GUIA INMUNOLÓGICA CLÍNICA

El CMH es un conjunto de genes codificados en el brazo corto del cromosoma 6, las moléculas de histocompatibilidad se

localizan en la superficie de las células nucleadas; las cuales en el humano se

denominan antígenos HLA.

Este grupo de genes se heredan de acuerdo con las leyes de Mendel, como caracteres

codominantes.

consiste en determinar cuáles de todas las variantes conocidas para un locus están presentes en un individuo. Hasta hace algunos años la tipificación HLA se realizaba con técnicas serológicas, utilizando sueros específicos contra los distintos antígenos HLA. Mediante este método se detectan los antígenos presentes en la membrana de los linfocitos estudiados. En la actualidad la tipificación se realiza utilizando técnicas de Biología Molecular, en la que se estudian los genes del individuo.

Detección selectiva y diferenciación de los AC anti HLA-ABC citotóxicos dependientes del complemento.

Microplacas MZP

Incubar los Ag HLA conocidos en presencia de complemento con el suero del paciente

Hay lisis si hay presencia de del AC correspondiente

Lisis se visualiza con el colorante eosina

Observación en un microscopio de contraste de fase inverso

EOSINAEOSINA

LISIS

OBSERVACION

MUESTRAHLA TIPO I

Detección de AC específicos de HLA, antes y después de un transplante de órgano.

Detecta AC IgG específicos para los Ag HLA clase I y II

Se añade la muestra uniéndose durante la incubación los Ac con el Ag fijado

se añade anti IgG humana conjugada con fosfatasa alcalina a cada pozo. una segunda incubacion permite que el conjugado se una a los Ac.

Se añade un sustrato cromogénico PNPP y tras incubación la actividad enzimática presente en el pocillo es proporcional a la intensidad de color desarrollado.

Se evalua fotometricamente

EE

SUSTRATO EE

EE

SUSTRATO

COLORCOLOR

Para determinación del Ag HLA-B27

El HLA B27 se asocia con la espondilitis esquilosante

Incubar los AC anti-HLA conocidos en presencia de complemento con una suspensión de linfocitos del paciente

Hay lisis si hay presencia de del AC correspondiente

Lisis se visualiza con el colorante eosina Observación en un microscopio de

contraste de fase inverso

EOSINAEOSINA

LISIS

OBSERVACION

MUESTRA

Para la detección de Ac anti HLA-DR/DQ

Microplaca MZP

Incubar los Ag HLA conocidos en presencia de complemento con el suero del paciente

Hay lisis si hay presencia de del AC correspondiente

Lisis se visualiza con el colorante eosina Observación en un microscopio de

contraste de fase inverso

EOSINAEOSINA

LISIS

OBSERVACION

MUESTRAHLA TIPO II

Detección de Ac anti HLA

Utiliza microplacas cubiertas con Ag

HLA de clase I y II, que tiene propiedades fluorescentes y que se excitan a 488 nm

Incubar cada grupo de bolas por separado con el suero en estudio

Tenir con AC anti-IgG humana conjugada con FITC

Detección por citometría de flujo

FIFITCTC

FIFITTCC

Para detección de AC clase I y clase II con una técnica microlinfotoxica dependiente del complemento

Bandejas ABC de LCT contienen LT con Ag HLA clase I

Bandejas LCT30D contienen LB con Ag HLA clase II

Incubar los Ag HLA conocidos en presencia de complemento con el suero del paciente

Hay lisis si hay presencia de del AC correspondiente

Lisis se visualiza con el colorante eosina

Observación en un microscopio de contraste de fase inverso

EOSINAEOSINA

LISIS

OBSERVACION

MUESTRAHLA TIPO I y II

SUBTEMSUBTEMASAS

Lupus Lupus Eritematoso Eritematoso

SistémicoSistémicoLES.doLES.docc

Síndrome Síndrome AntifosfolípidoAntifosfolípido

Enfermedad Enfermedad Neurológica Neurológica AutoinmuneAutoinmune

Síndrome de Síndrome de SjögrenSjögren

Enfermedad Enfermedad Tiroidea Tiroidea

AutoinmuneAutoinmune

Enfermedad Enfermedad Gástrica Gástrica

AutoinmuneAutoinmune

PRUEBAS PRUEBAS INMUNOLÓGICASINMUNOLÓGICAS

ENASENAS ANTICARDIOLIPINANTICARDIOLIPINASAS

ANASANAS

ANCASANCAS

ANTI - DNAANTI - DNA

ATASATAS

Los antígenos nucleares extraíbles (ENA) son macromoléculas acídicas (no

histónicas) extraídas de la fracción soluble salina de los núcleos celulares, de ahí el

nombre de ENA.

TECNICASTECNICAS