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IDENTIFICACION DE AGENTES ETIOLOGICOS EN NEONATOS CON CATETER UMBILICAL
Antecedentes
El inexorable progreso de la ciencia y la tecnologiacutea meacutedica ha sido acompantildeado por el
desarrollo de una enorme cantidad de nuevos dispositivos meacutedicos diagnoacutesticos y
terapeacuteuticos cada uno de los cuales se asocia con sus propias complicaciones1 Los
geacutermenes del medio hospitalario que actualmente causan enfermedad no pueden ser
eliminados soacutelo con teacutecnicas de higiene ambiental2 la infeccioacuten asociada a cateacuteter se ha
convertido en una de las infecciones intrahospitalarias maacutes comunes3 Por lo tanto los
esfuerzos recientes han sido enfocados hacia la manera de prevenir la transmisioacuten de estos
agentes y disminuir la susceptibilidad del paciente2
El uso de cateacuteter (del lat cathĕter y eacuteste del gr καθετήρ) es en medicina un dispositivo que
puede ser introducido dentro de un tejido o vena con el objeto de permitir la inyeccioacuten de
faacutermacos el drenaje de liacutequidos o bien el acceso de otros instrumentos meacutedicos
CATEacuteTER VENOSO UMBILICAL
Recambios sanguiacuteneo
Recambio parcial
Shock hipovoleacutemico grave
Medicioacuten de presioacuten venosa central en pacientes criacuteticamente enfermos
CATEacuteTER ARTERIAL UMBILICAL
Recieacuten nacido de preteacutermino menos de 1500 grs con distreacutes respiratorio
Recieacuten nacido con distreacutes respiratorio con requerimientos de oxigeno mayor de 50
Recieacuten nacido conectado a ventilacioacuten mecaacutenica
Administracioacuten de fluidos en situaciones de recieacuten nacido de preteacutermino en que es
imposible el acceso a venas perifeacutericas4
1
Existen diferentes tipos de cateacuteteres venosos centrales de acuerdo al tiempo de uso corta
duracioacuten larga duracioacuten nuacutemero de luacutemenes y uso terapeacuteutico por lo cual se hace
necesario conocer sus ventajas y riesgos como sus indicaciones manejo y mantencioacuten4
Seguacuten su tiempo de duracioacuten
Corta duracioacuten
- Cateacuteteres venosos perifeacutericos generalmente en miembros superiores especialmente en
manos y antebrazos
- Cateacuteteres arteriales perifeacutericos usualmente en arteria radial o braquial Tambieacuten tibia
posterior o femoral
- Cateacuteteres venosos centrales yugular interna subclavia o femoral-
- Cateacuteteres arteriales pulmonares a traveacutes de un introductor de tefloacuten en una vena central
(subclavia yugular o femoral)
- Cateacuteteres umbilicales se insertan dentro de la vena o la arteria umbilical5
Larga duracioacuten
- Cateacuteteres venosos de insercioacuten perifeacuterica (percutanea) generalmente en la vena basiacutelica
cefaacutelica o venas de miembros inferiores Entran en la vena cava superior o inferior
- Cateacuteteres venosos centrales tunelizados (semiemplantables) se implantan quiruacutergicamente
en subclavia yugular interna o femoral-
- Cateacuteteres totalmente implantados tunelizados a traveacutes de la piel tienen un reservorio
subcutaacuteneo al que se accede por puncioacuten5
Seguacuten su material
- Cloruro de polivinilo
- Poliuretano
2
- Silicona
- Tefloacuten6
Los CVC de Silicoacuten tienen un menor porcentaje de colonizacioacuten 38 en comparacioacuten con
los de poliuretano con 627
RETIRO
Los cateacuteter se retiran de acuerdo ha
CATEacuteTER VENOSO UMBILICAL
Exanguineotransfusioacuten y recambio parcial cuando haya terminado el procedimiento 30
a 90 minutos
Inmediatamente posterior al cese de la indicacioacuten
CATEacuteTER ARTERIAL UMBILICAL
Recieacuten nacido con requerimientos bajo 40 y puncioacuten arterial sin problemas
Retiro de ventilacioacuten mecaacutenica
Evidencia cliacutenica o confirmacioacuten bacterioloacutegica de infeccioacuten del cateacuteter
Cateacuteter arterial ubicado en zona peligrosa de acuerdo a Rx toracoabdominal4
Las Infecciones del Torrente Sanguiacuteneo son una de las complicaciones mas graves que
puede ocurrir en el hospital si bien su incidencia no es tan elevada su alta LETALIDAD
determina la prioridad que se debe tener en las medidas tendientes a su prevencioacuten
DEFINICION DE LOS TIPOS DE CATETERIZACION
- CATETERIZACIOacuteN VASCULAR es la canalizacioacuten de un vaso sanguiacuteneo venoso o
arterial realizada por medio de un cateacuteter a traveacutes de una puncioacuten o incisioacuten
- CATETERIZACIOacuteN TEMPORAL es aquella cateterizacioacuten que tiene una duracioacuten
miacutenima ya que se introduce y se retira el cateacuteter en el mismo procedimiento
3
- CATETERIZACIOacuteN PERMANENTE es aquella cateterizacioacuten en que se introduce el
cateacuteter en el vaso por un tiempo mayor que la duracioacuten del procedimiento
CONCEPTO DE SINTOMAS DE UN NEONATO CON CATETER INFECTADO
- BACTEREMIA POR CATETER Aislamiento de bacterias viables en la sangre con
cultivo de cateacuteter positivo sin que se identifique otro foco originario
Primaria es aquella en que no existe otro foco de infeccioacuten Se consideran
asociadas a los equipos de infusioacuten endovenosa
Secundaria es aquella en que existe foco infeccioso en otro sitio (pulmonar
urinario piel gastrointestinal) por el mismo microorganismo
- FLEBITIS es la inflamacioacuten de la iacutentima de la vena puede evolucionar de compromiso
leve a severo con tromboflebitis emboliacutea pulmonar y bacteremia Este compromiso se
inicia con sensibilidad local ligero dolor eritema calor local ligera induracioacuten y cordoacuten
venoso palpable
- INFILTRACIOacuteN es la extravasacioacuten de fluidos endovenosos al espacio intersticial a
causa del desplazamiento del cateacuteter o la perforacioacuten de la pared venosa La
infiltracioacuten de soluciones aacutecidas alcalina o hipertoacutenica puede producir necrosis
hiacutestica4
- COLONIZACION DE CATETER se define por un cultivo positivo de punta de cateacuteter
con 15 UFC (Unidad Formadora de Colonias) utilizando la teacutecnica descrita por maki
- CONTAMINACION DE CATETER Presencia de un cultivo semicuantitativo o
cuantitativo con un nuacutemero de UFCml por debajo del nivel considerado como positivo
seguacuten la teacutecnica considerada8
4
- SEPSIS POR CATETER Traduce la respuesta inflamatoria del paciente a la
colonizacioacuten de un cateacuteter Esta puede ser de tipo local o sisteacutemica 9
Cateacuteter umbilical en neonatos
El uso de cateacuteteres umbilicales se utilizan como liacuteneas centrales para administrar
soluciones y medicamentos monitorizar la presioacuten arterial y tomar muestras de gases
arteriales en la Unidad de Recieacuten Nacidos asiacute como las complicaciones que se presentan
con esta praacutectica haciendo especial eacutenfasis en la viacutea oral concomitante el cateterismo de
los vasos umbilicales es un procedimiento relativamente sencillo raacutepido y de uso comuacuten
en las unidades de cuidado intensivo neonatal10
Los vasos umbilicales son la viacutea de eleccioacuten para el neonato criacuteticamente enfermo La
canalizacioacuten de los cateacuteteres umbilicales es realizada por el facultativo
El cateterismo de la arteria umbilical estaacute indicado cuando se requieren determinaciones
frecuentes de los gases en sangre arterial este procedimiento tambieacuten se utiliza para la
monitorizacioacuten continua de la presioacuten arterial y para realizar exanguinotransfusioacuten
El cateterismo de la vena umbilical estaacute indicado para la monitorizacioacuten de la presioacuten venosa
central acceso inmediato para liacutequidos intravenosos y faacutermacos de emergencia
exanguinotransfusioacuten acceso venoso de largo plazo en recieacuten nacidos de peso
extremadamente bajo y en espera de la canalizacioacuten por enfermeriacutea de un cateacuteter venoso
epicutaacuteneo11
Agentes etioloacutegicos
Entre los agentes etioloacutegicos bacterianos que con mayor frecuencia causan infecciones
asociadas a cateacuteter y que a su vez son los maacutes estudiados se encuentran Gram
positivos como Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus
streptococcus ssp Enterococcus ssp Gram negativos como Escherichia coli Klebsiella
ssp Enterobacter serratia ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son
Candida albicans otras especies de Candidas12
5
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada
por una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
que afecta tambieacuten al depoacutesito de proteiacutenas seacutericas en la superficie del cateacuteter La
adhesioacuten variacutea seguacuten el material del cateacuteter siendo mayor en los de polivinilo o laacutetex
siliconado y menor en los cateacuteteres de poliuretano polietileno o tefloacuten A este primer
paso que es reversible le sigue un proceso de adherencia bacteriana mediante un
sistema de adhesinas a diferentes receptores como son el fibrinoacutegeno o la fibrina
Mientras el Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante
interaccioacuten hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada
por las proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor Una vez colonizado el cateacuteter los
microorganismos forman la llamada biocapa bacteriana mediante una sustancia
polimeacuterica (slime) que protege a las bacterias facilitando su adhesioacuten y disminuyendo
su sensibilidad a los antibioacuteticos favoreciendo la aparicioacuten de resistencias13
La prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos invasivos a los que son sometidos los
recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas infecciones bacterianas La duracioacuten de
la estancia hospitalaria es inversamente proporcional al peso del nacimiento y a la edad
gestacional factores relacionados directamente con infecciones nosocomiales A pesar de
todos los avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean siendo una
importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal14
Factores de riesgo
Los factores de riesgo de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes
dependen del sitio donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter
en los vasos umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso
canalizado15
6
Infeccioacuten en cateacuteter umbilical
El empleo de los cateacuteteres umbilicales en el tratamiento de nintildeos recieacuten nacidos es un
procedimiento comuacuten en el manejo que se hace en ellos en las unidades de cuidados
intensivos neonatales (UCIN) ante problemas que ponen en peligro su vida Los primeros en
usar los vasos umbilicales para alguno de los propoacutesitos mencionados fueron Diamond
(1947) y James(1959)16
A pesar de la aparente facilidad para colocar los cateacuteteres umbilicales el procedimiento no
estaacute exento de complicaciones las maacutes frecuentes son infecciones arritmias cardiacas
vasoespasmo trombosis y embolias vasculares taponamiento cardiaco enterocolitis
necrosante necrosis hepaacutetica e hipertensioacuten de la porta1718 Como factor predisponente se
menciona el tiempo de permanencia cateacuteter en el vaso canalizado por lo que se tiene el
cuidado de retirarlo tan pronto como se logre la estabilizacioacuten del nintildeo y sea posible contar
con otra viacutea es por la relativa facilidad de canalizar estos vasos para obtener en ellos
muestras de sangre para administrar soluciones y medicamentos y para hacer mediciones
vascular central
Se informa una mayor frecuencia de las complicaciones infecciosas que generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo19
Epidemiologia
El indicador de infeccioacuten relacionada con cateacuteter recomendado y utilizado en los principales
estudios de vigilancia de infeccioacuten nosocomial es la BRC Su definicioacuten puede variar
teniendo en cuenta aspectos epidemioloacutegicos que incluyen la bacteriemia primaria (origen
desconocido) o cliacutenicos (comprobacioacuten de la BRC con cultivos de microorganismos iguales
en el cateacuteter y en hemocultivos) La CDC y la JCAHO recomiendan que las tasas de BRC se
expresen en episodios de BRC1000 diacuteas de cateacuteter20
Aunque la incidencia de BRC ha disminuido en los uacuteltimos antildeos a unos 56 episodios1000
diacuteas de cateacuteter posiblemente por mejor disentildeo y calidad de los cateacuteteres el nuacutemero de
7
pacientes con BRC sigue siendo elevado Esto es debido al mayor uso de CVC su elevada
manipulacioacuten a los avances en los meacutetodos de diagnoacutestico microbioloacutegico y a la puesta en
marcha de estaacutendares de sistemas de vigilancia de infeccioacuten nosocomial21
Patogenia
Se considera que la patogeacutenesis de las infecciones relacionadas a cateacuteter es compleja y
multifactorial Las bacterias pueden llegar al torrente sanguiacuteneo por dos viacuteas principales
1048707 Pueden migrar desde la piel en la interfase del cateacuteter hasta colocarse en la superficie externa
de eacuteste
1048707 Pueden ingresar a la luz interna del cateacuteter a traveacutes del conector
La migracioacuten de microorganismos presentes en la piel en el sitio de insercioacuten del cateacuteter con
colonizacioacuten de la punta es la ruta mas comuacuten de infeccioacuten en cateacuteteres de corta
permanencia mientras que los cateacuteteres de larga permanencia la contaminacioacuten del tubo de
cateacuteter contribuye sustancialmente a su colonizacioacuten intraluminal22
Se han reconocido numerosas medidas de prevencioacuten efectivas en la reduccioacuten de las
infecciones pero la ejecucioacuten de estas medidas en la praacutectica parece ser el problema maacutes
relevante existiendo gran diferencia entre la mejor evidencia disponible y la praacutectica cliacutenica
Bases Cliacutenicas
Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter fue descrito por primera vez por Maki y cols
en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa de la punta del cateacuteter El criterio de
positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea de los pacientes con recuentos
inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten mientras que todos los casos que
cursaban con bacteriemia tuvieron recuentos superiores a 15 UFC y con frecuencia las
colonias fueron incontables La especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76 Este meacutetodo por
su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de microbiologiacutea y es la
teacutecnica de referencia23
8
En el estado o condicioacuten con relacioacuten a un cateacuteter ya colocado por la cual el cuerpo o parte
de este ha sido invadido por un agente patoacutegeno que en condiciones favorables se
multiplica y produce efectos dantildeinos Una vez que el microorganismo se ha instalado en el
cateacuteter hay un cierto nuacutemero de condiciones subsiguientes posibles ya sean localizadas o
sisteacutemicas La mejor manera de determinar si el cateacuteter es la causa de la infeccioacuten es hacer
un cultivo cuantitativo de cateacuteteres junto con un cultivo perifeacuterico de sangre Usando un
meacutetodo semicuantitativo para un cultivo de cateacuteter las siguientes definciones son aplicables
al diagnoacutestico de infeccioacuten
A Esteacuteril No hay crecimiento
B Contaminacioacuten lt 15 UFC de la punta del cateacuteter
C Localizada
1 Colonizacioacuten gt 15 UFC de la punta del cateacuteter El organismo se presenta sin siacutentomas
2 Infeccioacuten del lugar de insercioacuten gt 15 UFC en cultivos de la punta del cateacuteter
generalmente con siacutentomas externos de infeccioacuten localizada
D Sisteacutemica Bacteremia relacionada con el cateacuteter gt 15 UFC en cultivos de l apunta del
cateacuteter y en cultivos perifeacutericos de sangre positivos con el mismos organismo sin
identificarse otro sitio de infeccioacuten23
Agentes etioloacutegicos de infecciones en cateacuteter umbilical
La bacteremia es una invasioacuten del torrente sanguiacuteneo por bacterias La bacteremia se
desarrolla como resultado del dantildeo externo (la piel) o el interior (el tracto respiratorio el
tracto digestivo) de las barreras del cuerpo El agente causante de la bacteremia en un 71
es el Staphylococcus aureus Una entrada para la sepsis en pacientes con quemaduras
puede ser las heridas cateacuteteres de la vena las viacuteas aeacutereas los pulmones el tracto digestivo
etc24
Staphylococcus aureus9
S aureus forma parte de la familia Microccocaceae geacutenero Staphylococcus el cual contiene
maacutes de 30 especies diferentes Es un coco gram-positivo no moacutevil No forma esporas puede
encontrarse solo en pares en cadenas cortas o en racimos Es un anaerobio facultativo
pero crece mejor en condiciones aerobias25 El S aureus es un microorganismo positivo a la
coagulasa que se aiacutesla con mayor frecuencia en infecciones de piel26 Staphylococcus
aureus es la principal especie patoacutegena de su geacutenero y la causa comuacuten de diversas
infecciones de origen nosocomial y comunitario27
Los Staphylococcus producen muy diversos siacutendromes con manifestaciones cliacutenicas que
van desde una simple puacutestula hasta la sepsis y la muerte28
Escherichia coli y Klebsiella pneumoniae
Escherichia coli es un bacilo que reacciona negativamente a la tincioacuten de Gram es anaerobio
facultativo moacutevil por flagelos peritricos (que rodean su cuerpo) no forma esporas es capaz
de fermentar la glucosa y la lactosa Klebsiella es un geacutenero de bacterias no moacutetiles Gram-
negativas con una prominente caacutepsula de polisacaacuteridos Estas especies patoacutegenas estaacuten
significativamente asociadas a infecciones nosocomiales cuyas alternativas terapeacuteuticas
cada vez son menores por ser importantes fuentes de resistencia antibioacutetica transferible29
Estos patoacutegenos estaacuten asociados con infecciones en infantes prematuros y pacientes de las
unidades de cuidado intensivo son causantes de neumoniacuteas bacteriemias infecciones del
tracto urinario e infecciones de herida quiruacutergica30
10
Planteamiento de problema
iquestCuales son los agentes etioloacutegicos que presentan los pacientes neonatos con cateacuteter
umbilical durante su atencioacuten hospitalaria
11
Justificacioacuten
El uso temprano de cateacuteteres umbilicales es una alternativa segura para el acceso
vascular en el recieacuten nacido sus complicaciones son escasas y no asociadas a la
administracioacuten de medicamentos o al uso de la viacutea enteral
El cateacuteter umbilical en neonatos es muy uacutetil como liacutenea central para administrar
soluciones y medicamentos monitorizar la presioacuten arterial y tomar muestras de gases
arteriales
El siguiente trabajo descriptivo transversal se realiza con el objetivo de analizar las
complicaciones que se presentan con esta praacutectica haciendo especial eacutenfasis en la viacutea
oral concomitante
Es sumamente importante contar con un buen meacutetodo diagnoacutestico para poder enfrentar
las infecciones asociadas a cateacuteter por lo tanto la decisioacuten de retiro de un dispositivo
debe ser evaluada en forma responsable y criteriosa La sola presencia del cuadro
cliacutenico no determina su asociacioacuten con el dispositivo intravascular ya que habitualmente
los signos cliacutenicos son inespeciacuteficos es el diagnoacutestico microbioloacutegico el que
determinaraacute su retiro yo tratamiento seguacuten corresponda
12
Objetivos
Objetivo general
1- Conocer la frecuencia de la flora bacteriana del ombligo del neonato por uso de cateacuteter
durante su atencioacuten hospitalaria
Objetivos especiacuteficos
1- Identificar el geacutenero y especie de los agentes etioloacutegicos presentes en infecciones del
ombligo por uso de cateacuteter umbilical en neonatos durante la atencioacuten hospitalaria
2- Proporcionar informacioacuten al servicio de Vigilancia y Control de Enfermedades Hospitalarias
13
Hipoacutetesis
HI
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
Ho
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical no adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
14
MATERIAL Y METODOS
Lugar de estudio y ubicacioacuten
La investigacioacuten se realizoacute en Veracruz Veracruz Meacutexico que se encuentra ubicado en la
zona centro del estado
Ensayo cliacutenico y tamantildeo de muestra
Para calcular el tamantildeo de la muestra y conformar el grupo de pacientes neonatos con
cateacuteter umbilical se utilizo un intervalo de confianza de 95 De tal manera el tamantildeo de
muestra estimado fue de 80 pacientes pero se eliminaron 30 debido a bajas del Hospital y
por defuncioacuten debido a padecimientos asociados al nacimiento prematuro del neonato
Criterios de inclusioacuten
Se desarrolloacute un estudio transversal descriptivo para identificar pacientes neonatos que
adquirieron alguna infeccioacuten de forma natural y conocer su prevalencia Soacutelo fueron
considerados pacientes neonatos nacidos en el Hospital de Alta Especialidad de Veracruz
del aacuterea de Pediatriacutea con sospecha de infeccioacuten bacteriana que fueran mayores de una
semana de vida y no mayores a 1 antildeo asiacute como tambieacuten que los cateacuteteres umbilicales
fueran retirados en condiciones higieacutenicas apropiadas en base a lo descrito en la SS y sin
antecedentes de alguna infeccioacuten previa Se lograron reunir un grupo de 50 pacientes que
reunioacute las caracteriacutesticas oacuteptimas para este estudio
Criterios de exclusioacuten
15
No se tomaron en consideracioacuten para este estudio los cultivos de cateacuteteres umbilicales que
no fueron retirados en condiciones apropiadas y los cateacuteteres umbilicales de neonatos que
fueron transportados en un medio de cultivo inadecuado Los Pacientes neonatos que
autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una patologiacutea traumaacutetica asociada y
los pacientes neonatos que autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una baja
por defuncioacuten fueron totalmente descartados para fines de esta investigacioacuten
Caracteriacutesticas de la unidad de pediatriacutea
La unidad de pediatriacutea del Hospital Regional de Alta Especialidad estaacute dividida en diferentes
aeacutereas de las cuales para fines de esta investigacioacuten se analizaron pacientes neonatos de
UCIN UCIM y cunero patoloacutegico Debido a que existen pacientes en el aacuterea de pediatriacutea que
ya no cumplen con el reacutegimen de edad estipulado para este estudio
Muestreo para la seleccioacuten de neonatos
Para la seleccioacuten de los neonatos y para reunir el tamantildeo de la muestra necesario para el
estudio se analizaron cateacuteteres de todos los neonatos con sospecha de infeccioacuten bacteriana
a partir de un mes de edad con el uso de medios de Stuart para transportar el cateacuteter Para
este muestreo no se tomoacute en cuenta el sexo Cada tubo de Stuart se identificoacute con el nombre
completo del paciente el servicio de donde se tomo el tipo de muestra fecha y un nuacutemero
de folio con continuidad Las muestras se conservaron a temperatura ambiente durante la
transportacioacuten a su anaacutelisis y luego fueron remitidas al laboratorio para su anaacutelisis
microbioloacutegico
Teacutecnicas de laboratorio
Para el estudio microbioloacutegico del cateacuteter umbilical del neonato fue utilizada la teacutecnica
semicuantitativa de maki Esta teacutecnica ha sido aceptada por la mayoriacutea de los laboratorios
de microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia
16
Proceso de Investigacioacuten
Se trabajo con pacientes nacidos en el Hospital Regional De Alta Especialidad De Veracruz
los cuales tuvieron participacioacuten en esta investigacioacuten hasta la identificacioacuten del agente
etioloacutegico en el cateacuteter umbilical
Se realizo el retiro del cateacuteter umbilical del neonato con una teacutecnica aseacuteptica utilizando
material esteacuteril se desinfecto la piel con alcohol al 10 y se dejo secar con pinza se retiro el
cateacuteter cuidando de no rosar la piel se corto de 3 a 5 cm de la porcioacuten distal y se coloco en
el medio de transporte Stuart para remitirlo al laboratorio de microbiologiacutea para su anaacutelisis
bacterioloacutegico
En el laboratorio se inoculo el cateacuteter umbilical en el agar base sangre por la teacutecnica
semicuantitativa de maki rotando el cateacuteter con ayuda del asa bacterioloacutegica 5 veces Se
incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera O2 Se prosiguioacute con la interpretacioacuten de la morfologiacutea
colonial se resembraron colonias en los medios Agar sal y manitol Agar Mac Conkey y Agar
Biggy para su diferenciacioacuten se Incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera de O2 continuando con
la Interpretacioacuten de la morfologiacutea colonial
Se realizaron tinciones gram para diferenciar Gram positivas de Gram negativas para Gram
positivas como para Gam negativas se procedioacute a la preparacioacuten de paneles Se Incubaron
los paneles Gram en la estufa del Sensititre a 37degC por 24 Hrs en atmosfera de O2 Se
continuacuteo con la lectura de paneles Gram en autoreader Sensititre obteniendo asiacute el
resultado bacteriano en cuanto a geacutenero y especie
17
Material empleado
Paneles Combo Sensititre
Laminas adhesivas
Agua desmineralizada Sensititre
Tira de substrato para prueba de Gram positivos
Aceite mineral
Reactivos para tincioacuten de Gram
Cabezales de dosificacioacuten Sensititre
Estaacutendar de turbidez McFarland 05
Puntas desechables para pipeta
Tubos de ensaye 13 x 100
Tubos de ensaye 10 x 75
Pipetas Automaacuteticas de 5 ųl
Gradilla
Quemador bunsen
Asa bacterioloacutegica
Cajas petri
Goteros
Jaboacuten de manos
Detergente
Toalla
Franela
Alcohol
Cubrebocas
Guantes desechables
Recipiente para material contaminado
Rollo de papel adsorbente
Cloro
Gasas
Bolsas de plaacutestico
Cerillos
Porta objetos
Cubre objetos 18
Papel estraza
Computadora
Impresora
Hojas tamantildeo carta blancas
Medios de cultivo
Agar base sangre
Agar Sal de manitol
Agar Mac Conkey
Biggy
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes ajustado a Sensititre
Medio de transporte Stuart
Equipos de Laboratorio
1 Estufa de cultivo
2 Microscopio
3 Vortex
4 Auto inoculador
5 SISTEMA SENSITITRE
a Autoreader Sensititre
b Estufa Sensititre
Fundamentos
19
Uno de los sistemas maacutes importantes para la identificacioacuten de microorganismos es observar
su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio El material
alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de
los microorganismos es el Cultivo
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son temperatura grado de humedad y presioacuten de oxiacutegeno
adecuadas asiacute como un grado correcto de acidez o alcalinidad Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante
Estos Medios fueron utilizados en esta investigacioacuten para fines de identificacioacuten de
microorganismos bacterianos Cada medio tiene una caracteriacutestica importante para ser
empleado en este proyecto
A continuacioacuten se describen
Medio de Transporte Stuart
Medio semisoacutelido no nutritivo Contiene tioglicolato de sodio el cual provee un ambiente
reducido y es uacutetil para suprimir cambios oxidativos en el medio de transporte y azul de
metileno que es el indicador de oxido reduccioacuten De esta manera se favorece la viabilidad de
los microorganismos durante su enviacuteo al laboratorio
Agar sangre
La infusioacuten de muacutesculo de corazoacuten y la peptona otorgan al medio un alto valor nutritivo que
permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos auacuten de aquellos
nutricionalmente exigentes El cloruro de sodio mantiene el balance osmoacutetico
El agregado de sangre al medio de cultivo en concentracioacuten final de 5-10 aporta
nutrientes para el crecimiento bacteriano y permite detectar hemoacutelisis
Agar Mac Conkey
20
En el medio de cultivo las peptonas aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo
bacteriano la lactosa es el hidrato de carbono fermentable y la mezcla de sales biliares y el
cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora
Gram positiva Por fermentacioacuten de la lactosa disminuye el pH alrededor de la colonia Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro) la absorcioacuten en las colonias y la
precipitacioacuten de las sales biliares Los microorganismos no fermentadores de lactosa
producen colonias incoloras
Agar sal y manitol
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracioacuten salina Los
estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante Los estafilococos coagulasa negativos
presentan colonias rodeadas de una zona roja o puacuterpura En el medio de cultivo el extracto
de carne y la pluripeptona constituyen la fuente de carbono nitroacutegeno vitaminas y
minerales el manitol es el hidrato de carbono fermentable el cloruro de sodio (que se
encuentra en alta concentracioacuten) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora
acompantildeante y el rojo fenol es el indicador de pH Las bacterias que crecen en un medio
con alta concentracioacuten de sal y fermentan el manitol producen aacutecidos con lo que se modifica
el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo Los estafilococos crecen
en altas concentraciones de sal y pueden o no fermentar el manitol Los estafilococos
coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de
una zona del mismo color Los estafilococos que no fermentan el manitol se visualizan como
colonias rojas rodeadas de una zona del mismo color o puacuterpura
Agar Biggy
El Agar Biggy es una modificacioacuten de la foacutermula desarrollada por Nickerson La
diferenciacioacuten estaacute basada en la morfologiacutea colonial y la pigmentacioacuten tiacutepica que se presenta
en este medio La reduccioacuten del sulfito de bismuto se manifiesta en una pigmentacioacuten de la
colonia que en ocasiones difunde en el medio En este medio el extracto de levadura
proporciona vitaminas y aminoaacutecidos La glicina es utilizada para estimular el crecimiento La
dextrosa es la fuente de carbono El indicador sulfito de bismuto actuacutea tambieacuten como un
inhibidor del desarrollo bacteriano El agar es adicionado como agente solidificante
21
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes
El caldo Mueller-Hinton se recomienda como el medio preferido para pruebas de
susceptibilidad de organismos comuacutenmente aislados aeroacutebicos o facultativos de raacutepido
crecimiento El caldo debe tener el contenido apropiado de cationes (Ca++ y Mg++) El pH
debe estar entre 72 y 74 a temperatura ambiente (25ordm C)
22
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram positivas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar glucosa glicerol maltosa manitol B-metilglucoacutesido
ramnosa sacarosa sorbitol trehalosa La produccioacuten de acido reduce la fluorescencia de un
fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substrato fluorogeacutenico el substrato enzimaacutetico esta vinculado a un fluoroacuteforo
que suprime la fluorescencia La ruptura enzimaacutetica de la unioacuten libera el fluoroacuteforo con
capacidad de fluorescencia
3- Pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea y la arginina (requieren la adicioacuten de aceite
mineral esteacuteril) incrementa el pH y la fluorescencia La esculina es una moleacutecula fluorescente
que al hidrolizarse se descompone en productos no fluorescentes
23
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram negativas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar Arabinosa arabitol celobiosa fructosa inositol
maltosa manitol rafinosa sacarosa sorbitol trehalosa xilosa La produccioacuten de acido
reduce la fluorescencia de un fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substratos fluorogeacutenico Cada substrato enzimaacutetico esta vinculado a un
fluoroacuteforo que suprime la fluorescencia La ruptura particioacuten enzimaacutetico de la unioacuten libera el
fluoroacuteforo con capacidad de fluorescencia
3- Pruebas de utilizacioacuten de carbono Agmatina arginina citrato lisina malonato ornitina y
piruvato La descomposicioacuten del substrato provoca un aumento de pH y la fluorescencia
4- Otras pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea incrementa el pH y la fluorescencia La
esculina es una moleacutecula fluorescente que al hidrolizarse se descompone en productos no
fluorescentes Desaminacioacuten del triptofano La formacioacuten de un color oscuro suprime la sentildeal
fluorescente
24
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
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38
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29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
Existen diferentes tipos de cateacuteteres venosos centrales de acuerdo al tiempo de uso corta
duracioacuten larga duracioacuten nuacutemero de luacutemenes y uso terapeacuteutico por lo cual se hace
necesario conocer sus ventajas y riesgos como sus indicaciones manejo y mantencioacuten4
Seguacuten su tiempo de duracioacuten
Corta duracioacuten
- Cateacuteteres venosos perifeacutericos generalmente en miembros superiores especialmente en
manos y antebrazos
- Cateacuteteres arteriales perifeacutericos usualmente en arteria radial o braquial Tambieacuten tibia
posterior o femoral
- Cateacuteteres venosos centrales yugular interna subclavia o femoral-
- Cateacuteteres arteriales pulmonares a traveacutes de un introductor de tefloacuten en una vena central
(subclavia yugular o femoral)
- Cateacuteteres umbilicales se insertan dentro de la vena o la arteria umbilical5
Larga duracioacuten
- Cateacuteteres venosos de insercioacuten perifeacuterica (percutanea) generalmente en la vena basiacutelica
cefaacutelica o venas de miembros inferiores Entran en la vena cava superior o inferior
- Cateacuteteres venosos centrales tunelizados (semiemplantables) se implantan quiruacutergicamente
en subclavia yugular interna o femoral-
- Cateacuteteres totalmente implantados tunelizados a traveacutes de la piel tienen un reservorio
subcutaacuteneo al que se accede por puncioacuten5
Seguacuten su material
- Cloruro de polivinilo
- Poliuretano
2
- Silicona
- Tefloacuten6
Los CVC de Silicoacuten tienen un menor porcentaje de colonizacioacuten 38 en comparacioacuten con
los de poliuretano con 627
RETIRO
Los cateacuteter se retiran de acuerdo ha
CATEacuteTER VENOSO UMBILICAL
Exanguineotransfusioacuten y recambio parcial cuando haya terminado el procedimiento 30
a 90 minutos
Inmediatamente posterior al cese de la indicacioacuten
CATEacuteTER ARTERIAL UMBILICAL
Recieacuten nacido con requerimientos bajo 40 y puncioacuten arterial sin problemas
Retiro de ventilacioacuten mecaacutenica
Evidencia cliacutenica o confirmacioacuten bacterioloacutegica de infeccioacuten del cateacuteter
Cateacuteter arterial ubicado en zona peligrosa de acuerdo a Rx toracoabdominal4
Las Infecciones del Torrente Sanguiacuteneo son una de las complicaciones mas graves que
puede ocurrir en el hospital si bien su incidencia no es tan elevada su alta LETALIDAD
determina la prioridad que se debe tener en las medidas tendientes a su prevencioacuten
DEFINICION DE LOS TIPOS DE CATETERIZACION
- CATETERIZACIOacuteN VASCULAR es la canalizacioacuten de un vaso sanguiacuteneo venoso o
arterial realizada por medio de un cateacuteter a traveacutes de una puncioacuten o incisioacuten
- CATETERIZACIOacuteN TEMPORAL es aquella cateterizacioacuten que tiene una duracioacuten
miacutenima ya que se introduce y se retira el cateacuteter en el mismo procedimiento
3
- CATETERIZACIOacuteN PERMANENTE es aquella cateterizacioacuten en que se introduce el
cateacuteter en el vaso por un tiempo mayor que la duracioacuten del procedimiento
CONCEPTO DE SINTOMAS DE UN NEONATO CON CATETER INFECTADO
- BACTEREMIA POR CATETER Aislamiento de bacterias viables en la sangre con
cultivo de cateacuteter positivo sin que se identifique otro foco originario
Primaria es aquella en que no existe otro foco de infeccioacuten Se consideran
asociadas a los equipos de infusioacuten endovenosa
Secundaria es aquella en que existe foco infeccioso en otro sitio (pulmonar
urinario piel gastrointestinal) por el mismo microorganismo
- FLEBITIS es la inflamacioacuten de la iacutentima de la vena puede evolucionar de compromiso
leve a severo con tromboflebitis emboliacutea pulmonar y bacteremia Este compromiso se
inicia con sensibilidad local ligero dolor eritema calor local ligera induracioacuten y cordoacuten
venoso palpable
- INFILTRACIOacuteN es la extravasacioacuten de fluidos endovenosos al espacio intersticial a
causa del desplazamiento del cateacuteter o la perforacioacuten de la pared venosa La
infiltracioacuten de soluciones aacutecidas alcalina o hipertoacutenica puede producir necrosis
hiacutestica4
- COLONIZACION DE CATETER se define por un cultivo positivo de punta de cateacuteter
con 15 UFC (Unidad Formadora de Colonias) utilizando la teacutecnica descrita por maki
- CONTAMINACION DE CATETER Presencia de un cultivo semicuantitativo o
cuantitativo con un nuacutemero de UFCml por debajo del nivel considerado como positivo
seguacuten la teacutecnica considerada8
4
- SEPSIS POR CATETER Traduce la respuesta inflamatoria del paciente a la
colonizacioacuten de un cateacuteter Esta puede ser de tipo local o sisteacutemica 9
Cateacuteter umbilical en neonatos
El uso de cateacuteteres umbilicales se utilizan como liacuteneas centrales para administrar
soluciones y medicamentos monitorizar la presioacuten arterial y tomar muestras de gases
arteriales en la Unidad de Recieacuten Nacidos asiacute como las complicaciones que se presentan
con esta praacutectica haciendo especial eacutenfasis en la viacutea oral concomitante el cateterismo de
los vasos umbilicales es un procedimiento relativamente sencillo raacutepido y de uso comuacuten
en las unidades de cuidado intensivo neonatal10
Los vasos umbilicales son la viacutea de eleccioacuten para el neonato criacuteticamente enfermo La
canalizacioacuten de los cateacuteteres umbilicales es realizada por el facultativo
El cateterismo de la arteria umbilical estaacute indicado cuando se requieren determinaciones
frecuentes de los gases en sangre arterial este procedimiento tambieacuten se utiliza para la
monitorizacioacuten continua de la presioacuten arterial y para realizar exanguinotransfusioacuten
El cateterismo de la vena umbilical estaacute indicado para la monitorizacioacuten de la presioacuten venosa
central acceso inmediato para liacutequidos intravenosos y faacutermacos de emergencia
exanguinotransfusioacuten acceso venoso de largo plazo en recieacuten nacidos de peso
extremadamente bajo y en espera de la canalizacioacuten por enfermeriacutea de un cateacuteter venoso
epicutaacuteneo11
Agentes etioloacutegicos
Entre los agentes etioloacutegicos bacterianos que con mayor frecuencia causan infecciones
asociadas a cateacuteter y que a su vez son los maacutes estudiados se encuentran Gram
positivos como Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus
streptococcus ssp Enterococcus ssp Gram negativos como Escherichia coli Klebsiella
ssp Enterobacter serratia ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son
Candida albicans otras especies de Candidas12
5
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada
por una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
que afecta tambieacuten al depoacutesito de proteiacutenas seacutericas en la superficie del cateacuteter La
adhesioacuten variacutea seguacuten el material del cateacuteter siendo mayor en los de polivinilo o laacutetex
siliconado y menor en los cateacuteteres de poliuretano polietileno o tefloacuten A este primer
paso que es reversible le sigue un proceso de adherencia bacteriana mediante un
sistema de adhesinas a diferentes receptores como son el fibrinoacutegeno o la fibrina
Mientras el Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante
interaccioacuten hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada
por las proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor Una vez colonizado el cateacuteter los
microorganismos forman la llamada biocapa bacteriana mediante una sustancia
polimeacuterica (slime) que protege a las bacterias facilitando su adhesioacuten y disminuyendo
su sensibilidad a los antibioacuteticos favoreciendo la aparicioacuten de resistencias13
La prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos invasivos a los que son sometidos los
recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas infecciones bacterianas La duracioacuten de
la estancia hospitalaria es inversamente proporcional al peso del nacimiento y a la edad
gestacional factores relacionados directamente con infecciones nosocomiales A pesar de
todos los avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean siendo una
importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal14
Factores de riesgo
Los factores de riesgo de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes
dependen del sitio donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter
en los vasos umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso
canalizado15
6
Infeccioacuten en cateacuteter umbilical
El empleo de los cateacuteteres umbilicales en el tratamiento de nintildeos recieacuten nacidos es un
procedimiento comuacuten en el manejo que se hace en ellos en las unidades de cuidados
intensivos neonatales (UCIN) ante problemas que ponen en peligro su vida Los primeros en
usar los vasos umbilicales para alguno de los propoacutesitos mencionados fueron Diamond
(1947) y James(1959)16
A pesar de la aparente facilidad para colocar los cateacuteteres umbilicales el procedimiento no
estaacute exento de complicaciones las maacutes frecuentes son infecciones arritmias cardiacas
vasoespasmo trombosis y embolias vasculares taponamiento cardiaco enterocolitis
necrosante necrosis hepaacutetica e hipertensioacuten de la porta1718 Como factor predisponente se
menciona el tiempo de permanencia cateacuteter en el vaso canalizado por lo que se tiene el
cuidado de retirarlo tan pronto como se logre la estabilizacioacuten del nintildeo y sea posible contar
con otra viacutea es por la relativa facilidad de canalizar estos vasos para obtener en ellos
muestras de sangre para administrar soluciones y medicamentos y para hacer mediciones
vascular central
Se informa una mayor frecuencia de las complicaciones infecciosas que generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo19
Epidemiologia
El indicador de infeccioacuten relacionada con cateacuteter recomendado y utilizado en los principales
estudios de vigilancia de infeccioacuten nosocomial es la BRC Su definicioacuten puede variar
teniendo en cuenta aspectos epidemioloacutegicos que incluyen la bacteriemia primaria (origen
desconocido) o cliacutenicos (comprobacioacuten de la BRC con cultivos de microorganismos iguales
en el cateacuteter y en hemocultivos) La CDC y la JCAHO recomiendan que las tasas de BRC se
expresen en episodios de BRC1000 diacuteas de cateacuteter20
Aunque la incidencia de BRC ha disminuido en los uacuteltimos antildeos a unos 56 episodios1000
diacuteas de cateacuteter posiblemente por mejor disentildeo y calidad de los cateacuteteres el nuacutemero de
7
pacientes con BRC sigue siendo elevado Esto es debido al mayor uso de CVC su elevada
manipulacioacuten a los avances en los meacutetodos de diagnoacutestico microbioloacutegico y a la puesta en
marcha de estaacutendares de sistemas de vigilancia de infeccioacuten nosocomial21
Patogenia
Se considera que la patogeacutenesis de las infecciones relacionadas a cateacuteter es compleja y
multifactorial Las bacterias pueden llegar al torrente sanguiacuteneo por dos viacuteas principales
1048707 Pueden migrar desde la piel en la interfase del cateacuteter hasta colocarse en la superficie externa
de eacuteste
1048707 Pueden ingresar a la luz interna del cateacuteter a traveacutes del conector
La migracioacuten de microorganismos presentes en la piel en el sitio de insercioacuten del cateacuteter con
colonizacioacuten de la punta es la ruta mas comuacuten de infeccioacuten en cateacuteteres de corta
permanencia mientras que los cateacuteteres de larga permanencia la contaminacioacuten del tubo de
cateacuteter contribuye sustancialmente a su colonizacioacuten intraluminal22
Se han reconocido numerosas medidas de prevencioacuten efectivas en la reduccioacuten de las
infecciones pero la ejecucioacuten de estas medidas en la praacutectica parece ser el problema maacutes
relevante existiendo gran diferencia entre la mejor evidencia disponible y la praacutectica cliacutenica
Bases Cliacutenicas
Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter fue descrito por primera vez por Maki y cols
en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa de la punta del cateacuteter El criterio de
positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea de los pacientes con recuentos
inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten mientras que todos los casos que
cursaban con bacteriemia tuvieron recuentos superiores a 15 UFC y con frecuencia las
colonias fueron incontables La especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76 Este meacutetodo por
su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de microbiologiacutea y es la
teacutecnica de referencia23
8
En el estado o condicioacuten con relacioacuten a un cateacuteter ya colocado por la cual el cuerpo o parte
de este ha sido invadido por un agente patoacutegeno que en condiciones favorables se
multiplica y produce efectos dantildeinos Una vez que el microorganismo se ha instalado en el
cateacuteter hay un cierto nuacutemero de condiciones subsiguientes posibles ya sean localizadas o
sisteacutemicas La mejor manera de determinar si el cateacuteter es la causa de la infeccioacuten es hacer
un cultivo cuantitativo de cateacuteteres junto con un cultivo perifeacuterico de sangre Usando un
meacutetodo semicuantitativo para un cultivo de cateacuteter las siguientes definciones son aplicables
al diagnoacutestico de infeccioacuten
A Esteacuteril No hay crecimiento
B Contaminacioacuten lt 15 UFC de la punta del cateacuteter
C Localizada
1 Colonizacioacuten gt 15 UFC de la punta del cateacuteter El organismo se presenta sin siacutentomas
2 Infeccioacuten del lugar de insercioacuten gt 15 UFC en cultivos de la punta del cateacuteter
generalmente con siacutentomas externos de infeccioacuten localizada
D Sisteacutemica Bacteremia relacionada con el cateacuteter gt 15 UFC en cultivos de l apunta del
cateacuteter y en cultivos perifeacutericos de sangre positivos con el mismos organismo sin
identificarse otro sitio de infeccioacuten23
Agentes etioloacutegicos de infecciones en cateacuteter umbilical
La bacteremia es una invasioacuten del torrente sanguiacuteneo por bacterias La bacteremia se
desarrolla como resultado del dantildeo externo (la piel) o el interior (el tracto respiratorio el
tracto digestivo) de las barreras del cuerpo El agente causante de la bacteremia en un 71
es el Staphylococcus aureus Una entrada para la sepsis en pacientes con quemaduras
puede ser las heridas cateacuteteres de la vena las viacuteas aeacutereas los pulmones el tracto digestivo
etc24
Staphylococcus aureus9
S aureus forma parte de la familia Microccocaceae geacutenero Staphylococcus el cual contiene
maacutes de 30 especies diferentes Es un coco gram-positivo no moacutevil No forma esporas puede
encontrarse solo en pares en cadenas cortas o en racimos Es un anaerobio facultativo
pero crece mejor en condiciones aerobias25 El S aureus es un microorganismo positivo a la
coagulasa que se aiacutesla con mayor frecuencia en infecciones de piel26 Staphylococcus
aureus es la principal especie patoacutegena de su geacutenero y la causa comuacuten de diversas
infecciones de origen nosocomial y comunitario27
Los Staphylococcus producen muy diversos siacutendromes con manifestaciones cliacutenicas que
van desde una simple puacutestula hasta la sepsis y la muerte28
Escherichia coli y Klebsiella pneumoniae
Escherichia coli es un bacilo que reacciona negativamente a la tincioacuten de Gram es anaerobio
facultativo moacutevil por flagelos peritricos (que rodean su cuerpo) no forma esporas es capaz
de fermentar la glucosa y la lactosa Klebsiella es un geacutenero de bacterias no moacutetiles Gram-
negativas con una prominente caacutepsula de polisacaacuteridos Estas especies patoacutegenas estaacuten
significativamente asociadas a infecciones nosocomiales cuyas alternativas terapeacuteuticas
cada vez son menores por ser importantes fuentes de resistencia antibioacutetica transferible29
Estos patoacutegenos estaacuten asociados con infecciones en infantes prematuros y pacientes de las
unidades de cuidado intensivo son causantes de neumoniacuteas bacteriemias infecciones del
tracto urinario e infecciones de herida quiruacutergica30
10
Planteamiento de problema
iquestCuales son los agentes etioloacutegicos que presentan los pacientes neonatos con cateacuteter
umbilical durante su atencioacuten hospitalaria
11
Justificacioacuten
El uso temprano de cateacuteteres umbilicales es una alternativa segura para el acceso
vascular en el recieacuten nacido sus complicaciones son escasas y no asociadas a la
administracioacuten de medicamentos o al uso de la viacutea enteral
El cateacuteter umbilical en neonatos es muy uacutetil como liacutenea central para administrar
soluciones y medicamentos monitorizar la presioacuten arterial y tomar muestras de gases
arteriales
El siguiente trabajo descriptivo transversal se realiza con el objetivo de analizar las
complicaciones que se presentan con esta praacutectica haciendo especial eacutenfasis en la viacutea
oral concomitante
Es sumamente importante contar con un buen meacutetodo diagnoacutestico para poder enfrentar
las infecciones asociadas a cateacuteter por lo tanto la decisioacuten de retiro de un dispositivo
debe ser evaluada en forma responsable y criteriosa La sola presencia del cuadro
cliacutenico no determina su asociacioacuten con el dispositivo intravascular ya que habitualmente
los signos cliacutenicos son inespeciacuteficos es el diagnoacutestico microbioloacutegico el que
determinaraacute su retiro yo tratamiento seguacuten corresponda
12
Objetivos
Objetivo general
1- Conocer la frecuencia de la flora bacteriana del ombligo del neonato por uso de cateacuteter
durante su atencioacuten hospitalaria
Objetivos especiacuteficos
1- Identificar el geacutenero y especie de los agentes etioloacutegicos presentes en infecciones del
ombligo por uso de cateacuteter umbilical en neonatos durante la atencioacuten hospitalaria
2- Proporcionar informacioacuten al servicio de Vigilancia y Control de Enfermedades Hospitalarias
13
Hipoacutetesis
HI
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
Ho
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical no adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
14
MATERIAL Y METODOS
Lugar de estudio y ubicacioacuten
La investigacioacuten se realizoacute en Veracruz Veracruz Meacutexico que se encuentra ubicado en la
zona centro del estado
Ensayo cliacutenico y tamantildeo de muestra
Para calcular el tamantildeo de la muestra y conformar el grupo de pacientes neonatos con
cateacuteter umbilical se utilizo un intervalo de confianza de 95 De tal manera el tamantildeo de
muestra estimado fue de 80 pacientes pero se eliminaron 30 debido a bajas del Hospital y
por defuncioacuten debido a padecimientos asociados al nacimiento prematuro del neonato
Criterios de inclusioacuten
Se desarrolloacute un estudio transversal descriptivo para identificar pacientes neonatos que
adquirieron alguna infeccioacuten de forma natural y conocer su prevalencia Soacutelo fueron
considerados pacientes neonatos nacidos en el Hospital de Alta Especialidad de Veracruz
del aacuterea de Pediatriacutea con sospecha de infeccioacuten bacteriana que fueran mayores de una
semana de vida y no mayores a 1 antildeo asiacute como tambieacuten que los cateacuteteres umbilicales
fueran retirados en condiciones higieacutenicas apropiadas en base a lo descrito en la SS y sin
antecedentes de alguna infeccioacuten previa Se lograron reunir un grupo de 50 pacientes que
reunioacute las caracteriacutesticas oacuteptimas para este estudio
Criterios de exclusioacuten
15
No se tomaron en consideracioacuten para este estudio los cultivos de cateacuteteres umbilicales que
no fueron retirados en condiciones apropiadas y los cateacuteteres umbilicales de neonatos que
fueron transportados en un medio de cultivo inadecuado Los Pacientes neonatos que
autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una patologiacutea traumaacutetica asociada y
los pacientes neonatos que autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una baja
por defuncioacuten fueron totalmente descartados para fines de esta investigacioacuten
Caracteriacutesticas de la unidad de pediatriacutea
La unidad de pediatriacutea del Hospital Regional de Alta Especialidad estaacute dividida en diferentes
aeacutereas de las cuales para fines de esta investigacioacuten se analizaron pacientes neonatos de
UCIN UCIM y cunero patoloacutegico Debido a que existen pacientes en el aacuterea de pediatriacutea que
ya no cumplen con el reacutegimen de edad estipulado para este estudio
Muestreo para la seleccioacuten de neonatos
Para la seleccioacuten de los neonatos y para reunir el tamantildeo de la muestra necesario para el
estudio se analizaron cateacuteteres de todos los neonatos con sospecha de infeccioacuten bacteriana
a partir de un mes de edad con el uso de medios de Stuart para transportar el cateacuteter Para
este muestreo no se tomoacute en cuenta el sexo Cada tubo de Stuart se identificoacute con el nombre
completo del paciente el servicio de donde se tomo el tipo de muestra fecha y un nuacutemero
de folio con continuidad Las muestras se conservaron a temperatura ambiente durante la
transportacioacuten a su anaacutelisis y luego fueron remitidas al laboratorio para su anaacutelisis
microbioloacutegico
Teacutecnicas de laboratorio
Para el estudio microbioloacutegico del cateacuteter umbilical del neonato fue utilizada la teacutecnica
semicuantitativa de maki Esta teacutecnica ha sido aceptada por la mayoriacutea de los laboratorios
de microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia
16
Proceso de Investigacioacuten
Se trabajo con pacientes nacidos en el Hospital Regional De Alta Especialidad De Veracruz
los cuales tuvieron participacioacuten en esta investigacioacuten hasta la identificacioacuten del agente
etioloacutegico en el cateacuteter umbilical
Se realizo el retiro del cateacuteter umbilical del neonato con una teacutecnica aseacuteptica utilizando
material esteacuteril se desinfecto la piel con alcohol al 10 y se dejo secar con pinza se retiro el
cateacuteter cuidando de no rosar la piel se corto de 3 a 5 cm de la porcioacuten distal y se coloco en
el medio de transporte Stuart para remitirlo al laboratorio de microbiologiacutea para su anaacutelisis
bacterioloacutegico
En el laboratorio se inoculo el cateacuteter umbilical en el agar base sangre por la teacutecnica
semicuantitativa de maki rotando el cateacuteter con ayuda del asa bacterioloacutegica 5 veces Se
incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera O2 Se prosiguioacute con la interpretacioacuten de la morfologiacutea
colonial se resembraron colonias en los medios Agar sal y manitol Agar Mac Conkey y Agar
Biggy para su diferenciacioacuten se Incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera de O2 continuando con
la Interpretacioacuten de la morfologiacutea colonial
Se realizaron tinciones gram para diferenciar Gram positivas de Gram negativas para Gram
positivas como para Gam negativas se procedioacute a la preparacioacuten de paneles Se Incubaron
los paneles Gram en la estufa del Sensititre a 37degC por 24 Hrs en atmosfera de O2 Se
continuacuteo con la lectura de paneles Gram en autoreader Sensititre obteniendo asiacute el
resultado bacteriano en cuanto a geacutenero y especie
17
Material empleado
Paneles Combo Sensititre
Laminas adhesivas
Agua desmineralizada Sensititre
Tira de substrato para prueba de Gram positivos
Aceite mineral
Reactivos para tincioacuten de Gram
Cabezales de dosificacioacuten Sensititre
Estaacutendar de turbidez McFarland 05
Puntas desechables para pipeta
Tubos de ensaye 13 x 100
Tubos de ensaye 10 x 75
Pipetas Automaacuteticas de 5 ųl
Gradilla
Quemador bunsen
Asa bacterioloacutegica
Cajas petri
Goteros
Jaboacuten de manos
Detergente
Toalla
Franela
Alcohol
Cubrebocas
Guantes desechables
Recipiente para material contaminado
Rollo de papel adsorbente
Cloro
Gasas
Bolsas de plaacutestico
Cerillos
Porta objetos
Cubre objetos 18
Papel estraza
Computadora
Impresora
Hojas tamantildeo carta blancas
Medios de cultivo
Agar base sangre
Agar Sal de manitol
Agar Mac Conkey
Biggy
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes ajustado a Sensititre
Medio de transporte Stuart
Equipos de Laboratorio
1 Estufa de cultivo
2 Microscopio
3 Vortex
4 Auto inoculador
5 SISTEMA SENSITITRE
a Autoreader Sensititre
b Estufa Sensititre
Fundamentos
19
Uno de los sistemas maacutes importantes para la identificacioacuten de microorganismos es observar
su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio El material
alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de
los microorganismos es el Cultivo
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son temperatura grado de humedad y presioacuten de oxiacutegeno
adecuadas asiacute como un grado correcto de acidez o alcalinidad Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante
Estos Medios fueron utilizados en esta investigacioacuten para fines de identificacioacuten de
microorganismos bacterianos Cada medio tiene una caracteriacutestica importante para ser
empleado en este proyecto
A continuacioacuten se describen
Medio de Transporte Stuart
Medio semisoacutelido no nutritivo Contiene tioglicolato de sodio el cual provee un ambiente
reducido y es uacutetil para suprimir cambios oxidativos en el medio de transporte y azul de
metileno que es el indicador de oxido reduccioacuten De esta manera se favorece la viabilidad de
los microorganismos durante su enviacuteo al laboratorio
Agar sangre
La infusioacuten de muacutesculo de corazoacuten y la peptona otorgan al medio un alto valor nutritivo que
permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos auacuten de aquellos
nutricionalmente exigentes El cloruro de sodio mantiene el balance osmoacutetico
El agregado de sangre al medio de cultivo en concentracioacuten final de 5-10 aporta
nutrientes para el crecimiento bacteriano y permite detectar hemoacutelisis
Agar Mac Conkey
20
En el medio de cultivo las peptonas aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo
bacteriano la lactosa es el hidrato de carbono fermentable y la mezcla de sales biliares y el
cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora
Gram positiva Por fermentacioacuten de la lactosa disminuye el pH alrededor de la colonia Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro) la absorcioacuten en las colonias y la
precipitacioacuten de las sales biliares Los microorganismos no fermentadores de lactosa
producen colonias incoloras
Agar sal y manitol
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracioacuten salina Los
estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante Los estafilococos coagulasa negativos
presentan colonias rodeadas de una zona roja o puacuterpura En el medio de cultivo el extracto
de carne y la pluripeptona constituyen la fuente de carbono nitroacutegeno vitaminas y
minerales el manitol es el hidrato de carbono fermentable el cloruro de sodio (que se
encuentra en alta concentracioacuten) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora
acompantildeante y el rojo fenol es el indicador de pH Las bacterias que crecen en un medio
con alta concentracioacuten de sal y fermentan el manitol producen aacutecidos con lo que se modifica
el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo Los estafilococos crecen
en altas concentraciones de sal y pueden o no fermentar el manitol Los estafilococos
coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de
una zona del mismo color Los estafilococos que no fermentan el manitol se visualizan como
colonias rojas rodeadas de una zona del mismo color o puacuterpura
Agar Biggy
El Agar Biggy es una modificacioacuten de la foacutermula desarrollada por Nickerson La
diferenciacioacuten estaacute basada en la morfologiacutea colonial y la pigmentacioacuten tiacutepica que se presenta
en este medio La reduccioacuten del sulfito de bismuto se manifiesta en una pigmentacioacuten de la
colonia que en ocasiones difunde en el medio En este medio el extracto de levadura
proporciona vitaminas y aminoaacutecidos La glicina es utilizada para estimular el crecimiento La
dextrosa es la fuente de carbono El indicador sulfito de bismuto actuacutea tambieacuten como un
inhibidor del desarrollo bacteriano El agar es adicionado como agente solidificante
21
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes
El caldo Mueller-Hinton se recomienda como el medio preferido para pruebas de
susceptibilidad de organismos comuacutenmente aislados aeroacutebicos o facultativos de raacutepido
crecimiento El caldo debe tener el contenido apropiado de cationes (Ca++ y Mg++) El pH
debe estar entre 72 y 74 a temperatura ambiente (25ordm C)
22
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram positivas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar glucosa glicerol maltosa manitol B-metilglucoacutesido
ramnosa sacarosa sorbitol trehalosa La produccioacuten de acido reduce la fluorescencia de un
fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substrato fluorogeacutenico el substrato enzimaacutetico esta vinculado a un fluoroacuteforo
que suprime la fluorescencia La ruptura enzimaacutetica de la unioacuten libera el fluoroacuteforo con
capacidad de fluorescencia
3- Pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea y la arginina (requieren la adicioacuten de aceite
mineral esteacuteril) incrementa el pH y la fluorescencia La esculina es una moleacutecula fluorescente
que al hidrolizarse se descompone en productos no fluorescentes
23
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram negativas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar Arabinosa arabitol celobiosa fructosa inositol
maltosa manitol rafinosa sacarosa sorbitol trehalosa xilosa La produccioacuten de acido
reduce la fluorescencia de un fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substratos fluorogeacutenico Cada substrato enzimaacutetico esta vinculado a un
fluoroacuteforo que suprime la fluorescencia La ruptura particioacuten enzimaacutetico de la unioacuten libera el
fluoroacuteforo con capacidad de fluorescencia
3- Pruebas de utilizacioacuten de carbono Agmatina arginina citrato lisina malonato ornitina y
piruvato La descomposicioacuten del substrato provoca un aumento de pH y la fluorescencia
4- Otras pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea incrementa el pH y la fluorescencia La
esculina es una moleacutecula fluorescente que al hidrolizarse se descompone en productos no
fluorescentes Desaminacioacuten del triptofano La formacioacuten de un color oscuro suprime la sentildeal
fluorescente
24
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
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29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
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productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
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30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
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(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
- Silicona
- Tefloacuten6
Los CVC de Silicoacuten tienen un menor porcentaje de colonizacioacuten 38 en comparacioacuten con
los de poliuretano con 627
RETIRO
Los cateacuteter se retiran de acuerdo ha
CATEacuteTER VENOSO UMBILICAL
Exanguineotransfusioacuten y recambio parcial cuando haya terminado el procedimiento 30
a 90 minutos
Inmediatamente posterior al cese de la indicacioacuten
CATEacuteTER ARTERIAL UMBILICAL
Recieacuten nacido con requerimientos bajo 40 y puncioacuten arterial sin problemas
Retiro de ventilacioacuten mecaacutenica
Evidencia cliacutenica o confirmacioacuten bacterioloacutegica de infeccioacuten del cateacuteter
Cateacuteter arterial ubicado en zona peligrosa de acuerdo a Rx toracoabdominal4
Las Infecciones del Torrente Sanguiacuteneo son una de las complicaciones mas graves que
puede ocurrir en el hospital si bien su incidencia no es tan elevada su alta LETALIDAD
determina la prioridad que se debe tener en las medidas tendientes a su prevencioacuten
DEFINICION DE LOS TIPOS DE CATETERIZACION
- CATETERIZACIOacuteN VASCULAR es la canalizacioacuten de un vaso sanguiacuteneo venoso o
arterial realizada por medio de un cateacuteter a traveacutes de una puncioacuten o incisioacuten
- CATETERIZACIOacuteN TEMPORAL es aquella cateterizacioacuten que tiene una duracioacuten
miacutenima ya que se introduce y se retira el cateacuteter en el mismo procedimiento
3
- CATETERIZACIOacuteN PERMANENTE es aquella cateterizacioacuten en que se introduce el
cateacuteter en el vaso por un tiempo mayor que la duracioacuten del procedimiento
CONCEPTO DE SINTOMAS DE UN NEONATO CON CATETER INFECTADO
- BACTEREMIA POR CATETER Aislamiento de bacterias viables en la sangre con
cultivo de cateacuteter positivo sin que se identifique otro foco originario
Primaria es aquella en que no existe otro foco de infeccioacuten Se consideran
asociadas a los equipos de infusioacuten endovenosa
Secundaria es aquella en que existe foco infeccioso en otro sitio (pulmonar
urinario piel gastrointestinal) por el mismo microorganismo
- FLEBITIS es la inflamacioacuten de la iacutentima de la vena puede evolucionar de compromiso
leve a severo con tromboflebitis emboliacutea pulmonar y bacteremia Este compromiso se
inicia con sensibilidad local ligero dolor eritema calor local ligera induracioacuten y cordoacuten
venoso palpable
- INFILTRACIOacuteN es la extravasacioacuten de fluidos endovenosos al espacio intersticial a
causa del desplazamiento del cateacuteter o la perforacioacuten de la pared venosa La
infiltracioacuten de soluciones aacutecidas alcalina o hipertoacutenica puede producir necrosis
hiacutestica4
- COLONIZACION DE CATETER se define por un cultivo positivo de punta de cateacuteter
con 15 UFC (Unidad Formadora de Colonias) utilizando la teacutecnica descrita por maki
- CONTAMINACION DE CATETER Presencia de un cultivo semicuantitativo o
cuantitativo con un nuacutemero de UFCml por debajo del nivel considerado como positivo
seguacuten la teacutecnica considerada8
4
- SEPSIS POR CATETER Traduce la respuesta inflamatoria del paciente a la
colonizacioacuten de un cateacuteter Esta puede ser de tipo local o sisteacutemica 9
Cateacuteter umbilical en neonatos
El uso de cateacuteteres umbilicales se utilizan como liacuteneas centrales para administrar
soluciones y medicamentos monitorizar la presioacuten arterial y tomar muestras de gases
arteriales en la Unidad de Recieacuten Nacidos asiacute como las complicaciones que se presentan
con esta praacutectica haciendo especial eacutenfasis en la viacutea oral concomitante el cateterismo de
los vasos umbilicales es un procedimiento relativamente sencillo raacutepido y de uso comuacuten
en las unidades de cuidado intensivo neonatal10
Los vasos umbilicales son la viacutea de eleccioacuten para el neonato criacuteticamente enfermo La
canalizacioacuten de los cateacuteteres umbilicales es realizada por el facultativo
El cateterismo de la arteria umbilical estaacute indicado cuando se requieren determinaciones
frecuentes de los gases en sangre arterial este procedimiento tambieacuten se utiliza para la
monitorizacioacuten continua de la presioacuten arterial y para realizar exanguinotransfusioacuten
El cateterismo de la vena umbilical estaacute indicado para la monitorizacioacuten de la presioacuten venosa
central acceso inmediato para liacutequidos intravenosos y faacutermacos de emergencia
exanguinotransfusioacuten acceso venoso de largo plazo en recieacuten nacidos de peso
extremadamente bajo y en espera de la canalizacioacuten por enfermeriacutea de un cateacuteter venoso
epicutaacuteneo11
Agentes etioloacutegicos
Entre los agentes etioloacutegicos bacterianos que con mayor frecuencia causan infecciones
asociadas a cateacuteter y que a su vez son los maacutes estudiados se encuentran Gram
positivos como Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus
streptococcus ssp Enterococcus ssp Gram negativos como Escherichia coli Klebsiella
ssp Enterobacter serratia ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son
Candida albicans otras especies de Candidas12
5
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada
por una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
que afecta tambieacuten al depoacutesito de proteiacutenas seacutericas en la superficie del cateacuteter La
adhesioacuten variacutea seguacuten el material del cateacuteter siendo mayor en los de polivinilo o laacutetex
siliconado y menor en los cateacuteteres de poliuretano polietileno o tefloacuten A este primer
paso que es reversible le sigue un proceso de adherencia bacteriana mediante un
sistema de adhesinas a diferentes receptores como son el fibrinoacutegeno o la fibrina
Mientras el Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante
interaccioacuten hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada
por las proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor Una vez colonizado el cateacuteter los
microorganismos forman la llamada biocapa bacteriana mediante una sustancia
polimeacuterica (slime) que protege a las bacterias facilitando su adhesioacuten y disminuyendo
su sensibilidad a los antibioacuteticos favoreciendo la aparicioacuten de resistencias13
La prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos invasivos a los que son sometidos los
recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas infecciones bacterianas La duracioacuten de
la estancia hospitalaria es inversamente proporcional al peso del nacimiento y a la edad
gestacional factores relacionados directamente con infecciones nosocomiales A pesar de
todos los avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean siendo una
importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal14
Factores de riesgo
Los factores de riesgo de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes
dependen del sitio donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter
en los vasos umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso
canalizado15
6
Infeccioacuten en cateacuteter umbilical
El empleo de los cateacuteteres umbilicales en el tratamiento de nintildeos recieacuten nacidos es un
procedimiento comuacuten en el manejo que se hace en ellos en las unidades de cuidados
intensivos neonatales (UCIN) ante problemas que ponen en peligro su vida Los primeros en
usar los vasos umbilicales para alguno de los propoacutesitos mencionados fueron Diamond
(1947) y James(1959)16
A pesar de la aparente facilidad para colocar los cateacuteteres umbilicales el procedimiento no
estaacute exento de complicaciones las maacutes frecuentes son infecciones arritmias cardiacas
vasoespasmo trombosis y embolias vasculares taponamiento cardiaco enterocolitis
necrosante necrosis hepaacutetica e hipertensioacuten de la porta1718 Como factor predisponente se
menciona el tiempo de permanencia cateacuteter en el vaso canalizado por lo que se tiene el
cuidado de retirarlo tan pronto como se logre la estabilizacioacuten del nintildeo y sea posible contar
con otra viacutea es por la relativa facilidad de canalizar estos vasos para obtener en ellos
muestras de sangre para administrar soluciones y medicamentos y para hacer mediciones
vascular central
Se informa una mayor frecuencia de las complicaciones infecciosas que generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo19
Epidemiologia
El indicador de infeccioacuten relacionada con cateacuteter recomendado y utilizado en los principales
estudios de vigilancia de infeccioacuten nosocomial es la BRC Su definicioacuten puede variar
teniendo en cuenta aspectos epidemioloacutegicos que incluyen la bacteriemia primaria (origen
desconocido) o cliacutenicos (comprobacioacuten de la BRC con cultivos de microorganismos iguales
en el cateacuteter y en hemocultivos) La CDC y la JCAHO recomiendan que las tasas de BRC se
expresen en episodios de BRC1000 diacuteas de cateacuteter20
Aunque la incidencia de BRC ha disminuido en los uacuteltimos antildeos a unos 56 episodios1000
diacuteas de cateacuteter posiblemente por mejor disentildeo y calidad de los cateacuteteres el nuacutemero de
7
pacientes con BRC sigue siendo elevado Esto es debido al mayor uso de CVC su elevada
manipulacioacuten a los avances en los meacutetodos de diagnoacutestico microbioloacutegico y a la puesta en
marcha de estaacutendares de sistemas de vigilancia de infeccioacuten nosocomial21
Patogenia
Se considera que la patogeacutenesis de las infecciones relacionadas a cateacuteter es compleja y
multifactorial Las bacterias pueden llegar al torrente sanguiacuteneo por dos viacuteas principales
1048707 Pueden migrar desde la piel en la interfase del cateacuteter hasta colocarse en la superficie externa
de eacuteste
1048707 Pueden ingresar a la luz interna del cateacuteter a traveacutes del conector
La migracioacuten de microorganismos presentes en la piel en el sitio de insercioacuten del cateacuteter con
colonizacioacuten de la punta es la ruta mas comuacuten de infeccioacuten en cateacuteteres de corta
permanencia mientras que los cateacuteteres de larga permanencia la contaminacioacuten del tubo de
cateacuteter contribuye sustancialmente a su colonizacioacuten intraluminal22
Se han reconocido numerosas medidas de prevencioacuten efectivas en la reduccioacuten de las
infecciones pero la ejecucioacuten de estas medidas en la praacutectica parece ser el problema maacutes
relevante existiendo gran diferencia entre la mejor evidencia disponible y la praacutectica cliacutenica
Bases Cliacutenicas
Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter fue descrito por primera vez por Maki y cols
en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa de la punta del cateacuteter El criterio de
positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea de los pacientes con recuentos
inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten mientras que todos los casos que
cursaban con bacteriemia tuvieron recuentos superiores a 15 UFC y con frecuencia las
colonias fueron incontables La especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76 Este meacutetodo por
su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de microbiologiacutea y es la
teacutecnica de referencia23
8
En el estado o condicioacuten con relacioacuten a un cateacuteter ya colocado por la cual el cuerpo o parte
de este ha sido invadido por un agente patoacutegeno que en condiciones favorables se
multiplica y produce efectos dantildeinos Una vez que el microorganismo se ha instalado en el
cateacuteter hay un cierto nuacutemero de condiciones subsiguientes posibles ya sean localizadas o
sisteacutemicas La mejor manera de determinar si el cateacuteter es la causa de la infeccioacuten es hacer
un cultivo cuantitativo de cateacuteteres junto con un cultivo perifeacuterico de sangre Usando un
meacutetodo semicuantitativo para un cultivo de cateacuteter las siguientes definciones son aplicables
al diagnoacutestico de infeccioacuten
A Esteacuteril No hay crecimiento
B Contaminacioacuten lt 15 UFC de la punta del cateacuteter
C Localizada
1 Colonizacioacuten gt 15 UFC de la punta del cateacuteter El organismo se presenta sin siacutentomas
2 Infeccioacuten del lugar de insercioacuten gt 15 UFC en cultivos de la punta del cateacuteter
generalmente con siacutentomas externos de infeccioacuten localizada
D Sisteacutemica Bacteremia relacionada con el cateacuteter gt 15 UFC en cultivos de l apunta del
cateacuteter y en cultivos perifeacutericos de sangre positivos con el mismos organismo sin
identificarse otro sitio de infeccioacuten23
Agentes etioloacutegicos de infecciones en cateacuteter umbilical
La bacteremia es una invasioacuten del torrente sanguiacuteneo por bacterias La bacteremia se
desarrolla como resultado del dantildeo externo (la piel) o el interior (el tracto respiratorio el
tracto digestivo) de las barreras del cuerpo El agente causante de la bacteremia en un 71
es el Staphylococcus aureus Una entrada para la sepsis en pacientes con quemaduras
puede ser las heridas cateacuteteres de la vena las viacuteas aeacutereas los pulmones el tracto digestivo
etc24
Staphylococcus aureus9
S aureus forma parte de la familia Microccocaceae geacutenero Staphylococcus el cual contiene
maacutes de 30 especies diferentes Es un coco gram-positivo no moacutevil No forma esporas puede
encontrarse solo en pares en cadenas cortas o en racimos Es un anaerobio facultativo
pero crece mejor en condiciones aerobias25 El S aureus es un microorganismo positivo a la
coagulasa que se aiacutesla con mayor frecuencia en infecciones de piel26 Staphylococcus
aureus es la principal especie patoacutegena de su geacutenero y la causa comuacuten de diversas
infecciones de origen nosocomial y comunitario27
Los Staphylococcus producen muy diversos siacutendromes con manifestaciones cliacutenicas que
van desde una simple puacutestula hasta la sepsis y la muerte28
Escherichia coli y Klebsiella pneumoniae
Escherichia coli es un bacilo que reacciona negativamente a la tincioacuten de Gram es anaerobio
facultativo moacutevil por flagelos peritricos (que rodean su cuerpo) no forma esporas es capaz
de fermentar la glucosa y la lactosa Klebsiella es un geacutenero de bacterias no moacutetiles Gram-
negativas con una prominente caacutepsula de polisacaacuteridos Estas especies patoacutegenas estaacuten
significativamente asociadas a infecciones nosocomiales cuyas alternativas terapeacuteuticas
cada vez son menores por ser importantes fuentes de resistencia antibioacutetica transferible29
Estos patoacutegenos estaacuten asociados con infecciones en infantes prematuros y pacientes de las
unidades de cuidado intensivo son causantes de neumoniacuteas bacteriemias infecciones del
tracto urinario e infecciones de herida quiruacutergica30
10
Planteamiento de problema
iquestCuales son los agentes etioloacutegicos que presentan los pacientes neonatos con cateacuteter
umbilical durante su atencioacuten hospitalaria
11
Justificacioacuten
El uso temprano de cateacuteteres umbilicales es una alternativa segura para el acceso
vascular en el recieacuten nacido sus complicaciones son escasas y no asociadas a la
administracioacuten de medicamentos o al uso de la viacutea enteral
El cateacuteter umbilical en neonatos es muy uacutetil como liacutenea central para administrar
soluciones y medicamentos monitorizar la presioacuten arterial y tomar muestras de gases
arteriales
El siguiente trabajo descriptivo transversal se realiza con el objetivo de analizar las
complicaciones que se presentan con esta praacutectica haciendo especial eacutenfasis en la viacutea
oral concomitante
Es sumamente importante contar con un buen meacutetodo diagnoacutestico para poder enfrentar
las infecciones asociadas a cateacuteter por lo tanto la decisioacuten de retiro de un dispositivo
debe ser evaluada en forma responsable y criteriosa La sola presencia del cuadro
cliacutenico no determina su asociacioacuten con el dispositivo intravascular ya que habitualmente
los signos cliacutenicos son inespeciacuteficos es el diagnoacutestico microbioloacutegico el que
determinaraacute su retiro yo tratamiento seguacuten corresponda
12
Objetivos
Objetivo general
1- Conocer la frecuencia de la flora bacteriana del ombligo del neonato por uso de cateacuteter
durante su atencioacuten hospitalaria
Objetivos especiacuteficos
1- Identificar el geacutenero y especie de los agentes etioloacutegicos presentes en infecciones del
ombligo por uso de cateacuteter umbilical en neonatos durante la atencioacuten hospitalaria
2- Proporcionar informacioacuten al servicio de Vigilancia y Control de Enfermedades Hospitalarias
13
Hipoacutetesis
HI
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
Ho
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical no adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
14
MATERIAL Y METODOS
Lugar de estudio y ubicacioacuten
La investigacioacuten se realizoacute en Veracruz Veracruz Meacutexico que se encuentra ubicado en la
zona centro del estado
Ensayo cliacutenico y tamantildeo de muestra
Para calcular el tamantildeo de la muestra y conformar el grupo de pacientes neonatos con
cateacuteter umbilical se utilizo un intervalo de confianza de 95 De tal manera el tamantildeo de
muestra estimado fue de 80 pacientes pero se eliminaron 30 debido a bajas del Hospital y
por defuncioacuten debido a padecimientos asociados al nacimiento prematuro del neonato
Criterios de inclusioacuten
Se desarrolloacute un estudio transversal descriptivo para identificar pacientes neonatos que
adquirieron alguna infeccioacuten de forma natural y conocer su prevalencia Soacutelo fueron
considerados pacientes neonatos nacidos en el Hospital de Alta Especialidad de Veracruz
del aacuterea de Pediatriacutea con sospecha de infeccioacuten bacteriana que fueran mayores de una
semana de vida y no mayores a 1 antildeo asiacute como tambieacuten que los cateacuteteres umbilicales
fueran retirados en condiciones higieacutenicas apropiadas en base a lo descrito en la SS y sin
antecedentes de alguna infeccioacuten previa Se lograron reunir un grupo de 50 pacientes que
reunioacute las caracteriacutesticas oacuteptimas para este estudio
Criterios de exclusioacuten
15
No se tomaron en consideracioacuten para este estudio los cultivos de cateacuteteres umbilicales que
no fueron retirados en condiciones apropiadas y los cateacuteteres umbilicales de neonatos que
fueron transportados en un medio de cultivo inadecuado Los Pacientes neonatos que
autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una patologiacutea traumaacutetica asociada y
los pacientes neonatos que autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una baja
por defuncioacuten fueron totalmente descartados para fines de esta investigacioacuten
Caracteriacutesticas de la unidad de pediatriacutea
La unidad de pediatriacutea del Hospital Regional de Alta Especialidad estaacute dividida en diferentes
aeacutereas de las cuales para fines de esta investigacioacuten se analizaron pacientes neonatos de
UCIN UCIM y cunero patoloacutegico Debido a que existen pacientes en el aacuterea de pediatriacutea que
ya no cumplen con el reacutegimen de edad estipulado para este estudio
Muestreo para la seleccioacuten de neonatos
Para la seleccioacuten de los neonatos y para reunir el tamantildeo de la muestra necesario para el
estudio se analizaron cateacuteteres de todos los neonatos con sospecha de infeccioacuten bacteriana
a partir de un mes de edad con el uso de medios de Stuart para transportar el cateacuteter Para
este muestreo no se tomoacute en cuenta el sexo Cada tubo de Stuart se identificoacute con el nombre
completo del paciente el servicio de donde se tomo el tipo de muestra fecha y un nuacutemero
de folio con continuidad Las muestras se conservaron a temperatura ambiente durante la
transportacioacuten a su anaacutelisis y luego fueron remitidas al laboratorio para su anaacutelisis
microbioloacutegico
Teacutecnicas de laboratorio
Para el estudio microbioloacutegico del cateacuteter umbilical del neonato fue utilizada la teacutecnica
semicuantitativa de maki Esta teacutecnica ha sido aceptada por la mayoriacutea de los laboratorios
de microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia
16
Proceso de Investigacioacuten
Se trabajo con pacientes nacidos en el Hospital Regional De Alta Especialidad De Veracruz
los cuales tuvieron participacioacuten en esta investigacioacuten hasta la identificacioacuten del agente
etioloacutegico en el cateacuteter umbilical
Se realizo el retiro del cateacuteter umbilical del neonato con una teacutecnica aseacuteptica utilizando
material esteacuteril se desinfecto la piel con alcohol al 10 y se dejo secar con pinza se retiro el
cateacuteter cuidando de no rosar la piel se corto de 3 a 5 cm de la porcioacuten distal y se coloco en
el medio de transporte Stuart para remitirlo al laboratorio de microbiologiacutea para su anaacutelisis
bacterioloacutegico
En el laboratorio se inoculo el cateacuteter umbilical en el agar base sangre por la teacutecnica
semicuantitativa de maki rotando el cateacuteter con ayuda del asa bacterioloacutegica 5 veces Se
incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera O2 Se prosiguioacute con la interpretacioacuten de la morfologiacutea
colonial se resembraron colonias en los medios Agar sal y manitol Agar Mac Conkey y Agar
Biggy para su diferenciacioacuten se Incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera de O2 continuando con
la Interpretacioacuten de la morfologiacutea colonial
Se realizaron tinciones gram para diferenciar Gram positivas de Gram negativas para Gram
positivas como para Gam negativas se procedioacute a la preparacioacuten de paneles Se Incubaron
los paneles Gram en la estufa del Sensititre a 37degC por 24 Hrs en atmosfera de O2 Se
continuacuteo con la lectura de paneles Gram en autoreader Sensititre obteniendo asiacute el
resultado bacteriano en cuanto a geacutenero y especie
17
Material empleado
Paneles Combo Sensititre
Laminas adhesivas
Agua desmineralizada Sensititre
Tira de substrato para prueba de Gram positivos
Aceite mineral
Reactivos para tincioacuten de Gram
Cabezales de dosificacioacuten Sensititre
Estaacutendar de turbidez McFarland 05
Puntas desechables para pipeta
Tubos de ensaye 13 x 100
Tubos de ensaye 10 x 75
Pipetas Automaacuteticas de 5 ųl
Gradilla
Quemador bunsen
Asa bacterioloacutegica
Cajas petri
Goteros
Jaboacuten de manos
Detergente
Toalla
Franela
Alcohol
Cubrebocas
Guantes desechables
Recipiente para material contaminado
Rollo de papel adsorbente
Cloro
Gasas
Bolsas de plaacutestico
Cerillos
Porta objetos
Cubre objetos 18
Papel estraza
Computadora
Impresora
Hojas tamantildeo carta blancas
Medios de cultivo
Agar base sangre
Agar Sal de manitol
Agar Mac Conkey
Biggy
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes ajustado a Sensititre
Medio de transporte Stuart
Equipos de Laboratorio
1 Estufa de cultivo
2 Microscopio
3 Vortex
4 Auto inoculador
5 SISTEMA SENSITITRE
a Autoreader Sensititre
b Estufa Sensititre
Fundamentos
19
Uno de los sistemas maacutes importantes para la identificacioacuten de microorganismos es observar
su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio El material
alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de
los microorganismos es el Cultivo
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son temperatura grado de humedad y presioacuten de oxiacutegeno
adecuadas asiacute como un grado correcto de acidez o alcalinidad Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante
Estos Medios fueron utilizados en esta investigacioacuten para fines de identificacioacuten de
microorganismos bacterianos Cada medio tiene una caracteriacutestica importante para ser
empleado en este proyecto
A continuacioacuten se describen
Medio de Transporte Stuart
Medio semisoacutelido no nutritivo Contiene tioglicolato de sodio el cual provee un ambiente
reducido y es uacutetil para suprimir cambios oxidativos en el medio de transporte y azul de
metileno que es el indicador de oxido reduccioacuten De esta manera se favorece la viabilidad de
los microorganismos durante su enviacuteo al laboratorio
Agar sangre
La infusioacuten de muacutesculo de corazoacuten y la peptona otorgan al medio un alto valor nutritivo que
permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos auacuten de aquellos
nutricionalmente exigentes El cloruro de sodio mantiene el balance osmoacutetico
El agregado de sangre al medio de cultivo en concentracioacuten final de 5-10 aporta
nutrientes para el crecimiento bacteriano y permite detectar hemoacutelisis
Agar Mac Conkey
20
En el medio de cultivo las peptonas aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo
bacteriano la lactosa es el hidrato de carbono fermentable y la mezcla de sales biliares y el
cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora
Gram positiva Por fermentacioacuten de la lactosa disminuye el pH alrededor de la colonia Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro) la absorcioacuten en las colonias y la
precipitacioacuten de las sales biliares Los microorganismos no fermentadores de lactosa
producen colonias incoloras
Agar sal y manitol
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracioacuten salina Los
estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante Los estafilococos coagulasa negativos
presentan colonias rodeadas de una zona roja o puacuterpura En el medio de cultivo el extracto
de carne y la pluripeptona constituyen la fuente de carbono nitroacutegeno vitaminas y
minerales el manitol es el hidrato de carbono fermentable el cloruro de sodio (que se
encuentra en alta concentracioacuten) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora
acompantildeante y el rojo fenol es el indicador de pH Las bacterias que crecen en un medio
con alta concentracioacuten de sal y fermentan el manitol producen aacutecidos con lo que se modifica
el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo Los estafilococos crecen
en altas concentraciones de sal y pueden o no fermentar el manitol Los estafilococos
coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de
una zona del mismo color Los estafilococos que no fermentan el manitol se visualizan como
colonias rojas rodeadas de una zona del mismo color o puacuterpura
Agar Biggy
El Agar Biggy es una modificacioacuten de la foacutermula desarrollada por Nickerson La
diferenciacioacuten estaacute basada en la morfologiacutea colonial y la pigmentacioacuten tiacutepica que se presenta
en este medio La reduccioacuten del sulfito de bismuto se manifiesta en una pigmentacioacuten de la
colonia que en ocasiones difunde en el medio En este medio el extracto de levadura
proporciona vitaminas y aminoaacutecidos La glicina es utilizada para estimular el crecimiento La
dextrosa es la fuente de carbono El indicador sulfito de bismuto actuacutea tambieacuten como un
inhibidor del desarrollo bacteriano El agar es adicionado como agente solidificante
21
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes
El caldo Mueller-Hinton se recomienda como el medio preferido para pruebas de
susceptibilidad de organismos comuacutenmente aislados aeroacutebicos o facultativos de raacutepido
crecimiento El caldo debe tener el contenido apropiado de cationes (Ca++ y Mg++) El pH
debe estar entre 72 y 74 a temperatura ambiente (25ordm C)
22
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram positivas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar glucosa glicerol maltosa manitol B-metilglucoacutesido
ramnosa sacarosa sorbitol trehalosa La produccioacuten de acido reduce la fluorescencia de un
fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substrato fluorogeacutenico el substrato enzimaacutetico esta vinculado a un fluoroacuteforo
que suprime la fluorescencia La ruptura enzimaacutetica de la unioacuten libera el fluoroacuteforo con
capacidad de fluorescencia
3- Pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea y la arginina (requieren la adicioacuten de aceite
mineral esteacuteril) incrementa el pH y la fluorescencia La esculina es una moleacutecula fluorescente
que al hidrolizarse se descompone en productos no fluorescentes
23
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram negativas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar Arabinosa arabitol celobiosa fructosa inositol
maltosa manitol rafinosa sacarosa sorbitol trehalosa xilosa La produccioacuten de acido
reduce la fluorescencia de un fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substratos fluorogeacutenico Cada substrato enzimaacutetico esta vinculado a un
fluoroacuteforo que suprime la fluorescencia La ruptura particioacuten enzimaacutetico de la unioacuten libera el
fluoroacuteforo con capacidad de fluorescencia
3- Pruebas de utilizacioacuten de carbono Agmatina arginina citrato lisina malonato ornitina y
piruvato La descomposicioacuten del substrato provoca un aumento de pH y la fluorescencia
4- Otras pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea incrementa el pH y la fluorescencia La
esculina es una moleacutecula fluorescente que al hidrolizarse se descompone en productos no
fluorescentes Desaminacioacuten del triptofano La formacioacuten de un color oscuro suprime la sentildeal
fluorescente
24
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
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28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
- CATETERIZACIOacuteN PERMANENTE es aquella cateterizacioacuten en que se introduce el
cateacuteter en el vaso por un tiempo mayor que la duracioacuten del procedimiento
CONCEPTO DE SINTOMAS DE UN NEONATO CON CATETER INFECTADO
- BACTEREMIA POR CATETER Aislamiento de bacterias viables en la sangre con
cultivo de cateacuteter positivo sin que se identifique otro foco originario
Primaria es aquella en que no existe otro foco de infeccioacuten Se consideran
asociadas a los equipos de infusioacuten endovenosa
Secundaria es aquella en que existe foco infeccioso en otro sitio (pulmonar
urinario piel gastrointestinal) por el mismo microorganismo
- FLEBITIS es la inflamacioacuten de la iacutentima de la vena puede evolucionar de compromiso
leve a severo con tromboflebitis emboliacutea pulmonar y bacteremia Este compromiso se
inicia con sensibilidad local ligero dolor eritema calor local ligera induracioacuten y cordoacuten
venoso palpable
- INFILTRACIOacuteN es la extravasacioacuten de fluidos endovenosos al espacio intersticial a
causa del desplazamiento del cateacuteter o la perforacioacuten de la pared venosa La
infiltracioacuten de soluciones aacutecidas alcalina o hipertoacutenica puede producir necrosis
hiacutestica4
- COLONIZACION DE CATETER se define por un cultivo positivo de punta de cateacuteter
con 15 UFC (Unidad Formadora de Colonias) utilizando la teacutecnica descrita por maki
- CONTAMINACION DE CATETER Presencia de un cultivo semicuantitativo o
cuantitativo con un nuacutemero de UFCml por debajo del nivel considerado como positivo
seguacuten la teacutecnica considerada8
4
- SEPSIS POR CATETER Traduce la respuesta inflamatoria del paciente a la
colonizacioacuten de un cateacuteter Esta puede ser de tipo local o sisteacutemica 9
Cateacuteter umbilical en neonatos
El uso de cateacuteteres umbilicales se utilizan como liacuteneas centrales para administrar
soluciones y medicamentos monitorizar la presioacuten arterial y tomar muestras de gases
arteriales en la Unidad de Recieacuten Nacidos asiacute como las complicaciones que se presentan
con esta praacutectica haciendo especial eacutenfasis en la viacutea oral concomitante el cateterismo de
los vasos umbilicales es un procedimiento relativamente sencillo raacutepido y de uso comuacuten
en las unidades de cuidado intensivo neonatal10
Los vasos umbilicales son la viacutea de eleccioacuten para el neonato criacuteticamente enfermo La
canalizacioacuten de los cateacuteteres umbilicales es realizada por el facultativo
El cateterismo de la arteria umbilical estaacute indicado cuando se requieren determinaciones
frecuentes de los gases en sangre arterial este procedimiento tambieacuten se utiliza para la
monitorizacioacuten continua de la presioacuten arterial y para realizar exanguinotransfusioacuten
El cateterismo de la vena umbilical estaacute indicado para la monitorizacioacuten de la presioacuten venosa
central acceso inmediato para liacutequidos intravenosos y faacutermacos de emergencia
exanguinotransfusioacuten acceso venoso de largo plazo en recieacuten nacidos de peso
extremadamente bajo y en espera de la canalizacioacuten por enfermeriacutea de un cateacuteter venoso
epicutaacuteneo11
Agentes etioloacutegicos
Entre los agentes etioloacutegicos bacterianos que con mayor frecuencia causan infecciones
asociadas a cateacuteter y que a su vez son los maacutes estudiados se encuentran Gram
positivos como Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus
streptococcus ssp Enterococcus ssp Gram negativos como Escherichia coli Klebsiella
ssp Enterobacter serratia ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son
Candida albicans otras especies de Candidas12
5
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada
por una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
que afecta tambieacuten al depoacutesito de proteiacutenas seacutericas en la superficie del cateacuteter La
adhesioacuten variacutea seguacuten el material del cateacuteter siendo mayor en los de polivinilo o laacutetex
siliconado y menor en los cateacuteteres de poliuretano polietileno o tefloacuten A este primer
paso que es reversible le sigue un proceso de adherencia bacteriana mediante un
sistema de adhesinas a diferentes receptores como son el fibrinoacutegeno o la fibrina
Mientras el Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante
interaccioacuten hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada
por las proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor Una vez colonizado el cateacuteter los
microorganismos forman la llamada biocapa bacteriana mediante una sustancia
polimeacuterica (slime) que protege a las bacterias facilitando su adhesioacuten y disminuyendo
su sensibilidad a los antibioacuteticos favoreciendo la aparicioacuten de resistencias13
La prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos invasivos a los que son sometidos los
recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas infecciones bacterianas La duracioacuten de
la estancia hospitalaria es inversamente proporcional al peso del nacimiento y a la edad
gestacional factores relacionados directamente con infecciones nosocomiales A pesar de
todos los avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean siendo una
importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal14
Factores de riesgo
Los factores de riesgo de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes
dependen del sitio donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter
en los vasos umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso
canalizado15
6
Infeccioacuten en cateacuteter umbilical
El empleo de los cateacuteteres umbilicales en el tratamiento de nintildeos recieacuten nacidos es un
procedimiento comuacuten en el manejo que se hace en ellos en las unidades de cuidados
intensivos neonatales (UCIN) ante problemas que ponen en peligro su vida Los primeros en
usar los vasos umbilicales para alguno de los propoacutesitos mencionados fueron Diamond
(1947) y James(1959)16
A pesar de la aparente facilidad para colocar los cateacuteteres umbilicales el procedimiento no
estaacute exento de complicaciones las maacutes frecuentes son infecciones arritmias cardiacas
vasoespasmo trombosis y embolias vasculares taponamiento cardiaco enterocolitis
necrosante necrosis hepaacutetica e hipertensioacuten de la porta1718 Como factor predisponente se
menciona el tiempo de permanencia cateacuteter en el vaso canalizado por lo que se tiene el
cuidado de retirarlo tan pronto como se logre la estabilizacioacuten del nintildeo y sea posible contar
con otra viacutea es por la relativa facilidad de canalizar estos vasos para obtener en ellos
muestras de sangre para administrar soluciones y medicamentos y para hacer mediciones
vascular central
Se informa una mayor frecuencia de las complicaciones infecciosas que generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo19
Epidemiologia
El indicador de infeccioacuten relacionada con cateacuteter recomendado y utilizado en los principales
estudios de vigilancia de infeccioacuten nosocomial es la BRC Su definicioacuten puede variar
teniendo en cuenta aspectos epidemioloacutegicos que incluyen la bacteriemia primaria (origen
desconocido) o cliacutenicos (comprobacioacuten de la BRC con cultivos de microorganismos iguales
en el cateacuteter y en hemocultivos) La CDC y la JCAHO recomiendan que las tasas de BRC se
expresen en episodios de BRC1000 diacuteas de cateacuteter20
Aunque la incidencia de BRC ha disminuido en los uacuteltimos antildeos a unos 56 episodios1000
diacuteas de cateacuteter posiblemente por mejor disentildeo y calidad de los cateacuteteres el nuacutemero de
7
pacientes con BRC sigue siendo elevado Esto es debido al mayor uso de CVC su elevada
manipulacioacuten a los avances en los meacutetodos de diagnoacutestico microbioloacutegico y a la puesta en
marcha de estaacutendares de sistemas de vigilancia de infeccioacuten nosocomial21
Patogenia
Se considera que la patogeacutenesis de las infecciones relacionadas a cateacuteter es compleja y
multifactorial Las bacterias pueden llegar al torrente sanguiacuteneo por dos viacuteas principales
1048707 Pueden migrar desde la piel en la interfase del cateacuteter hasta colocarse en la superficie externa
de eacuteste
1048707 Pueden ingresar a la luz interna del cateacuteter a traveacutes del conector
La migracioacuten de microorganismos presentes en la piel en el sitio de insercioacuten del cateacuteter con
colonizacioacuten de la punta es la ruta mas comuacuten de infeccioacuten en cateacuteteres de corta
permanencia mientras que los cateacuteteres de larga permanencia la contaminacioacuten del tubo de
cateacuteter contribuye sustancialmente a su colonizacioacuten intraluminal22
Se han reconocido numerosas medidas de prevencioacuten efectivas en la reduccioacuten de las
infecciones pero la ejecucioacuten de estas medidas en la praacutectica parece ser el problema maacutes
relevante existiendo gran diferencia entre la mejor evidencia disponible y la praacutectica cliacutenica
Bases Cliacutenicas
Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter fue descrito por primera vez por Maki y cols
en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa de la punta del cateacuteter El criterio de
positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea de los pacientes con recuentos
inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten mientras que todos los casos que
cursaban con bacteriemia tuvieron recuentos superiores a 15 UFC y con frecuencia las
colonias fueron incontables La especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76 Este meacutetodo por
su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de microbiologiacutea y es la
teacutecnica de referencia23
8
En el estado o condicioacuten con relacioacuten a un cateacuteter ya colocado por la cual el cuerpo o parte
de este ha sido invadido por un agente patoacutegeno que en condiciones favorables se
multiplica y produce efectos dantildeinos Una vez que el microorganismo se ha instalado en el
cateacuteter hay un cierto nuacutemero de condiciones subsiguientes posibles ya sean localizadas o
sisteacutemicas La mejor manera de determinar si el cateacuteter es la causa de la infeccioacuten es hacer
un cultivo cuantitativo de cateacuteteres junto con un cultivo perifeacuterico de sangre Usando un
meacutetodo semicuantitativo para un cultivo de cateacuteter las siguientes definciones son aplicables
al diagnoacutestico de infeccioacuten
A Esteacuteril No hay crecimiento
B Contaminacioacuten lt 15 UFC de la punta del cateacuteter
C Localizada
1 Colonizacioacuten gt 15 UFC de la punta del cateacuteter El organismo se presenta sin siacutentomas
2 Infeccioacuten del lugar de insercioacuten gt 15 UFC en cultivos de la punta del cateacuteter
generalmente con siacutentomas externos de infeccioacuten localizada
D Sisteacutemica Bacteremia relacionada con el cateacuteter gt 15 UFC en cultivos de l apunta del
cateacuteter y en cultivos perifeacutericos de sangre positivos con el mismos organismo sin
identificarse otro sitio de infeccioacuten23
Agentes etioloacutegicos de infecciones en cateacuteter umbilical
La bacteremia es una invasioacuten del torrente sanguiacuteneo por bacterias La bacteremia se
desarrolla como resultado del dantildeo externo (la piel) o el interior (el tracto respiratorio el
tracto digestivo) de las barreras del cuerpo El agente causante de la bacteremia en un 71
es el Staphylococcus aureus Una entrada para la sepsis en pacientes con quemaduras
puede ser las heridas cateacuteteres de la vena las viacuteas aeacutereas los pulmones el tracto digestivo
etc24
Staphylococcus aureus9
S aureus forma parte de la familia Microccocaceae geacutenero Staphylococcus el cual contiene
maacutes de 30 especies diferentes Es un coco gram-positivo no moacutevil No forma esporas puede
encontrarse solo en pares en cadenas cortas o en racimos Es un anaerobio facultativo
pero crece mejor en condiciones aerobias25 El S aureus es un microorganismo positivo a la
coagulasa que se aiacutesla con mayor frecuencia en infecciones de piel26 Staphylococcus
aureus es la principal especie patoacutegena de su geacutenero y la causa comuacuten de diversas
infecciones de origen nosocomial y comunitario27
Los Staphylococcus producen muy diversos siacutendromes con manifestaciones cliacutenicas que
van desde una simple puacutestula hasta la sepsis y la muerte28
Escherichia coli y Klebsiella pneumoniae
Escherichia coli es un bacilo que reacciona negativamente a la tincioacuten de Gram es anaerobio
facultativo moacutevil por flagelos peritricos (que rodean su cuerpo) no forma esporas es capaz
de fermentar la glucosa y la lactosa Klebsiella es un geacutenero de bacterias no moacutetiles Gram-
negativas con una prominente caacutepsula de polisacaacuteridos Estas especies patoacutegenas estaacuten
significativamente asociadas a infecciones nosocomiales cuyas alternativas terapeacuteuticas
cada vez son menores por ser importantes fuentes de resistencia antibioacutetica transferible29
Estos patoacutegenos estaacuten asociados con infecciones en infantes prematuros y pacientes de las
unidades de cuidado intensivo son causantes de neumoniacuteas bacteriemias infecciones del
tracto urinario e infecciones de herida quiruacutergica30
10
Planteamiento de problema
iquestCuales son los agentes etioloacutegicos que presentan los pacientes neonatos con cateacuteter
umbilical durante su atencioacuten hospitalaria
11
Justificacioacuten
El uso temprano de cateacuteteres umbilicales es una alternativa segura para el acceso
vascular en el recieacuten nacido sus complicaciones son escasas y no asociadas a la
administracioacuten de medicamentos o al uso de la viacutea enteral
El cateacuteter umbilical en neonatos es muy uacutetil como liacutenea central para administrar
soluciones y medicamentos monitorizar la presioacuten arterial y tomar muestras de gases
arteriales
El siguiente trabajo descriptivo transversal se realiza con el objetivo de analizar las
complicaciones que se presentan con esta praacutectica haciendo especial eacutenfasis en la viacutea
oral concomitante
Es sumamente importante contar con un buen meacutetodo diagnoacutestico para poder enfrentar
las infecciones asociadas a cateacuteter por lo tanto la decisioacuten de retiro de un dispositivo
debe ser evaluada en forma responsable y criteriosa La sola presencia del cuadro
cliacutenico no determina su asociacioacuten con el dispositivo intravascular ya que habitualmente
los signos cliacutenicos son inespeciacuteficos es el diagnoacutestico microbioloacutegico el que
determinaraacute su retiro yo tratamiento seguacuten corresponda
12
Objetivos
Objetivo general
1- Conocer la frecuencia de la flora bacteriana del ombligo del neonato por uso de cateacuteter
durante su atencioacuten hospitalaria
Objetivos especiacuteficos
1- Identificar el geacutenero y especie de los agentes etioloacutegicos presentes en infecciones del
ombligo por uso de cateacuteter umbilical en neonatos durante la atencioacuten hospitalaria
2- Proporcionar informacioacuten al servicio de Vigilancia y Control de Enfermedades Hospitalarias
13
Hipoacutetesis
HI
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
Ho
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical no adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
14
MATERIAL Y METODOS
Lugar de estudio y ubicacioacuten
La investigacioacuten se realizoacute en Veracruz Veracruz Meacutexico que se encuentra ubicado en la
zona centro del estado
Ensayo cliacutenico y tamantildeo de muestra
Para calcular el tamantildeo de la muestra y conformar el grupo de pacientes neonatos con
cateacuteter umbilical se utilizo un intervalo de confianza de 95 De tal manera el tamantildeo de
muestra estimado fue de 80 pacientes pero se eliminaron 30 debido a bajas del Hospital y
por defuncioacuten debido a padecimientos asociados al nacimiento prematuro del neonato
Criterios de inclusioacuten
Se desarrolloacute un estudio transversal descriptivo para identificar pacientes neonatos que
adquirieron alguna infeccioacuten de forma natural y conocer su prevalencia Soacutelo fueron
considerados pacientes neonatos nacidos en el Hospital de Alta Especialidad de Veracruz
del aacuterea de Pediatriacutea con sospecha de infeccioacuten bacteriana que fueran mayores de una
semana de vida y no mayores a 1 antildeo asiacute como tambieacuten que los cateacuteteres umbilicales
fueran retirados en condiciones higieacutenicas apropiadas en base a lo descrito en la SS y sin
antecedentes de alguna infeccioacuten previa Se lograron reunir un grupo de 50 pacientes que
reunioacute las caracteriacutesticas oacuteptimas para este estudio
Criterios de exclusioacuten
15
No se tomaron en consideracioacuten para este estudio los cultivos de cateacuteteres umbilicales que
no fueron retirados en condiciones apropiadas y los cateacuteteres umbilicales de neonatos que
fueron transportados en un medio de cultivo inadecuado Los Pacientes neonatos que
autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una patologiacutea traumaacutetica asociada y
los pacientes neonatos que autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una baja
por defuncioacuten fueron totalmente descartados para fines de esta investigacioacuten
Caracteriacutesticas de la unidad de pediatriacutea
La unidad de pediatriacutea del Hospital Regional de Alta Especialidad estaacute dividida en diferentes
aeacutereas de las cuales para fines de esta investigacioacuten se analizaron pacientes neonatos de
UCIN UCIM y cunero patoloacutegico Debido a que existen pacientes en el aacuterea de pediatriacutea que
ya no cumplen con el reacutegimen de edad estipulado para este estudio
Muestreo para la seleccioacuten de neonatos
Para la seleccioacuten de los neonatos y para reunir el tamantildeo de la muestra necesario para el
estudio se analizaron cateacuteteres de todos los neonatos con sospecha de infeccioacuten bacteriana
a partir de un mes de edad con el uso de medios de Stuart para transportar el cateacuteter Para
este muestreo no se tomoacute en cuenta el sexo Cada tubo de Stuart se identificoacute con el nombre
completo del paciente el servicio de donde se tomo el tipo de muestra fecha y un nuacutemero
de folio con continuidad Las muestras se conservaron a temperatura ambiente durante la
transportacioacuten a su anaacutelisis y luego fueron remitidas al laboratorio para su anaacutelisis
microbioloacutegico
Teacutecnicas de laboratorio
Para el estudio microbioloacutegico del cateacuteter umbilical del neonato fue utilizada la teacutecnica
semicuantitativa de maki Esta teacutecnica ha sido aceptada por la mayoriacutea de los laboratorios
de microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia
16
Proceso de Investigacioacuten
Se trabajo con pacientes nacidos en el Hospital Regional De Alta Especialidad De Veracruz
los cuales tuvieron participacioacuten en esta investigacioacuten hasta la identificacioacuten del agente
etioloacutegico en el cateacuteter umbilical
Se realizo el retiro del cateacuteter umbilical del neonato con una teacutecnica aseacuteptica utilizando
material esteacuteril se desinfecto la piel con alcohol al 10 y se dejo secar con pinza se retiro el
cateacuteter cuidando de no rosar la piel se corto de 3 a 5 cm de la porcioacuten distal y se coloco en
el medio de transporte Stuart para remitirlo al laboratorio de microbiologiacutea para su anaacutelisis
bacterioloacutegico
En el laboratorio se inoculo el cateacuteter umbilical en el agar base sangre por la teacutecnica
semicuantitativa de maki rotando el cateacuteter con ayuda del asa bacterioloacutegica 5 veces Se
incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera O2 Se prosiguioacute con la interpretacioacuten de la morfologiacutea
colonial se resembraron colonias en los medios Agar sal y manitol Agar Mac Conkey y Agar
Biggy para su diferenciacioacuten se Incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera de O2 continuando con
la Interpretacioacuten de la morfologiacutea colonial
Se realizaron tinciones gram para diferenciar Gram positivas de Gram negativas para Gram
positivas como para Gam negativas se procedioacute a la preparacioacuten de paneles Se Incubaron
los paneles Gram en la estufa del Sensititre a 37degC por 24 Hrs en atmosfera de O2 Se
continuacuteo con la lectura de paneles Gram en autoreader Sensititre obteniendo asiacute el
resultado bacteriano en cuanto a geacutenero y especie
17
Material empleado
Paneles Combo Sensititre
Laminas adhesivas
Agua desmineralizada Sensititre
Tira de substrato para prueba de Gram positivos
Aceite mineral
Reactivos para tincioacuten de Gram
Cabezales de dosificacioacuten Sensititre
Estaacutendar de turbidez McFarland 05
Puntas desechables para pipeta
Tubos de ensaye 13 x 100
Tubos de ensaye 10 x 75
Pipetas Automaacuteticas de 5 ųl
Gradilla
Quemador bunsen
Asa bacterioloacutegica
Cajas petri
Goteros
Jaboacuten de manos
Detergente
Toalla
Franela
Alcohol
Cubrebocas
Guantes desechables
Recipiente para material contaminado
Rollo de papel adsorbente
Cloro
Gasas
Bolsas de plaacutestico
Cerillos
Porta objetos
Cubre objetos 18
Papel estraza
Computadora
Impresora
Hojas tamantildeo carta blancas
Medios de cultivo
Agar base sangre
Agar Sal de manitol
Agar Mac Conkey
Biggy
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes ajustado a Sensititre
Medio de transporte Stuart
Equipos de Laboratorio
1 Estufa de cultivo
2 Microscopio
3 Vortex
4 Auto inoculador
5 SISTEMA SENSITITRE
a Autoreader Sensititre
b Estufa Sensititre
Fundamentos
19
Uno de los sistemas maacutes importantes para la identificacioacuten de microorganismos es observar
su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio El material
alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de
los microorganismos es el Cultivo
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son temperatura grado de humedad y presioacuten de oxiacutegeno
adecuadas asiacute como un grado correcto de acidez o alcalinidad Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante
Estos Medios fueron utilizados en esta investigacioacuten para fines de identificacioacuten de
microorganismos bacterianos Cada medio tiene una caracteriacutestica importante para ser
empleado en este proyecto
A continuacioacuten se describen
Medio de Transporte Stuart
Medio semisoacutelido no nutritivo Contiene tioglicolato de sodio el cual provee un ambiente
reducido y es uacutetil para suprimir cambios oxidativos en el medio de transporte y azul de
metileno que es el indicador de oxido reduccioacuten De esta manera se favorece la viabilidad de
los microorganismos durante su enviacuteo al laboratorio
Agar sangre
La infusioacuten de muacutesculo de corazoacuten y la peptona otorgan al medio un alto valor nutritivo que
permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos auacuten de aquellos
nutricionalmente exigentes El cloruro de sodio mantiene el balance osmoacutetico
El agregado de sangre al medio de cultivo en concentracioacuten final de 5-10 aporta
nutrientes para el crecimiento bacteriano y permite detectar hemoacutelisis
Agar Mac Conkey
20
En el medio de cultivo las peptonas aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo
bacteriano la lactosa es el hidrato de carbono fermentable y la mezcla de sales biliares y el
cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora
Gram positiva Por fermentacioacuten de la lactosa disminuye el pH alrededor de la colonia Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro) la absorcioacuten en las colonias y la
precipitacioacuten de las sales biliares Los microorganismos no fermentadores de lactosa
producen colonias incoloras
Agar sal y manitol
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracioacuten salina Los
estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante Los estafilococos coagulasa negativos
presentan colonias rodeadas de una zona roja o puacuterpura En el medio de cultivo el extracto
de carne y la pluripeptona constituyen la fuente de carbono nitroacutegeno vitaminas y
minerales el manitol es el hidrato de carbono fermentable el cloruro de sodio (que se
encuentra en alta concentracioacuten) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora
acompantildeante y el rojo fenol es el indicador de pH Las bacterias que crecen en un medio
con alta concentracioacuten de sal y fermentan el manitol producen aacutecidos con lo que se modifica
el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo Los estafilococos crecen
en altas concentraciones de sal y pueden o no fermentar el manitol Los estafilococos
coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de
una zona del mismo color Los estafilococos que no fermentan el manitol se visualizan como
colonias rojas rodeadas de una zona del mismo color o puacuterpura
Agar Biggy
El Agar Biggy es una modificacioacuten de la foacutermula desarrollada por Nickerson La
diferenciacioacuten estaacute basada en la morfologiacutea colonial y la pigmentacioacuten tiacutepica que se presenta
en este medio La reduccioacuten del sulfito de bismuto se manifiesta en una pigmentacioacuten de la
colonia que en ocasiones difunde en el medio En este medio el extracto de levadura
proporciona vitaminas y aminoaacutecidos La glicina es utilizada para estimular el crecimiento La
dextrosa es la fuente de carbono El indicador sulfito de bismuto actuacutea tambieacuten como un
inhibidor del desarrollo bacteriano El agar es adicionado como agente solidificante
21
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes
El caldo Mueller-Hinton se recomienda como el medio preferido para pruebas de
susceptibilidad de organismos comuacutenmente aislados aeroacutebicos o facultativos de raacutepido
crecimiento El caldo debe tener el contenido apropiado de cationes (Ca++ y Mg++) El pH
debe estar entre 72 y 74 a temperatura ambiente (25ordm C)
22
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram positivas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar glucosa glicerol maltosa manitol B-metilglucoacutesido
ramnosa sacarosa sorbitol trehalosa La produccioacuten de acido reduce la fluorescencia de un
fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substrato fluorogeacutenico el substrato enzimaacutetico esta vinculado a un fluoroacuteforo
que suprime la fluorescencia La ruptura enzimaacutetica de la unioacuten libera el fluoroacuteforo con
capacidad de fluorescencia
3- Pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea y la arginina (requieren la adicioacuten de aceite
mineral esteacuteril) incrementa el pH y la fluorescencia La esculina es una moleacutecula fluorescente
que al hidrolizarse se descompone en productos no fluorescentes
23
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram negativas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar Arabinosa arabitol celobiosa fructosa inositol
maltosa manitol rafinosa sacarosa sorbitol trehalosa xilosa La produccioacuten de acido
reduce la fluorescencia de un fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substratos fluorogeacutenico Cada substrato enzimaacutetico esta vinculado a un
fluoroacuteforo que suprime la fluorescencia La ruptura particioacuten enzimaacutetico de la unioacuten libera el
fluoroacuteforo con capacidad de fluorescencia
3- Pruebas de utilizacioacuten de carbono Agmatina arginina citrato lisina malonato ornitina y
piruvato La descomposicioacuten del substrato provoca un aumento de pH y la fluorescencia
4- Otras pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea incrementa el pH y la fluorescencia La
esculina es una moleacutecula fluorescente que al hidrolizarse se descompone en productos no
fluorescentes Desaminacioacuten del triptofano La formacioacuten de un color oscuro suprime la sentildeal
fluorescente
24
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
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11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
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12Cuerda Compes C Breton Lesmes I Bonada Sanjaume A Planas Vila A ldquoProtocolo para
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22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
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23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
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38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
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colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
- SEPSIS POR CATETER Traduce la respuesta inflamatoria del paciente a la
colonizacioacuten de un cateacuteter Esta puede ser de tipo local o sisteacutemica 9
Cateacuteter umbilical en neonatos
El uso de cateacuteteres umbilicales se utilizan como liacuteneas centrales para administrar
soluciones y medicamentos monitorizar la presioacuten arterial y tomar muestras de gases
arteriales en la Unidad de Recieacuten Nacidos asiacute como las complicaciones que se presentan
con esta praacutectica haciendo especial eacutenfasis en la viacutea oral concomitante el cateterismo de
los vasos umbilicales es un procedimiento relativamente sencillo raacutepido y de uso comuacuten
en las unidades de cuidado intensivo neonatal10
Los vasos umbilicales son la viacutea de eleccioacuten para el neonato criacuteticamente enfermo La
canalizacioacuten de los cateacuteteres umbilicales es realizada por el facultativo
El cateterismo de la arteria umbilical estaacute indicado cuando se requieren determinaciones
frecuentes de los gases en sangre arterial este procedimiento tambieacuten se utiliza para la
monitorizacioacuten continua de la presioacuten arterial y para realizar exanguinotransfusioacuten
El cateterismo de la vena umbilical estaacute indicado para la monitorizacioacuten de la presioacuten venosa
central acceso inmediato para liacutequidos intravenosos y faacutermacos de emergencia
exanguinotransfusioacuten acceso venoso de largo plazo en recieacuten nacidos de peso
extremadamente bajo y en espera de la canalizacioacuten por enfermeriacutea de un cateacuteter venoso
epicutaacuteneo11
Agentes etioloacutegicos
Entre los agentes etioloacutegicos bacterianos que con mayor frecuencia causan infecciones
asociadas a cateacuteter y que a su vez son los maacutes estudiados se encuentran Gram
positivos como Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus
streptococcus ssp Enterococcus ssp Gram negativos como Escherichia coli Klebsiella
ssp Enterobacter serratia ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son
Candida albicans otras especies de Candidas12
5
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada
por una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
que afecta tambieacuten al depoacutesito de proteiacutenas seacutericas en la superficie del cateacuteter La
adhesioacuten variacutea seguacuten el material del cateacuteter siendo mayor en los de polivinilo o laacutetex
siliconado y menor en los cateacuteteres de poliuretano polietileno o tefloacuten A este primer
paso que es reversible le sigue un proceso de adherencia bacteriana mediante un
sistema de adhesinas a diferentes receptores como son el fibrinoacutegeno o la fibrina
Mientras el Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante
interaccioacuten hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada
por las proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor Una vez colonizado el cateacuteter los
microorganismos forman la llamada biocapa bacteriana mediante una sustancia
polimeacuterica (slime) que protege a las bacterias facilitando su adhesioacuten y disminuyendo
su sensibilidad a los antibioacuteticos favoreciendo la aparicioacuten de resistencias13
La prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos invasivos a los que son sometidos los
recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas infecciones bacterianas La duracioacuten de
la estancia hospitalaria es inversamente proporcional al peso del nacimiento y a la edad
gestacional factores relacionados directamente con infecciones nosocomiales A pesar de
todos los avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean siendo una
importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal14
Factores de riesgo
Los factores de riesgo de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes
dependen del sitio donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter
en los vasos umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso
canalizado15
6
Infeccioacuten en cateacuteter umbilical
El empleo de los cateacuteteres umbilicales en el tratamiento de nintildeos recieacuten nacidos es un
procedimiento comuacuten en el manejo que se hace en ellos en las unidades de cuidados
intensivos neonatales (UCIN) ante problemas que ponen en peligro su vida Los primeros en
usar los vasos umbilicales para alguno de los propoacutesitos mencionados fueron Diamond
(1947) y James(1959)16
A pesar de la aparente facilidad para colocar los cateacuteteres umbilicales el procedimiento no
estaacute exento de complicaciones las maacutes frecuentes son infecciones arritmias cardiacas
vasoespasmo trombosis y embolias vasculares taponamiento cardiaco enterocolitis
necrosante necrosis hepaacutetica e hipertensioacuten de la porta1718 Como factor predisponente se
menciona el tiempo de permanencia cateacuteter en el vaso canalizado por lo que se tiene el
cuidado de retirarlo tan pronto como se logre la estabilizacioacuten del nintildeo y sea posible contar
con otra viacutea es por la relativa facilidad de canalizar estos vasos para obtener en ellos
muestras de sangre para administrar soluciones y medicamentos y para hacer mediciones
vascular central
Se informa una mayor frecuencia de las complicaciones infecciosas que generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo19
Epidemiologia
El indicador de infeccioacuten relacionada con cateacuteter recomendado y utilizado en los principales
estudios de vigilancia de infeccioacuten nosocomial es la BRC Su definicioacuten puede variar
teniendo en cuenta aspectos epidemioloacutegicos que incluyen la bacteriemia primaria (origen
desconocido) o cliacutenicos (comprobacioacuten de la BRC con cultivos de microorganismos iguales
en el cateacuteter y en hemocultivos) La CDC y la JCAHO recomiendan que las tasas de BRC se
expresen en episodios de BRC1000 diacuteas de cateacuteter20
Aunque la incidencia de BRC ha disminuido en los uacuteltimos antildeos a unos 56 episodios1000
diacuteas de cateacuteter posiblemente por mejor disentildeo y calidad de los cateacuteteres el nuacutemero de
7
pacientes con BRC sigue siendo elevado Esto es debido al mayor uso de CVC su elevada
manipulacioacuten a los avances en los meacutetodos de diagnoacutestico microbioloacutegico y a la puesta en
marcha de estaacutendares de sistemas de vigilancia de infeccioacuten nosocomial21
Patogenia
Se considera que la patogeacutenesis de las infecciones relacionadas a cateacuteter es compleja y
multifactorial Las bacterias pueden llegar al torrente sanguiacuteneo por dos viacuteas principales
1048707 Pueden migrar desde la piel en la interfase del cateacuteter hasta colocarse en la superficie externa
de eacuteste
1048707 Pueden ingresar a la luz interna del cateacuteter a traveacutes del conector
La migracioacuten de microorganismos presentes en la piel en el sitio de insercioacuten del cateacuteter con
colonizacioacuten de la punta es la ruta mas comuacuten de infeccioacuten en cateacuteteres de corta
permanencia mientras que los cateacuteteres de larga permanencia la contaminacioacuten del tubo de
cateacuteter contribuye sustancialmente a su colonizacioacuten intraluminal22
Se han reconocido numerosas medidas de prevencioacuten efectivas en la reduccioacuten de las
infecciones pero la ejecucioacuten de estas medidas en la praacutectica parece ser el problema maacutes
relevante existiendo gran diferencia entre la mejor evidencia disponible y la praacutectica cliacutenica
Bases Cliacutenicas
Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter fue descrito por primera vez por Maki y cols
en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa de la punta del cateacuteter El criterio de
positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea de los pacientes con recuentos
inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten mientras que todos los casos que
cursaban con bacteriemia tuvieron recuentos superiores a 15 UFC y con frecuencia las
colonias fueron incontables La especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76 Este meacutetodo por
su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de microbiologiacutea y es la
teacutecnica de referencia23
8
En el estado o condicioacuten con relacioacuten a un cateacuteter ya colocado por la cual el cuerpo o parte
de este ha sido invadido por un agente patoacutegeno que en condiciones favorables se
multiplica y produce efectos dantildeinos Una vez que el microorganismo se ha instalado en el
cateacuteter hay un cierto nuacutemero de condiciones subsiguientes posibles ya sean localizadas o
sisteacutemicas La mejor manera de determinar si el cateacuteter es la causa de la infeccioacuten es hacer
un cultivo cuantitativo de cateacuteteres junto con un cultivo perifeacuterico de sangre Usando un
meacutetodo semicuantitativo para un cultivo de cateacuteter las siguientes definciones son aplicables
al diagnoacutestico de infeccioacuten
A Esteacuteril No hay crecimiento
B Contaminacioacuten lt 15 UFC de la punta del cateacuteter
C Localizada
1 Colonizacioacuten gt 15 UFC de la punta del cateacuteter El organismo se presenta sin siacutentomas
2 Infeccioacuten del lugar de insercioacuten gt 15 UFC en cultivos de la punta del cateacuteter
generalmente con siacutentomas externos de infeccioacuten localizada
D Sisteacutemica Bacteremia relacionada con el cateacuteter gt 15 UFC en cultivos de l apunta del
cateacuteter y en cultivos perifeacutericos de sangre positivos con el mismos organismo sin
identificarse otro sitio de infeccioacuten23
Agentes etioloacutegicos de infecciones en cateacuteter umbilical
La bacteremia es una invasioacuten del torrente sanguiacuteneo por bacterias La bacteremia se
desarrolla como resultado del dantildeo externo (la piel) o el interior (el tracto respiratorio el
tracto digestivo) de las barreras del cuerpo El agente causante de la bacteremia en un 71
es el Staphylococcus aureus Una entrada para la sepsis en pacientes con quemaduras
puede ser las heridas cateacuteteres de la vena las viacuteas aeacutereas los pulmones el tracto digestivo
etc24
Staphylococcus aureus9
S aureus forma parte de la familia Microccocaceae geacutenero Staphylococcus el cual contiene
maacutes de 30 especies diferentes Es un coco gram-positivo no moacutevil No forma esporas puede
encontrarse solo en pares en cadenas cortas o en racimos Es un anaerobio facultativo
pero crece mejor en condiciones aerobias25 El S aureus es un microorganismo positivo a la
coagulasa que se aiacutesla con mayor frecuencia en infecciones de piel26 Staphylococcus
aureus es la principal especie patoacutegena de su geacutenero y la causa comuacuten de diversas
infecciones de origen nosocomial y comunitario27
Los Staphylococcus producen muy diversos siacutendromes con manifestaciones cliacutenicas que
van desde una simple puacutestula hasta la sepsis y la muerte28
Escherichia coli y Klebsiella pneumoniae
Escherichia coli es un bacilo que reacciona negativamente a la tincioacuten de Gram es anaerobio
facultativo moacutevil por flagelos peritricos (que rodean su cuerpo) no forma esporas es capaz
de fermentar la glucosa y la lactosa Klebsiella es un geacutenero de bacterias no moacutetiles Gram-
negativas con una prominente caacutepsula de polisacaacuteridos Estas especies patoacutegenas estaacuten
significativamente asociadas a infecciones nosocomiales cuyas alternativas terapeacuteuticas
cada vez son menores por ser importantes fuentes de resistencia antibioacutetica transferible29
Estos patoacutegenos estaacuten asociados con infecciones en infantes prematuros y pacientes de las
unidades de cuidado intensivo son causantes de neumoniacuteas bacteriemias infecciones del
tracto urinario e infecciones de herida quiruacutergica30
10
Planteamiento de problema
iquestCuales son los agentes etioloacutegicos que presentan los pacientes neonatos con cateacuteter
umbilical durante su atencioacuten hospitalaria
11
Justificacioacuten
El uso temprano de cateacuteteres umbilicales es una alternativa segura para el acceso
vascular en el recieacuten nacido sus complicaciones son escasas y no asociadas a la
administracioacuten de medicamentos o al uso de la viacutea enteral
El cateacuteter umbilical en neonatos es muy uacutetil como liacutenea central para administrar
soluciones y medicamentos monitorizar la presioacuten arterial y tomar muestras de gases
arteriales
El siguiente trabajo descriptivo transversal se realiza con el objetivo de analizar las
complicaciones que se presentan con esta praacutectica haciendo especial eacutenfasis en la viacutea
oral concomitante
Es sumamente importante contar con un buen meacutetodo diagnoacutestico para poder enfrentar
las infecciones asociadas a cateacuteter por lo tanto la decisioacuten de retiro de un dispositivo
debe ser evaluada en forma responsable y criteriosa La sola presencia del cuadro
cliacutenico no determina su asociacioacuten con el dispositivo intravascular ya que habitualmente
los signos cliacutenicos son inespeciacuteficos es el diagnoacutestico microbioloacutegico el que
determinaraacute su retiro yo tratamiento seguacuten corresponda
12
Objetivos
Objetivo general
1- Conocer la frecuencia de la flora bacteriana del ombligo del neonato por uso de cateacuteter
durante su atencioacuten hospitalaria
Objetivos especiacuteficos
1- Identificar el geacutenero y especie de los agentes etioloacutegicos presentes en infecciones del
ombligo por uso de cateacuteter umbilical en neonatos durante la atencioacuten hospitalaria
2- Proporcionar informacioacuten al servicio de Vigilancia y Control de Enfermedades Hospitalarias
13
Hipoacutetesis
HI
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
Ho
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical no adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
14
MATERIAL Y METODOS
Lugar de estudio y ubicacioacuten
La investigacioacuten se realizoacute en Veracruz Veracruz Meacutexico que se encuentra ubicado en la
zona centro del estado
Ensayo cliacutenico y tamantildeo de muestra
Para calcular el tamantildeo de la muestra y conformar el grupo de pacientes neonatos con
cateacuteter umbilical se utilizo un intervalo de confianza de 95 De tal manera el tamantildeo de
muestra estimado fue de 80 pacientes pero se eliminaron 30 debido a bajas del Hospital y
por defuncioacuten debido a padecimientos asociados al nacimiento prematuro del neonato
Criterios de inclusioacuten
Se desarrolloacute un estudio transversal descriptivo para identificar pacientes neonatos que
adquirieron alguna infeccioacuten de forma natural y conocer su prevalencia Soacutelo fueron
considerados pacientes neonatos nacidos en el Hospital de Alta Especialidad de Veracruz
del aacuterea de Pediatriacutea con sospecha de infeccioacuten bacteriana que fueran mayores de una
semana de vida y no mayores a 1 antildeo asiacute como tambieacuten que los cateacuteteres umbilicales
fueran retirados en condiciones higieacutenicas apropiadas en base a lo descrito en la SS y sin
antecedentes de alguna infeccioacuten previa Se lograron reunir un grupo de 50 pacientes que
reunioacute las caracteriacutesticas oacuteptimas para este estudio
Criterios de exclusioacuten
15
No se tomaron en consideracioacuten para este estudio los cultivos de cateacuteteres umbilicales que
no fueron retirados en condiciones apropiadas y los cateacuteteres umbilicales de neonatos que
fueron transportados en un medio de cultivo inadecuado Los Pacientes neonatos que
autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una patologiacutea traumaacutetica asociada y
los pacientes neonatos que autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una baja
por defuncioacuten fueron totalmente descartados para fines de esta investigacioacuten
Caracteriacutesticas de la unidad de pediatriacutea
La unidad de pediatriacutea del Hospital Regional de Alta Especialidad estaacute dividida en diferentes
aeacutereas de las cuales para fines de esta investigacioacuten se analizaron pacientes neonatos de
UCIN UCIM y cunero patoloacutegico Debido a que existen pacientes en el aacuterea de pediatriacutea que
ya no cumplen con el reacutegimen de edad estipulado para este estudio
Muestreo para la seleccioacuten de neonatos
Para la seleccioacuten de los neonatos y para reunir el tamantildeo de la muestra necesario para el
estudio se analizaron cateacuteteres de todos los neonatos con sospecha de infeccioacuten bacteriana
a partir de un mes de edad con el uso de medios de Stuart para transportar el cateacuteter Para
este muestreo no se tomoacute en cuenta el sexo Cada tubo de Stuart se identificoacute con el nombre
completo del paciente el servicio de donde se tomo el tipo de muestra fecha y un nuacutemero
de folio con continuidad Las muestras se conservaron a temperatura ambiente durante la
transportacioacuten a su anaacutelisis y luego fueron remitidas al laboratorio para su anaacutelisis
microbioloacutegico
Teacutecnicas de laboratorio
Para el estudio microbioloacutegico del cateacuteter umbilical del neonato fue utilizada la teacutecnica
semicuantitativa de maki Esta teacutecnica ha sido aceptada por la mayoriacutea de los laboratorios
de microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia
16
Proceso de Investigacioacuten
Se trabajo con pacientes nacidos en el Hospital Regional De Alta Especialidad De Veracruz
los cuales tuvieron participacioacuten en esta investigacioacuten hasta la identificacioacuten del agente
etioloacutegico en el cateacuteter umbilical
Se realizo el retiro del cateacuteter umbilical del neonato con una teacutecnica aseacuteptica utilizando
material esteacuteril se desinfecto la piel con alcohol al 10 y se dejo secar con pinza se retiro el
cateacuteter cuidando de no rosar la piel se corto de 3 a 5 cm de la porcioacuten distal y se coloco en
el medio de transporte Stuart para remitirlo al laboratorio de microbiologiacutea para su anaacutelisis
bacterioloacutegico
En el laboratorio se inoculo el cateacuteter umbilical en el agar base sangre por la teacutecnica
semicuantitativa de maki rotando el cateacuteter con ayuda del asa bacterioloacutegica 5 veces Se
incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera O2 Se prosiguioacute con la interpretacioacuten de la morfologiacutea
colonial se resembraron colonias en los medios Agar sal y manitol Agar Mac Conkey y Agar
Biggy para su diferenciacioacuten se Incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera de O2 continuando con
la Interpretacioacuten de la morfologiacutea colonial
Se realizaron tinciones gram para diferenciar Gram positivas de Gram negativas para Gram
positivas como para Gam negativas se procedioacute a la preparacioacuten de paneles Se Incubaron
los paneles Gram en la estufa del Sensititre a 37degC por 24 Hrs en atmosfera de O2 Se
continuacuteo con la lectura de paneles Gram en autoreader Sensititre obteniendo asiacute el
resultado bacteriano en cuanto a geacutenero y especie
17
Material empleado
Paneles Combo Sensititre
Laminas adhesivas
Agua desmineralizada Sensititre
Tira de substrato para prueba de Gram positivos
Aceite mineral
Reactivos para tincioacuten de Gram
Cabezales de dosificacioacuten Sensititre
Estaacutendar de turbidez McFarland 05
Puntas desechables para pipeta
Tubos de ensaye 13 x 100
Tubos de ensaye 10 x 75
Pipetas Automaacuteticas de 5 ųl
Gradilla
Quemador bunsen
Asa bacterioloacutegica
Cajas petri
Goteros
Jaboacuten de manos
Detergente
Toalla
Franela
Alcohol
Cubrebocas
Guantes desechables
Recipiente para material contaminado
Rollo de papel adsorbente
Cloro
Gasas
Bolsas de plaacutestico
Cerillos
Porta objetos
Cubre objetos 18
Papel estraza
Computadora
Impresora
Hojas tamantildeo carta blancas
Medios de cultivo
Agar base sangre
Agar Sal de manitol
Agar Mac Conkey
Biggy
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes ajustado a Sensititre
Medio de transporte Stuart
Equipos de Laboratorio
1 Estufa de cultivo
2 Microscopio
3 Vortex
4 Auto inoculador
5 SISTEMA SENSITITRE
a Autoreader Sensititre
b Estufa Sensititre
Fundamentos
19
Uno de los sistemas maacutes importantes para la identificacioacuten de microorganismos es observar
su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio El material
alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de
los microorganismos es el Cultivo
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son temperatura grado de humedad y presioacuten de oxiacutegeno
adecuadas asiacute como un grado correcto de acidez o alcalinidad Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante
Estos Medios fueron utilizados en esta investigacioacuten para fines de identificacioacuten de
microorganismos bacterianos Cada medio tiene una caracteriacutestica importante para ser
empleado en este proyecto
A continuacioacuten se describen
Medio de Transporte Stuart
Medio semisoacutelido no nutritivo Contiene tioglicolato de sodio el cual provee un ambiente
reducido y es uacutetil para suprimir cambios oxidativos en el medio de transporte y azul de
metileno que es el indicador de oxido reduccioacuten De esta manera se favorece la viabilidad de
los microorganismos durante su enviacuteo al laboratorio
Agar sangre
La infusioacuten de muacutesculo de corazoacuten y la peptona otorgan al medio un alto valor nutritivo que
permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos auacuten de aquellos
nutricionalmente exigentes El cloruro de sodio mantiene el balance osmoacutetico
El agregado de sangre al medio de cultivo en concentracioacuten final de 5-10 aporta
nutrientes para el crecimiento bacteriano y permite detectar hemoacutelisis
Agar Mac Conkey
20
En el medio de cultivo las peptonas aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo
bacteriano la lactosa es el hidrato de carbono fermentable y la mezcla de sales biliares y el
cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora
Gram positiva Por fermentacioacuten de la lactosa disminuye el pH alrededor de la colonia Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro) la absorcioacuten en las colonias y la
precipitacioacuten de las sales biliares Los microorganismos no fermentadores de lactosa
producen colonias incoloras
Agar sal y manitol
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracioacuten salina Los
estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante Los estafilococos coagulasa negativos
presentan colonias rodeadas de una zona roja o puacuterpura En el medio de cultivo el extracto
de carne y la pluripeptona constituyen la fuente de carbono nitroacutegeno vitaminas y
minerales el manitol es el hidrato de carbono fermentable el cloruro de sodio (que se
encuentra en alta concentracioacuten) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora
acompantildeante y el rojo fenol es el indicador de pH Las bacterias que crecen en un medio
con alta concentracioacuten de sal y fermentan el manitol producen aacutecidos con lo que se modifica
el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo Los estafilococos crecen
en altas concentraciones de sal y pueden o no fermentar el manitol Los estafilococos
coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de
una zona del mismo color Los estafilococos que no fermentan el manitol se visualizan como
colonias rojas rodeadas de una zona del mismo color o puacuterpura
Agar Biggy
El Agar Biggy es una modificacioacuten de la foacutermula desarrollada por Nickerson La
diferenciacioacuten estaacute basada en la morfologiacutea colonial y la pigmentacioacuten tiacutepica que se presenta
en este medio La reduccioacuten del sulfito de bismuto se manifiesta en una pigmentacioacuten de la
colonia que en ocasiones difunde en el medio En este medio el extracto de levadura
proporciona vitaminas y aminoaacutecidos La glicina es utilizada para estimular el crecimiento La
dextrosa es la fuente de carbono El indicador sulfito de bismuto actuacutea tambieacuten como un
inhibidor del desarrollo bacteriano El agar es adicionado como agente solidificante
21
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes
El caldo Mueller-Hinton se recomienda como el medio preferido para pruebas de
susceptibilidad de organismos comuacutenmente aislados aeroacutebicos o facultativos de raacutepido
crecimiento El caldo debe tener el contenido apropiado de cationes (Ca++ y Mg++) El pH
debe estar entre 72 y 74 a temperatura ambiente (25ordm C)
22
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram positivas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar glucosa glicerol maltosa manitol B-metilglucoacutesido
ramnosa sacarosa sorbitol trehalosa La produccioacuten de acido reduce la fluorescencia de un
fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substrato fluorogeacutenico el substrato enzimaacutetico esta vinculado a un fluoroacuteforo
que suprime la fluorescencia La ruptura enzimaacutetica de la unioacuten libera el fluoroacuteforo con
capacidad de fluorescencia
3- Pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea y la arginina (requieren la adicioacuten de aceite
mineral esteacuteril) incrementa el pH y la fluorescencia La esculina es una moleacutecula fluorescente
que al hidrolizarse se descompone en productos no fluorescentes
23
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram negativas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar Arabinosa arabitol celobiosa fructosa inositol
maltosa manitol rafinosa sacarosa sorbitol trehalosa xilosa La produccioacuten de acido
reduce la fluorescencia de un fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substratos fluorogeacutenico Cada substrato enzimaacutetico esta vinculado a un
fluoroacuteforo que suprime la fluorescencia La ruptura particioacuten enzimaacutetico de la unioacuten libera el
fluoroacuteforo con capacidad de fluorescencia
3- Pruebas de utilizacioacuten de carbono Agmatina arginina citrato lisina malonato ornitina y
piruvato La descomposicioacuten del substrato provoca un aumento de pH y la fluorescencia
4- Otras pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea incrementa el pH y la fluorescencia La
esculina es una moleacutecula fluorescente que al hidrolizarse se descompone en productos no
fluorescentes Desaminacioacuten del triptofano La formacioacuten de un color oscuro suprime la sentildeal
fluorescente
24
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
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epidemioloacutegico de la sepsis nosocomial en la Unidad de Recieacuten Nacidos de la Fundacioacuten
Cardioinfantilrdquo Nosocomial Infections at the Neonatal Intensive Care Unit of Fundacioacuten
Cardioinfantil in Bogotaacute 2008 Vol 6 Num 1 Pp 36-49
15R Clarck Powers R With R Bloom B Sanchez P Benjamin D Prevention and treatment of
nosocomial sepsis in the NICU J Perinatol 2004 24 446-53
16K Tiffany B Burke C Collins-Odoms D Oelberg Current practice regarding the enteral
feeding of high-risk newborns with umbilical catheters in situ Pediatrics 2003 112 20-3
17Hermansen MC Hermansen MG Intravascular catheter complications in the neonatal
intensive Care Unit Clin Perinatol 2005 32 141-56
18Hogan M Neonatal vascular catheters and their complications Radiol Clin North Am 1999
37 165-72
19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
Gamboa-Caacutezares Isidro A ldquoComplicaciones asociadas a la colocacioacuten de cateacuteteres
umbilicales en neonatosrdquo Revista Mexicana de Pediatria 2007 Vol 74 Nuacutem 2 pp 70-73
20National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report data summary from
January 1992 through June 2003 issued August 2003 Am J Infect Control 2003 31 481-
498
21Brun-Buisson C Suspected central venous catheter-associated infection can the catheter be
safely retained Intensive Care Med 2004 30 1005-1007
22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
relacionadas a cateacuteter vascularrdquo Ministerio de salud 2006 Pp 7-17
23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
Instructor in Pediatrics Harvard Medical School Boston Massachusetts
38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
severe burn trauma Kaunas Lithuania Medicina (Kaunas) 2006 42(7)
25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
emergencia de un patoacutegeno en la comunidad Rev Biomed 2006 Meacutexico 17287-305
26Bonino A Gnesetti A Pujadas M Broggi A Infecciones por Staphylococcus aureus
meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
el Hospital Policial de Uruguay 2004 Arch Pediatr Urug 2007 78(1) 41-47
27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada
por una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
que afecta tambieacuten al depoacutesito de proteiacutenas seacutericas en la superficie del cateacuteter La
adhesioacuten variacutea seguacuten el material del cateacuteter siendo mayor en los de polivinilo o laacutetex
siliconado y menor en los cateacuteteres de poliuretano polietileno o tefloacuten A este primer
paso que es reversible le sigue un proceso de adherencia bacteriana mediante un
sistema de adhesinas a diferentes receptores como son el fibrinoacutegeno o la fibrina
Mientras el Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante
interaccioacuten hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada
por las proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor Una vez colonizado el cateacuteter los
microorganismos forman la llamada biocapa bacteriana mediante una sustancia
polimeacuterica (slime) que protege a las bacterias facilitando su adhesioacuten y disminuyendo
su sensibilidad a los antibioacuteticos favoreciendo la aparicioacuten de resistencias13
La prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos invasivos a los que son sometidos los
recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas infecciones bacterianas La duracioacuten de
la estancia hospitalaria es inversamente proporcional al peso del nacimiento y a la edad
gestacional factores relacionados directamente con infecciones nosocomiales A pesar de
todos los avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean siendo una
importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal14
Factores de riesgo
Los factores de riesgo de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes
dependen del sitio donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter
en los vasos umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso
canalizado15
6
Infeccioacuten en cateacuteter umbilical
El empleo de los cateacuteteres umbilicales en el tratamiento de nintildeos recieacuten nacidos es un
procedimiento comuacuten en el manejo que se hace en ellos en las unidades de cuidados
intensivos neonatales (UCIN) ante problemas que ponen en peligro su vida Los primeros en
usar los vasos umbilicales para alguno de los propoacutesitos mencionados fueron Diamond
(1947) y James(1959)16
A pesar de la aparente facilidad para colocar los cateacuteteres umbilicales el procedimiento no
estaacute exento de complicaciones las maacutes frecuentes son infecciones arritmias cardiacas
vasoespasmo trombosis y embolias vasculares taponamiento cardiaco enterocolitis
necrosante necrosis hepaacutetica e hipertensioacuten de la porta1718 Como factor predisponente se
menciona el tiempo de permanencia cateacuteter en el vaso canalizado por lo que se tiene el
cuidado de retirarlo tan pronto como se logre la estabilizacioacuten del nintildeo y sea posible contar
con otra viacutea es por la relativa facilidad de canalizar estos vasos para obtener en ellos
muestras de sangre para administrar soluciones y medicamentos y para hacer mediciones
vascular central
Se informa una mayor frecuencia de las complicaciones infecciosas que generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo19
Epidemiologia
El indicador de infeccioacuten relacionada con cateacuteter recomendado y utilizado en los principales
estudios de vigilancia de infeccioacuten nosocomial es la BRC Su definicioacuten puede variar
teniendo en cuenta aspectos epidemioloacutegicos que incluyen la bacteriemia primaria (origen
desconocido) o cliacutenicos (comprobacioacuten de la BRC con cultivos de microorganismos iguales
en el cateacuteter y en hemocultivos) La CDC y la JCAHO recomiendan que las tasas de BRC se
expresen en episodios de BRC1000 diacuteas de cateacuteter20
Aunque la incidencia de BRC ha disminuido en los uacuteltimos antildeos a unos 56 episodios1000
diacuteas de cateacuteter posiblemente por mejor disentildeo y calidad de los cateacuteteres el nuacutemero de
7
pacientes con BRC sigue siendo elevado Esto es debido al mayor uso de CVC su elevada
manipulacioacuten a los avances en los meacutetodos de diagnoacutestico microbioloacutegico y a la puesta en
marcha de estaacutendares de sistemas de vigilancia de infeccioacuten nosocomial21
Patogenia
Se considera que la patogeacutenesis de las infecciones relacionadas a cateacuteter es compleja y
multifactorial Las bacterias pueden llegar al torrente sanguiacuteneo por dos viacuteas principales
1048707 Pueden migrar desde la piel en la interfase del cateacuteter hasta colocarse en la superficie externa
de eacuteste
1048707 Pueden ingresar a la luz interna del cateacuteter a traveacutes del conector
La migracioacuten de microorganismos presentes en la piel en el sitio de insercioacuten del cateacuteter con
colonizacioacuten de la punta es la ruta mas comuacuten de infeccioacuten en cateacuteteres de corta
permanencia mientras que los cateacuteteres de larga permanencia la contaminacioacuten del tubo de
cateacuteter contribuye sustancialmente a su colonizacioacuten intraluminal22
Se han reconocido numerosas medidas de prevencioacuten efectivas en la reduccioacuten de las
infecciones pero la ejecucioacuten de estas medidas en la praacutectica parece ser el problema maacutes
relevante existiendo gran diferencia entre la mejor evidencia disponible y la praacutectica cliacutenica
Bases Cliacutenicas
Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter fue descrito por primera vez por Maki y cols
en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa de la punta del cateacuteter El criterio de
positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea de los pacientes con recuentos
inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten mientras que todos los casos que
cursaban con bacteriemia tuvieron recuentos superiores a 15 UFC y con frecuencia las
colonias fueron incontables La especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76 Este meacutetodo por
su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de microbiologiacutea y es la
teacutecnica de referencia23
8
En el estado o condicioacuten con relacioacuten a un cateacuteter ya colocado por la cual el cuerpo o parte
de este ha sido invadido por un agente patoacutegeno que en condiciones favorables se
multiplica y produce efectos dantildeinos Una vez que el microorganismo se ha instalado en el
cateacuteter hay un cierto nuacutemero de condiciones subsiguientes posibles ya sean localizadas o
sisteacutemicas La mejor manera de determinar si el cateacuteter es la causa de la infeccioacuten es hacer
un cultivo cuantitativo de cateacuteteres junto con un cultivo perifeacuterico de sangre Usando un
meacutetodo semicuantitativo para un cultivo de cateacuteter las siguientes definciones son aplicables
al diagnoacutestico de infeccioacuten
A Esteacuteril No hay crecimiento
B Contaminacioacuten lt 15 UFC de la punta del cateacuteter
C Localizada
1 Colonizacioacuten gt 15 UFC de la punta del cateacuteter El organismo se presenta sin siacutentomas
2 Infeccioacuten del lugar de insercioacuten gt 15 UFC en cultivos de la punta del cateacuteter
generalmente con siacutentomas externos de infeccioacuten localizada
D Sisteacutemica Bacteremia relacionada con el cateacuteter gt 15 UFC en cultivos de l apunta del
cateacuteter y en cultivos perifeacutericos de sangre positivos con el mismos organismo sin
identificarse otro sitio de infeccioacuten23
Agentes etioloacutegicos de infecciones en cateacuteter umbilical
La bacteremia es una invasioacuten del torrente sanguiacuteneo por bacterias La bacteremia se
desarrolla como resultado del dantildeo externo (la piel) o el interior (el tracto respiratorio el
tracto digestivo) de las barreras del cuerpo El agente causante de la bacteremia en un 71
es el Staphylococcus aureus Una entrada para la sepsis en pacientes con quemaduras
puede ser las heridas cateacuteteres de la vena las viacuteas aeacutereas los pulmones el tracto digestivo
etc24
Staphylococcus aureus9
S aureus forma parte de la familia Microccocaceae geacutenero Staphylococcus el cual contiene
maacutes de 30 especies diferentes Es un coco gram-positivo no moacutevil No forma esporas puede
encontrarse solo en pares en cadenas cortas o en racimos Es un anaerobio facultativo
pero crece mejor en condiciones aerobias25 El S aureus es un microorganismo positivo a la
coagulasa que se aiacutesla con mayor frecuencia en infecciones de piel26 Staphylococcus
aureus es la principal especie patoacutegena de su geacutenero y la causa comuacuten de diversas
infecciones de origen nosocomial y comunitario27
Los Staphylococcus producen muy diversos siacutendromes con manifestaciones cliacutenicas que
van desde una simple puacutestula hasta la sepsis y la muerte28
Escherichia coli y Klebsiella pneumoniae
Escherichia coli es un bacilo que reacciona negativamente a la tincioacuten de Gram es anaerobio
facultativo moacutevil por flagelos peritricos (que rodean su cuerpo) no forma esporas es capaz
de fermentar la glucosa y la lactosa Klebsiella es un geacutenero de bacterias no moacutetiles Gram-
negativas con una prominente caacutepsula de polisacaacuteridos Estas especies patoacutegenas estaacuten
significativamente asociadas a infecciones nosocomiales cuyas alternativas terapeacuteuticas
cada vez son menores por ser importantes fuentes de resistencia antibioacutetica transferible29
Estos patoacutegenos estaacuten asociados con infecciones en infantes prematuros y pacientes de las
unidades de cuidado intensivo son causantes de neumoniacuteas bacteriemias infecciones del
tracto urinario e infecciones de herida quiruacutergica30
10
Planteamiento de problema
iquestCuales son los agentes etioloacutegicos que presentan los pacientes neonatos con cateacuteter
umbilical durante su atencioacuten hospitalaria
11
Justificacioacuten
El uso temprano de cateacuteteres umbilicales es una alternativa segura para el acceso
vascular en el recieacuten nacido sus complicaciones son escasas y no asociadas a la
administracioacuten de medicamentos o al uso de la viacutea enteral
El cateacuteter umbilical en neonatos es muy uacutetil como liacutenea central para administrar
soluciones y medicamentos monitorizar la presioacuten arterial y tomar muestras de gases
arteriales
El siguiente trabajo descriptivo transversal se realiza con el objetivo de analizar las
complicaciones que se presentan con esta praacutectica haciendo especial eacutenfasis en la viacutea
oral concomitante
Es sumamente importante contar con un buen meacutetodo diagnoacutestico para poder enfrentar
las infecciones asociadas a cateacuteter por lo tanto la decisioacuten de retiro de un dispositivo
debe ser evaluada en forma responsable y criteriosa La sola presencia del cuadro
cliacutenico no determina su asociacioacuten con el dispositivo intravascular ya que habitualmente
los signos cliacutenicos son inespeciacuteficos es el diagnoacutestico microbioloacutegico el que
determinaraacute su retiro yo tratamiento seguacuten corresponda
12
Objetivos
Objetivo general
1- Conocer la frecuencia de la flora bacteriana del ombligo del neonato por uso de cateacuteter
durante su atencioacuten hospitalaria
Objetivos especiacuteficos
1- Identificar el geacutenero y especie de los agentes etioloacutegicos presentes en infecciones del
ombligo por uso de cateacuteter umbilical en neonatos durante la atencioacuten hospitalaria
2- Proporcionar informacioacuten al servicio de Vigilancia y Control de Enfermedades Hospitalarias
13
Hipoacutetesis
HI
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
Ho
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical no adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
14
MATERIAL Y METODOS
Lugar de estudio y ubicacioacuten
La investigacioacuten se realizoacute en Veracruz Veracruz Meacutexico que se encuentra ubicado en la
zona centro del estado
Ensayo cliacutenico y tamantildeo de muestra
Para calcular el tamantildeo de la muestra y conformar el grupo de pacientes neonatos con
cateacuteter umbilical se utilizo un intervalo de confianza de 95 De tal manera el tamantildeo de
muestra estimado fue de 80 pacientes pero se eliminaron 30 debido a bajas del Hospital y
por defuncioacuten debido a padecimientos asociados al nacimiento prematuro del neonato
Criterios de inclusioacuten
Se desarrolloacute un estudio transversal descriptivo para identificar pacientes neonatos que
adquirieron alguna infeccioacuten de forma natural y conocer su prevalencia Soacutelo fueron
considerados pacientes neonatos nacidos en el Hospital de Alta Especialidad de Veracruz
del aacuterea de Pediatriacutea con sospecha de infeccioacuten bacteriana que fueran mayores de una
semana de vida y no mayores a 1 antildeo asiacute como tambieacuten que los cateacuteteres umbilicales
fueran retirados en condiciones higieacutenicas apropiadas en base a lo descrito en la SS y sin
antecedentes de alguna infeccioacuten previa Se lograron reunir un grupo de 50 pacientes que
reunioacute las caracteriacutesticas oacuteptimas para este estudio
Criterios de exclusioacuten
15
No se tomaron en consideracioacuten para este estudio los cultivos de cateacuteteres umbilicales que
no fueron retirados en condiciones apropiadas y los cateacuteteres umbilicales de neonatos que
fueron transportados en un medio de cultivo inadecuado Los Pacientes neonatos que
autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una patologiacutea traumaacutetica asociada y
los pacientes neonatos que autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una baja
por defuncioacuten fueron totalmente descartados para fines de esta investigacioacuten
Caracteriacutesticas de la unidad de pediatriacutea
La unidad de pediatriacutea del Hospital Regional de Alta Especialidad estaacute dividida en diferentes
aeacutereas de las cuales para fines de esta investigacioacuten se analizaron pacientes neonatos de
UCIN UCIM y cunero patoloacutegico Debido a que existen pacientes en el aacuterea de pediatriacutea que
ya no cumplen con el reacutegimen de edad estipulado para este estudio
Muestreo para la seleccioacuten de neonatos
Para la seleccioacuten de los neonatos y para reunir el tamantildeo de la muestra necesario para el
estudio se analizaron cateacuteteres de todos los neonatos con sospecha de infeccioacuten bacteriana
a partir de un mes de edad con el uso de medios de Stuart para transportar el cateacuteter Para
este muestreo no se tomoacute en cuenta el sexo Cada tubo de Stuart se identificoacute con el nombre
completo del paciente el servicio de donde se tomo el tipo de muestra fecha y un nuacutemero
de folio con continuidad Las muestras se conservaron a temperatura ambiente durante la
transportacioacuten a su anaacutelisis y luego fueron remitidas al laboratorio para su anaacutelisis
microbioloacutegico
Teacutecnicas de laboratorio
Para el estudio microbioloacutegico del cateacuteter umbilical del neonato fue utilizada la teacutecnica
semicuantitativa de maki Esta teacutecnica ha sido aceptada por la mayoriacutea de los laboratorios
de microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia
16
Proceso de Investigacioacuten
Se trabajo con pacientes nacidos en el Hospital Regional De Alta Especialidad De Veracruz
los cuales tuvieron participacioacuten en esta investigacioacuten hasta la identificacioacuten del agente
etioloacutegico en el cateacuteter umbilical
Se realizo el retiro del cateacuteter umbilical del neonato con una teacutecnica aseacuteptica utilizando
material esteacuteril se desinfecto la piel con alcohol al 10 y se dejo secar con pinza se retiro el
cateacuteter cuidando de no rosar la piel se corto de 3 a 5 cm de la porcioacuten distal y se coloco en
el medio de transporte Stuart para remitirlo al laboratorio de microbiologiacutea para su anaacutelisis
bacterioloacutegico
En el laboratorio se inoculo el cateacuteter umbilical en el agar base sangre por la teacutecnica
semicuantitativa de maki rotando el cateacuteter con ayuda del asa bacterioloacutegica 5 veces Se
incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera O2 Se prosiguioacute con la interpretacioacuten de la morfologiacutea
colonial se resembraron colonias en los medios Agar sal y manitol Agar Mac Conkey y Agar
Biggy para su diferenciacioacuten se Incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera de O2 continuando con
la Interpretacioacuten de la morfologiacutea colonial
Se realizaron tinciones gram para diferenciar Gram positivas de Gram negativas para Gram
positivas como para Gam negativas se procedioacute a la preparacioacuten de paneles Se Incubaron
los paneles Gram en la estufa del Sensititre a 37degC por 24 Hrs en atmosfera de O2 Se
continuacuteo con la lectura de paneles Gram en autoreader Sensititre obteniendo asiacute el
resultado bacteriano en cuanto a geacutenero y especie
17
Material empleado
Paneles Combo Sensititre
Laminas adhesivas
Agua desmineralizada Sensititre
Tira de substrato para prueba de Gram positivos
Aceite mineral
Reactivos para tincioacuten de Gram
Cabezales de dosificacioacuten Sensititre
Estaacutendar de turbidez McFarland 05
Puntas desechables para pipeta
Tubos de ensaye 13 x 100
Tubos de ensaye 10 x 75
Pipetas Automaacuteticas de 5 ųl
Gradilla
Quemador bunsen
Asa bacterioloacutegica
Cajas petri
Goteros
Jaboacuten de manos
Detergente
Toalla
Franela
Alcohol
Cubrebocas
Guantes desechables
Recipiente para material contaminado
Rollo de papel adsorbente
Cloro
Gasas
Bolsas de plaacutestico
Cerillos
Porta objetos
Cubre objetos 18
Papel estraza
Computadora
Impresora
Hojas tamantildeo carta blancas
Medios de cultivo
Agar base sangre
Agar Sal de manitol
Agar Mac Conkey
Biggy
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes ajustado a Sensititre
Medio de transporte Stuart
Equipos de Laboratorio
1 Estufa de cultivo
2 Microscopio
3 Vortex
4 Auto inoculador
5 SISTEMA SENSITITRE
a Autoreader Sensititre
b Estufa Sensititre
Fundamentos
19
Uno de los sistemas maacutes importantes para la identificacioacuten de microorganismos es observar
su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio El material
alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de
los microorganismos es el Cultivo
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son temperatura grado de humedad y presioacuten de oxiacutegeno
adecuadas asiacute como un grado correcto de acidez o alcalinidad Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante
Estos Medios fueron utilizados en esta investigacioacuten para fines de identificacioacuten de
microorganismos bacterianos Cada medio tiene una caracteriacutestica importante para ser
empleado en este proyecto
A continuacioacuten se describen
Medio de Transporte Stuart
Medio semisoacutelido no nutritivo Contiene tioglicolato de sodio el cual provee un ambiente
reducido y es uacutetil para suprimir cambios oxidativos en el medio de transporte y azul de
metileno que es el indicador de oxido reduccioacuten De esta manera se favorece la viabilidad de
los microorganismos durante su enviacuteo al laboratorio
Agar sangre
La infusioacuten de muacutesculo de corazoacuten y la peptona otorgan al medio un alto valor nutritivo que
permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos auacuten de aquellos
nutricionalmente exigentes El cloruro de sodio mantiene el balance osmoacutetico
El agregado de sangre al medio de cultivo en concentracioacuten final de 5-10 aporta
nutrientes para el crecimiento bacteriano y permite detectar hemoacutelisis
Agar Mac Conkey
20
En el medio de cultivo las peptonas aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo
bacteriano la lactosa es el hidrato de carbono fermentable y la mezcla de sales biliares y el
cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora
Gram positiva Por fermentacioacuten de la lactosa disminuye el pH alrededor de la colonia Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro) la absorcioacuten en las colonias y la
precipitacioacuten de las sales biliares Los microorganismos no fermentadores de lactosa
producen colonias incoloras
Agar sal y manitol
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracioacuten salina Los
estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante Los estafilococos coagulasa negativos
presentan colonias rodeadas de una zona roja o puacuterpura En el medio de cultivo el extracto
de carne y la pluripeptona constituyen la fuente de carbono nitroacutegeno vitaminas y
minerales el manitol es el hidrato de carbono fermentable el cloruro de sodio (que se
encuentra en alta concentracioacuten) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora
acompantildeante y el rojo fenol es el indicador de pH Las bacterias que crecen en un medio
con alta concentracioacuten de sal y fermentan el manitol producen aacutecidos con lo que se modifica
el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo Los estafilococos crecen
en altas concentraciones de sal y pueden o no fermentar el manitol Los estafilococos
coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de
una zona del mismo color Los estafilococos que no fermentan el manitol se visualizan como
colonias rojas rodeadas de una zona del mismo color o puacuterpura
Agar Biggy
El Agar Biggy es una modificacioacuten de la foacutermula desarrollada por Nickerson La
diferenciacioacuten estaacute basada en la morfologiacutea colonial y la pigmentacioacuten tiacutepica que se presenta
en este medio La reduccioacuten del sulfito de bismuto se manifiesta en una pigmentacioacuten de la
colonia que en ocasiones difunde en el medio En este medio el extracto de levadura
proporciona vitaminas y aminoaacutecidos La glicina es utilizada para estimular el crecimiento La
dextrosa es la fuente de carbono El indicador sulfito de bismuto actuacutea tambieacuten como un
inhibidor del desarrollo bacteriano El agar es adicionado como agente solidificante
21
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes
El caldo Mueller-Hinton se recomienda como el medio preferido para pruebas de
susceptibilidad de organismos comuacutenmente aislados aeroacutebicos o facultativos de raacutepido
crecimiento El caldo debe tener el contenido apropiado de cationes (Ca++ y Mg++) El pH
debe estar entre 72 y 74 a temperatura ambiente (25ordm C)
22
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram positivas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar glucosa glicerol maltosa manitol B-metilglucoacutesido
ramnosa sacarosa sorbitol trehalosa La produccioacuten de acido reduce la fluorescencia de un
fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substrato fluorogeacutenico el substrato enzimaacutetico esta vinculado a un fluoroacuteforo
que suprime la fluorescencia La ruptura enzimaacutetica de la unioacuten libera el fluoroacuteforo con
capacidad de fluorescencia
3- Pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea y la arginina (requieren la adicioacuten de aceite
mineral esteacuteril) incrementa el pH y la fluorescencia La esculina es una moleacutecula fluorescente
que al hidrolizarse se descompone en productos no fluorescentes
23
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram negativas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar Arabinosa arabitol celobiosa fructosa inositol
maltosa manitol rafinosa sacarosa sorbitol trehalosa xilosa La produccioacuten de acido
reduce la fluorescencia de un fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substratos fluorogeacutenico Cada substrato enzimaacutetico esta vinculado a un
fluoroacuteforo que suprime la fluorescencia La ruptura particioacuten enzimaacutetico de la unioacuten libera el
fluoroacuteforo con capacidad de fluorescencia
3- Pruebas de utilizacioacuten de carbono Agmatina arginina citrato lisina malonato ornitina y
piruvato La descomposicioacuten del substrato provoca un aumento de pH y la fluorescencia
4- Otras pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea incrementa el pH y la fluorescencia La
esculina es una moleacutecula fluorescente que al hidrolizarse se descompone en productos no
fluorescentes Desaminacioacuten del triptofano La formacioacuten de un color oscuro suprime la sentildeal
fluorescente
24
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
BIBLIOGRAFIAS
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10 Restrepo C Natalia Hoyos R Aacutengela ldquoUso de cateacuteteres umbilicales en recieacuten nacidos
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11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
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12Cuerda Compes C Breton Lesmes I Bonada Sanjaume A Planas Vila A ldquoProtocolo para
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18Hogan M Neonatal vascular catheters and their complications Radiol Clin North Am 1999
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19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
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21Brun-Buisson C Suspected central venous catheter-associated infection can the catheter be
safely retained Intensive Care Med 2004 30 1005-1007
22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
relacionadas a cateacuteter vascularrdquo Ministerio de salud 2006 Pp 7-17
23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
Instructor in Pediatrics Harvard Medical School Boston Massachusetts
38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
severe burn trauma Kaunas Lithuania Medicina (Kaunas) 2006 42(7)
25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
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el Hospital Policial de Uruguay 2004 Arch Pediatr Urug 2007 78(1) 41-47
27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
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28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
Infeccioacuten en cateacuteter umbilical
El empleo de los cateacuteteres umbilicales en el tratamiento de nintildeos recieacuten nacidos es un
procedimiento comuacuten en el manejo que se hace en ellos en las unidades de cuidados
intensivos neonatales (UCIN) ante problemas que ponen en peligro su vida Los primeros en
usar los vasos umbilicales para alguno de los propoacutesitos mencionados fueron Diamond
(1947) y James(1959)16
A pesar de la aparente facilidad para colocar los cateacuteteres umbilicales el procedimiento no
estaacute exento de complicaciones las maacutes frecuentes son infecciones arritmias cardiacas
vasoespasmo trombosis y embolias vasculares taponamiento cardiaco enterocolitis
necrosante necrosis hepaacutetica e hipertensioacuten de la porta1718 Como factor predisponente se
menciona el tiempo de permanencia cateacuteter en el vaso canalizado por lo que se tiene el
cuidado de retirarlo tan pronto como se logre la estabilizacioacuten del nintildeo y sea posible contar
con otra viacutea es por la relativa facilidad de canalizar estos vasos para obtener en ellos
muestras de sangre para administrar soluciones y medicamentos y para hacer mediciones
vascular central
Se informa una mayor frecuencia de las complicaciones infecciosas que generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo19
Epidemiologia
El indicador de infeccioacuten relacionada con cateacuteter recomendado y utilizado en los principales
estudios de vigilancia de infeccioacuten nosocomial es la BRC Su definicioacuten puede variar
teniendo en cuenta aspectos epidemioloacutegicos que incluyen la bacteriemia primaria (origen
desconocido) o cliacutenicos (comprobacioacuten de la BRC con cultivos de microorganismos iguales
en el cateacuteter y en hemocultivos) La CDC y la JCAHO recomiendan que las tasas de BRC se
expresen en episodios de BRC1000 diacuteas de cateacuteter20
Aunque la incidencia de BRC ha disminuido en los uacuteltimos antildeos a unos 56 episodios1000
diacuteas de cateacuteter posiblemente por mejor disentildeo y calidad de los cateacuteteres el nuacutemero de
7
pacientes con BRC sigue siendo elevado Esto es debido al mayor uso de CVC su elevada
manipulacioacuten a los avances en los meacutetodos de diagnoacutestico microbioloacutegico y a la puesta en
marcha de estaacutendares de sistemas de vigilancia de infeccioacuten nosocomial21
Patogenia
Se considera que la patogeacutenesis de las infecciones relacionadas a cateacuteter es compleja y
multifactorial Las bacterias pueden llegar al torrente sanguiacuteneo por dos viacuteas principales
1048707 Pueden migrar desde la piel en la interfase del cateacuteter hasta colocarse en la superficie externa
de eacuteste
1048707 Pueden ingresar a la luz interna del cateacuteter a traveacutes del conector
La migracioacuten de microorganismos presentes en la piel en el sitio de insercioacuten del cateacuteter con
colonizacioacuten de la punta es la ruta mas comuacuten de infeccioacuten en cateacuteteres de corta
permanencia mientras que los cateacuteteres de larga permanencia la contaminacioacuten del tubo de
cateacuteter contribuye sustancialmente a su colonizacioacuten intraluminal22
Se han reconocido numerosas medidas de prevencioacuten efectivas en la reduccioacuten de las
infecciones pero la ejecucioacuten de estas medidas en la praacutectica parece ser el problema maacutes
relevante existiendo gran diferencia entre la mejor evidencia disponible y la praacutectica cliacutenica
Bases Cliacutenicas
Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter fue descrito por primera vez por Maki y cols
en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa de la punta del cateacuteter El criterio de
positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea de los pacientes con recuentos
inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten mientras que todos los casos que
cursaban con bacteriemia tuvieron recuentos superiores a 15 UFC y con frecuencia las
colonias fueron incontables La especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76 Este meacutetodo por
su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de microbiologiacutea y es la
teacutecnica de referencia23
8
En el estado o condicioacuten con relacioacuten a un cateacuteter ya colocado por la cual el cuerpo o parte
de este ha sido invadido por un agente patoacutegeno que en condiciones favorables se
multiplica y produce efectos dantildeinos Una vez que el microorganismo se ha instalado en el
cateacuteter hay un cierto nuacutemero de condiciones subsiguientes posibles ya sean localizadas o
sisteacutemicas La mejor manera de determinar si el cateacuteter es la causa de la infeccioacuten es hacer
un cultivo cuantitativo de cateacuteteres junto con un cultivo perifeacuterico de sangre Usando un
meacutetodo semicuantitativo para un cultivo de cateacuteter las siguientes definciones son aplicables
al diagnoacutestico de infeccioacuten
A Esteacuteril No hay crecimiento
B Contaminacioacuten lt 15 UFC de la punta del cateacuteter
C Localizada
1 Colonizacioacuten gt 15 UFC de la punta del cateacuteter El organismo se presenta sin siacutentomas
2 Infeccioacuten del lugar de insercioacuten gt 15 UFC en cultivos de la punta del cateacuteter
generalmente con siacutentomas externos de infeccioacuten localizada
D Sisteacutemica Bacteremia relacionada con el cateacuteter gt 15 UFC en cultivos de l apunta del
cateacuteter y en cultivos perifeacutericos de sangre positivos con el mismos organismo sin
identificarse otro sitio de infeccioacuten23
Agentes etioloacutegicos de infecciones en cateacuteter umbilical
La bacteremia es una invasioacuten del torrente sanguiacuteneo por bacterias La bacteremia se
desarrolla como resultado del dantildeo externo (la piel) o el interior (el tracto respiratorio el
tracto digestivo) de las barreras del cuerpo El agente causante de la bacteremia en un 71
es el Staphylococcus aureus Una entrada para la sepsis en pacientes con quemaduras
puede ser las heridas cateacuteteres de la vena las viacuteas aeacutereas los pulmones el tracto digestivo
etc24
Staphylococcus aureus9
S aureus forma parte de la familia Microccocaceae geacutenero Staphylococcus el cual contiene
maacutes de 30 especies diferentes Es un coco gram-positivo no moacutevil No forma esporas puede
encontrarse solo en pares en cadenas cortas o en racimos Es un anaerobio facultativo
pero crece mejor en condiciones aerobias25 El S aureus es un microorganismo positivo a la
coagulasa que se aiacutesla con mayor frecuencia en infecciones de piel26 Staphylococcus
aureus es la principal especie patoacutegena de su geacutenero y la causa comuacuten de diversas
infecciones de origen nosocomial y comunitario27
Los Staphylococcus producen muy diversos siacutendromes con manifestaciones cliacutenicas que
van desde una simple puacutestula hasta la sepsis y la muerte28
Escherichia coli y Klebsiella pneumoniae
Escherichia coli es un bacilo que reacciona negativamente a la tincioacuten de Gram es anaerobio
facultativo moacutevil por flagelos peritricos (que rodean su cuerpo) no forma esporas es capaz
de fermentar la glucosa y la lactosa Klebsiella es un geacutenero de bacterias no moacutetiles Gram-
negativas con una prominente caacutepsula de polisacaacuteridos Estas especies patoacutegenas estaacuten
significativamente asociadas a infecciones nosocomiales cuyas alternativas terapeacuteuticas
cada vez son menores por ser importantes fuentes de resistencia antibioacutetica transferible29
Estos patoacutegenos estaacuten asociados con infecciones en infantes prematuros y pacientes de las
unidades de cuidado intensivo son causantes de neumoniacuteas bacteriemias infecciones del
tracto urinario e infecciones de herida quiruacutergica30
10
Planteamiento de problema
iquestCuales son los agentes etioloacutegicos que presentan los pacientes neonatos con cateacuteter
umbilical durante su atencioacuten hospitalaria
11
Justificacioacuten
El uso temprano de cateacuteteres umbilicales es una alternativa segura para el acceso
vascular en el recieacuten nacido sus complicaciones son escasas y no asociadas a la
administracioacuten de medicamentos o al uso de la viacutea enteral
El cateacuteter umbilical en neonatos es muy uacutetil como liacutenea central para administrar
soluciones y medicamentos monitorizar la presioacuten arterial y tomar muestras de gases
arteriales
El siguiente trabajo descriptivo transversal se realiza con el objetivo de analizar las
complicaciones que se presentan con esta praacutectica haciendo especial eacutenfasis en la viacutea
oral concomitante
Es sumamente importante contar con un buen meacutetodo diagnoacutestico para poder enfrentar
las infecciones asociadas a cateacuteter por lo tanto la decisioacuten de retiro de un dispositivo
debe ser evaluada en forma responsable y criteriosa La sola presencia del cuadro
cliacutenico no determina su asociacioacuten con el dispositivo intravascular ya que habitualmente
los signos cliacutenicos son inespeciacuteficos es el diagnoacutestico microbioloacutegico el que
determinaraacute su retiro yo tratamiento seguacuten corresponda
12
Objetivos
Objetivo general
1- Conocer la frecuencia de la flora bacteriana del ombligo del neonato por uso de cateacuteter
durante su atencioacuten hospitalaria
Objetivos especiacuteficos
1- Identificar el geacutenero y especie de los agentes etioloacutegicos presentes en infecciones del
ombligo por uso de cateacuteter umbilical en neonatos durante la atencioacuten hospitalaria
2- Proporcionar informacioacuten al servicio de Vigilancia y Control de Enfermedades Hospitalarias
13
Hipoacutetesis
HI
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
Ho
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical no adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
14
MATERIAL Y METODOS
Lugar de estudio y ubicacioacuten
La investigacioacuten se realizoacute en Veracruz Veracruz Meacutexico que se encuentra ubicado en la
zona centro del estado
Ensayo cliacutenico y tamantildeo de muestra
Para calcular el tamantildeo de la muestra y conformar el grupo de pacientes neonatos con
cateacuteter umbilical se utilizo un intervalo de confianza de 95 De tal manera el tamantildeo de
muestra estimado fue de 80 pacientes pero se eliminaron 30 debido a bajas del Hospital y
por defuncioacuten debido a padecimientos asociados al nacimiento prematuro del neonato
Criterios de inclusioacuten
Se desarrolloacute un estudio transversal descriptivo para identificar pacientes neonatos que
adquirieron alguna infeccioacuten de forma natural y conocer su prevalencia Soacutelo fueron
considerados pacientes neonatos nacidos en el Hospital de Alta Especialidad de Veracruz
del aacuterea de Pediatriacutea con sospecha de infeccioacuten bacteriana que fueran mayores de una
semana de vida y no mayores a 1 antildeo asiacute como tambieacuten que los cateacuteteres umbilicales
fueran retirados en condiciones higieacutenicas apropiadas en base a lo descrito en la SS y sin
antecedentes de alguna infeccioacuten previa Se lograron reunir un grupo de 50 pacientes que
reunioacute las caracteriacutesticas oacuteptimas para este estudio
Criterios de exclusioacuten
15
No se tomaron en consideracioacuten para este estudio los cultivos de cateacuteteres umbilicales que
no fueron retirados en condiciones apropiadas y los cateacuteteres umbilicales de neonatos que
fueron transportados en un medio de cultivo inadecuado Los Pacientes neonatos que
autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una patologiacutea traumaacutetica asociada y
los pacientes neonatos que autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una baja
por defuncioacuten fueron totalmente descartados para fines de esta investigacioacuten
Caracteriacutesticas de la unidad de pediatriacutea
La unidad de pediatriacutea del Hospital Regional de Alta Especialidad estaacute dividida en diferentes
aeacutereas de las cuales para fines de esta investigacioacuten se analizaron pacientes neonatos de
UCIN UCIM y cunero patoloacutegico Debido a que existen pacientes en el aacuterea de pediatriacutea que
ya no cumplen con el reacutegimen de edad estipulado para este estudio
Muestreo para la seleccioacuten de neonatos
Para la seleccioacuten de los neonatos y para reunir el tamantildeo de la muestra necesario para el
estudio se analizaron cateacuteteres de todos los neonatos con sospecha de infeccioacuten bacteriana
a partir de un mes de edad con el uso de medios de Stuart para transportar el cateacuteter Para
este muestreo no se tomoacute en cuenta el sexo Cada tubo de Stuart se identificoacute con el nombre
completo del paciente el servicio de donde se tomo el tipo de muestra fecha y un nuacutemero
de folio con continuidad Las muestras se conservaron a temperatura ambiente durante la
transportacioacuten a su anaacutelisis y luego fueron remitidas al laboratorio para su anaacutelisis
microbioloacutegico
Teacutecnicas de laboratorio
Para el estudio microbioloacutegico del cateacuteter umbilical del neonato fue utilizada la teacutecnica
semicuantitativa de maki Esta teacutecnica ha sido aceptada por la mayoriacutea de los laboratorios
de microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia
16
Proceso de Investigacioacuten
Se trabajo con pacientes nacidos en el Hospital Regional De Alta Especialidad De Veracruz
los cuales tuvieron participacioacuten en esta investigacioacuten hasta la identificacioacuten del agente
etioloacutegico en el cateacuteter umbilical
Se realizo el retiro del cateacuteter umbilical del neonato con una teacutecnica aseacuteptica utilizando
material esteacuteril se desinfecto la piel con alcohol al 10 y se dejo secar con pinza se retiro el
cateacuteter cuidando de no rosar la piel se corto de 3 a 5 cm de la porcioacuten distal y se coloco en
el medio de transporte Stuart para remitirlo al laboratorio de microbiologiacutea para su anaacutelisis
bacterioloacutegico
En el laboratorio se inoculo el cateacuteter umbilical en el agar base sangre por la teacutecnica
semicuantitativa de maki rotando el cateacuteter con ayuda del asa bacterioloacutegica 5 veces Se
incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera O2 Se prosiguioacute con la interpretacioacuten de la morfologiacutea
colonial se resembraron colonias en los medios Agar sal y manitol Agar Mac Conkey y Agar
Biggy para su diferenciacioacuten se Incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera de O2 continuando con
la Interpretacioacuten de la morfologiacutea colonial
Se realizaron tinciones gram para diferenciar Gram positivas de Gram negativas para Gram
positivas como para Gam negativas se procedioacute a la preparacioacuten de paneles Se Incubaron
los paneles Gram en la estufa del Sensititre a 37degC por 24 Hrs en atmosfera de O2 Se
continuacuteo con la lectura de paneles Gram en autoreader Sensititre obteniendo asiacute el
resultado bacteriano en cuanto a geacutenero y especie
17
Material empleado
Paneles Combo Sensititre
Laminas adhesivas
Agua desmineralizada Sensititre
Tira de substrato para prueba de Gram positivos
Aceite mineral
Reactivos para tincioacuten de Gram
Cabezales de dosificacioacuten Sensititre
Estaacutendar de turbidez McFarland 05
Puntas desechables para pipeta
Tubos de ensaye 13 x 100
Tubos de ensaye 10 x 75
Pipetas Automaacuteticas de 5 ųl
Gradilla
Quemador bunsen
Asa bacterioloacutegica
Cajas petri
Goteros
Jaboacuten de manos
Detergente
Toalla
Franela
Alcohol
Cubrebocas
Guantes desechables
Recipiente para material contaminado
Rollo de papel adsorbente
Cloro
Gasas
Bolsas de plaacutestico
Cerillos
Porta objetos
Cubre objetos 18
Papel estraza
Computadora
Impresora
Hojas tamantildeo carta blancas
Medios de cultivo
Agar base sangre
Agar Sal de manitol
Agar Mac Conkey
Biggy
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes ajustado a Sensititre
Medio de transporte Stuart
Equipos de Laboratorio
1 Estufa de cultivo
2 Microscopio
3 Vortex
4 Auto inoculador
5 SISTEMA SENSITITRE
a Autoreader Sensititre
b Estufa Sensititre
Fundamentos
19
Uno de los sistemas maacutes importantes para la identificacioacuten de microorganismos es observar
su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio El material
alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de
los microorganismos es el Cultivo
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son temperatura grado de humedad y presioacuten de oxiacutegeno
adecuadas asiacute como un grado correcto de acidez o alcalinidad Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante
Estos Medios fueron utilizados en esta investigacioacuten para fines de identificacioacuten de
microorganismos bacterianos Cada medio tiene una caracteriacutestica importante para ser
empleado en este proyecto
A continuacioacuten se describen
Medio de Transporte Stuart
Medio semisoacutelido no nutritivo Contiene tioglicolato de sodio el cual provee un ambiente
reducido y es uacutetil para suprimir cambios oxidativos en el medio de transporte y azul de
metileno que es el indicador de oxido reduccioacuten De esta manera se favorece la viabilidad de
los microorganismos durante su enviacuteo al laboratorio
Agar sangre
La infusioacuten de muacutesculo de corazoacuten y la peptona otorgan al medio un alto valor nutritivo que
permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos auacuten de aquellos
nutricionalmente exigentes El cloruro de sodio mantiene el balance osmoacutetico
El agregado de sangre al medio de cultivo en concentracioacuten final de 5-10 aporta
nutrientes para el crecimiento bacteriano y permite detectar hemoacutelisis
Agar Mac Conkey
20
En el medio de cultivo las peptonas aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo
bacteriano la lactosa es el hidrato de carbono fermentable y la mezcla de sales biliares y el
cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora
Gram positiva Por fermentacioacuten de la lactosa disminuye el pH alrededor de la colonia Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro) la absorcioacuten en las colonias y la
precipitacioacuten de las sales biliares Los microorganismos no fermentadores de lactosa
producen colonias incoloras
Agar sal y manitol
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracioacuten salina Los
estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante Los estafilococos coagulasa negativos
presentan colonias rodeadas de una zona roja o puacuterpura En el medio de cultivo el extracto
de carne y la pluripeptona constituyen la fuente de carbono nitroacutegeno vitaminas y
minerales el manitol es el hidrato de carbono fermentable el cloruro de sodio (que se
encuentra en alta concentracioacuten) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora
acompantildeante y el rojo fenol es el indicador de pH Las bacterias que crecen en un medio
con alta concentracioacuten de sal y fermentan el manitol producen aacutecidos con lo que se modifica
el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo Los estafilococos crecen
en altas concentraciones de sal y pueden o no fermentar el manitol Los estafilococos
coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de
una zona del mismo color Los estafilococos que no fermentan el manitol se visualizan como
colonias rojas rodeadas de una zona del mismo color o puacuterpura
Agar Biggy
El Agar Biggy es una modificacioacuten de la foacutermula desarrollada por Nickerson La
diferenciacioacuten estaacute basada en la morfologiacutea colonial y la pigmentacioacuten tiacutepica que se presenta
en este medio La reduccioacuten del sulfito de bismuto se manifiesta en una pigmentacioacuten de la
colonia que en ocasiones difunde en el medio En este medio el extracto de levadura
proporciona vitaminas y aminoaacutecidos La glicina es utilizada para estimular el crecimiento La
dextrosa es la fuente de carbono El indicador sulfito de bismuto actuacutea tambieacuten como un
inhibidor del desarrollo bacteriano El agar es adicionado como agente solidificante
21
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes
El caldo Mueller-Hinton se recomienda como el medio preferido para pruebas de
susceptibilidad de organismos comuacutenmente aislados aeroacutebicos o facultativos de raacutepido
crecimiento El caldo debe tener el contenido apropiado de cationes (Ca++ y Mg++) El pH
debe estar entre 72 y 74 a temperatura ambiente (25ordm C)
22
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram positivas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar glucosa glicerol maltosa manitol B-metilglucoacutesido
ramnosa sacarosa sorbitol trehalosa La produccioacuten de acido reduce la fluorescencia de un
fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substrato fluorogeacutenico el substrato enzimaacutetico esta vinculado a un fluoroacuteforo
que suprime la fluorescencia La ruptura enzimaacutetica de la unioacuten libera el fluoroacuteforo con
capacidad de fluorescencia
3- Pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea y la arginina (requieren la adicioacuten de aceite
mineral esteacuteril) incrementa el pH y la fluorescencia La esculina es una moleacutecula fluorescente
que al hidrolizarse se descompone en productos no fluorescentes
23
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram negativas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar Arabinosa arabitol celobiosa fructosa inositol
maltosa manitol rafinosa sacarosa sorbitol trehalosa xilosa La produccioacuten de acido
reduce la fluorescencia de un fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substratos fluorogeacutenico Cada substrato enzimaacutetico esta vinculado a un
fluoroacuteforo que suprime la fluorescencia La ruptura particioacuten enzimaacutetico de la unioacuten libera el
fluoroacuteforo con capacidad de fluorescencia
3- Pruebas de utilizacioacuten de carbono Agmatina arginina citrato lisina malonato ornitina y
piruvato La descomposicioacuten del substrato provoca un aumento de pH y la fluorescencia
4- Otras pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea incrementa el pH y la fluorescencia La
esculina es una moleacutecula fluorescente que al hidrolizarse se descompone en productos no
fluorescentes Desaminacioacuten del triptofano La formacioacuten de un color oscuro suprime la sentildeal
fluorescente
24
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
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productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
pacientes con BRC sigue siendo elevado Esto es debido al mayor uso de CVC su elevada
manipulacioacuten a los avances en los meacutetodos de diagnoacutestico microbioloacutegico y a la puesta en
marcha de estaacutendares de sistemas de vigilancia de infeccioacuten nosocomial21
Patogenia
Se considera que la patogeacutenesis de las infecciones relacionadas a cateacuteter es compleja y
multifactorial Las bacterias pueden llegar al torrente sanguiacuteneo por dos viacuteas principales
1048707 Pueden migrar desde la piel en la interfase del cateacuteter hasta colocarse en la superficie externa
de eacuteste
1048707 Pueden ingresar a la luz interna del cateacuteter a traveacutes del conector
La migracioacuten de microorganismos presentes en la piel en el sitio de insercioacuten del cateacuteter con
colonizacioacuten de la punta es la ruta mas comuacuten de infeccioacuten en cateacuteteres de corta
permanencia mientras que los cateacuteteres de larga permanencia la contaminacioacuten del tubo de
cateacuteter contribuye sustancialmente a su colonizacioacuten intraluminal22
Se han reconocido numerosas medidas de prevencioacuten efectivas en la reduccioacuten de las
infecciones pero la ejecucioacuten de estas medidas en la praacutectica parece ser el problema maacutes
relevante existiendo gran diferencia entre la mejor evidencia disponible y la praacutectica cliacutenica
Bases Cliacutenicas
Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter fue descrito por primera vez por Maki y cols
en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa de la punta del cateacuteter El criterio de
positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea de los pacientes con recuentos
inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten mientras que todos los casos que
cursaban con bacteriemia tuvieron recuentos superiores a 15 UFC y con frecuencia las
colonias fueron incontables La especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76 Este meacutetodo por
su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de microbiologiacutea y es la
teacutecnica de referencia23
8
En el estado o condicioacuten con relacioacuten a un cateacuteter ya colocado por la cual el cuerpo o parte
de este ha sido invadido por un agente patoacutegeno que en condiciones favorables se
multiplica y produce efectos dantildeinos Una vez que el microorganismo se ha instalado en el
cateacuteter hay un cierto nuacutemero de condiciones subsiguientes posibles ya sean localizadas o
sisteacutemicas La mejor manera de determinar si el cateacuteter es la causa de la infeccioacuten es hacer
un cultivo cuantitativo de cateacuteteres junto con un cultivo perifeacuterico de sangre Usando un
meacutetodo semicuantitativo para un cultivo de cateacuteter las siguientes definciones son aplicables
al diagnoacutestico de infeccioacuten
A Esteacuteril No hay crecimiento
B Contaminacioacuten lt 15 UFC de la punta del cateacuteter
C Localizada
1 Colonizacioacuten gt 15 UFC de la punta del cateacuteter El organismo se presenta sin siacutentomas
2 Infeccioacuten del lugar de insercioacuten gt 15 UFC en cultivos de la punta del cateacuteter
generalmente con siacutentomas externos de infeccioacuten localizada
D Sisteacutemica Bacteremia relacionada con el cateacuteter gt 15 UFC en cultivos de l apunta del
cateacuteter y en cultivos perifeacutericos de sangre positivos con el mismos organismo sin
identificarse otro sitio de infeccioacuten23
Agentes etioloacutegicos de infecciones en cateacuteter umbilical
La bacteremia es una invasioacuten del torrente sanguiacuteneo por bacterias La bacteremia se
desarrolla como resultado del dantildeo externo (la piel) o el interior (el tracto respiratorio el
tracto digestivo) de las barreras del cuerpo El agente causante de la bacteremia en un 71
es el Staphylococcus aureus Una entrada para la sepsis en pacientes con quemaduras
puede ser las heridas cateacuteteres de la vena las viacuteas aeacutereas los pulmones el tracto digestivo
etc24
Staphylococcus aureus9
S aureus forma parte de la familia Microccocaceae geacutenero Staphylococcus el cual contiene
maacutes de 30 especies diferentes Es un coco gram-positivo no moacutevil No forma esporas puede
encontrarse solo en pares en cadenas cortas o en racimos Es un anaerobio facultativo
pero crece mejor en condiciones aerobias25 El S aureus es un microorganismo positivo a la
coagulasa que se aiacutesla con mayor frecuencia en infecciones de piel26 Staphylococcus
aureus es la principal especie patoacutegena de su geacutenero y la causa comuacuten de diversas
infecciones de origen nosocomial y comunitario27
Los Staphylococcus producen muy diversos siacutendromes con manifestaciones cliacutenicas que
van desde una simple puacutestula hasta la sepsis y la muerte28
Escherichia coli y Klebsiella pneumoniae
Escherichia coli es un bacilo que reacciona negativamente a la tincioacuten de Gram es anaerobio
facultativo moacutevil por flagelos peritricos (que rodean su cuerpo) no forma esporas es capaz
de fermentar la glucosa y la lactosa Klebsiella es un geacutenero de bacterias no moacutetiles Gram-
negativas con una prominente caacutepsula de polisacaacuteridos Estas especies patoacutegenas estaacuten
significativamente asociadas a infecciones nosocomiales cuyas alternativas terapeacuteuticas
cada vez son menores por ser importantes fuentes de resistencia antibioacutetica transferible29
Estos patoacutegenos estaacuten asociados con infecciones en infantes prematuros y pacientes de las
unidades de cuidado intensivo son causantes de neumoniacuteas bacteriemias infecciones del
tracto urinario e infecciones de herida quiruacutergica30
10
Planteamiento de problema
iquestCuales son los agentes etioloacutegicos que presentan los pacientes neonatos con cateacuteter
umbilical durante su atencioacuten hospitalaria
11
Justificacioacuten
El uso temprano de cateacuteteres umbilicales es una alternativa segura para el acceso
vascular en el recieacuten nacido sus complicaciones son escasas y no asociadas a la
administracioacuten de medicamentos o al uso de la viacutea enteral
El cateacuteter umbilical en neonatos es muy uacutetil como liacutenea central para administrar
soluciones y medicamentos monitorizar la presioacuten arterial y tomar muestras de gases
arteriales
El siguiente trabajo descriptivo transversal se realiza con el objetivo de analizar las
complicaciones que se presentan con esta praacutectica haciendo especial eacutenfasis en la viacutea
oral concomitante
Es sumamente importante contar con un buen meacutetodo diagnoacutestico para poder enfrentar
las infecciones asociadas a cateacuteter por lo tanto la decisioacuten de retiro de un dispositivo
debe ser evaluada en forma responsable y criteriosa La sola presencia del cuadro
cliacutenico no determina su asociacioacuten con el dispositivo intravascular ya que habitualmente
los signos cliacutenicos son inespeciacuteficos es el diagnoacutestico microbioloacutegico el que
determinaraacute su retiro yo tratamiento seguacuten corresponda
12
Objetivos
Objetivo general
1- Conocer la frecuencia de la flora bacteriana del ombligo del neonato por uso de cateacuteter
durante su atencioacuten hospitalaria
Objetivos especiacuteficos
1- Identificar el geacutenero y especie de los agentes etioloacutegicos presentes en infecciones del
ombligo por uso de cateacuteter umbilical en neonatos durante la atencioacuten hospitalaria
2- Proporcionar informacioacuten al servicio de Vigilancia y Control de Enfermedades Hospitalarias
13
Hipoacutetesis
HI
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
Ho
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical no adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
14
MATERIAL Y METODOS
Lugar de estudio y ubicacioacuten
La investigacioacuten se realizoacute en Veracruz Veracruz Meacutexico que se encuentra ubicado en la
zona centro del estado
Ensayo cliacutenico y tamantildeo de muestra
Para calcular el tamantildeo de la muestra y conformar el grupo de pacientes neonatos con
cateacuteter umbilical se utilizo un intervalo de confianza de 95 De tal manera el tamantildeo de
muestra estimado fue de 80 pacientes pero se eliminaron 30 debido a bajas del Hospital y
por defuncioacuten debido a padecimientos asociados al nacimiento prematuro del neonato
Criterios de inclusioacuten
Se desarrolloacute un estudio transversal descriptivo para identificar pacientes neonatos que
adquirieron alguna infeccioacuten de forma natural y conocer su prevalencia Soacutelo fueron
considerados pacientes neonatos nacidos en el Hospital de Alta Especialidad de Veracruz
del aacuterea de Pediatriacutea con sospecha de infeccioacuten bacteriana que fueran mayores de una
semana de vida y no mayores a 1 antildeo asiacute como tambieacuten que los cateacuteteres umbilicales
fueran retirados en condiciones higieacutenicas apropiadas en base a lo descrito en la SS y sin
antecedentes de alguna infeccioacuten previa Se lograron reunir un grupo de 50 pacientes que
reunioacute las caracteriacutesticas oacuteptimas para este estudio
Criterios de exclusioacuten
15
No se tomaron en consideracioacuten para este estudio los cultivos de cateacuteteres umbilicales que
no fueron retirados en condiciones apropiadas y los cateacuteteres umbilicales de neonatos que
fueron transportados en un medio de cultivo inadecuado Los Pacientes neonatos que
autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una patologiacutea traumaacutetica asociada y
los pacientes neonatos que autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una baja
por defuncioacuten fueron totalmente descartados para fines de esta investigacioacuten
Caracteriacutesticas de la unidad de pediatriacutea
La unidad de pediatriacutea del Hospital Regional de Alta Especialidad estaacute dividida en diferentes
aeacutereas de las cuales para fines de esta investigacioacuten se analizaron pacientes neonatos de
UCIN UCIM y cunero patoloacutegico Debido a que existen pacientes en el aacuterea de pediatriacutea que
ya no cumplen con el reacutegimen de edad estipulado para este estudio
Muestreo para la seleccioacuten de neonatos
Para la seleccioacuten de los neonatos y para reunir el tamantildeo de la muestra necesario para el
estudio se analizaron cateacuteteres de todos los neonatos con sospecha de infeccioacuten bacteriana
a partir de un mes de edad con el uso de medios de Stuart para transportar el cateacuteter Para
este muestreo no se tomoacute en cuenta el sexo Cada tubo de Stuart se identificoacute con el nombre
completo del paciente el servicio de donde se tomo el tipo de muestra fecha y un nuacutemero
de folio con continuidad Las muestras se conservaron a temperatura ambiente durante la
transportacioacuten a su anaacutelisis y luego fueron remitidas al laboratorio para su anaacutelisis
microbioloacutegico
Teacutecnicas de laboratorio
Para el estudio microbioloacutegico del cateacuteter umbilical del neonato fue utilizada la teacutecnica
semicuantitativa de maki Esta teacutecnica ha sido aceptada por la mayoriacutea de los laboratorios
de microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia
16
Proceso de Investigacioacuten
Se trabajo con pacientes nacidos en el Hospital Regional De Alta Especialidad De Veracruz
los cuales tuvieron participacioacuten en esta investigacioacuten hasta la identificacioacuten del agente
etioloacutegico en el cateacuteter umbilical
Se realizo el retiro del cateacuteter umbilical del neonato con una teacutecnica aseacuteptica utilizando
material esteacuteril se desinfecto la piel con alcohol al 10 y se dejo secar con pinza se retiro el
cateacuteter cuidando de no rosar la piel se corto de 3 a 5 cm de la porcioacuten distal y se coloco en
el medio de transporte Stuart para remitirlo al laboratorio de microbiologiacutea para su anaacutelisis
bacterioloacutegico
En el laboratorio se inoculo el cateacuteter umbilical en el agar base sangre por la teacutecnica
semicuantitativa de maki rotando el cateacuteter con ayuda del asa bacterioloacutegica 5 veces Se
incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera O2 Se prosiguioacute con la interpretacioacuten de la morfologiacutea
colonial se resembraron colonias en los medios Agar sal y manitol Agar Mac Conkey y Agar
Biggy para su diferenciacioacuten se Incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera de O2 continuando con
la Interpretacioacuten de la morfologiacutea colonial
Se realizaron tinciones gram para diferenciar Gram positivas de Gram negativas para Gram
positivas como para Gam negativas se procedioacute a la preparacioacuten de paneles Se Incubaron
los paneles Gram en la estufa del Sensititre a 37degC por 24 Hrs en atmosfera de O2 Se
continuacuteo con la lectura de paneles Gram en autoreader Sensititre obteniendo asiacute el
resultado bacteriano en cuanto a geacutenero y especie
17
Material empleado
Paneles Combo Sensititre
Laminas adhesivas
Agua desmineralizada Sensititre
Tira de substrato para prueba de Gram positivos
Aceite mineral
Reactivos para tincioacuten de Gram
Cabezales de dosificacioacuten Sensititre
Estaacutendar de turbidez McFarland 05
Puntas desechables para pipeta
Tubos de ensaye 13 x 100
Tubos de ensaye 10 x 75
Pipetas Automaacuteticas de 5 ųl
Gradilla
Quemador bunsen
Asa bacterioloacutegica
Cajas petri
Goteros
Jaboacuten de manos
Detergente
Toalla
Franela
Alcohol
Cubrebocas
Guantes desechables
Recipiente para material contaminado
Rollo de papel adsorbente
Cloro
Gasas
Bolsas de plaacutestico
Cerillos
Porta objetos
Cubre objetos 18
Papel estraza
Computadora
Impresora
Hojas tamantildeo carta blancas
Medios de cultivo
Agar base sangre
Agar Sal de manitol
Agar Mac Conkey
Biggy
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes ajustado a Sensititre
Medio de transporte Stuart
Equipos de Laboratorio
1 Estufa de cultivo
2 Microscopio
3 Vortex
4 Auto inoculador
5 SISTEMA SENSITITRE
a Autoreader Sensititre
b Estufa Sensititre
Fundamentos
19
Uno de los sistemas maacutes importantes para la identificacioacuten de microorganismos es observar
su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio El material
alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de
los microorganismos es el Cultivo
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son temperatura grado de humedad y presioacuten de oxiacutegeno
adecuadas asiacute como un grado correcto de acidez o alcalinidad Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante
Estos Medios fueron utilizados en esta investigacioacuten para fines de identificacioacuten de
microorganismos bacterianos Cada medio tiene una caracteriacutestica importante para ser
empleado en este proyecto
A continuacioacuten se describen
Medio de Transporte Stuart
Medio semisoacutelido no nutritivo Contiene tioglicolato de sodio el cual provee un ambiente
reducido y es uacutetil para suprimir cambios oxidativos en el medio de transporte y azul de
metileno que es el indicador de oxido reduccioacuten De esta manera se favorece la viabilidad de
los microorganismos durante su enviacuteo al laboratorio
Agar sangre
La infusioacuten de muacutesculo de corazoacuten y la peptona otorgan al medio un alto valor nutritivo que
permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos auacuten de aquellos
nutricionalmente exigentes El cloruro de sodio mantiene el balance osmoacutetico
El agregado de sangre al medio de cultivo en concentracioacuten final de 5-10 aporta
nutrientes para el crecimiento bacteriano y permite detectar hemoacutelisis
Agar Mac Conkey
20
En el medio de cultivo las peptonas aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo
bacteriano la lactosa es el hidrato de carbono fermentable y la mezcla de sales biliares y el
cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora
Gram positiva Por fermentacioacuten de la lactosa disminuye el pH alrededor de la colonia Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro) la absorcioacuten en las colonias y la
precipitacioacuten de las sales biliares Los microorganismos no fermentadores de lactosa
producen colonias incoloras
Agar sal y manitol
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracioacuten salina Los
estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante Los estafilococos coagulasa negativos
presentan colonias rodeadas de una zona roja o puacuterpura En el medio de cultivo el extracto
de carne y la pluripeptona constituyen la fuente de carbono nitroacutegeno vitaminas y
minerales el manitol es el hidrato de carbono fermentable el cloruro de sodio (que se
encuentra en alta concentracioacuten) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora
acompantildeante y el rojo fenol es el indicador de pH Las bacterias que crecen en un medio
con alta concentracioacuten de sal y fermentan el manitol producen aacutecidos con lo que se modifica
el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo Los estafilococos crecen
en altas concentraciones de sal y pueden o no fermentar el manitol Los estafilococos
coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de
una zona del mismo color Los estafilococos que no fermentan el manitol se visualizan como
colonias rojas rodeadas de una zona del mismo color o puacuterpura
Agar Biggy
El Agar Biggy es una modificacioacuten de la foacutermula desarrollada por Nickerson La
diferenciacioacuten estaacute basada en la morfologiacutea colonial y la pigmentacioacuten tiacutepica que se presenta
en este medio La reduccioacuten del sulfito de bismuto se manifiesta en una pigmentacioacuten de la
colonia que en ocasiones difunde en el medio En este medio el extracto de levadura
proporciona vitaminas y aminoaacutecidos La glicina es utilizada para estimular el crecimiento La
dextrosa es la fuente de carbono El indicador sulfito de bismuto actuacutea tambieacuten como un
inhibidor del desarrollo bacteriano El agar es adicionado como agente solidificante
21
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes
El caldo Mueller-Hinton se recomienda como el medio preferido para pruebas de
susceptibilidad de organismos comuacutenmente aislados aeroacutebicos o facultativos de raacutepido
crecimiento El caldo debe tener el contenido apropiado de cationes (Ca++ y Mg++) El pH
debe estar entre 72 y 74 a temperatura ambiente (25ordm C)
22
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram positivas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar glucosa glicerol maltosa manitol B-metilglucoacutesido
ramnosa sacarosa sorbitol trehalosa La produccioacuten de acido reduce la fluorescencia de un
fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substrato fluorogeacutenico el substrato enzimaacutetico esta vinculado a un fluoroacuteforo
que suprime la fluorescencia La ruptura enzimaacutetica de la unioacuten libera el fluoroacuteforo con
capacidad de fluorescencia
3- Pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea y la arginina (requieren la adicioacuten de aceite
mineral esteacuteril) incrementa el pH y la fluorescencia La esculina es una moleacutecula fluorescente
que al hidrolizarse se descompone en productos no fluorescentes
23
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram negativas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar Arabinosa arabitol celobiosa fructosa inositol
maltosa manitol rafinosa sacarosa sorbitol trehalosa xilosa La produccioacuten de acido
reduce la fluorescencia de un fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substratos fluorogeacutenico Cada substrato enzimaacutetico esta vinculado a un
fluoroacuteforo que suprime la fluorescencia La ruptura particioacuten enzimaacutetico de la unioacuten libera el
fluoroacuteforo con capacidad de fluorescencia
3- Pruebas de utilizacioacuten de carbono Agmatina arginina citrato lisina malonato ornitina y
piruvato La descomposicioacuten del substrato provoca un aumento de pH y la fluorescencia
4- Otras pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea incrementa el pH y la fluorescencia La
esculina es una moleacutecula fluorescente que al hidrolizarse se descompone en productos no
fluorescentes Desaminacioacuten del triptofano La formacioacuten de un color oscuro suprime la sentildeal
fluorescente
24
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
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10 Restrepo C Natalia Hoyos R Aacutengela ldquoUso de cateacuteteres umbilicales en recieacuten nacidos
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11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
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19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
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22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
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23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
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38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
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colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
En el estado o condicioacuten con relacioacuten a un cateacuteter ya colocado por la cual el cuerpo o parte
de este ha sido invadido por un agente patoacutegeno que en condiciones favorables se
multiplica y produce efectos dantildeinos Una vez que el microorganismo se ha instalado en el
cateacuteter hay un cierto nuacutemero de condiciones subsiguientes posibles ya sean localizadas o
sisteacutemicas La mejor manera de determinar si el cateacuteter es la causa de la infeccioacuten es hacer
un cultivo cuantitativo de cateacuteteres junto con un cultivo perifeacuterico de sangre Usando un
meacutetodo semicuantitativo para un cultivo de cateacuteter las siguientes definciones son aplicables
al diagnoacutestico de infeccioacuten
A Esteacuteril No hay crecimiento
B Contaminacioacuten lt 15 UFC de la punta del cateacuteter
C Localizada
1 Colonizacioacuten gt 15 UFC de la punta del cateacuteter El organismo se presenta sin siacutentomas
2 Infeccioacuten del lugar de insercioacuten gt 15 UFC en cultivos de la punta del cateacuteter
generalmente con siacutentomas externos de infeccioacuten localizada
D Sisteacutemica Bacteremia relacionada con el cateacuteter gt 15 UFC en cultivos de l apunta del
cateacuteter y en cultivos perifeacutericos de sangre positivos con el mismos organismo sin
identificarse otro sitio de infeccioacuten23
Agentes etioloacutegicos de infecciones en cateacuteter umbilical
La bacteremia es una invasioacuten del torrente sanguiacuteneo por bacterias La bacteremia se
desarrolla como resultado del dantildeo externo (la piel) o el interior (el tracto respiratorio el
tracto digestivo) de las barreras del cuerpo El agente causante de la bacteremia en un 71
es el Staphylococcus aureus Una entrada para la sepsis en pacientes con quemaduras
puede ser las heridas cateacuteteres de la vena las viacuteas aeacutereas los pulmones el tracto digestivo
etc24
Staphylococcus aureus9
S aureus forma parte de la familia Microccocaceae geacutenero Staphylococcus el cual contiene
maacutes de 30 especies diferentes Es un coco gram-positivo no moacutevil No forma esporas puede
encontrarse solo en pares en cadenas cortas o en racimos Es un anaerobio facultativo
pero crece mejor en condiciones aerobias25 El S aureus es un microorganismo positivo a la
coagulasa que se aiacutesla con mayor frecuencia en infecciones de piel26 Staphylococcus
aureus es la principal especie patoacutegena de su geacutenero y la causa comuacuten de diversas
infecciones de origen nosocomial y comunitario27
Los Staphylococcus producen muy diversos siacutendromes con manifestaciones cliacutenicas que
van desde una simple puacutestula hasta la sepsis y la muerte28
Escherichia coli y Klebsiella pneumoniae
Escherichia coli es un bacilo que reacciona negativamente a la tincioacuten de Gram es anaerobio
facultativo moacutevil por flagelos peritricos (que rodean su cuerpo) no forma esporas es capaz
de fermentar la glucosa y la lactosa Klebsiella es un geacutenero de bacterias no moacutetiles Gram-
negativas con una prominente caacutepsula de polisacaacuteridos Estas especies patoacutegenas estaacuten
significativamente asociadas a infecciones nosocomiales cuyas alternativas terapeacuteuticas
cada vez son menores por ser importantes fuentes de resistencia antibioacutetica transferible29
Estos patoacutegenos estaacuten asociados con infecciones en infantes prematuros y pacientes de las
unidades de cuidado intensivo son causantes de neumoniacuteas bacteriemias infecciones del
tracto urinario e infecciones de herida quiruacutergica30
10
Planteamiento de problema
iquestCuales son los agentes etioloacutegicos que presentan los pacientes neonatos con cateacuteter
umbilical durante su atencioacuten hospitalaria
11
Justificacioacuten
El uso temprano de cateacuteteres umbilicales es una alternativa segura para el acceso
vascular en el recieacuten nacido sus complicaciones son escasas y no asociadas a la
administracioacuten de medicamentos o al uso de la viacutea enteral
El cateacuteter umbilical en neonatos es muy uacutetil como liacutenea central para administrar
soluciones y medicamentos monitorizar la presioacuten arterial y tomar muestras de gases
arteriales
El siguiente trabajo descriptivo transversal se realiza con el objetivo de analizar las
complicaciones que se presentan con esta praacutectica haciendo especial eacutenfasis en la viacutea
oral concomitante
Es sumamente importante contar con un buen meacutetodo diagnoacutestico para poder enfrentar
las infecciones asociadas a cateacuteter por lo tanto la decisioacuten de retiro de un dispositivo
debe ser evaluada en forma responsable y criteriosa La sola presencia del cuadro
cliacutenico no determina su asociacioacuten con el dispositivo intravascular ya que habitualmente
los signos cliacutenicos son inespeciacuteficos es el diagnoacutestico microbioloacutegico el que
determinaraacute su retiro yo tratamiento seguacuten corresponda
12
Objetivos
Objetivo general
1- Conocer la frecuencia de la flora bacteriana del ombligo del neonato por uso de cateacuteter
durante su atencioacuten hospitalaria
Objetivos especiacuteficos
1- Identificar el geacutenero y especie de los agentes etioloacutegicos presentes en infecciones del
ombligo por uso de cateacuteter umbilical en neonatos durante la atencioacuten hospitalaria
2- Proporcionar informacioacuten al servicio de Vigilancia y Control de Enfermedades Hospitalarias
13
Hipoacutetesis
HI
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
Ho
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical no adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
14
MATERIAL Y METODOS
Lugar de estudio y ubicacioacuten
La investigacioacuten se realizoacute en Veracruz Veracruz Meacutexico que se encuentra ubicado en la
zona centro del estado
Ensayo cliacutenico y tamantildeo de muestra
Para calcular el tamantildeo de la muestra y conformar el grupo de pacientes neonatos con
cateacuteter umbilical se utilizo un intervalo de confianza de 95 De tal manera el tamantildeo de
muestra estimado fue de 80 pacientes pero se eliminaron 30 debido a bajas del Hospital y
por defuncioacuten debido a padecimientos asociados al nacimiento prematuro del neonato
Criterios de inclusioacuten
Se desarrolloacute un estudio transversal descriptivo para identificar pacientes neonatos que
adquirieron alguna infeccioacuten de forma natural y conocer su prevalencia Soacutelo fueron
considerados pacientes neonatos nacidos en el Hospital de Alta Especialidad de Veracruz
del aacuterea de Pediatriacutea con sospecha de infeccioacuten bacteriana que fueran mayores de una
semana de vida y no mayores a 1 antildeo asiacute como tambieacuten que los cateacuteteres umbilicales
fueran retirados en condiciones higieacutenicas apropiadas en base a lo descrito en la SS y sin
antecedentes de alguna infeccioacuten previa Se lograron reunir un grupo de 50 pacientes que
reunioacute las caracteriacutesticas oacuteptimas para este estudio
Criterios de exclusioacuten
15
No se tomaron en consideracioacuten para este estudio los cultivos de cateacuteteres umbilicales que
no fueron retirados en condiciones apropiadas y los cateacuteteres umbilicales de neonatos que
fueron transportados en un medio de cultivo inadecuado Los Pacientes neonatos que
autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una patologiacutea traumaacutetica asociada y
los pacientes neonatos que autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una baja
por defuncioacuten fueron totalmente descartados para fines de esta investigacioacuten
Caracteriacutesticas de la unidad de pediatriacutea
La unidad de pediatriacutea del Hospital Regional de Alta Especialidad estaacute dividida en diferentes
aeacutereas de las cuales para fines de esta investigacioacuten se analizaron pacientes neonatos de
UCIN UCIM y cunero patoloacutegico Debido a que existen pacientes en el aacuterea de pediatriacutea que
ya no cumplen con el reacutegimen de edad estipulado para este estudio
Muestreo para la seleccioacuten de neonatos
Para la seleccioacuten de los neonatos y para reunir el tamantildeo de la muestra necesario para el
estudio se analizaron cateacuteteres de todos los neonatos con sospecha de infeccioacuten bacteriana
a partir de un mes de edad con el uso de medios de Stuart para transportar el cateacuteter Para
este muestreo no se tomoacute en cuenta el sexo Cada tubo de Stuart se identificoacute con el nombre
completo del paciente el servicio de donde se tomo el tipo de muestra fecha y un nuacutemero
de folio con continuidad Las muestras se conservaron a temperatura ambiente durante la
transportacioacuten a su anaacutelisis y luego fueron remitidas al laboratorio para su anaacutelisis
microbioloacutegico
Teacutecnicas de laboratorio
Para el estudio microbioloacutegico del cateacuteter umbilical del neonato fue utilizada la teacutecnica
semicuantitativa de maki Esta teacutecnica ha sido aceptada por la mayoriacutea de los laboratorios
de microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia
16
Proceso de Investigacioacuten
Se trabajo con pacientes nacidos en el Hospital Regional De Alta Especialidad De Veracruz
los cuales tuvieron participacioacuten en esta investigacioacuten hasta la identificacioacuten del agente
etioloacutegico en el cateacuteter umbilical
Se realizo el retiro del cateacuteter umbilical del neonato con una teacutecnica aseacuteptica utilizando
material esteacuteril se desinfecto la piel con alcohol al 10 y se dejo secar con pinza se retiro el
cateacuteter cuidando de no rosar la piel se corto de 3 a 5 cm de la porcioacuten distal y se coloco en
el medio de transporte Stuart para remitirlo al laboratorio de microbiologiacutea para su anaacutelisis
bacterioloacutegico
En el laboratorio se inoculo el cateacuteter umbilical en el agar base sangre por la teacutecnica
semicuantitativa de maki rotando el cateacuteter con ayuda del asa bacterioloacutegica 5 veces Se
incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera O2 Se prosiguioacute con la interpretacioacuten de la morfologiacutea
colonial se resembraron colonias en los medios Agar sal y manitol Agar Mac Conkey y Agar
Biggy para su diferenciacioacuten se Incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera de O2 continuando con
la Interpretacioacuten de la morfologiacutea colonial
Se realizaron tinciones gram para diferenciar Gram positivas de Gram negativas para Gram
positivas como para Gam negativas se procedioacute a la preparacioacuten de paneles Se Incubaron
los paneles Gram en la estufa del Sensititre a 37degC por 24 Hrs en atmosfera de O2 Se
continuacuteo con la lectura de paneles Gram en autoreader Sensititre obteniendo asiacute el
resultado bacteriano en cuanto a geacutenero y especie
17
Material empleado
Paneles Combo Sensititre
Laminas adhesivas
Agua desmineralizada Sensititre
Tira de substrato para prueba de Gram positivos
Aceite mineral
Reactivos para tincioacuten de Gram
Cabezales de dosificacioacuten Sensititre
Estaacutendar de turbidez McFarland 05
Puntas desechables para pipeta
Tubos de ensaye 13 x 100
Tubos de ensaye 10 x 75
Pipetas Automaacuteticas de 5 ųl
Gradilla
Quemador bunsen
Asa bacterioloacutegica
Cajas petri
Goteros
Jaboacuten de manos
Detergente
Toalla
Franela
Alcohol
Cubrebocas
Guantes desechables
Recipiente para material contaminado
Rollo de papel adsorbente
Cloro
Gasas
Bolsas de plaacutestico
Cerillos
Porta objetos
Cubre objetos 18
Papel estraza
Computadora
Impresora
Hojas tamantildeo carta blancas
Medios de cultivo
Agar base sangre
Agar Sal de manitol
Agar Mac Conkey
Biggy
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes ajustado a Sensititre
Medio de transporte Stuart
Equipos de Laboratorio
1 Estufa de cultivo
2 Microscopio
3 Vortex
4 Auto inoculador
5 SISTEMA SENSITITRE
a Autoreader Sensititre
b Estufa Sensititre
Fundamentos
19
Uno de los sistemas maacutes importantes para la identificacioacuten de microorganismos es observar
su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio El material
alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de
los microorganismos es el Cultivo
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son temperatura grado de humedad y presioacuten de oxiacutegeno
adecuadas asiacute como un grado correcto de acidez o alcalinidad Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante
Estos Medios fueron utilizados en esta investigacioacuten para fines de identificacioacuten de
microorganismos bacterianos Cada medio tiene una caracteriacutestica importante para ser
empleado en este proyecto
A continuacioacuten se describen
Medio de Transporte Stuart
Medio semisoacutelido no nutritivo Contiene tioglicolato de sodio el cual provee un ambiente
reducido y es uacutetil para suprimir cambios oxidativos en el medio de transporte y azul de
metileno que es el indicador de oxido reduccioacuten De esta manera se favorece la viabilidad de
los microorganismos durante su enviacuteo al laboratorio
Agar sangre
La infusioacuten de muacutesculo de corazoacuten y la peptona otorgan al medio un alto valor nutritivo que
permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos auacuten de aquellos
nutricionalmente exigentes El cloruro de sodio mantiene el balance osmoacutetico
El agregado de sangre al medio de cultivo en concentracioacuten final de 5-10 aporta
nutrientes para el crecimiento bacteriano y permite detectar hemoacutelisis
Agar Mac Conkey
20
En el medio de cultivo las peptonas aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo
bacteriano la lactosa es el hidrato de carbono fermentable y la mezcla de sales biliares y el
cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora
Gram positiva Por fermentacioacuten de la lactosa disminuye el pH alrededor de la colonia Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro) la absorcioacuten en las colonias y la
precipitacioacuten de las sales biliares Los microorganismos no fermentadores de lactosa
producen colonias incoloras
Agar sal y manitol
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracioacuten salina Los
estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante Los estafilococos coagulasa negativos
presentan colonias rodeadas de una zona roja o puacuterpura En el medio de cultivo el extracto
de carne y la pluripeptona constituyen la fuente de carbono nitroacutegeno vitaminas y
minerales el manitol es el hidrato de carbono fermentable el cloruro de sodio (que se
encuentra en alta concentracioacuten) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora
acompantildeante y el rojo fenol es el indicador de pH Las bacterias que crecen en un medio
con alta concentracioacuten de sal y fermentan el manitol producen aacutecidos con lo que se modifica
el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo Los estafilococos crecen
en altas concentraciones de sal y pueden o no fermentar el manitol Los estafilococos
coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de
una zona del mismo color Los estafilococos que no fermentan el manitol se visualizan como
colonias rojas rodeadas de una zona del mismo color o puacuterpura
Agar Biggy
El Agar Biggy es una modificacioacuten de la foacutermula desarrollada por Nickerson La
diferenciacioacuten estaacute basada en la morfologiacutea colonial y la pigmentacioacuten tiacutepica que se presenta
en este medio La reduccioacuten del sulfito de bismuto se manifiesta en una pigmentacioacuten de la
colonia que en ocasiones difunde en el medio En este medio el extracto de levadura
proporciona vitaminas y aminoaacutecidos La glicina es utilizada para estimular el crecimiento La
dextrosa es la fuente de carbono El indicador sulfito de bismuto actuacutea tambieacuten como un
inhibidor del desarrollo bacteriano El agar es adicionado como agente solidificante
21
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes
El caldo Mueller-Hinton se recomienda como el medio preferido para pruebas de
susceptibilidad de organismos comuacutenmente aislados aeroacutebicos o facultativos de raacutepido
crecimiento El caldo debe tener el contenido apropiado de cationes (Ca++ y Mg++) El pH
debe estar entre 72 y 74 a temperatura ambiente (25ordm C)
22
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram positivas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar glucosa glicerol maltosa manitol B-metilglucoacutesido
ramnosa sacarosa sorbitol trehalosa La produccioacuten de acido reduce la fluorescencia de un
fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substrato fluorogeacutenico el substrato enzimaacutetico esta vinculado a un fluoroacuteforo
que suprime la fluorescencia La ruptura enzimaacutetica de la unioacuten libera el fluoroacuteforo con
capacidad de fluorescencia
3- Pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea y la arginina (requieren la adicioacuten de aceite
mineral esteacuteril) incrementa el pH y la fluorescencia La esculina es una moleacutecula fluorescente
que al hidrolizarse se descompone en productos no fluorescentes
23
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram negativas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar Arabinosa arabitol celobiosa fructosa inositol
maltosa manitol rafinosa sacarosa sorbitol trehalosa xilosa La produccioacuten de acido
reduce la fluorescencia de un fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substratos fluorogeacutenico Cada substrato enzimaacutetico esta vinculado a un
fluoroacuteforo que suprime la fluorescencia La ruptura particioacuten enzimaacutetico de la unioacuten libera el
fluoroacuteforo con capacidad de fluorescencia
3- Pruebas de utilizacioacuten de carbono Agmatina arginina citrato lisina malonato ornitina y
piruvato La descomposicioacuten del substrato provoca un aumento de pH y la fluorescencia
4- Otras pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea incrementa el pH y la fluorescencia La
esculina es una moleacutecula fluorescente que al hidrolizarse se descompone en productos no
fluorescentes Desaminacioacuten del triptofano La formacioacuten de un color oscuro suprime la sentildeal
fluorescente
24
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
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10 Restrepo C Natalia Hoyos R Aacutengela ldquoUso de cateacuteteres umbilicales en recieacuten nacidos
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11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
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22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
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23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
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38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
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colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
S aureus forma parte de la familia Microccocaceae geacutenero Staphylococcus el cual contiene
maacutes de 30 especies diferentes Es un coco gram-positivo no moacutevil No forma esporas puede
encontrarse solo en pares en cadenas cortas o en racimos Es un anaerobio facultativo
pero crece mejor en condiciones aerobias25 El S aureus es un microorganismo positivo a la
coagulasa que se aiacutesla con mayor frecuencia en infecciones de piel26 Staphylococcus
aureus es la principal especie patoacutegena de su geacutenero y la causa comuacuten de diversas
infecciones de origen nosocomial y comunitario27
Los Staphylococcus producen muy diversos siacutendromes con manifestaciones cliacutenicas que
van desde una simple puacutestula hasta la sepsis y la muerte28
Escherichia coli y Klebsiella pneumoniae
Escherichia coli es un bacilo que reacciona negativamente a la tincioacuten de Gram es anaerobio
facultativo moacutevil por flagelos peritricos (que rodean su cuerpo) no forma esporas es capaz
de fermentar la glucosa y la lactosa Klebsiella es un geacutenero de bacterias no moacutetiles Gram-
negativas con una prominente caacutepsula de polisacaacuteridos Estas especies patoacutegenas estaacuten
significativamente asociadas a infecciones nosocomiales cuyas alternativas terapeacuteuticas
cada vez son menores por ser importantes fuentes de resistencia antibioacutetica transferible29
Estos patoacutegenos estaacuten asociados con infecciones en infantes prematuros y pacientes de las
unidades de cuidado intensivo son causantes de neumoniacuteas bacteriemias infecciones del
tracto urinario e infecciones de herida quiruacutergica30
10
Planteamiento de problema
iquestCuales son los agentes etioloacutegicos que presentan los pacientes neonatos con cateacuteter
umbilical durante su atencioacuten hospitalaria
11
Justificacioacuten
El uso temprano de cateacuteteres umbilicales es una alternativa segura para el acceso
vascular en el recieacuten nacido sus complicaciones son escasas y no asociadas a la
administracioacuten de medicamentos o al uso de la viacutea enteral
El cateacuteter umbilical en neonatos es muy uacutetil como liacutenea central para administrar
soluciones y medicamentos monitorizar la presioacuten arterial y tomar muestras de gases
arteriales
El siguiente trabajo descriptivo transversal se realiza con el objetivo de analizar las
complicaciones que se presentan con esta praacutectica haciendo especial eacutenfasis en la viacutea
oral concomitante
Es sumamente importante contar con un buen meacutetodo diagnoacutestico para poder enfrentar
las infecciones asociadas a cateacuteter por lo tanto la decisioacuten de retiro de un dispositivo
debe ser evaluada en forma responsable y criteriosa La sola presencia del cuadro
cliacutenico no determina su asociacioacuten con el dispositivo intravascular ya que habitualmente
los signos cliacutenicos son inespeciacuteficos es el diagnoacutestico microbioloacutegico el que
determinaraacute su retiro yo tratamiento seguacuten corresponda
12
Objetivos
Objetivo general
1- Conocer la frecuencia de la flora bacteriana del ombligo del neonato por uso de cateacuteter
durante su atencioacuten hospitalaria
Objetivos especiacuteficos
1- Identificar el geacutenero y especie de los agentes etioloacutegicos presentes en infecciones del
ombligo por uso de cateacuteter umbilical en neonatos durante la atencioacuten hospitalaria
2- Proporcionar informacioacuten al servicio de Vigilancia y Control de Enfermedades Hospitalarias
13
Hipoacutetesis
HI
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
Ho
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical no adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
14
MATERIAL Y METODOS
Lugar de estudio y ubicacioacuten
La investigacioacuten se realizoacute en Veracruz Veracruz Meacutexico que se encuentra ubicado en la
zona centro del estado
Ensayo cliacutenico y tamantildeo de muestra
Para calcular el tamantildeo de la muestra y conformar el grupo de pacientes neonatos con
cateacuteter umbilical se utilizo un intervalo de confianza de 95 De tal manera el tamantildeo de
muestra estimado fue de 80 pacientes pero se eliminaron 30 debido a bajas del Hospital y
por defuncioacuten debido a padecimientos asociados al nacimiento prematuro del neonato
Criterios de inclusioacuten
Se desarrolloacute un estudio transversal descriptivo para identificar pacientes neonatos que
adquirieron alguna infeccioacuten de forma natural y conocer su prevalencia Soacutelo fueron
considerados pacientes neonatos nacidos en el Hospital de Alta Especialidad de Veracruz
del aacuterea de Pediatriacutea con sospecha de infeccioacuten bacteriana que fueran mayores de una
semana de vida y no mayores a 1 antildeo asiacute como tambieacuten que los cateacuteteres umbilicales
fueran retirados en condiciones higieacutenicas apropiadas en base a lo descrito en la SS y sin
antecedentes de alguna infeccioacuten previa Se lograron reunir un grupo de 50 pacientes que
reunioacute las caracteriacutesticas oacuteptimas para este estudio
Criterios de exclusioacuten
15
No se tomaron en consideracioacuten para este estudio los cultivos de cateacuteteres umbilicales que
no fueron retirados en condiciones apropiadas y los cateacuteteres umbilicales de neonatos que
fueron transportados en un medio de cultivo inadecuado Los Pacientes neonatos que
autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una patologiacutea traumaacutetica asociada y
los pacientes neonatos que autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una baja
por defuncioacuten fueron totalmente descartados para fines de esta investigacioacuten
Caracteriacutesticas de la unidad de pediatriacutea
La unidad de pediatriacutea del Hospital Regional de Alta Especialidad estaacute dividida en diferentes
aeacutereas de las cuales para fines de esta investigacioacuten se analizaron pacientes neonatos de
UCIN UCIM y cunero patoloacutegico Debido a que existen pacientes en el aacuterea de pediatriacutea que
ya no cumplen con el reacutegimen de edad estipulado para este estudio
Muestreo para la seleccioacuten de neonatos
Para la seleccioacuten de los neonatos y para reunir el tamantildeo de la muestra necesario para el
estudio se analizaron cateacuteteres de todos los neonatos con sospecha de infeccioacuten bacteriana
a partir de un mes de edad con el uso de medios de Stuart para transportar el cateacuteter Para
este muestreo no se tomoacute en cuenta el sexo Cada tubo de Stuart se identificoacute con el nombre
completo del paciente el servicio de donde se tomo el tipo de muestra fecha y un nuacutemero
de folio con continuidad Las muestras se conservaron a temperatura ambiente durante la
transportacioacuten a su anaacutelisis y luego fueron remitidas al laboratorio para su anaacutelisis
microbioloacutegico
Teacutecnicas de laboratorio
Para el estudio microbioloacutegico del cateacuteter umbilical del neonato fue utilizada la teacutecnica
semicuantitativa de maki Esta teacutecnica ha sido aceptada por la mayoriacutea de los laboratorios
de microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia
16
Proceso de Investigacioacuten
Se trabajo con pacientes nacidos en el Hospital Regional De Alta Especialidad De Veracruz
los cuales tuvieron participacioacuten en esta investigacioacuten hasta la identificacioacuten del agente
etioloacutegico en el cateacuteter umbilical
Se realizo el retiro del cateacuteter umbilical del neonato con una teacutecnica aseacuteptica utilizando
material esteacuteril se desinfecto la piel con alcohol al 10 y se dejo secar con pinza se retiro el
cateacuteter cuidando de no rosar la piel se corto de 3 a 5 cm de la porcioacuten distal y se coloco en
el medio de transporte Stuart para remitirlo al laboratorio de microbiologiacutea para su anaacutelisis
bacterioloacutegico
En el laboratorio se inoculo el cateacuteter umbilical en el agar base sangre por la teacutecnica
semicuantitativa de maki rotando el cateacuteter con ayuda del asa bacterioloacutegica 5 veces Se
incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera O2 Se prosiguioacute con la interpretacioacuten de la morfologiacutea
colonial se resembraron colonias en los medios Agar sal y manitol Agar Mac Conkey y Agar
Biggy para su diferenciacioacuten se Incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera de O2 continuando con
la Interpretacioacuten de la morfologiacutea colonial
Se realizaron tinciones gram para diferenciar Gram positivas de Gram negativas para Gram
positivas como para Gam negativas se procedioacute a la preparacioacuten de paneles Se Incubaron
los paneles Gram en la estufa del Sensititre a 37degC por 24 Hrs en atmosfera de O2 Se
continuacuteo con la lectura de paneles Gram en autoreader Sensititre obteniendo asiacute el
resultado bacteriano en cuanto a geacutenero y especie
17
Material empleado
Paneles Combo Sensititre
Laminas adhesivas
Agua desmineralizada Sensititre
Tira de substrato para prueba de Gram positivos
Aceite mineral
Reactivos para tincioacuten de Gram
Cabezales de dosificacioacuten Sensititre
Estaacutendar de turbidez McFarland 05
Puntas desechables para pipeta
Tubos de ensaye 13 x 100
Tubos de ensaye 10 x 75
Pipetas Automaacuteticas de 5 ųl
Gradilla
Quemador bunsen
Asa bacterioloacutegica
Cajas petri
Goteros
Jaboacuten de manos
Detergente
Toalla
Franela
Alcohol
Cubrebocas
Guantes desechables
Recipiente para material contaminado
Rollo de papel adsorbente
Cloro
Gasas
Bolsas de plaacutestico
Cerillos
Porta objetos
Cubre objetos 18
Papel estraza
Computadora
Impresora
Hojas tamantildeo carta blancas
Medios de cultivo
Agar base sangre
Agar Sal de manitol
Agar Mac Conkey
Biggy
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes ajustado a Sensititre
Medio de transporte Stuart
Equipos de Laboratorio
1 Estufa de cultivo
2 Microscopio
3 Vortex
4 Auto inoculador
5 SISTEMA SENSITITRE
a Autoreader Sensititre
b Estufa Sensititre
Fundamentos
19
Uno de los sistemas maacutes importantes para la identificacioacuten de microorganismos es observar
su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio El material
alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de
los microorganismos es el Cultivo
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son temperatura grado de humedad y presioacuten de oxiacutegeno
adecuadas asiacute como un grado correcto de acidez o alcalinidad Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante
Estos Medios fueron utilizados en esta investigacioacuten para fines de identificacioacuten de
microorganismos bacterianos Cada medio tiene una caracteriacutestica importante para ser
empleado en este proyecto
A continuacioacuten se describen
Medio de Transporte Stuart
Medio semisoacutelido no nutritivo Contiene tioglicolato de sodio el cual provee un ambiente
reducido y es uacutetil para suprimir cambios oxidativos en el medio de transporte y azul de
metileno que es el indicador de oxido reduccioacuten De esta manera se favorece la viabilidad de
los microorganismos durante su enviacuteo al laboratorio
Agar sangre
La infusioacuten de muacutesculo de corazoacuten y la peptona otorgan al medio un alto valor nutritivo que
permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos auacuten de aquellos
nutricionalmente exigentes El cloruro de sodio mantiene el balance osmoacutetico
El agregado de sangre al medio de cultivo en concentracioacuten final de 5-10 aporta
nutrientes para el crecimiento bacteriano y permite detectar hemoacutelisis
Agar Mac Conkey
20
En el medio de cultivo las peptonas aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo
bacteriano la lactosa es el hidrato de carbono fermentable y la mezcla de sales biliares y el
cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora
Gram positiva Por fermentacioacuten de la lactosa disminuye el pH alrededor de la colonia Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro) la absorcioacuten en las colonias y la
precipitacioacuten de las sales biliares Los microorganismos no fermentadores de lactosa
producen colonias incoloras
Agar sal y manitol
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracioacuten salina Los
estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante Los estafilococos coagulasa negativos
presentan colonias rodeadas de una zona roja o puacuterpura En el medio de cultivo el extracto
de carne y la pluripeptona constituyen la fuente de carbono nitroacutegeno vitaminas y
minerales el manitol es el hidrato de carbono fermentable el cloruro de sodio (que se
encuentra en alta concentracioacuten) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora
acompantildeante y el rojo fenol es el indicador de pH Las bacterias que crecen en un medio
con alta concentracioacuten de sal y fermentan el manitol producen aacutecidos con lo que se modifica
el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo Los estafilococos crecen
en altas concentraciones de sal y pueden o no fermentar el manitol Los estafilococos
coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de
una zona del mismo color Los estafilococos que no fermentan el manitol se visualizan como
colonias rojas rodeadas de una zona del mismo color o puacuterpura
Agar Biggy
El Agar Biggy es una modificacioacuten de la foacutermula desarrollada por Nickerson La
diferenciacioacuten estaacute basada en la morfologiacutea colonial y la pigmentacioacuten tiacutepica que se presenta
en este medio La reduccioacuten del sulfito de bismuto se manifiesta en una pigmentacioacuten de la
colonia que en ocasiones difunde en el medio En este medio el extracto de levadura
proporciona vitaminas y aminoaacutecidos La glicina es utilizada para estimular el crecimiento La
dextrosa es la fuente de carbono El indicador sulfito de bismuto actuacutea tambieacuten como un
inhibidor del desarrollo bacteriano El agar es adicionado como agente solidificante
21
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes
El caldo Mueller-Hinton se recomienda como el medio preferido para pruebas de
susceptibilidad de organismos comuacutenmente aislados aeroacutebicos o facultativos de raacutepido
crecimiento El caldo debe tener el contenido apropiado de cationes (Ca++ y Mg++) El pH
debe estar entre 72 y 74 a temperatura ambiente (25ordm C)
22
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram positivas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar glucosa glicerol maltosa manitol B-metilglucoacutesido
ramnosa sacarosa sorbitol trehalosa La produccioacuten de acido reduce la fluorescencia de un
fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substrato fluorogeacutenico el substrato enzimaacutetico esta vinculado a un fluoroacuteforo
que suprime la fluorescencia La ruptura enzimaacutetica de la unioacuten libera el fluoroacuteforo con
capacidad de fluorescencia
3- Pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea y la arginina (requieren la adicioacuten de aceite
mineral esteacuteril) incrementa el pH y la fluorescencia La esculina es una moleacutecula fluorescente
que al hidrolizarse se descompone en productos no fluorescentes
23
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram negativas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar Arabinosa arabitol celobiosa fructosa inositol
maltosa manitol rafinosa sacarosa sorbitol trehalosa xilosa La produccioacuten de acido
reduce la fluorescencia de un fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substratos fluorogeacutenico Cada substrato enzimaacutetico esta vinculado a un
fluoroacuteforo que suprime la fluorescencia La ruptura particioacuten enzimaacutetico de la unioacuten libera el
fluoroacuteforo con capacidad de fluorescencia
3- Pruebas de utilizacioacuten de carbono Agmatina arginina citrato lisina malonato ornitina y
piruvato La descomposicioacuten del substrato provoca un aumento de pH y la fluorescencia
4- Otras pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea incrementa el pH y la fluorescencia La
esculina es una moleacutecula fluorescente que al hidrolizarse se descompone en productos no
fluorescentes Desaminacioacuten del triptofano La formacioacuten de un color oscuro suprime la sentildeal
fluorescente
24
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
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22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
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38
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escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
Planteamiento de problema
iquestCuales son los agentes etioloacutegicos que presentan los pacientes neonatos con cateacuteter
umbilical durante su atencioacuten hospitalaria
11
Justificacioacuten
El uso temprano de cateacuteteres umbilicales es una alternativa segura para el acceso
vascular en el recieacuten nacido sus complicaciones son escasas y no asociadas a la
administracioacuten de medicamentos o al uso de la viacutea enteral
El cateacuteter umbilical en neonatos es muy uacutetil como liacutenea central para administrar
soluciones y medicamentos monitorizar la presioacuten arterial y tomar muestras de gases
arteriales
El siguiente trabajo descriptivo transversal se realiza con el objetivo de analizar las
complicaciones que se presentan con esta praacutectica haciendo especial eacutenfasis en la viacutea
oral concomitante
Es sumamente importante contar con un buen meacutetodo diagnoacutestico para poder enfrentar
las infecciones asociadas a cateacuteter por lo tanto la decisioacuten de retiro de un dispositivo
debe ser evaluada en forma responsable y criteriosa La sola presencia del cuadro
cliacutenico no determina su asociacioacuten con el dispositivo intravascular ya que habitualmente
los signos cliacutenicos son inespeciacuteficos es el diagnoacutestico microbioloacutegico el que
determinaraacute su retiro yo tratamiento seguacuten corresponda
12
Objetivos
Objetivo general
1- Conocer la frecuencia de la flora bacteriana del ombligo del neonato por uso de cateacuteter
durante su atencioacuten hospitalaria
Objetivos especiacuteficos
1- Identificar el geacutenero y especie de los agentes etioloacutegicos presentes en infecciones del
ombligo por uso de cateacuteter umbilical en neonatos durante la atencioacuten hospitalaria
2- Proporcionar informacioacuten al servicio de Vigilancia y Control de Enfermedades Hospitalarias
13
Hipoacutetesis
HI
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
Ho
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical no adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
14
MATERIAL Y METODOS
Lugar de estudio y ubicacioacuten
La investigacioacuten se realizoacute en Veracruz Veracruz Meacutexico que se encuentra ubicado en la
zona centro del estado
Ensayo cliacutenico y tamantildeo de muestra
Para calcular el tamantildeo de la muestra y conformar el grupo de pacientes neonatos con
cateacuteter umbilical se utilizo un intervalo de confianza de 95 De tal manera el tamantildeo de
muestra estimado fue de 80 pacientes pero se eliminaron 30 debido a bajas del Hospital y
por defuncioacuten debido a padecimientos asociados al nacimiento prematuro del neonato
Criterios de inclusioacuten
Se desarrolloacute un estudio transversal descriptivo para identificar pacientes neonatos que
adquirieron alguna infeccioacuten de forma natural y conocer su prevalencia Soacutelo fueron
considerados pacientes neonatos nacidos en el Hospital de Alta Especialidad de Veracruz
del aacuterea de Pediatriacutea con sospecha de infeccioacuten bacteriana que fueran mayores de una
semana de vida y no mayores a 1 antildeo asiacute como tambieacuten que los cateacuteteres umbilicales
fueran retirados en condiciones higieacutenicas apropiadas en base a lo descrito en la SS y sin
antecedentes de alguna infeccioacuten previa Se lograron reunir un grupo de 50 pacientes que
reunioacute las caracteriacutesticas oacuteptimas para este estudio
Criterios de exclusioacuten
15
No se tomaron en consideracioacuten para este estudio los cultivos de cateacuteteres umbilicales que
no fueron retirados en condiciones apropiadas y los cateacuteteres umbilicales de neonatos que
fueron transportados en un medio de cultivo inadecuado Los Pacientes neonatos que
autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una patologiacutea traumaacutetica asociada y
los pacientes neonatos que autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una baja
por defuncioacuten fueron totalmente descartados para fines de esta investigacioacuten
Caracteriacutesticas de la unidad de pediatriacutea
La unidad de pediatriacutea del Hospital Regional de Alta Especialidad estaacute dividida en diferentes
aeacutereas de las cuales para fines de esta investigacioacuten se analizaron pacientes neonatos de
UCIN UCIM y cunero patoloacutegico Debido a que existen pacientes en el aacuterea de pediatriacutea que
ya no cumplen con el reacutegimen de edad estipulado para este estudio
Muestreo para la seleccioacuten de neonatos
Para la seleccioacuten de los neonatos y para reunir el tamantildeo de la muestra necesario para el
estudio se analizaron cateacuteteres de todos los neonatos con sospecha de infeccioacuten bacteriana
a partir de un mes de edad con el uso de medios de Stuart para transportar el cateacuteter Para
este muestreo no se tomoacute en cuenta el sexo Cada tubo de Stuart se identificoacute con el nombre
completo del paciente el servicio de donde se tomo el tipo de muestra fecha y un nuacutemero
de folio con continuidad Las muestras se conservaron a temperatura ambiente durante la
transportacioacuten a su anaacutelisis y luego fueron remitidas al laboratorio para su anaacutelisis
microbioloacutegico
Teacutecnicas de laboratorio
Para el estudio microbioloacutegico del cateacuteter umbilical del neonato fue utilizada la teacutecnica
semicuantitativa de maki Esta teacutecnica ha sido aceptada por la mayoriacutea de los laboratorios
de microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia
16
Proceso de Investigacioacuten
Se trabajo con pacientes nacidos en el Hospital Regional De Alta Especialidad De Veracruz
los cuales tuvieron participacioacuten en esta investigacioacuten hasta la identificacioacuten del agente
etioloacutegico en el cateacuteter umbilical
Se realizo el retiro del cateacuteter umbilical del neonato con una teacutecnica aseacuteptica utilizando
material esteacuteril se desinfecto la piel con alcohol al 10 y se dejo secar con pinza se retiro el
cateacuteter cuidando de no rosar la piel se corto de 3 a 5 cm de la porcioacuten distal y se coloco en
el medio de transporte Stuart para remitirlo al laboratorio de microbiologiacutea para su anaacutelisis
bacterioloacutegico
En el laboratorio se inoculo el cateacuteter umbilical en el agar base sangre por la teacutecnica
semicuantitativa de maki rotando el cateacuteter con ayuda del asa bacterioloacutegica 5 veces Se
incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera O2 Se prosiguioacute con la interpretacioacuten de la morfologiacutea
colonial se resembraron colonias en los medios Agar sal y manitol Agar Mac Conkey y Agar
Biggy para su diferenciacioacuten se Incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera de O2 continuando con
la Interpretacioacuten de la morfologiacutea colonial
Se realizaron tinciones gram para diferenciar Gram positivas de Gram negativas para Gram
positivas como para Gam negativas se procedioacute a la preparacioacuten de paneles Se Incubaron
los paneles Gram en la estufa del Sensititre a 37degC por 24 Hrs en atmosfera de O2 Se
continuacuteo con la lectura de paneles Gram en autoreader Sensititre obteniendo asiacute el
resultado bacteriano en cuanto a geacutenero y especie
17
Material empleado
Paneles Combo Sensititre
Laminas adhesivas
Agua desmineralizada Sensititre
Tira de substrato para prueba de Gram positivos
Aceite mineral
Reactivos para tincioacuten de Gram
Cabezales de dosificacioacuten Sensititre
Estaacutendar de turbidez McFarland 05
Puntas desechables para pipeta
Tubos de ensaye 13 x 100
Tubos de ensaye 10 x 75
Pipetas Automaacuteticas de 5 ųl
Gradilla
Quemador bunsen
Asa bacterioloacutegica
Cajas petri
Goteros
Jaboacuten de manos
Detergente
Toalla
Franela
Alcohol
Cubrebocas
Guantes desechables
Recipiente para material contaminado
Rollo de papel adsorbente
Cloro
Gasas
Bolsas de plaacutestico
Cerillos
Porta objetos
Cubre objetos 18
Papel estraza
Computadora
Impresora
Hojas tamantildeo carta blancas
Medios de cultivo
Agar base sangre
Agar Sal de manitol
Agar Mac Conkey
Biggy
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes ajustado a Sensititre
Medio de transporte Stuart
Equipos de Laboratorio
1 Estufa de cultivo
2 Microscopio
3 Vortex
4 Auto inoculador
5 SISTEMA SENSITITRE
a Autoreader Sensititre
b Estufa Sensititre
Fundamentos
19
Uno de los sistemas maacutes importantes para la identificacioacuten de microorganismos es observar
su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio El material
alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de
los microorganismos es el Cultivo
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son temperatura grado de humedad y presioacuten de oxiacutegeno
adecuadas asiacute como un grado correcto de acidez o alcalinidad Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante
Estos Medios fueron utilizados en esta investigacioacuten para fines de identificacioacuten de
microorganismos bacterianos Cada medio tiene una caracteriacutestica importante para ser
empleado en este proyecto
A continuacioacuten se describen
Medio de Transporte Stuart
Medio semisoacutelido no nutritivo Contiene tioglicolato de sodio el cual provee un ambiente
reducido y es uacutetil para suprimir cambios oxidativos en el medio de transporte y azul de
metileno que es el indicador de oxido reduccioacuten De esta manera se favorece la viabilidad de
los microorganismos durante su enviacuteo al laboratorio
Agar sangre
La infusioacuten de muacutesculo de corazoacuten y la peptona otorgan al medio un alto valor nutritivo que
permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos auacuten de aquellos
nutricionalmente exigentes El cloruro de sodio mantiene el balance osmoacutetico
El agregado de sangre al medio de cultivo en concentracioacuten final de 5-10 aporta
nutrientes para el crecimiento bacteriano y permite detectar hemoacutelisis
Agar Mac Conkey
20
En el medio de cultivo las peptonas aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo
bacteriano la lactosa es el hidrato de carbono fermentable y la mezcla de sales biliares y el
cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora
Gram positiva Por fermentacioacuten de la lactosa disminuye el pH alrededor de la colonia Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro) la absorcioacuten en las colonias y la
precipitacioacuten de las sales biliares Los microorganismos no fermentadores de lactosa
producen colonias incoloras
Agar sal y manitol
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracioacuten salina Los
estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante Los estafilococos coagulasa negativos
presentan colonias rodeadas de una zona roja o puacuterpura En el medio de cultivo el extracto
de carne y la pluripeptona constituyen la fuente de carbono nitroacutegeno vitaminas y
minerales el manitol es el hidrato de carbono fermentable el cloruro de sodio (que se
encuentra en alta concentracioacuten) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora
acompantildeante y el rojo fenol es el indicador de pH Las bacterias que crecen en un medio
con alta concentracioacuten de sal y fermentan el manitol producen aacutecidos con lo que se modifica
el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo Los estafilococos crecen
en altas concentraciones de sal y pueden o no fermentar el manitol Los estafilococos
coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de
una zona del mismo color Los estafilococos que no fermentan el manitol se visualizan como
colonias rojas rodeadas de una zona del mismo color o puacuterpura
Agar Biggy
El Agar Biggy es una modificacioacuten de la foacutermula desarrollada por Nickerson La
diferenciacioacuten estaacute basada en la morfologiacutea colonial y la pigmentacioacuten tiacutepica que se presenta
en este medio La reduccioacuten del sulfito de bismuto se manifiesta en una pigmentacioacuten de la
colonia que en ocasiones difunde en el medio En este medio el extracto de levadura
proporciona vitaminas y aminoaacutecidos La glicina es utilizada para estimular el crecimiento La
dextrosa es la fuente de carbono El indicador sulfito de bismuto actuacutea tambieacuten como un
inhibidor del desarrollo bacteriano El agar es adicionado como agente solidificante
21
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes
El caldo Mueller-Hinton se recomienda como el medio preferido para pruebas de
susceptibilidad de organismos comuacutenmente aislados aeroacutebicos o facultativos de raacutepido
crecimiento El caldo debe tener el contenido apropiado de cationes (Ca++ y Mg++) El pH
debe estar entre 72 y 74 a temperatura ambiente (25ordm C)
22
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram positivas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar glucosa glicerol maltosa manitol B-metilglucoacutesido
ramnosa sacarosa sorbitol trehalosa La produccioacuten de acido reduce la fluorescencia de un
fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substrato fluorogeacutenico el substrato enzimaacutetico esta vinculado a un fluoroacuteforo
que suprime la fluorescencia La ruptura enzimaacutetica de la unioacuten libera el fluoroacuteforo con
capacidad de fluorescencia
3- Pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea y la arginina (requieren la adicioacuten de aceite
mineral esteacuteril) incrementa el pH y la fluorescencia La esculina es una moleacutecula fluorescente
que al hidrolizarse se descompone en productos no fluorescentes
23
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram negativas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar Arabinosa arabitol celobiosa fructosa inositol
maltosa manitol rafinosa sacarosa sorbitol trehalosa xilosa La produccioacuten de acido
reduce la fluorescencia de un fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substratos fluorogeacutenico Cada substrato enzimaacutetico esta vinculado a un
fluoroacuteforo que suprime la fluorescencia La ruptura particioacuten enzimaacutetico de la unioacuten libera el
fluoroacuteforo con capacidad de fluorescencia
3- Pruebas de utilizacioacuten de carbono Agmatina arginina citrato lisina malonato ornitina y
piruvato La descomposicioacuten del substrato provoca un aumento de pH y la fluorescencia
4- Otras pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea incrementa el pH y la fluorescencia La
esculina es una moleacutecula fluorescente que al hidrolizarse se descompone en productos no
fluorescentes Desaminacioacuten del triptofano La formacioacuten de un color oscuro suprime la sentildeal
fluorescente
24
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
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pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
Justificacioacuten
El uso temprano de cateacuteteres umbilicales es una alternativa segura para el acceso
vascular en el recieacuten nacido sus complicaciones son escasas y no asociadas a la
administracioacuten de medicamentos o al uso de la viacutea enteral
El cateacuteter umbilical en neonatos es muy uacutetil como liacutenea central para administrar
soluciones y medicamentos monitorizar la presioacuten arterial y tomar muestras de gases
arteriales
El siguiente trabajo descriptivo transversal se realiza con el objetivo de analizar las
complicaciones que se presentan con esta praacutectica haciendo especial eacutenfasis en la viacutea
oral concomitante
Es sumamente importante contar con un buen meacutetodo diagnoacutestico para poder enfrentar
las infecciones asociadas a cateacuteter por lo tanto la decisioacuten de retiro de un dispositivo
debe ser evaluada en forma responsable y criteriosa La sola presencia del cuadro
cliacutenico no determina su asociacioacuten con el dispositivo intravascular ya que habitualmente
los signos cliacutenicos son inespeciacuteficos es el diagnoacutestico microbioloacutegico el que
determinaraacute su retiro yo tratamiento seguacuten corresponda
12
Objetivos
Objetivo general
1- Conocer la frecuencia de la flora bacteriana del ombligo del neonato por uso de cateacuteter
durante su atencioacuten hospitalaria
Objetivos especiacuteficos
1- Identificar el geacutenero y especie de los agentes etioloacutegicos presentes en infecciones del
ombligo por uso de cateacuteter umbilical en neonatos durante la atencioacuten hospitalaria
2- Proporcionar informacioacuten al servicio de Vigilancia y Control de Enfermedades Hospitalarias
13
Hipoacutetesis
HI
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
Ho
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical no adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
14
MATERIAL Y METODOS
Lugar de estudio y ubicacioacuten
La investigacioacuten se realizoacute en Veracruz Veracruz Meacutexico que se encuentra ubicado en la
zona centro del estado
Ensayo cliacutenico y tamantildeo de muestra
Para calcular el tamantildeo de la muestra y conformar el grupo de pacientes neonatos con
cateacuteter umbilical se utilizo un intervalo de confianza de 95 De tal manera el tamantildeo de
muestra estimado fue de 80 pacientes pero se eliminaron 30 debido a bajas del Hospital y
por defuncioacuten debido a padecimientos asociados al nacimiento prematuro del neonato
Criterios de inclusioacuten
Se desarrolloacute un estudio transversal descriptivo para identificar pacientes neonatos que
adquirieron alguna infeccioacuten de forma natural y conocer su prevalencia Soacutelo fueron
considerados pacientes neonatos nacidos en el Hospital de Alta Especialidad de Veracruz
del aacuterea de Pediatriacutea con sospecha de infeccioacuten bacteriana que fueran mayores de una
semana de vida y no mayores a 1 antildeo asiacute como tambieacuten que los cateacuteteres umbilicales
fueran retirados en condiciones higieacutenicas apropiadas en base a lo descrito en la SS y sin
antecedentes de alguna infeccioacuten previa Se lograron reunir un grupo de 50 pacientes que
reunioacute las caracteriacutesticas oacuteptimas para este estudio
Criterios de exclusioacuten
15
No se tomaron en consideracioacuten para este estudio los cultivos de cateacuteteres umbilicales que
no fueron retirados en condiciones apropiadas y los cateacuteteres umbilicales de neonatos que
fueron transportados en un medio de cultivo inadecuado Los Pacientes neonatos que
autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una patologiacutea traumaacutetica asociada y
los pacientes neonatos que autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una baja
por defuncioacuten fueron totalmente descartados para fines de esta investigacioacuten
Caracteriacutesticas de la unidad de pediatriacutea
La unidad de pediatriacutea del Hospital Regional de Alta Especialidad estaacute dividida en diferentes
aeacutereas de las cuales para fines de esta investigacioacuten se analizaron pacientes neonatos de
UCIN UCIM y cunero patoloacutegico Debido a que existen pacientes en el aacuterea de pediatriacutea que
ya no cumplen con el reacutegimen de edad estipulado para este estudio
Muestreo para la seleccioacuten de neonatos
Para la seleccioacuten de los neonatos y para reunir el tamantildeo de la muestra necesario para el
estudio se analizaron cateacuteteres de todos los neonatos con sospecha de infeccioacuten bacteriana
a partir de un mes de edad con el uso de medios de Stuart para transportar el cateacuteter Para
este muestreo no se tomoacute en cuenta el sexo Cada tubo de Stuart se identificoacute con el nombre
completo del paciente el servicio de donde se tomo el tipo de muestra fecha y un nuacutemero
de folio con continuidad Las muestras se conservaron a temperatura ambiente durante la
transportacioacuten a su anaacutelisis y luego fueron remitidas al laboratorio para su anaacutelisis
microbioloacutegico
Teacutecnicas de laboratorio
Para el estudio microbioloacutegico del cateacuteter umbilical del neonato fue utilizada la teacutecnica
semicuantitativa de maki Esta teacutecnica ha sido aceptada por la mayoriacutea de los laboratorios
de microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia
16
Proceso de Investigacioacuten
Se trabajo con pacientes nacidos en el Hospital Regional De Alta Especialidad De Veracruz
los cuales tuvieron participacioacuten en esta investigacioacuten hasta la identificacioacuten del agente
etioloacutegico en el cateacuteter umbilical
Se realizo el retiro del cateacuteter umbilical del neonato con una teacutecnica aseacuteptica utilizando
material esteacuteril se desinfecto la piel con alcohol al 10 y se dejo secar con pinza se retiro el
cateacuteter cuidando de no rosar la piel se corto de 3 a 5 cm de la porcioacuten distal y se coloco en
el medio de transporte Stuart para remitirlo al laboratorio de microbiologiacutea para su anaacutelisis
bacterioloacutegico
En el laboratorio se inoculo el cateacuteter umbilical en el agar base sangre por la teacutecnica
semicuantitativa de maki rotando el cateacuteter con ayuda del asa bacterioloacutegica 5 veces Se
incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera O2 Se prosiguioacute con la interpretacioacuten de la morfologiacutea
colonial se resembraron colonias en los medios Agar sal y manitol Agar Mac Conkey y Agar
Biggy para su diferenciacioacuten se Incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera de O2 continuando con
la Interpretacioacuten de la morfologiacutea colonial
Se realizaron tinciones gram para diferenciar Gram positivas de Gram negativas para Gram
positivas como para Gam negativas se procedioacute a la preparacioacuten de paneles Se Incubaron
los paneles Gram en la estufa del Sensititre a 37degC por 24 Hrs en atmosfera de O2 Se
continuacuteo con la lectura de paneles Gram en autoreader Sensititre obteniendo asiacute el
resultado bacteriano en cuanto a geacutenero y especie
17
Material empleado
Paneles Combo Sensititre
Laminas adhesivas
Agua desmineralizada Sensititre
Tira de substrato para prueba de Gram positivos
Aceite mineral
Reactivos para tincioacuten de Gram
Cabezales de dosificacioacuten Sensititre
Estaacutendar de turbidez McFarland 05
Puntas desechables para pipeta
Tubos de ensaye 13 x 100
Tubos de ensaye 10 x 75
Pipetas Automaacuteticas de 5 ųl
Gradilla
Quemador bunsen
Asa bacterioloacutegica
Cajas petri
Goteros
Jaboacuten de manos
Detergente
Toalla
Franela
Alcohol
Cubrebocas
Guantes desechables
Recipiente para material contaminado
Rollo de papel adsorbente
Cloro
Gasas
Bolsas de plaacutestico
Cerillos
Porta objetos
Cubre objetos 18
Papel estraza
Computadora
Impresora
Hojas tamantildeo carta blancas
Medios de cultivo
Agar base sangre
Agar Sal de manitol
Agar Mac Conkey
Biggy
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes ajustado a Sensititre
Medio de transporte Stuart
Equipos de Laboratorio
1 Estufa de cultivo
2 Microscopio
3 Vortex
4 Auto inoculador
5 SISTEMA SENSITITRE
a Autoreader Sensititre
b Estufa Sensititre
Fundamentos
19
Uno de los sistemas maacutes importantes para la identificacioacuten de microorganismos es observar
su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio El material
alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de
los microorganismos es el Cultivo
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son temperatura grado de humedad y presioacuten de oxiacutegeno
adecuadas asiacute como un grado correcto de acidez o alcalinidad Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante
Estos Medios fueron utilizados en esta investigacioacuten para fines de identificacioacuten de
microorganismos bacterianos Cada medio tiene una caracteriacutestica importante para ser
empleado en este proyecto
A continuacioacuten se describen
Medio de Transporte Stuart
Medio semisoacutelido no nutritivo Contiene tioglicolato de sodio el cual provee un ambiente
reducido y es uacutetil para suprimir cambios oxidativos en el medio de transporte y azul de
metileno que es el indicador de oxido reduccioacuten De esta manera se favorece la viabilidad de
los microorganismos durante su enviacuteo al laboratorio
Agar sangre
La infusioacuten de muacutesculo de corazoacuten y la peptona otorgan al medio un alto valor nutritivo que
permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos auacuten de aquellos
nutricionalmente exigentes El cloruro de sodio mantiene el balance osmoacutetico
El agregado de sangre al medio de cultivo en concentracioacuten final de 5-10 aporta
nutrientes para el crecimiento bacteriano y permite detectar hemoacutelisis
Agar Mac Conkey
20
En el medio de cultivo las peptonas aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo
bacteriano la lactosa es el hidrato de carbono fermentable y la mezcla de sales biliares y el
cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora
Gram positiva Por fermentacioacuten de la lactosa disminuye el pH alrededor de la colonia Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro) la absorcioacuten en las colonias y la
precipitacioacuten de las sales biliares Los microorganismos no fermentadores de lactosa
producen colonias incoloras
Agar sal y manitol
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracioacuten salina Los
estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante Los estafilococos coagulasa negativos
presentan colonias rodeadas de una zona roja o puacuterpura En el medio de cultivo el extracto
de carne y la pluripeptona constituyen la fuente de carbono nitroacutegeno vitaminas y
minerales el manitol es el hidrato de carbono fermentable el cloruro de sodio (que se
encuentra en alta concentracioacuten) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora
acompantildeante y el rojo fenol es el indicador de pH Las bacterias que crecen en un medio
con alta concentracioacuten de sal y fermentan el manitol producen aacutecidos con lo que se modifica
el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo Los estafilococos crecen
en altas concentraciones de sal y pueden o no fermentar el manitol Los estafilococos
coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de
una zona del mismo color Los estafilococos que no fermentan el manitol se visualizan como
colonias rojas rodeadas de una zona del mismo color o puacuterpura
Agar Biggy
El Agar Biggy es una modificacioacuten de la foacutermula desarrollada por Nickerson La
diferenciacioacuten estaacute basada en la morfologiacutea colonial y la pigmentacioacuten tiacutepica que se presenta
en este medio La reduccioacuten del sulfito de bismuto se manifiesta en una pigmentacioacuten de la
colonia que en ocasiones difunde en el medio En este medio el extracto de levadura
proporciona vitaminas y aminoaacutecidos La glicina es utilizada para estimular el crecimiento La
dextrosa es la fuente de carbono El indicador sulfito de bismuto actuacutea tambieacuten como un
inhibidor del desarrollo bacteriano El agar es adicionado como agente solidificante
21
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes
El caldo Mueller-Hinton se recomienda como el medio preferido para pruebas de
susceptibilidad de organismos comuacutenmente aislados aeroacutebicos o facultativos de raacutepido
crecimiento El caldo debe tener el contenido apropiado de cationes (Ca++ y Mg++) El pH
debe estar entre 72 y 74 a temperatura ambiente (25ordm C)
22
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram positivas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar glucosa glicerol maltosa manitol B-metilglucoacutesido
ramnosa sacarosa sorbitol trehalosa La produccioacuten de acido reduce la fluorescencia de un
fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substrato fluorogeacutenico el substrato enzimaacutetico esta vinculado a un fluoroacuteforo
que suprime la fluorescencia La ruptura enzimaacutetica de la unioacuten libera el fluoroacuteforo con
capacidad de fluorescencia
3- Pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea y la arginina (requieren la adicioacuten de aceite
mineral esteacuteril) incrementa el pH y la fluorescencia La esculina es una moleacutecula fluorescente
que al hidrolizarse se descompone en productos no fluorescentes
23
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram negativas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar Arabinosa arabitol celobiosa fructosa inositol
maltosa manitol rafinosa sacarosa sorbitol trehalosa xilosa La produccioacuten de acido
reduce la fluorescencia de un fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substratos fluorogeacutenico Cada substrato enzimaacutetico esta vinculado a un
fluoroacuteforo que suprime la fluorescencia La ruptura particioacuten enzimaacutetico de la unioacuten libera el
fluoroacuteforo con capacidad de fluorescencia
3- Pruebas de utilizacioacuten de carbono Agmatina arginina citrato lisina malonato ornitina y
piruvato La descomposicioacuten del substrato provoca un aumento de pH y la fluorescencia
4- Otras pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea incrementa el pH y la fluorescencia La
esculina es una moleacutecula fluorescente que al hidrolizarse se descompone en productos no
fluorescentes Desaminacioacuten del triptofano La formacioacuten de un color oscuro suprime la sentildeal
fluorescente
24
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
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18Hogan M Neonatal vascular catheters and their complications Radiol Clin North Am 1999
37 165-72
19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
Gamboa-Caacutezares Isidro A ldquoComplicaciones asociadas a la colocacioacuten de cateacuteteres
umbilicales en neonatosrdquo Revista Mexicana de Pediatria 2007 Vol 74 Nuacutem 2 pp 70-73
20National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report data summary from
January 1992 through June 2003 issued August 2003 Am J Infect Control 2003 31 481-
498
21Brun-Buisson C Suspected central venous catheter-associated infection can the catheter be
safely retained Intensive Care Med 2004 30 1005-1007
22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
relacionadas a cateacuteter vascularrdquo Ministerio de salud 2006 Pp 7-17
23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
Instructor in Pediatrics Harvard Medical School Boston Massachusetts
38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
severe burn trauma Kaunas Lithuania Medicina (Kaunas) 2006 42(7)
25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
emergencia de un patoacutegeno en la comunidad Rev Biomed 2006 Meacutexico 17287-305
26Bonino A Gnesetti A Pujadas M Broggi A Infecciones por Staphylococcus aureus
meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
el Hospital Policial de Uruguay 2004 Arch Pediatr Urug 2007 78(1) 41-47
27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
Objetivos
Objetivo general
1- Conocer la frecuencia de la flora bacteriana del ombligo del neonato por uso de cateacuteter
durante su atencioacuten hospitalaria
Objetivos especiacuteficos
1- Identificar el geacutenero y especie de los agentes etioloacutegicos presentes en infecciones del
ombligo por uso de cateacuteter umbilical en neonatos durante la atencioacuten hospitalaria
2- Proporcionar informacioacuten al servicio de Vigilancia y Control de Enfermedades Hospitalarias
13
Hipoacutetesis
HI
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
Ho
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical no adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
14
MATERIAL Y METODOS
Lugar de estudio y ubicacioacuten
La investigacioacuten se realizoacute en Veracruz Veracruz Meacutexico que se encuentra ubicado en la
zona centro del estado
Ensayo cliacutenico y tamantildeo de muestra
Para calcular el tamantildeo de la muestra y conformar el grupo de pacientes neonatos con
cateacuteter umbilical se utilizo un intervalo de confianza de 95 De tal manera el tamantildeo de
muestra estimado fue de 80 pacientes pero se eliminaron 30 debido a bajas del Hospital y
por defuncioacuten debido a padecimientos asociados al nacimiento prematuro del neonato
Criterios de inclusioacuten
Se desarrolloacute un estudio transversal descriptivo para identificar pacientes neonatos que
adquirieron alguna infeccioacuten de forma natural y conocer su prevalencia Soacutelo fueron
considerados pacientes neonatos nacidos en el Hospital de Alta Especialidad de Veracruz
del aacuterea de Pediatriacutea con sospecha de infeccioacuten bacteriana que fueran mayores de una
semana de vida y no mayores a 1 antildeo asiacute como tambieacuten que los cateacuteteres umbilicales
fueran retirados en condiciones higieacutenicas apropiadas en base a lo descrito en la SS y sin
antecedentes de alguna infeccioacuten previa Se lograron reunir un grupo de 50 pacientes que
reunioacute las caracteriacutesticas oacuteptimas para este estudio
Criterios de exclusioacuten
15
No se tomaron en consideracioacuten para este estudio los cultivos de cateacuteteres umbilicales que
no fueron retirados en condiciones apropiadas y los cateacuteteres umbilicales de neonatos que
fueron transportados en un medio de cultivo inadecuado Los Pacientes neonatos que
autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una patologiacutea traumaacutetica asociada y
los pacientes neonatos que autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una baja
por defuncioacuten fueron totalmente descartados para fines de esta investigacioacuten
Caracteriacutesticas de la unidad de pediatriacutea
La unidad de pediatriacutea del Hospital Regional de Alta Especialidad estaacute dividida en diferentes
aeacutereas de las cuales para fines de esta investigacioacuten se analizaron pacientes neonatos de
UCIN UCIM y cunero patoloacutegico Debido a que existen pacientes en el aacuterea de pediatriacutea que
ya no cumplen con el reacutegimen de edad estipulado para este estudio
Muestreo para la seleccioacuten de neonatos
Para la seleccioacuten de los neonatos y para reunir el tamantildeo de la muestra necesario para el
estudio se analizaron cateacuteteres de todos los neonatos con sospecha de infeccioacuten bacteriana
a partir de un mes de edad con el uso de medios de Stuart para transportar el cateacuteter Para
este muestreo no se tomoacute en cuenta el sexo Cada tubo de Stuart se identificoacute con el nombre
completo del paciente el servicio de donde se tomo el tipo de muestra fecha y un nuacutemero
de folio con continuidad Las muestras se conservaron a temperatura ambiente durante la
transportacioacuten a su anaacutelisis y luego fueron remitidas al laboratorio para su anaacutelisis
microbioloacutegico
Teacutecnicas de laboratorio
Para el estudio microbioloacutegico del cateacuteter umbilical del neonato fue utilizada la teacutecnica
semicuantitativa de maki Esta teacutecnica ha sido aceptada por la mayoriacutea de los laboratorios
de microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia
16
Proceso de Investigacioacuten
Se trabajo con pacientes nacidos en el Hospital Regional De Alta Especialidad De Veracruz
los cuales tuvieron participacioacuten en esta investigacioacuten hasta la identificacioacuten del agente
etioloacutegico en el cateacuteter umbilical
Se realizo el retiro del cateacuteter umbilical del neonato con una teacutecnica aseacuteptica utilizando
material esteacuteril se desinfecto la piel con alcohol al 10 y se dejo secar con pinza se retiro el
cateacuteter cuidando de no rosar la piel se corto de 3 a 5 cm de la porcioacuten distal y se coloco en
el medio de transporte Stuart para remitirlo al laboratorio de microbiologiacutea para su anaacutelisis
bacterioloacutegico
En el laboratorio se inoculo el cateacuteter umbilical en el agar base sangre por la teacutecnica
semicuantitativa de maki rotando el cateacuteter con ayuda del asa bacterioloacutegica 5 veces Se
incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera O2 Se prosiguioacute con la interpretacioacuten de la morfologiacutea
colonial se resembraron colonias en los medios Agar sal y manitol Agar Mac Conkey y Agar
Biggy para su diferenciacioacuten se Incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera de O2 continuando con
la Interpretacioacuten de la morfologiacutea colonial
Se realizaron tinciones gram para diferenciar Gram positivas de Gram negativas para Gram
positivas como para Gam negativas se procedioacute a la preparacioacuten de paneles Se Incubaron
los paneles Gram en la estufa del Sensititre a 37degC por 24 Hrs en atmosfera de O2 Se
continuacuteo con la lectura de paneles Gram en autoreader Sensititre obteniendo asiacute el
resultado bacteriano en cuanto a geacutenero y especie
17
Material empleado
Paneles Combo Sensititre
Laminas adhesivas
Agua desmineralizada Sensititre
Tira de substrato para prueba de Gram positivos
Aceite mineral
Reactivos para tincioacuten de Gram
Cabezales de dosificacioacuten Sensititre
Estaacutendar de turbidez McFarland 05
Puntas desechables para pipeta
Tubos de ensaye 13 x 100
Tubos de ensaye 10 x 75
Pipetas Automaacuteticas de 5 ųl
Gradilla
Quemador bunsen
Asa bacterioloacutegica
Cajas petri
Goteros
Jaboacuten de manos
Detergente
Toalla
Franela
Alcohol
Cubrebocas
Guantes desechables
Recipiente para material contaminado
Rollo de papel adsorbente
Cloro
Gasas
Bolsas de plaacutestico
Cerillos
Porta objetos
Cubre objetos 18
Papel estraza
Computadora
Impresora
Hojas tamantildeo carta blancas
Medios de cultivo
Agar base sangre
Agar Sal de manitol
Agar Mac Conkey
Biggy
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes ajustado a Sensititre
Medio de transporte Stuart
Equipos de Laboratorio
1 Estufa de cultivo
2 Microscopio
3 Vortex
4 Auto inoculador
5 SISTEMA SENSITITRE
a Autoreader Sensititre
b Estufa Sensititre
Fundamentos
19
Uno de los sistemas maacutes importantes para la identificacioacuten de microorganismos es observar
su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio El material
alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de
los microorganismos es el Cultivo
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son temperatura grado de humedad y presioacuten de oxiacutegeno
adecuadas asiacute como un grado correcto de acidez o alcalinidad Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante
Estos Medios fueron utilizados en esta investigacioacuten para fines de identificacioacuten de
microorganismos bacterianos Cada medio tiene una caracteriacutestica importante para ser
empleado en este proyecto
A continuacioacuten se describen
Medio de Transporte Stuart
Medio semisoacutelido no nutritivo Contiene tioglicolato de sodio el cual provee un ambiente
reducido y es uacutetil para suprimir cambios oxidativos en el medio de transporte y azul de
metileno que es el indicador de oxido reduccioacuten De esta manera se favorece la viabilidad de
los microorganismos durante su enviacuteo al laboratorio
Agar sangre
La infusioacuten de muacutesculo de corazoacuten y la peptona otorgan al medio un alto valor nutritivo que
permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos auacuten de aquellos
nutricionalmente exigentes El cloruro de sodio mantiene el balance osmoacutetico
El agregado de sangre al medio de cultivo en concentracioacuten final de 5-10 aporta
nutrientes para el crecimiento bacteriano y permite detectar hemoacutelisis
Agar Mac Conkey
20
En el medio de cultivo las peptonas aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo
bacteriano la lactosa es el hidrato de carbono fermentable y la mezcla de sales biliares y el
cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora
Gram positiva Por fermentacioacuten de la lactosa disminuye el pH alrededor de la colonia Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro) la absorcioacuten en las colonias y la
precipitacioacuten de las sales biliares Los microorganismos no fermentadores de lactosa
producen colonias incoloras
Agar sal y manitol
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracioacuten salina Los
estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante Los estafilococos coagulasa negativos
presentan colonias rodeadas de una zona roja o puacuterpura En el medio de cultivo el extracto
de carne y la pluripeptona constituyen la fuente de carbono nitroacutegeno vitaminas y
minerales el manitol es el hidrato de carbono fermentable el cloruro de sodio (que se
encuentra en alta concentracioacuten) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora
acompantildeante y el rojo fenol es el indicador de pH Las bacterias que crecen en un medio
con alta concentracioacuten de sal y fermentan el manitol producen aacutecidos con lo que se modifica
el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo Los estafilococos crecen
en altas concentraciones de sal y pueden o no fermentar el manitol Los estafilococos
coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de
una zona del mismo color Los estafilococos que no fermentan el manitol se visualizan como
colonias rojas rodeadas de una zona del mismo color o puacuterpura
Agar Biggy
El Agar Biggy es una modificacioacuten de la foacutermula desarrollada por Nickerson La
diferenciacioacuten estaacute basada en la morfologiacutea colonial y la pigmentacioacuten tiacutepica que se presenta
en este medio La reduccioacuten del sulfito de bismuto se manifiesta en una pigmentacioacuten de la
colonia que en ocasiones difunde en el medio En este medio el extracto de levadura
proporciona vitaminas y aminoaacutecidos La glicina es utilizada para estimular el crecimiento La
dextrosa es la fuente de carbono El indicador sulfito de bismuto actuacutea tambieacuten como un
inhibidor del desarrollo bacteriano El agar es adicionado como agente solidificante
21
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes
El caldo Mueller-Hinton se recomienda como el medio preferido para pruebas de
susceptibilidad de organismos comuacutenmente aislados aeroacutebicos o facultativos de raacutepido
crecimiento El caldo debe tener el contenido apropiado de cationes (Ca++ y Mg++) El pH
debe estar entre 72 y 74 a temperatura ambiente (25ordm C)
22
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram positivas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar glucosa glicerol maltosa manitol B-metilglucoacutesido
ramnosa sacarosa sorbitol trehalosa La produccioacuten de acido reduce la fluorescencia de un
fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substrato fluorogeacutenico el substrato enzimaacutetico esta vinculado a un fluoroacuteforo
que suprime la fluorescencia La ruptura enzimaacutetica de la unioacuten libera el fluoroacuteforo con
capacidad de fluorescencia
3- Pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea y la arginina (requieren la adicioacuten de aceite
mineral esteacuteril) incrementa el pH y la fluorescencia La esculina es una moleacutecula fluorescente
que al hidrolizarse se descompone en productos no fluorescentes
23
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram negativas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar Arabinosa arabitol celobiosa fructosa inositol
maltosa manitol rafinosa sacarosa sorbitol trehalosa xilosa La produccioacuten de acido
reduce la fluorescencia de un fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substratos fluorogeacutenico Cada substrato enzimaacutetico esta vinculado a un
fluoroacuteforo que suprime la fluorescencia La ruptura particioacuten enzimaacutetico de la unioacuten libera el
fluoroacuteforo con capacidad de fluorescencia
3- Pruebas de utilizacioacuten de carbono Agmatina arginina citrato lisina malonato ornitina y
piruvato La descomposicioacuten del substrato provoca un aumento de pH y la fluorescencia
4- Otras pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea incrementa el pH y la fluorescencia La
esculina es una moleacutecula fluorescente que al hidrolizarse se descompone en productos no
fluorescentes Desaminacioacuten del triptofano La formacioacuten de un color oscuro suprime la sentildeal
fluorescente
24
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
BIBLIOGRAFIAS
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Diseasesrdquo Churchill livingstone 2000 Vol 2 Num5 pp 3005-3015
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2 Delgado P Rodriacuteguez P Moreno C Debrosse B ldquoDeterminacioacuten de antibiotipos de
Pseudomonas aeruginosardquo Mexicana Patologiacutea Cliacutenica 2004 Vol 51 Nuacutem 4 pp 226-230
3 Jaen Roxana Saporiti Adrian ldquoInfeccioacuten asociada a cateacuteter Estudio comparativo entre
recambio periodico o permanencia prolongadardquo Pediatrica Argentina 2004 Vol 2 pp 96-101
4 Gobierno de Chile Ministerio de Salud Servicio de salud Valdivia Hospital Base Valdivia
5 Grandi Carlos Valenti Eduardo ldquoPrevencioacuten de infecciones intrahospitalariasrdquo Revista del
Hospital materno infantil Ramoacuten Sarna 2005 Vol 24 Nuacutem 4 pp 179-182
6 Villalobos E Sandra ldquoCuidados y generalidades sobre cateacuteteres venosos centralesrdquo Hospital
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7 Tome-Z Enrique Lizardo Luis ldquoExperiencia en el uso de cateacuteteres venosos centrales en
pacientes ingresados a las unidades de cuidados intensivos del instituto Hondurentildeo de
Seguridad Socialrdquo Honduras Pediaacutetrica 2000 Vol XXI Nuacutem 1
8 Garcia R Jose A Picazo Juan J Microbiologiacutea Cliacutenica Harcourt Brace 1996 Vol 2 Pp
302
9 Rumi B Luisa Torralbas O Jordi Mallafre CarmenrdquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccioacuten 3 Capitulo 52
10 Restrepo C Natalia Hoyos R Aacutengela ldquoUso de cateacuteteres umbilicales en recieacuten nacidos
experiencia en la Cliacutenica del Countryrdquo Sociedad Colombiana de Pediatria 2006 Vol
11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccion 3 Capitulo 51
12Cuerda Compes C Breton Lesmes I Bonada Sanjaume A Planas Vila A ldquoProtocolo para
el diagnostico y tratamiento de las infecciones relacionadas con el cateacuteter en el paciente con
nutricioacuten parenteralrdquo Revista cliacutenica Especializada 2005 Num8 pp 387-389
37
13 Rk Lane Matthay Ma Central Line Infections Curr Opin Crit Care 2002 8 441-448
14Eraso Jenny Troncoso Gloria Aacutelvarez Marta Ibaacutentildeez Milciacuteades ldquoComportamiento
epidemioloacutegico de la sepsis nosocomial en la Unidad de Recieacuten Nacidos de la Fundacioacuten
Cardioinfantilrdquo Nosocomial Infections at the Neonatal Intensive Care Unit of Fundacioacuten
Cardioinfantil in Bogotaacute 2008 Vol 6 Num 1 Pp 36-49
15R Clarck Powers R With R Bloom B Sanchez P Benjamin D Prevention and treatment of
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16K Tiffany B Burke C Collins-Odoms D Oelberg Current practice regarding the enteral
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17Hermansen MC Hermansen MG Intravascular catheter complications in the neonatal
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18Hogan M Neonatal vascular catheters and their complications Radiol Clin North Am 1999
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19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
Gamboa-Caacutezares Isidro A ldquoComplicaciones asociadas a la colocacioacuten de cateacuteteres
umbilicales en neonatosrdquo Revista Mexicana de Pediatria 2007 Vol 74 Nuacutem 2 pp 70-73
20National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report data summary from
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498
21Brun-Buisson C Suspected central venous catheter-associated infection can the catheter be
safely retained Intensive Care Med 2004 30 1005-1007
22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
relacionadas a cateacuteter vascularrdquo Ministerio de salud 2006 Pp 7-17
23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
Instructor in Pediatrics Harvard Medical School Boston Massachusetts
38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
severe burn trauma Kaunas Lithuania Medicina (Kaunas) 2006 42(7)
25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
emergencia de un patoacutegeno en la comunidad Rev Biomed 2006 Meacutexico 17287-305
26Bonino A Gnesetti A Pujadas M Broggi A Infecciones por Staphylococcus aureus
meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
el Hospital Policial de Uruguay 2004 Arch Pediatr Urug 2007 78(1) 41-47
27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
Hipoacutetesis
HI
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
Ho
Los pacientes neonatos con cateacuteter umbilical no adquieren infecciones bacterianas como
Staphylococcus coagulasa negativos Staphylococcus aureus streptococcus ssp
Enterococcus ssp Gram negativos Escherichia coli Klebsiella ssp Enterobacter Serratia
ssp Los agentes etioloacutegicos fuacutengicos de mayor incidencia son Candida albicans otras
especies de Candidas en su estancia en el hospital regional
14
MATERIAL Y METODOS
Lugar de estudio y ubicacioacuten
La investigacioacuten se realizoacute en Veracruz Veracruz Meacutexico que se encuentra ubicado en la
zona centro del estado
Ensayo cliacutenico y tamantildeo de muestra
Para calcular el tamantildeo de la muestra y conformar el grupo de pacientes neonatos con
cateacuteter umbilical se utilizo un intervalo de confianza de 95 De tal manera el tamantildeo de
muestra estimado fue de 80 pacientes pero se eliminaron 30 debido a bajas del Hospital y
por defuncioacuten debido a padecimientos asociados al nacimiento prematuro del neonato
Criterios de inclusioacuten
Se desarrolloacute un estudio transversal descriptivo para identificar pacientes neonatos que
adquirieron alguna infeccioacuten de forma natural y conocer su prevalencia Soacutelo fueron
considerados pacientes neonatos nacidos en el Hospital de Alta Especialidad de Veracruz
del aacuterea de Pediatriacutea con sospecha de infeccioacuten bacteriana que fueran mayores de una
semana de vida y no mayores a 1 antildeo asiacute como tambieacuten que los cateacuteteres umbilicales
fueran retirados en condiciones higieacutenicas apropiadas en base a lo descrito en la SS y sin
antecedentes de alguna infeccioacuten previa Se lograron reunir un grupo de 50 pacientes que
reunioacute las caracteriacutesticas oacuteptimas para este estudio
Criterios de exclusioacuten
15
No se tomaron en consideracioacuten para este estudio los cultivos de cateacuteteres umbilicales que
no fueron retirados en condiciones apropiadas y los cateacuteteres umbilicales de neonatos que
fueron transportados en un medio de cultivo inadecuado Los Pacientes neonatos que
autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una patologiacutea traumaacutetica asociada y
los pacientes neonatos que autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una baja
por defuncioacuten fueron totalmente descartados para fines de esta investigacioacuten
Caracteriacutesticas de la unidad de pediatriacutea
La unidad de pediatriacutea del Hospital Regional de Alta Especialidad estaacute dividida en diferentes
aeacutereas de las cuales para fines de esta investigacioacuten se analizaron pacientes neonatos de
UCIN UCIM y cunero patoloacutegico Debido a que existen pacientes en el aacuterea de pediatriacutea que
ya no cumplen con el reacutegimen de edad estipulado para este estudio
Muestreo para la seleccioacuten de neonatos
Para la seleccioacuten de los neonatos y para reunir el tamantildeo de la muestra necesario para el
estudio se analizaron cateacuteteres de todos los neonatos con sospecha de infeccioacuten bacteriana
a partir de un mes de edad con el uso de medios de Stuart para transportar el cateacuteter Para
este muestreo no se tomoacute en cuenta el sexo Cada tubo de Stuart se identificoacute con el nombre
completo del paciente el servicio de donde se tomo el tipo de muestra fecha y un nuacutemero
de folio con continuidad Las muestras se conservaron a temperatura ambiente durante la
transportacioacuten a su anaacutelisis y luego fueron remitidas al laboratorio para su anaacutelisis
microbioloacutegico
Teacutecnicas de laboratorio
Para el estudio microbioloacutegico del cateacuteter umbilical del neonato fue utilizada la teacutecnica
semicuantitativa de maki Esta teacutecnica ha sido aceptada por la mayoriacutea de los laboratorios
de microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia
16
Proceso de Investigacioacuten
Se trabajo con pacientes nacidos en el Hospital Regional De Alta Especialidad De Veracruz
los cuales tuvieron participacioacuten en esta investigacioacuten hasta la identificacioacuten del agente
etioloacutegico en el cateacuteter umbilical
Se realizo el retiro del cateacuteter umbilical del neonato con una teacutecnica aseacuteptica utilizando
material esteacuteril se desinfecto la piel con alcohol al 10 y se dejo secar con pinza se retiro el
cateacuteter cuidando de no rosar la piel se corto de 3 a 5 cm de la porcioacuten distal y se coloco en
el medio de transporte Stuart para remitirlo al laboratorio de microbiologiacutea para su anaacutelisis
bacterioloacutegico
En el laboratorio se inoculo el cateacuteter umbilical en el agar base sangre por la teacutecnica
semicuantitativa de maki rotando el cateacuteter con ayuda del asa bacterioloacutegica 5 veces Se
incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera O2 Se prosiguioacute con la interpretacioacuten de la morfologiacutea
colonial se resembraron colonias en los medios Agar sal y manitol Agar Mac Conkey y Agar
Biggy para su diferenciacioacuten se Incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera de O2 continuando con
la Interpretacioacuten de la morfologiacutea colonial
Se realizaron tinciones gram para diferenciar Gram positivas de Gram negativas para Gram
positivas como para Gam negativas se procedioacute a la preparacioacuten de paneles Se Incubaron
los paneles Gram en la estufa del Sensititre a 37degC por 24 Hrs en atmosfera de O2 Se
continuacuteo con la lectura de paneles Gram en autoreader Sensititre obteniendo asiacute el
resultado bacteriano en cuanto a geacutenero y especie
17
Material empleado
Paneles Combo Sensititre
Laminas adhesivas
Agua desmineralizada Sensititre
Tira de substrato para prueba de Gram positivos
Aceite mineral
Reactivos para tincioacuten de Gram
Cabezales de dosificacioacuten Sensititre
Estaacutendar de turbidez McFarland 05
Puntas desechables para pipeta
Tubos de ensaye 13 x 100
Tubos de ensaye 10 x 75
Pipetas Automaacuteticas de 5 ųl
Gradilla
Quemador bunsen
Asa bacterioloacutegica
Cajas petri
Goteros
Jaboacuten de manos
Detergente
Toalla
Franela
Alcohol
Cubrebocas
Guantes desechables
Recipiente para material contaminado
Rollo de papel adsorbente
Cloro
Gasas
Bolsas de plaacutestico
Cerillos
Porta objetos
Cubre objetos 18
Papel estraza
Computadora
Impresora
Hojas tamantildeo carta blancas
Medios de cultivo
Agar base sangre
Agar Sal de manitol
Agar Mac Conkey
Biggy
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes ajustado a Sensititre
Medio de transporte Stuart
Equipos de Laboratorio
1 Estufa de cultivo
2 Microscopio
3 Vortex
4 Auto inoculador
5 SISTEMA SENSITITRE
a Autoreader Sensititre
b Estufa Sensititre
Fundamentos
19
Uno de los sistemas maacutes importantes para la identificacioacuten de microorganismos es observar
su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio El material
alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de
los microorganismos es el Cultivo
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son temperatura grado de humedad y presioacuten de oxiacutegeno
adecuadas asiacute como un grado correcto de acidez o alcalinidad Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante
Estos Medios fueron utilizados en esta investigacioacuten para fines de identificacioacuten de
microorganismos bacterianos Cada medio tiene una caracteriacutestica importante para ser
empleado en este proyecto
A continuacioacuten se describen
Medio de Transporte Stuart
Medio semisoacutelido no nutritivo Contiene tioglicolato de sodio el cual provee un ambiente
reducido y es uacutetil para suprimir cambios oxidativos en el medio de transporte y azul de
metileno que es el indicador de oxido reduccioacuten De esta manera se favorece la viabilidad de
los microorganismos durante su enviacuteo al laboratorio
Agar sangre
La infusioacuten de muacutesculo de corazoacuten y la peptona otorgan al medio un alto valor nutritivo que
permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos auacuten de aquellos
nutricionalmente exigentes El cloruro de sodio mantiene el balance osmoacutetico
El agregado de sangre al medio de cultivo en concentracioacuten final de 5-10 aporta
nutrientes para el crecimiento bacteriano y permite detectar hemoacutelisis
Agar Mac Conkey
20
En el medio de cultivo las peptonas aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo
bacteriano la lactosa es el hidrato de carbono fermentable y la mezcla de sales biliares y el
cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora
Gram positiva Por fermentacioacuten de la lactosa disminuye el pH alrededor de la colonia Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro) la absorcioacuten en las colonias y la
precipitacioacuten de las sales biliares Los microorganismos no fermentadores de lactosa
producen colonias incoloras
Agar sal y manitol
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracioacuten salina Los
estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante Los estafilococos coagulasa negativos
presentan colonias rodeadas de una zona roja o puacuterpura En el medio de cultivo el extracto
de carne y la pluripeptona constituyen la fuente de carbono nitroacutegeno vitaminas y
minerales el manitol es el hidrato de carbono fermentable el cloruro de sodio (que se
encuentra en alta concentracioacuten) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora
acompantildeante y el rojo fenol es el indicador de pH Las bacterias que crecen en un medio
con alta concentracioacuten de sal y fermentan el manitol producen aacutecidos con lo que se modifica
el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo Los estafilococos crecen
en altas concentraciones de sal y pueden o no fermentar el manitol Los estafilococos
coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de
una zona del mismo color Los estafilococos que no fermentan el manitol se visualizan como
colonias rojas rodeadas de una zona del mismo color o puacuterpura
Agar Biggy
El Agar Biggy es una modificacioacuten de la foacutermula desarrollada por Nickerson La
diferenciacioacuten estaacute basada en la morfologiacutea colonial y la pigmentacioacuten tiacutepica que se presenta
en este medio La reduccioacuten del sulfito de bismuto se manifiesta en una pigmentacioacuten de la
colonia que en ocasiones difunde en el medio En este medio el extracto de levadura
proporciona vitaminas y aminoaacutecidos La glicina es utilizada para estimular el crecimiento La
dextrosa es la fuente de carbono El indicador sulfito de bismuto actuacutea tambieacuten como un
inhibidor del desarrollo bacteriano El agar es adicionado como agente solidificante
21
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes
El caldo Mueller-Hinton se recomienda como el medio preferido para pruebas de
susceptibilidad de organismos comuacutenmente aislados aeroacutebicos o facultativos de raacutepido
crecimiento El caldo debe tener el contenido apropiado de cationes (Ca++ y Mg++) El pH
debe estar entre 72 y 74 a temperatura ambiente (25ordm C)
22
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram positivas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar glucosa glicerol maltosa manitol B-metilglucoacutesido
ramnosa sacarosa sorbitol trehalosa La produccioacuten de acido reduce la fluorescencia de un
fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substrato fluorogeacutenico el substrato enzimaacutetico esta vinculado a un fluoroacuteforo
que suprime la fluorescencia La ruptura enzimaacutetica de la unioacuten libera el fluoroacuteforo con
capacidad de fluorescencia
3- Pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea y la arginina (requieren la adicioacuten de aceite
mineral esteacuteril) incrementa el pH y la fluorescencia La esculina es una moleacutecula fluorescente
que al hidrolizarse se descompone en productos no fluorescentes
23
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram negativas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar Arabinosa arabitol celobiosa fructosa inositol
maltosa manitol rafinosa sacarosa sorbitol trehalosa xilosa La produccioacuten de acido
reduce la fluorescencia de un fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substratos fluorogeacutenico Cada substrato enzimaacutetico esta vinculado a un
fluoroacuteforo que suprime la fluorescencia La ruptura particioacuten enzimaacutetico de la unioacuten libera el
fluoroacuteforo con capacidad de fluorescencia
3- Pruebas de utilizacioacuten de carbono Agmatina arginina citrato lisina malonato ornitina y
piruvato La descomposicioacuten del substrato provoca un aumento de pH y la fluorescencia
4- Otras pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea incrementa el pH y la fluorescencia La
esculina es una moleacutecula fluorescente que al hidrolizarse se descompone en productos no
fluorescentes Desaminacioacuten del triptofano La formacioacuten de un color oscuro suprime la sentildeal
fluorescente
24
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
BIBLIOGRAFIAS
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Diseasesrdquo Churchill livingstone 2000 Vol 2 Num5 pp 3005-3015
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neonatales 2006 Seccioacuten 3 Capitulo 52
10 Restrepo C Natalia Hoyos R Aacutengela ldquoUso de cateacuteteres umbilicales en recieacuten nacidos
experiencia en la Cliacutenica del Countryrdquo Sociedad Colombiana de Pediatria 2006 Vol
11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccion 3 Capitulo 51
12Cuerda Compes C Breton Lesmes I Bonada Sanjaume A Planas Vila A ldquoProtocolo para
el diagnostico y tratamiento de las infecciones relacionadas con el cateacuteter en el paciente con
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37
13 Rk Lane Matthay Ma Central Line Infections Curr Opin Crit Care 2002 8 441-448
14Eraso Jenny Troncoso Gloria Aacutelvarez Marta Ibaacutentildeez Milciacuteades ldquoComportamiento
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18Hogan M Neonatal vascular catheters and their complications Radiol Clin North Am 1999
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19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
Gamboa-Caacutezares Isidro A ldquoComplicaciones asociadas a la colocacioacuten de cateacuteteres
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20National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report data summary from
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22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
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23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
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38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
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25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
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meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
el Hospital Policial de Uruguay 2004 Arch Pediatr Urug 2007 78(1) 41-47
27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
MATERIAL Y METODOS
Lugar de estudio y ubicacioacuten
La investigacioacuten se realizoacute en Veracruz Veracruz Meacutexico que se encuentra ubicado en la
zona centro del estado
Ensayo cliacutenico y tamantildeo de muestra
Para calcular el tamantildeo de la muestra y conformar el grupo de pacientes neonatos con
cateacuteter umbilical se utilizo un intervalo de confianza de 95 De tal manera el tamantildeo de
muestra estimado fue de 80 pacientes pero se eliminaron 30 debido a bajas del Hospital y
por defuncioacuten debido a padecimientos asociados al nacimiento prematuro del neonato
Criterios de inclusioacuten
Se desarrolloacute un estudio transversal descriptivo para identificar pacientes neonatos que
adquirieron alguna infeccioacuten de forma natural y conocer su prevalencia Soacutelo fueron
considerados pacientes neonatos nacidos en el Hospital de Alta Especialidad de Veracruz
del aacuterea de Pediatriacutea con sospecha de infeccioacuten bacteriana que fueran mayores de una
semana de vida y no mayores a 1 antildeo asiacute como tambieacuten que los cateacuteteres umbilicales
fueran retirados en condiciones higieacutenicas apropiadas en base a lo descrito en la SS y sin
antecedentes de alguna infeccioacuten previa Se lograron reunir un grupo de 50 pacientes que
reunioacute las caracteriacutesticas oacuteptimas para este estudio
Criterios de exclusioacuten
15
No se tomaron en consideracioacuten para este estudio los cultivos de cateacuteteres umbilicales que
no fueron retirados en condiciones apropiadas y los cateacuteteres umbilicales de neonatos que
fueron transportados en un medio de cultivo inadecuado Los Pacientes neonatos que
autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una patologiacutea traumaacutetica asociada y
los pacientes neonatos que autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una baja
por defuncioacuten fueron totalmente descartados para fines de esta investigacioacuten
Caracteriacutesticas de la unidad de pediatriacutea
La unidad de pediatriacutea del Hospital Regional de Alta Especialidad estaacute dividida en diferentes
aeacutereas de las cuales para fines de esta investigacioacuten se analizaron pacientes neonatos de
UCIN UCIM y cunero patoloacutegico Debido a que existen pacientes en el aacuterea de pediatriacutea que
ya no cumplen con el reacutegimen de edad estipulado para este estudio
Muestreo para la seleccioacuten de neonatos
Para la seleccioacuten de los neonatos y para reunir el tamantildeo de la muestra necesario para el
estudio se analizaron cateacuteteres de todos los neonatos con sospecha de infeccioacuten bacteriana
a partir de un mes de edad con el uso de medios de Stuart para transportar el cateacuteter Para
este muestreo no se tomoacute en cuenta el sexo Cada tubo de Stuart se identificoacute con el nombre
completo del paciente el servicio de donde se tomo el tipo de muestra fecha y un nuacutemero
de folio con continuidad Las muestras se conservaron a temperatura ambiente durante la
transportacioacuten a su anaacutelisis y luego fueron remitidas al laboratorio para su anaacutelisis
microbioloacutegico
Teacutecnicas de laboratorio
Para el estudio microbioloacutegico del cateacuteter umbilical del neonato fue utilizada la teacutecnica
semicuantitativa de maki Esta teacutecnica ha sido aceptada por la mayoriacutea de los laboratorios
de microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia
16
Proceso de Investigacioacuten
Se trabajo con pacientes nacidos en el Hospital Regional De Alta Especialidad De Veracruz
los cuales tuvieron participacioacuten en esta investigacioacuten hasta la identificacioacuten del agente
etioloacutegico en el cateacuteter umbilical
Se realizo el retiro del cateacuteter umbilical del neonato con una teacutecnica aseacuteptica utilizando
material esteacuteril se desinfecto la piel con alcohol al 10 y se dejo secar con pinza se retiro el
cateacuteter cuidando de no rosar la piel se corto de 3 a 5 cm de la porcioacuten distal y se coloco en
el medio de transporte Stuart para remitirlo al laboratorio de microbiologiacutea para su anaacutelisis
bacterioloacutegico
En el laboratorio se inoculo el cateacuteter umbilical en el agar base sangre por la teacutecnica
semicuantitativa de maki rotando el cateacuteter con ayuda del asa bacterioloacutegica 5 veces Se
incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera O2 Se prosiguioacute con la interpretacioacuten de la morfologiacutea
colonial se resembraron colonias en los medios Agar sal y manitol Agar Mac Conkey y Agar
Biggy para su diferenciacioacuten se Incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera de O2 continuando con
la Interpretacioacuten de la morfologiacutea colonial
Se realizaron tinciones gram para diferenciar Gram positivas de Gram negativas para Gram
positivas como para Gam negativas se procedioacute a la preparacioacuten de paneles Se Incubaron
los paneles Gram en la estufa del Sensititre a 37degC por 24 Hrs en atmosfera de O2 Se
continuacuteo con la lectura de paneles Gram en autoreader Sensititre obteniendo asiacute el
resultado bacteriano en cuanto a geacutenero y especie
17
Material empleado
Paneles Combo Sensititre
Laminas adhesivas
Agua desmineralizada Sensititre
Tira de substrato para prueba de Gram positivos
Aceite mineral
Reactivos para tincioacuten de Gram
Cabezales de dosificacioacuten Sensititre
Estaacutendar de turbidez McFarland 05
Puntas desechables para pipeta
Tubos de ensaye 13 x 100
Tubos de ensaye 10 x 75
Pipetas Automaacuteticas de 5 ųl
Gradilla
Quemador bunsen
Asa bacterioloacutegica
Cajas petri
Goteros
Jaboacuten de manos
Detergente
Toalla
Franela
Alcohol
Cubrebocas
Guantes desechables
Recipiente para material contaminado
Rollo de papel adsorbente
Cloro
Gasas
Bolsas de plaacutestico
Cerillos
Porta objetos
Cubre objetos 18
Papel estraza
Computadora
Impresora
Hojas tamantildeo carta blancas
Medios de cultivo
Agar base sangre
Agar Sal de manitol
Agar Mac Conkey
Biggy
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes ajustado a Sensititre
Medio de transporte Stuart
Equipos de Laboratorio
1 Estufa de cultivo
2 Microscopio
3 Vortex
4 Auto inoculador
5 SISTEMA SENSITITRE
a Autoreader Sensititre
b Estufa Sensititre
Fundamentos
19
Uno de los sistemas maacutes importantes para la identificacioacuten de microorganismos es observar
su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio El material
alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de
los microorganismos es el Cultivo
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son temperatura grado de humedad y presioacuten de oxiacutegeno
adecuadas asiacute como un grado correcto de acidez o alcalinidad Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante
Estos Medios fueron utilizados en esta investigacioacuten para fines de identificacioacuten de
microorganismos bacterianos Cada medio tiene una caracteriacutestica importante para ser
empleado en este proyecto
A continuacioacuten se describen
Medio de Transporte Stuart
Medio semisoacutelido no nutritivo Contiene tioglicolato de sodio el cual provee un ambiente
reducido y es uacutetil para suprimir cambios oxidativos en el medio de transporte y azul de
metileno que es el indicador de oxido reduccioacuten De esta manera se favorece la viabilidad de
los microorganismos durante su enviacuteo al laboratorio
Agar sangre
La infusioacuten de muacutesculo de corazoacuten y la peptona otorgan al medio un alto valor nutritivo que
permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos auacuten de aquellos
nutricionalmente exigentes El cloruro de sodio mantiene el balance osmoacutetico
El agregado de sangre al medio de cultivo en concentracioacuten final de 5-10 aporta
nutrientes para el crecimiento bacteriano y permite detectar hemoacutelisis
Agar Mac Conkey
20
En el medio de cultivo las peptonas aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo
bacteriano la lactosa es el hidrato de carbono fermentable y la mezcla de sales biliares y el
cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora
Gram positiva Por fermentacioacuten de la lactosa disminuye el pH alrededor de la colonia Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro) la absorcioacuten en las colonias y la
precipitacioacuten de las sales biliares Los microorganismos no fermentadores de lactosa
producen colonias incoloras
Agar sal y manitol
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracioacuten salina Los
estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante Los estafilococos coagulasa negativos
presentan colonias rodeadas de una zona roja o puacuterpura En el medio de cultivo el extracto
de carne y la pluripeptona constituyen la fuente de carbono nitroacutegeno vitaminas y
minerales el manitol es el hidrato de carbono fermentable el cloruro de sodio (que se
encuentra en alta concentracioacuten) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora
acompantildeante y el rojo fenol es el indicador de pH Las bacterias que crecen en un medio
con alta concentracioacuten de sal y fermentan el manitol producen aacutecidos con lo que se modifica
el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo Los estafilococos crecen
en altas concentraciones de sal y pueden o no fermentar el manitol Los estafilococos
coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de
una zona del mismo color Los estafilococos que no fermentan el manitol se visualizan como
colonias rojas rodeadas de una zona del mismo color o puacuterpura
Agar Biggy
El Agar Biggy es una modificacioacuten de la foacutermula desarrollada por Nickerson La
diferenciacioacuten estaacute basada en la morfologiacutea colonial y la pigmentacioacuten tiacutepica que se presenta
en este medio La reduccioacuten del sulfito de bismuto se manifiesta en una pigmentacioacuten de la
colonia que en ocasiones difunde en el medio En este medio el extracto de levadura
proporciona vitaminas y aminoaacutecidos La glicina es utilizada para estimular el crecimiento La
dextrosa es la fuente de carbono El indicador sulfito de bismuto actuacutea tambieacuten como un
inhibidor del desarrollo bacteriano El agar es adicionado como agente solidificante
21
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes
El caldo Mueller-Hinton se recomienda como el medio preferido para pruebas de
susceptibilidad de organismos comuacutenmente aislados aeroacutebicos o facultativos de raacutepido
crecimiento El caldo debe tener el contenido apropiado de cationes (Ca++ y Mg++) El pH
debe estar entre 72 y 74 a temperatura ambiente (25ordm C)
22
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram positivas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar glucosa glicerol maltosa manitol B-metilglucoacutesido
ramnosa sacarosa sorbitol trehalosa La produccioacuten de acido reduce la fluorescencia de un
fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substrato fluorogeacutenico el substrato enzimaacutetico esta vinculado a un fluoroacuteforo
que suprime la fluorescencia La ruptura enzimaacutetica de la unioacuten libera el fluoroacuteforo con
capacidad de fluorescencia
3- Pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea y la arginina (requieren la adicioacuten de aceite
mineral esteacuteril) incrementa el pH y la fluorescencia La esculina es una moleacutecula fluorescente
que al hidrolizarse se descompone en productos no fluorescentes
23
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram negativas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar Arabinosa arabitol celobiosa fructosa inositol
maltosa manitol rafinosa sacarosa sorbitol trehalosa xilosa La produccioacuten de acido
reduce la fluorescencia de un fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substratos fluorogeacutenico Cada substrato enzimaacutetico esta vinculado a un
fluoroacuteforo que suprime la fluorescencia La ruptura particioacuten enzimaacutetico de la unioacuten libera el
fluoroacuteforo con capacidad de fluorescencia
3- Pruebas de utilizacioacuten de carbono Agmatina arginina citrato lisina malonato ornitina y
piruvato La descomposicioacuten del substrato provoca un aumento de pH y la fluorescencia
4- Otras pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea incrementa el pH y la fluorescencia La
esculina es una moleacutecula fluorescente que al hidrolizarse se descompone en productos no
fluorescentes Desaminacioacuten del triptofano La formacioacuten de un color oscuro suprime la sentildeal
fluorescente
24
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
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19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
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20National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report data summary from
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22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
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23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
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38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
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25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
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28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
No se tomaron en consideracioacuten para este estudio los cultivos de cateacuteteres umbilicales que
no fueron retirados en condiciones apropiadas y los cateacuteteres umbilicales de neonatos que
fueron transportados en un medio de cultivo inadecuado Los Pacientes neonatos que
autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una patologiacutea traumaacutetica asociada y
los pacientes neonatos que autorizada su participacioacuten en el estudio presentaron una baja
por defuncioacuten fueron totalmente descartados para fines de esta investigacioacuten
Caracteriacutesticas de la unidad de pediatriacutea
La unidad de pediatriacutea del Hospital Regional de Alta Especialidad estaacute dividida en diferentes
aeacutereas de las cuales para fines de esta investigacioacuten se analizaron pacientes neonatos de
UCIN UCIM y cunero patoloacutegico Debido a que existen pacientes en el aacuterea de pediatriacutea que
ya no cumplen con el reacutegimen de edad estipulado para este estudio
Muestreo para la seleccioacuten de neonatos
Para la seleccioacuten de los neonatos y para reunir el tamantildeo de la muestra necesario para el
estudio se analizaron cateacuteteres de todos los neonatos con sospecha de infeccioacuten bacteriana
a partir de un mes de edad con el uso de medios de Stuart para transportar el cateacuteter Para
este muestreo no se tomoacute en cuenta el sexo Cada tubo de Stuart se identificoacute con el nombre
completo del paciente el servicio de donde se tomo el tipo de muestra fecha y un nuacutemero
de folio con continuidad Las muestras se conservaron a temperatura ambiente durante la
transportacioacuten a su anaacutelisis y luego fueron remitidas al laboratorio para su anaacutelisis
microbioloacutegico
Teacutecnicas de laboratorio
Para el estudio microbioloacutegico del cateacuteter umbilical del neonato fue utilizada la teacutecnica
semicuantitativa de maki Esta teacutecnica ha sido aceptada por la mayoriacutea de los laboratorios
de microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia
16
Proceso de Investigacioacuten
Se trabajo con pacientes nacidos en el Hospital Regional De Alta Especialidad De Veracruz
los cuales tuvieron participacioacuten en esta investigacioacuten hasta la identificacioacuten del agente
etioloacutegico en el cateacuteter umbilical
Se realizo el retiro del cateacuteter umbilical del neonato con una teacutecnica aseacuteptica utilizando
material esteacuteril se desinfecto la piel con alcohol al 10 y se dejo secar con pinza se retiro el
cateacuteter cuidando de no rosar la piel se corto de 3 a 5 cm de la porcioacuten distal y se coloco en
el medio de transporte Stuart para remitirlo al laboratorio de microbiologiacutea para su anaacutelisis
bacterioloacutegico
En el laboratorio se inoculo el cateacuteter umbilical en el agar base sangre por la teacutecnica
semicuantitativa de maki rotando el cateacuteter con ayuda del asa bacterioloacutegica 5 veces Se
incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera O2 Se prosiguioacute con la interpretacioacuten de la morfologiacutea
colonial se resembraron colonias en los medios Agar sal y manitol Agar Mac Conkey y Agar
Biggy para su diferenciacioacuten se Incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera de O2 continuando con
la Interpretacioacuten de la morfologiacutea colonial
Se realizaron tinciones gram para diferenciar Gram positivas de Gram negativas para Gram
positivas como para Gam negativas se procedioacute a la preparacioacuten de paneles Se Incubaron
los paneles Gram en la estufa del Sensititre a 37degC por 24 Hrs en atmosfera de O2 Se
continuacuteo con la lectura de paneles Gram en autoreader Sensititre obteniendo asiacute el
resultado bacteriano en cuanto a geacutenero y especie
17
Material empleado
Paneles Combo Sensititre
Laminas adhesivas
Agua desmineralizada Sensititre
Tira de substrato para prueba de Gram positivos
Aceite mineral
Reactivos para tincioacuten de Gram
Cabezales de dosificacioacuten Sensititre
Estaacutendar de turbidez McFarland 05
Puntas desechables para pipeta
Tubos de ensaye 13 x 100
Tubos de ensaye 10 x 75
Pipetas Automaacuteticas de 5 ųl
Gradilla
Quemador bunsen
Asa bacterioloacutegica
Cajas petri
Goteros
Jaboacuten de manos
Detergente
Toalla
Franela
Alcohol
Cubrebocas
Guantes desechables
Recipiente para material contaminado
Rollo de papel adsorbente
Cloro
Gasas
Bolsas de plaacutestico
Cerillos
Porta objetos
Cubre objetos 18
Papel estraza
Computadora
Impresora
Hojas tamantildeo carta blancas
Medios de cultivo
Agar base sangre
Agar Sal de manitol
Agar Mac Conkey
Biggy
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes ajustado a Sensititre
Medio de transporte Stuart
Equipos de Laboratorio
1 Estufa de cultivo
2 Microscopio
3 Vortex
4 Auto inoculador
5 SISTEMA SENSITITRE
a Autoreader Sensititre
b Estufa Sensititre
Fundamentos
19
Uno de los sistemas maacutes importantes para la identificacioacuten de microorganismos es observar
su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio El material
alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de
los microorganismos es el Cultivo
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son temperatura grado de humedad y presioacuten de oxiacutegeno
adecuadas asiacute como un grado correcto de acidez o alcalinidad Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante
Estos Medios fueron utilizados en esta investigacioacuten para fines de identificacioacuten de
microorganismos bacterianos Cada medio tiene una caracteriacutestica importante para ser
empleado en este proyecto
A continuacioacuten se describen
Medio de Transporte Stuart
Medio semisoacutelido no nutritivo Contiene tioglicolato de sodio el cual provee un ambiente
reducido y es uacutetil para suprimir cambios oxidativos en el medio de transporte y azul de
metileno que es el indicador de oxido reduccioacuten De esta manera se favorece la viabilidad de
los microorganismos durante su enviacuteo al laboratorio
Agar sangre
La infusioacuten de muacutesculo de corazoacuten y la peptona otorgan al medio un alto valor nutritivo que
permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos auacuten de aquellos
nutricionalmente exigentes El cloruro de sodio mantiene el balance osmoacutetico
El agregado de sangre al medio de cultivo en concentracioacuten final de 5-10 aporta
nutrientes para el crecimiento bacteriano y permite detectar hemoacutelisis
Agar Mac Conkey
20
En el medio de cultivo las peptonas aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo
bacteriano la lactosa es el hidrato de carbono fermentable y la mezcla de sales biliares y el
cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora
Gram positiva Por fermentacioacuten de la lactosa disminuye el pH alrededor de la colonia Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro) la absorcioacuten en las colonias y la
precipitacioacuten de las sales biliares Los microorganismos no fermentadores de lactosa
producen colonias incoloras
Agar sal y manitol
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracioacuten salina Los
estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante Los estafilococos coagulasa negativos
presentan colonias rodeadas de una zona roja o puacuterpura En el medio de cultivo el extracto
de carne y la pluripeptona constituyen la fuente de carbono nitroacutegeno vitaminas y
minerales el manitol es el hidrato de carbono fermentable el cloruro de sodio (que se
encuentra en alta concentracioacuten) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora
acompantildeante y el rojo fenol es el indicador de pH Las bacterias que crecen en un medio
con alta concentracioacuten de sal y fermentan el manitol producen aacutecidos con lo que se modifica
el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo Los estafilococos crecen
en altas concentraciones de sal y pueden o no fermentar el manitol Los estafilococos
coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de
una zona del mismo color Los estafilococos que no fermentan el manitol se visualizan como
colonias rojas rodeadas de una zona del mismo color o puacuterpura
Agar Biggy
El Agar Biggy es una modificacioacuten de la foacutermula desarrollada por Nickerson La
diferenciacioacuten estaacute basada en la morfologiacutea colonial y la pigmentacioacuten tiacutepica que se presenta
en este medio La reduccioacuten del sulfito de bismuto se manifiesta en una pigmentacioacuten de la
colonia que en ocasiones difunde en el medio En este medio el extracto de levadura
proporciona vitaminas y aminoaacutecidos La glicina es utilizada para estimular el crecimiento La
dextrosa es la fuente de carbono El indicador sulfito de bismuto actuacutea tambieacuten como un
inhibidor del desarrollo bacteriano El agar es adicionado como agente solidificante
21
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes
El caldo Mueller-Hinton se recomienda como el medio preferido para pruebas de
susceptibilidad de organismos comuacutenmente aislados aeroacutebicos o facultativos de raacutepido
crecimiento El caldo debe tener el contenido apropiado de cationes (Ca++ y Mg++) El pH
debe estar entre 72 y 74 a temperatura ambiente (25ordm C)
22
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram positivas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar glucosa glicerol maltosa manitol B-metilglucoacutesido
ramnosa sacarosa sorbitol trehalosa La produccioacuten de acido reduce la fluorescencia de un
fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substrato fluorogeacutenico el substrato enzimaacutetico esta vinculado a un fluoroacuteforo
que suprime la fluorescencia La ruptura enzimaacutetica de la unioacuten libera el fluoroacuteforo con
capacidad de fluorescencia
3- Pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea y la arginina (requieren la adicioacuten de aceite
mineral esteacuteril) incrementa el pH y la fluorescencia La esculina es una moleacutecula fluorescente
que al hidrolizarse se descompone en productos no fluorescentes
23
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram negativas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar Arabinosa arabitol celobiosa fructosa inositol
maltosa manitol rafinosa sacarosa sorbitol trehalosa xilosa La produccioacuten de acido
reduce la fluorescencia de un fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substratos fluorogeacutenico Cada substrato enzimaacutetico esta vinculado a un
fluoroacuteforo que suprime la fluorescencia La ruptura particioacuten enzimaacutetico de la unioacuten libera el
fluoroacuteforo con capacidad de fluorescencia
3- Pruebas de utilizacioacuten de carbono Agmatina arginina citrato lisina malonato ornitina y
piruvato La descomposicioacuten del substrato provoca un aumento de pH y la fluorescencia
4- Otras pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea incrementa el pH y la fluorescencia La
esculina es una moleacutecula fluorescente que al hidrolizarse se descompone en productos no
fluorescentes Desaminacioacuten del triptofano La formacioacuten de un color oscuro suprime la sentildeal
fluorescente
24
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
BIBLIOGRAFIAS
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10 Restrepo C Natalia Hoyos R Aacutengela ldquoUso de cateacuteteres umbilicales en recieacuten nacidos
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11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
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19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
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22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
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23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
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38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
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28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
Proceso de Investigacioacuten
Se trabajo con pacientes nacidos en el Hospital Regional De Alta Especialidad De Veracruz
los cuales tuvieron participacioacuten en esta investigacioacuten hasta la identificacioacuten del agente
etioloacutegico en el cateacuteter umbilical
Se realizo el retiro del cateacuteter umbilical del neonato con una teacutecnica aseacuteptica utilizando
material esteacuteril se desinfecto la piel con alcohol al 10 y se dejo secar con pinza se retiro el
cateacuteter cuidando de no rosar la piel se corto de 3 a 5 cm de la porcioacuten distal y se coloco en
el medio de transporte Stuart para remitirlo al laboratorio de microbiologiacutea para su anaacutelisis
bacterioloacutegico
En el laboratorio se inoculo el cateacuteter umbilical en el agar base sangre por la teacutecnica
semicuantitativa de maki rotando el cateacuteter con ayuda del asa bacterioloacutegica 5 veces Se
incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera O2 Se prosiguioacute con la interpretacioacuten de la morfologiacutea
colonial se resembraron colonias en los medios Agar sal y manitol Agar Mac Conkey y Agar
Biggy para su diferenciacioacuten se Incubo 24 Hrs A 37degC en atmosfera de O2 continuando con
la Interpretacioacuten de la morfologiacutea colonial
Se realizaron tinciones gram para diferenciar Gram positivas de Gram negativas para Gram
positivas como para Gam negativas se procedioacute a la preparacioacuten de paneles Se Incubaron
los paneles Gram en la estufa del Sensititre a 37degC por 24 Hrs en atmosfera de O2 Se
continuacuteo con la lectura de paneles Gram en autoreader Sensititre obteniendo asiacute el
resultado bacteriano en cuanto a geacutenero y especie
17
Material empleado
Paneles Combo Sensititre
Laminas adhesivas
Agua desmineralizada Sensititre
Tira de substrato para prueba de Gram positivos
Aceite mineral
Reactivos para tincioacuten de Gram
Cabezales de dosificacioacuten Sensititre
Estaacutendar de turbidez McFarland 05
Puntas desechables para pipeta
Tubos de ensaye 13 x 100
Tubos de ensaye 10 x 75
Pipetas Automaacuteticas de 5 ųl
Gradilla
Quemador bunsen
Asa bacterioloacutegica
Cajas petri
Goteros
Jaboacuten de manos
Detergente
Toalla
Franela
Alcohol
Cubrebocas
Guantes desechables
Recipiente para material contaminado
Rollo de papel adsorbente
Cloro
Gasas
Bolsas de plaacutestico
Cerillos
Porta objetos
Cubre objetos 18
Papel estraza
Computadora
Impresora
Hojas tamantildeo carta blancas
Medios de cultivo
Agar base sangre
Agar Sal de manitol
Agar Mac Conkey
Biggy
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes ajustado a Sensititre
Medio de transporte Stuart
Equipos de Laboratorio
1 Estufa de cultivo
2 Microscopio
3 Vortex
4 Auto inoculador
5 SISTEMA SENSITITRE
a Autoreader Sensititre
b Estufa Sensititre
Fundamentos
19
Uno de los sistemas maacutes importantes para la identificacioacuten de microorganismos es observar
su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio El material
alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de
los microorganismos es el Cultivo
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son temperatura grado de humedad y presioacuten de oxiacutegeno
adecuadas asiacute como un grado correcto de acidez o alcalinidad Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante
Estos Medios fueron utilizados en esta investigacioacuten para fines de identificacioacuten de
microorganismos bacterianos Cada medio tiene una caracteriacutestica importante para ser
empleado en este proyecto
A continuacioacuten se describen
Medio de Transporte Stuart
Medio semisoacutelido no nutritivo Contiene tioglicolato de sodio el cual provee un ambiente
reducido y es uacutetil para suprimir cambios oxidativos en el medio de transporte y azul de
metileno que es el indicador de oxido reduccioacuten De esta manera se favorece la viabilidad de
los microorganismos durante su enviacuteo al laboratorio
Agar sangre
La infusioacuten de muacutesculo de corazoacuten y la peptona otorgan al medio un alto valor nutritivo que
permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos auacuten de aquellos
nutricionalmente exigentes El cloruro de sodio mantiene el balance osmoacutetico
El agregado de sangre al medio de cultivo en concentracioacuten final de 5-10 aporta
nutrientes para el crecimiento bacteriano y permite detectar hemoacutelisis
Agar Mac Conkey
20
En el medio de cultivo las peptonas aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo
bacteriano la lactosa es el hidrato de carbono fermentable y la mezcla de sales biliares y el
cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora
Gram positiva Por fermentacioacuten de la lactosa disminuye el pH alrededor de la colonia Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro) la absorcioacuten en las colonias y la
precipitacioacuten de las sales biliares Los microorganismos no fermentadores de lactosa
producen colonias incoloras
Agar sal y manitol
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracioacuten salina Los
estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante Los estafilococos coagulasa negativos
presentan colonias rodeadas de una zona roja o puacuterpura En el medio de cultivo el extracto
de carne y la pluripeptona constituyen la fuente de carbono nitroacutegeno vitaminas y
minerales el manitol es el hidrato de carbono fermentable el cloruro de sodio (que se
encuentra en alta concentracioacuten) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora
acompantildeante y el rojo fenol es el indicador de pH Las bacterias que crecen en un medio
con alta concentracioacuten de sal y fermentan el manitol producen aacutecidos con lo que se modifica
el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo Los estafilococos crecen
en altas concentraciones de sal y pueden o no fermentar el manitol Los estafilococos
coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de
una zona del mismo color Los estafilococos que no fermentan el manitol se visualizan como
colonias rojas rodeadas de una zona del mismo color o puacuterpura
Agar Biggy
El Agar Biggy es una modificacioacuten de la foacutermula desarrollada por Nickerson La
diferenciacioacuten estaacute basada en la morfologiacutea colonial y la pigmentacioacuten tiacutepica que se presenta
en este medio La reduccioacuten del sulfito de bismuto se manifiesta en una pigmentacioacuten de la
colonia que en ocasiones difunde en el medio En este medio el extracto de levadura
proporciona vitaminas y aminoaacutecidos La glicina es utilizada para estimular el crecimiento La
dextrosa es la fuente de carbono El indicador sulfito de bismuto actuacutea tambieacuten como un
inhibidor del desarrollo bacteriano El agar es adicionado como agente solidificante
21
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes
El caldo Mueller-Hinton se recomienda como el medio preferido para pruebas de
susceptibilidad de organismos comuacutenmente aislados aeroacutebicos o facultativos de raacutepido
crecimiento El caldo debe tener el contenido apropiado de cationes (Ca++ y Mg++) El pH
debe estar entre 72 y 74 a temperatura ambiente (25ordm C)
22
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram positivas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar glucosa glicerol maltosa manitol B-metilglucoacutesido
ramnosa sacarosa sorbitol trehalosa La produccioacuten de acido reduce la fluorescencia de un
fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substrato fluorogeacutenico el substrato enzimaacutetico esta vinculado a un fluoroacuteforo
que suprime la fluorescencia La ruptura enzimaacutetica de la unioacuten libera el fluoroacuteforo con
capacidad de fluorescencia
3- Pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea y la arginina (requieren la adicioacuten de aceite
mineral esteacuteril) incrementa el pH y la fluorescencia La esculina es una moleacutecula fluorescente
que al hidrolizarse se descompone en productos no fluorescentes
23
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram negativas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar Arabinosa arabitol celobiosa fructosa inositol
maltosa manitol rafinosa sacarosa sorbitol trehalosa xilosa La produccioacuten de acido
reduce la fluorescencia de un fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substratos fluorogeacutenico Cada substrato enzimaacutetico esta vinculado a un
fluoroacuteforo que suprime la fluorescencia La ruptura particioacuten enzimaacutetico de la unioacuten libera el
fluoroacuteforo con capacidad de fluorescencia
3- Pruebas de utilizacioacuten de carbono Agmatina arginina citrato lisina malonato ornitina y
piruvato La descomposicioacuten del substrato provoca un aumento de pH y la fluorescencia
4- Otras pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea incrementa el pH y la fluorescencia La
esculina es una moleacutecula fluorescente que al hidrolizarse se descompone en productos no
fluorescentes Desaminacioacuten del triptofano La formacioacuten de un color oscuro suprime la sentildeal
fluorescente
24
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
BIBLIOGRAFIAS
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Diseasesrdquo Churchill livingstone 2000 Vol 2 Num5 pp 3005-3015
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10 Restrepo C Natalia Hoyos R Aacutengela ldquoUso de cateacuteteres umbilicales en recieacuten nacidos
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11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
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37
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17Hermansen MC Hermansen MG Intravascular catheter complications in the neonatal
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18Hogan M Neonatal vascular catheters and their complications Radiol Clin North Am 1999
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19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
Gamboa-Caacutezares Isidro A ldquoComplicaciones asociadas a la colocacioacuten de cateacuteteres
umbilicales en neonatosrdquo Revista Mexicana de Pediatria 2007 Vol 74 Nuacutem 2 pp 70-73
20National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report data summary from
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498
21Brun-Buisson C Suspected central venous catheter-associated infection can the catheter be
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22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
relacionadas a cateacuteter vascularrdquo Ministerio de salud 2006 Pp 7-17
23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
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38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
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25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
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27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
Material empleado
Paneles Combo Sensititre
Laminas adhesivas
Agua desmineralizada Sensititre
Tira de substrato para prueba de Gram positivos
Aceite mineral
Reactivos para tincioacuten de Gram
Cabezales de dosificacioacuten Sensititre
Estaacutendar de turbidez McFarland 05
Puntas desechables para pipeta
Tubos de ensaye 13 x 100
Tubos de ensaye 10 x 75
Pipetas Automaacuteticas de 5 ųl
Gradilla
Quemador bunsen
Asa bacterioloacutegica
Cajas petri
Goteros
Jaboacuten de manos
Detergente
Toalla
Franela
Alcohol
Cubrebocas
Guantes desechables
Recipiente para material contaminado
Rollo de papel adsorbente
Cloro
Gasas
Bolsas de plaacutestico
Cerillos
Porta objetos
Cubre objetos 18
Papel estraza
Computadora
Impresora
Hojas tamantildeo carta blancas
Medios de cultivo
Agar base sangre
Agar Sal de manitol
Agar Mac Conkey
Biggy
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes ajustado a Sensititre
Medio de transporte Stuart
Equipos de Laboratorio
1 Estufa de cultivo
2 Microscopio
3 Vortex
4 Auto inoculador
5 SISTEMA SENSITITRE
a Autoreader Sensititre
b Estufa Sensititre
Fundamentos
19
Uno de los sistemas maacutes importantes para la identificacioacuten de microorganismos es observar
su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio El material
alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de
los microorganismos es el Cultivo
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son temperatura grado de humedad y presioacuten de oxiacutegeno
adecuadas asiacute como un grado correcto de acidez o alcalinidad Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante
Estos Medios fueron utilizados en esta investigacioacuten para fines de identificacioacuten de
microorganismos bacterianos Cada medio tiene una caracteriacutestica importante para ser
empleado en este proyecto
A continuacioacuten se describen
Medio de Transporte Stuart
Medio semisoacutelido no nutritivo Contiene tioglicolato de sodio el cual provee un ambiente
reducido y es uacutetil para suprimir cambios oxidativos en el medio de transporte y azul de
metileno que es el indicador de oxido reduccioacuten De esta manera se favorece la viabilidad de
los microorganismos durante su enviacuteo al laboratorio
Agar sangre
La infusioacuten de muacutesculo de corazoacuten y la peptona otorgan al medio un alto valor nutritivo que
permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos auacuten de aquellos
nutricionalmente exigentes El cloruro de sodio mantiene el balance osmoacutetico
El agregado de sangre al medio de cultivo en concentracioacuten final de 5-10 aporta
nutrientes para el crecimiento bacteriano y permite detectar hemoacutelisis
Agar Mac Conkey
20
En el medio de cultivo las peptonas aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo
bacteriano la lactosa es el hidrato de carbono fermentable y la mezcla de sales biliares y el
cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora
Gram positiva Por fermentacioacuten de la lactosa disminuye el pH alrededor de la colonia Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro) la absorcioacuten en las colonias y la
precipitacioacuten de las sales biliares Los microorganismos no fermentadores de lactosa
producen colonias incoloras
Agar sal y manitol
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracioacuten salina Los
estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante Los estafilococos coagulasa negativos
presentan colonias rodeadas de una zona roja o puacuterpura En el medio de cultivo el extracto
de carne y la pluripeptona constituyen la fuente de carbono nitroacutegeno vitaminas y
minerales el manitol es el hidrato de carbono fermentable el cloruro de sodio (que se
encuentra en alta concentracioacuten) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora
acompantildeante y el rojo fenol es el indicador de pH Las bacterias que crecen en un medio
con alta concentracioacuten de sal y fermentan el manitol producen aacutecidos con lo que se modifica
el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo Los estafilococos crecen
en altas concentraciones de sal y pueden o no fermentar el manitol Los estafilococos
coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de
una zona del mismo color Los estafilococos que no fermentan el manitol se visualizan como
colonias rojas rodeadas de una zona del mismo color o puacuterpura
Agar Biggy
El Agar Biggy es una modificacioacuten de la foacutermula desarrollada por Nickerson La
diferenciacioacuten estaacute basada en la morfologiacutea colonial y la pigmentacioacuten tiacutepica que se presenta
en este medio La reduccioacuten del sulfito de bismuto se manifiesta en una pigmentacioacuten de la
colonia que en ocasiones difunde en el medio En este medio el extracto de levadura
proporciona vitaminas y aminoaacutecidos La glicina es utilizada para estimular el crecimiento La
dextrosa es la fuente de carbono El indicador sulfito de bismuto actuacutea tambieacuten como un
inhibidor del desarrollo bacteriano El agar es adicionado como agente solidificante
21
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes
El caldo Mueller-Hinton se recomienda como el medio preferido para pruebas de
susceptibilidad de organismos comuacutenmente aislados aeroacutebicos o facultativos de raacutepido
crecimiento El caldo debe tener el contenido apropiado de cationes (Ca++ y Mg++) El pH
debe estar entre 72 y 74 a temperatura ambiente (25ordm C)
22
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram positivas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar glucosa glicerol maltosa manitol B-metilglucoacutesido
ramnosa sacarosa sorbitol trehalosa La produccioacuten de acido reduce la fluorescencia de un
fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substrato fluorogeacutenico el substrato enzimaacutetico esta vinculado a un fluoroacuteforo
que suprime la fluorescencia La ruptura enzimaacutetica de la unioacuten libera el fluoroacuteforo con
capacidad de fluorescencia
3- Pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea y la arginina (requieren la adicioacuten de aceite
mineral esteacuteril) incrementa el pH y la fluorescencia La esculina es una moleacutecula fluorescente
que al hidrolizarse se descompone en productos no fluorescentes
23
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram negativas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar Arabinosa arabitol celobiosa fructosa inositol
maltosa manitol rafinosa sacarosa sorbitol trehalosa xilosa La produccioacuten de acido
reduce la fluorescencia de un fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substratos fluorogeacutenico Cada substrato enzimaacutetico esta vinculado a un
fluoroacuteforo que suprime la fluorescencia La ruptura particioacuten enzimaacutetico de la unioacuten libera el
fluoroacuteforo con capacidad de fluorescencia
3- Pruebas de utilizacioacuten de carbono Agmatina arginina citrato lisina malonato ornitina y
piruvato La descomposicioacuten del substrato provoca un aumento de pH y la fluorescencia
4- Otras pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea incrementa el pH y la fluorescencia La
esculina es una moleacutecula fluorescente que al hidrolizarse se descompone en productos no
fluorescentes Desaminacioacuten del triptofano La formacioacuten de un color oscuro suprime la sentildeal
fluorescente
24
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
BIBLIOGRAFIAS
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Diseasesrdquo Churchill livingstone 2000 Vol 2 Num5 pp 3005-3015
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22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
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23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
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38
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meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
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27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
Papel estraza
Computadora
Impresora
Hojas tamantildeo carta blancas
Medios de cultivo
Agar base sangre
Agar Sal de manitol
Agar Mac Conkey
Biggy
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes ajustado a Sensititre
Medio de transporte Stuart
Equipos de Laboratorio
1 Estufa de cultivo
2 Microscopio
3 Vortex
4 Auto inoculador
5 SISTEMA SENSITITRE
a Autoreader Sensititre
b Estufa Sensititre
Fundamentos
19
Uno de los sistemas maacutes importantes para la identificacioacuten de microorganismos es observar
su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio El material
alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de
los microorganismos es el Cultivo
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son temperatura grado de humedad y presioacuten de oxiacutegeno
adecuadas asiacute como un grado correcto de acidez o alcalinidad Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante
Estos Medios fueron utilizados en esta investigacioacuten para fines de identificacioacuten de
microorganismos bacterianos Cada medio tiene una caracteriacutestica importante para ser
empleado en este proyecto
A continuacioacuten se describen
Medio de Transporte Stuart
Medio semisoacutelido no nutritivo Contiene tioglicolato de sodio el cual provee un ambiente
reducido y es uacutetil para suprimir cambios oxidativos en el medio de transporte y azul de
metileno que es el indicador de oxido reduccioacuten De esta manera se favorece la viabilidad de
los microorganismos durante su enviacuteo al laboratorio
Agar sangre
La infusioacuten de muacutesculo de corazoacuten y la peptona otorgan al medio un alto valor nutritivo que
permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos auacuten de aquellos
nutricionalmente exigentes El cloruro de sodio mantiene el balance osmoacutetico
El agregado de sangre al medio de cultivo en concentracioacuten final de 5-10 aporta
nutrientes para el crecimiento bacteriano y permite detectar hemoacutelisis
Agar Mac Conkey
20
En el medio de cultivo las peptonas aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo
bacteriano la lactosa es el hidrato de carbono fermentable y la mezcla de sales biliares y el
cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora
Gram positiva Por fermentacioacuten de la lactosa disminuye el pH alrededor de la colonia Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro) la absorcioacuten en las colonias y la
precipitacioacuten de las sales biliares Los microorganismos no fermentadores de lactosa
producen colonias incoloras
Agar sal y manitol
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracioacuten salina Los
estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante Los estafilococos coagulasa negativos
presentan colonias rodeadas de una zona roja o puacuterpura En el medio de cultivo el extracto
de carne y la pluripeptona constituyen la fuente de carbono nitroacutegeno vitaminas y
minerales el manitol es el hidrato de carbono fermentable el cloruro de sodio (que se
encuentra en alta concentracioacuten) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora
acompantildeante y el rojo fenol es el indicador de pH Las bacterias que crecen en un medio
con alta concentracioacuten de sal y fermentan el manitol producen aacutecidos con lo que se modifica
el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo Los estafilococos crecen
en altas concentraciones de sal y pueden o no fermentar el manitol Los estafilococos
coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de
una zona del mismo color Los estafilococos que no fermentan el manitol se visualizan como
colonias rojas rodeadas de una zona del mismo color o puacuterpura
Agar Biggy
El Agar Biggy es una modificacioacuten de la foacutermula desarrollada por Nickerson La
diferenciacioacuten estaacute basada en la morfologiacutea colonial y la pigmentacioacuten tiacutepica que se presenta
en este medio La reduccioacuten del sulfito de bismuto se manifiesta en una pigmentacioacuten de la
colonia que en ocasiones difunde en el medio En este medio el extracto de levadura
proporciona vitaminas y aminoaacutecidos La glicina es utilizada para estimular el crecimiento La
dextrosa es la fuente de carbono El indicador sulfito de bismuto actuacutea tambieacuten como un
inhibidor del desarrollo bacteriano El agar es adicionado como agente solidificante
21
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes
El caldo Mueller-Hinton se recomienda como el medio preferido para pruebas de
susceptibilidad de organismos comuacutenmente aislados aeroacutebicos o facultativos de raacutepido
crecimiento El caldo debe tener el contenido apropiado de cationes (Ca++ y Mg++) El pH
debe estar entre 72 y 74 a temperatura ambiente (25ordm C)
22
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram positivas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar glucosa glicerol maltosa manitol B-metilglucoacutesido
ramnosa sacarosa sorbitol trehalosa La produccioacuten de acido reduce la fluorescencia de un
fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substrato fluorogeacutenico el substrato enzimaacutetico esta vinculado a un fluoroacuteforo
que suprime la fluorescencia La ruptura enzimaacutetica de la unioacuten libera el fluoroacuteforo con
capacidad de fluorescencia
3- Pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea y la arginina (requieren la adicioacuten de aceite
mineral esteacuteril) incrementa el pH y la fluorescencia La esculina es una moleacutecula fluorescente
que al hidrolizarse se descompone en productos no fluorescentes
23
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram negativas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar Arabinosa arabitol celobiosa fructosa inositol
maltosa manitol rafinosa sacarosa sorbitol trehalosa xilosa La produccioacuten de acido
reduce la fluorescencia de un fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substratos fluorogeacutenico Cada substrato enzimaacutetico esta vinculado a un
fluoroacuteforo que suprime la fluorescencia La ruptura particioacuten enzimaacutetico de la unioacuten libera el
fluoroacuteforo con capacidad de fluorescencia
3- Pruebas de utilizacioacuten de carbono Agmatina arginina citrato lisina malonato ornitina y
piruvato La descomposicioacuten del substrato provoca un aumento de pH y la fluorescencia
4- Otras pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea incrementa el pH y la fluorescencia La
esculina es una moleacutecula fluorescente que al hidrolizarse se descompone en productos no
fluorescentes Desaminacioacuten del triptofano La formacioacuten de un color oscuro suprime la sentildeal
fluorescente
24
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
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1 Geral L Mandell John E Bennett Raphael Dolin ldquoPrinciples and practice of Infectious
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Pseudomonas aeruginosardquo Mexicana Patologiacutea Cliacutenica 2004 Vol 51 Nuacutem 4 pp 226-230
3 Jaen Roxana Saporiti Adrian ldquoInfeccioacuten asociada a cateacuteter Estudio comparativo entre
recambio periodico o permanencia prolongadardquo Pediatrica Argentina 2004 Vol 2 pp 96-101
4 Gobierno de Chile Ministerio de Salud Servicio de salud Valdivia Hospital Base Valdivia
5 Grandi Carlos Valenti Eduardo ldquoPrevencioacuten de infecciones intrahospitalariasrdquo Revista del
Hospital materno infantil Ramoacuten Sarna 2005 Vol 24 Nuacutem 4 pp 179-182
6 Villalobos E Sandra ldquoCuidados y generalidades sobre cateacuteteres venosos centralesrdquo Hospital
de Pediatria Centro Meacutedico Nacional Siglo XXI IMSS Pp 29-34
7 Tome-Z Enrique Lizardo Luis ldquoExperiencia en el uso de cateacuteteres venosos centrales en
pacientes ingresados a las unidades de cuidados intensivos del instituto Hondurentildeo de
Seguridad Socialrdquo Honduras Pediaacutetrica 2000 Vol XXI Nuacutem 1
8 Garcia R Jose A Picazo Juan J Microbiologiacutea Cliacutenica Harcourt Brace 1996 Vol 2 Pp
302
9 Rumi B Luisa Torralbas O Jordi Mallafre CarmenrdquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccioacuten 3 Capitulo 52
10 Restrepo C Natalia Hoyos R Aacutengela ldquoUso de cateacuteteres umbilicales en recieacuten nacidos
experiencia en la Cliacutenica del Countryrdquo Sociedad Colombiana de Pediatria 2006 Vol
11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccion 3 Capitulo 51
12Cuerda Compes C Breton Lesmes I Bonada Sanjaume A Planas Vila A ldquoProtocolo para
el diagnostico y tratamiento de las infecciones relacionadas con el cateacuteter en el paciente con
nutricioacuten parenteralrdquo Revista cliacutenica Especializada 2005 Num8 pp 387-389
37
13 Rk Lane Matthay Ma Central Line Infections Curr Opin Crit Care 2002 8 441-448
14Eraso Jenny Troncoso Gloria Aacutelvarez Marta Ibaacutentildeez Milciacuteades ldquoComportamiento
epidemioloacutegico de la sepsis nosocomial en la Unidad de Recieacuten Nacidos de la Fundacioacuten
Cardioinfantilrdquo Nosocomial Infections at the Neonatal Intensive Care Unit of Fundacioacuten
Cardioinfantil in Bogotaacute 2008 Vol 6 Num 1 Pp 36-49
15R Clarck Powers R With R Bloom B Sanchez P Benjamin D Prevention and treatment of
nosocomial sepsis in the NICU J Perinatol 2004 24 446-53
16K Tiffany B Burke C Collins-Odoms D Oelberg Current practice regarding the enteral
feeding of high-risk newborns with umbilical catheters in situ Pediatrics 2003 112 20-3
17Hermansen MC Hermansen MG Intravascular catheter complications in the neonatal
intensive Care Unit Clin Perinatol 2005 32 141-56
18Hogan M Neonatal vascular catheters and their complications Radiol Clin North Am 1999
37 165-72
19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
Gamboa-Caacutezares Isidro A ldquoComplicaciones asociadas a la colocacioacuten de cateacuteteres
umbilicales en neonatosrdquo Revista Mexicana de Pediatria 2007 Vol 74 Nuacutem 2 pp 70-73
20National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report data summary from
January 1992 through June 2003 issued August 2003 Am J Infect Control 2003 31 481-
498
21Brun-Buisson C Suspected central venous catheter-associated infection can the catheter be
safely retained Intensive Care Med 2004 30 1005-1007
22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
relacionadas a cateacuteter vascularrdquo Ministerio de salud 2006 Pp 7-17
23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
Instructor in Pediatrics Harvard Medical School Boston Massachusetts
38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
severe burn trauma Kaunas Lithuania Medicina (Kaunas) 2006 42(7)
25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
emergencia de un patoacutegeno en la comunidad Rev Biomed 2006 Meacutexico 17287-305
26Bonino A Gnesetti A Pujadas M Broggi A Infecciones por Staphylococcus aureus
meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
el Hospital Policial de Uruguay 2004 Arch Pediatr Urug 2007 78(1) 41-47
27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
Uno de los sistemas maacutes importantes para la identificacioacuten de microorganismos es observar
su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio El material
alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de
los microorganismos es el Cultivo
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son temperatura grado de humedad y presioacuten de oxiacutegeno
adecuadas asiacute como un grado correcto de acidez o alcalinidad Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante
Estos Medios fueron utilizados en esta investigacioacuten para fines de identificacioacuten de
microorganismos bacterianos Cada medio tiene una caracteriacutestica importante para ser
empleado en este proyecto
A continuacioacuten se describen
Medio de Transporte Stuart
Medio semisoacutelido no nutritivo Contiene tioglicolato de sodio el cual provee un ambiente
reducido y es uacutetil para suprimir cambios oxidativos en el medio de transporte y azul de
metileno que es el indicador de oxido reduccioacuten De esta manera se favorece la viabilidad de
los microorganismos durante su enviacuteo al laboratorio
Agar sangre
La infusioacuten de muacutesculo de corazoacuten y la peptona otorgan al medio un alto valor nutritivo que
permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos auacuten de aquellos
nutricionalmente exigentes El cloruro de sodio mantiene el balance osmoacutetico
El agregado de sangre al medio de cultivo en concentracioacuten final de 5-10 aporta
nutrientes para el crecimiento bacteriano y permite detectar hemoacutelisis
Agar Mac Conkey
20
En el medio de cultivo las peptonas aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo
bacteriano la lactosa es el hidrato de carbono fermentable y la mezcla de sales biliares y el
cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora
Gram positiva Por fermentacioacuten de la lactosa disminuye el pH alrededor de la colonia Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro) la absorcioacuten en las colonias y la
precipitacioacuten de las sales biliares Los microorganismos no fermentadores de lactosa
producen colonias incoloras
Agar sal y manitol
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracioacuten salina Los
estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante Los estafilococos coagulasa negativos
presentan colonias rodeadas de una zona roja o puacuterpura En el medio de cultivo el extracto
de carne y la pluripeptona constituyen la fuente de carbono nitroacutegeno vitaminas y
minerales el manitol es el hidrato de carbono fermentable el cloruro de sodio (que se
encuentra en alta concentracioacuten) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora
acompantildeante y el rojo fenol es el indicador de pH Las bacterias que crecen en un medio
con alta concentracioacuten de sal y fermentan el manitol producen aacutecidos con lo que se modifica
el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo Los estafilococos crecen
en altas concentraciones de sal y pueden o no fermentar el manitol Los estafilococos
coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de
una zona del mismo color Los estafilococos que no fermentan el manitol se visualizan como
colonias rojas rodeadas de una zona del mismo color o puacuterpura
Agar Biggy
El Agar Biggy es una modificacioacuten de la foacutermula desarrollada por Nickerson La
diferenciacioacuten estaacute basada en la morfologiacutea colonial y la pigmentacioacuten tiacutepica que se presenta
en este medio La reduccioacuten del sulfito de bismuto se manifiesta en una pigmentacioacuten de la
colonia que en ocasiones difunde en el medio En este medio el extracto de levadura
proporciona vitaminas y aminoaacutecidos La glicina es utilizada para estimular el crecimiento La
dextrosa es la fuente de carbono El indicador sulfito de bismuto actuacutea tambieacuten como un
inhibidor del desarrollo bacteriano El agar es adicionado como agente solidificante
21
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes
El caldo Mueller-Hinton se recomienda como el medio preferido para pruebas de
susceptibilidad de organismos comuacutenmente aislados aeroacutebicos o facultativos de raacutepido
crecimiento El caldo debe tener el contenido apropiado de cationes (Ca++ y Mg++) El pH
debe estar entre 72 y 74 a temperatura ambiente (25ordm C)
22
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram positivas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar glucosa glicerol maltosa manitol B-metilglucoacutesido
ramnosa sacarosa sorbitol trehalosa La produccioacuten de acido reduce la fluorescencia de un
fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substrato fluorogeacutenico el substrato enzimaacutetico esta vinculado a un fluoroacuteforo
que suprime la fluorescencia La ruptura enzimaacutetica de la unioacuten libera el fluoroacuteforo con
capacidad de fluorescencia
3- Pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea y la arginina (requieren la adicioacuten de aceite
mineral esteacuteril) incrementa el pH y la fluorescencia La esculina es una moleacutecula fluorescente
que al hidrolizarse se descompone en productos no fluorescentes
23
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram negativas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar Arabinosa arabitol celobiosa fructosa inositol
maltosa manitol rafinosa sacarosa sorbitol trehalosa xilosa La produccioacuten de acido
reduce la fluorescencia de un fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substratos fluorogeacutenico Cada substrato enzimaacutetico esta vinculado a un
fluoroacuteforo que suprime la fluorescencia La ruptura particioacuten enzimaacutetico de la unioacuten libera el
fluoroacuteforo con capacidad de fluorescencia
3- Pruebas de utilizacioacuten de carbono Agmatina arginina citrato lisina malonato ornitina y
piruvato La descomposicioacuten del substrato provoca un aumento de pH y la fluorescencia
4- Otras pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea incrementa el pH y la fluorescencia La
esculina es una moleacutecula fluorescente que al hidrolizarse se descompone en productos no
fluorescentes Desaminacioacuten del triptofano La formacioacuten de un color oscuro suprime la sentildeal
fluorescente
24
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
BIBLIOGRAFIAS
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Diseasesrdquo Churchill livingstone 2000 Vol 2 Num5 pp 3005-3015
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el diagnostico y tratamiento de las infecciones relacionadas con el cateacuteter en el paciente con
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15R Clarck Powers R With R Bloom B Sanchez P Benjamin D Prevention and treatment of
nosocomial sepsis in the NICU J Perinatol 2004 24 446-53
16K Tiffany B Burke C Collins-Odoms D Oelberg Current practice regarding the enteral
feeding of high-risk newborns with umbilical catheters in situ Pediatrics 2003 112 20-3
17Hermansen MC Hermansen MG Intravascular catheter complications in the neonatal
intensive Care Unit Clin Perinatol 2005 32 141-56
18Hogan M Neonatal vascular catheters and their complications Radiol Clin North Am 1999
37 165-72
19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
Gamboa-Caacutezares Isidro A ldquoComplicaciones asociadas a la colocacioacuten de cateacuteteres
umbilicales en neonatosrdquo Revista Mexicana de Pediatria 2007 Vol 74 Nuacutem 2 pp 70-73
20National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report data summary from
January 1992 through June 2003 issued August 2003 Am J Infect Control 2003 31 481-
498
21Brun-Buisson C Suspected central venous catheter-associated infection can the catheter be
safely retained Intensive Care Med 2004 30 1005-1007
22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
relacionadas a cateacuteter vascularrdquo Ministerio de salud 2006 Pp 7-17
23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
Instructor in Pediatrics Harvard Medical School Boston Massachusetts
38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
severe burn trauma Kaunas Lithuania Medicina (Kaunas) 2006 42(7)
25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
emergencia de un patoacutegeno en la comunidad Rev Biomed 2006 Meacutexico 17287-305
26Bonino A Gnesetti A Pujadas M Broggi A Infecciones por Staphylococcus aureus
meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
el Hospital Policial de Uruguay 2004 Arch Pediatr Urug 2007 78(1) 41-47
27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
En el medio de cultivo las peptonas aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo
bacteriano la lactosa es el hidrato de carbono fermentable y la mezcla de sales biliares y el
cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora
Gram positiva Por fermentacioacuten de la lactosa disminuye el pH alrededor de la colonia Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro) la absorcioacuten en las colonias y la
precipitacioacuten de las sales biliares Los microorganismos no fermentadores de lactosa
producen colonias incoloras
Agar sal y manitol
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracioacuten salina Los
estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante Los estafilococos coagulasa negativos
presentan colonias rodeadas de una zona roja o puacuterpura En el medio de cultivo el extracto
de carne y la pluripeptona constituyen la fuente de carbono nitroacutegeno vitaminas y
minerales el manitol es el hidrato de carbono fermentable el cloruro de sodio (que se
encuentra en alta concentracioacuten) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora
acompantildeante y el rojo fenol es el indicador de pH Las bacterias que crecen en un medio
con alta concentracioacuten de sal y fermentan el manitol producen aacutecidos con lo que se modifica
el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo Los estafilococos crecen
en altas concentraciones de sal y pueden o no fermentar el manitol Los estafilococos
coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de
una zona del mismo color Los estafilococos que no fermentan el manitol se visualizan como
colonias rojas rodeadas de una zona del mismo color o puacuterpura
Agar Biggy
El Agar Biggy es una modificacioacuten de la foacutermula desarrollada por Nickerson La
diferenciacioacuten estaacute basada en la morfologiacutea colonial y la pigmentacioacuten tiacutepica que se presenta
en este medio La reduccioacuten del sulfito de bismuto se manifiesta en una pigmentacioacuten de la
colonia que en ocasiones difunde en el medio En este medio el extracto de levadura
proporciona vitaminas y aminoaacutecidos La glicina es utilizada para estimular el crecimiento La
dextrosa es la fuente de carbono El indicador sulfito de bismuto actuacutea tambieacuten como un
inhibidor del desarrollo bacteriano El agar es adicionado como agente solidificante
21
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes
El caldo Mueller-Hinton se recomienda como el medio preferido para pruebas de
susceptibilidad de organismos comuacutenmente aislados aeroacutebicos o facultativos de raacutepido
crecimiento El caldo debe tener el contenido apropiado de cationes (Ca++ y Mg++) El pH
debe estar entre 72 y 74 a temperatura ambiente (25ordm C)
22
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram positivas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar glucosa glicerol maltosa manitol B-metilglucoacutesido
ramnosa sacarosa sorbitol trehalosa La produccioacuten de acido reduce la fluorescencia de un
fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substrato fluorogeacutenico el substrato enzimaacutetico esta vinculado a un fluoroacuteforo
que suprime la fluorescencia La ruptura enzimaacutetica de la unioacuten libera el fluoroacuteforo con
capacidad de fluorescencia
3- Pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea y la arginina (requieren la adicioacuten de aceite
mineral esteacuteril) incrementa el pH y la fluorescencia La esculina es una moleacutecula fluorescente
que al hidrolizarse se descompone en productos no fluorescentes
23
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram negativas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar Arabinosa arabitol celobiosa fructosa inositol
maltosa manitol rafinosa sacarosa sorbitol trehalosa xilosa La produccioacuten de acido
reduce la fluorescencia de un fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substratos fluorogeacutenico Cada substrato enzimaacutetico esta vinculado a un
fluoroacuteforo que suprime la fluorescencia La ruptura particioacuten enzimaacutetico de la unioacuten libera el
fluoroacuteforo con capacidad de fluorescencia
3- Pruebas de utilizacioacuten de carbono Agmatina arginina citrato lisina malonato ornitina y
piruvato La descomposicioacuten del substrato provoca un aumento de pH y la fluorescencia
4- Otras pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea incrementa el pH y la fluorescencia La
esculina es una moleacutecula fluorescente que al hidrolizarse se descompone en productos no
fluorescentes Desaminacioacuten del triptofano La formacioacuten de un color oscuro suprime la sentildeal
fluorescente
24
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
BIBLIOGRAFIAS
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498
21Brun-Buisson C Suspected central venous catheter-associated infection can the catheter be
safely retained Intensive Care Med 2004 30 1005-1007
22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
relacionadas a cateacuteter vascularrdquo Ministerio de salud 2006 Pp 7-17
23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
Instructor in Pediatrics Harvard Medical School Boston Massachusetts
38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
severe burn trauma Kaunas Lithuania Medicina (Kaunas) 2006 42(7)
25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
emergencia de un patoacutegeno en la comunidad Rev Biomed 2006 Meacutexico 17287-305
26Bonino A Gnesetti A Pujadas M Broggi A Infecciones por Staphylococcus aureus
meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
el Hospital Policial de Uruguay 2004 Arch Pediatr Urug 2007 78(1) 41-47
27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
Caldo de cultivo Mueller Hinton con cationes
El caldo Mueller-Hinton se recomienda como el medio preferido para pruebas de
susceptibilidad de organismos comuacutenmente aislados aeroacutebicos o facultativos de raacutepido
crecimiento El caldo debe tener el contenido apropiado de cationes (Ca++ y Mg++) El pH
debe estar entre 72 y 74 a temperatura ambiente (25ordm C)
22
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram positivas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar glucosa glicerol maltosa manitol B-metilglucoacutesido
ramnosa sacarosa sorbitol trehalosa La produccioacuten de acido reduce la fluorescencia de un
fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substrato fluorogeacutenico el substrato enzimaacutetico esta vinculado a un fluoroacuteforo
que suprime la fluorescencia La ruptura enzimaacutetica de la unioacuten libera el fluoroacuteforo con
capacidad de fluorescencia
3- Pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea y la arginina (requieren la adicioacuten de aceite
mineral esteacuteril) incrementa el pH y la fluorescencia La esculina es una moleacutecula fluorescente
que al hidrolizarse se descompone en productos no fluorescentes
23
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram negativas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar Arabinosa arabitol celobiosa fructosa inositol
maltosa manitol rafinosa sacarosa sorbitol trehalosa xilosa La produccioacuten de acido
reduce la fluorescencia de un fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substratos fluorogeacutenico Cada substrato enzimaacutetico esta vinculado a un
fluoroacuteforo que suprime la fluorescencia La ruptura particioacuten enzimaacutetico de la unioacuten libera el
fluoroacuteforo con capacidad de fluorescencia
3- Pruebas de utilizacioacuten de carbono Agmatina arginina citrato lisina malonato ornitina y
piruvato La descomposicioacuten del substrato provoca un aumento de pH y la fluorescencia
4- Otras pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea incrementa el pH y la fluorescencia La
esculina es una moleacutecula fluorescente que al hidrolizarse se descompone en productos no
fluorescentes Desaminacioacuten del triptofano La formacioacuten de un color oscuro suprime la sentildeal
fluorescente
24
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
BIBLIOGRAFIAS
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Diseasesrdquo Churchill livingstone 2000 Vol 2 Num5 pp 3005-3015
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10 Restrepo C Natalia Hoyos R Aacutengela ldquoUso de cateacuteteres umbilicales en recieacuten nacidos
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11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
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37
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17Hermansen MC Hermansen MG Intravascular catheter complications in the neonatal
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18Hogan M Neonatal vascular catheters and their complications Radiol Clin North Am 1999
37 165-72
19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
Gamboa-Caacutezares Isidro A ldquoComplicaciones asociadas a la colocacioacuten de cateacuteteres
umbilicales en neonatosrdquo Revista Mexicana de Pediatria 2007 Vol 74 Nuacutem 2 pp 70-73
20National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report data summary from
January 1992 through June 2003 issued August 2003 Am J Infect Control 2003 31 481-
498
21Brun-Buisson C Suspected central venous catheter-associated infection can the catheter be
safely retained Intensive Care Med 2004 30 1005-1007
22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
relacionadas a cateacuteter vascularrdquo Ministerio de salud 2006 Pp 7-17
23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
Instructor in Pediatrics Harvard Medical School Boston Massachusetts
38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
severe burn trauma Kaunas Lithuania Medicina (Kaunas) 2006 42(7)
25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
emergencia de un patoacutegeno en la comunidad Rev Biomed 2006 Meacutexico 17287-305
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el Hospital Policial de Uruguay 2004 Arch Pediatr Urug 2007 78(1) 41-47
27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram positivas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar glucosa glicerol maltosa manitol B-metilglucoacutesido
ramnosa sacarosa sorbitol trehalosa La produccioacuten de acido reduce la fluorescencia de un
fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substrato fluorogeacutenico el substrato enzimaacutetico esta vinculado a un fluoroacuteforo
que suprime la fluorescencia La ruptura enzimaacutetica de la unioacuten libera el fluoroacuteforo con
capacidad de fluorescencia
3- Pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea y la arginina (requieren la adicioacuten de aceite
mineral esteacuteril) incrementa el pH y la fluorescencia La esculina es una moleacutecula fluorescente
que al hidrolizarse se descompone en productos no fluorescentes
23
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram negativas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar Arabinosa arabitol celobiosa fructosa inositol
maltosa manitol rafinosa sacarosa sorbitol trehalosa xilosa La produccioacuten de acido
reduce la fluorescencia de un fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substratos fluorogeacutenico Cada substrato enzimaacutetico esta vinculado a un
fluoroacuteforo que suprime la fluorescencia La ruptura particioacuten enzimaacutetico de la unioacuten libera el
fluoroacuteforo con capacidad de fluorescencia
3- Pruebas de utilizacioacuten de carbono Agmatina arginina citrato lisina malonato ornitina y
piruvato La descomposicioacuten del substrato provoca un aumento de pH y la fluorescencia
4- Otras pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea incrementa el pH y la fluorescencia La
esculina es una moleacutecula fluorescente que al hidrolizarse se descompone en productos no
fluorescentes Desaminacioacuten del triptofano La formacioacuten de un color oscuro suprime la sentildeal
fluorescente
24
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
BIBLIOGRAFIAS
1 Geral L Mandell John E Bennett Raphael Dolin ldquoPrinciples and practice of Infectious
Diseasesrdquo Churchill livingstone 2000 Vol 2 Num5 pp 3005-3015
36
2 Delgado P Rodriacuteguez P Moreno C Debrosse B ldquoDeterminacioacuten de antibiotipos de
Pseudomonas aeruginosardquo Mexicana Patologiacutea Cliacutenica 2004 Vol 51 Nuacutem 4 pp 226-230
3 Jaen Roxana Saporiti Adrian ldquoInfeccioacuten asociada a cateacuteter Estudio comparativo entre
recambio periodico o permanencia prolongadardquo Pediatrica Argentina 2004 Vol 2 pp 96-101
4 Gobierno de Chile Ministerio de Salud Servicio de salud Valdivia Hospital Base Valdivia
5 Grandi Carlos Valenti Eduardo ldquoPrevencioacuten de infecciones intrahospitalariasrdquo Revista del
Hospital materno infantil Ramoacuten Sarna 2005 Vol 24 Nuacutem 4 pp 179-182
6 Villalobos E Sandra ldquoCuidados y generalidades sobre cateacuteteres venosos centralesrdquo Hospital
de Pediatria Centro Meacutedico Nacional Siglo XXI IMSS Pp 29-34
7 Tome-Z Enrique Lizardo Luis ldquoExperiencia en el uso de cateacuteteres venosos centrales en
pacientes ingresados a las unidades de cuidados intensivos del instituto Hondurentildeo de
Seguridad Socialrdquo Honduras Pediaacutetrica 2000 Vol XXI Nuacutem 1
8 Garcia R Jose A Picazo Juan J Microbiologiacutea Cliacutenica Harcourt Brace 1996 Vol 2 Pp
302
9 Rumi B Luisa Torralbas O Jordi Mallafre CarmenrdquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccioacuten 3 Capitulo 52
10 Restrepo C Natalia Hoyos R Aacutengela ldquoUso de cateacuteteres umbilicales en recieacuten nacidos
experiencia en la Cliacutenica del Countryrdquo Sociedad Colombiana de Pediatria 2006 Vol
11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccion 3 Capitulo 51
12Cuerda Compes C Breton Lesmes I Bonada Sanjaume A Planas Vila A ldquoProtocolo para
el diagnostico y tratamiento de las infecciones relacionadas con el cateacuteter en el paciente con
nutricioacuten parenteralrdquo Revista cliacutenica Especializada 2005 Num8 pp 387-389
37
13 Rk Lane Matthay Ma Central Line Infections Curr Opin Crit Care 2002 8 441-448
14Eraso Jenny Troncoso Gloria Aacutelvarez Marta Ibaacutentildeez Milciacuteades ldquoComportamiento
epidemioloacutegico de la sepsis nosocomial en la Unidad de Recieacuten Nacidos de la Fundacioacuten
Cardioinfantilrdquo Nosocomial Infections at the Neonatal Intensive Care Unit of Fundacioacuten
Cardioinfantil in Bogotaacute 2008 Vol 6 Num 1 Pp 36-49
15R Clarck Powers R With R Bloom B Sanchez P Benjamin D Prevention and treatment of
nosocomial sepsis in the NICU J Perinatol 2004 24 446-53
16K Tiffany B Burke C Collins-Odoms D Oelberg Current practice regarding the enteral
feeding of high-risk newborns with umbilical catheters in situ Pediatrics 2003 112 20-3
17Hermansen MC Hermansen MG Intravascular catheter complications in the neonatal
intensive Care Unit Clin Perinatol 2005 32 141-56
18Hogan M Neonatal vascular catheters and their complications Radiol Clin North Am 1999
37 165-72
19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
Gamboa-Caacutezares Isidro A ldquoComplicaciones asociadas a la colocacioacuten de cateacuteteres
umbilicales en neonatosrdquo Revista Mexicana de Pediatria 2007 Vol 74 Nuacutem 2 pp 70-73
20National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report data summary from
January 1992 through June 2003 issued August 2003 Am J Infect Control 2003 31 481-
498
21Brun-Buisson C Suspected central venous catheter-associated infection can the catheter be
safely retained Intensive Care Med 2004 30 1005-1007
22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
relacionadas a cateacuteter vascularrdquo Ministerio de salud 2006 Pp 7-17
23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
Instructor in Pediatrics Harvard Medical School Boston Massachusetts
38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
severe burn trauma Kaunas Lithuania Medicina (Kaunas) 2006 42(7)
25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
emergencia de un patoacutegeno en la comunidad Rev Biomed 2006 Meacutexico 17287-305
26Bonino A Gnesetti A Pujadas M Broggi A Infecciones por Staphylococcus aureus
meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
el Hospital Policial de Uruguay 2004 Arch Pediatr Urug 2007 78(1) 41-47
27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
Paneles Combo Sensititre para identificacioacuten y determinacioacuten de sensibilidad de
bacterias Gram negativas
La placa Sensititre Combo Gram positivos es un producto de diagnostico en Vitro para la
identificacioacuten y determinacioacuten de la sensibilidad automatizada de bacterias Gram positivas
Cada placa combo contiene 32 pruebas bioquiacutemicas secas cada una y agentes
antimicrobiamos a las diluciones adecuadas Las pruebas de identificacioacuten incluyen medios
bioquimicos claacutesicos reformulados para lectura fluorometrica y pruebas que utilizan
substratos fluorogenicos Las pruebas de sensibilidad implica la deteccioacuten cuantitativa del
crecimiento bacteriano mediante el control de la actividad de las enzimas producidas por los
organismos Los substratos fluorescentes se encuentran deshidratados en la placa o se
agregan como una tira de papel en el caldo de cultivo
1- Pruebas de fermentacioacuten de azuacutecar Arabinosa arabitol celobiosa fructosa inositol
maltosa manitol rafinosa sacarosa sorbitol trehalosa xilosa La produccioacuten de acido
reduce la fluorescencia de un fluoroacuteforo sensible al pH
2- Pruebas de substratos fluorogeacutenico Cada substrato enzimaacutetico esta vinculado a un
fluoroacuteforo que suprime la fluorescencia La ruptura particioacuten enzimaacutetico de la unioacuten libera el
fluoroacuteforo con capacidad de fluorescencia
3- Pruebas de utilizacioacuten de carbono Agmatina arginina citrato lisina malonato ornitina y
piruvato La descomposicioacuten del substrato provoca un aumento de pH y la fluorescencia
4- Otras pruebas especificas la hidroacutelisis de la urea incrementa el pH y la fluorescencia La
esculina es una moleacutecula fluorescente que al hidrolizarse se descompone en productos no
fluorescentes Desaminacioacuten del triptofano La formacioacuten de un color oscuro suprime la sentildeal
fluorescente
24
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
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pacientes ingresados a las unidades de cuidados intensivos del instituto Hondurentildeo de
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302
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de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccioacuten 3 Capitulo 52
10 Restrepo C Natalia Hoyos R Aacutengela ldquoUso de cateacuteteres umbilicales en recieacuten nacidos
experiencia en la Cliacutenica del Countryrdquo Sociedad Colombiana de Pediatria 2006 Vol
11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccion 3 Capitulo 51
12Cuerda Compes C Breton Lesmes I Bonada Sanjaume A Planas Vila A ldquoProtocolo para
el diagnostico y tratamiento de las infecciones relacionadas con el cateacuteter en el paciente con
nutricioacuten parenteralrdquo Revista cliacutenica Especializada 2005 Num8 pp 387-389
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13 Rk Lane Matthay Ma Central Line Infections Curr Opin Crit Care 2002 8 441-448
14Eraso Jenny Troncoso Gloria Aacutelvarez Marta Ibaacutentildeez Milciacuteades ldquoComportamiento
epidemioloacutegico de la sepsis nosocomial en la Unidad de Recieacuten Nacidos de la Fundacioacuten
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16K Tiffany B Burke C Collins-Odoms D Oelberg Current practice regarding the enteral
feeding of high-risk newborns with umbilical catheters in situ Pediatrics 2003 112 20-3
17Hermansen MC Hermansen MG Intravascular catheter complications in the neonatal
intensive Care Unit Clin Perinatol 2005 32 141-56
18Hogan M Neonatal vascular catheters and their complications Radiol Clin North Am 1999
37 165-72
19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
Gamboa-Caacutezares Isidro A ldquoComplicaciones asociadas a la colocacioacuten de cateacuteteres
umbilicales en neonatosrdquo Revista Mexicana de Pediatria 2007 Vol 74 Nuacutem 2 pp 70-73
20National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report data summary from
January 1992 through June 2003 issued August 2003 Am J Infect Control 2003 31 481-
498
21Brun-Buisson C Suspected central venous catheter-associated infection can the catheter be
safely retained Intensive Care Med 2004 30 1005-1007
22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
relacionadas a cateacuteter vascularrdquo Ministerio de salud 2006 Pp 7-17
23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
Instructor in Pediatrics Harvard Medical School Boston Massachusetts
38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
severe burn trauma Kaunas Lithuania Medicina (Kaunas) 2006 42(7)
25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
emergencia de un patoacutegeno en la comunidad Rev Biomed 2006 Meacutexico 17287-305
26Bonino A Gnesetti A Pujadas M Broggi A Infecciones por Staphylococcus aureus
meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
el Hospital Policial de Uruguay 2004 Arch Pediatr Urug 2007 78(1) 41-47
27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
Sistema Sensititre
Es un sistema automatizado para microbiologiacutea el cual realiza la identificacioacuten y
susceptibilidad microbiana en concentracioacuten miacutenima inhibitoria (MIC) Utiliza un sustrato
fluorescente presente en cada medio para detectar el crecimiento microbiano y medir la
actividad metaboacutelica
Fluorescencia es un proceso de emisioacuten en el cual las moleacuteculas son excitadas por la
absorcioacuten de radiacioacuten electromagneacutetica Las especies excitadas se relajan al estado
fundamental liberando su exceso de energiacutea en forma de fotones Una vez excitada la
moleacutecula pasara al modo vibracional de menor energiacutea del estado excitado El fotoacuten emitido
por fluorescencia tiene menos energiacutea que el absorbido Por tanto posee una frecuencia
menor y emite a mayor longitud de onda
25
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
BIBLIOGRAFIAS
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Diseasesrdquo Churchill livingstone 2000 Vol 2 Num5 pp 3005-3015
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neonatales 2006 Seccioacuten 3 Capitulo 52
10 Restrepo C Natalia Hoyos R Aacutengela ldquoUso de cateacuteteres umbilicales en recieacuten nacidos
experiencia en la Cliacutenica del Countryrdquo Sociedad Colombiana de Pediatria 2006 Vol
11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccion 3 Capitulo 51
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37
13 Rk Lane Matthay Ma Central Line Infections Curr Opin Crit Care 2002 8 441-448
14Eraso Jenny Troncoso Gloria Aacutelvarez Marta Ibaacutentildeez Milciacuteades ldquoComportamiento
epidemioloacutegico de la sepsis nosocomial en la Unidad de Recieacuten Nacidos de la Fundacioacuten
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18Hogan M Neonatal vascular catheters and their complications Radiol Clin North Am 1999
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19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
Gamboa-Caacutezares Isidro A ldquoComplicaciones asociadas a la colocacioacuten de cateacuteteres
umbilicales en neonatosrdquo Revista Mexicana de Pediatria 2007 Vol 74 Nuacutem 2 pp 70-73
20National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report data summary from
January 1992 through June 2003 issued August 2003 Am J Infect Control 2003 31 481-
498
21Brun-Buisson C Suspected central venous catheter-associated infection can the catheter be
safely retained Intensive Care Med 2004 30 1005-1007
22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
relacionadas a cateacuteter vascularrdquo Ministerio de salud 2006 Pp 7-17
23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
Instructor in Pediatrics Harvard Medical School Boston Massachusetts
38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
severe burn trauma Kaunas Lithuania Medicina (Kaunas) 2006 42(7)
25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
emergencia de un patoacutegeno en la comunidad Rev Biomed 2006 Meacutexico 17287-305
26Bonino A Gnesetti A Pujadas M Broggi A Infecciones por Staphylococcus aureus
meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
el Hospital Policial de Uruguay 2004 Arch Pediatr Urug 2007 78(1) 41-47
27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
Tecnica
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXPC1 para identificacioacuten y
susceptibilidad a organismos Gram-positivos
Encender el autoinoculador y calibrar con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Se tomoacute de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-positivas) de una placa de Agar Sangre y suspenderlas en
el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc Farland de 05 en el
autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizo
Inmediatamente despueacutes colocar al caldo Muller-Hinton en condiciones de asepsia una tira
con sustrato fluorogegravenico
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el patron 22
sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes se coloca el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inocula el resto de los
pocillos dispensando 100 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en el primer pocillo
Leer las placas a las 24 horas
26
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
BIBLIOGRAFIAS
1 Geral L Mandell John E Bennett Raphael Dolin ldquoPrinciples and practice of Infectious
Diseasesrdquo Churchill livingstone 2000 Vol 2 Num5 pp 3005-3015
36
2 Delgado P Rodriacuteguez P Moreno C Debrosse B ldquoDeterminacioacuten de antibiotipos de
Pseudomonas aeruginosardquo Mexicana Patologiacutea Cliacutenica 2004 Vol 51 Nuacutem 4 pp 226-230
3 Jaen Roxana Saporiti Adrian ldquoInfeccioacuten asociada a cateacuteter Estudio comparativo entre
recambio periodico o permanencia prolongadardquo Pediatrica Argentina 2004 Vol 2 pp 96-101
4 Gobierno de Chile Ministerio de Salud Servicio de salud Valdivia Hospital Base Valdivia
5 Grandi Carlos Valenti Eduardo ldquoPrevencioacuten de infecciones intrahospitalariasrdquo Revista del
Hospital materno infantil Ramoacuten Sarna 2005 Vol 24 Nuacutem 4 pp 179-182
6 Villalobos E Sandra ldquoCuidados y generalidades sobre cateacuteteres venosos centralesrdquo Hospital
de Pediatria Centro Meacutedico Nacional Siglo XXI IMSS Pp 29-34
7 Tome-Z Enrique Lizardo Luis ldquoExperiencia en el uso de cateacuteteres venosos centrales en
pacientes ingresados a las unidades de cuidados intensivos del instituto Hondurentildeo de
Seguridad Socialrdquo Honduras Pediaacutetrica 2000 Vol XXI Nuacutem 1
8 Garcia R Jose A Picazo Juan J Microbiologiacutea Cliacutenica Harcourt Brace 1996 Vol 2 Pp
302
9 Rumi B Luisa Torralbas O Jordi Mallafre CarmenrdquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccioacuten 3 Capitulo 52
10 Restrepo C Natalia Hoyos R Aacutengela ldquoUso de cateacuteteres umbilicales en recieacuten nacidos
experiencia en la Cliacutenica del Countryrdquo Sociedad Colombiana de Pediatria 2006 Vol
11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccion 3 Capitulo 51
12Cuerda Compes C Breton Lesmes I Bonada Sanjaume A Planas Vila A ldquoProtocolo para
el diagnostico y tratamiento de las infecciones relacionadas con el cateacuteter en el paciente con
nutricioacuten parenteralrdquo Revista cliacutenica Especializada 2005 Num8 pp 387-389
37
13 Rk Lane Matthay Ma Central Line Infections Curr Opin Crit Care 2002 8 441-448
14Eraso Jenny Troncoso Gloria Aacutelvarez Marta Ibaacutentildeez Milciacuteades ldquoComportamiento
epidemioloacutegico de la sepsis nosocomial en la Unidad de Recieacuten Nacidos de la Fundacioacuten
Cardioinfantilrdquo Nosocomial Infections at the Neonatal Intensive Care Unit of Fundacioacuten
Cardioinfantil in Bogotaacute 2008 Vol 6 Num 1 Pp 36-49
15R Clarck Powers R With R Bloom B Sanchez P Benjamin D Prevention and treatment of
nosocomial sepsis in the NICU J Perinatol 2004 24 446-53
16K Tiffany B Burke C Collins-Odoms D Oelberg Current practice regarding the enteral
feeding of high-risk newborns with umbilical catheters in situ Pediatrics 2003 112 20-3
17Hermansen MC Hermansen MG Intravascular catheter complications in the neonatal
intensive Care Unit Clin Perinatol 2005 32 141-56
18Hogan M Neonatal vascular catheters and their complications Radiol Clin North Am 1999
37 165-72
19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
Gamboa-Caacutezares Isidro A ldquoComplicaciones asociadas a la colocacioacuten de cateacuteteres
umbilicales en neonatosrdquo Revista Mexicana de Pediatria 2007 Vol 74 Nuacutem 2 pp 70-73
20National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report data summary from
January 1992 through June 2003 issued August 2003 Am J Infect Control 2003 31 481-
498
21Brun-Buisson C Suspected central venous catheter-associated infection can the catheter be
safely retained Intensive Care Med 2004 30 1005-1007
22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
relacionadas a cateacuteter vascularrdquo Ministerio de salud 2006 Pp 7-17
23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
Instructor in Pediatrics Harvard Medical School Boston Massachusetts
38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
severe burn trauma Kaunas Lithuania Medicina (Kaunas) 2006 42(7)
25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
emergencia de un patoacutegeno en la comunidad Rev Biomed 2006 Meacutexico 17287-305
26Bonino A Gnesetti A Pujadas M Broggi A Infecciones por Staphylococcus aureus
meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
el Hospital Policial de Uruguay 2004 Arch Pediatr Urug 2007 78(1) 41-47
27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
Protocolo de trabajo e inoculacioacuten de las placas combo MEXNC1F para identificacioacuten
y susceptibilidad a organismos Gram-negativos
Encender el autoinoculador y calibrarlo con el estaacutendar de Mc Farland de 05
Tomar de dos a tres colonias aisladas y de las mismas caracteriacutesticas coloniales (previa
verificacioacuten de ser bacterias Gram-negativas) de una placa de Agar Sangre o Agar Mc
Conkey y suspenderlas en el caldo estandarizado para inoacuteculo y ajustarlo al estaacutendar de Mc
Farland de 05 en el autoinoculador
Una vez ajustado el caldo para inoacuteculo al estaacutendar de 05 transferir 10 μl con micropipeta y
punta esteacuteril al caldo de Muller-Hinton y homogenizar
Homogenizar
En el autoinoculador colocamos el caldo estandarizado para inoculo y con el Patron 21
Sample 1 el equipo dispensara 50 μl del mismo en los primeros 32 pocillos los cuales
contienen las pruebas bioquiacutemicas
Despueacutes colocamos el caldo de Muller-Hinton y con sample 2 el equipo inoculara el resto de
los pocillos dispensando 50 μl para las pruebas de susceptibilidad
Finalmente con sample 3 el equipo dispensara aceite mineral en dos pocillos
Leer las placas a las 24 horas
NOTA
- ESTA PLACA NO REQUIERE LA ADICIOacuteN DE TIRA FLUOROGENICA
27
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
BIBLIOGRAFIAS
1 Geral L Mandell John E Bennett Raphael Dolin ldquoPrinciples and practice of Infectious
Diseasesrdquo Churchill livingstone 2000 Vol 2 Num5 pp 3005-3015
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2 Delgado P Rodriacuteguez P Moreno C Debrosse B ldquoDeterminacioacuten de antibiotipos de
Pseudomonas aeruginosardquo Mexicana Patologiacutea Cliacutenica 2004 Vol 51 Nuacutem 4 pp 226-230
3 Jaen Roxana Saporiti Adrian ldquoInfeccioacuten asociada a cateacuteter Estudio comparativo entre
recambio periodico o permanencia prolongadardquo Pediatrica Argentina 2004 Vol 2 pp 96-101
4 Gobierno de Chile Ministerio de Salud Servicio de salud Valdivia Hospital Base Valdivia
5 Grandi Carlos Valenti Eduardo ldquoPrevencioacuten de infecciones intrahospitalariasrdquo Revista del
Hospital materno infantil Ramoacuten Sarna 2005 Vol 24 Nuacutem 4 pp 179-182
6 Villalobos E Sandra ldquoCuidados y generalidades sobre cateacuteteres venosos centralesrdquo Hospital
de Pediatria Centro Meacutedico Nacional Siglo XXI IMSS Pp 29-34
7 Tome-Z Enrique Lizardo Luis ldquoExperiencia en el uso de cateacuteteres venosos centrales en
pacientes ingresados a las unidades de cuidados intensivos del instituto Hondurentildeo de
Seguridad Socialrdquo Honduras Pediaacutetrica 2000 Vol XXI Nuacutem 1
8 Garcia R Jose A Picazo Juan J Microbiologiacutea Cliacutenica Harcourt Brace 1996 Vol 2 Pp
302
9 Rumi B Luisa Torralbas O Jordi Mallafre CarmenrdquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccioacuten 3 Capitulo 52
10 Restrepo C Natalia Hoyos R Aacutengela ldquoUso de cateacuteteres umbilicales en recieacuten nacidos
experiencia en la Cliacutenica del Countryrdquo Sociedad Colombiana de Pediatria 2006 Vol
11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccion 3 Capitulo 51
12Cuerda Compes C Breton Lesmes I Bonada Sanjaume A Planas Vila A ldquoProtocolo para
el diagnostico y tratamiento de las infecciones relacionadas con el cateacuteter en el paciente con
nutricioacuten parenteralrdquo Revista cliacutenica Especializada 2005 Num8 pp 387-389
37
13 Rk Lane Matthay Ma Central Line Infections Curr Opin Crit Care 2002 8 441-448
14Eraso Jenny Troncoso Gloria Aacutelvarez Marta Ibaacutentildeez Milciacuteades ldquoComportamiento
epidemioloacutegico de la sepsis nosocomial en la Unidad de Recieacuten Nacidos de la Fundacioacuten
Cardioinfantilrdquo Nosocomial Infections at the Neonatal Intensive Care Unit of Fundacioacuten
Cardioinfantil in Bogotaacute 2008 Vol 6 Num 1 Pp 36-49
15R Clarck Powers R With R Bloom B Sanchez P Benjamin D Prevention and treatment of
nosocomial sepsis in the NICU J Perinatol 2004 24 446-53
16K Tiffany B Burke C Collins-Odoms D Oelberg Current practice regarding the enteral
feeding of high-risk newborns with umbilical catheters in situ Pediatrics 2003 112 20-3
17Hermansen MC Hermansen MG Intravascular catheter complications in the neonatal
intensive Care Unit Clin Perinatol 2005 32 141-56
18Hogan M Neonatal vascular catheters and their complications Radiol Clin North Am 1999
37 165-72
19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
Gamboa-Caacutezares Isidro A ldquoComplicaciones asociadas a la colocacioacuten de cateacuteteres
umbilicales en neonatosrdquo Revista Mexicana de Pediatria 2007 Vol 74 Nuacutem 2 pp 70-73
20National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report data summary from
January 1992 through June 2003 issued August 2003 Am J Infect Control 2003 31 481-
498
21Brun-Buisson C Suspected central venous catheter-associated infection can the catheter be
safely retained Intensive Care Med 2004 30 1005-1007
22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
relacionadas a cateacuteter vascularrdquo Ministerio de salud 2006 Pp 7-17
23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
Instructor in Pediatrics Harvard Medical School Boston Massachusetts
38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
severe burn trauma Kaunas Lithuania Medicina (Kaunas) 2006 42(7)
25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
emergencia de un patoacutegeno en la comunidad Rev Biomed 2006 Meacutexico 17287-305
26Bonino A Gnesetti A Pujadas M Broggi A Infecciones por Staphylococcus aureus
meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
el Hospital Policial de Uruguay 2004 Arch Pediatr Urug 2007 78(1) 41-47
27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
RESULTADOS
En relacioacuten al aislamiento de agentes bacterianos a partir del cultivo del cateacuteter umbilical se
obtuvo que el 78 de los pacientes fueron positivos al cultivo bacteriano mientras que el
22 fue negativo (grafica No 1)
Grafica No 1
AISLAMIENTOS POSITIVOS A AGENTES BACTERIANOS DEL CULTIVO DE LA PUNTA
DEL CATETER UMBILICAL
78
22
MUESTRAS TOTALES
POSITIVAS NEGATIVAS
28
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
BIBLIOGRAFIAS
1 Geral L Mandell John E Bennett Raphael Dolin ldquoPrinciples and practice of Infectious
Diseasesrdquo Churchill livingstone 2000 Vol 2 Num5 pp 3005-3015
36
2 Delgado P Rodriacuteguez P Moreno C Debrosse B ldquoDeterminacioacuten de antibiotipos de
Pseudomonas aeruginosardquo Mexicana Patologiacutea Cliacutenica 2004 Vol 51 Nuacutem 4 pp 226-230
3 Jaen Roxana Saporiti Adrian ldquoInfeccioacuten asociada a cateacuteter Estudio comparativo entre
recambio periodico o permanencia prolongadardquo Pediatrica Argentina 2004 Vol 2 pp 96-101
4 Gobierno de Chile Ministerio de Salud Servicio de salud Valdivia Hospital Base Valdivia
5 Grandi Carlos Valenti Eduardo ldquoPrevencioacuten de infecciones intrahospitalariasrdquo Revista del
Hospital materno infantil Ramoacuten Sarna 2005 Vol 24 Nuacutem 4 pp 179-182
6 Villalobos E Sandra ldquoCuidados y generalidades sobre cateacuteteres venosos centralesrdquo Hospital
de Pediatria Centro Meacutedico Nacional Siglo XXI IMSS Pp 29-34
7 Tome-Z Enrique Lizardo Luis ldquoExperiencia en el uso de cateacuteteres venosos centrales en
pacientes ingresados a las unidades de cuidados intensivos del instituto Hondurentildeo de
Seguridad Socialrdquo Honduras Pediaacutetrica 2000 Vol XXI Nuacutem 1
8 Garcia R Jose A Picazo Juan J Microbiologiacutea Cliacutenica Harcourt Brace 1996 Vol 2 Pp
302
9 Rumi B Luisa Torralbas O Jordi Mallafre CarmenrdquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccioacuten 3 Capitulo 52
10 Restrepo C Natalia Hoyos R Aacutengela ldquoUso de cateacuteteres umbilicales en recieacuten nacidos
experiencia en la Cliacutenica del Countryrdquo Sociedad Colombiana de Pediatria 2006 Vol
11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccion 3 Capitulo 51
12Cuerda Compes C Breton Lesmes I Bonada Sanjaume A Planas Vila A ldquoProtocolo para
el diagnostico y tratamiento de las infecciones relacionadas con el cateacuteter en el paciente con
nutricioacuten parenteralrdquo Revista cliacutenica Especializada 2005 Num8 pp 387-389
37
13 Rk Lane Matthay Ma Central Line Infections Curr Opin Crit Care 2002 8 441-448
14Eraso Jenny Troncoso Gloria Aacutelvarez Marta Ibaacutentildeez Milciacuteades ldquoComportamiento
epidemioloacutegico de la sepsis nosocomial en la Unidad de Recieacuten Nacidos de la Fundacioacuten
Cardioinfantilrdquo Nosocomial Infections at the Neonatal Intensive Care Unit of Fundacioacuten
Cardioinfantil in Bogotaacute 2008 Vol 6 Num 1 Pp 36-49
15R Clarck Powers R With R Bloom B Sanchez P Benjamin D Prevention and treatment of
nosocomial sepsis in the NICU J Perinatol 2004 24 446-53
16K Tiffany B Burke C Collins-Odoms D Oelberg Current practice regarding the enteral
feeding of high-risk newborns with umbilical catheters in situ Pediatrics 2003 112 20-3
17Hermansen MC Hermansen MG Intravascular catheter complications in the neonatal
intensive Care Unit Clin Perinatol 2005 32 141-56
18Hogan M Neonatal vascular catheters and their complications Radiol Clin North Am 1999
37 165-72
19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
Gamboa-Caacutezares Isidro A ldquoComplicaciones asociadas a la colocacioacuten de cateacuteteres
umbilicales en neonatosrdquo Revista Mexicana de Pediatria 2007 Vol 74 Nuacutem 2 pp 70-73
20National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report data summary from
January 1992 through June 2003 issued August 2003 Am J Infect Control 2003 31 481-
498
21Brun-Buisson C Suspected central venous catheter-associated infection can the catheter be
safely retained Intensive Care Med 2004 30 1005-1007
22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
relacionadas a cateacuteter vascularrdquo Ministerio de salud 2006 Pp 7-17
23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
Instructor in Pediatrics Harvard Medical School Boston Massachusetts
38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
severe burn trauma Kaunas Lithuania Medicina (Kaunas) 2006 42(7)
25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
emergencia de un patoacutegeno en la comunidad Rev Biomed 2006 Meacutexico 17287-305
26Bonino A Gnesetti A Pujadas M Broggi A Infecciones por Staphylococcus aureus
meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
el Hospital Policial de Uruguay 2004 Arch Pediatr Urug 2007 78(1) 41-47
27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
De estos cultivos positivos el 57 mostroacute desarrollo de bacterias Gram positivas el 29
fueron bacterias Gram negativas y el 14 fueron levaduras (grafica No 2)
Grafica No 2
ESPECIES GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS AISLADAS EN CULTIVOS DE CATETER
UMBILICAL
n = 39 Aislamientos
50
7
29
14
MORGOLOGIA COLONIAL
Coccos Gram + 50 Basilos Gram + 7
Basilos Gram - 29 Hongos Levaduriformes 14
29
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
BIBLIOGRAFIAS
1 Geral L Mandell John E Bennett Raphael Dolin ldquoPrinciples and practice of Infectious
Diseasesrdquo Churchill livingstone 2000 Vol 2 Num5 pp 3005-3015
36
2 Delgado P Rodriacuteguez P Moreno C Debrosse B ldquoDeterminacioacuten de antibiotipos de
Pseudomonas aeruginosardquo Mexicana Patologiacutea Cliacutenica 2004 Vol 51 Nuacutem 4 pp 226-230
3 Jaen Roxana Saporiti Adrian ldquoInfeccioacuten asociada a cateacuteter Estudio comparativo entre
recambio periodico o permanencia prolongadardquo Pediatrica Argentina 2004 Vol 2 pp 96-101
4 Gobierno de Chile Ministerio de Salud Servicio de salud Valdivia Hospital Base Valdivia
5 Grandi Carlos Valenti Eduardo ldquoPrevencioacuten de infecciones intrahospitalariasrdquo Revista del
Hospital materno infantil Ramoacuten Sarna 2005 Vol 24 Nuacutem 4 pp 179-182
6 Villalobos E Sandra ldquoCuidados y generalidades sobre cateacuteteres venosos centralesrdquo Hospital
de Pediatria Centro Meacutedico Nacional Siglo XXI IMSS Pp 29-34
7 Tome-Z Enrique Lizardo Luis ldquoExperiencia en el uso de cateacuteteres venosos centrales en
pacientes ingresados a las unidades de cuidados intensivos del instituto Hondurentildeo de
Seguridad Socialrdquo Honduras Pediaacutetrica 2000 Vol XXI Nuacutem 1
8 Garcia R Jose A Picazo Juan J Microbiologiacutea Cliacutenica Harcourt Brace 1996 Vol 2 Pp
302
9 Rumi B Luisa Torralbas O Jordi Mallafre CarmenrdquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccioacuten 3 Capitulo 52
10 Restrepo C Natalia Hoyos R Aacutengela ldquoUso de cateacuteteres umbilicales en recieacuten nacidos
experiencia en la Cliacutenica del Countryrdquo Sociedad Colombiana de Pediatria 2006 Vol
11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccion 3 Capitulo 51
12Cuerda Compes C Breton Lesmes I Bonada Sanjaume A Planas Vila A ldquoProtocolo para
el diagnostico y tratamiento de las infecciones relacionadas con el cateacuteter en el paciente con
nutricioacuten parenteralrdquo Revista cliacutenica Especializada 2005 Num8 pp 387-389
37
13 Rk Lane Matthay Ma Central Line Infections Curr Opin Crit Care 2002 8 441-448
14Eraso Jenny Troncoso Gloria Aacutelvarez Marta Ibaacutentildeez Milciacuteades ldquoComportamiento
epidemioloacutegico de la sepsis nosocomial en la Unidad de Recieacuten Nacidos de la Fundacioacuten
Cardioinfantilrdquo Nosocomial Infections at the Neonatal Intensive Care Unit of Fundacioacuten
Cardioinfantil in Bogotaacute 2008 Vol 6 Num 1 Pp 36-49
15R Clarck Powers R With R Bloom B Sanchez P Benjamin D Prevention and treatment of
nosocomial sepsis in the NICU J Perinatol 2004 24 446-53
16K Tiffany B Burke C Collins-Odoms D Oelberg Current practice regarding the enteral
feeding of high-risk newborns with umbilical catheters in situ Pediatrics 2003 112 20-3
17Hermansen MC Hermansen MG Intravascular catheter complications in the neonatal
intensive Care Unit Clin Perinatol 2005 32 141-56
18Hogan M Neonatal vascular catheters and their complications Radiol Clin North Am 1999
37 165-72
19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
Gamboa-Caacutezares Isidro A ldquoComplicaciones asociadas a la colocacioacuten de cateacuteteres
umbilicales en neonatosrdquo Revista Mexicana de Pediatria 2007 Vol 74 Nuacutem 2 pp 70-73
20National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report data summary from
January 1992 through June 2003 issued August 2003 Am J Infect Control 2003 31 481-
498
21Brun-Buisson C Suspected central venous catheter-associated infection can the catheter be
safely retained Intensive Care Med 2004 30 1005-1007
22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
relacionadas a cateacuteter vascularrdquo Ministerio de salud 2006 Pp 7-17
23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
Instructor in Pediatrics Harvard Medical School Boston Massachusetts
38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
severe burn trauma Kaunas Lithuania Medicina (Kaunas) 2006 42(7)
25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
emergencia de un patoacutegeno en la comunidad Rev Biomed 2006 Meacutexico 17287-305
26Bonino A Gnesetti A Pujadas M Broggi A Infecciones por Staphylococcus aureus
meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
el Hospital Policial de Uruguay 2004 Arch Pediatr Urug 2007 78(1) 41-47
27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
De las bacterias Gram positivas encontradas el 36 correspondioacute a la especie S
epidermidis el 16 a S haemolyticus y con menor incidencia se encontroacute al S aureus con 1
caso correspondiente al 4 (Grafica No 3)
Grafica No 3
AGENTES BACTERIANOS GRAM + CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 25 Aislamientos
GRAM POSITIVOS
Sepid
erm
idis
S hae
moly
ticus
S hom
inis-
hom
inis
S cap
itis-c
apitis
S coa
gulas
a ne
g
S war
nery
S aur
eus
0
5
10
15
20
25
30
35
40
3600
16001200 1200 1200
800400
30
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
BIBLIOGRAFIAS
1 Geral L Mandell John E Bennett Raphael Dolin ldquoPrinciples and practice of Infectious
Diseasesrdquo Churchill livingstone 2000 Vol 2 Num5 pp 3005-3015
36
2 Delgado P Rodriacuteguez P Moreno C Debrosse B ldquoDeterminacioacuten de antibiotipos de
Pseudomonas aeruginosardquo Mexicana Patologiacutea Cliacutenica 2004 Vol 51 Nuacutem 4 pp 226-230
3 Jaen Roxana Saporiti Adrian ldquoInfeccioacuten asociada a cateacuteter Estudio comparativo entre
recambio periodico o permanencia prolongadardquo Pediatrica Argentina 2004 Vol 2 pp 96-101
4 Gobierno de Chile Ministerio de Salud Servicio de salud Valdivia Hospital Base Valdivia
5 Grandi Carlos Valenti Eduardo ldquoPrevencioacuten de infecciones intrahospitalariasrdquo Revista del
Hospital materno infantil Ramoacuten Sarna 2005 Vol 24 Nuacutem 4 pp 179-182
6 Villalobos E Sandra ldquoCuidados y generalidades sobre cateacuteteres venosos centralesrdquo Hospital
de Pediatria Centro Meacutedico Nacional Siglo XXI IMSS Pp 29-34
7 Tome-Z Enrique Lizardo Luis ldquoExperiencia en el uso de cateacuteteres venosos centrales en
pacientes ingresados a las unidades de cuidados intensivos del instituto Hondurentildeo de
Seguridad Socialrdquo Honduras Pediaacutetrica 2000 Vol XXI Nuacutem 1
8 Garcia R Jose A Picazo Juan J Microbiologiacutea Cliacutenica Harcourt Brace 1996 Vol 2 Pp
302
9 Rumi B Luisa Torralbas O Jordi Mallafre CarmenrdquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccioacuten 3 Capitulo 52
10 Restrepo C Natalia Hoyos R Aacutengela ldquoUso de cateacuteteres umbilicales en recieacuten nacidos
experiencia en la Cliacutenica del Countryrdquo Sociedad Colombiana de Pediatria 2006 Vol
11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccion 3 Capitulo 51
12Cuerda Compes C Breton Lesmes I Bonada Sanjaume A Planas Vila A ldquoProtocolo para
el diagnostico y tratamiento de las infecciones relacionadas con el cateacuteter en el paciente con
nutricioacuten parenteralrdquo Revista cliacutenica Especializada 2005 Num8 pp 387-389
37
13 Rk Lane Matthay Ma Central Line Infections Curr Opin Crit Care 2002 8 441-448
14Eraso Jenny Troncoso Gloria Aacutelvarez Marta Ibaacutentildeez Milciacuteades ldquoComportamiento
epidemioloacutegico de la sepsis nosocomial en la Unidad de Recieacuten Nacidos de la Fundacioacuten
Cardioinfantilrdquo Nosocomial Infections at the Neonatal Intensive Care Unit of Fundacioacuten
Cardioinfantil in Bogotaacute 2008 Vol 6 Num 1 Pp 36-49
15R Clarck Powers R With R Bloom B Sanchez P Benjamin D Prevention and treatment of
nosocomial sepsis in the NICU J Perinatol 2004 24 446-53
16K Tiffany B Burke C Collins-Odoms D Oelberg Current practice regarding the enteral
feeding of high-risk newborns with umbilical catheters in situ Pediatrics 2003 112 20-3
17Hermansen MC Hermansen MG Intravascular catheter complications in the neonatal
intensive Care Unit Clin Perinatol 2005 32 141-56
18Hogan M Neonatal vascular catheters and their complications Radiol Clin North Am 1999
37 165-72
19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
Gamboa-Caacutezares Isidro A ldquoComplicaciones asociadas a la colocacioacuten de cateacuteteres
umbilicales en neonatosrdquo Revista Mexicana de Pediatria 2007 Vol 74 Nuacutem 2 pp 70-73
20National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report data summary from
January 1992 through June 2003 issued August 2003 Am J Infect Control 2003 31 481-
498
21Brun-Buisson C Suspected central venous catheter-associated infection can the catheter be
safely retained Intensive Care Med 2004 30 1005-1007
22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
relacionadas a cateacuteter vascularrdquo Ministerio de salud 2006 Pp 7-17
23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
Instructor in Pediatrics Harvard Medical School Boston Massachusetts
38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
severe burn trauma Kaunas Lithuania Medicina (Kaunas) 2006 42(7)
25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
emergencia de un patoacutegeno en la comunidad Rev Biomed 2006 Meacutexico 17287-305
26Bonino A Gnesetti A Pujadas M Broggi A Infecciones por Staphylococcus aureus
meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
el Hospital Policial de Uruguay 2004 Arch Pediatr Urug 2007 78(1) 41-47
27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
De las bacterias Gram negativas encontradas el 40 correspondioacute a la especie P
aeruginosa el 30 a E coli y con menor incidencia se encontroacute K oxytoca con 1 caso
correspondiente al 10 (Grafica No 4)
Grafica No 4
AGENTES BACTERIANOS GRAM - CAUSANTES DE INFECCION DE PACIENTES
INCLUIDOS EN EL ESTUDIO CON CATETER UMBILICAL
n = 10 Aislamientos
P aeruginosa
E coli
K pneumoniae
K oxytoca
4000
3000
2000
1000
GRAM NEGATIVOS
31
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
BIBLIOGRAFIAS
1 Geral L Mandell John E Bennett Raphael Dolin ldquoPrinciples and practice of Infectious
Diseasesrdquo Churchill livingstone 2000 Vol 2 Num5 pp 3005-3015
36
2 Delgado P Rodriacuteguez P Moreno C Debrosse B ldquoDeterminacioacuten de antibiotipos de
Pseudomonas aeruginosardquo Mexicana Patologiacutea Cliacutenica 2004 Vol 51 Nuacutem 4 pp 226-230
3 Jaen Roxana Saporiti Adrian ldquoInfeccioacuten asociada a cateacuteter Estudio comparativo entre
recambio periodico o permanencia prolongadardquo Pediatrica Argentina 2004 Vol 2 pp 96-101
4 Gobierno de Chile Ministerio de Salud Servicio de salud Valdivia Hospital Base Valdivia
5 Grandi Carlos Valenti Eduardo ldquoPrevencioacuten de infecciones intrahospitalariasrdquo Revista del
Hospital materno infantil Ramoacuten Sarna 2005 Vol 24 Nuacutem 4 pp 179-182
6 Villalobos E Sandra ldquoCuidados y generalidades sobre cateacuteteres venosos centralesrdquo Hospital
de Pediatria Centro Meacutedico Nacional Siglo XXI IMSS Pp 29-34
7 Tome-Z Enrique Lizardo Luis ldquoExperiencia en el uso de cateacuteteres venosos centrales en
pacientes ingresados a las unidades de cuidados intensivos del instituto Hondurentildeo de
Seguridad Socialrdquo Honduras Pediaacutetrica 2000 Vol XXI Nuacutem 1
8 Garcia R Jose A Picazo Juan J Microbiologiacutea Cliacutenica Harcourt Brace 1996 Vol 2 Pp
302
9 Rumi B Luisa Torralbas O Jordi Mallafre CarmenrdquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccioacuten 3 Capitulo 52
10 Restrepo C Natalia Hoyos R Aacutengela ldquoUso de cateacuteteres umbilicales en recieacuten nacidos
experiencia en la Cliacutenica del Countryrdquo Sociedad Colombiana de Pediatria 2006 Vol
11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccion 3 Capitulo 51
12Cuerda Compes C Breton Lesmes I Bonada Sanjaume A Planas Vila A ldquoProtocolo para
el diagnostico y tratamiento de las infecciones relacionadas con el cateacuteter en el paciente con
nutricioacuten parenteralrdquo Revista cliacutenica Especializada 2005 Num8 pp 387-389
37
13 Rk Lane Matthay Ma Central Line Infections Curr Opin Crit Care 2002 8 441-448
14Eraso Jenny Troncoso Gloria Aacutelvarez Marta Ibaacutentildeez Milciacuteades ldquoComportamiento
epidemioloacutegico de la sepsis nosocomial en la Unidad de Recieacuten Nacidos de la Fundacioacuten
Cardioinfantilrdquo Nosocomial Infections at the Neonatal Intensive Care Unit of Fundacioacuten
Cardioinfantil in Bogotaacute 2008 Vol 6 Num 1 Pp 36-49
15R Clarck Powers R With R Bloom B Sanchez P Benjamin D Prevention and treatment of
nosocomial sepsis in the NICU J Perinatol 2004 24 446-53
16K Tiffany B Burke C Collins-Odoms D Oelberg Current practice regarding the enteral
feeding of high-risk newborns with umbilical catheters in situ Pediatrics 2003 112 20-3
17Hermansen MC Hermansen MG Intravascular catheter complications in the neonatal
intensive Care Unit Clin Perinatol 2005 32 141-56
18Hogan M Neonatal vascular catheters and their complications Radiol Clin North Am 1999
37 165-72
19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
Gamboa-Caacutezares Isidro A ldquoComplicaciones asociadas a la colocacioacuten de cateacuteteres
umbilicales en neonatosrdquo Revista Mexicana de Pediatria 2007 Vol 74 Nuacutem 2 pp 70-73
20National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report data summary from
January 1992 through June 2003 issued August 2003 Am J Infect Control 2003 31 481-
498
21Brun-Buisson C Suspected central venous catheter-associated infection can the catheter be
safely retained Intensive Care Med 2004 30 1005-1007
22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
relacionadas a cateacuteter vascularrdquo Ministerio de salud 2006 Pp 7-17
23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
Instructor in Pediatrics Harvard Medical School Boston Massachusetts
38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
severe burn trauma Kaunas Lithuania Medicina (Kaunas) 2006 42(7)
25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
emergencia de un patoacutegeno en la comunidad Rev Biomed 2006 Meacutexico 17287-305
26Bonino A Gnesetti A Pujadas M Broggi A Infecciones por Staphylococcus aureus
meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
el Hospital Policial de Uruguay 2004 Arch Pediatr Urug 2007 78(1) 41-47
27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
De manera particular en cuanto al geacutenero Caacutendida se encontroacute que el 50 correspondioacute a C
albicans y el 50 a C tropicalis (grafica No 5)
Grafica No 5
ESPECIES DEL GEacuteNERO Caacutendida AISLADOS E IDENTIFICADOS EN CULTIVO DE
CATETER UMBILICAL
n = 4 Aislamientos
5050
HONGOS LEVADURIFORMES
C albicans
C tropicalis
DISCUSIOacuteN
32
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
BIBLIOGRAFIAS
1 Geral L Mandell John E Bennett Raphael Dolin ldquoPrinciples and practice of Infectious
Diseasesrdquo Churchill livingstone 2000 Vol 2 Num5 pp 3005-3015
36
2 Delgado P Rodriacuteguez P Moreno C Debrosse B ldquoDeterminacioacuten de antibiotipos de
Pseudomonas aeruginosardquo Mexicana Patologiacutea Cliacutenica 2004 Vol 51 Nuacutem 4 pp 226-230
3 Jaen Roxana Saporiti Adrian ldquoInfeccioacuten asociada a cateacuteter Estudio comparativo entre
recambio periodico o permanencia prolongadardquo Pediatrica Argentina 2004 Vol 2 pp 96-101
4 Gobierno de Chile Ministerio de Salud Servicio de salud Valdivia Hospital Base Valdivia
5 Grandi Carlos Valenti Eduardo ldquoPrevencioacuten de infecciones intrahospitalariasrdquo Revista del
Hospital materno infantil Ramoacuten Sarna 2005 Vol 24 Nuacutem 4 pp 179-182
6 Villalobos E Sandra ldquoCuidados y generalidades sobre cateacuteteres venosos centralesrdquo Hospital
de Pediatria Centro Meacutedico Nacional Siglo XXI IMSS Pp 29-34
7 Tome-Z Enrique Lizardo Luis ldquoExperiencia en el uso de cateacuteteres venosos centrales en
pacientes ingresados a las unidades de cuidados intensivos del instituto Hondurentildeo de
Seguridad Socialrdquo Honduras Pediaacutetrica 2000 Vol XXI Nuacutem 1
8 Garcia R Jose A Picazo Juan J Microbiologiacutea Cliacutenica Harcourt Brace 1996 Vol 2 Pp
302
9 Rumi B Luisa Torralbas O Jordi Mallafre CarmenrdquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccioacuten 3 Capitulo 52
10 Restrepo C Natalia Hoyos R Aacutengela ldquoUso de cateacuteteres umbilicales en recieacuten nacidos
experiencia en la Cliacutenica del Countryrdquo Sociedad Colombiana de Pediatria 2006 Vol
11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccion 3 Capitulo 51
12Cuerda Compes C Breton Lesmes I Bonada Sanjaume A Planas Vila A ldquoProtocolo para
el diagnostico y tratamiento de las infecciones relacionadas con el cateacuteter en el paciente con
nutricioacuten parenteralrdquo Revista cliacutenica Especializada 2005 Num8 pp 387-389
37
13 Rk Lane Matthay Ma Central Line Infections Curr Opin Crit Care 2002 8 441-448
14Eraso Jenny Troncoso Gloria Aacutelvarez Marta Ibaacutentildeez Milciacuteades ldquoComportamiento
epidemioloacutegico de la sepsis nosocomial en la Unidad de Recieacuten Nacidos de la Fundacioacuten
Cardioinfantilrdquo Nosocomial Infections at the Neonatal Intensive Care Unit of Fundacioacuten
Cardioinfantil in Bogotaacute 2008 Vol 6 Num 1 Pp 36-49
15R Clarck Powers R With R Bloom B Sanchez P Benjamin D Prevention and treatment of
nosocomial sepsis in the NICU J Perinatol 2004 24 446-53
16K Tiffany B Burke C Collins-Odoms D Oelberg Current practice regarding the enteral
feeding of high-risk newborns with umbilical catheters in situ Pediatrics 2003 112 20-3
17Hermansen MC Hermansen MG Intravascular catheter complications in the neonatal
intensive Care Unit Clin Perinatol 2005 32 141-56
18Hogan M Neonatal vascular catheters and their complications Radiol Clin North Am 1999
37 165-72
19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
Gamboa-Caacutezares Isidro A ldquoComplicaciones asociadas a la colocacioacuten de cateacuteteres
umbilicales en neonatosrdquo Revista Mexicana de Pediatria 2007 Vol 74 Nuacutem 2 pp 70-73
20National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report data summary from
January 1992 through June 2003 issued August 2003 Am J Infect Control 2003 31 481-
498
21Brun-Buisson C Suspected central venous catheter-associated infection can the catheter be
safely retained Intensive Care Med 2004 30 1005-1007
22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
relacionadas a cateacuteter vascularrdquo Ministerio de salud 2006 Pp 7-17
23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
Instructor in Pediatrics Harvard Medical School Boston Massachusetts
38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
severe burn trauma Kaunas Lithuania Medicina (Kaunas) 2006 42(7)
25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
emergencia de un patoacutegeno en la comunidad Rev Biomed 2006 Meacutexico 17287-305
26Bonino A Gnesetti A Pujadas M Broggi A Infecciones por Staphylococcus aureus
meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
el Hospital Policial de Uruguay 2004 Arch Pediatr Urug 2007 78(1) 41-47
27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
Clark R (2004) en su estudio de Prevencioacuten y Tratamiento de Enfermedades Nosocomiales
en la UCIN (Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales) menciona que los factores de riesgo
de infecciones asociadas a cateacuteteres umbilicales son diferentes ya que dependen del sitio
donde se instale el cateacuteter aunque el tiempo de permanencia del cateacuteter en los vasos
umbilicales parece ser un factor de riesgo comuacuten independientemente del vaso canalizado
En el presente trabajo del total de pacientes 50 fueron colocados en arteria y 50 en
vena dando como resultado una colonizacioacuten de cateacuteter de 39 muestras correspondiente al
78
Gaspar U (2007) menciona en su artiacuteculo que las complicaciones infecciosas generalmente
obedecen a dos circunstancias 1) que 90 de estos vasos se encuentran colonizados por
bacterias al tercer diacutea de vida y 2) que el cateacuteter por su caraacutecter invasivo favorezca la
entrada de bacterias al organismo
Lo que llamo la atencioacuten en este tipo de estudio realizado en el Hospital de Alta Especialidad
es la diversidad de especies encontradas como fue 4 muestras de S haemolyticus
correspondiente al 103 S hominis-hominis con 3 muestras correspondiente al 77 y S
warnery que aunque no es considerada de importancia cliacutenica obtienen relevancia para este
estudio
El geacutenero maacutes relevante en esta investigacioacuten fue el S epidermidis con un 23 ya que es
una bacteria de flora normal esta bacteria estaacute muy lejos de ser oportunista ya que es
encontrada normalmente en incisiones o heridas debido a que se encuentra en piel respecto
a esta bacteria no se puede decir que es de origen nosocomial debido a esta caracteriacutestica
el s epidermidis es la bacteria mas susceptible de encontrar en el cateacuteter
Al encontrar hallazgos de hongos levaduriformes se expresa que al tratarse de c albicans
esto nos habla de que el microorganismo bacteriano fue contraiacutedo de la madre al hijo siendo
esta la portadora de la candidiasis
33
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
BIBLIOGRAFIAS
1 Geral L Mandell John E Bennett Raphael Dolin ldquoPrinciples and practice of Infectious
Diseasesrdquo Churchill livingstone 2000 Vol 2 Num5 pp 3005-3015
36
2 Delgado P Rodriacuteguez P Moreno C Debrosse B ldquoDeterminacioacuten de antibiotipos de
Pseudomonas aeruginosardquo Mexicana Patologiacutea Cliacutenica 2004 Vol 51 Nuacutem 4 pp 226-230
3 Jaen Roxana Saporiti Adrian ldquoInfeccioacuten asociada a cateacuteter Estudio comparativo entre
recambio periodico o permanencia prolongadardquo Pediatrica Argentina 2004 Vol 2 pp 96-101
4 Gobierno de Chile Ministerio de Salud Servicio de salud Valdivia Hospital Base Valdivia
5 Grandi Carlos Valenti Eduardo ldquoPrevencioacuten de infecciones intrahospitalariasrdquo Revista del
Hospital materno infantil Ramoacuten Sarna 2005 Vol 24 Nuacutem 4 pp 179-182
6 Villalobos E Sandra ldquoCuidados y generalidades sobre cateacuteteres venosos centralesrdquo Hospital
de Pediatria Centro Meacutedico Nacional Siglo XXI IMSS Pp 29-34
7 Tome-Z Enrique Lizardo Luis ldquoExperiencia en el uso de cateacuteteres venosos centrales en
pacientes ingresados a las unidades de cuidados intensivos del instituto Hondurentildeo de
Seguridad Socialrdquo Honduras Pediaacutetrica 2000 Vol XXI Nuacutem 1
8 Garcia R Jose A Picazo Juan J Microbiologiacutea Cliacutenica Harcourt Brace 1996 Vol 2 Pp
302
9 Rumi B Luisa Torralbas O Jordi Mallafre CarmenrdquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccioacuten 3 Capitulo 52
10 Restrepo C Natalia Hoyos R Aacutengela ldquoUso de cateacuteteres umbilicales en recieacuten nacidos
experiencia en la Cliacutenica del Countryrdquo Sociedad Colombiana de Pediatria 2006 Vol
11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccion 3 Capitulo 51
12Cuerda Compes C Breton Lesmes I Bonada Sanjaume A Planas Vila A ldquoProtocolo para
el diagnostico y tratamiento de las infecciones relacionadas con el cateacuteter en el paciente con
nutricioacuten parenteralrdquo Revista cliacutenica Especializada 2005 Num8 pp 387-389
37
13 Rk Lane Matthay Ma Central Line Infections Curr Opin Crit Care 2002 8 441-448
14Eraso Jenny Troncoso Gloria Aacutelvarez Marta Ibaacutentildeez Milciacuteades ldquoComportamiento
epidemioloacutegico de la sepsis nosocomial en la Unidad de Recieacuten Nacidos de la Fundacioacuten
Cardioinfantilrdquo Nosocomial Infections at the Neonatal Intensive Care Unit of Fundacioacuten
Cardioinfantil in Bogotaacute 2008 Vol 6 Num 1 Pp 36-49
15R Clarck Powers R With R Bloom B Sanchez P Benjamin D Prevention and treatment of
nosocomial sepsis in the NICU J Perinatol 2004 24 446-53
16K Tiffany B Burke C Collins-Odoms D Oelberg Current practice regarding the enteral
feeding of high-risk newborns with umbilical catheters in situ Pediatrics 2003 112 20-3
17Hermansen MC Hermansen MG Intravascular catheter complications in the neonatal
intensive Care Unit Clin Perinatol 2005 32 141-56
18Hogan M Neonatal vascular catheters and their complications Radiol Clin North Am 1999
37 165-72
19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
Gamboa-Caacutezares Isidro A ldquoComplicaciones asociadas a la colocacioacuten de cateacuteteres
umbilicales en neonatosrdquo Revista Mexicana de Pediatria 2007 Vol 74 Nuacutem 2 pp 70-73
20National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report data summary from
January 1992 through June 2003 issued August 2003 Am J Infect Control 2003 31 481-
498
21Brun-Buisson C Suspected central venous catheter-associated infection can the catheter be
safely retained Intensive Care Med 2004 30 1005-1007
22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
relacionadas a cateacuteter vascularrdquo Ministerio de salud 2006 Pp 7-17
23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
Instructor in Pediatrics Harvard Medical School Boston Massachusetts
38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
severe burn trauma Kaunas Lithuania Medicina (Kaunas) 2006 42(7)
25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
emergencia de un patoacutegeno en la comunidad Rev Biomed 2006 Meacutexico 17287-305
26Bonino A Gnesetti A Pujadas M Broggi A Infecciones por Staphylococcus aureus
meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
el Hospital Policial de Uruguay 2004 Arch Pediatr Urug 2007 78(1) 41-47
27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
La estancia hospitalaria favorecioacute la colonizacioacuten por agentes microbianos tanto por Gram
positivos y Gram negativos tenieacutendose que el 3846 de los pacientes permanecioacute entre 15
y 30 diacuteas dentro del hospital la estancia y el tiempo favorecioacute el desarrollo de
microorganismos en el cateter de los pacientes
El Cultivo semicuantitativo de la punta del cateacuteter que en esta investigacioacuten se empleo fue
descrito por primera vez por Maki y cols en 1977 Este meacutetodo cultiva la superficie externa
de la punta del cateacuteter con un criterio de positividad (gt15 UFC) fue elegido porque la mayoriacutea
de los pacientes con recuentos inferiores no presentaban datos sugestivos de infeccioacuten La
especificidad de eacutesta teacutecnica fue del 76
Este meacutetodo por su sencillez ha sido aceptado por la mayoriacutea de los laboratorios de
microbiologiacutea y es la teacutecnica de referencia que se tomo para esta investigacioacuten en donde de
los 39 casos positivos uacutenicamente 9 muestras correspondientes al 2307 coinciden con
este paraacutemetro esto no significa que el 7693 no tengan importancia cliacutenica
CONCLUSION
34
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
BIBLIOGRAFIAS
1 Geral L Mandell John E Bennett Raphael Dolin ldquoPrinciples and practice of Infectious
Diseasesrdquo Churchill livingstone 2000 Vol 2 Num5 pp 3005-3015
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2 Delgado P Rodriacuteguez P Moreno C Debrosse B ldquoDeterminacioacuten de antibiotipos de
Pseudomonas aeruginosardquo Mexicana Patologiacutea Cliacutenica 2004 Vol 51 Nuacutem 4 pp 226-230
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recambio periodico o permanencia prolongadardquo Pediatrica Argentina 2004 Vol 2 pp 96-101
4 Gobierno de Chile Ministerio de Salud Servicio de salud Valdivia Hospital Base Valdivia
5 Grandi Carlos Valenti Eduardo ldquoPrevencioacuten de infecciones intrahospitalariasrdquo Revista del
Hospital materno infantil Ramoacuten Sarna 2005 Vol 24 Nuacutem 4 pp 179-182
6 Villalobos E Sandra ldquoCuidados y generalidades sobre cateacuteteres venosos centralesrdquo Hospital
de Pediatria Centro Meacutedico Nacional Siglo XXI IMSS Pp 29-34
7 Tome-Z Enrique Lizardo Luis ldquoExperiencia en el uso de cateacuteteres venosos centrales en
pacientes ingresados a las unidades de cuidados intensivos del instituto Hondurentildeo de
Seguridad Socialrdquo Honduras Pediaacutetrica 2000 Vol XXI Nuacutem 1
8 Garcia R Jose A Picazo Juan J Microbiologiacutea Cliacutenica Harcourt Brace 1996 Vol 2 Pp
302
9 Rumi B Luisa Torralbas O Jordi Mallafre CarmenrdquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccioacuten 3 Capitulo 52
10 Restrepo C Natalia Hoyos R Aacutengela ldquoUso de cateacuteteres umbilicales en recieacuten nacidos
experiencia en la Cliacutenica del Countryrdquo Sociedad Colombiana de Pediatria 2006 Vol
11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccion 3 Capitulo 51
12Cuerda Compes C Breton Lesmes I Bonada Sanjaume A Planas Vila A ldquoProtocolo para
el diagnostico y tratamiento de las infecciones relacionadas con el cateacuteter en el paciente con
nutricioacuten parenteralrdquo Revista cliacutenica Especializada 2005 Num8 pp 387-389
37
13 Rk Lane Matthay Ma Central Line Infections Curr Opin Crit Care 2002 8 441-448
14Eraso Jenny Troncoso Gloria Aacutelvarez Marta Ibaacutentildeez Milciacuteades ldquoComportamiento
epidemioloacutegico de la sepsis nosocomial en la Unidad de Recieacuten Nacidos de la Fundacioacuten
Cardioinfantilrdquo Nosocomial Infections at the Neonatal Intensive Care Unit of Fundacioacuten
Cardioinfantil in Bogotaacute 2008 Vol 6 Num 1 Pp 36-49
15R Clarck Powers R With R Bloom B Sanchez P Benjamin D Prevention and treatment of
nosocomial sepsis in the NICU J Perinatol 2004 24 446-53
16K Tiffany B Burke C Collins-Odoms D Oelberg Current practice regarding the enteral
feeding of high-risk newborns with umbilical catheters in situ Pediatrics 2003 112 20-3
17Hermansen MC Hermansen MG Intravascular catheter complications in the neonatal
intensive Care Unit Clin Perinatol 2005 32 141-56
18Hogan M Neonatal vascular catheters and their complications Radiol Clin North Am 1999
37 165-72
19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
Gamboa-Caacutezares Isidro A ldquoComplicaciones asociadas a la colocacioacuten de cateacuteteres
umbilicales en neonatosrdquo Revista Mexicana de Pediatria 2007 Vol 74 Nuacutem 2 pp 70-73
20National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report data summary from
January 1992 through June 2003 issued August 2003 Am J Infect Control 2003 31 481-
498
21Brun-Buisson C Suspected central venous catheter-associated infection can the catheter be
safely retained Intensive Care Med 2004 30 1005-1007
22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
relacionadas a cateacuteter vascularrdquo Ministerio de salud 2006 Pp 7-17
23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
Instructor in Pediatrics Harvard Medical School Boston Massachusetts
38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
severe burn trauma Kaunas Lithuania Medicina (Kaunas) 2006 42(7)
25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
emergencia de un patoacutegeno en la comunidad Rev Biomed 2006 Meacutexico 17287-305
26Bonino A Gnesetti A Pujadas M Broggi A Infecciones por Staphylococcus aureus
meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
el Hospital Policial de Uruguay 2004 Arch Pediatr Urug 2007 78(1) 41-47
27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
La colonizacioacuten de un cateacuteter depende de un proceso de adhesioacuten bacteriana mediada por
una interaccioacuten fiacutesico-quiacutemica (interaccioacuten hidrofoacutebica fuerzas de Van der Waals)
Staphylococcus epidermidis se une al cateacuteter principalmente mediante interaccioacuten
hidrofoacutebica la adhesioacuten de Staphylococcus aureus o Candida estaacute estimulada por las
proteiacutenas seacutericas siendo su adherencia mayor
Se logro identificar la flora bacteriana que con frecuencia de desarrolla en el ombligo del
neonato al utilizar el cateacuteter como via de administracioacuten de soluciones o para la toma de
presioacuten durante su atencioacuten Hospitalaria obteniendo el genero y especie de los
micoorganismos encontrados
De los resultados obtenidos en esta investigacioacuten el agente microbiano con mayor incidencia
fueron los Gram positivos en un 50 donde el geacutenero maacutes relevante fue el S epidermidis
con un total de 9 casos correspondiente al 23
A pesar de que K pneumoniae al igual que E coli estaacuten en igualdades de proporcioacuten con 2
casos cada uno correspondiente al 51 llaman la importancia las P aeruginosa con 4 casos
correspondientes al 103 no sin olvidar la presencia de oacuterganos levaduriformes con 2 casos
cada uno de las especies albicas y tropicalis indiscutiblemente es importante su
identificacioacuten es estos casos en los que la prolongada hospitalizacioacuten y los procedimientos
invasivos a los que son sometidos los recieacuten nacidos han contribuido al aumento de ciertas
infecciones bacterianas La duracioacuten de la estancia hospitalaria un factores relacionado
directamente con infecciones nosocomiales
35
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
BIBLIOGRAFIAS
1 Geral L Mandell John E Bennett Raphael Dolin ldquoPrinciples and practice of Infectious
Diseasesrdquo Churchill livingstone 2000 Vol 2 Num5 pp 3005-3015
36
2 Delgado P Rodriacuteguez P Moreno C Debrosse B ldquoDeterminacioacuten de antibiotipos de
Pseudomonas aeruginosardquo Mexicana Patologiacutea Cliacutenica 2004 Vol 51 Nuacutem 4 pp 226-230
3 Jaen Roxana Saporiti Adrian ldquoInfeccioacuten asociada a cateacuteter Estudio comparativo entre
recambio periodico o permanencia prolongadardquo Pediatrica Argentina 2004 Vol 2 pp 96-101
4 Gobierno de Chile Ministerio de Salud Servicio de salud Valdivia Hospital Base Valdivia
5 Grandi Carlos Valenti Eduardo ldquoPrevencioacuten de infecciones intrahospitalariasrdquo Revista del
Hospital materno infantil Ramoacuten Sarna 2005 Vol 24 Nuacutem 4 pp 179-182
6 Villalobos E Sandra ldquoCuidados y generalidades sobre cateacuteteres venosos centralesrdquo Hospital
de Pediatria Centro Meacutedico Nacional Siglo XXI IMSS Pp 29-34
7 Tome-Z Enrique Lizardo Luis ldquoExperiencia en el uso de cateacuteteres venosos centrales en
pacientes ingresados a las unidades de cuidados intensivos del instituto Hondurentildeo de
Seguridad Socialrdquo Honduras Pediaacutetrica 2000 Vol XXI Nuacutem 1
8 Garcia R Jose A Picazo Juan J Microbiologiacutea Cliacutenica Harcourt Brace 1996 Vol 2 Pp
302
9 Rumi B Luisa Torralbas O Jordi Mallafre CarmenrdquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccioacuten 3 Capitulo 52
10 Restrepo C Natalia Hoyos R Aacutengela ldquoUso de cateacuteteres umbilicales en recieacuten nacidos
experiencia en la Cliacutenica del Countryrdquo Sociedad Colombiana de Pediatria 2006 Vol
11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccion 3 Capitulo 51
12Cuerda Compes C Breton Lesmes I Bonada Sanjaume A Planas Vila A ldquoProtocolo para
el diagnostico y tratamiento de las infecciones relacionadas con el cateacuteter en el paciente con
nutricioacuten parenteralrdquo Revista cliacutenica Especializada 2005 Num8 pp 387-389
37
13 Rk Lane Matthay Ma Central Line Infections Curr Opin Crit Care 2002 8 441-448
14Eraso Jenny Troncoso Gloria Aacutelvarez Marta Ibaacutentildeez Milciacuteades ldquoComportamiento
epidemioloacutegico de la sepsis nosocomial en la Unidad de Recieacuten Nacidos de la Fundacioacuten
Cardioinfantilrdquo Nosocomial Infections at the Neonatal Intensive Care Unit of Fundacioacuten
Cardioinfantil in Bogotaacute 2008 Vol 6 Num 1 Pp 36-49
15R Clarck Powers R With R Bloom B Sanchez P Benjamin D Prevention and treatment of
nosocomial sepsis in the NICU J Perinatol 2004 24 446-53
16K Tiffany B Burke C Collins-Odoms D Oelberg Current practice regarding the enteral
feeding of high-risk newborns with umbilical catheters in situ Pediatrics 2003 112 20-3
17Hermansen MC Hermansen MG Intravascular catheter complications in the neonatal
intensive Care Unit Clin Perinatol 2005 32 141-56
18Hogan M Neonatal vascular catheters and their complications Radiol Clin North Am 1999
37 165-72
19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
Gamboa-Caacutezares Isidro A ldquoComplicaciones asociadas a la colocacioacuten de cateacuteteres
umbilicales en neonatosrdquo Revista Mexicana de Pediatria 2007 Vol 74 Nuacutem 2 pp 70-73
20National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report data summary from
January 1992 through June 2003 issued August 2003 Am J Infect Control 2003 31 481-
498
21Brun-Buisson C Suspected central venous catheter-associated infection can the catheter be
safely retained Intensive Care Med 2004 30 1005-1007
22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
relacionadas a cateacuteter vascularrdquo Ministerio de salud 2006 Pp 7-17
23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
Instructor in Pediatrics Harvard Medical School Boston Massachusetts
38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
severe burn trauma Kaunas Lithuania Medicina (Kaunas) 2006 42(7)
25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
emergencia de un patoacutegeno en la comunidad Rev Biomed 2006 Meacutexico 17287-305
26Bonino A Gnesetti A Pujadas M Broggi A Infecciones por Staphylococcus aureus
meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
el Hospital Policial de Uruguay 2004 Arch Pediatr Urug 2007 78(1) 41-47
27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
Aunque se tienen avances en la prevencioacuten y el tratamiento las infecciones continuacutean
siendo una importante causa de morbilidad y mortalidad en el periodo neonatal
Se proporciono esta informacioacuten al servicio de vigilancia y control de enfermedades
Hospitalarias para una mayor calidad del servicio del Hospital a la comunidad Logrando asiacute
los objetivos de esta investigacioacuten
BIBLIOGRAFIAS
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Diseasesrdquo Churchill livingstone 2000 Vol 2 Num5 pp 3005-3015
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10 Restrepo C Natalia Hoyos R Aacutengela ldquoUso de cateacuteteres umbilicales en recieacuten nacidos
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11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
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el diagnostico y tratamiento de las infecciones relacionadas con el cateacuteter en el paciente con
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epidemioloacutegico de la sepsis nosocomial en la Unidad de Recieacuten Nacidos de la Fundacioacuten
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intensive Care Unit Clin Perinatol 2005 32 141-56
18Hogan M Neonatal vascular catheters and their complications Radiol Clin North Am 1999
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19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
Gamboa-Caacutezares Isidro A ldquoComplicaciones asociadas a la colocacioacuten de cateacuteteres
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24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
severe burn trauma Kaunas Lithuania Medicina (Kaunas) 2006 42(7)
25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
emergencia de un patoacutegeno en la comunidad Rev Biomed 2006 Meacutexico 17287-305
26Bonino A Gnesetti A Pujadas M Broggi A Infecciones por Staphylococcus aureus
meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
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27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
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28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
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pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
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productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
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30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
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2 Delgado P Rodriacuteguez P Moreno C Debrosse B ldquoDeterminacioacuten de antibiotipos de
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recambio periodico o permanencia prolongadardquo Pediatrica Argentina 2004 Vol 2 pp 96-101
4 Gobierno de Chile Ministerio de Salud Servicio de salud Valdivia Hospital Base Valdivia
5 Grandi Carlos Valenti Eduardo ldquoPrevencioacuten de infecciones intrahospitalariasrdquo Revista del
Hospital materno infantil Ramoacuten Sarna 2005 Vol 24 Nuacutem 4 pp 179-182
6 Villalobos E Sandra ldquoCuidados y generalidades sobre cateacuteteres venosos centralesrdquo Hospital
de Pediatria Centro Meacutedico Nacional Siglo XXI IMSS Pp 29-34
7 Tome-Z Enrique Lizardo Luis ldquoExperiencia en el uso de cateacuteteres venosos centrales en
pacientes ingresados a las unidades de cuidados intensivos del instituto Hondurentildeo de
Seguridad Socialrdquo Honduras Pediaacutetrica 2000 Vol XXI Nuacutem 1
8 Garcia R Jose A Picazo Juan J Microbiologiacutea Cliacutenica Harcourt Brace 1996 Vol 2 Pp
302
9 Rumi B Luisa Torralbas O Jordi Mallafre CarmenrdquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccioacuten 3 Capitulo 52
10 Restrepo C Natalia Hoyos R Aacutengela ldquoUso de cateacuteteres umbilicales en recieacuten nacidos
experiencia en la Cliacutenica del Countryrdquo Sociedad Colombiana de Pediatria 2006 Vol
11Rumi B Luisa Mallafre Carmen Jimeacutenez M Marisol ldquoCuidados y prevencioacuten de la infeccioacuten
de cateacuteteres intravascularesrdquo Tratado de enfermeriacutea cuidados criacuteticos pediaacutetricos y
neonatales 2006 Seccion 3 Capitulo 51
12Cuerda Compes C Breton Lesmes I Bonada Sanjaume A Planas Vila A ldquoProtocolo para
el diagnostico y tratamiento de las infecciones relacionadas con el cateacuteter en el paciente con
nutricioacuten parenteralrdquo Revista cliacutenica Especializada 2005 Num8 pp 387-389
37
13 Rk Lane Matthay Ma Central Line Infections Curr Opin Crit Care 2002 8 441-448
14Eraso Jenny Troncoso Gloria Aacutelvarez Marta Ibaacutentildeez Milciacuteades ldquoComportamiento
epidemioloacutegico de la sepsis nosocomial en la Unidad de Recieacuten Nacidos de la Fundacioacuten
Cardioinfantilrdquo Nosocomial Infections at the Neonatal Intensive Care Unit of Fundacioacuten
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nosocomial sepsis in the NICU J Perinatol 2004 24 446-53
16K Tiffany B Burke C Collins-Odoms D Oelberg Current practice regarding the enteral
feeding of high-risk newborns with umbilical catheters in situ Pediatrics 2003 112 20-3
17Hermansen MC Hermansen MG Intravascular catheter complications in the neonatal
intensive Care Unit Clin Perinatol 2005 32 141-56
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37 165-72
19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
Gamboa-Caacutezares Isidro A ldquoComplicaciones asociadas a la colocacioacuten de cateacuteteres
umbilicales en neonatosrdquo Revista Mexicana de Pediatria 2007 Vol 74 Nuacutem 2 pp 70-73
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22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
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23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
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38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
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25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
emergencia de un patoacutegeno en la comunidad Rev Biomed 2006 Meacutexico 17287-305
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meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
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27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
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Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
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14Eraso Jenny Troncoso Gloria Aacutelvarez Marta Ibaacutentildeez Milciacuteades ldquoComportamiento
epidemioloacutegico de la sepsis nosocomial en la Unidad de Recieacuten Nacidos de la Fundacioacuten
Cardioinfantilrdquo Nosocomial Infections at the Neonatal Intensive Care Unit of Fundacioacuten
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nosocomial sepsis in the NICU J Perinatol 2004 24 446-53
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feeding of high-risk newborns with umbilical catheters in situ Pediatrics 2003 112 20-3
17Hermansen MC Hermansen MG Intravascular catheter complications in the neonatal
intensive Care Unit Clin Perinatol 2005 32 141-56
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37 165-72
19Gaspar U Caacuteceres-Papadakis M Hortensia Peacuterez-Villalobos Ugalde- Fernaacutendez J Horacio
Gamboa-Caacutezares Isidro A ldquoComplicaciones asociadas a la colocacioacuten de cateacuteteres
umbilicales en neonatosrdquo Revista Mexicana de Pediatria 2007 Vol 74 Nuacutem 2 pp 70-73
20National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System Report data summary from
January 1992 through June 2003 issued August 2003 Am J Infect Control 2003 31 481-
498
21Brun-Buisson C Suspected central venous catheter-associated infection can the catheter be
safely retained Intensive Care Med 2004 30 1005-1007
22 Villavicencio M Heacutector D Ochoa Linares Marina ldquoGuiacutea para las prevencioacuten de infecciones
relacionadas a cateacuteter vascularrdquo Ministerio de salud 2006 Pp 7-17
23Deirdre OReilly Neonatologist Divisioacuten of Newborn Medicine Childrens Hospital Boston and
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38
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
severe burn trauma Kaunas Lithuania Medicina (Kaunas) 2006 42(7)
25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
emergencia de un patoacutegeno en la comunidad Rev Biomed 2006 Meacutexico 17287-305
26Bonino A Gnesetti A Pujadas M Broggi A Infecciones por Staphylococcus aureus
meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
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27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
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cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
productoras de szlig-lactamasas de Espectro extendido tipo SHV-5 en una unidad de cuidados
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Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
39
24Vostrugina Kristina Gudavičienė Daiva Vitkauskienė Astra Bacteremias in patients with
severe burn trauma Kaunas Lithuania Medicina (Kaunas) 2006 42(7)
25Bustos Martiacutenez J A Hamdan Partida A Gutieacuterrez Caacuterdenas M Staphylococcus aureus la
emergencia de un patoacutegeno en la comunidad Rev Biomed 2006 Meacutexico 17287-305
26Bonino A Gnesetti A Pujadas M Broggi A Infecciones por Staphylococcus aureus
meticilino resistente adquirido en la comunidad anaacutelisis de la poblacioacuten pediaacutetrica asistida en
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27Muntildeoz Mendoza D Cavazos Elizondo M E Loera Reyna A Zapata Castilleja C Trevintildeo
Salinas M B Peacuterez Chaacutevez A Bacteriemia por Staphylococcus aureus en pacientes
pediaacutetricos del Hospital Universitario Medicina Universitaria Meacutexico 20068(31)79-83
28Gonzaacutelez Alemaacuten M Juaacuterez Gaacutemez I Gonzaacutelez Mesa L Nadal Becerra L Frecuencia de
colonizacioacuten de Staphylococcus aureus resistente a meticilina en un grupo de nintildeos en edad
escolar Revista de enfermedades infecciosas en pediatriacutea 2007 Cuba Vol XX Nuacutem 80
pp 86-91
29Calderoacuten E R Sacsaquispe C R Pasteraacuten F G Galas M F Soto P J Riveros Q J and
cools Caracterizacioacuten molecular de klebsiella pneumoniae Y enterobacter cloacae
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intensivos neonatal de lima Rev Peruacute MED Exp salud publica 2003 20 (3) 121-127
30Martiacutenez Ramos P J Espinal Mariacuten P A Bustos G Aacute Mattar Velilla S Prevaleciacutea de
Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido
(BLEE) en el Hospital San Jeroacutenimo de Monteriacutea Med UNAB 2005 Colombia8 (1) 15-22
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