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UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL
FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS
ESCUELA DE GRADUADOS
TITULO:
EFECTO DE Hypocrea lixii SOBRE EL TIZÓN TEMPRANO DEL
TOMATE Alternaria solani EN CONDICIONES DE INVERNADERO,
GUAYAS 2014.
TESIS PRESENTADA COMO REQUISITO PARA OPTAR POR EL
TITULO DE MAGISTER EN MICROBIOLOGÍA MENCIÓN
INDUSTRIAL
AUTORA
QF. NELKA TANDAZO FALQUEZ
TUTORA:
ING. AGR. MARÍA LETICIA VIVAS VIVAS MSc.
AÑO:
2015
GUAYAQUIL-ECUADOR
ii
CERTIFICADO DEL TUTOR
iii
CERTIFICADO GRAMÁTICO
Ing. María Leticia Vivas.Vivas MSc, con domicilio ubicado en Urb Malaga II Mz 14 villa
6 por medio de la presente tengo a bien CERTIFICAR: Que he revisado el trabajo de
titulación elaborado por la Sra. QF NELKA PATRICIA TANDAZO FALQUEZ previo
a la obtención del título de magister en Microbiología mención Industrial.
TEMA DE TRABAJO DE TITULACIÓN ES: “EFECTO DE Hypocrea lixii SOBRE EL
TIZÓN TEMPRANO DEL TOMATE Alternaria solani EN CONDICIONES DE
INVERNADERO GUAYAS, 2014.”
El trabajo de titulación revisado ha sido escrito de acuerdo a las normas gramaticales y
de sintaxis vigentes de la lengua española.
………………………………………………..
Ing. María Leticia Vivas Vivas MSc
TUTORA
iv
DEDICATORIA
A Dios ser supremo que me permitió la vida y observar las maravillas de su
creación así como poder terminar esta investigación y escribir mis
experiencias.
A mi madre (+) quien me trajo al mundo, madre inigualable llena de virtudes,
quien siempre me apoyo y me alentó diciéndome que para estudiar no hay
edad, limites, ni tiempo, que siempre lo haga, en su MEMORIA.
A mis hijas, Shibell Defaz Tandazo, Nelka Louisiana y Zahary Johanna
Torres Tandazo, razón de mi vida y por quienes me esfuerzo día a día, para
que comprendan que no hay nada más que estudiar para ser libres y que no
importa la edad, siempre habrá tiempo para prepararse.
A mi esposo Juan Luis Torres compañero de mi vida, aunque no estabas a
mi lado pero tus palabras de aliento desde muy lejos me motivaban a seguir
adelante cubriendo todas mis necesidades para que termine mis estudios y la
concluya con éxito.
A mis hermanos Ing. Agr Jofree Sixto, y Eglintón Sadoc Tandazo Falquez
que ya partieron de este mundo terrenal, en su memoria y a mis otros
hermanos(a) Dr. Godofredo, Jimmy y Enita, para que lo tomen como un
ejemplo de superación.
AGRADECIMIENTOS
v
Mi más sincero agradecimiento a la Facultad de Ciencias Agrarias con
su representación el Ing. Carlos Becilla por haberme dado las facilidades en
el invernadero de la Facultad para poder realizar mi investigación.
Al Laboratorio de suelos de la Facultad en donde desempeño mis
labores, al Dr. Miguel Macías quien me abrió las puertas para que realice la
parte práctica necesaria.
A la Ing. María Leticia Vivas quien fue mi tutora y supo guiarme para
el feliz término del presente trabajo, así como a la Ing. Segress García.
A mi querida amiga MSc Marta Mora Gutiérrez quien siempre estuvo
a mi lado ayudándome y dándome las fuerzas necesarias cuando ya sentía
que no las tenía.
A mi revisora Dra. Carmen Mosquera de la Facultad de Medicina,
quien con su dedicación y paciencia supo guiarme con sus consejos para que
este trabajo se ha presentado muy bien.
A mis amigos Roberto, Xavier, a mis amigas, Betty, Felicita, Andrea,
Jessica, Gigi compañeras de esta hermosa aventura, la maestría que
emprendimos juntos (as) y que siempre estuvieron a mi lado motivándome,
aconsejándome, ayudándome para la culminación de la misma. Y a mis
compañeras del colegio Rita Lecumberri quienes siempre vivieron mis
experiencias alentándome para que persistas en mi meta.
A mis queridos alumnos quienes hicieron sus pasantías estando a mi
lado ayudándome en lo necesario a ellos: Sr Sallo, Sr Calle, Sr Cantos y Sra.
Montes, muy en especial a mi ex alumno Sr Daniel Merejildo que con su
experiencia junto con los conocimientos del Ing. Aldo Loqui lograron
mantener el cultivo el tiempo necesario hasta su culminación, a todos ellos
GRACIAS MIL GRACIAS, QUE DIOS LE PAGUE.
vi
RESUMEN
El tomate Lycopersicum esculentum Mill es una solanácea que es afectado por diversos
microorganismos como hongos, bacterias, virus y nematodos; para prevenir estos
problemas se utilizan pesticidas para su manejo, los mismos que aumentan los costos de
producción y daños en la salud de las personas que laboran en la actividad agrícola y de
consumidores. Dentro de las enfermedades comunes y de importancia económica se
encuentra el tizón temprano del tomate o alternariosis, causada por Alternaria solani. El
objetivo de esta investigación fue determinar el efecto de Hypocrea lixii sobre el tizón
temprano del tomate Alternaria solani, en condiciones de invernadero, la misma que se
desarrollo entre el mes de octubre del 2014 a mayo del 2015.
La investigación tuvo cinco tratamientos por cada experimento es decir de dosis y
frecuencias, se utilizó un diseño completamente aleatorio (DCA) con 10 unidades
experimentales. Los tratamientos del estudio de dosis fueron: 1x106, 1x108 y 1x1010
conidios por ml y cinco frecuencias de aplicación. 10, 15, 20, 28 y 44 días después de
trasplante; en ambos ensayos se incluyeron dos testigos uno absoluto y uno químico. Se
registraron datos de incidencia y severidad de la enfermedad mediante la escala de 0 a 5
grados, donde 0= sin síntomas y 5= más del 50% del área foliar manchada.
Se determinó que la dosis de 1 x 1010 de Hypocrea lixii fue la de menor incidencia de
daños por Alternaria solani con 5,8%; la frecuencia con menor porcentaje de plantas
afectadas fue cada 20 días.
Palabras clave: Alternaria solani, Hypocrea lixii, antagonismo
vii
ABSTRACT
The tomato Lycopersicon esculentum Mill is a solanum which is affected by various
microorganisms such as fungi, bacteria, viruses and nematodes; to prevent these problems
there are used pesticides for handling, the same that rise costs for production and damage
the health of working people in agriculture and consumers. Among the common diseases
in economical important of tomato we find early blight or Alternariosis, caused by
Alternaria solani. The objective of this research was to determine the effect of Hypocrea
lixii on tomato early blight Alternaria solani, under greenhouse conditions developed
between October 2014 and May 2015.
Research had five treatments per experiment in dose and frequency, it was used a
completely random design (CRD) with 10 experimental units. The dose study treatments
were: 1x106, 1x108 and 1x1010 conidia per ml. in five application frequencies. 10, 15,
20, 28 and 44 days after transplantation; two witnesses in both trials, an absolute one and
one chemical is included. Data on the incidence and severity of the disease were recorded
by the scale of 0-5 degrees, where 0 = no symptoms to 5 = more than 50% of the spotted
leaf area.
It was determined that the dose of 1 x 1010 Hypocrea lixii showed the lower incidence
of damage by Alternaria solani 5.8 % ; the frequency with the lowest percentage of
affected plants was every 20 days.
Keywords: Alternaria solani, Hypocrea lixii, antagonism
viii
CONTENIDO
Página
INTRODUCCIÓN
CAPITULO I EL PROBLEMA
1
3
1.1. Planteamiento del problema 3
1.2. Justificación 3
1.3. Determinación del problema 4
1 1.4. Preguntas de Investigación 4
1.5. Objetivos 4
1.5.1. Objetivo General 4
1.5.2. Objetivo Especifico 4
1.6. Hipótesis 5
CAPITULO II MARCO TEÓRICO 6
2.1. El cultivo del tomate (Lycopersicum esculentum Mill) 6
2.1.1. Generalidades 6
2.1.2. Composición y valor nutricional 7
2.2. Enfermedades que afectan al cultivo del tomate 8
2.2.1. Generalidades 8
2.2.2. Hongo patógeno: Alternaria solani 10
2.2.3. Control Fitosanitario 12
2.3. Organismos Antagónicos 13
2.3.1. Hongos 13
2.4. Características del Invernadero 14
2 2.4.1. Temperatura 14
2.4.2. Humedad 14
2.4.3. Luminosidad 15
2.4.4. Suelo 15
2.4.5. Potencial de Hidrogeniones 15
2 2.4.6. Riego 15
2.5. Variedades 16
CAPITULO III METODOLOGÍA 17
3.1. Área de Estudio 17
ix
3 3.1.1. Ubicación Geográfica 17
3.2. Universo y muestra 17
3.3. Viabilidad 17
3.4. Variables 18
3.5. Criterios 18
3.5. 1.
3.5.2.
Criterio de inclusión
Criterio de exclusión
18
18
3.6. Operación de variables 19
3.7. Tipo de investigación 20
3.8. Tratamientos estudiados 20
3.9. Diseño de la investigación 21
3.9.1. Análisis de varianza 21
3.10. Técnicas aplicada a la investigación 21
3.10.1. En el laboratorio 21
3.10.2. Identificar la presencia de Alternaria solani 21
3.10.3. Reactivación de Hypocrea lixii 22
3.10.4. Inoculación del fitopatógeno 22
3.10.5. Contaje de conidios en cámara de neubauer 22
3.10.6. Inoculación del antagonista 23
3.11. Incidencia y severidad 24
3.12. Manejo del experimento en el campo 24
3.12.1. Preparación del semillero y siembra 24
3.12.2. Preparación de tierra y llenado de macetas 24
3.12.3. Trasplante 25
3.13. Labores Agrícolas 25
3.13.1 Preparación del suelo 25
3.13.2 Riego 25
3.13.3 Control de maleza 25
3.13.4. Fertilización 25
3.13.5. Poda 26
3.13.6. Tutorado 26
3.13.7. Aporque 26
3.13.8. Control Fitosanitario 26
x
3.14. Materiales y equipos utilizados 27
3.15. Recursos utilizados 27
3.15.1. Recursos humanos 27
3.15.2. Recursos Físicos 27
CAPITULO IV RESULTADOS Y DISCUSIÓN 28
CAPITULO V CONCLUSIONES 36
CAPITULO VI RECOMENDACIONES 37
BIBLIOGRAFÍA 38
ANEXOS 42
Anexo 1. Cultivo del tomate en invernadero. 42
Anexo 2. Croquis de invernadero 43
Anexo 3. Croquis de campo 44
Anexo 4. Alternaria solani en medio de cultivo y conidios 45
Anexo 5. Antagonista obtenido en el laboratorio 46
Anexo 6. Tutoreo de las plantas de tomate 47
Anexo 7. Preparación de diluciones en el laboratorio 48
Anexo 8. Atomización manual a los tratamientos 49
Anexo 9. Acción de la Alternaria solani en el fruto y sanos 50
Anexo 10. Flujograma de la investigación 51
Glosario 52
xi
ÍNDICE DE CUADROS Y FIGURAS
Contenido Página
Cuadro 1. Porcentaje de plantas afectadas por Alternaria solani en
condiciones de invernadero, primera réplica. UG. 2015
30
Cuadro 2. Porcentajes plantas afectadas por Alternaria solani en
condiciones de invernadero, segunda réplica. UG. 2015
31
Cuadro 3. Porcentaje de plantas con síntomas de Alternaria solani,
primera réplica UG. 2015
32
Cuadro 4 Porcentaje de plantas con síntomas de Alternaría solani,
segunda réplica UG. 2015
33
Figura 1. Cámara de Neubauer para contaje de esporas
23
Figura 2. Esquema del proceso de dilución del antagonista
23
Figura 3. Cultivo de Alternaria solani en agar Sabouraud
28
Figura 4. Observación de micelios de Alternaria solani a través de
microscopía óptica
29
Figura 5. Porcentaje de plantas con presencia de Alternaria solani
durante 44 días de evaluación. UG, 2015
31
Figura 6. Fig Porcentaje de plantas con presencia de Alternaria solani
durante 44 días de evaluación en el estudio de
frecuencias de aplicación de H. lixii en la primera réplica.
UG, 2015
33
Figura 7. Fig Porcentaje de plantas con presencia de Alternaria solani
durante 44 días de evaluación en el estudio de
frecuencias de aplicación de H. lixii en la segunda
réplica. UG, 2015.
34
xii
DECLARACIÓN DE RESPONSABILIDAD.
QF. Nelka Patricia Tandazo Falquez
C. I. 0902958164
Celular: 0991222262
e-mail: [email protected].
………………………………………………
Bajo juramento declaro que la responsabilidad de
los resultados obtenidos, conclusiones y
recomendaciones del presente trabajo de
investigación son exclusivamente de la autora.
1
INTRODUCCIÓN.
El tomate Lycopersicum esculentum Mill es una planta solanácea de origen
americano, se considera oriundo de Ecuador, Perú y la zona norte de Chile. Su
consumo es mundial, en cuanto a los países que lo cultivan son la Unión Europea y
Estados Unidos, que proviene al margen de la producción local de países vecinos
como México y Canadá. En América los principales productores son: Brasil
(35.08%), México (22.5%) y Argentina (11.7%), mientras que los que suministran
a la Unión Europea son: España, Holanda (comercio intracomunitario) y
Marruecos.
En Ecuador, es cultivado en las provincias de Manabí, Guayas, Santa Elena,
en la región Costa; en Chimborazo, Tungurahua, Pichincha, Carchi en la Sierra, en
baja escala en el Oriente y Galápagos. En el país durante el año 2.010 se cultivaron
297 hectáreas con esta especie, de las cuales se cosecharon 264 y produjeron 5.034
toneladas métricas (TM) de fruta fresca, con un rendimiento promedio de 17,71
TM/ha, (MAGAP-SIGAGRO, 2011).
El cultivo de tomate es afectado por muchos hongos ascomicetes e
imperfectos los cuales ocasionan enfermedades en el follaje, inflorescencias, tallos
jóvenes, frutos e incluso las raíces. Algunos fitopatógenos pueden causar también
ataques por crecer y multiplicarse en el xilema y en el floema de la planta y, por
ende, por bloquear el transporte de agua y nutrientes desde la raíz hacia las hojas o
el flujo de la savia desde las hojas hacia el resto de la planta.
El tizón temprano del tomate es producido por un hongo llamado Alternaria
solani que afecta a hojas, produce lesiones en el tallo, peciolo y frutos.
Una de las tendencias en la actualidad es la búsqueda de alternativas como es el uso
de hongos antagonistas del grupo de los Hyphomycetes, entre ellos los géneros
Thichoderma, Penicilium y Gliocladium.
2
En Cuba han realizados experimentos de control biológico con Gluticid a
dosis de 3.0 kg/ha obteniendo una buena eficacia especialmente en el tizón
temprano del tomate. En cambio, en Costa Rica se están realizando experiencias
utilizando microorganismos de montaña (M/M), lo que consiste en recogerlo de la
hojarasca y la multiplican con melaza y agua, que luego lo riegan en los campos
para evitar el ataque del tizón temprano.
El uso de hongos y bacterias antagonistas han ayudado en el control de
enfermedades ocasiónadas por patógenos del suelo (Infante et al 2009). El estudio
de las cepas de Trichoderma como agente de control biológico es debido a su alta
capacidad reproductora, y su habilidad de sobrevivir en condiciones ambientales
desfavorables, su capacidad para modificar la rizósfera logra una mayor utilización
de sus nutrientes por lo que es muy agresivo contra hongos fitopatógenos (Benítez,
et al, 2004).
Así mismo (Torres Iannacom y Gomez, 2008) reportaron que Trichoderma
harzianum es la especie más fuertes que otras especies de Trichoderma debido a
que reducen la severidad de la enfermedad del tizón temprano del tomate y
especialmente cuando se usa Hypocrea lixii como el hongo antagonista.
En Ecuador se ha identificado a T. asperellum como antagonista de
Sclerotium rolfsii y Rhizoctonia solani (Capuz, 2009), mientras que Cevallos
(2010) reportó que la cepa G-008 de este mismo antagonista aplicado al suelo en
forma líquida redujo la severidad del complejo de la marchitez del tomate después
de dos ciclos de cultivo. Por otra parte Molina (2011) reporta que Hypocrea lixii
tuvo efecto sobre esporas de A. solani en condiciones de laboratorio y mostró
eficacia sobre la infección del tizón del tomate en invernadero
En este estudio los resultados a obtener serán: reducir el uso de fungicidas,
obtener frutos de calidad, proteger la salud de las personas y del ambiente, evitar
costos de producción.
3
CAPITULO I
EL PROBLEMA
1.1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
El cultivo de tomate es muy afectado por una serie de microorganismos
como virus, bacterias, hongos, entre otros. Siendo los hongos los que más
problemas ocasionan, por lo que los agricultores recurren al uso de productos
químicos que contribuyen al aumento en los costos de producción; al punto que en
Manabí- Ecuador, más del 50% del costo de producción se destina al control de
plagas.
Por otra parte, los fungicidas son productos químicos, que al ser rociados
causan daño al ecosistema; así como a las personas que laboran en las actividades
agrícolas y a los frutos que son consumidos por los habitantes. En el caso de los
plaguicidas utilizados en hortalizas, en un estudio en mercados de Quito, se reveló
que el nivel promedio de metamidofos en tomate fue mayor a 15 ppm, siete veces
más alto que el límite permitido por la Organización para la Alimentación y la
Agricultura (FDA).
1.2. JUSTIFICACIÓN
La presente investigación servirá para evitar el uso indiscriminado para el
control de plagas, pues, existen casos en que las aspersiones se realizan hasta 24
horas antes de la cosecha, con productos a base de ingredientes activos de categoría
peligrosa que provocan deterioros en la salud, especialmente en las vías
respiratorias y afecciones a la piel de las personas que laboran en el campo y de los
consumidores, por ello el uso de microorganismos que reducen en forma natural la
invasión de fitopatógenos.
4
Por lo antes expuesto la importancia de este tema es disponer de una
alternativa biológica para obtener productos sin residuos químicos e impulsará a
una agricultura sustentable y sostenible mediante un cultivo ecológico; proteger el
medio ambiente y generar información sobre la acción que ejerce Hypocrea lixii
sobre el tizón temprano del tomate.
1.3 DETERMINACIÓN DEL PROBLEMA
Campo: Agricultura
Área: Microbiología
Aspecto: biocontrol de la enfermedad del tizón temprano del tomate por medio de
un antagonista como es Hypocrea lixii.
1.4. PREGUNTAS DE INVESTIGACIÓN
¿Qué apariencia tiene Alternaria solani causante del tizón temprano en el cultivo
del tomate al microscopio?
¿Cómo se manifiesta el control de Alternaria solani ante diferentes dosis de
Hypocrea lixii?
¿Influye la frecuencia de aplicación de Hypocrea lixii en el control de la Alternaria
solani?
1.5. OBJETIVOS
1.5.1. OBJETIVO GENERAL
Determinar el efecto de Hypocrea lixii sobre el tizón temprano del tomate
Alternaria solani, en condiciones de invernadero.
1.5.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS
1. Identificar la presencia de Alternaria solani causante del tizón temprano en
el cultivo del tomate mediante microscopía óptica.
5
2. Evaluar el efecto de la mejor dosis de aplicación de Hypocrea lixii sobre
Alternaria solani en condiciones de invernadero.
3. Establecer la frecuencia de aplicación de H. lixii para el manejo de
Alternaria solani en condiciones de invernadero.
1.6. HIPÓTESIS
El uso del antagonista Hypocrea lixii tiene efecto positivo sobre el hongo de
Alternaría solani.
6
CAPITULO II
MARCO TEÓRICO
2.1. EL CULTIVO DE TOMATE (Lycopersicum esculentum Mill)
2.1.1. GENERALIDADES
El tomate es una planta originaria de América y cultivada en todo el mundo
por su fruto comestible. Este cultivo pertenece a la familia de las solanáceas y
necesita de climas templados para crecer sin problemas. La palabra tomate procede
del náhuatl tomātl, ‘tomate’. En el centro y sur de México se llama «tomate» al
tomatillo o tomate verde (Physalis ixocarpa), mientras que el tomate común es
conocido como «jitomate» (que proviene del nahuat jictli: ‘ombligo’ y tomātl:
‘tomate’, que significaba ‘tomate de ombligo” (Crisanto C, 2010).
Este fruto se produce y consume en todo el mundo tanto fresco como
procesado de diferentes modos, ya sea como salsa, puré, jugo/zumo, deshidratado
o enlatado. La planta del tomate, es una hierba delicada que crece naturalmente de
manera rastrera, sin embargo, puede cultivarse de forma erecta o semi erecta, con
ayuda de estructuras de madera y puede llegar a sobrepasar al metro de altura. Las
hojas, pubescentes-tomentosas (como toda la planta), son alternas, de hasta 25 cm
de largo, divididas en varias hojillas de diferentes tamaños principalmente en la
base (Crisanto C, 2010).
Los tallos no son delgados (superan los 20 centímetros de grosor) y, debido
a esto, son frágiles. Externamente están cubiertos de abundantes pelos, por lo que
es áspero al tacto. La flor tiene un cáliz de 5 sépalos angostamente triangulares,
puntiagudos; la corola es de color amarillo, también en forma de estrella de 5 puntas
(raramente más, y hasta 9). Hay 5 estambre, a veces más hasta 9, con sus filamentos
unidos entre sí en la parte inferior, libres en la parte distal y rodeando al estilo. Las
flores juntas forman inflorescencias dispuestas en racimos cortos o alargados, a
veces ramificados, ubicados generalmente en los nudos (Corpeño B, 2004).
7
El fruto, el tomate es una baya jugosa, de forma generalmente sub-esférica,
globosa o alargada y, habitualmente, de unos 8 centímetros de diámetro. Inmaduro
es del todo verde y cuando madura, toma generalmente un color rojo intenso, pero
también se encuentra en tonos anaranjados, debido a la presencia de los pigmentos
licopeno y carotenos, posee un sabor ligeramente ácido, mide de 1 a 2 cm de
diámetro en las especies silvestres, y es mucho más grande en las variedades
cultivadas (Nuez F, 2009).
Los frutos del tomate de pasta son de distintos modos, pudiendo encontrarse
de forma alargada, de pera o redondos, siendo estos últimos preferidos por el
mercado ya que en muchas ocasiones los utilizan para sustituir el tomate de
ensalada. El color predominante es el rojo, tienen alta viscosidad, son biloculares,
con pH menor a 4.5 y de pericarpio más grueso que los destinados al consumo en
ensaladas. Su peso varía entre los 50 – 100 gr/fruto. Sus semillas son numerosas,
más o menos circulares, aplanadas, parduscas/amarillentas (El Agro, 2005).
2.1.2. COMPOSICIÓN Y VALOR NUTRICIONAL
El tomate es un alimento con escasa cantidad de calorías. De hecho, 5.000
gramos de tomate se aportan solamente 18 Kcal. La mayor parte de su peso es agua
y el segundo constituyente en importancia son los hidratos de carbono. Contiene
azúcares simples que le confieren un ligero sabor dulce y algunos ácidos orgánicos
que le otorgan el sabor ácido característico. Los contenidos nutricionales por cada
100 gramos de tomate son: Carbohidrato 4 g, azúcares 2.6 g, Grasas 0.02, Proteínas
1 g, agua 95 g, vitamina C 13 mg y una energía de 20 Kcal 80 Kj, según el
departamento de Agricultura de los Estados Unidos (USDA, 2007).
El tomate maduro contiene mayoritariamente el licopeno en
aproximadamente un 83%, también se encuentra el β-caroteno, entre un 3-7%, y
otros componentes como el γ-caroteno, el β-caroteno que presentan actividad
provitamínica A, fitoeno, fitoflueno, etc. El contenido en licopeno aumenta con la
maduración de los tomates y puede presentar grandes variaciones según la variedad,
condiciones del cultivo como el tipo de suelo y clima (Duran A et al, 2005).
8
El tomate es una fuente importante de minerales, como potasio y magnesio.
De su contenido en vitaminas destacan la B1, B2, B5, y la C. Posee también
carotenoides como licopeno, (pigmento que da el color rojo característico al
tomate), estos dos últimos son antioxidantes con una función protectora del
organismo humano (CIDH, 2004).
Además, actúa modulando las moléculas responsables de la regulación del
ciclo celular y produciendo una regresión de ciertas lesiones cancerosas. No se
conoce exactamente las bases biológicas ni fisicoquímicas de estas propiedades,
pero parecen directamente relacionadas con el elevado poder antioxidante del
licopeno, mucho más que otros antioxidantes como la vitamina E o el β-caroteno.
Un gran número de procesos cancerígenos y degenerativos están asociados a daños
oxidativos sobre los tejidos. El licopeno actuaría como un poderoso neutralizador
de radicales libres (óxido y peróxido) (Vítale A et al, 2010).
Este fruto contiene vitamina A en un 20%, vitamina C en 10%, potasio en
10% e hierro en 2%, la vitamina C combate la presencia de radicales libres que
dañan nuestra salud ya que están ligados con muchas enfermedades
cardiovasculares y al cáncer, así como también aceleran el proceso de
envejecimiento. Al ser rico en potasio interviene en la regulación del equilibrio
acido-base del cuerpo y funcionamiento de los nervios, corazón y los músculos (El
Agro, 2005).
2.2. ENFERMEDADES QUE AFECTAN AL CULTIVO DEL
TOMATE
2.2.1. GENERALIDADES.
Los organismos fitopatógeno pueden ser nematodos, bacterias, virus,
protozoarios, moluscos, y hongos, pero la mayoría de los patógenos de las plantas
son hongos de las división ascomicetes, basidiomicetes y oomycota.
Las principales enfermedades causadas por hongos en tomate son mildius,
oidios, royas, carbones, que se manifiestan como agallas, deformaciones, necroris,
chancros, marchiteces foliares, vasculares, podredumbres radiculares, de flores, de
9
frutos y micosis post-recolección. Generalmente el patógeno inverna en residuos
de cosecha que permanecen en el suelo, o en otras solanáceas; los conidios germina
a temperaturas entre 24-29°C, en ambientes húmedos o lluviosos, diseminándose
fácilmente a través del aire y la lluvia (Sánchez, 2012).
Entre las provincias de Guayas, Santa Elena y Manabí, entre los causales de
enfermedades foliares en el cultivo del tomate se mencionan a Alternaría solani
entre otros. Daña las hojas produciendo manchas pequeñas circulares o angulares,
con marcados anillos concéntricos en las hojas, en tallo y peciolo produce lesiones
negras alargadas, en las que se pueden observar a veces anillos concéntricos
(Morán, 2008).
Este hongo puede sobrevivir en el suelo, en residuos de cultivos infestados,
en la maleza, en semillas o dispersado con la ayuda del viento, agua insectos,
trabajadores y maquinarias agrícolas. Las esporas que aterrizan en las plantas de
tomate germinan e infectan las hojas cuando estas están húmedas. Las esporas
pueden penetrar las hojas, tallos o frutos. El tizón temprano es más severo cuando
las plantas están estresadas por muchos fructificaciones, ataque de nematodos o
deficiencias de nitrógeno, Alternaría solani persiste dependiendo de la localidad en
residuos de cosecha, suelo, tubérculos infectados u otros hospedantes del grupo de
las solanáceas (Infante D et al, 2009).
El hongo penetra directamente a través de la epidermis. La infección
primaria puede realizarse al follaje más viejo durante la etapa temprana del cultivo,
la mayor diseminación secundaria se realiza especialmente después de la floración,
cuando el nivel de inoculo es mucho más alto, la enfermedad se desarrolla con
mayor rapidez durante los periodos en que se alternan condiciones húmedas y secas
de ambiente (Nuez, 2009).
La sintomatología del tizón temprano A. solani, afecta principalmente a las
hojas, tallos, flores y frutos, generalmente, la afección foliar aparece en forma de
manchas irregulares constituidas por anillos concéntricos (Okumoto, 2004; CIDH,
2004).
10
Este hongo también ataca al fruto, formando una depresión cerca al
pedúnculo, a partir de las cicatrices del cáliz, provocando lesiones pardo-oscuras
ligeramente deprimidas y recubiertas de numerosas esporas del hongo. (Info Jardín,
2011). La infección se presenta durante periodos lluviosos y de alta humedad,
aunque también se ha observado que en periodos secos y cálidos que se favorece su
rápida expansión, preferentemente si existen períodos frecuentes de rocío o riego
por aspersión (Agrios, 2004).
Los hongos del género Trichoderma presentan una eficiencia en el control
de fitopatógenos que atacan partes aéreas y de la raíz de las plantas; además está
catalogado entre los agentes de control biológico más eficientes debido al amplio
espectro antagonista que presentan las enzimas extracelulares que producen,
actividad antibiótica, microparasitismo y habilidad de incrementar el desarrollo y
crecimiento de las plantas. Otra de las propiedades antagónicas se basa en el
biocontrol por competencias como fungistaxis, que es la competencia por
nutrientes, biofertilización y activación de los mecanismos de defensa de las
plantas. (Benítez et al, 2004).
2.2.2. HONGO PATÓGENO: Alternaria solani
TAXONOMIA
Reino : Fungi
División : Ascomycota
Subdivisión : Pezizomycotina
Clase : Dothidiomycetes
Orden : Pleosporaes
Familia: Pleosporaceae
Género: Alternaría
Especie: solani
Nombre Científico: Alternaría solani
Nombre común : Tizón temprano del tomate
El tizón temprano o alternariosis es una de las enfermedades más
importantes del cultivo del tomate, debido a que puede afectarlo en cualquier etapa
de su desarrollo. La enfermedad se encuentra bien establecida, su presencia y
peligro potencial se puede manifestar prácticamente durante casi todo el ciclo de
11
desarrollo en muchas regiones del país. Su control es difícil y la opción del empleo
de variedades resistentes es uno de los objetivos a lograr en breve plazo, para lo
cual se requiere del conocimiento de los mecanismos básicos que rigen la
interacción de esta investigación (Torres E, et al, 2008).
Los primeros síntomas en el follaje son pequeñas manchas de color café o
negro, rodeado de un halo amarillo, que aparece en las hojas banderas o más viejas.
Cuando las lesiones miden aproximadamente 6 mm de diámetro se observan anillos
concéntricos que le dan un aspecto de tabla de tiro al blanco. Los síntomas de las
hojas más viejas son aparición de manchas de color café rodeada de zonas de color
amarillo que crecen hasta 2 centímetros y muestran por lo general el aspecto de un
blanco de tiro y pueden cubrir toda la hoja volviéndolas de color amarillo (Arreaga
J, Hernández M, 2004).
Dañadas las hojas con manchas pequeñas circulares o angulares, con
marcados anillos concéntricos, las plantas muy atacadas pueden perder todas sus
hojas, exponiendo los frutos a los rayos directos del sol, produciéndose
escaldaduras. En los tallos se presentan zonas necróticas de forma alargada (con
anillos concéntricos), causando en las plántulas lo que se denomina como
“pudrición del collar”. Si la planta no muere, permanece enana y su producción es
muy reducida (Arias M, 2004).
En tallo y peciolo produce lesiones negras alargadas, en las que se pueden
observar a veces anillos concéntricos. Los frutos son atacados a partir de las
cicatrices del cáliz, provocando lesiones pardo-oscuras ligeramente deprimidas y
recubiertas de numerosas esporas del hongo. La infección del fruto ocurre
generalmente en la base del pedúnculo y se muestra con manchas hundidas, oscuras
y acartonadas; estas manchas también presentan los anillos concéntricos, formando
una depresión cerca al pedúnculo (Jacas J, et al, 2005).
La colonia del hongo va de color marrón gris a negro. Los conidióforos se
encuentran solos o formando pequeños grupos, son rectos o flexuosos, septados de
12
color variable (de marrón pálido a marrón oliváceo). La conidia es solitaria,
multicelular de cuerpo elipsoidal, tiene de 9 a 11 septas transversales y de 0- 3
septas longitudinales. El pico de la conidia tiene al inicio el cuerpo y se adelgaza
en el extremo, algunas veces es ramificado y tiene el largo del cuerpo de la conidia
o ligeramente más grande (Benítez T et al, 2004).
Entre las alternativas para el manejo de las enfermedades causadas por
hongos está el uso de químico a través de fungicidas, que en el caso de la
Alternariosis en el cultivo de tomate constituye una medida obligatoria para
asegurar una alta productividad (Arauz, 2002). Entre los fungicidas comúnmente
utilizados por los agricultores para eliminar patógenos o retardar su crecimiento se
encuentran fungicidas protectantes como los carbamatos, clorotalonil, cúpricos,
entre otros (Arreaga, Hernández 2004).
También se usan extractos vegetales elaborados con ruda, neen, en dosis de
200 y 100 g de hoja por litro de agua. Las labores fitosanitarias, se realizan de
acuerdo al tipo de plaga presente en el cultivo. Las constantes investigaciones en la
búsqueda de respuestas al control fitosanitario en el cultivo del tomate, es la tarea
principal de muchos científicos ya que son necesarios estos estudios por diversas
razones como: agroecológicas, salud, alimentación, entre otras (Vivas, 2011).
2.2.3. Control fitosanitarias.
Se realizaron monitoreo y evaluaciones semanales de los principales
insectos plagas y enfermedades que se presentaren en el cultivo y de acuerdo
al umbral se aplicaron los insecticidas adecuados para el control de los
mismos.
2.3. ORGANISMO ANTAGÓNICOS
2.3.1. HONGO ANTAGONISTA: Hypocrea lixii
Taxonomía
Reino : Fungi
División : Ascomycota
Subdivisión : Pezizomycota
Clase : Sordariomycetes
13
Orden : Hypocreales
Familia: Hypocreomycetidae
Género: Trichoderma
Especie: Trichoderma
Nombre Científico: Hypocrea lixii
Los hongos del género Trichoderma presentan una eficiencia en el control
de fitopatógenos que atacan partes aéreas y de la raíz de las plantas; además está
catalogado entre los agentes de control biológico más eficientes debido al amplio
espectro antagonista que presentan las enzimas extracelulares que producen,
actividad antibiótica, microparasitismo y habilidad de incrementar el desarrollo y
crecimiento de las plantas. Un factor que puede afectar la densidad de población de
Trichoderma spp, en el suelo, es la época del año: otoño e invierno (Harman et al,
2004).
El uso de microorganismos antagonistas para el control biológico de
fitopatógenos de suelo es una de las herramientas del manejo integrado de plagas.
El control biológico es la utilización de organismos vivos para reducir la población
de determinados organismos nocivos. Los organismos utilizados pueden ser
enemigos naturales de los dañinos o individuos de la misma especie manipulados
de modo que perjudiquen a sus propios congéneres (Jacas et al, 2005, Nicholls,
2008).
El modo de acción del Hypocrea lixii es complejo y comprende quimiotaxis,
antibiosis y parasitismo. Parece ser que la primera interacción entre el parásito y el
hospedero es un desarrollo quimiotrópico; en la que las hifas del parásito se dirigen
hacia el hospedante y este responde a la secreción de lectinas. Es posible que las
lectinas se combinen con residuos de galactosa de las paredes celulares de
Trichoderma y éste identifique a su presa produciendo enzimas hidrolíticas como:
quitinasas, b-1,3-glucanasas y proteinasas que desintegran las paredes celulares de
las hifas, produciendo esclerocios del hongo patógeno hasta causarle la muerte
(Morán, 2008; Capuz, 2009).
14
2.4. CARACTERISTICAS DEL INVERNADERO
2.4.1. Temperatura
La temperatura óptima, de desarrollo del cultivo de tomate oscila entre los
20 y 30 °C durante el día y entre 10 y 17 °C durante la noche. Las temperaturas
superiores a los 35 °C impactan negativamente sobre el desarrollo de los óvulos
fecundados y, por ende, afectan el crecimiento de los frutos. Por otro lado, las
temperaturas inferiores a 12 °C afectan adversamente el crecimiento de la planta.
Las temperaturas son especialmente críticas durante el período de floración, ya que
por encima de los 25 °C o por debajo de los 12 °C la fecundación no se produce
(Duran A, et al, 2005).
2.4.2. Humedad
La humedad relativa óptima oscila entre 60% y 80%. Con humedades
superiores al 80% incrementa la incidencia de enfermedades en la parte aérea de la
planta y puede determinar, además, el agrietamiento de los frutos o dificultades en
la polinización ya que el polen se apelmaza. En el otro extremo, una humedad
relativa menor al 60% dificulta la fijación de los granos de polen al estigma, lo que
dificulta la polinización (Corpeño, 2004).
2.4.3. Luminosidad
La luz solar es un pre-requisito para el crecimiento de la planta. El tomate
necesita de condiciones de muy buena luminosidad, de lo contrario los procesos de
crecimiento, desarrollo, floración, polinización y maduración de los frutos pueden
verse negativamente afectados.
El tomate es un cultivo que no lo afecta el fotoperiodo o largo del día, sus
necesidades de luz oscilan entre las 8 y 16 horas; aunque requiere buena
iluminación. Los días soleados y sin interferencia de nubes, estimulan el
crecimiento y desarrollo normal del cultivo (Corpeño B, 2004).
15
2.4.4. Suelo
La planta de tomate no es muy exigente en cuanto a suelos, excepto en lo que
se refiere al drenaje, el cual tiene que ser excelente ya que no soporta el
anegamiento. No obstante, prefiere suelos sueltos de textura silíceo-arcillosa y ricos
en materia orgánica como los suelos franco, y franco arcilloso, con buen drenaje y
pH entre 6,5 a 7,5(Nuez F, 2009).
2.4.5. Potencial de hidrogeniones pH
En cuanto al pH, los suelos pueden ser desde ligeramente ácidos hasta
ligeramente alcalinos cuando están en-arenados. En invernadero el tomate tolera
diferentes condiciones de salinidad tanto del suelo, como del agua de riego (Nuez
F, 2009).
2.4.6. Riego
El consumo diario de agua por planta adulta de tomate es de
aproximadamente 1.5 a 2 litros por día, la cual varía dependiendo de la zona, las
condiciones climáticas del lugar, la época del año y el tipo de suelo que se tenga.
Existen diversos sistemas de riego (gravedad, aspersión y goteo) y su uso
depende de la disponibilidad de recursos, pendiente del terreno, textura de suelo,
abastecimiento y calidad de agua. Con cualquiera de los sistemas seleccionados, se
debe evitar someter el cultivo a deficiencias o excesos de agua. Es importante la
buena distribución del riego durante todo el ciclo del cultivo, principalmente antes
de la formación de frutos.
De los tres sistemas de riego mencionados, el más eficiente es el de goteo,
ya que es el que menos pérdidas de agua tiene. Este tipo de riego es el que se
recomienda para trabajar el tomate, en general, en riego por goteo se aplican entre
30 a 40 m³ de agua/ha. /día, dependiendo del tamaño de la planta, población y época
del año. La evapotranspiración de la zona y el coeficiente del cultivo es quizá lo
16
más importante que debe considerarse en el rendimiento del riego. (MAGAP,
2012).
2.5. Variedades
Los cultivares sembrados en el país y que se encuentran en los mercados y
supermercados están: Daniella, Francesca, Alboran, Jenna, Heart Máster, Big Beff,
y otros. El cultivar usado en esta investigación será Floradade por ser uno de los
cultivares más frecuentes y más fungosos.
17
CAPÍTULO III
METODOLOGÍA
3.1. ÁREA DE ESTUDIO
El estudio se realizó en un invernadero de construcción artesanal cuyo largo
fue 9 metros, 6 metros de ancho y 3,5 metros de alto, ubicado en los predios de la
ciudadela Salvador Allende de la Universidad de Guayaquil, situada en la ciudad
de Guayaquil, perteneciente a la provincia del Guayas.
3.1.1. Ubicación geográfica
Sus coordinadas Geográficas son: latitud sur 2º a 12’, longitud occidental 79º
53’ y 6 msnm, con una temperatura media anual de 26.79 ºC, una precipitación
media anual de 85.59 mm, una humedad relativa media anual de 72.94%, una
precipitación media anual de 118.65 y una heliofonía de 1303.9 horas de sol anual
(Datos tomados de la estación meteorológica de la Universidad de Guayaquil).
3.2. UNIVERSO Y MUESTRA
El universo fue de 100 macetas y el tamaño de la muestra correspondió a 10
plantas por cada tratamiento, las mismas que se ubicaron en los predios de la
Universidad de Guayaquil como ya se describió.
3.3. VIABILIDAD
Se dispone de información sobre el efecto del antagonista, existe además el
laboratorio para la multiplicación e identificación del hongo patógeno y una
infraestructura para la evaluación de H. lixii en condiciones de invernadero en
forma artesanal; así como el personal capacitado para lograr el objetivo de esta
investigación.
18
3.4. VARIABLES
Dependiente: Incidencia y severidad de A. solani.
Independiente: Efecto de antibiosis de Hypocrea lixii sobre A. solani.
3.5. CRITERIOS
3.5.1. Criterio de inclusión
1.- Producción de tomate con uso de fungicidas.
2.- Manejo de microorganismos (A. solani e H. lixii).
3.5.2. Criterios de exclusión
1.- Tomates cultivados sin uso de fungicidas.
2.- Manejo de otros microorganismos que no fueran: A. solani e Hypocrea
lixii.
19
3.6. OPERACIÓN DE VARIABLES
VARIABLE DEFINICIÓN DIMENSIÓN INDICADOR
NIV.
MEDIC.
INS. MEDIC. ESTADÍSTICO
Alternaria solani Hongo fitopatógeno
causante de
Alternariosis en
tomate
Cantidad de
manchas o
daños en la
planta
Presencia de
Síntomas
Ordinal Libreta de campo,
escala de
evaluación
Diseño completamente
al azar, análisis de
varianza.
Hypocrea lixii Hongo antagonista
de Alternaria solani
Inhibición de
daños causados
por Alternaria
solani
Ausencia de
Síntomas
Ordinal Libreta de campo,
escala de
evaluación
Diseño completamente
al azar, análisis de
varianza.
20
3.7. TIPO DE INVESTIGACIÓN
El tipo de investigación es Experimental – prospectivo porque se conoció el efecto
de Hypocrea lixii sobre Alternaria solani con respecto al uso de fungicidas y su control
absoluto.
3.8. TRATAMIENTOS ESTUDIADOS
Desarrollo del segundo objetivo:
Los tratamientos en el estudio de dosis fueron los siguientes:
Nº DE TRATAMIENTO
CONCENTRACIONES conidios/ml
1
Hypocrea lixii 1 x 106 conidios /ml
2 Hypocrea lixii 1 x 108 conidios /ml
3
Hypocrea lixii 1 x 1010 conidios /ml
4 Testigo químico (planta + patógeno + fungicida)
5
Testigo Absoluto (planta + patógeno)
Desarrollo del tercer Objetivo:
El estudio de frecuencias de aplicación de H. lixii se describe a continuación:
No Número de repeticiones conidios / ml
1 Hypocrea lixii aplicado 10 días después del
trasplantes (ddt)
2 Hypocrea lixii aplicado 15 días después del
trasplante (ddt)
3 Hypocrea lixii aplicado a los 20 días con frecuencia semanal (28 y 44 días)
4 Testigo Químico (planta + patógeno + fungicida)
5 Testigo Absoluto (planta + patógeno)
21
3.9. DISEÑO DE INVESTIGACIÓN
Para la investigación se utilizó un diseño experimental completamente aleatorio
(DCA) con cinco tratamientos y dos réplicas para el estudio de dosis y frecuencias de
aplicación del antagonista. Para la comparación de las medias se utilizó la prueba de
rangos múltiples de Tukey.
3.9.1. Análisis de varianza que se utilizó durante el estudio
La fuente de variación y grados de libertad utilizados en ambos estudios fue el
siguiente:
Fuente de variación Grados de libertad
Tratamientos 4
Error experimental 15
Total 19
Para comparación de las medias se usaron las pruebas de rangos múltiples de Tukey (p=
0.05).
3.10. TÉCNICAS APLICADAS EN LA INVESTIGACIÓN
3.10.1. En el laboratorio
a) Identificar la presencia de Alternaria solani
b) Reactivación de la Hypocrea lixii
c) Inoculación del fitopatógeno
d) Contaje de conidios en cámara de newbauer
e) Inoculación del Antagonista
3.10.2. Identificar la presencia de Alternaria solani
A. solani fue aislada de hojas de tomate. Para ello las hojas fueron cortadas en
pedazos de 1cm cuadrado aproximadamente y luego desinfectadas en una solución de
22
hipoclorito de sodio al 10% durante tres minutos y después enjuagada con agua destilada
estéril (ADE) por tres veces para eliminar residuos de cloro.
Posteriormente, se colocó la muestra en cajas petri que contenía medio de cultivo
papa dextrosa agar (PDA), para después incubar a temperatura ambiente durante cinco
días. Transcurrido este tiempo se tomó el crecimiento del hongo con un asa de platino y
se colocó en una placa porta objeto, el que previamente contenía una gota de ácido láctico,
luego se observó en el microscopio de luz con un objetivo de 40X, el mismo que mediante
claves se determinó la presencia de Alternaria.
3.10.3. Reactivación de Hypocrea lixii
H. lixii fue proporcionada por el laboratorio de Fitopatología de la Estación
Experimental Litoral Sur del INIAP, para ello se tomó un gramo del crecimiento del
hongo en arroz pilado y se colocó en 100 ml de agua destilada estéril y se colocó en medio
de cultivo en agar Sabouraud. Con el crecimiento del hongo se tomó una pequeña porción
del micelio y se procedió a multiplicarlo masivamente en medio de cultivo, para ello se
distribuyó en forma de estrías y luego se incubó a 25°C, durante cinco días. Una vez que
esporuló se observó en el microscopio con el objetivo de 40X para comprobar su
presencia.
3.10.4. Inoculación del fitopatógeno
Para este propósito se realizó una suspensión de crecimiento micelial del hongo
de toda una caja de petri en 1000 ml de agua destilada estéril, después, se le agregó 10 ml
por cada planta de tomate y en cada tratamiento con un atomizador manual.
3.10.5. Contaje de conidios en cámara de neubauer
Para preparar la solución madre de Hypocrea lixii, se midió en una matraz 100 ml
de agua destilada estéril, se agregó el contenido micelial de una caja, se agitó fuertemente
con la ayuda de perlas de vidrio, luego con una jeringa estéril se tomó un ml y colocó en
la cámara de neubauer, con la ayuda de un contador se procede a contar en el microscopio
con el objetivo de 10X (Figura 1). Luego se aplicó la fórmula:
Concentración = Total de conidios contados X 250.000
Número de cuadros contados
23
3.9.7. Preparación de diluciones
Una vez que se contó las esporas se procedió a calcular el volumen de la dilución
para obtener las dosis requeridas para esta investigación. El esquema del proceso se
observa en la Figura 2.
3.10.6. Inoculación del antagonista
Después de haber inoculado al fitopatógeno y con el primer síntoma de la
enfermedad se aplicó el antagonista (H. lixii), utilizando las tres dosis mencionadas.
Figura 2. Esquema del proceso de dilución del antagonista.
Figura 1. Cámara de Neubauer para contaje de esporas
24
Las aspersiones del antagonista en el estudio de frecuencia se aplicaron a los 10,
15, 20, 28 y 44 días, igualmente se utilizó un atomizador manual.
3.11. INCIDENCIA Y SEVERIDAD
En condiciones de invernadero se contaron el número de plantas con síntomas de
la enfermedad. Para severidad se utilizaron la escala de Horsfall-Barratt modificada por
Large (1996), donde:
0 = planta sana,
1 = 0 – 1 % de área foliar afectada,
2 = 1 – 3 %,
3 = 3 - 9 %,
4 = 9 – 24 %,
5 = 24 – 50 %
6 = 50 – 76 %,
7 = 76 – 91 %,
8= 91 – 99 % del área foliar afectada y
9= planta muerta.
3.12. MANEJO DEL EXPERIMENTO EN EL CAMPO
3.12.1. Preparación del semillero y siembra
La semilla se sembró en tierra preparada comercialmente certificada libre de
patógenos, después se colocó en las bandejas germinadoras y se plantó una a tres semillas,
luego se esperó a que germine después de dos semanas, finalmente se trasplantó en las
macetas y se le suministró el riego necesario.
3.12.2. Preparación de tierra y llenado de macetas
En un plástico grande se colocó 30 sacos de tierra de sembrado para prepararla y
librarla de nematodos y todo tipo de microorganismos que están en la tierra para eso se le
agrego 1 kg de captan, el mismo que fue esparcido uniformemente, luego con palas se la
25
mezcla y se la tapó por espacio de 15 días. Pasado ese tiempo se volvió a mezclar con una
paleta y se procede al llenado de las macetas. En las macetas con capacidad de 8 Kg. se
trasplantó las plántulas de tomate cultivar Floradade.
3.12.3. Trasplante
Después de 18 - 21 días de edad de las plántulas en el semillero fueron
trasplantadas en los maceteros plásticos.
Una vez que se obtuvieron las plantas se procedió a inocularlas con el fitopatógeno
Alternaria solani en una sola aplicación y después de comprobar que había infestación se
procedió a aplicar el antagonista Hypocrea lixii según las dosis utilizadas. De acuerdo a
los tratamientos ya descritos.
3.13. LABORES AGRICOLAS
3.13.1. Preparación del suelo
La preparación del suelo en el que se ubicaron las macetas, se realizó
primeramente el corte de la maleza, luego se niveló el terreno y se le agregó un herbicida
aminapac y después de una semana se adicionó cal con creolina quedando el suelo listo
para ubicar las macetas.
3.13.2. Riego
Como el experimento fue en maceteros se procedió a construir un sistema de riego
a base de llaves de paso para implantar el goteo, el mismo que se planificó con un caudal
de 80 gotas por minuto y se regó 5 minutos una vez al día cuando bajara el sol.
3.13.3. Control de malezas
El deshierbe fue en forma manual (100 maceteros) para evitar competencias con
el cultivo.
26
3.13.4. Fertilización
Se realizó aplicaciones de NPK (30-10-10), 3 gramos por cada planta, mediante
espeques, su función es llegar hacia la raíz para que sean absorbidos por la planta, luego
de mes y medio se volvió a fertilizar agregándole NPK (40-20-10), en dosis de 3 g en
cada macetero.
También se hizo aplicaciones de calcio en dosis de 5 ml de producto en 4 litros de
agua para suplir el requerimiento de este elemento en la planta y así evitar que los frutos
presentes hundimiento por falta del mismo.
3.13.5. Poda
Se hicieron dos podas. Al mes del trasplante se realizó una poda manual donde
se eliminó los chupones para permitir que las ramas crecieran mejor. La segunda poda
se hizo a los dos meses de la siembra la misma que consistió en descartar las hojas viejas.
3.13.6. Tutorado
A las tres semanas después del trasplante se realizó el tutorado para guiar el
crecimiento y mantener el soporte del cultivo del tomate. El objetivo del tutoreo es
mejorar la ventilación e iluminación de toda la planta, así como optimizar los espacios
para evitar que el fruto caiga al suelo y tenga un mejor desarrollo.
3.13.7. Aporque
Al mes y medio del trasplante se realizó el aporque que consistió en acumular
tierra alrededor del tallo de la planta de tomate para fortalecer los mismos.
3.13.8. Control Fitosanitario
La mosca blanca (Bemisia tabaci) pone sus huevos en las partes jóvenes de las plantas,
como las hojas. Su control se lo realizó con cipermetrina (C22H19Cl2NO3), que es un
insecticida piretroide de amplio espectro, no sistémico, usando 1.5 cm, en 2 litros de agua
en una bomba de 5 litros, la misma que se roció por dos ocasiones debido a la persistencia
de este insecto.
27
3.14. MATERIALES Y EQUIPOS UTILIZADOS
Los materiales y equipos a utilizarse están disponibles en el laboratorio de
Biología y suelo de la Facultad de Ciencias Agrarias.
EQUIPOS: Microscopio (Leica CME), Bomba de Riego 5 L, Estufa (Memmert),
Autoclave (Olmar), Atomizadores manual (Aquaflex).
MATERIALES: Cajas de petri (Marienfeld), Matraces (pirex), Vasos de precipitación
(Pirex), Pipetas (Eppendorf), Jeringa descartables (Lisfar), Mascarillas (3M 8210),
Guantes desechables (Dura Shield), Bandeja germinadora (Ten-rop), Maceteros
(Protexer), placas porta objetos (Corning 7980), Tierra estéril (Propia de la zona),
Invernadero (construcción de Madera).
3.15. RECURSOS UTILIZADOS
3.15.1. Recursos Humanos
En la presente investigación participaron: la maestrante y la tutora.
3.15.2. Recursos físicos
Se contó con:
computadoras,
cámara digital,
papeles
semillas de tomate
bandejas germinadoras
caña guadua, plástico y piola
bombas de fumigación capacidad 5 L
mangueras para riegos
28
CAPÍTULO IV
RESULTADOS
5.1. IDENTIFICAR LA PRESENCIA DE Alternaria solani CAUSANTE DEL
TIZÓN TEMPRANO EN EL CULTIVO DEL TOMATE MEDIANTE
MICROSCOPÍA ÓPTICA.
En las hojas del cultivo de tomate se identificó la Alternaria solani, primeramente a través
de la sintomatología, la misma que consistió en manchas circulares, negruzcas a manera
de tiro al blanco en el haz de la hoja. Luego se lo cultivó en agar Sabouraud, (Figura 3)
para posteriormente observar las colonias mediante microscopía óptica.
Figuras 3. Cultivo de Alternaria solani en agar Sabouraud.
El hongo se lo observó como un micelio filamentoso con conidióforos simples tabicados
en cuyos extremos se encuentra unos conidios muriformes de color pardo con septos
transversales y verticales de disposición irregular (Figura 4).
29
Figura 4. Observación de micelios de Alternaria solani a través de microscopía óptica.
5.2. EVALUAR EL EFECTO DE LA MEJOR DOSIS DE APLICACIÓN DE
Hypocrea lixii SOBRE Alternaria solani EN CONDICIONES DE INVERNADERO.
El mayor porcentaje promedio de plantas afectadas por Alternaria solani en
condiciones de invernadero en la primera réplica, lo presentó en los tratamientos 1 y 5
que corresponden a 1x106 y testigo absoluto en su orden, los que fueron iguales
estadísticamente entre sí, al igual que la dosis 1x108 y al testigo químico. El tratamiento
1x1010 fue el de menor incidencia y fue diferente de los demás tratamientos. Se obtuvo
un coeficiente de variación (CV) fue 40,08%, cabe recalcar que el CV es alto lo que se
debe a que entre repeticiones hubo valores bajos y altos (Cuadro 1).
30
Cuadro 1. Porcentaje de plantas afectadas por Alternaria solani en condiciones de
invernadero, primera réplica. UG. 2015.
Tratamientos DÍAS DESPUÉS DEL TRASPLANTE
10 15 20 28 44 MEDIA
1. Hypocrea lixii 1 X10⁶ 10 50 60 80 100 60 a1/
2.Hypocrea lixii 1X10⁸ 30 30 60 60 70 50 a
3.Hypocrea lixii 1X 101⁰ 10 10 20 30 30 20 b
4.Testigo químico 40 50 50 50 50 48 a
5.Testigo absoluto 50 50 50 70 80 60 a
C.V. 40.08%
1/Cifras de la columna con la misma letra son estadísticamente iguales entre sí de acuerdo a la prueba de
rangos múltiples de Tukey p =0.05
Durante los 44 días después del trasplante las evaluaciones fueron aumentando el
porcentaje de plantas afectadas en todos los tratamientos; como se observa en el
(Cuadro1), el tratamiento 1x106 conidios por ml, en esta edad todas las plantas
mostraron daños y llegaron a morir; el testigo absoluto en la última lectura llego a
80% de plantas con la enfermedad (Figura 5).
Figura 5. Porcentaje de plantas con presencia de Alternaria solani durante 44 días de
evaluación. UG, 2015.
0
50
100
150
200
250
300
350
10 15 20 28 44 MEDIA
DIAS DESPUES DEL TRASPLANTE
1050 60 80 100
6030
3060
6070
50
10
10
2030
30
20
40
50
50
50
50
48
50
50
50
70
80
60
% p
lan
tas
afec
tad
as p
or
alte
rnar
ia s
ola
ni
1. Hypocrea lixii 1 X106 2. Hypocrea lixii 1X108 3. Hypocrea lixii 1X1010
4. Testigo químico 5. Testigo absoluto
31
La segunda réplica muestra que la dosis 1x1010 de H. lixii tuvo el menor porcentaje de
plantas afectadas por A. solani y fue estadísticamente diferente de los demás tratamientos.
Los valores más altos los mostró el testigo absoluto, seguido de los tratamientos químico
y la dosis más baja del antagonista, todos ellos fueron iguales estadísticamente entre sí.
El coeficiente de variación fue 31.30% (Cuadro 2).
Cuadro 2. Porcentajes plantas afectadas por Alternaria solani en condiciones de
invernadero, segunda réplica. UG. 2015.
1/ Cifras de la columna con la misma letra son estadísticamente iguales entre sí de acuerdo a la prueba de
rangos múltiples de Tukey p =0.05
5.3. ESTABLECER LA FRECUENCIA DE APLICACIÓN DE H. lixii PARA EL
MANEJO DE Alternaria solani EN CONDICIONES DE INVERNADERO.
En la primera réplica se determinó que la frecuencia de 20 días con dos aplicaciones en
el ciclo de cultivo tuvo el menor valor de plantas con síntomas de Alternaria solani y fue
diferente de los demás tratamientos; los valores más altos fueron el testigo absoluto y
cada 10 días, los mismos que fueron iguales estadísticamente a los demás tratamientos
(Cuadro 3).
Concentración conidios /ml
Días después del trasplante
10 15 20 28 44 Media
1.Hypocrea lixii 1 x106 1 3 1 90 99 38,8 a1/
2. Hypocrea lixii 1x108 25 4 1 60 80 34,0 a
3. Hypocrea lixii 1x1010 1 1 9 9 9 5,8 b
4. Testigo químico 91 60 7 50 50 51,6 a
5. Testigo absoluto 99 80 7 50 91 65,4 a
C.V. 31.30%
32
Cuadro 3. Porcentaje de plantas con síntomas de Alternaria solani, primera réplica UG.
2015.
Tratamientos
Días después del trasplante (ddt)
Media 10 15 20 28 44
Hypocrea lixii 10 ddt 1 25 60 90 99 55,0 a1/
Hypocrea lixii 15 ddt 3 4 60 60 80 41,4 a
Hypocrea lixii 20 ddt 1 1 3 7 7 3,8 b
Testigo químico 9 35 50 50 50 38,8 a
Testigo absoluto 24 35 50 80 90 55,8 a
C.V. 38.96% 1/ Cifras de la columna con la misma letra son estadísticamente iguales entre sí de acuerdo a la prueba de
rangos múltiples de Tukey p =0.05
En las cinco evaluaciones el tratamiento a base de H. lixii aplicado cada 20 días se
mantuvo a través del tiempo, en los demás tratamientos se nota un incremento del
porcentaje de plantas afectadas (Figura 6).
Figura 6. Porcentaje de plantas con presencia de Alternaria solani durante 44 días de
evaluación en el estudio de frecuencias de aplicación de H. lixii en la primera
réplica. UG, 2015.
En la segunda réplica los porcentajes promedios de plantas afectadas por A. solani
tuvieron el mismo comportamiento, pues, el tratamiento aplicado cada 20 días fue el de
menor valor con 9% y fue diferente de los demás tratamientos. Los mayores valores
fueron para el testigo absoluto seguido de la frecuencia de cada 10 días y el testigo
químico los mismos que fueron iguales entre sí (Cuadro 4).
33
Cuadro 4. Porcentaje de plantas con síntomas de Alternaria solani, segunda réplica UG.
2015.
Tratamientos Días después del trasplante (ddt) Media
10 15 20 28 44
Hypocrea lixii 10 ddt 30 30 50 60 91 52,2 a 1/
Hypocrea lixii 15 ddt 9 15 50 60 80 42,8 a
Hypocrea lixii 20 ddt 9 9 9 9 9 9,0 b
Testigo químico 15 20 50 50 50 37,0 a
Testigo absoluto 24 24 50 80 91 53,8a
C.V. 38.96%
1/ Cifras de la columna con la misma letra son estadísticamente iguales entre sí de acuerdo a la prueba de
rangos múltiples de Tukey p =0.05
En las cinco evaluaciones el tratamiento a base de H. lixii aplicado cada 20 días se
mantuvo a través del tiempo, mientras que los demás tuvieron un incremento en el
porcentaje de plantas afectadas (Figura 7).
Figura 7. Porcentaje de plantas con presencia de Alternaria solani durante 44 días de
evaluación en el estudio de frecuencias de aplicación de H. lixii en la segunda
réplica. UG, 2015.
0%
50%
100%
150%
200%
250%
300%
1T 2T% 3T TQ TA
Hl a los 10 ddt Hl a los 15 ddt Hla los 20 ddt Hla los 28 ddt Hl a los 44 ddt
34
DISCUSIÓN.
De acuerdo a los resultados obtenidos en la investigación las tres dosis de Hypocrea
lixii, 1 x 106, 1 x 108, 1x 1010, y con dos réplicas, se determinó que la dosis de 1x 1010fue
la de mejor efecto, debido a que es el tratamiento que presenta a las plantas de tomate con
poco ataque y se obtuvo el mayor número de plantas sanas.
Las plantas que tuvieron mayor infestación fue la dosis de 1 x 106 ya que fueron
igual al testigo absoluto. Las plantas con la dosis de 1 x 108 resistieron más, pero el
análisis estadístico indicó que fueron iguales a los testigos.
El efecto que produce el antagonista frente a Alternaría solani en el cultivar
Floradade muestran un comportamiento variable, la dosis más alta fue la de menor efecto,
datos que concuerdan a los reportados por Molina M (2010), pues, efectivamente así
aconteció.
Respecto a la frecuencia hubo respuesta positiva con las aplicaciones cada 20 días,
fue significativo y con el menor porcentaje de plantas afectadas, por otra parte, se puede
mencionar que este resultado estaría relacionado con el fenómeno de la hormesis, el
mismo que es una respuesta de ciertos microorganismos frente dosis altas o bajas.
Existe escasa información nacional e internacional sobre el estudio de dosis de H.
lixii como antagonista sobre el tizón temprano del tomate causada por Alternaria solani,
en condiciones de invernadero.
Los siguientes microorganismos como: Bacillus subtilis JF419701 y Trichoderma
harzianum JF419706 (teleomorfo: Hypocrea lixii) inhibieron el crecimiento de Alternaria
alternata, Fusarium oxysporum, Exserohilum rostratum, Macrophomina phaseolina,
Pythium ultimum y Rhizoctonia solani, además, el examen microscópico demostró la
capacidad de T. harzianum JF419706 a parasitar las hifas de todos los patógenos y les
ocasionaba la muerte a través de enzimas degradantes producidas en su pared celular.
Por otro lado, Viterbo A (2009), describe el antagonismo de Hypocrea lixii sobre
algunas cepas de Trichoderma.
35
Estudios realizados en Ecuador con seis cepas de hongos antagonistas que actúan
sobre la alternariosis, del tomate se determinó que Hypocrea lixii tiene algún efecto
antagonista contra Alternaria solani (Molina M, 2011). En el estudio se logró un mayor
efecto antagonista.
Las bondades que presentan las cepas del antagonista Trichoderma han logrado que
se lo considere como un excelente biocontrolador tanto desde el punto de vista fisiológico
y por ser un producto muy amigable con el ambiente.
Los frutos que se obtuvieron en la cosecha fueron frutos sanos, limpios, libre de
contaminantes químicos, lo que determina la contribución que tienen estos hongos del
genero Trichoderma en colaborar con el medio ambiente, y bajar el costo de insumos en
la producción de tomate de calidad para que llegue a los hogares de muchos ecuatorianos
y a muy bajo precio.
Es trascendental mencionar que este estudio sirve para evitar el uso indiscriminado
de productos químicos para el control de plagas, con repercusión a la salud humana.
Es importante destacar que esta investigación es una alternativa biológica para
obtener productos sin residuos químicos e impulsará a una agricultura sustentable y
sostenible mediante un cultivo ecológico para proteger el medio ambiente.
36
CAPÍTULO V
CONCLUSIONES
1.- Ante los resultados obtenidos se afirma que existen diferencias estadísticamente
significativas entre las diferentes dosis de aplicaciones de Hypocrea lixii y los testigos
químicos y absolutos.
2.-La dosis 1x1010 de Hypocrea lixii, ejerció un mejor efecto sobre A. solani.
3.- En cuanto a la frecuencia de aplicación cada 20 días fue la mejor efecto sobre el
porcentaje de plantas afectadas por A. solani.
4.- El tratamiento de Hypocrea lixii con concentraciones de 1 x 1010 contribuye de manera
significativa a disminuir el uso de plaguicidas y fungicidas de origen químico que son
sustancias altamente tóxicas y ocasionan daños en la salud y al ambiente
5.-De los resultados de este estudio, se beneficiarán los agricultores, las personas que
trabajan en el campo, los consumidores finales y el eco sistema
6.-La sociedad se verá beneficiada al disponer de productos de consumo masivo limpio,
sano saludable; el ecosistema tendrá menos contaminación y mejorará la calidad de vida
de los agricultores y consumidores
7.- Con el uso de este producto orgánico en la concentración determinada como
apropiada, se obtiene un fruto orgánico de excelente calidad, cuyo uso reducirá de modo
significativo los costos de producción, debido al no uso de los agroquímicos tradicionales
para el control fitosanitario.
37
CAPÍTULO VI
RECOMENDACIONES
1. Realizar otros estudios sobre las dosis determinadas con otros cepas de hongos
antagonista que ataquen al tizón temprano del tomate
2. Efectuar otras investigaciones sobre el control de alternariosis en otros cultivos
como: pimiento, sandía, melón, que son ampliamente cultivados en la costa y de
gran consumo masivo.
3. Investigar los metabolitos toxico volátiles y no volátiles que impiden ser
colonizados por microorganismos antagonistas, como H. lixii sobre A. solani.
4. Realizar combinaciones de bacterias con hongos antagonistas como alternativa
eficaz en el control biológico de patógenos que producen enfermedades en el
tomate.
38
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42
ANEXOS
ANEXO 1. CULTIVO DE TOMATE EN INVERNADERO
Se observa un invernadero elaborado artesanalmente, cuyo interior hay siembras de
tomates tutoreadas con piola para mantenerlas erguidas.
43
ANEXO 2. CROQUIS DE INVERNADERO
Invernadero construido en forma artesanal
44
ANEXO 3. CROQUIS DE CAMPO
Croquis de campo. Cultivo del tomate en condiciones de invernadero.
45
ANEXO 4. Alternaria solani en medio de cultivo agar saboraund. UG. 2015
A
B
46
ANEXO 5. ANTAGONÍSTA OBTENIDO EN EL LABORATORIO: Hypocrea lixii
se observa el crecimiento miceliar del antagonista Hypocrea lixii
después de 5 días de haber permanecido en la estufa a 25°C
Se observa la forma alargada transparente y sifonada de Hypocrea lixii sembrado en agar
PDA (A) y vista al microscopio (B).
A
B
47
ANEXO 6. TUTOREO DE LAS PLANTAS DE TOMATE
Se hace el tutoreo de la planta de tomate para mantener la planta erguida y darles las
facilidades para su desarrollo, procedimiento que se lo realiza cuando la planta tenga 21
días del trasplante
ACCIÓN EN LAS HOJAS DE Alternaria solani.
Se observa la infección de tizón temprano del tomate ocasionada por Alternaría Solani
que consiste en manchas en las hojas constituidas por anillos concéntricos que le confiere
la apariencia de una diana dando el aspecto del tiro al blanco produciendo un
marchitamiento en sus hojas
48
ANEXO 7. PREPARACION DE DILUCIONES EN EL LABORATORIO. Y
ATOMIZADORES
Se observa la caja de petri en el que se encuentra Hypocrea lixii y el matraz. Se procede
a preparar el agua madre que fue llevada a la cámara de neubauer realizando el contaje
micelial.
Una vez hechos los cálculos respectivos y preparados sus diluciones se procedió
aplicarlas de forma manual a los tratamientos de acuerdo a sus dosis.
49
ANEXO 8. ATOMIZACION MANUAL A LOS DIVERSOS TRATAMIENTOS.
Se observa cuando se hace la atomización a las plantas de tomate con las diluciones
mencionadas y de acuerdo a los tratamientos.
50
ANEXO 9. ACCIÓN DE ALTERNARIA SOLANI EN EL FRUTO DEL TOMATE.
Y SANOS
Se observa el ataque de la Alternaria solani al fruto en forma de manchas cóncavas
deprimidas.
Se observa frutos sanos de buen color, limpios libres de sustancias químicas tóxicas.
51
ANEXO 10. FLUJOGRAMA DE LA INVESTIGACIÓN
EFECTO DE Hypocrea lixii SOBRE
Alternaria solani EN ALTERNARIOSIS
DEL TOMATE
LABORATORIO
SIEMBRA EN
AGAR SABORAUD
PREPARACION DE
INOCULOS DE
MICROORGANISMOS
SELECCIÓN DE
FRECUENCIA
Antagonista
Hypocrea lixii
Patógeno
Alternaría
solani
PREPARACIÓN
DILUCIONES
SERIADAS. 106, 108,
1010
Dilución de
agua destilada
+ Agente
Inoculación del
patógeno
CAMPO
INVERNADERO
SEMILLERO
TRASPLANTE A
MACETAS
APLICACIÓN DE
INOCULO Y
ANTAGONISTA
MEDICIÓN DE
DAÑOS: TALLO.
HOJA. FRUTO
ANÁLISIS DE
RESULTADOS
SELECCIÓN DE
DOSIS
52
GLOSARIO
Agonista: Sustancia que es capaz de unirse a un receptor celular receptor y provocar una
respuesta en la célula con el fin de estimular una función.
Antagonista: Sustancia, natural o sintética, que se une a los receptores del organismo en
cuestión, bloqueándolos contra la acción de los agonistas.
Antibiosis: Asociación de dos o más organismos que resulta perjudicial para uno de ellos.
Alternaria solani: Hongo fitopatógeno causante de alternariosis o tizón temprano en
cultivos de tomate.
Alternariosis: Es una infección por Alternaria solani, la presentación por vía cutánea
como centros de coordinación, ulceradas pápulas y placas.
Bio-control: Utilización de organismos vivos para comprobar la pureza de ciertas
sustancias.
Biocontroladores o Control Biológico: Es un método de control de plagas,
enfermedades y malezas que consiste en utilizar organismos vivos con el objeto de
controlar las poblaciones de otro organismo
Bioflenoides: Son moléculas hidrosolubles y están compuestas por un grupo de
pigmentos brillantes que frecuentemente se encuentran en frutas y vegetales en compañía
de la vitamina C.
Biotrófica: Microorganismos que colonizan las raíces de las plantas para aportarles los
nutrientes que necesita para la fase vegetativa.
Carotenoides: Son pigmentos orgánicos del grupo de los isoprenoides que se encuentran
de forma natural en plantas y otros organismos fotosintéticos como algas, algunas clases
de hongos y bacterias.
Conidióforo: Es una estructura microscópica especializada en la producción asexual de
miles de esporas llamadas conidias y se localizan al extremo de hifas.
Cuajado: Unir y trabar las partes de un líquido para convertirlo en sólido.
53
Esporulación: Reproducción a través de esporas.
Fitoreguladores: Son productores reguladores del crecimiento de las plantas.
crecimiento; normalmente se trata de hormonas vegetales (fitohormonas), y sus
principales funciones son estimular o paralizar el desarrollo de las raíces y de las partes
aéreas.
Flexuoso: Torcido o doblado.
Floema: El tejido conductor encargado del transporte de nutrientes orgánicos,
especialmente azúcares, producidos por la parte aérea fotosintética y autótrofa, hacia las
partes basales subterráneas, no fotosintéticas, heterótrofas de las plantas vasculares.
Floración: Período en que las flores se mantienen abiertas.
Glucanasas: Son enzimas que degradan b-glucanos.
Gluticid: Antifúngico foliar obtenido a partir de metabolitos activo de Pseudomonas
aeruginosa.
Haustorio: extremo de la hifa de un hongo parásito o de la raíz modificada de una planta
parásita.
Hypocrea lixii: Hongo antagonista de la Alternaria solani en alternariosis del tomate.
Lectinas: Son proteínas que se unen a azúcares con una elevada especificidad para cada
tipo distinto. Su principal papel está en los fenómenos de reconocimiento, tanto a nivel
molecular como celular.
Licopeno: Es un pigmento vegetal, soluble en grasas, que aporta el color rojo
característico a los tomates, sandia, y a otras frutas y verduras.
Metamidofos: Es un plaguicida prohibido en muchos países bajo todas las formulaciones
y usos pues es nocivo para la salud humana y el medio ambiente.
Parasitismo: Es una interacción biológica entre organismos de diferentes especies.
Pesticidas: Son sustancias químicas o mezclas de sustancias, destinadas a matar, repeler,
atraer, regular o interrumpir el crecimiento de microorganismos considerados plagas
Proteinasas: Enzimas que degradan proteínas.
54
Quimiotaxis: Es un tipo de fenómeno en el cual las bacterias y otras células de
organismos uni o multicelulares dirigen sus movimientos de acuerdo a la concentración
de ciertas sustancias químicas en su medio ambiente.
Quimiotrópico: Movimiento o crecimiento inducido cuyo estímulo direccional es la
química.
Quitinasas: Enzimas que degradan la quitina
Sostenibilidad: Mantención de diversossistemas biológicos y productivos con el
transcurso del tiempo.
Sustentabilidad: Es el equilibrio existente entre una especie con los recursos del entorno.
Tutores: Cuerdas que permiten mantener los tallos de las plantas de tomates en posición
vertical.
Xilema: Es el tejido vegetal leñoso de conducción que transporta la savia desde la raíz
hasta las hojas de las plantas. Transporta agua, sales minerales y otros nutrientes.
REPOSITARIO NACIONAL EN CIENCIA Y TECNOLOGÍA
FICHA DE REGISTRO de tesis
TITULO Y SUBTITULO: EFECTO DE Hypocrea lixii SOBRE EL TIZÓN TEMPRANO DEL
TOMATE Alternaria solani EN CONDICIONES DE INVERNADERO. GUAYAS, 2014
AUTOR/ES: Q.F. NELKA PATRICIA
TANDAZO FALQUEZ.
REVISORES:
INSTITUCIÓN:
UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL
FACULTAD:
FACULTAD DE MEDICINA
CARRERA: MAESTRÍA EN MICROBIOLOGÍA, MENCIÓN INDUSTRIAL.
FECHA DE PUBLICACIÓN: N. DE PAGS:
ÁREAS TEMÁTICAS: Agronomía, Salud Pública.
PALABRAS CLAVE: Alternaria solani, Hypocrea lixii, antagonismo.
RESUMEN:El tomate Lycopersicum esculentum Mill es una solanácea que es afectado por diversos
microorganismos como hongos, bacterias, virus y nematodos; para prevenir estos problemas se utilizan
pesticidas para su manejo, los mismos que aumentan los costos de producción y daños en la salud de las
personas que laboran en la actividad agrícola y de consumidores. Dentro de las enfermedades comunes
y de importancia económica se encuentra el tizón temprano del tomate o Alternariosis, causada por
Alternaria solani. El objetivo de esta investigación fue determinar el efecto de Hypocrea lixii sobre el
tizón temprano del tomate Alternaria solani, en condiciones de invernadero, la misma que se desarrollo
entre el mes de octubre del 2014 a mayo del 2015.
La investigación tuvo cinco tratamientos por cada experimento es decir de dosis y frecuencias, se utilizó
un diseño completamente aleatorio (DCA) con 10 unidades experimentales. Los tratamientos del estudio
de dosis fueron: 1x106, 1x108 y 1x1010 conidios por ml y cinco frecuencias de aplicación. 10, 15, 20, 28
y 44 días después de trasplante; en ambos ensayos se incluyeron dos testigos uno absoluto y uno químico.
Se registraron datos de incidencia y severidad de la enfermedad mediante la escala de 0 a 5 grados, donde
0= sin síntomas y 5= más del 50% del área foliar manchada.
Se determinó que la dosis de 1 x 1010 de Hypocrea lixii fue la de menor incidencia de daños por Alternaria
solani con 5,8%; la frecuencia con menor porcentaje de plantas afectadas fue cada 20 días.
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