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Trabajo Práctico N°3
INTEGRANTES:
VASALLO KARINA
PRADEDA CRISTIAN
DIAZ RECALDE MAXIMILIANO
CROMATOGRAFÍA
En placa y en columna
Realizamos una cromatografía en columna con el fin deseparar una mezcla de colorantes: azul de metileno y rojo demetilo.
Utilizamos este método de separación porque aprovecha ladiferencia de polaridad entre estas sustancias.
Azul de metileno: polar
Rojo de metilo: no polar
Para seleccionar el mejor eluyente, en primer lugar realizamos cuatro pruebas de cromatografía en placas de gel de sílice.
Con un capilar angostado se colocó una gota de muestra en cuatro
placas de gel de sílice.
Se prepararon cuatro vasos de precipitado que contenían
cuatro mililitros de: metanol, diclorometano, mezcla 3:1
diclorometano-metanol y mezcla 30:1 de diclorometano-metanol.
Luego se colocó una placa de silicagel en cada uno de
los vasos de precipitado.
Se retiraron las placas cuando el eluyente hubo
alcanzado el otro extremo de la placa.
La elección del eluyenteapropiado estriba en su capacidad para arrastrar ambos componentes en
distinta proporción.
Puede observarse que sólo en la placa 3 ambos
componentes se desplazaron, razón por la
cual fue elegida como eluyente la mezcla 3:1
diclorometano-metanol.
Diclorometano Metanol 3:1 30:1
Cromatografía en columna
Materiales: bureta, soporte universal, agarradera para bureta, tubos de ensayo, embudo, vaso de precipitados, algodón, pipeta, perita de goma, silicagel.
Reactivos: muestra (mezcla rojo de metilo y azul de metileno), mezcla 3:1 diclorometano-metanol, ácido acético.
Se armó el dispositivo de la foto.
Con ayuda de una vara de vidrio se colocó un pequeño pedazo de algodón en el fondo de la bureta.
Usando un embudo se introdujo en la bureta una cantidad de silicagel medida al ras con una tapa de
gaseosa.
Luego se colocó otro pequeño pedazo de algodón sobre la silicagel.
Para que la silicagel se compactara y no se formasen canales se le dieron algunos golpecitos a la pared de la
bureta.
Se abrió el robinete de la bureta y se vertió el eluyentehasta humedecer totalmente la silicagel.
Usando una pipeta se sembraron 0,5 ml de muestra encima del
algodón y la silicagel, como se ve en la foto.
Usando un embudo se vertió
gradualmente el eluyente (mezcla 3:1
diclorometano-metanol) cuidando
que nunca se seque la silicagel.
A medida que la muestra bajaba por la bureta sus
componentes se separaban.
En un Erlenmeyer se recogió la porción que correspondía
al rojo de metilo.
Con el objetivo de evitar que los componentes de la
muestra volvieran a mezclarse, se recogió una porción intermedia en un
tubo de ensayos.
Para acelerar el descenso del azul de metileno se agregó al eluyente
unos pocos mililitros de ácido acético.
La elución continuó hasta que la silicagel quedó limpia.
Se obtuvieron los colorantes por separado.
Se realizaron pruebas cromatográficas en placa de
cada componente comparándolo con un
patrón, Azul de Metileno y Rojo de Metilo.
No se observan diferencias en el Rf de cada componente con
respecto al Rf del patrón, por lo cual
podemos decir que se trata de la misma
sustancia.
Puede verse que cada uno de los
componentes es una sustancia pura porque
no hay separación en el arrastre producido por
el eluyente
Rf patrón = 3.5cm/3.7cm = 0.95
Rf muestra = 3.5cm/3.7cm = 0.95
Rf patrón = 3.6cm/3.7cm = 0.97
Rf muestra = 3.6cm/3.7cm = 0.97
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