View
33
Download
0
Category
Preview:
DESCRIPTION
RESPOSTA IMMUNITÀRIA CONTRA ELEMENTS DEL SISTEMA NERVIÓS DURANT EL DESENVOLUPAMENT DE LA DIABETIS AUTOIMMUNITÀRIA. SISTEMA NERVIÓS: ¿ESPECTADOR INNOCENT O PROTAGONISTA IMPLICAT?. La T1D és una malaltia autoimmunitària caracteritzada per la pèrdua de les cèl·lules . - PowerPoint PPT Presentation
Citation preview
RESPOSTA IMMUNITÀRIA CONTRA ELEMENTS DEL SISTEMA NERVIÓS DURANT
EL DESENVOLUPAMENT DE LA DIABETIS AUTOIMMUNITÀRIA.
SISTEMA NERVIÓS: ¿ESPECTADOR INNOCENT O PROTAGONISTA IMPLICAT?
La T1D és una malaltia autoimmunitària caracteritzada per la pèrdua de les cèl·lules .
Tot i que l’etiologia és desconeguda se sap que és multifactorial.
Intervenen:
A) Factors genètics. Més de 20 loci gènics implicats en la susceptibilitat i la resistència.
B) Factors ambientals. Dieta, infeccions, etc.
C) Factors estocàstics. Com són els reordenaments aleatoris durant la generació des BCRs i TCRs dels limfòcits B i T, respectivament.
Illots de LangerhansIllots de Langerhans
Cèl·lules Cèl·lules : 65-80%: 65-80%Cèl·lules Cèl·lules : 15-20%: 15-20%Cèl·lules Cèl·lules : 3-10%: 3-10%Cèl·lules PP (F): 1%Cèl·lules PP (F): 1%
Anti-glucagó Anti-somatostatinaAnti-insulina
cèl·lules(glucagó)
cèl·lules(insulina)
cèl·lules (somatostatina)
cèl·lules PP(polipèptid pancreàtic)
Vas sanguini
Descobert el 1869 pel patòleg alemany Paul Langerhans.Constitueixen el 1-2% de la massa del pàncrees.Cada illot conté varis milers de cèl·lules d’un diàmetre de 0,2-0,5mm.Massa total 1-1’5gr.
Illot de LangerhansIllot de Langerhans
Innervació parasimpàtica [acetilcolina, gastrin releasing peptide (GRP), pituitary adenylate cyclase activating polypeptide (PACAP), vasoactive intestinal polypeptide (VIP)]. Estimulen la secreció d’insulina, glucagó, (somatostatina, i polipèptid pancreàtic). Innervació simpàtica: [Noradrenalina, neuropeptide Y (NPY), Galanin]. Activació dels nervis simpàtics inhibeix la secreció d’insulina tant basal com estimulada per glucosa, mentre que estimula la secreció de glucagó i polipèptid pancreàtic.Innervació sensorial [pèptid SP, calcitonin gene-related peptide (CGRP)]. Inhibició de la secreció d’insulina i estimulació de la secreció de glucagó.Altres innervacions: [colecystokinin (CCK), òxid nítric (NO)]. Estimula secreció d’insulina.
Vas sanguini
cèl·lulesde Schwann
ComplexNeuroinsular
GFAP
Teitelman et al. 1998 J Neurobiol 34: 304-318
InnervacióInnervació
Saravia F et al. 2003 Trends Immunol 24: 574-579
Ushiki T & Watanabe S; Microsc. Res. Tech. (1997) 37:399-406
Sunami et al; Arch. Histol.Cytol. (2001) 64:191-2001
RATOLÍ NODRATOLÍ NOD (nonobese diabetic)
- Malaltia multifactorial:• Factors genètics: MHC (H-2g7), altres loci idd• Factors ambientals: dieta, patògens, temperatura• Factors estocàstics
- Insulitis: T, B, Mø, DCs
- Curs de la malaltia:• 3-5 setmanes: insulitis• > 12 setmanes: diabetis• Incidència: 90-60% F i 40-10% M
CD45R/B220 CD8
CD45R/B220 F4/80
CD45R/B220 CD11c
CD45R/B220 CD4
Trends in Immunology (2005) 26:248-253
Trends in Immunology (2003) 24:574-579
Limfòcits B són crucials:
- Contribueixen al desenvolupament de T1D - Ratolins NOD.IgMnull- Producció de autoanticossos: correlació amb
l’evolució de la malaltia, transferència placentària).
- Funció APC (ratolins NOD portadors de limfòcits B sense expressió de MHC classe II).
• Repertori extens contra antígens endocrins i neuroendocrins.
Quina és l'especificitat antigènica dels limfòcits B que infiltren els illots pancreàtics de ratolins NOD?
Carrillo J, Puertas M.C, Alba A, Ampudia R.M, Pastor X, Planas R, Riutort N, Alonso N, Pujol-Borrell R, Santamaria P, Vives-Pi M, Verdaguer J. Islet-infiltrating B-cells in nonobese diabetic mice predominantly target nervous system elements. Diabetes (2005) 54(1):69-77
A
Identificació dels autoantígens reconeguts per els AcMo produïts per els hibridomes
anti-SNP
Puertas M.C, Carrillo J, Pastor X, Ampudia R.M, Planas R, Alba A, Bruno R, Pujol-Borrell R, Estanyol JM, Vives-Pi M, Verdaguer J. Peripherin is a relevant neuroendocrine autoantigen recognized by islet-infiltrating B lymphocytes. The Journal of Immunology, 2007, 178: 6533–6539.
Neuronal 53,8%
Patró de reconeixement: AcMo representatiu H184F6 (IgG2b)
100m
Secció pàncrees
HIBRIDOMES ANTI-SNPANÀLISI DE L’ESPECIFICITAT
Control isotip IgG2 H184F6
NIE-115 neuroblastoma ratolí
51
contr
ol M
CC
173
C2
184
F6116
A1
263
B161
A258
A259
B293
A260
D39C
1I6 36B
182
B1
35A
246
A3A
A280
A186
A271
F3A
135
A170
B1B
166
I228
E1
NIE-115 F4
ANÀLISI DE L’ESPECIFICITAT
F1: Fracció citosòlicaF2: Fracció membrana/organel·lesF3: Fracció nuclearF4: Fracció citoesqueletN
IE-1
15
HC
-6N
IT-1
Isle
tsSV
-T2
F4 F3 F2 F1
F4
NIE-115
64
51173C2
espectre proteolític
Tinció Coomassie InmunoblotTinció con plata
IDENTIFICACIÓ PROTEÏNA
Búsqueda en bases de dades
Digestió amb tripsina
proteïna aillada
fragments peptídics
Espectrometria de masses
ANÀLISI DE L’ESPECIFICITAT
24/37 pèptidsScore=1.23+011
ANÀLISI DE L’ESPECIFICITAT
Periferina és l’autoantigen reconegut
Periferina és un filament Periferina és un filament intermig de tipus III intermig de tipus III característic del sistema característic del sistema nerviós perifèric. També nerviós perifèric. També s’expressa en cèl·lules s’expressa en cèl·lules ββ pancreàtiques.pancreàtiques.
Periferina és un antigen Periferina és un antigen neuroendocrí associat a neuroendocrí associat a diabetis autoimmunitària en diabetis autoimmunitària en el model NOD: s’han descrit la el model NOD: s’han descrit la presència de autoanticossos presència de autoanticossos en sèrum i també resposta T.en sèrum i també resposta T.
ANÀLISI DE L’ESPECIFICITAT
Ac. policlonal anti-periferina
ANÀLISI DE L’ESPECIFICITAT
Ratolí NOD: resposta contra SNPRatolí NOD: resposta contra SNP
Nature Medicine (2003) 9:198-205
- Resposta reactiva de limfòcits T i B contra cèl·lules de Schwann a las 3-4 sem. de vida. (Nature Medicine 9:198-205 (2003))- El infiltrat perinsular s’iniciaria al voltant de les fibres GABAérgiques que contenen de GAD. (Endocrinology 137:3497-3506 (1996))- Destrucció de cèl·lules de Schwann inclús abans que cèl·lules beta. (Nature Medicine 9:198-205 (2003))- Eliminació de les neurones sensorials prevé el desenvolupament de insulitis i diabetis en ratolins NOD. (Cell 127(6):1123-35 (2006)) Evidencies indirectes:- Ratolins NOD tractats amb toxina pertussis desenvolupen encefalitis autoimmunitària semblant a l’esclerosi múltiple. (J Immunol 166:2831-2841 (2001))- Ratolins NOD knockouts de B7-2 desenvolupen una neuropatia autoimmunitària periférica. (J Exp Med 194:677-684 (2001))
Rata BioBreder: resposta contra SNPRata BioBreder: resposta contra SNP
- Pèrdua selectiva i precoç de la innervació simpàtica. (Diabetes (2002) 51:2997-3001; Am J Physiol Endocrinol Metab (2003) 285:E1047-E1054))
MostraAutoAc teixit
nervios autònomAc. ganglisimpàtic
Ac. medul.laadrenal
Ac. nervivague
Diabetes care 12:1-6, 198919 ind. alt risc T1D (ICA+) 53% 9 ind. alt risc T1D (ICA-) 44%10 ind. T1D (ICA+) 60%11 ind. T1D (ICA-) 18%
J Autoimmun 4:807-818, 1991114 ind. T1D 36% 56 ind. T2D 1.8% Ind. control 0%
Diabetes 40:1611-1214, 1991 93 familiars de T1D 40% 30% 12% 26%101 ind. control 2.8% 0% 2.8% 0%
Diabetología 36:564-569, 199315 ind. T1D 33% 13% 13% 13% 27 ind. control 3% 0% 3% 0%
Diabetología 39:970-975, 1996 20 ind. T1D 40% 80 ind. control 5%
Evidencies indirectes:- A favor
- En contra: Ac. contra sist. nerviós autònom són una troballa inconstant en T1D. (Q J Med 90:577-585 (1997))
Humans: resposta contra SNP ?Humans: resposta contra SNP ?
Evidències indirectes:- Ac contra autoantígens (GAD, ICA69, IA-2).- Ac. contra cèl·lules de Schwann, i limfòcits T reactius contra GFAP i S-100 en pacients amb un debut recent de T1D i en familiars amb alt risc de desenvolupament de T1D. Nature medicine 9:198-205 (2003)- Resposta de glucagó a la hipoglucèmia deteriorada en malalts con T1D. Diabetes 32:134-141 (1983) Acta Med Scand 216:215-222 (1984) Diabetes 47:995-1005 (1998) - La T1D és més freqüent en pacients i familiars d’esclerosi múltiple. Lancet 359:1461-1465 (2002)- Neuropatia diabètica (??).
Humans: resposta contra SNP ?Humans: resposta contra SNP ?
Joan VerdaguerMaria Carmen PuertasJorge CarrilloJorge Carrascal
Marta VivesRaquel PlanasXavier Clemente
Rosa Maria Ampudia
(Institut de Recerca Biomèdica Germans Trias i Pujol)
Recommended