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Control De Calidad Interno
Seguimiento de las condiciones de
trabajo de cada laboratorio, que
permite ver a diario la confiabilidad
de los resultados.
Fases Para La Calidad De Un Proceso En El Laboratorio:
Fase pre-analítica
Fase analítica
Fase post-analítica
• Fase Pre-analítica
Control de equipos que intervengan en la conservación y análisis de la muestra, reactivos, personal, etc.
Errores que podemos encontrar: Errores administrativos. Errores de la muestra. Errores en la estandarización.
Fase Analítica :
Se refiere a los controles y
observaciones de los análisis
realizados en el laboratorio, con
la respectiva verificación del
método.
Errores Analíticos :
Errores determinados ó sistemáticos.
Relacionados con el método, personal e instrumentos.
Resultados constantemente bajos o altos son causados por este tipo de error.
Influye en la exactitud de los resultados.
Errores Indeterminados o Aleatorios
Entrenamiento inadecuado, fatiga, dificultad de observación, vencimiento de reactivos.
Influyen en la reproductibilidad de la medición.
Afecta la precisión de los resultados.
Fase Post-analítica :
Confirmación de los resultados (trascripción)
Puntualidad reporte
Registro (unidades SI)
Inspeccionar nueva curva de calibración
Verificar los valores de control de calidad en relación a los límites aceptables
Manuales (manual de calidad)
Control Interno en Microbiología
Control a la muestra
Control a los medios de cultivo
Control a los procesos de tinción
Control de pruebas de sensibilidad
Control al Proceso de Tinción: Se preparan láminas con una gota de
suspensión que contenga organismos gram(+) y gram (-) en proporciones iguales.
Una vez seco, se almacenan sin fijar con calor como controles.
Bacillus spp. y Neisseria spp.
Controles se aplican a reactivos nuevos, entrenamiento, una vez por semana.
Control de Calidad en las Pruebas de Sensibilidad
Según las necesidades respiratorias
de los microorganismos, se
distinguen 2 grupos de
Antibiogramas:
Antibiogramas para gérmenes
aerobios
Antibiogramas para gérmenes
anaerobios
A. Antibiograma por dilución:
1. En medio líquido
Permite investigar la concentración mínima inhibitoria (CMI) y la concentración mínima bactericida (CMB)
2. En medio sólido
Permite investigar la CMI, que en este caso coincide con la CMB
B. Antibiogramas por difusión en medio sólido
Permite investigar la CMI de forma indirecta y aproximada, al relacionarla mediante reglas de regresión con los halos de inhibición
Antibiograma Aeróbio
1. Método de dilución en medio
líquido
2. Método de dilución en medio
sólido
3. Método de difusión en medio
sólido
En cualquiera de los 3 tipos de antibiogramas aerobios se consideran los siguientes puntos:
Medio de cultivo Inóculo Antimicrobianos Incubación Lectura e interpretación de resultados Control de calidad al producto final
Medio de Cultivo :
Será de amplio espectro nutritivo y permitirá el crecimiento de la mayoría de microorganismos a los que va destinado.
Para los más lábiles podrá incorporar sangre o suero sanguíneo.
La adición de lo anterior no es muy recomendable, pues limita la acción de algunos antimicrobianos que se ligan a las proteínas.
Tendrá un pH estable (7.2-7.4) y no sufrirá oscilaciones por acción de los microorganismos sobre los componentes del medio
No incluirá inhibidores de los
antimicrobianos como:
Peptonas, que inactivan los
derivados sulfamídicos
Fosfatos, NaCl y extracto de cerebro
(lecitina), que inactivan
aminoglicósidos y polimixinas
Sales de Ca y Mg, que forman
compuestos quelantes con
betalactamicos y tetraciclinas
Ácido para-amino-benzóico (PABA) o
cualquier otro antagonista por competencia.
Glúcidos, que en medios mal tamponados
dan lugar a disminuciones del pH.
El medio que mejor cumple estas condiciones
es el Mueller-Hinton.
Inóculo Presentará una turbidez análoga al tubo
No. 0.5 de Mcfarland, que se prepara
añadiendo 0.5 ml de BaCl2 0.048 M a
99.5 ml de H2SO4 0.36 N.
Este patrón se conserva estable durante 1 año en tubos de vidrio tapados, pero si se cierran a la llama, su duración es de varios años.
Antimicrobianos:
Deben proceder directamente de firmas comerciales que se dediquen a su fabricación, y tendrán una actividad en producto activo conocida ( mg ó UI/ml)
Los discos o comprimidos procederán de firmas acreditadas, que solo se dediquen a su producción, y que además no fabriquen antibióticos
Cada vez que entre un nuevo lote se debe controlar la calidad de los discos
Incubación :En todos los medios aerobios, se
incuba a 35oC durante 18-24 horas
Lectura e Interpretación de los resultados :
Es propio de cada método y se realiza comparando el resultado obtenido (halo) con las tablas correspondientes
Control de Calidad:
Cada laboratorio tendrá
seleccionadas algunas cepas de
sensibilidad conocida, para que
sirvan periódicamente de control
interno de la calidad
Staphylococcus aureus, Escherichia
coli y Pseudomona aeruginosa
Antibiograma Anaerobio
Método de difusión en medio
sólido
Método de Elución en medio
líquido
Método de dilución en caldo
Método de dilución en Agar
Medio de cultivo
La necesidad de utilizar productos
suplementarios para garantizar el
crecimiento de anaerobios, afecta los
resultados del antibiograma.
La adición de sangre al medio base
rebaja las CMI y el diámetro del halo de
inhibición.
Otras sustancias inhiben o alteran los
resultados:extracto de carne,
peptonas,etc.
Los cambios de pH:
La atmósfera ideal esta compuesta de 85% de Nitrógeno, 10% de Hidrogeno y 5% de Anhídrido Carbónico. La presencia de este último compuesto provoca en la superficie del medio una tendencia hacia la acidez, que altera la acción de betalactamicos y aminoglicósidos
El distinto periodo de duplicación de
los microorganismos dificulta
estandarizar las normas para la
preparación del inoculo
Concentración del inóculo
Se encuentran entre 35oC y tiempo de incubación entre 24-48h, según la velocidad de crecimiento del microorganismo.
En cualquier caso las siembras se incuban dentro de jarras especiales exentas de oxígeno
Características de la incubación:
Fuentes Comunes de Error:
Utilización de un agar diferente al recomendado por la técnica.
Preparación del medio de cultivo con un pH inadecuado.
Utilización de medios de cultivo con fecha de expiración vencida, mal almacenados o hidratados.
Excesivo retraso entre la preparación del medio y su inoculación
Excesivo retraso entre la inoculación y la aplicación de los discos
Conservación incorrecta de los discos de sensibilidad: refrigerados y en recipientes libres de humedad.
Preparación y/o conservación incorrecta del patrón de turbidez
Cualquier omisión o falla en el procedimiento ó técnica escogida(temperatura,tiempo,lectura)
Omitir el uso de las cepas de microorganismos control
No realizar las modificaciones y justificaciones para:
H. Influenzae: Agar MH + 1% de Hb (5% sangre de caballo).
N. Gonorrhoeae : Agar GC base sin Hb y suplementado con 1% de isovitalex. CO2 al 5-10%.
S. Pneumoniae: Agar MH + sangre de cordero al 5% y atmósfera aerobica sin CO2
Estafilococos: para detectar las cepas heteroresistentes a las penicilinas isoxazólicas, deben incubarse a 30oC, agar MH hipertónico (4% NaCL)
