View
4
Download
0
Category
Preview:
Citation preview
IDENTIFICACION DE Erwinia amylovora Y ALTERNATIVA DE
CONTROL EN MANZANO
XII Simposium Internacional sobre Manzano y frutales de clima templado
Asociación de Manzaneros de
Cuauhtémoc, A. C.
CIAD, A. C.
Centro de Investigación en Alimentación
y Desarrollo, A.C.
Unidad Cuauhtémoc, Chih.
Fisiología y Tecnología de Alimentos de la Zona Templada
Víctor M. Guerrero-Prieto, Alejandro Romo Chacón, Ana LuisaMartínez-López, Roberto Martínez-Campos y José Soria-Carrillo
Cuauhtémoc, Chih. 8-11 de Nov., 2006.
Introducción
La mancha o tizón de fuego, tiene como agente causal a Erwinia amylovora. Se considera una de las enfermedades bacterianas más destructivas en árboles de manzano, peral y otros, ya que puede infectar desde flores, frutos, y diversos órganos, pudiendo provocar la muerte del árbol.
CIAD, A. C.
El control tradicional se ha basado en el uso de los diferentes tipos de antibióticos como son: estreptomicina, gentamicina, tetraciclina, oxitetraciclina y otros, que pueden o han inducido resistencia en las bacterias contra algunos de ellos (estreptomicina), lo que ha dificultado más su control.
CIAD, A. C. Control Tradicional
Otro factor que ha dificultado el control de la
bacteria, es que en ocasiones, los síntomas
visibles que provoca en el árbol, se pueden
confundir con los daños de otras bacterias,
de ahí la necesidad de partir de la base de
identificar con seguridad al agente causal
de la enfermedad.
CIAD, A. C.Agente Causal (¿Erwinia amylovora?)
Pseudomonas syringaePseudomonas syringaeProvoca sProvoca sííntomas similaresntomas similares
a a Erwinia amylovoraErwinia amylovora
Objetivos
� Identificación de Erwinia amylovora, por medio de PCR
� Evaluación de cuatro fracciones del aceite esencial de orégano mexicano (Lippia berlandieri Schauer) como bactericida contra Erwinia amylovora en campo.
CIAD, A. C.
� Bacteria Gram Negativo.
� Sacarolitica.
� Aerobia facultativa.
� Temperatura óptima de
crecimiento de 28º C.
� Fitopatógena para el manzano,
peral y otras rosáceas.
� Presenta dos fases de virulencia:
epifítica y endofítica.
Erwinia amylovoraCIAD, A. C.
Erwinia amylovora
Cráter característico
de Erwinia amylovora
en cultivo
Cráter característico
de Erwinia amylovora
en cultivo
Erwinia amylovora
Varias coloniasde Erwinia amylovora
en cultivo
Fase Fase EpifEpifííticatica Fase Fase EndofEndofííticatica
Erwinia amylovora
Infección de Erwinia amylovora
en flores
CCááncer invernal con ncer invernal con
exudados de exudados de Erwinia amylovoraErwinia amylovora
Exudados de Exudados de Erwinia amylovora Erwinia amylovora en en
crecimientos vegetativoscrecimientos vegetativos
Exudados de Exudados de Erwinia amylovoraErwinia amylovora en en
frutofruto
Erwinia amylovora
*Impresiones de estigmas en CCTTemperaturaHumedadEstadio de plena floración (%)
Erwinia amylovora
* *
Factores paradecidir cuándo
aplicar
� Extracto de Lippia berlandieri Schauer
� Se considera bactericida y fungicida.
� Su acción es por contacto; al estar dentro del
grupo de los compuestos fenólicos
� Varios compuestos activos, principalmente
fenoles volátiles monoterpenicos como:
~Carvacrol
~Timol
Aceite esencial del orégano mexicano CIAD, A. C.
� Actúan a nivel de membrana celular, dañando la
integridad estructural.
� Interfieren con procesos de transporte y
metabolismo energético.
� Provocan la pérdida de constituyentes
citoplásmicos.
� Inactivación irreversible de oxidasas y
deshidrogenasas de membrana.
� Desnaturalización de proteínas.
Mecanismos de acción del
carvacrol y timolCIAD, A. C.
Identificación de Erwinia amylovora
Se realizó por PCR, mediante la amplificación de un fragmento de 987 pares de bases (pb) del gen de patogenicidad del plasmido pEA29.
CIAD, A. C.
RESULTADOS
Identificación de Erwinia amylovoraCIAD, A. C.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
2000
567
2000
567
Erwinia amylovora (987)
Erwinia amylovora (987)
Estudios previos:Evaluación de Agentes de control
biológico:
•Pseudomonas fluorescens
•Pantoea agglomerans
CIAD, A. C. Alternativas de control en campo.
Alternativa de control en campo.
Estudios previos, evaluación
productos naturales:
•Evaluación de cuatro
fracciones del aceite esencial
del orégano mexicano (procedente de Chihuahua, zonas
centro y sur)
Concentración de carvacrol (ppm)
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
100 250 500 750 1000 1250 1500
F1
F2
F3
F4
C+
Crecimiento de Erwinia amylovoraErwinia amylovora a diferentes
concentraciones de las 4 fracciones del aceite
Ciclos logarítm
icos (U
FC/m
L)
CIAD, A. C.
Concentración de carvacrol (ppm)
Ciclos logarítmicos (UFC/ml)
0
2
4
6
8
10
F1 F4 Testigo
200 250 300 350 400
Crecimiento de Erwinia amylovora a diferentes concentraciones
de las fracciones F1 y F4. (Dosis mínima bactericida, 250 ppm, F4)CIAD, A. C.
Las dosis se determinaron en base al contenido de
carvacrol de la fracción y para campo se duplicó la
dosis mínima bactericida encontrada en los
trabajos de laboratorio
CIAD, A. C.
Evaluación de cuatro fracciones del aceite contra:
Erwinia amylovora en campo
2.0Testigo productor
2.3F4, 500 ppm*
2.8Aceite 80%
1200 ppm*(1)
n. s.3.1Testigo
Significancia estadística
Media
Racimos florales
Tratamiento
Control deControl de Erwinia amylovoraErwinia amylovora en campo. en campo.
Guerrero Chih. 2006. Guerrero Chih. 2006. RomeRome BeautyBeauty..
*contenido de carvacrol en ppm
CIAD, A. C.
(1) Orégano, zona centro
Control deControl de Erwinia amylovoraErwinia amylovora en campo. en campo.
CuauhtCuauhtéémoc Chih. 2006. moc Chih. 2006. GoldenGolden DeliciousDelicious..
CIAD, A. C.
Tratamientos
Racim
os Florales dañados / árbol
5
15
25
35
45
ab
ab
a
ab
b
Testigo Agri-Mycin 100 Agrigen Plus 800 Cuprimicin 100 Aceite de orégano
Punta plateada
Punta Verde
Media pulgada Verde
Racimo Estrecho
Punta Rosa
Rosa Completo
Flor Rey
Completa Floración
Caída de Pétalos
Yem
as (%)
0
20
40
60
80
100
7 de Abril
11 de Abril
13 de Abril
17 de Abril
19 de Abril
21 de Abril
24 de Abril
26 de Abril
28 de Abril
CIAD, A. C.
Etapas fenológicas de floración.
Cuauhtémoc Chih. 2006.
•La bacteria es Erwinia amylovora
•El aceite esencial de orégano mexicano, en
base a su contenido de carvacrol, controla la
bacteria in vitro eficientemente, pero en
Campo:
• En el cultivar Rome Beauty, no presentó
diferencias entre tratamientos
• En el cultivar Golden Delicious;
si hubo control
CIAD, A. C.
CONCLUSIONES:
¡GRACIAS!
CIAD, A. C.
Centro de Investigación en Alimentación y Desarrollo, A. C.CIAD, A. C. Unidad Cuauhtémoc, Chih.
Recommended