anticuerpos antifosfolipidos

Anticuerpos antifosfolípidos

Julissa Pinto Roldán

R1 Patología Clínica

Anticuerpos dirigidos contra epitopos que contienen fosfolípidos.

• La primera evidencia de los aFL fue en 1952, con los falsos positivos para la detección de Sífilis.

• Antígeno: cardiolipina-colesterol-leutina.

• En 1998 en un panel Internacional en Sapporo (Japón), se estableció los criterios para definir el Síndrome Antifosfolípido (SAF).

• El SAF presenta trombosis arterial y/o venosa, abortos a repetición y trombocitopenia, al menos en dos determinaciones, con un intervalo superior a 8 semanas.

• Entre los antígenos que se distinguen para los aFL se encuentran: ß2GPI, protrombina, anexina, proteína C y S entre otras.

Anticuerpos Anti-Fosfolípidos

Reacción aguda: los Ac son transitorios y está asociada con infecciones virales, varicela y escarlatina.

Reacción crónica: (persiste + de 6 meses) asociada a desórdenes autoimmunes (LES, Sjogren, anemia hemolítica, Tiroiditis de Hashimoto y AR.

• Se une a sustancias con carga negativa como fosfolípidos, heparina, lipoproteínas, y plaquetas activadas.

• La 2GPI es un anticoagulante natural ya que inhibe la vía intrínseca de la coagulación, la actividad de protrombinasa, y la agregación plaquetaria dependiente de ADP.

• Estos anticuerpos se asocian más a trombosis venosa.

• No existe diferencia con el tipo de inmunoglobulina y el tipo de trombosis con respecto a los anticuerpos anti-cardiolipina.

2 Glicoproteína I

Los individuos con niveles significativos de anticuerpos anti fosfolípidos presentan

frecuentemente alteraciones de la coagulación

VIA EXTRINSECA LESION TISULAR

VIA EXTRINSECA LESION TISULAR

FACTOR TISULAR

VII VII a / FT Ca ++

Síndrome anti fosfolípidoCriterios de laboratorio

• Anticuerpos anticardiolipina presentes en títulos medios o elevados. De isotipo IgM ó IgG presentes en más de dos ocasiones separadas seis semanas, determinados por ELISA para cardiolipina dependiente del cofactor 2 glicoproteína I.

• Anticoagulante lúpico presente. En más de dos ocasiones separadas al menos seis semanas.

Los anticuerpos anti fosfolípidos modifican las pruebas para la determinación de la funcionalidad de la cascada de la coagulación, aumentan los tiempos de coagulación

Anticoagulante lúpico

In vitro tiene una actividad anticoagulante contradictoria con lo que sucede in vivo que es pro coagulante

El anticoagulante lúpico es una paradoja fascinante que ocurre frecuentemente en el laboratorio de coagulación. Aunque frecuentemente prolonga las pruebas de coagulación en un grado mayor que las hemofilias, raramente están asociados con sangrado, pero frecuentemente ocasiona problemas trombóticos.

Enfermedades autoinmunes. LES. Artritis reumatoide. OtrosExposición a drogas. Clorpromazina. Procainamida. Hidralazina. QuinidinaAntibióticos. FenitoínaInfecciones. Bacterianas. Protozoarios (Pneumocystis carinii). ViralesDesórdenes linfoproliferativos. Leucemia de células pilosas. Linfoma maligno. Macroglobulinemia de Waldenstrom

Los anticuerpos antifosfolípidos no sólo involucran al fosfolípido sino también a otra proteína, de la cascada de la coagulación, a la que se le denomina cofactor.

cofactorfosfolípido

Anticuerpos dirigidos sólo al cofactor

Anticuerpos dirigidos al fosfolípido + cofactor

Anticuerpos dirigidos sólo al fosfolípido

• cardiolipina (difosfatidil glicerol)

• fosfatidilserina

• fosfatidilcolina

• fosfatidil inositol

• fosfatidil etanolamina.

Los antígenos fosfolípidicos más comunes

• 2 glicoproteína I (apolipoproteína H). El más estudiado, tiene actividad anticoagulante natural in vitro.

• protrombina

• anexina V

• proteína C

• proteína S

Cofactores

Técnicas empleadas para detectar anticuerpos antifosofolípidos

VDRL y RPR

Técnica de aglutinación en que el fosfolípido (mezcla de lecitina y cardiolipina) se encuentra sobre cristales de colesterol, el anticuerpo aglutina las partículas

SIFILIS

Anticoagulante lúpico(se asoció rápidamente al lupus)

Complejo protrombinasa (factor Xa + factor Va + membranas de plaquetas activadas +

Ca ++)

Técnicas empleadas para detectar anticuerpos antifosfofolípidos

In vivo:

En la prueba in vitro se sustituyen las plaquetas por fosfolípidos, losAc. anti pL inhiben la reacción

protrombina trombina

Anticoagulante lúpico

• prueba de detección (tiempo de tromboplastina parcial activado, tiempo de tromboplastina tisular diluida o prueba del veneno de víbora de Russell).

El diagnóstico se efectúa en tres pasos consecutivos:

Técnicas empleadas para detectar anticuerpos antifosfofolípidos

• identificación del inhibidor (se repite la prueba que da mal mezclando el plasma del paciente con plasma normal 1:1)

• prueba confirmatoria. Se repite la prueba coagulométrica agregando un exceso de fosfolípidos. Esto debe anular el efecto del inhibidor

Si alguna de estás pruebas está alargada

Si no se corrige existe inhibidor plasmático

La técnica que das más información es el ELISA, puede diferenciar contra qué fosfolípido y contra cuál cofactor están dirigidos. Es la técnica actual de referencia para anticuerpos antifosfolípdos

También da información del isotipo involucrado y título de los mismos.

Técnicas empleadas para detectar anticuerpos antifosofolípidos

YY

YYYY

Conjugado anti isotipo inmunoglobulina

Complejo

fosfolípido / cofactor

Técnicas empleadas para detectar anticuerpos antifosofolípidos

Tipo de anticuerpo antifosfolípido antígeno Falso positivo biólogico (serología luética +) Cardiolipina

Anticuerpos anticardiolipina

Tipo A con actividad anticoagulante

Tipo B sin actividad anticoagulante

Cardiolipina / 2 glicoproteína I

Anticoagulante lúpico Fosfolípido / protrombina

Anti fosfolípidos verdaderos Fosfolípido sin cofactor

Anticuerpos anti cofactor: Anti 2 – glicoproteína I

Anti protrombina Anti proteína C Anti proteína S Anti anexina V Anti trombomodiluna

2 glicoproteína I

Protrombina

Proteína CProteína SAnexina VTrombomodulina

Anticuerpos anticardiolipina (AAC).

Se detectan por ELISA.

• Los que sólo son contra el fosfolípido sólo aparecen en ciertas infecciones (sífilis). No están vinculados al síndrome

• Los dirigidos al neo epítopo con el cofactor se asocian a manifestaciones clínicas del síndrome.

Valor diagnóstico de los anticuerpos antifosfolípidos y cofactores

Los anticuerpos dirigidos contra otros fosfolípidos, pueden detectarse por ELISA, pero no aportan más información que los AAC.

Anticuerpos contra 2 glicoproteína

Se detectan por ELISA, al inmovilizar la proteína aparece el neoepitopo como si estuviera unido al fosfolípido.

• Tienen gran valor para identificar un grupo de pacientes con el síndrome que tiene riesgo aumentado de trombosis.

• Existen pacientes con las manifestaciones clínicas del síndrome, con anticoagulante lúpico y anticuerpos AAC negativo, que son positivos para esta proteína.

•En conclusión: son de gran valor para la toma de decisiones terapéuticas

La prevalencia en pacientes con lupus oscila entre el 31 al 27 %

Valor diagnóstico de los anticuerpos antifosfolípidos y cofactores

Anticuerpos antiprotrombina

Se determinan por técnica de ELISA

Prevalencia global en paciente positivos al anticoagulante

lúpico: 55%Prevalencia en pacientes con síndrome primario antifosfolípidos o lupus, positivos al anticoagulante lúpico: 70%

Aunque estos anticuerpos se han asociado a manifestaciones trombóticas, los resultados son contradictorios. Su utilidad clínica está aún por definirse

Valor diagnóstico de los anticuerpos antifosfolípidos y cofactores

Anticuerpos anti anexina V

Esta molécula (proteína anticoagulante placentaria) es una anticoagulante natural por desplazamiento de los factores de coagulación de las superficies de fosfolípidos. Se encuentra en placenta y endotelios.

• Crea un estado de hiper coagulabilidad en la placenta.

• se detectan en el 19% de los paciente con lupus

Valor diagnóstico de los anticuerpos antifosfolípidos y cofactores