Efecto Protector Del Extracto de Calendula Officinalis

EFECTO PROTECTOR DEL EXTRACTO DE CALENDULA OFFICINALIS CONTRA LA INDUCCION

DE STRESS OXIDATIVO EN LA PIEL POR UVB : EVALUACION DE LOS NIVELES REDUCIDOS DE GLUTATION Y

SECRECION DE METALOPROTEINASAS DE MATRIZ

Presentado por

Sandra Johanna Garzón P., O.D., Msc. Pharm.

Candidata Ph.D Ciencias Farmacéuticas Universidad Nacional de Colombia

sjgarzonp@unal.edu.co

PROTECTIVE EFFECT OF CALENDULA OFFICINALIS EXTRACT AGAINST UVB-INDUCED OXIDATIVE STRESS IN SKIN:

EVALUATION OF REDUCED GLUTATHIONE LEVELS AND MATRIX METALLOPROTEINASE SECRETION

Fonseca , Y. et al (2009)

INTRODUCCIÓN CALÉNDULA OFFICINALIS

• BOTÓN DE ORO, MARAVILLA, MARIGOLD

• 35 propiedades (Brown, Dattnerr, 1998)

• Enfermedades Inflamatorias: Traumas, Quemaduras,

Antitumorales (Jimenez, 2006), reparación (Zitterl et al , 1997), antioxidantes ( Katlinic, 2006)

• 2-4 ml tintura diluida

• 250-500 ml con Agua

• 2-5 g de hierba en 100g ungüento

Asteraceae

Constituyentes Químicos

• Aceite esencial 0,02%

• Calendulina

• Carotenoides

• Esteroides

• Sesquiterpenoides

• Triterpenoides

• Flavonoides y Polifenoles

• Esteres de ácidos orgánico y otros • (Re et al, 2009)

•(Re et al, 2009)

Las radiaciones UV de tipo B se encuentran entre las longitudes de onda de 280 a 320 _m y las menos energéticas son las de tipo A con longitudes de onda de 320 a 400 _m (Afaq et al., 2002; Bernerd et al.,2003).

ESPECIES REACTIVAS DEL OXÍGENO (ROS)

Uso potencial de administraciones orales

de Marigold para prevenir el estrés

oxidativo en la piel por radiación UV

Deficiencia de glutation peroxidasa predispone a la formación de carcinoma de

células escamosas.

MATERIALES Y MÉTODOS

Partículas Caléndula 0,3mm

Maceradas 50% Etanol (25 C- 5 dias)

Agitación mecánica 870 rpm (1h)

Filtración y Secado 40 C

Suspension 50% solucion hidroalcohica 200 ml (conservados 20 C)

Concentracion 15,7%

Solucion de extracto de Calendula fue preparada por dilucion de 100 microL de extracto concentrado en 10mL de solución metanolica al 50%

Metodos Colorimétricos: Polifenol y contenido de Flavonoides

Determinación de la Actividad antioxidante por el método DPPH (2,2-

difenil-1-picril hidrazilo)

Consiste en que este radical tiene un electrón desapareado y es de color azul-violeta, decolorándose hacia amarillo pálido por reacción con una sustancia antioxidante; la absorbancia es medida espectrofotométricamente a 517 nm. La diferencia de absorbancias, permite obtener el porcentaje de captación de radicales libres

MATERIALES Y MÉTODOS Determinación in vivo de efecto protector contra stress oxidativo producido por UVB Los animales se dividieron en cinco grupos Grupo 1 = no irradiado control Grupo 2 = control irradiado Grupo 3 = irradió y se trató con una solución que contiene 150 mg / kg de EM Grupo 4 = irradiado y tratado con una solución que contiene 300 mg / kg ofME Grupo 5 = irradiado y se trató con una solución que contiene 600 mg / kg de EM

Esta fuente emite en el rango de 270-400nm con un pico de salida a 313 nm, dando lugar a una irradiación de 0.27mW/cm2 a una distancia de 20 cm, medida por un radiómetro 1700 IL

Induccion actividad gelatinasa (2.46 J/cm2)

vía oral 30 min y18 h antes de la irradiación.

Philips TL/12 RS 40W lamp

Glutation

Los niveles de la piel de GSH

spectrofotómetro de fluorescencia.

Actividad gelatinasa por UVB

Electroforesis: Cascada de enzimas (colagenasas, gelatinasas, elastasas, stromelysin-1), que degradan a las proteínas de la matriz extracelular

RESULTADOS

• Eficacia antioxidante mayor actividad sobre destrucción radicales superóxido producidos en el sistema xantina / luminol / XOD

• Bajas concentraciones de extracto de caléndula estimulan la proliferación de fibroblastos 27% incremento (11,25-15 mg/mL) Hepatoprotección (93%)

150 y 300 mg / kg de ME mantiene los niveles de GSH cercanos a los del control no irradiado, a la dosis más alta administrada de ME (600 mg / kg), Disminuye 43% de los niveles de GSH

RESULTADOS

• Aumento de la expresión / actividad de las gelatinasas en la piel de ratones sin pelo se observó después de la irradiación UVB en este estudio. El análisis de las gelatinasas (MMP-2 y MMP-9) en la piel mostró que la MMP-9 sólo apareció en la piel irradiada

• 150, 300 y 600 mg / kg de Extracto, mostraron reducción MMP-9

CONCLUSIONES

• ROS inducidas por UVB causa daño celular y alteraciones bioquímicas, tales como la oxidación de proteínas y lípidos, la inflamación, el daño al ADN, y la activación y la inactivación de enzimas (Shindo et al., 1993).

• Prevención reducción de GSH inducida por irradiación UVB: tratamiento con EM estrategia protección contra daños en la piel inducido por UVB

CONCLUSIONES

• MMPs tienen dos actividades: pro-inflamatoria y anti-inflamatoria

• El daño en la piel generado por UVB se produce por degradación del procolágeno tipo I MMP-1

• Aumento gelatinasas: MMP-9 MMP-2: Benefician procolágeno tipo 1

FIN