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Practica de espectrofotometría
molecularAndrea Suarez MontoyaIngeniería Biológica
Daniela García RuizIngeniería Biológica
Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica
Índice Introducción Objetivos ¿ Que es espectrofotometría? ¿Como funciona un espectrofotómetro? Ley de Beer Practica de laboratorio Conceptos Resultados Espectro de Absorción Curva de calibración Discusión Conclusiones Bibliografía
Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica
IntroducciónLos métodos ópticos de análisis químico son los que miden la radiación electromagnética que emana o interactúa con la materia. Estos, tienen como objeto, la medida de la radiación que es emitida, absorbida, o transmitida al interactuar con las moléculas.
Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica
Objetivos General
• Utilizar la técnica de espectrofotometría, para determinar las partes por millón de un determinado colorante de alimentos.
Específicos• Comprender los conceptos de espectrofotometría.• Comprender la ley de beer y sus limitaciones
¿Qué es espectrofotometría? Se denomina espectrofotometría a la
medición de la cantidad de energía radiante que absorbe un sistema químico en función de la longitud de onda, de la radiación, y a las mediciones a una determinada longitud de onda.
Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica
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Aplicaciones de la espectrofotometría
La principal aplicación de la espectrofotometría es la determinación de la concentraciones ya sea de sustancias químicas o de microorganismos presentes en una solución
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¿COMO DETERMINAR CONCENTRACIONES POR ESPECTROFOTOMETRÍA?
Para comenzar se deben definir 3conceptos fundamentales: Absorbancia Transmitancia Concentración
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Para comenzar: Espectro de absorción
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Curva de calibración
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Ley de Beer La ley de Beer tiene en cuenta el área
y el número de partículas qué atraviesa un haz de luz, deduciendo de esto la energía que queda atrapada. Con estas variables se desarrollo la siguiente ecuación:
A = ε·b·c
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LIMITACIONES DE LA LEY DE BEER
Solo describe el comportamiento de la absorción en concentraciones mucho menor a 0,01M
Se observa una adhesión estricta a la ley de Beer solamente cuando la radiación es monocromática verdadera
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¿Como funciona un espectrofotómetro?
El funcionamiento de unEspectrofotómetroconsiste básicamente eniluminar la muestra conluz blanca y calcular lacantidad de luz querefleja dicha muestra enuna serie de intervalosde longitudes de onda.
Practica de laboratorio
Colorimetría - Laboratorio Química Analítica
1- Se preparo una solución de 482,8 ppm de rojo ponceau (4R), y a partir de esta se crearon, distintas disoluciones de:10ppm, 15ppm, 20ppm, 25ppm, 30ppm
2- Con la disolución de 15ppm, calculamos en el espectrofotómetro, en cual longitud de onda, se tiene mayor absorbancia.
3- Con la longitud de onda hallada, calculamos la absorbancia de las anteriores disoluciones para crear la curva de calibración
4- Tomamos la absorbancia de la muestra, y con esta se puede determinar las ppm del colorante
Conceptos
Colorante Colorante artificial o sintéticos Colorantes azoicos
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Colorante Rojo Ponceau (4R): Según el Ministerio de salud (resolución
numero 10593 de16 de Julio de 1985):
Origen: Colorante sintético azoico.
Función & características: Colorante rojo alimentario. Muy soluble en agua.
Ingesta diaria: Máximo 4 mg/kg de peso corporal.
Efectos colaterales: Desde 1976 no se utiliza en Estados Unidos. Se ha discutido su posible efecto cancerígeno.
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Estructura química del 4R
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Espectro de absorción: sln 15 ppm
460 470 480 490 500 510 520 530 54000.050.1
0.150.2
0.250.3
0.350.4
0.450.5
Longitud de onda (nm)
Abso
rban
cia
±0,
001
Curva de calibración
5 10 15 20 25 30 3500.10.20.30.40.50.60.70.80.9
f(x) = 0.02738 x + 0.0132000000000001
Concentración ppm
Abso
rban
cia
± 0
,001
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ResultadosGrupo 1 Absorbancia de la muestra: 0,803 Ppm diluida: 28.82 ± 3,035x10-5
Grupo 2: Absorbancia de la muestra: 0,757 Ppm diluida: 27,07 ± 2,850x10-5
Grupo 3: Ppm diluida: 29,45± 3,101x10-5Grupo 4: Ppm diluida: 29.07± 3,062x10-5
Resultados
Grupo 1 Grupo 2 Grupo 3 Grupo 425.5
2626.5
2727.5
2828.5
2929.5
Ppm vs grupos
ppm
Ppm
sln
dilu
ida
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ResultadosConcentraciones iniciales:
Grupo 1: Ci: 1441,25 ppm Grupo 2: Ci: 1353,85 ppm Grupo 3: Ci: 1472,5 ppm Grupo 4: Ci: 1453,85 ppm
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Resultados Promedio partes por millón de colorante
diluido: 28,6055 ± 3,012x10-5 ppm Concentración inicial promedio: CixVi=CfxVf Cix1ml=28,6055x50ml Ci= 1430,27 ppm
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Conclusiones Se puede concluir que la espectrofotometría
es un método bastante preciso pues los valores dieron todos bastante cercanos.
Podemos concluir que un error se pudo haber dado al medir inexactamente los volúmenes al preparar las soluciones.
Podemos afirmar que la solución estudiada, sobrepasa en 7 veces, la cantidad permitida por en invima, entidad que regula los alimentos y medicamentos.
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Bibliografía SKOOG, D.A y WEST D.M. Química analítica. 5ª ed. España,
2002 Instituto Nacional de Vigilancia de Medicamentos y
Alimentos – Invima (http://web.invima.gov.co/portal/documents/portal/documents/root//resolucion_10593_1985.pdf). Citado Jueves 11-nov 1:35pm
Dirección Nacional de Servicios Académicos Virtuales (http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2001184/lecciones/Cap05/05_04_01.htm) Citado Sabado 13-nov 7:35pm
Sistema de Bibliotecas - Universidad Nacional de Colombia – SINAB (http://www.sinab.unal.edu.co/ntc/NTC1325.pdf). Citado Jueves 11-nov 1:43pm
FinGracias por la atención.
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