Química Biológica Seminario Enzimas. Definición Son catalizadores biológicos Principalmente de...

Química Biológica

Seminario Enzimas

Definición

Son catalizadores biológicos

Principalmente de naturaleza proteíca

Difieren de la actividad de otros catalizadores

Mecanismo de acción

Modelos de acción

Modelo llave-cerradura Modelo de ajuste inducido

Características de la AE

• Son termolábiles

• Alta eficiencia

• Gran especificidad

• Están sujetas a una gran variedad de controles celulares, genéticos y alostéricos.

Clasificación

Según la reacción en la que participan:

• Hidrolasas

• Oxidoreductasas

• Transferasas

• Liasas

• Isomerasas

• Ligasas

Holoenzimas

Cofactor

Proteína +

Coenzima

Efecto de la temperatura

Efecto del pH

Inhibidores

Sustancia que hace disminuir la actividad enzimática,

Esta definición excluye todos aquellos agentes desnaturalizantes

Dos tipos de inhibidores:

I. Isostéricos: ejercen su acción sobre el centro activoII. Alostéricos: ejercen su acción sobre otra parte de la molécula.

Los inhibidores isostéricos pueden ser de dos tipos:

1. Inhibidor reversible:

E + I EI

2. Inhibidor irreversible:

E + I E’

ES + I ESI

Inhibición competitiva

Inhibición no competitiva

Parte experimental

Objetivo:

Identificar enzimas a partir de su actividad especifica.

Lipasa

Cataliza la hidrólisis de los TAG

Es secretada por el páncreas

Lipasa

Sacarasa

Cataliza la hidrólisis de sacarosa

La extraemos de levaduras

1 g Levadura

20 ml de Acetona

Centrifugar

Filtrar y

secar

Resuspender en buffer

Agregar 5 ml de agua

Sacarasa

Ensayo de Fehling

Catalasa

Enzima oxidoreductasa hepática

1 g de higado

+

5 ml de Peroxido de hidrogeno

O2

Inhibición enzimática

Inhibición de la GOD por azida de sodio

1 gr. de levadura

50 ml de buffer fosfato de sodio 0.01 M NaCl 0.1.

5 ml de glucosa 10 mM

Inhibición

Rvo de trabajo: GOD, POD, Fenol y 4 aminofenazona

Reacción de identificacion