View
30
Download
0
Category
Preview:
Citation preview
IRTA-CReSA. Col·laboració en tasques de laboratori
Programa Argó 2015
Ana Serrano, Olga Valero i Marina Nieves
Índex1. Haemophilus parasuis
2. Cultius bacterians
3. Tinció Gram
4. Procediment PCR,Eric-PCR, PCR de
virulència
5. Conclusió
Haemophilus parasuis-Colonitzador primari del tracte respiratori dels garrins.
-Agent causal de la malaltia de Glässer.
-Molt heterogeni (varietat de soques).
Diagnòstic
Objectiu: Generar cultius de colònies aïllades i observar el creixementProcediment: Estendre hisop en dues zones per la placa d’agar xocolata.
Deixar reposar el cultiu a l’estufa (37ºC, 5% CO2)
Resultat:
CULTIU BACTERIÀ 1
Objectiu: Caracteritzar les colònies cultivadesProcediment: A partir de les colònies aïllades cultivades intentem tornar a
generar un cultiu en plaques agar sang i agar xocolata. Deixem reposar 24 hores en les mateixes condicions.
Resultat:
CULTIU BACTERIÀ 2
Tinció Gram1. Agafem part del cultiu i el posem en el portaobjectes.
2. Tenyim la mostra en cristall violeta.
3. Afegim lugol per fixar-ho.
4. Hi introduïm alcohol.
5. Tenyim la mostra amb safranina.
Procediment PCRs1. Extracció DNA a partir dels cultius obtinguts
2. Preparació de la solució necessària PCR (H2O, MgCl2, Buffer,
primers, enzim Taq, nucleòtids)
3. Introduïm en diferents strips la solució i el DNA extret de cada
mostra.
4. Ho introduïm al termociclador seguint els temps i les temperatures
corresponents a cada PCR, i el posem en funcionament.
5. Correm el gel per poder observar els resultats.
PCR PATOLÒGICA
Objectiu: Comprovació de la presència de Haemophilus parasuis a les mostres.
ERIC-PCR
Objectiu: Determinar el tipus de soca causant del cas clínic.
PCR DE VIRULÈNCIA
Objectiu: Determinar si la soca és virulenta o no virulenta.
NV NV - NV V V V Control Control
Conclusions• Podem concloure que els garrins estaven infectats per la bactèria
Haemophilus parasuis.
Recommended