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Resolución de problemas de enzimática perteneciente a la asignatura de Bioquímica I.
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RESOLUCIN DE PROBLEMAS DE CINTICA ENZIMTICA
REPRESENTACIN DE EADIE-HOFSTEE
Es ms sencilla esta representacin que la de Lineweaver-Burke porque se tienen que hacer menos clculos y no se tiene que calcular cunto espacio dejar a la izquierda del eje y.
En el eje y se representa la velocidad inicial
(v0), mientras que en el eje x se representa la velocidad inicial dividida entre la concentracin de sustrato (v0/[S]).
El punto de corte con el eje y es el valor de la velocidad mxima (vmx).
[ ] El punto de corte con el eje x nos da el
cociente entre vmx y la KM. Por tanto, el valor de KM se puede calcular dividiendo la velocidad mxima entre el punto de corte con el eje x.
[
]
NMERO DE RECAMBIO (kcat)
El nmero de recambio (kcat) es el nmero de molculas de sustrato convertidas por segundo, por lo que
su unidad es s-1. Para calcularlo se utiliza la frmula:
[ [ ]
]
Donde vmx es la velocidad mxima y [E]T es la cantidad de enzima (en moles).
ACTIVIDAD ENZIMTICA ESPECFICA
La vmx mide la actividad enzimtica, por lo que la actividad enzimtica especfica ser el cociente entre
vmx y la masa (en gramos o mltiplos).
[
]
CLCULO DE VMXAP Y DE KMAP
Ambos parmetros cinticos aparentes se calculan de la misma manera que sus anlogos no aparentes
(vase apartado de REPRESENTACIN DE EADIE-HOFSTEE), pero se utilizan los datos de la recta obtenida a
partir de los valores en presencia del inhibidor.
2
TIPO DE INHIBICIN
Tipo de inhibicin
Qu pasa con KM?
Qu pasa con vmx?
Representacin grfica
Inhibicin competitiva
La KMap aumenta.
La vmxap se
mantiene constante.
Inhibicin acompetitiva
La KMap
disminuye. La vmx
ap disminuye.
Inhibicin no competitiva pura
La KMap se
mantiene constante.
La vmxap disminuye.
3
CLCULO DE K I
Inhibicin competitiva. Se cumple que:
(
[ ]
)
[ ]
[
[ ]
]
Inhibicin acompetitiva. Se cumple que:
[ ]
[ ]
[
[ ]
( )
]
Tambin se cumple que:
[ ]
[ ]
[
[ ]
( )
]
Inhibicin no competitiva pura. Se cumple que:
[ ]
[ ]
[
[ ]
( )
]
Resolucin de problemas de Cintica enzimticaRepresentacin de Eadie-HofsteeNmero de recambio (kcat)Actividad enzimtica especficaClculo de Vmxap y de KMapTipo de inhibicinClculo de KI
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