0 + 2+ 3+

8 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + + + + + + 0 + + 2+ 3+

9 rr 0 0 0 + + 0 + + 0 + + 0 + 0 + 0 + 0 2+ 3+

10 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + 0 + 1+ 3+

11 auto 0 0

TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O

AUTO-CONTROL POSITIVO

PATOLOGIAS causas investigar

Anemia hemolítica auto-

imune en caliente / frio.

IgG / IgM / IgA / Complemento

Sistema Rh y utros

Caracterizar a Ig y

Complemento

Enfermedad hemolítica

del recién nacido

Incompatibilidad sanguínea

materno-fetal

Identificar el Ac

(tipificación y elución)

Reacción transfusional

hemolítica

Error técnico

Aloanticuerpo en bajo título

Identificar el Ac

(Elución e IAI)

Anemia inducida por

droga

a-metildopa Historia clínica

Poliaglutinación Coloides

Reaciones inflamatorias

Historia clínica

TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O AUTO-

CONTROL POSITIVO

Presencia de auto-anticuerpos y complemento

Ampla reactividad

Interfieren en la investigación e identificación de aloanticuerpo

Investigación

AGH monoespecífica (IgG e C)

32% dos pacientes con AHAI presentan aloanticuerpos

DIFICULTADES

TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O AUTO-

CONTROL POSITIVO

¿QUE HACER ?

Inactivación de complemento

Disociación Fenotipificación / Auto-adsorción de la muestra de suero

Pesquiza e identificación de aloanticuerpos

Genotipificación

TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O AUTO-

CONTROL POSITIVO

Disociación de los auto-anticuerpos

Temperatura (Acs frios)

Difosfato de cloroquina

ZZAP

Glicina EDTA

Auto-adsorción

Necesidad de grandes volúmes de hemtíes

Tiempo para realización del procedimento

TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O AUTO-

CONTROL POSITIVO

Hematíes LI AGH

I 3+ 1+

II 3+ 2+

Auto 3+ W

Caso 5: autocontrol positivo a temperatura ambiente

INVESTIGAR HISTORIA TRANSFUSIONAL RECIENTE

REALIZAR C.D. (reacción hemolítica transfusional o auto-inmune)

REALIZAR AUTO-ADSORCIÓN EN FRIO

TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O AUTO-

CONTROL POSITIVO

Paciente/donante: nº de la muestra:

Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado

fenótipo D C E c e Cw K k Fya Fyb Jka Jkb M N S s LI AGH

1 R1wR1 + + 0 0 + + 0 + + + + 0 0 + 0 + 3+ W

2 R1R1 + + 0 0 + 0 + + + 0 0 + + + + + 3+ 2+

3 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + 0 + 3+ 1+

4 R2R2 + 0 + + 0 0 0 + + 0 + 0 + + + 0 3+ 2+

5 r’r 0 + 0 + + 0 0 + + + + + 0 + 0 + 3+ W

6 r”r 0 0 + + + 0 0 + 0 + + + 0 + 0 + 3+ W

7 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + 0 0 + 3+ 1+

8 rr 0 0 0 + + 0 0 + + + + + + 0 + + 3+ 2+

9 rr 0 0 0 + + 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0 3+ 2+

10 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + + + + + 0 + 3+ W

11 auto 3+ W

TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O

AUTOCONTROL POSITIVO

Caso 5: autocontrol positivo a temperatura ambiente

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

AgAg

Ag

Ag

TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O

AUTOCONTROL POSITIVO

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

AgAg

Ag

AgAg

Remoción del auto-anticuerpo frio con

lavado de los hemtíes con Nacl (0,9%)

a 37ºC

TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O

AUTOCONTROL POSITIVO

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

AgAg

TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O

AUTOCONTROL POSITIVO

Remoción del auto-anticuerpo frio

con lavado de los hemtíes con Nacl

(0,9%) a 37ºC

Muestra con auto-anticuerpo frio + aloanticuerpo

TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O

AUTOCONTROL POSITIVO

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

AgAg

Auto-adsorción en frio 4°C

TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O

AUTOCONTROL POSITIVO

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

AgAg

Muestra adsorbida para test de

IAI

TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O

AUTOCONTROL POSITIVO

Paciente/donanter: nº de la muestra:

Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado

fenótipo D C E c e Cw K k Fya Fyb Jka Jkb M N S s LI AGH

1 R1wR1 + + 0 0 + + 0 + + + + 0 0 + 0 + 0 0

2 R1R1 + + 0 0 + 0 + + + 0 0 + + + + + W 2+

3 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + 0 + 0 0

4 R2R2 + 0 + + 0 0 0 + + 0 + 0 + + + 0 1+ 2+

5 r’r 0 + 0 + + 0 0 + + + + + 0 + 0 + 0 0

6 r”r 0 0 + + + 0 0 + 0 + + + 0 + 0 + 0 0

7 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + 0 0 + 0 0

8 rr 0 0 0 + + 0 0 + + + + + + 0 + + 0 2+

9 rr 0 0 0 + + 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0 W 2+

10 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + + + + + 0 + 0 0

11 auto 0 0

Anticuerpos identificados: anti-S

TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O

AUTOCONTROL POSITIVO

Caso 5: autocontrol positivo a temperatura ambiente

Hematíes LI AGH

I 0 2+

II 0 2+

Auto 0 2+

Caso 6

(auto control positivo en AGH)

•INVESTIGAR HISTÓRIA TRANSFUSIONAL RECIENTE

•REALIZAR C.D. (reación hemolítica transfusional o auto-inmune)

•REALIZAR DISOCIACIÖN y AUTO-ADSORCIÓN A 37°C

TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O

AUTOCONTROL POSITIVO

Paciente/donante: nº de la muestra:

Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado

fenótipo D C E c e Cw K k Fya Fyb Jka Jkb M N S s LI AGH

1 R1wR1 + + 0 0 + + 0 + + + + 0 0 + 0 + 0 2+

2 R1R1 + + 0 0 + 0 + + + 0 0 + + + + + 0 2+

3 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + 0 + 0 2+

4 R2R2 + 0 + + 0 0 0 + + 0 + 0 + + + 0 0 2+

5 r’r 0 + 0 + + 0 0 + + + + + 0 + 0 + 0 2+

6 r”r 0 0 + + + 0 0 + 0 + + + 0 + 0 + 0 2+

7 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + 0 0 + 0 2+

8 rr 0 0 0 + + 0 0 + + + + + + 0 + + 0 2+

9 rr 0 0 0 + + 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0 0 2+

10 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + + + + + 0 + 0 2+

11 auto 0 2+

CASO 6) Identificación en muestras con auto control positivo e AGH .

TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O

AUTOCONTROL POSITIVO

Disociación del auto anticuerpo

con Difosfato de cloroquina (CDP)

20% en PBS (pH 7,2)

Ag

Ag

AgAg Ag

Ag

Ag

AgAg

Ag

Ag

AgAg

AgAg

CDP

CDP

CDP

CDP

CDP

CDPCDPCDP

CDP

CDP

CDP

CDP

CDP

CDP

CDP

TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O

AUTOCONTROL POSITIVO

Ag

Ag

AgAg Ag

Ag

Ag

AgAg

Ag

Ag

AgAg

AgAg

TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O

AUTOCONTROL POSITIVO

Dissociación del auto anticuerpo

con Difosfato de cloroquina (CDP)

20% en PBS (pH 7,2)

Muestra co auto-anticuerpo frio + aloanticuerpo

TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O

AUTOCONTROL POSITIVO

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

AgAg

Auto-adsorción a 37°C

TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O

AUTOCONTROL POSITIVO

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

Ag

AgAg

TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O

AUTOCONTROL POSITIVO

Muestra adsorbida para test de

IAI

Paciente/donante: nº de la muestra:

Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado

fenótipo D C E c e Cw K k Fya Fyb Jka Jkb M N S s LI AGH

1 R1wR1 + + 0 0 + + 0 + + + + 0 0 + 0 + 0 0

2 R1R1 + + 0 0 + 0 + + + 0 0 + + + + + 0 2+

3 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + 0 + 0 2+

4 R2R2 + 0 + + 0 0 0 + + 0 + 0 + + + 0 0 0

5 r’r 0 + 0 + + 0 0 + + + + + 0 + 0 + 0 0

6 r”r 0 0 + + + 0 0 + 0 + + + 0 + 0 + 0 0

7 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + 0 0 + 0 0

8 rr 0 0 0 + + 0 0 + + + + + + 0 + + 0 0

9 rr 0 0 0 + + 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0 0 2+

10 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + + + + + 0 + 0 0

11 auto 0 0

CASO 6) Identificación en muestras con auto control positivo e AGH .

Anticuerpos identificados: anti-K

TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O

AUTOCONTROL POSITIVO

Técnicas de congelamiento

Sueros raros y anticuerpos contra antígenos públicos

•Panel de células selecionadas y fenotipos nulos

Fenotipificación es siempre fundamental

Técnicas de disociación

Técnicas de adsorción (auto o alo):•Frío / caliente/ enzimáticas.

CONCLUSIÓN

Paneles de hemátíes

história transfusional, obstétrica y diagnóstico

PESQUIZA E IDENTIFICACIÓN DE ANTICUERPOS

IRREGULARES

•DANIELS, G. Human Blood Groups. Oxford: Blackwell Science, 1995. 737p.

•VERGELEN-TYLER, V. (Ed.). Technical Manual. 13. ed. Bethesda: American

Association of Blood Banks, 1999. 798p.

•DANIELS, G & BROMILOW, I. Essential Guide to Blood Groups. Oxford:

Blackwell Publishing, 2007. 99p.

•MOLLISON, P. L.; ENGELFRIET, C. P.; CONTRERAS, M. Blood transfusion

in clinical medicine. 10 ed. Oxford: Blackwell Science, 1997.

Referencias bibliográficas