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7/24/2019 (740501481) Manualdemtodosgeneralesparadeterminacindecarbohidratos 141106162652 Conversion Gate02

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MANUAL DEMTODOS

GENERALESPARA

DETERMINACIN DE

CARBOHIDRATOS


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ELABORADO POR: Leidy Milena Cristancho Cruz

Ricardo Alonso Monroy Soler

UPTC

201


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P ! " i n acuanti-icacion de los di,ersos car)ohidratos +resentes en un ali*ento/

+udiendo a+ro,echar un car)ohidrato con 9enes industriales o +ara

ase"uarar la co*+osicion ue un +roducto ali*entario +ueda tener

la analitica


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+er*ite entre otras cosas el control del estado de las *aterias +ri*as o

los +roductos durante todo el +roceso de trans+orte al*acena*iento o

trans-or*acion$

El *uestreo de los +roductos o *aterias +ri*as hace uso de analisis

ui*icos e intru*entales ue no reuieren cantidades "rantes de

*uestra +ara +oder hacer un analisis y deter*inar su co*+osicion

al"unas tecnicas de es+ectro-oto*etria tienen un car!cter dual/ al

+er*itir la identi9cacion y la cuanti9cacion de un co*+uesto de

cualuier ali*ento los analisis de cuali9cacion de la *olecual de

car)ohidrato utiliza tecnicas ui*icoas de reacciones o


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%&D%CE1$ %&'ROD(CC%O&2

2$ ME'ODOS C(A&'%'A'%@OS

2$1 DE'ERM%&AC%O& DE CARBO7%DRA'OS 'O'ALES PORESPEC'RO5O'OME'R%A (@ ME'ODO DE 5E&OL6S(L5(R%CO;

2$2 DE'ERM%&AC%O& DE A(CARES RED(C'ORES 'O'ALES POR

ESPEC'RO5O'OME'R%A (@ ME'ODO DE AC%DO D%&%'ROSAL%C%L%CO D&S;2$> DE'ERM%&AC%O& DE A(CARES POR EL ME'ODO OP'%CO DE10POLAR%ME'R%A

2$ DE'ERM%&AC%O& DE A(CARES L(COSA/ SACAROSA 5R(C'(OSA;12POR 7PLC CROMA'ORA5%A L%F(%DA DE AL'A RESOL(C%O&;

2$ DE'ERM%&AC%O& DE A(CARES POR ESPEC'ROSCOP%A POR1%&5RARROGO CERCA&O

2$? A&AL%S%S DE POL%SACAR%DOS DE'ERM%&AC%O& DE 5%BRA D%E'E'%CA;20

>$ ME'ODOS C(AL%'A'%@OS22

>$1 PR(EBA DE MOL%SC722

>$2 PR(EBA DE BE&ED%C'O2>

>$> PR(EBA DE L(OL2>$ PR(EBA DE B%AL2

>$ PR(EBA DE SEL%HA&O552?

>$? PR(EBA DE BAR5OED2

>$ PR(EBA DE 5E7L%&2I


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>$I EF(EMA DE A&AL%S%S C(AL%'A'%@O PARA CARBO7%DRA'OS2I

$ B%BL%ORA5%A2J


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2$ ME'ODOS C(A&'%'A'%@OS2 $ 1 D E ' E R M % & A C % O & D E C A R B O 7 % D R A ' O S ' O ' A L E SP O RE S P E C ' R O 5 O ' O M E ' R % A (@ M E ' O D O D E 5 E & O L 6 S ( L5 ( R % C O ;

%&'ROD(C%O&

El *etodo +or es+ectro-oto*etria (@ hace re-erencia al uso de la luz +ara*edir las concentraciones de ciertas sustancias ui*icas$ Para ue este-eno*eno +ueda lle"ar a *edirse se de)e tener +resente la concentracion de

las es+ecies a)osor)entes dado a ue esta es +ro+orcional a la a)sor)anciase".n la ley de la*)er6)ee donde:

A = e b c

A es la a)sor)ancia *a"nitud adi*ensional; e es un coe-iciente de +ro+orcionalidad deno*inado coe-iciente dee


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A 2 *l de al8cuota de una soluci4n de hidratos de car)ono se *ezcla con 1 *lde soluci4n acuosa al de -enol en un tu)o de ensayo$Posterior*ente/ se aade *l de !cido sul-.rico


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concentrado r!+ida*ente a la *ezcla$ Lue"o los tu)os de ensayo se dean enre+oso durante 10 *in/ se a"itan durante >0 se"undos y se colocan

durante 20 *in en un )ao de a"ua a te*+eratura a*)iente +ara eldesarrollo de color$ El )lanco y la soluci4n +atr4n se +re+aran con-or*e al+rocedi*iento anterior*ente descrito/ utilizando el car)ohidrato de inter3s$5inal*ente se lle,a a una celda donde se de+osita en el es+ectro-ot4*etro+ara +ro"ra*ar la lon"itud de onda a J0 n* y se +rocede a leer laa)sor)ancia M$ DuBois/ N$ illes/ G$ 7a*ilton/ P$ Re)ers y 5$ S*ith/ 1J?;$

Pre+aracion de la cur,a +atron

Se +rocede a deter*inar las di-erentes concentraciones del car)ohidrato+artiendo de 0$01 ue indica 0$1 "ra*os en 1000 *l de a"ua$Posterior*ente se to*an al8cuotas de 0$1 0$2 0$> y se co*+leta a ,olu*en

+ara 1$0 *l con a"ua destilada$ Por .lti*o se aade el -enol y el !cidosul-.rico si"uiendo la *etodolo"8a anterior/ +ara ser le8das en eles+ectro-ot4*etro R$ Matisse/ 5$M$ Schne+el y $ Steiner/ 1JJ2;$

'a)la 1: Pre+aracion de las soluciones +atrones +ara ela)oraruna cur,a +atron$

&de

+atr4ndel

az.car 0$1a"ua*l;

-enol

72SO*l;

Concentraci4n A)sor)anci

1 0$1 0$J 1$0 $0 10 QK*l 6

2 0$2 0$I 1$0 $0 6 6> 0$> 0$ 1$0 $0 6 6 0$ 0$? 1$0 $0 6 6 0$ 0$ 1$0 $0 6 6? 0$? 0$ 1$0 $0 6 6 0$ 0$> 1$0 $0 6 6I 0$I 0$2 1$0 $0 6 6

)lanco 0$J 0$1 1$0 $0 6 6

5uente: An!lisis de ali*entos$ 2da edici4n/ Editorial Acri)a S$A ara"oza Es+aa$

Se deter*ina la concentraci4n *olar del car)ohidrato +atr4n si"uiendo lasi"uiente relaci4n: Entonces: 1000 *l 0$1 "ra*os de

az.car

0$1 *l

0$1


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Para leer los resultados de la *uestra a analizar/ es necesario contruir unacur,a de cali)racion o cur,a +atron a di-erentes concentraciones con el

car)ohidrato de interes disacaridos y *onosacaridos; +ara deter*inar laa)sor)ancia$ Para cali)rar el es+ectro-oto*etro se +rocede a u)icar el )lancoue se tiene +ro,isto en la celda/ austandolo al 100 de trans*itancia y 0/000de a)sor)ancia$ (na ,ez o)tenida la a)sor,ancia de cada concentracion/ se"ra9ca so)re e


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5(&DAME&'O

En disolucion alcalina el azucar se hidroliza +roduciendo un co*+uesto ue sereduce a un "ru+o nitro del D&S/ +ara dar el +roducto *onoa*inocorres+ondiente$ Esta reaccion da un +roducto colorido en solucion alcalinaSO('7A'E/ D$A$'/ 1JJ1;$ La reaccion ue se lle,a a ca)o es la si"uiente:

%*a"en 1: Reaccion de reduccion del Acidodinitrosalicilico$

5uente: &ielsen/ 200>

ME'ODOLO%A

Pre+aracion del reacti,o D&S

Se +re+ara se".n el *etodo +ro+uesto +or Cou"hlan y Moloney$ Se aade 10 "de !cido dinitrosalic8lico D&S; y >00 " de tartrato de sodio y +otasio sal deRochelle; a I00 *l de &aO70/ & y se calienta sua,e*ente +ara disol,er los reacti,os$ El ,olu*en seco*+leta hasta 1/0 L cona"ua destilada MP Cou"hlan/ APMoloney/ 1JII;$

Pre+aracion de la cur,a +atron

Se i*+le*enta el *is*o *etodo +ara realizar la cur,a +atron/ co*o sedescri)io en el *etodo -enol6sul-urico$ E*+lendo una solucion +atron de"lucosa con una concentracion de 1$0 "KL/ +ara la cual se disuel,e 0$1 "ra*os

de "lucosa en J0 *l de a"ua y se lle,a a ,olu*en a 100 *l$ Esta solucion


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+atron se +re+ara a di-entes concentraciones adicionando a cada tu)o 1 *ldel reacti,o


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de D&S con a"itacion constante$ Posterior*ente se lle,a a )ao *aria durante1 *inutos se dea en-riar y se aade a"ua destilada hasta co*+letar el

,olu*en res+ecti,o$ Se deter*ina la a)sor)ancia de cada tu)o a n* en eles+ectro-oto*etro (@$

Pre+aracion de la *uestra

Se to*a 1 *l de la solucion acuosa de la *uestra/ ense"uida se adiciona 1*ldel reacti,o de D&S y se calienta +or 1 *inutos en )ao *aria$ Se deaen-riar y se diluyen con 10 *l de a"ua destilada$ Se +rocede a leer laa)sor)ancia unto con el )lanco a la *is*a lon"itud de onda ue las*uestras +ara la cur,a +atron$

RES(L'ADO

S+ara realizar la cur,a +atron se "ra9ca concentracion en ++* de la "lucosa ,sa)sor)ancia de las *uestras diluidas a di-erentes concentraciones$

%*a"en 2$ Cru,a +atron +orEs+ectro-oto*etria$

5uente: Deter*inaci4n de azucares reductores +or la t3cnica de Miller$htt+s:KKes$scri)d$co*KdocK?21>?JKDE'ERM%&AC%O&6DE6A(CARES6RED(C'ORES6POR6LA6'EC&%CA6DE6M%LLER

Para deter*inar la concetracion de azucares reductores en la *uestra sea+lica el *is*o *etodo *ate*atico con el -enol6sul9rico; utilizando laecuacion lineal de la cur,a +atron$ 'a*)ien se +uede e*+lear una cur,a decali)racion +ara azucares reductores co*o la celo)iosa u otro ti+o de azucar+ara deter*inar su res+ecti,a a)sor)ancia y asi su concentracion$


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2 $ > D E ' E R M % & A C % O & D E A ( C A R E S P O R E L M E ' O D OO P ' % C O D E

P O L A R % M E ' R % A%&'ROD(CC%O&

La +olari*etria es una tecnica no destructi,a )asada en la *edicion dela rotacion o+tica +roducida so)re un haz de luz +olarizada al +asar +or unasustancia o+tica*ente acti,a$ La acti,idad o+tica rotatoria de una sustanciatiene su ori"en en la asi*etria estructural de los ato*os de car)ono/nitro"eno/ -os-oro o azu-re en la *olecula/ lo cual es conocido co*o uiralidad$La uiralidad se descri)e co*o la i*a"en en un es+eo de una *olecula lacual no +uede su+or+onerse so)re ella *is*a$

5(&DAME&'O

Se coloca un tu)o de *uestra ue contiene un liuido en solucion/ entre dosele*entos +olarizantes$ El +ri*er ele*ento +olarizador; +olariza la luz antesde ue esta +ase a tra,es de la *uestra$ El se"undo ele*ento analizador;+uede "irarse +ara contrarrestar cualuier rotacion +or la *uestra y +ortanto/ localiza la +osicion an"ular resultante del +lano de la luz/ y +or tanto lacantidad de rotacion causada +or la *uestra/ donde se e


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5uente: htt + s :KK es$sc ri)d$c o *Kd o cKI J I ?2 1 K A n a lis is 6+ola ri* et r ic o$
https://es.scribd.com/doc/89862717/Analisis-polarimetricohttps://es.scribd.com/doc/89862717/Analisis-polarimetricohttps://es.scribd.com/doc/89862717/Analisis-polarimetricohttps://es.scribd.com/doc/89862717/Analisis-polarimetricohttps://es.scribd.com/doc/89862717/Analisis-polarimetricohttps://es.scribd.com/doc/89862717/Analisis-polarimetricohttps://es.scribd.com/doc/89862717/Analisis-polarimetricohttps://es.scribd.com/doc/89862717/Analisis-polarimetricohttps://es.scribd.com/doc/89862717/Analisis-polarimetricohttps://es.scribd.com/doc/89862717/Analisis-polarimetrico


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Cada sustancia o+tica*ente acti,a tiene su rotacion es+eci-ica/deter*inada +or la si"uiente ecuacion:

TU V t/W; Ut/W; K c %

Donde:

TUV rotacion es+eci-ica a una deter*inada sustancia

U rotacion o+tica ,iene deter*inada +or la estructura;

c concentracion

% +aso o+tico a tra,es de la

*uestra t te*+eratura

Wlon"itud de onda

%*a"en $Esue*a de un +olari*etro

5uente: 'EC&%CAXA$/ Manual de la)oratorio +ara el an!lisis azucarero 'ecnicaa$ 1JI?$

1 6 Entrada de luz de &a

2 6 Lente de ilu*inaci4n

> 6 5iltro de luz

6 Polarizador


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6Placa

? 6 Cilindro conteniendo la soluci4na *edir

6Analizador

I 6 O)eti,o +ara elen-oue

J 6 Ocular +ara,isualizaci4n$

10 6

Lu+a

11 6 Panel delectura

12 6 'ornillo +ara laescala

ME'ODOLO%A

Se to*an 1> "ra*os de azucar y se disuel,en en 0 *l de a"ua en un

,aso +reci+itado en constante a"itacion/ lue"o se tras+asa a un *atraz yse enraza a 0 *l con a"ua destilada$ Posterior*ente se ,erte elcontenido a un erlen*eyer y se aade *l acido concentrado$ Se +one a)ao *aria de a 1 *inutos$ Se dea en-riar la solucion y se +rocede aa"re"arla en el tu)o +olari*etrico hasta llenarlo co*+leta*ente C7E& C$ P/

Ga*es/ 1JJ?;$ Se re"istra la lectura del +olari*etro una ,ez se esta)iliza$

RES(L'ADOS

Se deter*ina la concentracion del azucar se".n la ecuacion y el an"ulo derotacion/ unto con la te*+eratura al *o*ento de la lectura con el eui+o:

TU V t/W; U t/W; K c %

la concentracion del azucar se e


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La 7PLC o cro*ato"ra-ia liuida de alta resolucion es una tecnicacro*ato"ra-ica usada +ara se+arar co*+onentes de una *uestra ue se-raccionan entre una -ase *o,il liuida y una -ase estacionaria solidaco*+uesta +or +articulas *uy -inas contenidas en una colu*na/ y donde seutiliza una +resion *uy ele,ada +ara -orzar el +aso del disol,ente a tra,es deella/ consi"uiendo asi se+araciones de "ran resolucion/ +er*itiendo suidenti9cacion y cuanti9cacion$ La cro*ato"ra-8a l8uida de alta resoluci4n tiene

,entaas en el an!lisis de los az.cares de)ido a su


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"ran solu)ilidad en a"ua y su idoneidad +ara la se+araci4n de es+ecies no,ol!tiles o ter*ol!)ilesChicharro/ Manuel

200;$ 5(&DAME&'O

La *uestra se introduce en +eueos ,olu*enes a la corriente de la -ase*o,il )o*)eada conalta +resion a una colu*na rellena de -ase estacionaria y alli el analito seretarda +re+arandose +or *edio de interacciones ui*icas con la -aseestacionaria *ientras atra,iesa la colu*na$ El retardo se conoce co*o tie*+ode retencion/ unico +ara cada analito$

Para la se+aracion de car)ohidratos co*o sacarosa/ "lucosa y -ructosa se

utiliza una colu*na de se+aracion rellena de una resina de interca*)iocationico con )ase calcica/ ue e


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Sacarosa rado anal8tico lucosa rado anal8tico 5ructosa rado anal8tico


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ED'A C!lcico; rado anal8tico

ME'ODOLO%A

Pre+aracion de la -ase *o,il

Se +re+aran 1000 *l de soluci4n de ED'A Sal C!lcica; de 0 ++*/ se -iltra+or *e*)rana de0$ Q* y se des"asi-ica$

Pre+aracion de estandares de cali)racion e


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del disol,ente y +or lo tanto dando un ruido insi"ni-icante$ (na ,elocidad de-luo +resi4n; del siste*a del aire a > )ar y una "anancia de +ro+orcionaron una )uena sensi)ilidad y una adecuada relaci4n seal6ruidoLuciana C$ &o"ueira 200;$

C!lculos

C&lc'lo el Po!centa(e Saca!o)a* +!'cto)a ,Gl'co)a #o! HPLC

El inte"rador su*inistra +orcentaes de !reas y alturas con sucorres+ondiente tie*+o de retenci4n ue se relacionan con las !reas de losest!ndares de cali)raci4n e


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Area Dada +or el inte"rador +ara el est!ndar deCali)raci4n de lucosaConcentraci4n ra*os e


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C&lc'lo el #o!centa(e e +!'cto)a

en la $'e)t!aSe +rocede i"ual ue +ara el c!lculo del +orcentae de Sacarosa y "lucosa/ seidenti9ca el !rea de la -ructosa corres+ondiente a un tie*+o de eluci4n dea+ro


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KL


27/50

La -i"ura anterior re+resenta el *3todo est!ndar e


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000 y 1>00 c*61; se suelen o)ser,ar una serie de )andas de a)sorci4n+ro,ocadas +or las ,i)raciones entre .nica*ente dos !to*os de la *ol3cula$Estas ,i)raciones deri,an de "ru+os ue contienen hidr4"eno o de "ru+os condo)les o tri+les enlaces aislados$ &aa*oto N$/ 1JJ;$


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'a)la >$ %nter,alo de -recuencia de las )andas co*o *edidas est!ndar

%nter,alo de

-recuencia Enlace 'i+o de ,i)raci4n>?006>200 O67 'ensi4

>006>200 &67 'ensi4

>00062I00 C67 'ensi4

1?006100 O67 5le


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sinteriza y -or*a una ta)leta trans+arente ue se ase*ea a un cristal$ Alusar


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esta t3cnica/ se *ezcla a -ondo un *ili"ra*o o *enos de la *uestra-ina*ente +ul,erizada/ con a+ro00 *" de +ol,o de NBr$La *ezcla se +uede realizar con un *ortero y su *ano o en un +eueo*olino de )olas$ Posterior*ente se +resiona la *ezcla en un troueles+ecial entre 00 y 1000 "Kc*2 hasta o)tener un disco trans+arente$ Seo)tienen *eores resultados si el disco se +re+ara a ,ac8o +ara eli*inar elaire ocluido$ A continuaci4n/ el disco se coloca en la trayectoria del haz delinstru*ento +ara su e0 y 1?0 c*61 de)idas a la hu*edada)sor)ida$

%*a"en ?$ 'rouel +ara -a)ricar discos uni-or*e conre+roduci)ilidad

An!lisiscuantitati,o

Para el an!lisis cuantitati,o en el caso del %R se utiliza la cantidad deradiaci4n electro*a"n3tica a)sor)ida/ y el +ar!*etro a *edir es el cocienteentre la intensidad de la radiaci4n de una lon"itud de onda deter*inada;antes y des+u3s de atra,esar la *uestra$ La ley de Beer descri)e la relaci4nentre esta *a"nitud deter*inada e


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recta de cali)rado$ La concentraci4n de la *uestra +ro)le*a se hallar!en esta recta de cali)rado a +artir del dato e


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"elatinizada de ali*ento seco/ desen"rasado se di"iere enzi*!tica*ente conal-a6a*ilasa/ a*ilo"lucosida y +roteasa +ara hidrolizar el al*id4n y la +rote8na$El contenido total


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de la -i)ra de la *uestra se deter*ina a"re"ando etanol al J a la soluci4n+ara +reci+itar toda la -i)ra$ La soluci4n entonces se -iltra/ se recu+era/ se seca

y se +esa/ el residuo se re+orta co*o -i)ra$ Prosy et al/ 1JI/ Prosy et al/1JI;

5(&DAME&'O

Muestras en du+licado de ali*entos secos y des"rasados son "elatinizados cona Y a*ilasa t3r*ica*ente esta)le y lue"o di"erida enzi*!tica*ente con+roteasa y a*ilo"lucosidasa +ara re*o,er la +rote8na y el al*id4n$ La -i)radiet3tica solu)le es +reci+itada +or la adici4n de etanol/ el residuo total se

-iltra/ se la,a/ se seca y se +esa$ En el residuo en du+licado se deter*ina+rote8na/ y en el otro cenizas O--icial Methods o- Analysis$ A$O$A$C 1JJ0;$

5i)ra diet3tica total Peso del residuo 6 Peso+rote8na = cenizas;$

ME'ODOLO%A

Correr un )lanco a lo lar"o de toda ladeter*inaci4n$

Pesar +or 1" de *uestra e0 *inutos con a"itaci4n continua$

En-riar a te*+eratura a*)iente/ adicionar 10 *L de 7CL 0$>2&$ Austarel +7 a $06 $?/ adicionar 0$1*L de a*ilo"lucosidasa/ incu)ar a ?0C +or>0 *inutos con a"itaci4n continua$ Adicionar 2I0 *L de etanol J+recalentado a ?0C *edir el ,olu*en antes de calentar;$ Dear en re+oso 1 h$Pesar el crisol conteniendo la celita/ hu*edecer y redistri)uir la ca*a de celitacon etanol I$ A+licar succi4n$

Mantener la succi4n y cuantitati,a*ente trans-erir el +reci+itado de ladi"esti4n enzi*!tica$ La,ar el residuo con > +orciones de 20 *L de etanolI/ la,ar con 2 +orciones de 10 *L de etanol J/ la,ar con 2 +orcionesde 10 *L de acetona/ si se -or*a una -or*a una "o*a/ *o,er con la es+!tula

+ara *eorar la -iltraci4n


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Secar el crisol conteniendo el residuo toda lanoche a 0C


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En-riar en desecador y +esar

Restar el +eso del crisol con la celita +ara conocer el +eso del residuo

RES(L'ADOS

C!lculo de 9)ra diet3tica total:

5D' T *asa del residuo 6 P 6 C 6 B;K *asa de la *uestra;V < 100

Donde:

6 * *asa de la *uestra +ro*edio de la *asa de 2 *uestras *";$

6 *1 *asa del residuo +ro*edio de las *asas de las *uestrasdeter*inadas en du+licado

*";$6 P y C *asa *"; de +rote8na y cenizas/ res+ecti,a*ente en los residuos de

las *uestras$ %n-or*ar el de -i)ra al 0/1 / so)re la )ase de la *uestra

ori"inal considerando ue ha sidodes"rasada en el caso de contener *!s de 10 de "rasa$

>$ ME'ODOS C(AL%'A'%@OS> $ 1 P R ( E B A D E M O L % S C 7

Es la +rue)a es+ec8-ica +ara deter*inar la +resencia de car)ohidratos en una*uestra/ al deshidratar el "l.cido *onosac!ridos6alta reacci4n y disac!ridos/+olisac!ridos6)aa reacci4n; -or*a 5ur-ural este al reaccionar con U6&a-tol+roduce un co*+leo de color *orado Condensaci4n del 5ur-ual; Fuesada/200 A*alesh/ Et$Al$/ 200?;$

%*a"en I$ Reacci4n u8*ica en la Prue)ade Molisch$

5uente: 5uente: 7ar+erColle"e n$d$;$


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M3todo: se colocan 162 *ililitros *l; de una soluci4n ]*uestra^ en un tu)o deensayo/ se aaden dos "otas de reacti,o de Molisch una soluci4n de U6na+thol

en etanol al J;$ se ,ierte lue"o lenta*ente +or la +ared del tu)o Fuesada/200; 162 *l de !cido sul-.rico concentrado de 7ar+ercolle"e/ n$d$;$

Resultados: la -or*aci4n de una ca+a inter*edia de color Pur+ura es indicati,ode la +resencia de -ur-ural l.cido deshidratado; condensados el tie*+o uede*ore la reacci4n es indicati,o del n.*ero de car)onos ue ten"a el "l.cido/as8/ una +entosa c; tiene una alta reacci4n y +or el contrario una he

*inutos$ Aadir 10 "otas de la soluci4n de hidratos de car)ono a ensayar/*ezclar )ien/ y colocan de nue,o en el )ao de a"ua hir,iendo durante *inutos adicionales (ni,ersidad &acional/ n$d$ 5irdouse y Ala*/ 2011;$ (nca*)io de color de azul a ,erde a roo ladrillo a*arillo y -inal*ente Cu2O;indica ue el hidrato de car)ono es un az.car reductor$ La ,elocidad dereacci4n es *uy i*+ortante$ La -ructosa reacciona *uy r!+ida*ente/ "lucosa y"alactosa *!s lenta*ente$ %ncluso el al*id4n y la celulosa dar!n resultadosd3)iles si la soluci4n se calienta a*+lia*ente (&%@ERS%DAD &AC%O&AL/ n$d$;$

Resultados: la reacci4n +ositi,a es una coloraci4n ue ,a desde ,erde/ a*arillo/narana y roizo/ el "rado de coloraci4n y el tono radica en la concentraci4n de

co)re o


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> $ > P R ( E B A D E L ( O L

La interacci4n del yodo o yodo +ot!sico con el al*id4n -or*a coloracionesazules oscuras/ de)ido a la ocu+aci4n de los es+acios li)res del "l.cido/ este esun "l.cido alterado/ al cual/ sus +ro+iedades -8sicas son *odi-icadas/ co*o lano a)sorci4n lu*8nica

M3todo: se to*an 2 *l de la soluci4n de *uestra/ se colocan en un tu)o deensayo se a"re"a dos "otas de lu"ol y 1 *l de a"ua 7ARPER COLLEE/ n$d$;o a"re"ar 1 *l de reacti,o +ara un +eso de *uestra de 100 *"r irish/ Et$Al$/200J;$

Resultados: la -or*aci4n de un co*+leo azul oscuro/ de)ido a la adhesi4n delcolorante a la *ol3cula de az.car$

%*a"en 10$ Resultados

ne"ati,os de la +rue)a deLu"ol

5uente: 7ARPER COLLEE/n$d$

%*a"en 11$ Resultado+ositi,o de la +rue)a de Lu"ol

5uente: 7ARPER COLLEE/ n$d$

> $ P R ( E B A D E B % A L

Esta +rue)a detecta las +entosas$ El reacti,o deshidrata las +entosas-or*ando -ur-uralderi,ados de las +entosas;$ Estos deri,ados de las +entosas ade*!sreaccionan con orcinol y los


39/50

iones de hierro +resentes en el test reacti,o/ "eneran +roductos de color azul7ARPER COLLEE/ n$d$;$

%*a"en 12$ Reacci4n de deshidrataci4n y-or*aci4n de -ur-ural$

5uente: 5uente: 7ar+erColle"e n$d$;$

M3todo: to*ar dos *l o 162 "otas Mahesh/ Muru"esh y Mohana/ 200?; deuna *uestra de soluci4n y colocarla en un tu)o$ 'o*ar dos *l del reacti,o deBial soluci4n de orcinol/ 7Cl y cloruro -3rrico; y adicionarlo en el tu)o$Entonces calentar la soluci4n lenta*ente con un *echero Bunsen o en)ao de Mar8a 7ARPER COLLEE/ n$d$;$ Se de)e calentar a ?0 Z C durante10 *inutos D8az/ Gorr8n yB!rcena;$

Resultados: es +ositi,o si se o)ser,a un deri,ado azulado$ Otros coloresindican ne"ati,o ,er i*a"en 1>;$ Las he$ Resultados

ne"ati,os de la +rue)a de

Bial


%*a"en 1$ Resultado+ositi,o de la +rue)a de Bial



40/50

> $ P R ( E B A D E S E L % H A & O 5 5

Esta +rue)a detecta cetosas he


41/50

> $ ? P R ( E B A D E B A R 5 O E D

Se utiliza +ara detectar *onosacaridos reductores en disoluci4n$ Los*onosacaridos reductores son o


42/50

> $ P R ( E B A D E 5 E 7 L % &

La +rue)a hace reduce el co)re Cu

==

; +or o


43/50

5uente: 5uente: 7ar+er Colle"e n$d$;$

$ B % B L % O R A 5 % A

1$ AMALES7/ Asa*anta Et$Al$ 200?;$ u* Odina6A &e 'a)let Binder$ E n :'rends in A++lied

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J$ irish/ Gani Et$ Al$ 200J;$ u*s and *ucila"es: ,ersatile e$

'ra)ao de "rado Modalidad +ractica e*+resarial$ (ni,iersidad tecnolo"ica
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Es+aa$h tt+s :KKes$s c ri)d$c o *Kd o cK 1I2 10 IK La) 6 0J 6M e tod o6 D e l6 5 e n o l6

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and (O Li)raries %nteracti,e Media rou+$ Ten lineaV (SA$ TCitado >06106

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'est

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Ten l8neaV$ 5or*ato PD5$ Tcitado el 1 de unio de 200V$ Dis+oni)le en

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'ru"o/ Se+araci4n y cuanti9caci4n de los hidratos de car)ono de la

cer,eza *ediante cro*ato"ra-8a l8uida de alta resoluci4n con detecci4n de

dis+ersi4n de luz e,a+orati,a/ Gournal o- Chro*ato"ra+hy A/ 'o*o 10?/

&.*ero 2/ 1I de -e)rero de 200/ +!"inas 20 6210/ %SS& 0021 hasta

J?>/

htt + :KKd 1V/ ++$ 0160?$ Dis+oni)le en:

htt+: KK $s cielo $o r "$ar Ks cielo $+h+scri+tsciartte


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>01I2010000100001_ln"es_nr*isom$ %SS& 1I16>01I$


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Documents

(740501481) Manualdemtodosgeneralesparadeterminacindecarbohidratos 141106162652 Conversion Gate02