HEMAGLUTINACION

En una suspensin de virus (antigeno) y glbulos rojos, una hemoaglutinina se une simultneamente a dos glbulos rojos estable

Hemoaglutinacin

En una suspensin de virus (antigeno) y glbulos rojos, una hemoaglutinina se une simultneamente a dos glbulos rojos establecindose un puente entre ellos. Si el nmero de glbulos rojos excede al nmero de partculas virales, se forma un nmero pequeo de dmeros celulares que por lo general precipitan en forma de boton en el fondo del pocillo (A), pero si la concentracin vrica es bastante elevada se forman puentes mltiples que dan lugar a un enrejado de glbulos rojos aglutinados que se depositan de una forma muy caracterstica, perfectamente diferenciable del patrn de sedimentacin que presentan las clulas no-aglutinadas (B).

Prueba de Hemoaglutinacin (HA)

La prueba de HA se utiliza para la titulacin adecuada de una suspensin viral que aglutinar un nmero estandarizado de eritrocitos. La prueba de HA no es muy sensitiva ya que son necesarias aproximadamente 106 partculas virales para la visualizacin de 1 unidad hemoaglutinante. Por ello, cuando dicha suspensin viral es titulada, la misma es diluida solo en base 2 (1:2, 1:4, etc.).

En esta reaccin intervienen dos elementos fundamentales:

Antgeno: virus que tienen en su constitucin hemoaglutininas

Glbulos rojos: susceptibles a la aglutinacin por el virus en estudio. Actan como reactivo indicador.

Esquema del Test de Hemoaglutinacin (HA)

Prueba de Inhibicin de la Hemoaglutinacin (HI)

Los anticuerpos inhibidores de la hemoaglutinacin son producidos en respuesta a la infeccin por cierto tipo de virus que, como anteriormente se mencion, presentan en su envoltura hemoaglutininas, las que actan como potentes antgenos (Orthomixovirus, Paramixovirus, etc) y otros antgenos presentes en la cpside de otros virus, como por ejemplo en los Adenovirus. Estos anticuerpos son tipo especfico, se demuestran tempranamente luego de la infeccin y persisten por muchos aos. La prueba se basa en el hecho que la unin de las partculas virales con anticuerpos especficos impide la reaccin de hemoaglutinacin por bloqueo de los receptores virales. A dicho fenmeno se lo denomina inhibicin de la hemoaglutinacin o HI. Esta prueba permite evaluar la capacidad de los anticuerpos para bloquear una infeccin viral especfica producida por estos virus.

Si confrontamos una suspensin estndar de antgeno viral con diluciones de un suero problema, podremos demostrar en ste la presencia de anticuerpos contra dicho virus y, adems, estimar su ttulo.

La reaccin de HI es una verdadera reaccin inmunolgica y en ella intervienen tres elementos fundamentales:

Antgeno: virus que tienen en su constitucin hemoaglutininas

Anticuerpo: Inmunoglobulina con capacidad de unirse a las hemoaglutininas impidiendo la unin de estas a los glbulos rojos.

Glbulos rojos: susceptibles a la aglutinacin por el virus en estudio. Actan como reactivo indicador.

La determinacin de anticuerpos inhibidores de la hemoaglutinacin es el mtodo de eleccin para el diagnstico de virus de Influenza, Paramixovirus, Parvovirus, Adenovirus y algunos Enterovirus.

La prueba de HI tampoco es particularmente sensitiva. El suero debe poseer suficiente ttulo para poder bloquear 4x106 partculas virales, cada una de las cuales tiene en su superficie ente 700 y 1000 proyecciones de hemoaglutininas. Por ello tambin las diluciones de suero se hacen en base 2.

Las ventajas de la prueba de HI consisten en que no es costosa, es de fcil realizacin, produce resultados dentro de las 24 horas, al mismo tiempo que mantiene su especificidad..

Esquema del Test de Inhibicin de la Hemoaglutinacin