OPTIMIZACIN DE UNA FORMA FARMACUTICA SLIDA DE EXTRACTO DE

Ibervillea Sonorae PARA EL TRATAMIENTO DE LA DIABETES MELLITUS TIPO II

Dra. Mara Guadalupe Ramrez Sotelo

Mxico, D.F. 12 de diciembre, 2014

Laboratorio de Biotecnologa Molecular y de Tecnologa Farmacutica, Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnologa del I.P.N. (UPIBI)

Proyecto SIP: 2014696

Contenido

Introduccin Justificacin Objetivos Metodologa Resultados Conclusiones Perspectivas

Grupo de desrdenes en el metabolismo de carbohidratos, lpidos y protenas, que se presenta debido a una insuficiencia en la secrecin y/o

accin de la insulina.

American Diabetes Association, 2012Asociacin Mexicana de Diabetes , 2012

1 Causa de muerte de los mexicanos1 Causa de ceguera adquirida1 Causa de amputaciones no traumticas20% de los recursos de las instituciones de salud pblicas

Consecuencias

Prevalencia nacional 14.3% en la poblacin de 20 a 69

aos, 9 millones de personas con

diabetes.

( Lpez e Hinojosa, 1988) (Xolalpa, 1994) (Alarcn, 2002)

Usos tnicos

I. sonorae Greene (Sinonimia: Maximowiczia sonorae

S.Wats; Cucurbitaceae)

4

Suplementos alimenticios

(COFEPRIS, 2002 modificacin al Reglamento de la Ley General de Salud en Materia dePublicidad)

5

ANTECEDENTESHypoglycaemic activity of Ibervillea sonorae roots in healthy and diabetic miceand rats (Alarcn-Aguilar, F.J., Campos-Sepulveda,A.E., et al 2002).

Acute and chronic hypoglycemic effect of Ibervillea sonorae root extracts(Alarcn-Aguilar F.J., Calzada Bermejo F., et al 2005).

Antiobesity and Hypoglycaemic Effects of Aqueous Extract of Ibervilleasonorae in Mice Fed a High-Fat Diet with Fructose (Rivera-Ramirez F., Escalona-Cardoso G.,et al 2011).

6

Compuesto

Extracto acuoso/

secado por aspersin

Extracto acuoso/liofilizacin Extracto

metanlicoExtracto etanolico

M I M I

Azcares ++ +++ +++ +++ +++ +++

Cumarinas ++ +++ ++ ++ +++ +++

Glicosidoscianogenicos - - + - - -

Flavonoides ++ +++ ++ ++ +++ +++

Quinonas + + ++ +++ +++ +++

Taninos - - - - - -

Sesquiterpenlac-tonas - - + - - .

Saponinas +++ ++ +++ ++ +++ +++

Alcaloides ++ +++ +++ ++ +++ +++

(Hernndez Daz,2011)

6mg/kg

(Moreno R., 2011)

Clulas tratadas con I . sonorae (extracto por infusin) al 0.1%. (Tratamiento de 1 a 5 horas). Porcentaje de control de GLUT1 con respecto al tiempo

* Mostraron diferencias significativas con respecto al control (p

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Alternativa de tratamiento = enfermedades crnicas

Uso de la herbolaria tradicional /suplementos alimenticios (90%

poblacin)

Productos milagro - Riesgo para el consumidor

Fitomedicamento, medicamento herbario

Secretara de Salubridad, 2012OMS, 2014

Grado de avanceExtraccin (rendimientos)

Caracterizacin de los principios activos (fitoqumico, electroforesis capilar, RMN)

Dosis Letal 50, citoxicidad, sobrevivencia

Actividad farmacolgica (in vivo e in vitro)

Preformulacin

Formulacin

Perfiles de disolucin

Antecedentes directos

Determinacin Magnitud

Tamao de partcula (m) 0.9800.020

Densidad aparente (g/ml) 0.0882 0.0001

Densidad compactada (g/ml) 0.18660.0012

ndice Carr (%) 52.68

Cociente de Hausner 2.113

Vel. de flujo y Angulo de

reposo

Muy malo

Solubilidad (g/ml) 0.0110.0005

OBJETIVO GENERAL

Optimizar una forma farmacutica slida de extracto de Ibervilleab sonorae, para el tratamiento de la Diabetes

Mellitus tipo II.

Objetivos Particulares

Desarrollar una formulacin utilizando granulacinhmeda, para aumentar la densidad de polvo.

Utilizar cinco diferentes aglutinantes en lagranulacin hmeda a diferentes concentraciones.

Cuantificar la cantidad de fenoles y flavonoidespresentes en los grnulos.

Evaluacin reolgica de los granulados. Realizar evaluacin de grnulos (disolucin y

desintegracin)

Propuesta Desarrollo de dos etapas anuales.

PreF

orm

ulac

in

y fo

rmul

aci

n 200 mg/kg peso, una cpsulaPerfiles de disolucin

Prec

lnic

a y

Cln

ica

I

Farmacocintica en modelos murinosEstudios de bioseguridad en humanosActividad farmacolgica clnica I

CONVENIO DE COLABORACIN SECTOR SALUD, PROTECCIN INTELECTUAL (FORMULACIN)

METODOLOGA Obtencin de

extracto acuoso

Estudios de preformulacin

Estandarizacin de extracto

Formulacin

Estudios de disolucin

Maceracin/ secado por aspersin

Cuantificacin de metabolitos secundarios

Interaccin de excipientes

Propiedades granulomtricas y

fisicoqumicas

15

Tipo 1Tamizado

de extracto y excipiente

Mezclado de extracto y excipiente

Adicin de agua

Tamizado con numero de

malla 10

Secado a temperatura

ambiente durante 24 hrs

Tipo 2Elaboracin de solucin aglutinante

Tamizado del extracto

Adicin de solucin

aglutinante

Tamizado con numero de

malla 10

Secado a temperatura

ambiente durante 24 hrs

5 g de Extracto

Granulacin Hmeda

16

Estudios de preformulacinMedicin Referencia bibliogrfica

Tamao de partcula Prueba de tamices FEUM 2004

Densidad aparente y compactada (Aulton, 2004)

Grado de cristalinidad y

polimorfismo

Microscopia CNMN,IPN

Angulo de reposo (Aulton, 2004)

Velocidad de flujo (Aulton, 2004)

Solubilidad (Aulton, 2004)

Contenido de humedad FEUM,2004

Cenizas totales FEUM,2004

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Pruebas reolgicas

Medicin de volumen de cierta y masa de grnulos.

Compactacin de la masa en la probeta

Densidad aparente y compactada

Medicin de tiempo y masa de los granulados.

Velocidad de flujo Medicin de

dimetros y altura del montculo.

ngulo de reposo

18

Estandarizacin del extracto

Curva tipo de cido Glico Reaccin de oxidacin con

reactivo de Folin-Ciocalteu

Cuantificacin de Fenoles

Curva tipo de Quercitina Reaccin con solucin

etnolica de AlCl3

Cuantificacin de

Flavonoides

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Evaluacin de los grnulos

Solucin de HCl pH= 1.7 a 37C

Tiempo de desintegracin

Desintegracin

Solucin de HCl pH= 1.7 a 37C

Se tomaron alcuotas a 5, 10, 15,20,30,45 y 60 minutos

Disolucin

20

Formulaciones:Se disearon 14 formulaciones con cinco aglutinantes base: Carbopol PVP Acacia Gelatina Arginato

Se estandarizaron los lotes por cuantificacin:- Flavonoides- Fenoles

Resultados

21

Flujo de polvo como indicaciones del ndice de Carr

(Wells, 2002)22

Pruebas reolgicas

Aglutinante Densidad aparenteDensidad

compactadandice de

Carrndice de Haussner

Carbopol F1 0.442 0.568 22.222 1.286PVP F4 0.473 0.592 20.144 1.252

Gelatina F11 0.454 0.722 37.063 1.589

Aglutinante Densidad aparenteDensidad

compactadandice de

Carrndice de Haussner

Carbopol F1 0.490 0.562 12.687 1.145PVP F4 0.498 0.595 16.279 1.194

Gelatina F11 0.587 0.684 14.286 1.167

Tamao de partcula= 1.4 mm

Tamao de partcula= 2.00 mm

23

Estandarizacin de Fenoles y Flavonoides

Fenoles

(

)Flavonoides

(

)

Extracto 2.580.13 4.600.13Carbopol F1 2.480.30 4.100.18

PVP F4 2.390.16 2.780.14Gelatina F14 0.991.05 3.960.09

24

Tiempos de desintegracin

0 2 4 6 8 10 12

1

Tiempo (minutos)

Alginato 1%Gelatina 7%PVP 10%Acacia 15%PVP 5%Alginato 3%Carbopol 1%

F11

F10F6

F9

F4F15F1

Form

ulac

in

25

Parmetros de disolucin

Formulacin 1/Vm Vm(g ml-1/ min) Km

1 0.0028 357.142 12.321

2 0.0038 263.157 2.763

4 0.004 250 5.55

5 0.0041 243.902 6.53626

Realizando una granulacin hmeda se pudo aumentar eltamao de partcula que fue de 2.00 mm.

Se comprob que la formulacin con Carbopol F1 fue laque tuvo menor tiempo de desintegracin.

Al realizar las prueba de disolucin, el Carbopol F1 fue elque se asemej ms a la disolucin del extracto puro.

Se logr obtener una cpsula con la dosis teraputicaefectiva de 200 mg.

Al disminuir el tamao de los grnulos, las propiedadesreolgicas se afectan negativamente.

La formulacin con Carbopol al F1 puede funcionar comoalternativa para el desarrollo de un medicamentoherbolario.

Conclusiones

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Perspectivas Ia. Etapa. Preformulacin, formulacin y perfiles de disolucin.

2. Etapa. Preclnica y Clnica I Animales (ratas Wistar, ratones CD1, jaulas y accesorios, camas sanitarias, alimento Nutricubos-)= Pacientes (30-50 aos, 30 sanos y 30 enfermos, diabetes tipo II), kits

determinacin de glucosa en sangre, estudios clnicos=

Proteccin de la(s) formulaciones obtenidas. Registro ante COFEPRIS para la autorizacin de su distribucin

y no incurrir en los denominados productos milagro.

Producto Final Registro Propiedad Intelectual Formacin de recursos humanos (Licenciatura y

Posgrado) Publicacin de artculos internacionales

Nmero de diapositiva 1ContenidoNmero de diapositiva 3Nmero de diapositiva 4Nmero de diapositiva 5Nmero de diapositiva 6Estudios Farmacolgicos Nmero de diapositiva 8Grado de avanceAntecedentes directosOBJETIVO GENERALObjetivos ParticularesNmero de diapositiva 14METODOLOGA Granulacin HmedaEstudios de preformulacinPruebas reolgicasEstandarizacin del extractoEvaluacin de los grnulosFormulaciones:Flujo de polvo como indicaciones del ndice de CarrPruebas reolgicas Estandarizacin de Fenoles y FlavonoidesTiempos de desintegracinNmero de diapositiva 26ConclusionesPerspectivasProducto Final