Presentación de PowerPoint -...

Pol I Pol II pol III

gen pol A polB polC

PM (kDa) 103 90 130

mol/cél. 400 100 10

Vmax 20 nt/s 3 nt/s 750 nt/s

3' exonucl. + + +

5' exonucl + no no

procesiv. 3-200 10000 500000

DNA polimerasas en E. coli

DNA polimerasa I

La DNA pol I rellena los espacios entre fragmentos de Okazaki

Utiliza actividad exonucleasa 5’3’ para eliminar cebador de RNA

DNA ligasa

La replicación causa superenrollamiento

La topoisomerasa Girasa alivia

la tensión

Terminación de la replicación

Topoisomerasa IV

participa en la

terminación de la

replicación de

moléculas circulares.

Cómo se asegura la célula que su DNA se

replica solo una vez?

Patrones de metilación del DNA

Las enzimas Dam metilasas regulan el inicio en el origen de replicación

ADN polimerasas en células eucariontes

Replicativas

Reparativas

Los cromosomas eucariontes tienen múltiples

origenes de replicación

Cantidad de DNA, pb/ cél. 4.2 106 109

Velocidad avance horquilla mm/min 30 3

Velocidad de replicación, nt / seg 750 60-90

Número de orígenes de replicación

/ célula 1 103-104

Tiempo 1 replicación genómica (hs) 0.27 8

Tiempo 1 división celular (hs) 0.33 24

E. coli Cél humanas

Replicación del ADN:

E. coli vs. células humanas

1. Formación de un complejo pre-replicativo (comienza a finales de la fase M)

Activación de los orígenes de replicación en

eucariontes

CycA/Cdk

2. Activación de pre-RC en el punto de control G1/S

Hebra Retrasada

Topoisomerasa

DNA ligasa I

Rnasa HEN 1

Primasa

CDC 45

MCM 2 Helicasa

Topoisomerasa

Cebador ARN

PCNA

RFC

PCNA

RFC

Hebra Guía

DNA pol

DNA pol

RPA (SSB)

Horquilla de replicación en eucariontes

DNA pol

DNA pol : elonga cebadores de ARN DNA pol : elonga la cadena continua DNA pol : elonga la cadena discontinua

Re-formación de cromatina durante la

replicación

Hay complejos encargados de posicionar

los nucleosomas en las cadenas hijas

Consultar el Artículo3 en el AMYD

La modificación de histonas en los

nucleosomas se hereda a las cadenas

hijas (herencia epigenética)

Existen varios modelos propuestos para la transmisión de marcas epigenéticas en la cromatina

Se heredan patrones de metilación de citosinas en el ADN

Se heredan patrones de acetilación y metilación de las histonas

CMC= Chromatin Modifying Complex

Planta de A. thaliana defectuosa en

metilación del DNA (Zhang lab, University of Georgia)

¿Cómo completar la replicación de genomas lineales?

Cada uno de los dos

extremos 5’ en cada

cromosoma queda

incompleto al remover el

último cebador de RNA

3’ 5’

Solución: Elongar los telómeros

Telomerasa

Las células controlan el tamaño de su telómero