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Los taninos son compuestos sintetizados de forma natural por las plantas. En función del origen botánico del tanino éste pertenecerá a un grupo químico distinto, pero todos pueden unirse a proteínas. Esto nos explica el empleo de taninos en vindicación: en mosto pueden usarse como agentes clarificantes y en vino como aditivo. Nuestros taninos protegen y refuerzan la estructura, el cuerpo y la fruta de los vinos, destacando las características varietales. Son seleccionados en base a estrictos controles de pureza y calidad, para obtener vinos redondos, armoniosos y aterciopelados.
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ANLISIS CUALITATIVO Y CUALITATIVO DE DROGAS CON
TANINOS
INTRODUCCION
Los taninos son compuestos sintetizados de
forma natural por las plantas. En funcin del
origen botnico del tanino ste pertenecer a
un grupo qumico distinto, pero todos pueden
unirse a protenas. Esto nos explica el empleo
de taninos en vindicacin: en mosto pueden
usarse como agentes claricantes y en vino
como aditivo. Nuestros taninos protegen y
refuerzan la estructura, el cuerpo y la fruta de
los vinos, destacando las caractersticas
varietales. Son seleccionados en base a
estrictos controles de pureza y calidad, para
obtener vinos redondos, armoniosos y
aterciopelados.1
CLASIFICACIN:
La clasificacin de los taninos se realiza
comnmente en dos grandes grupos:
Taninos condensados o
proantocianidnico o no hidrolizables,
cuya particularidad es que liberan tras
una hidrlisis cida una antocianidina. En
el caso del tanino de pepita se libera
cianidina, por lo que se denomina
procianidina. En el caso del tanino de
hollejo se trata de una mezcla de
procianidina y prodelfinidina. El nombre
genrico de proantocianidina se usa
cuando se desconoce la antocianidina
formada. Qumicamente se trata de
polmeros de flavanoles. 2
Taninos hidrolizables, en los cuales
despus de una hidrlisis cida se libera
cido glico o cido elgico. Se
denominan galotaninos o elagitaninos
respectivamente. Los elagitaninos estn
estructurados como molculas lineales de
glucosa enlazadas a las funciones
carboxilo de los grupos
hexahidroxidifnicos del cido elgico,
mientras que los galotaninos estn
constituidos por ncleos de glucosa en
forma cclica que forman enlaces con la
funcin cida del cido glico. En ambos
casos se trata de estructuras de una
complejidad relativa (Figuras 1 y 2).2
Figura 1: Derivados de la hidrlisis de los taninos hidrolizables
a) cido 3, 4, 5 trihidroxibenzoico (c. Glico) b) cido elgico.
Figura 2:: Flavan-3-ol. Monmero estructural del que derivan los taninos condensados
DROGAS CON TANINOS:
Los taninos industriales para uso
agroalimentario y farmacutico son
obtenidos de diversas especies vegetales
mediante su extraccin de las partes leosas,
frutos o agallas. En enologa se utilizan
comnmente como coadyuvante de
clarificacin de vinos y mostos, y
particularmente, en vinificacin en tinto,
como coadyuvante de afinado, buscando la
estabilizacin de la materia colorante y la
estructuracin armnica de los vinos.
La calidad del producto final depende de su
riqueza en polifenoles totales y ms
especficamente de la tipologa y
concentracin en el principio activo, es decir,
de tanino. A partir de aqu se empiezan a
distinguir notables diferencias entre los
productos que se pueden encontrar en el
mercado.
La cantidad de tanino depende, adems de su
origen botnico, de su proceso de obtencin
(atomizacin, liofilizacin, evaporacin, etc.),
del tipo de solvente (etanol, agua, etc.) y del
tiempo de extraccin, pudiendo obtener,
como demuestra la tabla II, un rango de
concentracin del principio activo muy
amplio, lo cual condiciona sin duda la calidad
de los resultados finales tras su utilizacin.2
La tara (Caesalpinia spinosa) es un rbol de
origen peruano que crece en las zonas secas.
El Per es el mayor productor de tara en el
mundo con el 80% de la produccin mundial.
La mayor parte de esta produccin se destina
a la exportacin, como polvo de vaina de tara
a pases como: Argentina, Italia, Estados
Unidos, Alemania, Brasil, Uruguay, Blgica,
China, Sudfrica, Mxico, Corea, Suiza y
Francia3
La tara, como fuente natural integral (tallo,
hojas y frutos) es utilizada desde la poca
prehispnica en la medicina folclrica o
popular como: astringente, cicatrizante,
antidisentrico, tambin como mordiente en
teidos. Se atribuye estas propiedades a su
gran potencial como antioxidante. 3
Las vainas, previamente despepitadas,
representan aproximadamente el 62% del
peso del fruto, en esta se concentra la mayor
parte de los taninos. Las vainas secas son
molidas para obtener polvo de tara de
diferente granulometra (grueso o ultrafino),
del que se puede obtener un extracto acuoso
que luego de ser decantado/filtrado,
concentrado y secado por atomizacin se
obtiene extracto tnico de tara, del que se
puede obtener cido tnico, cido galotnico
y cido glico.3
En los ltimos aos se ha incrementado la
aplicacin industrial de la tara, debido a que
sus vainas son fuentes importante de taninos,
un compuesto fenlico que se utiliza en la
industria como clarificador del vino, como
sustituto de la malta en la elaboracin de
cerveza y como materia prima para la
produccin de cido glico que es utilizado
como antioxidante en la industria de los
aceites.4
Figura 3 ; Caesalpinia spinosa
(Tara)
En las tres titulaciones el punto final de la
reaccin se determina con tiras de papel
almidonado (indicador externo), vira a violeta
intenso en el punto de equivalencia.
El blanco nos servir para determinar el gasto
real de la titulacin.
Gasto A Gasto B = A-B
Gasto C Gasto B = C-B
Se determinara la cantidad de g obtenidos en
10 mL de muestra segn:
A-B ----------- 0.1 g (patrn)
C-B ----------- X
X = contenido de taninos (g) en 10 mL de
muestra problema
Expresar los resultados en porcentajes de
taninos en la muestra
MATERIALES Y METODOS:
b. Anlisis Cuantitativo: Se separa 10 mL de la solucin obtenida en la etapa de
extraccin de la harina de Tara y se
procede a titular con Yodo segn como se
muestre en los siguientes esquemas:
PREPARACIN DEL PATRN:
PREPARACIN DEL BLANCO:
PREPARACIN DE LA MUESTRA:
YODO 2.5%
GASTO: A
2mL de NaHCO3 + c.s.p
para 20 mL con agua
destilada
YODO 2.5%
GASTO: B
10 mL de solucin de cido
tnico 1% + 2mL de
NaHCO3 + c.s.p para 20 mL
con agua destilada
10 mL de solucin muestra
problema + 2mL de NaHCO3 +
c.s.p para 20 mL con agua
destilada
YODO 2.5%
GASTO: C
RESULTADOS:
a. Anlisis Cualitativo
b. Anlisis Cuantitativo:
Clculos:
- Calculo del gasto real
9.1 mL 1.4 mL = 7.7 mL
8 mL 1.4 mL = 6.6 mL
- Determinacin cantidad de g obtenidos
en 10 mL de muestra:
7.7 mL ----------- 0.1 g (patrn)
6.6 mL ----------- X
X = 0.085 g taninos en 10 mL en la
muestra
- Expresando los resultados en
porcentajes de taninos en la muestra:
0.085g taninos ----- 10 mL
0.8571g taninos ----- 100mL
1g de tara ----- 100 %
0.8571 ----- X%
X = 85.71 %
Gasto del patrn: 9.1 mL
Gasto del blanco: 1.4 mL
Gasto de la muestra: 8 mL
CONCLUSIONES:
La tara presenta taninos hidrolizables
del tipo taninos glicos.
El anlisis cuantitativo de taninos de la
extraccin de harina de Tara se pudo
determinar porque el cido tnico fija el
yodo metlico el cual est en medio
alcalino.
La cantidad de taninos que
encontramos en nuestra muestra fue
de 85.71% , es decir el procedimiento
tuvo un rendimiento muy cercano al
100 % .
CUESTIONARIO
1. Explique las funciones de los taninos en las especies vegetales
En las plantas cumplen funciones de defensa ante el herbivorismo. Los taninos en
general son toxinas que reducen significativamente el crecimiento y la supervivencia de
muchos herbvoros cuando se adicionan a su dieta. Los taninos pueden inactivar las
enzimas digestivas de los herbvoros y crear complejos agregados de taninos y protenas
de plantas que son difciles de digerir. Adems, tienen potencial de producir rechazo al
alimento ("antifeedants" o "feeding repellents") en una gran diversidad de animales. Los
mamferos como la vaca, el ciervo y el simio caractersticamente evitan a las plantas o
partes de las plantas con alto contenido de taninos. Las frutas no maduras, por ejemplo,
con frecuencia tienen altos contenidos de taninos, que pueden estar concentrados en
las capas celulares ms externas de la fruta.1
Es interesante el dato de que los humanos usualmente prefieren un cierto nivel de
astringencia en las comidas que contienen taninos, como las manzanas, las zarzamoras,
y el vino tinto. Recientemente, son los taninos del vino tinto los que mostraron poseer
propiedades de bloquear la formacin de endotelina-1, una molcula seal ("signaling
molecule") que produce la constriccin de los vasos sanguneo2, lo cual disminuira el
riesgo de enfermedades cardacas a aquellos que consuman vino tinto en forma
moderada.
Si bien hay taninos especficos que pueden ser saludables para el hombre, en general
son txicos, debido a las mismas propiedades que los hace buenos para la curtiembre:
su capacidad de unir entre s protenas de forma no especfica. Durante mucho tiempo
se pens que los taninos formaban complejos con las protenas del intestino de los
herbvoros formando puentes de hidrgeno entre sus grupos hidroxilo y los sitios
electronegativos de la protena, pero evidencia ms reciente tambin avala una unin
covalente entre los taninos (y otros compuestos fenlicos provenientes de las plantas)
y las protenas de los herbvoros que los consumen.1
Los taninos de las plantas tambin funcionan como defensas contra los
microorganismos. Por ejemplo, el corazn de madera muerta de muchos rboles
contiene altas concentraciones de taninos que ayudan a prevenir el desmoronamiento
por ataques de hongos y bacterias patgenos.1
2. Describa los principales mecanismos de accin que expliquen el efecto antidiarreicos de
los taninos.
En los pases en desarrollo, un cuarto de la mortalidad infantil est relacionada con la diarrea .
Lalas tasas de mortalidad ms altas se han informado de que en nios menores de cinco aos
de edad. Durante la pasada decada la terapia de rehidratacin oral, ha reducido muertes por
enfermedad diarreica aguda, mientras que la diarrea crnica sigue siendo un problema que
amenaza la vida de los diferentes pases del mundo, en las que la malnutricin es un factor de
co-existente y complicacin comn. Nmero de factores, talescomo infecciosa, inmunolgica y
nutricional ha sido involucrados en la perpetuacin del sndrome diarreico .Muchas plantas
convenientemente disponibles en la India se utilizan en la medicina tradicional para el
tratamiento de la diarrea y la disentera. De las plantas autctonas usadas, Andrographis
paniculata, Asparagus racemosus, Butea monosperma, Cassia auriculata y otros. Varios estudios
han demostrado que la administracin previa con algunos extractos de plantas tenaun efecto
protector en el tracto intestinal. En el estudio citado , etanol y extractos acuosos de Asparagus
racemosus que no han sido estudiados hasta ahora, sern evaluado por su potencial anti-
diarreicas en contra de la diarrea inducida por aceite ricino, la motilidad gastrointestinal en la
prueba preparado de carbn y PGE2. Entero estancamiento inducida enRatas Wistar albino.
El etanol y el extracto acuoso de Asparagus racemosus exhibi actividad anti-diarreicas
significativa contra aceite de ricino diarrea inducida en ratas. Los extractos tenan una actividad
similar a la loperamida, cuando se prob en 200 y250 mg / kg y reduccin estadsticamente
significativa en la frecuencia de defecacin y la humedad de la fecal excrementos en
comparacin con las ratas de control no tratadas.
Es ampliamente conocido que el aceite de ricino o cido ricinoleico su componente activo induce
cambios de permeabilidad en fluido de la mucosa y el transporte de electrolitos que resulta en
una respuesta hipersecretor y diarrea. La estudios experimentales en ratas demostraron un
aumento significativo en la vena porta de la concentracin de PGE2 despus administracin oral
de aceite de ricino. Ricinoleico cido aument notablemente la PGE2 contenido en el intestino
lumen y tambin causado en aumento de la secrecin neta del agua y electrolitos en el intestino
delgado.
Los resultados indican que el etanol y acuosa extracto de Asparagus racemosus posee
significativa actividad anti-diarreicas debido a su efecto inhibidor tanto sobre la propulsin
gastrointestinal y secrecin de fluidos. La datos obtenidos son consistentes con el informe de la
literatura sobre actividad antidiarreico de la raz pubescens Asparagus mediante la prueba de la
motilidad gastrointestinal y diarrea oilinduced ricino y la acumulacin intraluminal de fluido en
ratas . El efecto inhibidor del extracto justificado el uso de la planta como un agente anti-
diarreica no especfica en la medicina popular. Otras investigaciones detalladas estn en marcha
para determinar la exacta fitoconstituyentes que son responsables de la actividad antidiarreica3.
3. Proponga la metodologa de trabajo para la extraccin y cuantificacin de taninos y acido
glico de la tara
Estudio de la cintica de hidrlisis de taninos:
Se realiz un proceso de extraccin de los taninos y una hidrlisis cida; teniendo como
variable independiente el tiempo de hidrlisis (15 niveles) y variables dependientes la
concentracin de cido glico libre y compuestos fenlicos totales. Para la evaluacin
de las caractersticas antioxidantes de los taninos hidrolizados, se procedi a una
purificacin del cido sulfrico, mediante una separacin lquido-lquido con acetato de
etilo. 4
a. Extraccin.- Se realiz una extraccin con acetona al 80% (solvente que no
interfiere con el proceso de hidrlisis y que garantiza una mxima extraccin), con
una relacin materia prima: solvente de 1: 100 (p/v), durante 20 horas a 4 C; luego
se centrifug a 4000 rpm durante 15 min, obtenindose el extracto entero (EE). El
EE se concentr a vaco a 38 C, para eliminar la acetona luego se resuspendi en
agua destilada; se enfri a 4 C y mantuvo durante 16 horas a esta temperatura y
posteriormente se centrifug a 4000 rpm por 15 min, con el fin de conseguir una
clarificacin adecuada. El extracto acuoso obtenido se denomina extracto bruto
(EB).
b. Hidrlisis.- Al EB con una concentracin de taninos de 20 mg glico equi./ml se
adicion H2SO4 hasta una concentracin 2N y se someti en bao Mara a 100C por
diferentes tiempos: 0; 0.5; 1; 1; 2; 4; 5; 6; 8; 9; 20; 24 y 28 horas. El extracto fue
centrifugado para obtener el extracto hidrolizado (EH), al cual se determin su
concentracin de cido glico y compuestos fenlicos totales y se determin el
grado de hidrlisis (GH) mediante la siguiente relacin:
c. Purificacin.- El EH, se someti a una purificacin mediante una separacin
liquido-liquido con acetato de etilo, en una relacin 1:2 (v/v) hidrolizado: acetato de
etilo, dos veces consecutivas con la finalidad de eliminar el cido sulfrico en la fase
acuosa. El acetato de etilo fue removido por evaporacin al vaco a 38 C hasta
sequedad, aproximadamente 5 minutos, recuperndose los compuestos con etanol
absoluto.
Figura a: Proceso
de extraccin
Referencias bibliogrficas:
1. GW Felton, K Donato, RJ Del Vecchio, SS Duffey. 1989. "Activation of plant foliar oxidases
by insect feeding reduces nutritive quality of foliage for noctuid herbivores". Journal of
Chemical Ecology 15: 2667-2694.
2. R Corder, JA Douthwaite, DM Lees. 2001. "Endothelin-1 synthesis reduced by red wine".
Nature. 414: 863-864.
3. Venkatesan N, Vadivu T, Sathiya N, Arokya A, James BP. Anti-diarrhoeal potential of
Asparagus racemous wild root extract in laboratory animals. J Pharm Pharmaceut Sci
2005; 8: 39-46
4. Campos Gutierrez, D. Obtencin y caracterizacin de taninos hidrolizados de tara
(Caesalpinia spinosa) y evaluacin de su eficacia antioxidante en carnes y aceites
vegetales. Per biodiverso (Lima, Per) 2010
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