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CAPITULO VII
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
7.1 Concentraciones mínimas inhibitorias individuales de los
antimicrobianos
En la Tabla 7.1 se muestran las concentraciones mínimas inhibitorias
(CMI) de los diferentes antimicrobianos para Aspergillus parasiticus en agar
papa dextrosa con una actividad de agua de 0.99 y pH de 3.5. Estas
concentraciones fueron las concentraciones más bajas en las que no se
detectó crecimiento del moho después de 25 días de incubación a 30°C.
Tabla 7.1 Concentraciones mínimas inhibitorias de los antimicrobianos
seleccionados para Aspergillus parasiticus en agar papa dextrosa con
un pH de 3.5 y una actividad de agua de 0.99
Antimicrobiano Concentración mínima
inhibitoria (ppm)
Timol 400
Eugenol 600
Carvacrol 300
Sorbato de potasio 400
46
Estos resultados se obtuvieron por triplicado, y fueron las mismas
concentraciones que las reportadas por López-Malo (2000) para Aspergillus
flavus.
La Figura 7.1 muestra las los sistemas con las concentraciones
mínimas inhibitorias encontradas, además de las concentraciones más
cercanas a estas para cada agente antimicrobiano probado.
Dependiendo del agente antimicrobiano añadido en el medio, fue
mayor o menor la concentración necesaria para inhibir al moho. El eugenol
fue el antimicrobiano de origen natural del cual se necesitó mayor
concentración para observar una inhibición del Aspergillus parasiticus
(600ppm), mientras que el carvacrol fue el que requirió una menor cantidad
(300ppm). El timol y el sorbato de potasio requirieron también
concentraciones relativamente bajas (400ppm)
47
Figura 7.1 Cajas Petri con 100ppm menos que las concentraciones mínimas inhibitorias
individuales (CMI), las CMI, y 100ppm más que las CMI en agar papa dextrosa con pH
de 3.5 y actividad de agua de 0.99 después de 720 horas (30 días) de haber sido
inoculadas con Aspergillus parasiticus.
Sorbato de potasio
�
300ppm 400ppm 500ppm
Eugenol
400ppm 500ppm 600ppm
Timol
300ppm 400ppm 500ppm
Carvacrol
200ppm 300ppm 400ppm
48
El timol (5-metil-2-1-metiletilfenol) es un compuesto con un amplio
espectro de actividad antimicrobiana que se obtiene de diferentes especias,
principalmente de la vainilla y del orégano. El aceite esencial del orégano
contiene aproximadamente 50% de timol, y también se encuentra en
grandes cantidades en el tomillo y en la ajedrea. El carvacrol también se
extrae de especias, principalmente del tomillo y de la albahaca. Conner y
Beuchat (1984) probaron a los aceites esenciales del orégano, del tomillo y
de la ajedrea con 13 tipos de mohos y levaduras, y los clasificaron como
unos de los aceites con mayor capacidad de inhibición para el crecimiento
de hongos.
El eugenol (2-metoxi-4-2-propenilfenol) es uno de los principales
constituyentes de los aceites esenciales de clavo, de pimienta y de jamaica,
y su actividad antimicrobiana también es considerable. Bullerman et al.
(1994) reportó que el aceite de clavo 0.025% inhibió la producción de toxinas
de Aspergillus parasiticus y en concentraciones mayores inhibió su
crecimiento (Sofos et al., 1998)
49
7.2 Concentraciones fraccionales inhibitorias de los
antimicrobianos utilizados en las mezclas
En las Tablas 7.2 a 7.13 se encuentran los resultados de las mezclas
analizadas, y se muestra donde creció (C) y donde no creció (NC) el moho,
así como las concentraciones fraccionales inhibitorias (CFI) de cada
antimicrobiano y el índice CFI (CFI index) de la mezcla al tiempo máximo en
donde no hubo crecimiento.
7.2.1 Mezcla sorbato de potasio - eugenol - timol
Los resultados para las mezclas ternarias probadas para la
combinación sorbato de potasio, eugenol y timol, según el modelo de
Berenbaum et al. (1983) para probar su eficiencia en Aspergillus parasiticus
se muestran en las Tablas 7.2 y 7.3, así como en las Figuras 7.2 y 7.3.
50
Tabla 7.2 Crecimiento y concentraciones fraccionales inhibitorias (CFI) e índice
CFI de la mezcla ternaria de sorbato de potasio, eugenol y timol sobre el
crecimiento de Aspergillus parasiticus a una actividad de agua de 0.99 ajustada
con sacarosa y pH de 3.5 ajustado con ácido clorhídrico en agar papa dextrosa,
después de 720 horas (30 días) de incubación
Sorbato
de
potasio
(ppm)
Eugenol
(ppm)
Timol
(ppm)
Creci-
miento a
720 hrs.
CFI
Sorbato
de
potasio
CFI
Eugenol CFI Timol CFIindex
400 0 0 NC 1.00 0.00 0.00 1.00
0 600 0 NC 0.00 1.00 0.00 1.00
0 0 400 NC 0.00 0.00 1.00 1.00
0 300 200 NC 0.00 0.50 0.50 1.00
200 0 200 NC 0.50 0.00 0.50 1.00
200 300 0 NC 0.50 0.50 0.00 1.00
132 198 132 NC 0.33 0.33 0.33 0.99
68 102 68 C
68 102 268 NC 0.17 0.17 0.67 1.01
268 102 68 NC 0.67 0.17 0.17 1.01
68 402 68 NC 0.17 0.67 0.17 1.01
32 48 132 C
132 48 32 C
32 198 32 C
NC: No creció; C: Creció
51
Figura 7.2 Imágenes del modelo de Berenbaum et al. (1983) con los agentes sorbato
de potasio (KS), eugenol (E) y timol (T) en concentración fraccional con respecto a su
mínima inhibitoria individual sobre Aspergillus parasiticus después de 10, 20 y 720
horas (30 días) de haber sido inoculado
Día 10 Día 20 Día 30
KS (1)
�
E (1)
T (1)
E (0.5) + T (0.5)
52
Figura 7.2 Continuación KS (0.5) + T (0.5)
�
KS (0.5) + E (0.5)
KS (0.33) + E (0.33) + T (0.33)
KS (0.17) + E (0.17) + T (0.17)
KS (0.17) + E (0.17) + T (0.67)
53
Figura 7.2 Continuación KS (0.67) + E (0.17) + T (0.17)
�
KS (0.17) + E (0.67) + T (0.17)
KS (0.08) + E (0.08) + T (0.33)
KS (0.33) + E (0.08) + T (0.08)
KS (0.08) + E (0.33) + T (0.08)
( )=Fracción de la concentración mínima inhibitoria utilizada.
54
Figura 7.3 Gráfica de crecimiento (tiempo contra diámetro) de
Aspergillus parasiticus en los sistemas modelo con las mezclas
ternarias formadas por sorbato de potasio, eugenol y timol.
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
1.4
1.6
0 100 200 300 400 500 600 700Tiempo (h)
Diá
met
ro (c
m)
Sorbato 68ppm, Eugenol 102ppm, Timol 68ppmSorbato 32ppm, Eugenol 48ppm, Timol 132ppmSorbato 132ppm, Eugenol 48ppm, Timol 32ppmSorbato 32ppm, Eugenol 198ppm, Timol 32ppm
55
Tabla 7.3 Constantes de regresión lineal del crecimiento del diámetro de
colonias de Aspergillus parasiticus en centímetros hasta sobrepasar los 1.5cm
con respecto al tiempo en horas después de ser inoculado en medios de cultivo
sólidos (agar papa-dextrosa) con pH de 3.5 y aw de 0.99 y con la mezcla
ternaria de sorbato de potasio, eugenol y timol.
Concentración de cada
antimicrobianos (ppm) Regresión lineal
Sorbato de
Potasio Eugenol Timol m b R2
68 102 68 0.006 -0.675 0.971
32 48 132 0.004 -0.714 0.971
132 48 32 0.018 -0.050 0.990
32 198 32 0.004 -0.475 0.981
m=pendiente
b=intercepto
R=coeficiente de correlación
7.2.2 Mezcla sorbato de potasio - carvacrol - timol
Los resultados para las mezclas ternarias probadas para la
combinación sorbato de potasio, carvacrol y timol, según el modelo de
Berenbaum et al. (1983) para probar su eficiencia en Aspergillus parasiticus
se muestran en las Tablas 7.4 y 7.5, así como en las Figuras 7.4 y 7.5.
56
Tabla 7.4 Crecimiento y concentraciones fraccionales inhibitorias (CFI) e índice
CFI de la mezcla ternaria de sorbato de potasio, carvacrol y timol sobre el
crecimiento de Aspergillus parasiticus a una actividad de agua de 0.99 ajustada
con sacarosa y pH de 3.5 ajustado con ácido clorhídrico en agar papa dextrosa,
después de 720 horas (30 días) de incubación
Sorbato de
potasio (ppm)
Carvacrol (ppm)
Timol (ppm)
Creci-
miento a
720 hrs.
CFI
Sorbato
de
potasio
CFI
Carvacrol CFI Timol CFIindex
400 0 0 NC 1.00 0.00 0.00 1.00
0 300 0 NC 0.00 1.00 0.00 1.00
0 0 400 NC 0.00 0.00 1.00 1.00
0 150 200 NC 0.00 0.50 0.50 1.00
200 0 200 NC 0.50 0.00 0.50 1.00
200 150 0 NC 0.50 0.50 0.00 1.00
132 99 132 NC 0.33 0.33 0.33 0.99
68 51 68 C
68 51 268 NC 0.17 0.17 0.67 1.01
268 51 68 NC 0.67 0.17 0.17 1.01
68 201 68 NC 0.17 0.67 0.17 1.01
32 24 132 NC 0.08 0.08 0.33 .49
132 24 32 C
32 99 32 C NC: No creció; C: Creció
57
Figura 7.4 Imágenes del modelo de Berenbaum et al. (1983) con los agentes sorbato
de potasio (KS), carvacrol (C) y timol (T) en concentración fraccional con respecto a su
mínima inhibitoria individual sobre Aspergillus parasiticus después de 10, 20 y 720
horas (30 días) de haber sido inoculado
Día 10 Día 20 Día 30
KS (1)
�
C (1)
T (1)
C (0.5) + T (0.5)
58
Figura 7.4 Continuación. KS (0.5) + T (0.5)
�
KS (0.5) + C (0.5)
KS (0.33) + C (0.33) + T (0.33)
KS (0.17) + C (0.17) + T (0.17)
KS (0.17) + C (0.17) + T (0.67)
59
Figura 7.4 Continuación. KS (0.67) + C (0.17) + T (0.17)
�
KS (0.17) + C (0.67) + T (0.17)
KS (0.08) + C (0.08) + T (0.33)
KS (0.33) + C (0.08) + T (0.08)
KS (0.08) + C (0.33) + T (0.08)
( )=Fracción de la concentración mínima inhibitoria utilizada.
60
Figura 7.5 Gráfica de crecimiento (tiempo contra diámetro) de
Aspergillus parasiticus en los sistemas modelo con las mezclas
ternarias formadas por sorbato de potasio, carvacrol y timol.
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
1.4
1.6
0 100 200 300 400 500 600Tiempo (h)
Diá
met
ro (c
m)
Sorbato 68ppm, Carvacrol 51ppm, Timol 68ppmSorbato 132ppm, Carvacrol 24ppm, Timol 32ppmSorbato 32ppm, Carvacrol 99ppm, Timol 32ppm
61
Tabla 7.5 Constantes de regresión lineal del crecimiento del diámetro (cm) de
colonias de Aspergillus parasiticus con respecto al tiempo (h) después de ser
inoculado en medios de cultivo sólidos (agar papa-dextrosa) con pH de 3.5 y
aw de 0.99 y con la mezcla ternaria de sorbato de potasio, carvacrol y timol.
Concentración de cada
antimicrobianos (ppm) Regresión lineal
Sorbato
de Potasio Carvacrol Timol m b R2
68 51 68 0.005 -0.820 0.993
132 24 32 0.007 -0.732 0.991
32 99 32 0.007 -1.250 0.991
m=pendiente
b=intercepto
R=coeficiente de correlación
7.2.3 Mezcla sorbato de potasio - eugenol - carvacrol
Los resultados para las mezclas ternarias probadas para la
combinación sorbato de potasio, eugenol y carvacrol, según el modelo de
Berenbaum et al. (1983) para probar la eficiencia en Aspergillus parasiticus
se muestran en las Tablas 7.6-7.7, así como en las Figuras 7.6 y 7.7.
62
Tabla 7.6 Crecimiento y concentraciones fraccionales inhibitorias (CFI) e índice
CFI de la mezcla ternaria de sorbato de potasio, eugenol y carvacrol sobre el
crecimiento de Aspergillus parasiticus a una actividad de agua de 0.99 ajustada
con sacarosa y pH de 3.5 ajustado con ácido clorhídrico en agar papa dextrosa,
después de 720 horas (30 días) de incubación
Sorbato
de
potasio
(ppm)
Eugenol
(ppm)
Carvacrol
(ppm)
Creci-
miento a
720 hrs.
CFI
Sorbato
de
potasio
CFI
Eugenol
CFI
CarvacrolCFIindex
400 0 0 NC 1.00 0.00 0.00 1.00
0 600 0 NC 0.00 1.00 0.00 1.00
0 0 300 NC 0.00 0.00 1.00 1.00
0 300 150 NC 0.00 0.50 0.50 1.00
200 0 150 NC 0.50 0.00 0.50 1.00
200 300 0 NC 0.50 0.50 0.00 1.00
132 198 99 NC 0.33 0.33 0.33 0.99
68 102 51 C
68 102 201 NC 0.17 0.17 0.67 1.01
268 102 51 NC 0.67 0.17 0.17 1.01
68 402 51 NC 0.17 0.67 0.17 1.01
32 48 99 C
132 48 24 C
32 198 24 C
NC: No creció; C: Creció
63
Figura 7.6 Imágenes del modelo de Berenbaum et al. (1983) con los agentes sorbato
de potasio (KS), eugenol (E) y carvacrol (C) en concentración fraccional con respecto a
su mínima inhibitoria individual sobre Aspergillus parasiticus después de 10, 20 y 720
horas (30 días) de haber sido inoculado
Día 10 Día 20 Día 30
KS (1)
�
E (1)
C (1)
E (0.5) + C (0.5)
64
Figura 7.6 Continuación KS (0.5) + C (0.5)
�
KS (0.5) + E (0.5)
KS (0.33) + E (0.33) + C (0.33)
KS (0.17) + E (0.17) + C (0.17)
KS (0.17) + E (0.17) + C (0.67)
65
Figura 7.6 Continuación KS (0.67) + E (0.17) + C (0.17)
�
KS (0.17) + E (0.67) + C (0.17)
KS (0.08) + E (0.08) + C (0.33)
KS (0.33) + E (0.08) + C (0.08)
KS (0.08) + E (0.33) + C (0.08)
( )=Fracción de la concentración mínima inhibitoria utilizada.
66
Figura 7.7 Gráfica de crecimiento (tiempo contra diámetro) de
Aspergillus parasiticus en los sistemas modelo con las mezclas
ternarias formadas por sorbato de potasio, eugenol y carvacrol.
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
1.4
1.6
0 100 200 300 400 500 600 700
Tiempo (h)
Diá
met
ro (c
m)
Sorbato 68ppm, Eugenol 102ppm, Carvacrol 51ppmSorbato 32ppm, Eugenol 48ppm, Carvacrol 24ppmSorbato 132ppm, Eugenol 48pm, Carvacrol 24ppmSorbato32 ppm, Eugenol 198ppm, Carvacrol 24ppm
67
Tabla 7.7 Constantes de regresión lineal del crecimiento del diámetro (cm)
colonias de Aspergillus parasiticus con respecto al tiempo (h) después de ser
inoculado en medios de cultivo sólidos (agar papa-dextrosa) con pH de 3.5 y
aw de 0.99 y con la mezcla ternaria de sorbato de potasio, eugenol y carvacrol.
Concentración de cada
antimicrobianos (ppm) Regresión lineal
Sorbato
de Potasio Eugenol Carvacrol m b R2
68 102 51 0.005 -0.412 0.997
32 48 99 0.009 -1.690 0.998
132 48 24 0.007 -0.380 0.985
32 198 24 0.003 -0.324 0.920
m=pendiente
b=intercepto
R=coeficiente de correlación
7.2.4 Mezcla timol - eugenol - carvacrol
Los resultados para las mezclas ternarias probadas para la combinación
timol, eugenol y carvacrol, según el modelo de Berenbaum et al. (1983) para
probar la eficiencia en Aspergillus parasiticus se muestran en las Tablas 7.8
y 7.9, así como en las Figuras 7.8 y 7.9
68
Tabla 7.8 Crecimiento y concentraciones fraccionales inhibitorias (CFI) e índice
CFI de la mezcla ternaria de timol, eugenol y carvacrol sobre el crecimiento de
Aspergillus parasiticus a una actividad de agua de 0.99 ajustada con sacarosa y
pH de 3.5 ajustado con ácido clorhídrico en agar papa dextrosa, después de 720
horas (30 días) de incubación
Timol
(ppm)
Eugenol
(ppm)
Carvacrol
(ppm)
Creci-
miento a
720 hrs.
CFI TimolCFI
Eugenol
CFI
CarvacrolCFIindex
400 0 0 NC 1.00 0.00 0.00 1.00
0 600 0 NC 0.00 1.00 0.00 1.00
0 0 300 NC 0.00 0.00 1.00 1.00
0 300 150 NC 0.00 0.50 0.50 1.00
200 0 150 NC 0.50 0.00 0.50 1.00
200 300 0 NC 0.50 0.50 0.00 1.00
132 198 99 NC 0.33 0.33 0.33 0.99
68 102 51 C
68 102 201 NC 0.17 0.17 0.67 1.01
268 102 51 NC 0.67 0.17 0.17 1.01
68 402 51 NC 0.17 0.67 0.17 1.01
32 48 99 C
132 48 24 C
32 198 24 C
NC: No creció; C: Creció
69
Figura 7.8 Imágenes del modelo de Berenbaum et al. (1983) con los agentes timol (T),
eugenol (E) y carvacrol (C) en concentración fraccional con respecto a su mínima
inhibitoria individual sobre Aspergillus parasiticus después de 10, 20 y 720 horas (30
días) de haber sido inoculado
Día 10 Día 20 Día 30
T (1)
�
E (1)
C (1)
E (0.5) + C (0.5)
70
Figura 7.8 Continuación T (0.5) + C (0.5)
�
T (0.5) + E (0.5)
T (0.33) + E (0.33) + C (0.33)
T (0.17) + E (0.17) + C (0.17)
T (0.17) + E (0.17) + C (0.67)
71
Figura 7.8 Continuación T (0.67) + E (0.17) + C (0.17)
�
T (0.17) + E (0.67) + C (0.17)
T (0.08) + E (0.08) + C (0.33)
T (0.33) + E (0.08) + C (0.08)
T (0.08) + E (0.33) + C (0.08)
( )=Fracción de la concentración mínima inhibitoria utilizada.
72
Figura 7.9 Gráfica de crecimiento (tiempo contra diámetro) de Aspergillus
parasiticus en los sistemas modelo con las mezclas ternarias formadas por
timol, eugenol y carvacrol.
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
1.4
1.6
0 100 200 300 400 500 600 700
Tiempo (h)
Diá
met
ro (c
m)
Timol 68ppm, Eugenol 102ppm, Carvacrol 51ppmTimol 32ppm, Eugenol 48ppm, Carvacrol 99ppmTimol 132ppm, Eugenol 48ppm, Carvacrol 24ppmTimol 32ppm, Eugenol 198ppm, Carvacrol 24ppm
73
Tabla 7.9 Constantes de regresión lineal del crecimiento del diámetro (cm) de
colonias de Aspergillus parasiticus con respecto al tiempo (h) después de ser
inoculado en medios de cultivo sólidos (agar papa-dextrosa) con pH de 3.5 y
aw de 0.99 y con la mezcla ternaria de timol, eugenol y carvacrol.
Concentración de cada
antimicrobianos (ppm) Regresión lineal
Timol Eugenol Carvacrol m b R2
68 102 51 0.004 -0.631 0.947
32 48 99 0.006 -0.775 0.996
132 48 24 0.003 -0.631 0.982
32 198 24 0.004 -0.431 0.989
m=pendiente
b=intercepto
R=coeficiente de correlación
7.2.5 Mezcla sorbato de potasio - timol - eugenol - carvacrol
Los resultados para las mezclas cuaternarias probadas para la combinación
Sorbato de potasio, timol, eugenol y carvacrol, según el modelo de
Berenbaum et al. (1983) para probar la eficiencia en Aspergillus parasiticus
se muestran en las Tablas 7.10 y 7.11, así como en las Figuras 7.10 y 7.11.
74
Tabla 7.10 Crecimiento y concentraciones fraccionales inhibitorias (CFI) e
índice CFI de la mezcla cuaternaria de sorbato de potasio, timol, eugenol y
carvacrol sobre el crecimiento de Aspergillus parasiticus a una actividad de
agua de 0.99 ajustada con sacarosa y pH de 3.5 ajustado con ácido clorhídrico
en agar papa dextrosa, después de 720 horas (30 días) de incubación
Sorba-
to de
potasio
(ppm)
Timol
(ppm)
Euge-
nol
(ppm)
Carva-
crol
(ppm)
Creci-
miento
a 720
hrs.
CFI
Sorba-
to de
potasio
CFI
Timol
CFI
Euge-
nol
CFI
Carva-
crol
CFIindex
400 0 0 0 NC 1 0 0 0 1.00
0 400 0 0 NC 0 1 0 0 1.00
0 0 600 0 NC 0 0 1 0 1.00
0 0 0 300 NC 0 0 0 1 1.00
200 200 0 0 NC 0.5 0.5 0 0 1.00
200 0 300 0 NC 0.5 0 0.5 0 1.00
200 0 0 150 NC 0.5 0 0 0.5 1.00
0 200 300 0 NC 0 0.5 0.5 0 1.00
0 200 0 150 NC 0 0.5 0 0.5 1.00
0 0 300 150 NC 0 0 0.5 0.5 1.00
132 132 198 0 NC 0.33 0.33 0.33 0 0.99
132 132 0 99 NC 0.33 0.33 0 0.33 0.99
132 0 198 99 NC 0.33 0 0.33 0.33 0.99
0 132 198 99 NC 0 0.33 0.33 0.33 0.99
100 100 150 75 NC 0.25 0.25 0.25 0.25 1.00
252 52 78 39 NC 0.63 0.13 0.13 0.13 1.02
52 252 78 39 NC 0.13 0.63 0.13 0.13 1.02
52 52 378 39 NC 0.13 0.13 0.63 0.13 1.02
52 52 78 189 NC 0.13 0.13 0.13 0.63 1.02
52 52 78 39 C
75
Tabla 7.10 Continuación
100 32 48 24 C
32 100 48 24 C
32 32 150 24 C
32 32 48 75 C
100 48 36 18 C
100 24 78 18 C
100 24 36 39 C
52 100 36 18 C
52 24 150 18 C
52 24 36 75 C
24 100 78 18 C
24 100 36 39 C
24 52 150 18 C
24 52 36 75 C
24 24 150 39 C
24 24 78 75 C
NC: No creció; C: Creció
76
Figura 7.10 Imágenes del modelo de Berenbaum et al. (1983) con los agentes sorbato
de potasio (KS), Timol (T), eugenol (E) y carvacrol (C) en concentración fraccional con
respecto a su mínima inhibitoria individual sobre Aspergillus parasiticus después de 10,
20 y 720 horas (30 días) de haber sido inoculado
Día 10 Día 20 Día 30
KS (1)
�
T (1)
E (1)
C (1)
77
Figura 7.10 Continuación KS (0.5) + T (0.5)
�
KS (0.5) + E (0.5)
KS (0.5) + C (0.5)
T (0.5) + E (0.5)
T (0.5) + C (0.5)
78
Figura 7.10 Continuación E (0.5) + C (0.5)
�
KS (0.33) + T (0.33) + E (0.33)
KS (0.33) + T (0.33) + C (0.33)
KS (0.33) + E (0.33) + C (0.33)
T (0.33) + E (0.33) + C (0.33)
79
Figura 7.10 Continuación KS (0.25) + T (0.25) + E (0.25) + C (0.25)
�
KS (0.625) + T (0.125) + E (0.125) + C (0.125)
KS (0.125) + T (0.625) + E (0.125) + C (0.125)
KS (0.125) + T (0.125) + E (0.625) + C (0.125)
KS (0.125) + T (0.125) + E (0.125) + C (0.625)
80
Figura 7.10 Continuación KS (0.125) + T (0.125) + E (0.125) + C (0.125)
�
KS (0.25) + T (0.0833) + E (0.0833) + C (0.0833)
KS (0.0833) + T (0.25) + E (0.0833) + C (0.0833)
KS (0.0833) + T (0.0833) + E (0.25) + C (0.0833)
KS (0.0833) + T (0.0833) + E (0.0833) + C (0.25)
81
Figura 7.10 Continuación KS (0.25) + T (0.125) + E (0.0625) + C (0.0625)
�
KS (0.25) + T (0.0625) + E (0.125) + C (0.0625)
KS (0.25) + T (0.0625) + E (0.0625) + C (0.125)
KS (0.125) + T (0.25) + E (0.0625) + C (0.0625)
KS (0.125) + T (0.0625) + E (0.25) + C (0.0625)
82
Figura 7.10 Continuación KS (0.125) + T (0.0625) + E (0.0625) + C (0.25)
�
KS (0.0625) + T (0.25) + E (0.125) + C (0.0625)
KS (0.0625) + T (0.25) + E (0.0625) + C (0.125)
KS (0.0625) + T (0.125) + E (0.25) + C (0.0625)
KS (0.0625) + T (0.125) + E (0.0625) + C (0.25)
83
( )=Fracción de la concentración mínima inhibitoria utilizada.
Figura 7.10 Continuación KS (0.0625) + T (0.0625) + E (0.25) + C (0.125)
�
KS (0.0625) + T (0.0625) + E (0.125) + C (0.25)
84
Figura 7.11 Gráfica de crecimiento (tiempo contra diámetro) de
Aspergillus parasiticus en los sistemas modelo con las mezclas
cuaternarias formadas por sorbato de potasio, timol, eugenol y
carvacrol.
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
1.4
1.6
0 100 200 300 400 500 600 700
Tiempo (h)
Diám
etro
(cm
)
Sorbato 52 ppm, Timol 52 ppm, Eugenol 78 ppm, Carvacrol 39 ppmSorbato 100 ppm, Timol 32 ppm, Eugenol 48 ppm, Carvacrol 24 ppmSorbato 32 ppm, Timol 100 ppm, Eugenol 48 ppm, Carvacrol 24 ppmSorbato 32 ppm, Timol 32 ppm, Eugenol 150 ppm, Carvacrol 24 ppmSorbato 32 ppm, Timol 32 ppm, Eugenol 48 ppm, Carvacrol 75 ppmSorbato 100 ppm, Timol 48 ppm, Eugenol 36 ppm, Carvacrol 18 ppmSorbato 100 ppm, Timol 24 ppm, Eugenol 78 ppm, Carvacrol 18 ppmSorbato 100 ppm, Timol 24 ppm, Eugenol 36 ppm, Carvacrol 39 ppmSorbato 52 ppm, Timol 100 ppm, Eugenol 36 ppm, Carvacrol 18 ppmSorbato 52 ppm, Timol 24 ppm, Eugenol 150 ppm, Carvacrol 18 ppmSorbato 52 ppm, Timol 24 ppm, Eugenol 36 ppm, Carvacrol 75 ppmSorbato 24 ppm, Timol 100 ppm, Eugenol 78 ppm, Carvacrol 18 ppmSorbato 24 ppm, Timol 100 ppm, Eugenol 36 ppm, Carvacrol 39 ppmSorbato 24 ppm, Timol 52 ppm, Eugenol 150 ppm, Carvacrol 18 ppmSorbato 24 ppm, Timol 52 ppm, Eugenol 36 ppm, Carvacrol 75 ppmSorbato 24 ppm, Timol 24 ppm, Eugenol 150 ppm, Carvacrol 39 ppmSorbato 24 ppm, Timol 24 ppm, Eugenol 78 ppm, Carvacrol 75 ppm
85
Tabla 7.11 Constantes de regresión lineal del crecimiento del diámetro (cm) de
colonias de Aspergillus parasiticus con respecto al tiempo (h) después de ser
inoculado en medios de cultivo sólidos (agar papa-dextrosa) con pH de 3.5 y
aw de0.99 y con la mezcla cuaternaria de sorbato de potasio, timol, eugenol y
carvacrol.
Concentración de cada antimicrobianos (ppm) Regresión lineal
Sorbato de
potasio Timol Eugenol Carvacrol m b R2
52 52 78 39 0.007 -0.983 0.976
100 32 48 24 0.005 -0.540 0.993
32 100 48 24 0.006 -2.178 0.986
32 32 150 24 0.009 -3.523 0.992
32 32 48 75 0.005 -0.611 0.956
100 48 36 18 0.007 -1.054 0.985
100 24 78 18 0.007 -1.008 0.986
100 24 36 39 0.006 -0.586 0.978
52 100 36 18 0.006 -2.053 0.938
52 24 150 18 0.006 -1.645 0.960
52 24 36 75 0.005 -0.873 0.988
24 100 78 18 0.004 -0.964 0.989
24 100 36 39 0.004 -0.776 0.991
24 52 150 18 0.004 -0.828 0.958
24 52 36 75 0.004 -0.992 0.982
24 24 150 39 0.004 -0.822 0.973
24 24 78 75 0.005 -0.214 0.980
m=pendiente
b=intercepto
R=coeficiente de correlación
86
Los resultados anteriores muestran que todas las mezclas probadas
tuvieron efecto aditivo (CFIindex =1), sin embargo sólo una mezcla mostró un
efecto sinérgico para inhibir a Aspergillus parasiticus. Esta mezcla fue
Sorbato 32ppm -Carvacrol 24ppm-Timol 132 ppm, la cual tiene un índice ce
concentración fraccional inhibitoria de 049. Sin embargo existieron mezclas
tanto ternarias como cuaternarias que retardaron considerablemente el
crecimiento del microorganismo. Algunas mezclas ternarias lograron retardar
el crecimiento hasta por aproximadamente 240 h. Estas se muestran en la
Tabla 7.12. Hubo 3 mezclas cuaternarias que lograron retardar el
crecimiento hasta por 432 h. Estas mezclas se muestran en la Tabla 7.13.
Tabla 7.12. Regresiones lineales de las mezclas ternarias que por más
tiempo (240 hrs) retardaron el crecimiento de A. parasiticus
Sorbato Eugenol Timol Carvacrol m b R2
32 48 132 - 0.004 -0.714 0.971
32 - 132 99 0.007 -1.250 0.991
32 48 - 99 0.009 -1.690 0.998
- 102 68 51 0.004 -0.631 0.974
- 48 132 24 0.003 -0.631 0.982
m=pendiente
b=intercepto
R=coeficiente de correlación
87
Tabla 7.13 Regresiones lineales de las mezclas cuaternarias que por más
tiempo (432 hrs) retardaron el crecimiento de A. parasiticus
Sorbato Eugenol Timol Carvacrol m b R2
32 100 48 24 0.006 -2.178 0.986
32 32 150 24 0.009 -3.523 0.992
52 100 36 18 0.006 -2.053 0.938
m=pendiente
b=intercepto
R=coeficiente de correlación
Las mezclas ternarias estudiadas ya se habían probado para
Aspergillus flavus, en donde mostraron sinergismo, ya que muchas si
inhibieron al microorganismo durante 30 días (León, 2002).
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