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Sequence Tagged Side (STS) Content Mapping ofHuman Chromosomes: Theoretical Considerationes and
arl! "periences
Principales objetivos del Proyecto Genoma Humano:
1- Aislamiento del genoma humano entero en clonessuperpuestos.
2- Desarrollo de mapas !sicos de los D"A clonados.
#a llegada del P$% ha acilitado la evoluci&n de un nuevo tipo
de marcador '()(* para la construcci&n de mapas !sicos decromosomas.
Panorama en conjunto:
+l proceso de elaboraci&n de mapas !sicos de largo alcance
de genomas complejos involucra la identi,caci&n ylocaliaci&n de marcadores dentro de clones recom#inantesde $%&'
$aso t!pico:
a. ragmentaci&n del genoma en pieas m/s pe0ueas
'digesti&n enim/tica 3*b. Aislamiento y puri,caci&n de cada ragmento '$lonaci&n
3*c. +4aminaci&n de los ragmentos individuales de D"A por
la presencia de marcadores comunes.d. $onstrucci&n de mapas !sicos sobre las posiciones
relativas de los marcadores.
Avances tecnol&gicos:
5A$6( '$omo un sistema de clonaci&n* 7 P$% 'para ladetecci&n de marcadores !sicos ha cedido eno0ues potentes
para el maeo !sico de genomas enteros*
&C Cloning
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Proporciona los medios para aislar segmentos de D"A 0ue son
largos '8.1 - 19b* aun e4perimentalmente manejable. #a
implementaci&n de 5A$ cloning ha sido enormementeacilitado en aos recientes por el desarrollo de e,cientes
mtodos para construir5A$ cloning: Aislamiento de segmentos de AD" largos '8.1 a19b*
Genetic (creen: tcnica e4perimental para identi,car
individuos 0ue poseen un enotipo de inters en una poblaci&nmutagnica.
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;
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9ethods to veriy i your gene o interest @as successully
cloned
1. >lue--galatosidase enyme..
2. Pos
* +rticulo
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,enome'-ide .denti/cation and Mapping of %0S'ncoding esistance ,enes in Solanum tuberosum
#a mayor!a de genes de resistencia identi,cados 'hasta laecha* en plantas codi,can dominios:
">(-##% 'nucleotide-binding site B #eucine-rich repeat*
$$ '$oiled-coil*
)?% ')==#Cinterleuin -1 receptor*
Eno de los mecanismos de deensa m/s estudiados es
mediado por prote!nas de resistencia 0ue uncionan en elreconocimiento de eectores pat&genos.
#os genes de resistencia a enermedades m/s predominantes
clonados hasta la echa ">(-#%% resistence genes codi,canprote!nas 0ue contienen sitios de uni&n a nucle&tidos '">(* ydominios con repeticiones ricas en leucina '#%%*. (in
embargo tambin pueden contener dominios adicionales en
su dominio amino y carbo4i terminal.
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