1.-PROTOZOARIOS

Embed Size (px)

DESCRIPTION

guía para el conocimiento de protozoarios

Citation preview

  • GUA DE PRACTICAS DE ZOOLOGA DE INVERTEBRADOS 2015

    1

    SESION PRACTICA N 1 TEMA: ESTUDIO DE PROTOZOARIOS DE VIDA LIBRE (NO PARSITOS)

    INTRODUCCION

    La palabra "Protozoo" significa etimolgicamente "primeros animales" o "animales primitivos". Constituyen un grupo heterogneo formado por aproximadamente 50000 organismos unicelulares que poseen organelos celulares tpicos (eucariticos) rodeados por una membrana. Puesto que casi todos son mviles y muchos de ellos son heterotrficos, hasta hace algn tiempo se consideraba que este grupo era slo un Phylum dentro del Reino Animalia: el Phylum Protozoa. En la actualidad se sabe que el grupo est formado por varios phyla unicelulares diferentes, los cuales, junto con la mayor parte de los phyla de algas, pertenecen al Reino Protista. Los Protozoarios como organismos han evolucionado a nivel celular, alcanzando diferenciacin protoplasmtica y por lo tanto su complejidad se manifiesta en el nmero y naturaleza de organitos y organelos. Forman un grupo de organismos microscpicos unicelulares, con una gran diversidad en complejidad, tamao y comportamiento. Siendo el cuerpo de los Protozoarios formado por una sola clula, manifiesta todas las caractersticas inherentes a la materia viviente y por lo tanto realiza las funciones propias de un animal superior. El nivel de organizacin unicelular es la nica caracterstica descriptiva unificadora de los protozoarios, pues en todos los dems aspectos exhiben una diversidad extrema. Adems, entre stos se observan todos los tipos de simetra, una amplia gama de grados de complejidad estructural, y adaptaciones para la vida en todo tipo de ambientes. Como organismos, los protozoarios se han conservado en el nivel unicelular, aunque han evolucionado a lo largo de muchas lneas por especializacin de partes del protoplasma (organelos) o de la estructura esqueltica. Existen protozoarios donde quiera que haya humedad: en el mar, en todo tipo de aguas dulces y en el suelo; hay especies comensales, mutualistas y muchas parsitas. La locomocin la realizan mediante flagelos, cilios y seudpodos. Su nutricin puede ser holozoica, holoftica y saprozoica. Se reproducen sexual y asexualmente. Unos son solitarios y otros coloniales. Aunque casi todos viven como individuos solitarios, existen muchas formas coloniales. Algunas de stas, como las especies de Volvox, tienen tal grado de interdependencia celular que se aproximan a un verdadero nivel estructural pluricelular. Las especies coloniales o solitarias pueden ser mviles o ssiles.

  • GUA DE PRACTICAS DE ZOOLOGA DE INVERTEBRADOS 2015

    2

    En el estudio de los Protozoarios se utilizan determinadas tcnicas microscpicas, estas son: exmenes en fresco, que nos permiten observar la forma, locomocin y otras actitudes y reacciones; con colorantes vitales que permiten ampliar las observaciones hacia algunos procesos intracelulares, as como permiten la observacin del movimiento ciliar y flagelar; por ltimo las tcnicas de fijacin y montaje temporal y permanente, en las que se utilizan diversas tcnicas de coloracin que posibilitan el conocimiento de toda la organizacin celular de los Protozoarios, haciendo resaltar aquellos caracteres que nos interesan. Para las tcnicas en las que se utilizan colorantes existen toda una gama de ellos, de esta manera su empleo permite teir diversas estructuras, tales como: ncleo, cilios, flagelos, mitocondrias y otras estructuras citoplasmticas.

    COLECTA Y CONSERVACION La colecta de protozoarios en general ofrece pocas dificultades, ya que habitan

    en casi cualquier tipo de agua; pero la bsqueda de un determinado grupo o especie es difcil y depende del conocimiento de su hbitat y hbitos. Son mltiples los factores que pueden determinar que en cierto lugar habite una determinada poblacin de protozoarios.

    Los Rizpodos estn tipificados por la presencia de seudpodos. Estos son

    extensiones no permanentes del cuerpo que funcionan como rganos de locomocin y alimentacin. La forma de los seudpodos varia considerablemente: pueden ser salientes redondeados (lobopodios), como en la conocida Amoeba o estructuras filamentosas largas y finas (filopodios), y en ciertas especies, los seudpodos poseen tbulos axiales (axopodios). La diversidad de los Protozoos Rizpodos en las subdivisiones que presenta el grupo. Amoebinos comprende organismos desnudos, normalmente con lobopodios; los Testceos y los Foraminferos poseen una concha externa consistente, o testa, y seudpodos de tipo Rizpodo o filopodios; los Heliozoos carecen de testa externa, pero sus seudpodos presentan ejes rgidos (axopodios); y los Radiolarios tienen una cpsula silcea interna que proporciona soporte esqueltico al cuerpo, a la vez que exhiben numerosos seudopodios filamentosos.

    La testa puede ser una estructura dbil formada por la adherencia de

    partculas orgnicas o inorgnicas en la superficie del organismo, como ocurre en muchos Testceos, o bien puede consistir en una slida concha constituida por material orgnico o inorgnico que impone al organismo una forma rgida. Las testas calcreas de algunos Foraminferos y las conchas silceas de muchos Radiolarios presentan una enorme complejidad arquitectnica y son de gran belleza.

    Los Mastigforos comprenden aquellos Protozoos comnmente denominados

    "Flagelados". Todos ellos poseen uno o ms flagelos, que utilizan principalmente para la locomocin, aunque tambin contribuyen en la alimentacin. El Grupo se subdivide en dos: Fitomastiginos y los Zoomastiginos. Los primeros se caracterizan por la presencia de un pigmento fotosinttico, la clorofila, y normalmente poseen uno o dos flagelos. En cambio, los Zoomastiginos no tienen clorofila, dependiendo del medio externo para obtener partculas alimenticias. Adems los Zoomastiginos

  • GUA DE PRACTICAS DE ZOOLOGA DE INVERTEBRADOS 2015

    3

    pueden poseer muchos flagelos, algunos de los cuales forman rganos ms complejos. Entre los fitomastiginos ms conocidos figuran Euglena y Chlamydomonas, solitarios; el colonial Volvox y los dinoflagelados Ceratium y Noctiluca. Los organismos patgenos del gnero Trypanosoma, de gran importancia mdica pertenecen a los Zoomastiginos.

    Los Protozoos flagelados se encuentran en todos los tipos de hbitat, ya sea

    en el mar, en las aguas dulces o en el suelo. Pueden ser de vidas libres, solitarias o coloniales, y tambin parsitos.

    Los Esporozoos son exclusivamente endozoicos, es decir, todos ellos viven en

    la cavidad corporal o en los tejidos de un animal hospedador. Los miembros del grupo tienen ciclos vitales complejos, y reciben su nombre del proceso de formacin de esporas (esporogonia) que forma parte del ciclo vital. En la mayora de los Esporozoos dicho ciclo incluye un estado intracelular, con muchas especies de importancia mdica.

    Los Ciliados, como indica su nombre, se caracterizan por la presencia de cilios

    en la superficie corporal. Esta condicin es patente en los conocidos Paramecium y Tetrahymena, cuyo cuerpo est cubierto por "una capa de finos cabellos". La forma corporal es muy variable, as como la disposicin de los cilios, que pueden aparecer modificados como orgnulos complejos. Como ocurre con los Flagelados, los Ciliados son muy comunes y se encuentran en todo tipo de hbitats. Muchos son de vida libre, pero hay formas unidas al substrato por un pednculo y formas parsitas.

    Ciliados, flagelados y rizpodos se pueden encontrar en cualquier muestra de

    agua, aunque algunos grupos se desarrollan en condiciones particulares. As, por ejemplo, en la superficie de los estanques y de los lagos o de los arroyos de aguas tranquilas, y a profundidades que pueden variar desde la superficie hasta 30 cm, existen la mayor parte de los flagelados con clorofila, tales como, Euglena. Este gnero habita en aguas dulces, donde la vegetacin flotante y las superficies espumosas casi siempre delatan su presencia. En estos sitios, la colecta se hace desplazando por la superficie del agua un frasco de boca ancha. Se recomienda usar redes de plancton de 200 millas por pulgada cuadrada para colectar Euglenas, tomando muestras entre 25 a 60 cm de profundidad, adems de las muestras superficiales y del fondo.

    Muchas especies de rizpodos, entre ellas las amibas o gneros como Arcella,

    Pelomyxa y Difflugia se encuentran en las aguas estancadas obscuras o sombreadas. Se desplazan sobre los fondos lodosos cubiertos de vegetacin muerta o de materia orgnica en descomposicin. El material colectado debe ponerse en frascos limpios y llevarse al laboratorio.

    Los Protozoarios marinos abundan tambin en gran cantidad y casi todos

    comprenden especies cuya distribucin es muy amplia. Se pueden encontrar a cualquier profundidad. Para colectar muestras representativas, se necesita usar redes finas o redes de plancton. Los Rizpodos del grupo de los Foraminferos y Radiolarios abundan en casi todos los mares y sus caparazones llegan a acumularse por millones en el fondo de algunas reas marinas.

  • GUA DE PRACTICAS DE ZOOLOGA DE INVERTEBRADOS 2015

    4

    Se puede obtener Foraminferos vivos en las coralinas y otras algas marinas, tanto extrayndolos con ayuda de una lente como utilizando un filtro grueso unido a una malla de seda. El filtro debe sumergirse en agua de mar y sobre l se colocan algunos puados de algas, etc. La malla de seda atrapar los organismos que atraviesen el filtro. Se puede poner tambin fango o arena fina del fondo del mar en recipientes con agua de mar y agitar. Los Foraminferos se hundirn hacia el fondo, y las partculas ms ligeras se arrastran con el agua.

    Los caparazones de Foraminferos se pueden colectar fcilmente con la arena

    fina depositada por la espuma de las olas que desaparecen suavemente sobre las playas extensas. Esta arenilla, despus de secada, se observa en el laboratorio bajo un microscopio de diseccin. Los pequeos caparazones se aslan con el pincel fino o con agujas de diseccin, y se pegan sobre preparaciones o sobre cartones negros diseados especialmente para eso.

    Grandes reas de fondo ocenico son ricas en conchas calcreas de

    Foraminferos muertos. El "barro" de Globigerina, que cubre aproximadamente ciento treinta millones de kilmetros cuadrados del suelo del ocano, est formado casi por completo de estas conchas. Se pueden secar y filtrar dragados procedentes de estas reas, colocando los filtrados ms finos en recipientes con agua que se procede a agitar. Las conchas ms delicadas flotarn, pudiendo ser recogidas, mientras que las ms pesadas se hunden y pueden secarse tras extraer el agua.

    Muchas especies de Radiolarios viven en, o cerca de, la superficie del mar, donde a veces son muy numerosas. Pueden recogerse mediante una red de arrastre o en un simple frasco de agua marina. Las conchas silceas de los Radiolarios muertos caen al fondo y forman el "barro de los Radiolarios", que cubre un rea de ms de cinco millones de kilmetros cuadrados. Este depsito se encuentra tpicamente en aguas muy profundas de las regiones tropicales de los Ocanos Indico y Pacfico. Se pueden recoger de igual forma que los Foraminferos, por dragado, y secarse de forma similar.

    Las muestras de protozoarios marinos se pueden fijar mezclndolas con

    alcohol isoproplico de 95%. Este alcohol se puede agregar al agua que contengan los protozoarios, siempre que su volumen sea reducido o los protozoarios se hayan concentrado dentro de un rea pequea. Al fijar muestras con Foraminferos o Radiolarios, se puede agregar un poco de rosa de bengala (un gramo de colorante seco por un litro de agua destilada), para colorear los protoplasmas de los protozoarios vivos.

    Entre los talos de las aguas marinas se encuentran algunos protozoarios que

    habitan estos sitios. Colecte las algas y lvelas en un frasco con agua del medio. Las redes y los tamices de mallas finas pueden utilizarse para concentrar los protozoarios en limitados volmenes de agua. Tambin se pueden matar y concentrar, agregando gota a gota a las muestras de protozoarios una cantidad pequea de formol neutro al 3%, hasta que mueran los protozoarios y se depositen en el fondo. En seguida, el agua se decanta dejando slo una pequea cantidad del fondo junto con el material sedimentado. Este puede fijarse y dejarse en alcohol de 70%.

  • GUA DE PRACTICAS DE ZOOLOGA DE INVERTEBRADOS 2015

    5

    Algunas especies de protozoarios parsitos se pueden colectar con facilidad en los rganos internos de sus huspedes. La cavidad oral y braquial de los vertebrados puede albergar Amibas. El tubo digestivo de casi todos los vertebrados y de muchos invertebrados es rico en protozoarios. En la cloaca de las ranas es frecuente encontrar varias especies. La sangre de los vertebrados terrestres tambin puede presentar protozoarios del grupo de los Esporozoarios (Gregarnidos, Coccidios y Hemosporidios).

    En las "termitas" hay Fitomastiginos simbiontes que les ayudan a transformar

    la celulosa de la que se alimentan. Ms de un 50% de algunas "cucarachas" como, por ejemplo, Blatta orientalis, Blatella germanica y Periplaneta americana, tienen en su intestino protozoarios del gnero Gregarina. Muchas especies de Amibas ocupan sitios semejantes. Las vesculas seminales de la "lombriz de tierra" presentan, casi invariablemente, protozoarios del gnero Monocystis.

    En cualquiera de los casos citados, los protozoarios se pueden observar vivos,

    ponindolos en soluciones isotnicas, o bien, pueden hacerse frotis, teidos con colorantes vitales como rojo neutro o azul de metileno en soluciones diluidas (por ejemplo al 1/1000). Los frotis de sangre pueden teirse con Giemsa para poder observar los parsitos.

    En general para su conservacin, los especmenes vivos deben colocarse

    primero en alcohol al 70 - 90 %. Tambin pueden ponerse directamente en una solucin de formol neutro al 3 - 5 %. Si se est recolectando especmenes para un posterior examen citolgico, debe consultarse literatura especializada en tcnicas de fijacin.

    FIJACION

    Entre los fijadores ms recomendables estn los de Schaudin, Goldschmidt, Boui y Guilson. El material fijado en estos lquidos se puede usar para elaborar preparaciones fijas. Los flagelados, como Euglena, se pueden fijar con el lquido de Noland, que produce la muerte instantnea del protozoario y permite la observacin clara del flagelo.

    Para fijar y montar temporalmente algunos protozoarios, agregue una gota de

    una solucin de verde de metilo en cido actico al 1% a una gota de cultivo de protozoarios. Este colorante fija y tie de verde los ncleos.

    Los ciliados o flagelados cultivados tambin se pueden observar en montajes

    temporales siguiendo el mtodo de Noland:

    Solucin de Noland: - Solucin saturada de fenol en agua destilada............................... 80 cc. - Formol al 40% (comercial)............ 20 cc. - Glicerol.......................................... 4 cc. - Violeta de genciana...................... 20 mg.

  • GUA DE PRACTICAS DE ZOOLOGA DE INVERTEBRADOS 2015

    6

    Se debe mezclar al colorante con un poco de agua, antes de agregar los otros ingredientes. No debe quedar fenol en suspensin.

    Agregue a una gota del cultivo de protozoarios, una gota de la mezcla. Los

    cilios y flagelos se tien claramente. Este es un mtodo til para el estudio de ciliados que poseen cirros.

    DIVISION SISTEMATICA***

    Reino Protista Subreino Protozoos

    Filo Sarcomastigforos Subfilo Mastigforos

    Clase Fitomastigforos Clase Zoomastigforos

    Subfilo Opalinados Subfilo Sarcodinos Superclase Rizpodos Clase Lobosos Clase Eumicetozoos Clase Filosos Clase Granulorreticulosos

    Superclase Actinpodos Clase Acantarios Clase Policistineos Clase Feodarios Clase Heliozoos

    Filo Labirintomorfos Filo Apicomplejos

    Clase Perkinsidos Clase Esporozoos

    Filo Mixozoos Filo Microsporidios Filo Ascetosporos Filo Ciliforos

    *** HICKMAN; ROBERTS; LARSON. Principios Integrales de Zoologa.

    OBJETIVOS

    1. Reconocer e identificar los protozoarios de vida libre ms comunes de nuestra regin. 2. Identificar las principales estructuras y caractersticas de los diversos grupos taxonmicos de protozoarios de vida libre observados.

  • GUA DE PRACTICAS DE ZOOLOGA DE INVERTEBRADOS 2015

    7

    MATERIAL MATERIAL DE LABORATORIO: COLORANTES VITALES: - Microscopio - Pardo de Bismark

    - Lmina porta-objetos - Rojo Congo

    - Laminillas cubre-objetos - Verde Jano

    - Lminas escavadas - Verde de metilo

    - Vaselina - Azul de metileno

    - Algodn - Lugol

    - Glicerina - Rojo neutro

    - Palillos de madera

    MATERIAL BIOLOGICO: - Muestras diversas de aguas con protozoarios.

    - Cultivos de protozoarios.

    - Lminas con preparaciones permanentes coloreadas y sin colorear de protozoarios

    de vida libre.

    METODOLOGIA

    I. OBSERVACION DE PROTOZOARIOS DE VIDA LIBRE Con el material necesario y las muestras de agua con protozoos proceder segn las tcnicas de observacin siguientes: 1. TECNICAS DE OBSERVACION: 1. 1.EXAMEN DIRECTO: Este examen permite la observacin de los protozoos vivos, su morfologa, locomocin, reacciones, etc., durante la observacin se requiere de enfocar adecuadamente y diafragmar convenientemente. Con una lmina portaobjetos y una laminilla cubreobjetos proceda a preparar y montar una muestra de agua estancada o una gota de cultivo. Observar al microscopio con mayor y menor aumento. Si al observar la muestra se nota demasiada movilidad en los especmenes, agregue a la preparacin unas fibras de algodn (puede tambin utilizarse gelatina, goma arbiga, glicerina, etc.) para que de esta manera se pueda realizar una mejor observacin. Si la muestra es muy pobre, y contiene pocos individuos, se puede concentrar los protozoos, para el caso se utiliza la filtracin rpida e incompleta a travs de un pao (tela o papel filtro) el residuo de la filtracin debe ser vaciado rpidamente en un recipiente adecuado, antes de que se complete la filtracin; puede tambin utilizarse la centrifugacin a bajas velocidades.

  • GUA DE PRACTICAS DE ZOOLOGA DE INVERTEBRADOS 2015

    8

    1.2. OBSERVACION EN CAMARA HUMEDA: A fin de que la pequea gota de lquido que se examina no se concentre o deseque durante la observacin, no se recurre al sencillo sistema de poner la gota entre porta y cubre-objeto, sino que se la encierra en un pequeo recinto situado entre ellos, que permite, adems, entretener la vida de los protozoos durante algn tiempo. Esto se consigue de tres modos diferentes:

    1.2.1. Cmara de Gota Pendiente: Para esta tcnica se requiere de un porta-objetos especial, en cuya parte central tiene una excavacin o concavidad de poca profundidad (porta-objetos excavado o lmina excavada). En la laminilla cubre-objetos bien limpio proceda a colocar en cada ngulo un punto de vaselina, esta puede ser colocada con la ayuda de un palillo de madera (mondadientes o fsforo); en la parte central de la laminilla coloque una gota de las muestras de agua a observar, luego adhiera la lmina porta-objetos a la laminilla de manera tal que la excavacin coincida con la gota del medio de cultivo; realizado esto invierta y observe al microscopio con menor y mayor aumento. De ser conveniente se puede sellar los bordes con vaselina. 1.2.2. Cmara Hmeda de Ranvier: Con la tcnica de la gota pendiente, el espesor de la capa lquida que se examina no es uniforme; esto hace que la observacin a grandes aumentos venga perturbada por los fenmenos de reflexin y refraccin de los rayos luminosos al atravesar la parte inferior de la gota. Para obviar este inconveniente y conseguir una capa lquida de igual espesor, con sus superficies lmites paralelas, se recurre a otros mtodos, entre los cuales el ms utilizado es el de Ranvier. La cmara de Ranvier consiste en un porta-objetos, de bastante grosor, que tiene excavado en su parte central un canal circular, rodeando una plataforma de unos 15 o 20 mm de dimetro y cuya superficie queda 0.1 mm ms baja que el resto del porta. Depositando la gota que se quiere examinar sobre esta plataforma y tapando con un cubre-objeto, ste la extiende en una capa uniforme entre dos caras paralelas cayendo al canal circundante el exceso de lquido que hubiese, y quedando as una capa lquida de igual espesor entre cubre y la plataforma, y una pequea cantidad de aire encerrada en el canal, suficiente para mantener algn tiempo la vida de los protozoos, aunque no lo bastante para que la preparacin se seque. 1.2.3. Cmara Hmeda de Tieghem: Para esta tcnica se utiliza una lmina porta-objeto corriente en la que se forma una celda usando un anillo de vidrio que se adhiere mediante el uso de vaselina, lanolina, blsamo, etc. Se coloca unas gotas de agua en el fondo para conservar la humedad, se unta el borde superior del anillo con vaselina slida; se pone la gota de la muestra en el cubre-objeto, se coloca el porta sobre el cubre, se invierte rpidamente, debe hacerse ligera presin para que se obtenga una buena adherencia y la cmara quede completamente sellada.

  • GUA DE PRACTICAS DE ZOOLOGA DE INVERTEBRADOS 2015

    9

    1.3. OBSERVACION CON COLORANTES VITALES: Procedimiento intermedio entre el examen en fresco y las tcnicas de coloracin despus de la fijacin. El uso de colorantes vitales tiene por objeto teir algunos elementos celulares de los protozoos, de manera que las hagan fcilmente visibles, sin causar modificaciones intensas que puedan alterarlos o matarlos. Los colorantes vitales son de naturaleza cida o bsica, en soluciones muy diluidas son poco txicos. Entre los colorantes vitales ms usados tenemos a los siguientes: - Rojo neutro. - Azul pirrol. - Azul de metileno. - Verde Jano. - Tinta china. - Azul de tripan. - Rojo Congo. - Amarillo anilina - Pardo de Bismark. - Verde de metilo. - Carmn latinado. - Cristal violeta. Se puede utilizar dos metodologas en la presente preparacin: mtodo de dilucin o el mtodo del secado. En el de dilucin la preparacin se realiza de la siguiente manera: en una lmina porta-objetos colocar una gota del medio a observar, luego directamente agregar una gota del colorante vital (el colorante debe estar en la dilucin correcta para evitar matar a los protozoos), colocar una laminilla cubre-objetos y observar con menor y mayor aumento. En el mtodo del secado la preparacin se realiza de la siguiente manera: en una lmina porta-objetos colocar una gota del colorante vital, expandir la gota y dejar secar, luego de esto agregar sobre el secado una gota de la muestra a observar, colocar una laminilla cubre-objetos y observar al microscopio con menor y mayor aumento. En ambos casos el colorante debe estar en la dilucin correcta para evitar matar a los protozoarios. Al agregar los colorantes vitales en solucin, en primer lugar verifique la difusin del colorante para luego observar la reaccin del protozoo frente al colorante y la accin del colorante sobre las diversas estructuras internas y externas del protozoo. Explique las reacciones, describa la coloracin de las estructuras correspondientes y verifique la funcin de los colorantes. 1.4. OBSERVACION EN COLORACIONES SUPRAVITALES: Las coloraciones supra vitales son aquellas que se realizan sobre el material simplemente desecado y no fijado, esta tcnica es frecuente en el examen de protozoos y en los frotis de sangre. Los colorantes ms usados para el caso son: el azul de metileno al 1/500 y el azul de toluidina fenicado. Azul de toluidina fenicado: - Azul de toluidina...............................0.5 g - Acido fnico......................................3.0 g - Alcohol etlico de 95......................10.0 cc - Agua destilada................................90.0 cc

  • GUA DE PRACTICAS DE ZOOLOGA DE INVERTEBRADOS 2015

    10

    Las preparaciones as obtenidas son muy interesantes, pues en ellas los protozoos simplemente secos no han sufrido alteracin por los reactivos fijadores y los caracteres morfolgicos se han conservado muy bien. 1.5. PREPARACIONES TEMPORALES: Para el caso se utiliza el lquido de Noland y el verde de metilo en solucin al 1% en cido actico (solucin de verde de metilo en cido actico al 1%). La preparacin se realiza de la siguiente manera: en una lmina pota-objetos coloque una gota de la muestra y agregue una gota del lquido de Noland o una gota de solucin de verde de metilo; cubra con una laminilla cubre-objeto y realice la observacin con menor y mayor aumento. Lquido de Noland: - Solucin saturada de fenol en agua destilada................................... 80.0 cc - Formol al 40%.................................... 20.0 cc - Glicerol............................................... 4.0 cc - Violeta de Genciana............................ 20.0 mg 1.6. PREPARACIONES PERMANENTES: Para el caso se requiere que el material de la muestra sea previamente fijado, la fijacin puede ser realizada sobre la muestra contenida en un porta-objeto, o en un pequeo volumen de la muestra. Luego de la fijacin se procede a la coloracin.

    1.6.1. Fijadores: - Fijadores Fsicos: calor, frio. - Fijadores Qumicos: simples, compuestos. 1.6.2. Coloraciones: - Hematoxilina - Eritrocina - Orange G. - Hematoxilina Frrica de Heidenhain. - Impregnacin Argntica. - Shorr. - Giemsa. - Leisshmann - Hemalumbre de Mayer. - Hematoxilina - Mtodo A.

    Para mayores detalles consultar la bibliografa especializada. 2. OBSERVACION DE FLAGELADOS: Realizando las preparaciones que considere necesarias, proceda a observar y

    reconocer los protozoarios flagelados ms comunes, identificar los organelos constituyentes, graficar sus observaciones y ubicarlos sistemticamente.

  • GUA DE PRACTICAS DE ZOOLOGA DE INVERTEBRADOS 2015

    11

  • GUA DE PRACTICAS DE ZOOLOGA DE INVERTEBRADOS 2015

    12

    3. OBSERVACION DE CILIADOS: Proceda a preparar y observar muestras de ciliados, diferencie los diversos

    organelos, graficar sus observaciones y ubicarlos sistemticamente.

  • GUA DE PRACTICAS DE ZOOLOGA DE INVERTEBRADOS 2015

    13

  • GUA DE PRACTICAS DE ZOOLOGA DE INVERTEBRADOS 2015

    14

    4. OBSERVACION DE SARCODINOS (RIZOPODOS) Con las muestras y/o los medios de cultivo realice las preparaciones que

    correspondan y observe al microscopio con menor y mayor aumento. Graficar sus observaciones, identificar sus organelos y ubicarlos sistemticamente.

  • GUA DE PRACTICAS DE ZOOLOGA DE INVERTEBRADOS 2015

    15

    5. OBSERVACION DE LMINAS CON PREPARACIONES PERMANENTES: Se proporcionar el referido material para su conveniente observacin con menor y mayor aumento. En cada una de las observaciones realice el estudio de:

    - Extremo anterior y posterior - Presencia de citostoma, citofaringe, citopigio. - Ectoplasma y endoplasma, caractersticas. - Ncleos: macroncleo y microncleo - Vacuolas: alimenticias, contrctiles - Otras observaciones de importancia

    De acuerdo a sus observaciones realizadas con las diferentes tcnicas, ubique en el grupo taxonmico correspondiente al protozoario observado en las diferentes muestras. Graficar sus observaciones, identificar sus organelos y ubicarlos sistemticamente.

  • GUA DE PRACTICAS DE ZOOLOGA DE INVERTEBRADOS 2015

    16

  • GUA DE PRACTICAS DE ZOOLOGA DE INVERTEBRADOS 2015

    17

    CUESTIONARIO

    1. Cules son los factores o condiciones ambientales que influyen en el desarrollo de los protozoarios dulceacucolas? 2. Porqu los protozoarios no pueden alcanzar grandes tamaos? 3. Caracterice los tipos de seudpodos. 4. Esquematice y caracterice la estructura de un flagelo. 5. Diferencie cilios y cirros. 6. En que consiste el aparato neuromotor de los ciliados. 7. Caracterice el hbitat de los protozoos catarbicos, oligosaprbicos, mesosaprbicos, polisaprbicos y coprozoicos. 8. Describa las tcnicas de coloracin ms importantes y/o usadas para la preparacin de las muestras permanentes. 9. En que se basa el uso de los colorantes vitales. 10. Refiera las relaciones filogenticas de los protozoos.

  • GUA DE PRACTICAS DE ZOOLOGA DE INVERTEBRADOS 2015

    18

    BIBLIOGRAFIA

    BARNES, R. D. 1982 Zoologa de los Invertebrados. Ed. Interamericana. GAVIO DE LA TORRE; JUAREZ LOPEZ Y FIGUEROA TAPIA. 1985. Tcnicas

    Selectas de Laboratorio y de Campo. Ed. Limusa. JIMENEZ, P. 1977. Apuntes para la Elaboracin de un Manual de Invertebrados.

    Informe Bilogo. UNSA. HICKMAN, C.; ROBERTTS, L. y LARSON, A. 2002. Principios Integrales de

    Zoologa. Undcima edicin. McGraw-Hill Interamericana LINCOLN, R. Y SHEALS, G. 1989. Gua de Captura y Conservacin -

    Invertebrados. Ed. Interamericana McGraw - Hill. LOPEZ, E. Y MORALES, A. 1985. Gua de Investigacin para el Estudio de

    Protozoos. Departamento Acadmico de Biologa. UNSA. KUDO, R. 1966. Protozoologa. Ed. Continental S.A. SLEIGHT, M. 1979. Biologa de los Protozoos. Ed. Blume. WESTPHAL, A. 1977. Protozoos. Ed. Omega S.A.

    V B

    JEFE DE PRCTICAS