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Metodología de cuantificación de estructuras de Phytophthora palmivoraen tejidos afectados por la Pudrición del cogollo
Greicy Andrea Sarria V., Natalia Martínez, Yuri Adriana Mestizo, Alejandra García, Gabriel Torres L., Francia Varón
Programa de Plagas y Enfermedades – Área Fitopatología, Cenipalma. Bogotá, D.C. Colombia
Correo electrónico: gsarria@cenipalma.org
La Zona Central palmera no ha sido ajena a las pérdidas
ocasionadas por la Pudrición del cogollo (PC) de la palma de
aceite Elaeis guineensis Jacq, la cual durante los últimos años
ha sido causante de la eliminación de más de 35000 ha. A pesar
de los diferentes esfuerzos realizados por el sector, la
enfermedad ha continuado expandiéndose a nuevas áreas.
La implementación de medidas preventivas como un buen
manejo agronómico desde el establecimiento del cultivo, la
detección temprana y manejo oportuno constituyen las
principales estrategias. En esta última, la remoción de tejido
enfermo es la base para la reducción de la incidencia de la
enfermedad. Con el propósito de determinar la presencia de
estructuras del microorganismo en tejidos afectados por PC, se
evaluó una metodología que permitiera cuantificarlas en
condiciones de laboratorio.
En 12 plantaciones de la Zona Central Palmera que
presentaban palmas afectadas por la Pudrición del cogollo, se
tomaron 45 muestras de tejido enfermo necrosado y de la zona
de avance, que fueron depositadas en bolsas plásticas,
rotuladas con la correspondiente información de identificación,
posteriormente fueron llevadas al laboratorio de Fitopatología
del Campo Experimental Palmar de la Vizcaína (Figura 1).
En el laboratorio el tejido fue transferido a bolsas de papel y
sometido a un proceso de secado por exposición al sol durante
dos días. Una vez se comprobó que el tejido estuviese
completamente seco, se procedió a molerlo y almacenarlo en
tubos tipo Falcon de 15ml para su evaluación. De este tejido
molido, se tomó una muestra de 0,5 gramos y se mezcló en 10
ml de agua destilada esterilizada, posteriormente, se filtró por
un juego de tamices de 150, 45 y 38 µm respectivamente,
finalmente el contenido de los dos últimos se concentró en 10ml
de agua (Figura 2).
La cuantificación se realizó con ayuda del microscopio de luz,
utilizando una cámara de conteo de un volumen de un mililitro.
Para la obtención de aislamientos, las estructuras observadas
fueron recogidas con una micropipeta y sembradas en medio
selectivo para el crecimiento de Phytophthora palmivora.
Con la técnica utilizada se logró cuantificar e identificar
esporangios y clamidosporas de P. palmivora en el 60% de las
muestras, el número de estructuras varió para esporangios
entre 1 y 830 por 100 gr de materia seca y clamidosporas entre
1 y 1200 por 100 gr de materia seca, de igual manera fueron
observadas inmersas en el tejido estructuras de tres paredes
similares a oosporas del patógeno (Figura 3). Se obtuvieron dos
aislamientos de P. palmivora corroborando la viabilidad de las
estructuras que son fuente de inóculo y diseminación del
patógeno.
Figura 1. Toma de muestras. a. Palma afectada con el PC en estados avanzados. b. Tejidos del cogollo – paquete de flechas. c. Toma de muestra de
tejidos necrosados. d. Muestra empacada en bolsa plástica.
a c db
a b c d
Figura 2. Procesamiento de muestras de tejido afectado por la PC. a. Secado del tejido en bolsas de papel. b. Tejidos secos molidos. c. Almacenamiento
de muestras procesadas en tubos tipo Falcon. d. Tamizaje de muestras.
Figura 3. Estructuras de Phytophthora encontradas en tejidos necrosados afectados por la PC. a. Clamidosporas. b y C. Esporangios. d. Estructuras con
tres paredes similares a oosporas.
a b c d
• Con la metodología utilizada en este trabajo se logro cuantificar las estructuras de P. palmivora en tejidos afectados
con la PC.
• El aislamiento de P. palmivora a partir de estos tejidos afectados confirman que estos constituyen una fuente de
supervivencia de este patógeno.
Introducción
Metodología
Resultados
Conclusiones
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