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República Bolivariana de Venezuela República Bolivariana de Venezuela Ministerio para el Poder Popular de la Educación Superior Ministerio para el Poder Popular de la Educación Superior Facultad de Ciencias de la Salud Facultad de Ciencias de la Salud Escuela de Patología Médica Escuela de Patología Médica HEMATOXILINA - HEMATOXILINA - EOSINA EOSINA

Metodos de Tincion

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Page 1: Metodos de Tincion

República Bolivariana de VenezuelaRepública Bolivariana de VenezuelaMinisterio para el Poder Popular de la Educación SuperiorMinisterio para el Poder Popular de la Educación SuperiorFacultad de Ciencias de la SaludFacultad de Ciencias de la SaludEscuela de Patología MédicaEscuela de Patología Médica

HEMATOXILINA - HEMATOXILINA - EOSINAEOSINA

Page 2: Metodos de Tincion

TINCIÓNTINCIÓNhemaToxIlINa-eosINahemaToxIlINa-eosINa

Page 3: Metodos de Tincion

HEMATOXILINHEMATOXILINAA

Page 4: Metodos de Tincion

HEMATOXILINAHEMATOXILINA

Es un colorante NATURAL.Es un colorante NATURAL.Hay que oxidarla.Hay que oxidarla.

Proceso de oxidación:Proceso de oxidación:Maduración de la Maduración de la

HEMATOXILINA.HEMATOXILINA.

Page 5: Metodos de Tincion

HEMATOXILINAHEMATOXILINA

La HEMATOXILINA tiñe:La HEMATOXILINA tiñe:Estructuras ácidasEstructuras ácidasEstructuras BasófilasEstructuras Basófilas

Y existen algunos tipos …Y existen algunos tipos …

Page 6: Metodos de Tincion

Lacas AlumÍnIcas deHEMATOXILINA

HEMATOXILINA deHarris

HEMATOXILINA deMayer

Page 7: Metodos de Tincion

HEMATOXILINA deHarris

Page 8: Metodos de Tincion

HEMATOXILINA deMayer

Page 9: Metodos de Tincion

HEMATOXILINAHEMATOXILINA

Para la coloración con Hematoxilina se Para la coloración con Hematoxilina se utilizan los siguientes:utilizan los siguientes:

IngredientesIngredientes 1 g Hematoxilina1 g Hematoxilina 20 g Alumbre potásico20 g Alumbre potásico 0,5 g Oxido de mercurio0,5 g Oxido de mercurio200 cc Agua destilada200 cc Agua destilada

Page 10: Metodos de Tincion

HEMATOXILINAHEMATOXILINA

Se siguen los siguientes pasos:Se siguen los siguientes pasos:2.2. Disolver la Hematoxilina con el alcohol en un Disolver la Hematoxilina con el alcohol en un

vaso de precipitadosvaso de precipitados3.3. Calentar el agua destilada en un matraz o vaso Calentar el agua destilada en un matraz o vaso

de precipitados, y antes de hervir retirar el de precipitados, y antes de hervir retirar el matraz y añadir el alumbre potásicomatraz y añadir el alumbre potásico

4.4. Añadir la Hematoxilina disuelta en el alcohol y Añadir la Hematoxilina disuelta en el alcohol y poner otra vez al fuego hasta la ebulliciónponer otra vez al fuego hasta la ebullición

5.5. Sacar del hornillo y echar el óxido de mercurioSacar del hornillo y echar el óxido de mercurio6.6. FiltrarFiltrar

Page 11: Metodos de Tincion

EOSINAEOSINA

Page 12: Metodos de Tincion

EOSINAEOSINA

Proviene (del griego Eos), Proviene (del griego Eos), “Amanecer”“Amanecer”

Es un polvo rojo cristalinoEs un polvo rojo cristalinoCC2020HH66BrBr44NaNa22OO55

Se utilizó mucho a finales del siglo Se utilizó mucho a finales del siglo XIXXIX

Actualmente existen dos tipos de Actualmente existen dos tipos de EOSINAEOSINA

Page 13: Metodos de Tincion

Tipos de EOSINA

EOSINA Y EOSINA B

Page 14: Metodos de Tincion

EOSINAEOSINA

FUNDAMENTOFUNDAMENTOEs un compuesto ácidoEs un compuesto ácidoTiene una polaridad negativaTiene una polaridad negativaColorea componentes y orgánulos Colorea componentes y orgánulos

citoplasmáticos, colágeno y fibras citoplasmáticos, colágeno y fibras muscularesmusculares

Los componentes que se tiñen con ésta Los componentes que se tiñen con ésta se conocen como: acidófilos o se conocen como: acidófilos o eosinófiloseosinófilos

Page 15: Metodos de Tincion

EOSINAEOSINA

Preparación de la EOSINAPreparación de la EOSINAAgua destilada en un vaso de precipitadosAgua destilada en un vaso de precipitados 1 gota de ácido acético glacial por cada 100 cc 1 gota de ácido acético glacial por cada 100 cc

de disoluciónde disolución Se usa para reforzar la tonalidad rosa del Se usa para reforzar la tonalidad rosa del

tejido a coloreartejido a colorear Se pone en una estufa a unos 60º durante Se pone en una estufa a unos 60º durante

30min30min Luego se retira, se echa en un bote y se Luego se retira, se echa en un bote y se

etiquetaetiqueta

Page 16: Metodos de Tincion

EOSINAEOSINA

A pesar de su alta disponibilidad comercial, A pesar de su alta disponibilidad comercial, la EOSINA se puede preparar en el la EOSINA se puede preparar en el laboratorio sin dificultad ni necesidad de laboratorio sin dificultad ni necesidad de material especial.material especial.

Las preparaciones son muy estables, por lo Las preparaciones son muy estables, por lo que perduran mucho tiempo si son que perduran mucho tiempo si son almacenadas convenientemente.almacenadas convenientemente.

Page 17: Metodos de Tincion

EOSINAEOSINA

Resultado de la tinción:Resultado de la tinción:

Citoplasmas y fibra colágena de rojo Citoplasmas y fibra colágena de rojo o rosao rosa

Eritrocitos de rojo brillanteEritrocitos de rojo brillante

Page 18: Metodos de Tincion

EOSINAEOSINA

Page 19: Metodos de Tincion

En conclusiónEn conclusión

La La HEMATOXILINAHEMATOXILINA es un colorante es un colorante catiónicocatiónico

La La EOSINAEOSINA es un colorante es un colorante aniónicoaniónico

La La HEMATOXILINA-EOSINAHEMATOXILINA-EOSINA nos permite nos permite contrastar el contrastar el núcleonúcleo del del citoplasmacitoplasma, , tiñendo así el tiñendo así el núcleonúcleo de un color de un color azul azul y el y el citoplasma citoplasma de un color de un color rosadorosado..

Page 20: Metodos de Tincion

HEMATOXILINA-EOSINAHEMATOXILINA-EOSINA

Page 21: Metodos de Tincion

La HEMATOXILINA-EOSINA es una La HEMATOXILINA-EOSINA es una técnica de coloración que se utiliza luego técnica de coloración que se utiliza luego de:de:

La fijación de la muestraLa fijación de la muestra La deshidratación La deshidratación Lavados de Lavados de

ALCOHOLALCOHOL El Aclaramiento El Aclaramiento Con XILOL Con XILOL La inclusión en ParafinaLa inclusión en Parafina El CorteEl Corte

Page 22: Metodos de Tincion

Y luego de este proceso viene la coloración Y luego de este proceso viene la coloración con los tintes, pero para esto debemos con los tintes, pero para esto debemos desparafinar e hidratar la muestra con desparafinar e hidratar la muestra con HH22O para luego resaltar la tinción H.E. que O para luego resaltar la tinción H.E. que tiene como resultado:tiene como resultado:

Colorear el núcleo de azulColorear el núcleo de azul El citoplasma de rosaEl citoplasma de rosa Los eritrocitos de rojo brillanteLos eritrocitos de rojo brillante

Page 23: Metodos de Tincion

GR A CI A S POR GR A CI A S POR SU A TENCI ONSU A TENCI ON