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Actividad antioxidante total de la piel avellana
(Nocciola Piemonte IGP): Impacto de diferentes
condiciones de tostado
MonicaLocatelli *, Fabiano Travaglia, Jean Daniel Coisson, Aldo
Martelli, CarolineStevigny 1, Marco
Arlorio
Resumen
Las delgadas peris perma marrn (piel) que envuelve los granos de
avellanas se retira
generalmente despus del proceso de torrefaccin,que conduce un
subproducto fenlico rico.
Principal objetivo de este trabajo fue caracterizar el
antioxidante total la actividad de los extractos
fenlicos obtiene a partir de tostado '' NocciolaPiemonte IGP
"piel de avellanas.
Diferentes disolventes de extraccin (metanol, metanol
acidificado, etanol, etanol acidificado, y
acetona /protocolos de agua) y diferentes (extraccin y
disolvente asistida fro semi-automatizado
de extraccin de Soxhlet)fueron empleados. La influencia de
diferentes grados de tostado (180 _C
/ 10 min y 180 _C / 20 min) fue tambininvestigado. DPPH_ y ABTS_
+ mtodos de barrido de
radicales, iones ferrosos actividad de quelacin y la inhibicin
de la per oxidacin lipdica
investigado en este estudio demostrado propiedades antioxidantes
significativas para avellana
compuestos fenlicos de la piel. El mecanismo principal implicado
apareci la actividad
antirradical, estrictamente relacionados con el contenido
fenlico total (r = _0.8798 y _0.8285
para los ensayos de DPPH_ y ABTS_ +, respectivamente). La
acidificacin de extraccin de
solventes llevaron a una disminucin significativa de la
actividad anti radical, mientras que el
diferente tueste condiciones influidas significativamente la
actividad de quelacin y la inhibicin
de la per oxidacin lipdica, mostrando una mayor efectividad de
los extractos de piel de avellana
alta asadas. Por el contrario, la medida directa dela capacidad
antioxidante de la piel avellana
desgrasados revel mayores ABTS_ + propiedades de eliminacin de
mediano muestra asado.
1. Introduccin
En ciencia de los alimentos, los antioxidantes son muy
importantes, ya que actan en la
prevencin de la oxidacin de lpidos en los alimentos y la
disminucin de los efectos adversos
especies de reactivo (ROS: especies reactivas del oxgeno; RNS:
reactivaespecies de nitrgeno) en
las funciones fisiolgicas normales en los seres humanos (Huang,
Ou, y Prior, 2005).
Antioxidante obtenidos sintticamente, como BHA (butil
adohidroxianisol) y BHT (hidroxito
luenobutilado), son en gran parte utilizado en la industria
alimentaria y se incluyen en la dieta
humana. Sin embargo, en los ltimos aos se ha promovido el uso de
antioxidantes naturales
debido a las preocupaciones sobre la seguridad de los sintticos.
Diettico componentes,
incluyendo polifenoles, carotenoides y vitaminas Cy E, se
consideran efectivos antioxidantes tiles
en la prevencinde las enfermedades de estrs oxidativo y afines
(Kaur y Kapoor,2001; Moure et
al., 2001).
Ampliamente distribuido en el reino vegetal y abundante en
nuestra dieta, los polifenoles se
encuentran entre los ms estudiados sobre las clases de
antioxidantes.
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Fenlicos son los productos del metabolismo secundario en
plantas, proporcionando funciones
esenciales en la reproduccin y el crecimiento de las plantas,
actuando como mecanismos de
defensa contra agentes patgenos,parsitos y depredadores, as como
contribuir al colorde las
plantas (Liu, 2004). Adems de sus funciones en las plantas,
varios epidemiolgica investigaciones
clnicas demostraron que fenlicoantioxidantes presentes en los
cereales, las frutas y las verduras
son directorfactores que contribuyen a la disminucin de la
incidencia de variosenfermedades
crnicas y degenerativas (Shahidi, 2000).
Por todas estas razones, en los ltimos aos, varios estudios han
sido conducidos con el fin de
investigar la actividad antioxidante de Fito extractos obtenidos
a partir de fuentes vegetales.
Particularmente, agrcolay residuos industriales son considerados
como fuentes muy atractiva de
antioxidantes naturales (Moure et al., 2001). Los subproductos
de la uva (Vitisvinifera L.) de
procesamiento, tales como semillas y cscaras, son los ms fuentes
de antioxidantes estudiados y
prometedores (Shi, Yu, Pohorly, yKakuda, 2003). La extraccin y
la actividad antioxidante fenlico
decompuestos de otros materiales residuales, tales como cscara
de la manzana (Kimet al., 2005),
pulpa de manzana (Lu y Foo, 2000), cscara de naranja
dulce(Anagnostopoulou, Kefalas, Kokkalou,
Assimopoulou, y Papageorgiou,2005), alcachofa blanqueadas y
aguas de alcachofa
escaldado(Llorach, Espn, Toms-Barbern, y Ferreres, 2002), las
hojas ytallos de coliflores
(Llorach, Espin, Toms-Barbern, y Ferreres,2003), de oliva
residual de molienda (Mulinacci et al.,
2005), el cacao subproductos(Arlorio et al, 2008;. Azizah,
RuslawatiNik, y SweeTee, 1999)
ycscaras de frutos secos (cacahuetes, anacardos, avellanas,
almendras, pistachos,* Autor para la
correspondencia. Tel .: +39 0321375774; fax: +39 0321375621.
E-mail: [email protected] (M. Locatelli).
1 Direccin actual: Universidad Libre de Bruselas (ULB),
Instituto de Farmacia,Laboratorio de
Farmacognosia, Bromatologa y Nutricin Humana, CP 205/9, Bd
duTriunfo, Bruselas 1050, Blgica.
Avellana chilena, etc.) (Goli, Barzegar, y Sahari, 2005; Kamath
yRajini, 2007; Moure et al., 2000;
Shahidi, Alasalvar, y Liyana-Pathirana,2007; Wijeratne,
Abou-Zaid, y Shahidi, 2006; Yu, Ahmedna,Y
Goktepe, 2005) han sido tambin investigados. La presencia
depolifenoles en las capas exteriores
(pieles, cscaras y cscaras) de frutas, verdurasy semillas
(nueces) puede ofrecer proteccin contra
la oxidacinestrs: se sabe que los cascos juegan el papel
principal en la defensade las semillas de
la planta y, junto con fracciones de salvado, concentrarsela
mayora de los fenoles y taninos
(Shahidi y Naczk, 1995). Por otra parte,polifenoles desempean un
papel importante en el sabor
astringente, causandotpica de larga duracin arrugas,
encogimiento, spero, y sensacin de
sequedaden la cavidad oral (Stark, Bareuther, y Hofmann,
2005).
La actividad antioxidante de los frutos secos y sus productos
derivados, ha sido estudiada
previamente. Estos estudios han puesto de manifiesto que los
productos derivados de frutos
secosson fuentes ricas en antioxidantes naturales y
fenlicacompuestos. Entre los frutos secos, las
avellanas (Corylus avellana L.) son muyinteresante en ese rico
en fenoles y, en particular, las
proantocianidinas(Gu et al., 2003). Estudios recientes
identificaron tentativamente varioscidos
fenlicos en ambos ncleos de avellanas (Alasalvar, Karamac',
Amarowicz,Y Shahidi, 2006; Yurttas,
Schafer, y Warthesen, 2000) yavellana subproductos (piel,
cubierta de hojas verdes, cscara dura y
el rbolhoja) (Contini, Baccelloni, Massantini, y Anelli, 2008;
Shahidiet al., 2007). Estos trabajos
demostraron que la piel de avellana (o perisperma,o testa) es
una fuente rica y bajo costo de
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fenlicos naturalesantioxidantes. Ms recientemente, Alasalvar et
al. (2009) obtuvieron
dosfracciones de extractos fenlicos brutos de avellanas turcas
tombulla piel (compuestos
fenlicos de bajo peso molecular y taninos, respectivamente),que
muestra mayor actividad
antirradical / antioxidante para la fraccin tanino,seguido por
el extracto crudo y de peso
molecular bajo fenlicocompuestos. Sin embargo, el impacto de las
diferentes condiciones de
tostadotanto en la extraccin de fenoles y actividad antioxidante
tambin debea investigar,
especialmente teniendo en cuenta la formacin de Maillard
productos (melanoidinas) durante el
tostado.
El objetivo de este trabajo fue caracterizar el antioxidante
totalla actividad de los extractos
fenlicos obtiene a partir de tostado '' Nocciola PiemonteIGP
"avellanas piel, considerando
diferentes enfoques (gratisactividad de los radicales de
captacin, la quelacin de iones ferrosos
pro-oxidantes, inhibicin de la peroxidacin de lpidos).
Diferentes protocolos de
extraccin(extraccin fueron empleados fro solvente asistida y
semi-automatizado Extraccin de
Soxhlet) y la influencia de diferentes tostadoprocesos (grados
de media y alta para asar) se
investig.
Por ltimo, la capacidad antioxidante total de pieles de avellana
(desgrasadapolvos) se determin
usando un protocolo de medicin directa.
2. Materiales y mtodos
2.1. Muestras
Las muestras de pieles de avellana fueron amablemente
proporcionadas por el Dr. GiuseppeZeppa
(Universidad de Turn, Italia). Se obtuvieron pieles Avellana del
italiano '' Nocciola Piemonte IGP
"ncleos de avellanas (C. avellanaL.), a saber Tonda gentil del
eLanghe cultivar, cultivado slo
enreas especficas y de acuerdo con la disciplina de la produccin
dela indicacin geogrfica
protegida (IGP) '' Nocciola Piemonte".
Avellanas con cscara secos se tuestan en dos condiciones
diferentes:
180 _C durante 10 minutos (medio asar, MR) y 180 _C para 20 min
(alta tostado, HR), y avellana
pieles fueron recuperados despus de la separacin espontnea de
los granos despus del
tostado. TodosLas muestras se almacenaron bajo vaco y se
mantienen en la oscuridad a_20 _C
Hasta que se analizaron.
2.2. Productos Qumicos
Todos los reactivos y productos qumicos estndar - catequina
monohidrato,Trolox, monohidrato
de cido glico, cido cafeico, epicatequina, dihidratoquercetina,
hidroxianisolbutilado (BHA) y
disdicodihidrato de etilendiaminotetraacetato (Na2-EDTA))
utilizadopara la determinacin del
contenido de fenoles totales y la actividad anti radical fueron
adquiridos de Sigma-Aldrich (Miln,
Italia). Todos los productos qumicosy disolventes eran de nivel
de grado reactivo y comprar ya sea
de Sigma-Aldrich (Miln, Italia).
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2.3. Anlisis de la composicin proximal
Se determin el contenido de humedad de las muestras de piel de
avellanautilizando un termo
balanza Sartorius MA30 (Sartorius AG, Goettingen, Alemania).
Contenido de nitrgeno total y el
contenido total de protenas (conversinFactor: 6,25) se
obtuvieron segn el mtodo
Kjeldahlutilizando el sistema de Kjeltec I (FOSS Tecator,
Suecia). El contenido de cenizasse
determin en un horno de mufla segn la AOAC (1990)
procedimiento.
Fraccin lipdica se extrae de pieles de avellana planta (despus
de la molienda y las partculas de
tamizado tamao de
-
2.6. Actividad de barrido DPPH_
El DPPH (1,1-difenil-2-picrilhidrazil) radical de captacinensayo
se realiz de acuerdo con el
mtodo descrito por Locatelliet al. (2009). Las muestras estndar
y las molculas se disolvieron
enmetanol y diluido apropiadamente con el fin de obtener una
calibracincurva (intervalo de
concentracin de 1 a 20 lg mL_1). Antiradicalla actividad se
expres como porcentaje de inhibicin
(I%) y calculausando la siguiente ecuacin:
Los resultados se expresaron finalmente como dosis CE50
(antioxidante requierepara obtener una
inhibicin del 50%), calculado por regresin y anlisis.
2.7. ABTS_ + actividad de barrido
El catin radical ABTS (ABTS_ +) se realiz ensayo de depuracinde
acuerdo con el mtodo
descrito por Re et al. (1999). Muestrasy molculas estndar se
disolvieron en etanol ydiluido
apropiadamente con el fin de obtener una curva de calibracin
(concentracionesrango de 10 a 900
lgmL_1). Actividadanti radical se expres como porcentaje de
inhibicin (I%), como se describi
previamentepara el ensayo de DPPH_. Los resultados se expresaron
como EC50, calculanpor
anlisis de regresin lineal.
2.8. La actividad de quelacin (ferrozina mtodo)
Se realiz la determinacin de iones ferrosos actividad de
quelacin de acuerdo con el mtodo
descrito por Liyana-Pathirana y Shahidi (2005) con algunas
modificaciones. Brevemente, 500
LLmuestra o su disolvente relativa (control: agua para Na2-EDTA,
metanolpara los extractos de piel
de avellanas y otras molculas estndar),10 lL acuosa de FeCl2 2
mM, 35 lL de ferrozina 5 mM (3-
(2-piridil) -5,6-difenil-1,2,4-triazina-40400-disulfnico sal
sdica del cido)y se aadieron 2,5 ml de
etanol, se mezclan adecuadamente, y se dejanreposar durante 10
min. Se ley la absorbancia
inmediatamente a 562 nm, utilizando un Kontron UVIKON 930
espectrofotmetro (Kontron
Instruments, Miln, Italia). Las muestras se disolvieron y las
molculas estndaren metanol (agua
en el caso de Na2-EDTA) yapropiadamente diluido para obtener una
curva de calibracin. Debido a
la altaconcentraciones de extracto empleadas (comprendido entre
0,2 y 7 mg mL_1),absorbancia
de las soluciones en blanco (sin ferrozina) se midi a corregir
cualquier influencia debido al color
de los extractos. La quelacin actividad, medida como porcentaje
de inhibicin de la ferrozina-Fe2
+ complejo la formacin, se calcul utilizando la siguiente
ecuacin:
Los resultados se expresan como finalmente EC50, calculado por
linealanlisis de regresin.
-
2.9. La inhibicin de la peroxidacin lipdica (mtodo de tiocianato
frrico)
Se realiz la determinacin de la inhibicin de la peroxidacin
lipdica de acuerdo con el mtodo
de tiocianato frrico (FTC) inform por Zin, Hamid, Osman, y Saari
(2006), con algunas
modificaciones.
En primer lugar, 100 lL de cido linoleico se disolvieron en 4 ml
de EtOH, 8 mlde tampn fosfato
0,05 M (pH 7,0) y 3,9 ml de agua destilada.
Trescientos cincuenta micro litros de muestra o disolvente
(5%etanol metanlico, control) se
aadieron a 1,4 ml de la anteriormente solucin de cido linoleico
descrito. Esta mezcla se
mantuvo en un contenedor atornillado en la oscuridad y a una
temperatura de 50 _C;la oxidacin
acelerada de cido linoleico se midi despus de 24,48, 72 y 96 h
de tratamiento trmico. La
determinacin de la oxidacin degrado (como la formacin de
perxidos) se realiz segn el
mtodo de tiocianato frrico: 30 lL de la mezcla de reaccin se
aadido a 2910 lL de 75% de
etanol, tiocianato de amonio 30 lL del 30%tiocianatoy 30 lL de
cloruro ferroso 0,02 M en 3,5%
clorhdricocido. Las mezclas se agitaron y se exactamente despus
de 3 min la absorbanciase
midi a 500 nm, utilizando un espectrofotmetro Kontron UVIKON
930(Kontron Instruments,
Miln, Italia). Las muestras y los estndarmolculas se ensayaron a
tres concentraciones
diferentes (10,100, y 1000 lgmL_1). Los resultados se expresaron
como la inhibicin de los lpidos
porcentaje peroxidacin calculado utilizando la
siguienteecuacin:
Donde (t) y (0) indican que la absorcin de las muestras y lade
control se mide en el tiempo t (t =
24, 48, 72 y 96 h de trmicatratamiento) y en el tiempo cero
(antes de la puesta en marcha de la
oxidacinreaccin), respectivamente.
2.10. La medicin directa de la capacidad antioxidante total
(extintorenfoque)
La medicin directa de la capacidad antioxidante total de la
avellanala piel se obtuvo siguiendo el
procedimiento descrito por Serpen, Gokmen, Pellegrini y Fogliano
(2008). ABTS_ + reactivo
sepreparado como se describe y se diluy adicionalmente en una
mezcla de etanol:agua (50:50, v /
v) para obtener una absorbancia de 0,700 ) 0,020 a734 nm. Piel
Avellanas (polvos desgrasados)
fueron finamente molidas y se tamizaron (tamao de partculas
-
seguido de Tukey de '' honesto significativoDiferencia "de
prueba. Las diferencias se consideraron
significativas apMeOH / H +> Ac2O / H2O>EtOH / H
+>EtOH>MeOHsoxMR para la piel de avellana
(rango de 43,67% a 28,59%) y en el ordenAc2O / H2O>MeOH / H
+>EtOH / H
+>MeOHsox>MeOH>EtOHde HR piel avellana (rango de 42.65%
a 27.95%). Extraccinlos
rendimientos obtenidos para los extractos acetnicos acuosas
(38,54% y 42,65%para muestras de
RM y de RH, respectivamente) fueron superiores a lo reportadopor
Contini et al. (2008), que
obtuvo una extraccin de 32,6%producir empleando el mismo
disolvente, pero el uso de una
-
maceracin de largo plazomtodo de extraccin. Un estudio reciente
mostr que la acetona
acuosa(80:20 acetona / agua, v / v) era un disolvente ms
eficazde metanol acuoso (80:20 metanol
/ agua, v / v) para extraertaninos condensados de piel avellana
(Alasalvar et al., 2009).
Los otros disolventes utilizados en este trabajo (MeOH, MeOH / H
+, y EtOH / H +) no fueron
considerados anteriormente para la extraccin fenlicaa partir de
piel de avellana. Se puede
observar un orden diferente de disolventesdependiendo de las
muestras de tostado medio y alto
tostados: de hecho, diferentes tratamientos trmicos podran
inducir modificaciones enla
composicin qumica y la estructura celular de la matriz
original(Saklar, Ungan, y Katnas,
2003;.Ozdemir et al, 2001).
3.3. Determinacin del contenido de fenoles totales
Contenido de fenoles totales de piel avellana se muestra en la
Tabla 2; resultadosse expresan en
miligramos equivalentes de catequina (CE) por gramo de extracto.
La cantidad de compuestos
fenlicos rangos de 637,65 a 380,24 mg g_1 CE y 706,35 a 551,59
mg g_1 CE paraMuestras de RM
y de RH, respectivamente. El muy bajo contenido de
fenolesobtenido para la muestra asado a
medio usando metanol bajo agitacines presumiblemente debido a la
solubilidad incompleta
inesperadode este extracto en metanol. Por lo tanto, este valor
se considera subestimado.
En cuanto a la piel tanto de media y alta asado msdisolvente de
extraccin efectiva result etanol
contenido (fenoles totalescontenidoexpresado por gramo de
extracto); Sin embargo,
considerando los resultadossobre una base dw, se obtuvo el
contenido fenlico alto utilizandola
mezcla de acetona acuosa (181,51 y 190,88 mg g_1 CE depiel
avellana, dw para muestras de RM y
de recursos humanos, respectivamente). SignificativoNo se
observaron diferencias entre los
extractos. En general, se acidificdisolventes extraen cantidades
ms bajas de compuestos
fenlicos queno acidificados-uno (p 0,05). Resultados
obtenidos eneste trabajo son similares a los obtenidos por otros
investigadores que usan
-
diferentes disolventes y mtodo de extraccin. Alasalvar et al.
(2009) report686 y 701 mg g_1 CE
para extractos crudos obtenidos detres extracciones consecutivas
en 50 _C (cada uno de 30 min),
usando80:20 acetona / agua (v / v) y 80:20 metanol / agua (v /
v) como
disolvente,respectivamente. Shahidi et al. (2007) reportaron una
g_1 CE 577,7 mgcontenido
fenlico para la piel de avellana empleando 80/20 (v / v) de
etanol /mezcla de agua bajo
condiciones de reflujo en 80 _C; Contini et al.(2008) obtuvieron
499,7, 588,2 y 546,6 mg g_1 CE
para residuos de la pielde kernel asado entero utilizando
metanol acuoso (80/20, v / v),etanol
acuoso (80/20, v / v) y acetona acuosa (80/20, v /
v),respectivamente, despus de una larga
maceracin a temperatura ambiente. Diferenciasen los fenoles
totales de contenido podra ser
atribuida a diferentesdisolventes y mtodos de extraccin
utilizados, sino tambin a los diferentes
cultivares,origen geogrfico y la temporada de cosecha de las
muestras (todos estosparmetros
estn estrictamente relacionadas con la biosntesis de metabolitos
secundariostales como
compuestos fenlicos). En este trabajo, analizamos la piel
avellanaobtenido exclusivamente de ''
NocciolaPiemonte IGP "ncleos de avellanas,mientras que los
autores anteriormente citados
utilizan los subproductos obtenidosdel turco avellana Tombul
(Alasalvar et al, 2009;.Shahidiet de
2007 a partir de una mezcla de diferentes variedades (Tonda
italiano al.) oGentil Romana, Tonda di
Giffoni, Tonda gentil delleLanghe; Turco Tombul) (Contini et
al., 2008).
3.4. Determinacin de la actividad antioxidante de los extractos
de piel de avellana
Con el fin de comprender mejor las propiedades antioxidantes de
extractos fenlicos piel avellana,
se realizaron cuatro qumicas diferentes ensayos in vitro, basado
en diferente mecanismo
antioxidante.
Propiedades anti radicales se analizaron mediante DPPH_ y ABTS_
+barrido de ensayos, en que
estos mtodos muestran varias importantediferencias en su
respuesta a los antioxidantes y en su
manipulacin(Arnao, 2000); a continuacin, los iones ferrosos
actividad de quelacin y la
inhibicinde la oxidacin de lpidos (autooxidacin de sistema de
cido linoleico)
erandeterminado. Trolox(til y disponible como estndar
comercialcompuesto en la evaluacin de
las propiedades antioxidantes), BHA (una sintticaantioxidante
ampliamente utilizado por la
industria alimentaria), algunos fenlicocidos (cido glico y cido
cafeico) y algunos flavonoides
naturales(epicatequina y quercetina) (cualitativamente
identificado en avellanaextractos de piel,
los datos no mostraron) se ensayaron para su
antioxidantepropiedades como compuestos de
referencia.
3.4.1. Actividad de barrido DPPH_
DPPH_ es uno de los restos sintticos ms utilizados para
evaluarpropiedades antirradicales de
compuestos bioactivos y extractos de alimentos.
Es ms estable que los radicales naturales comunes (hidroxilo
yradicales superxido) y no se ve
afectado por ciertas reacciones secundarias,tales como la
quelacin de iones metlicos y la
inhibicin de la enzima. En este trabajo,Propiedades de
eliminacin DPPH_ se evaluaron las
pruebas de al menos seis diferentesconcentraciones para cada
extracto y experimentos que se
repitenal menos por triplicado. Los resultados se informaron
como la concentracin
requeridaobtenido a una inhibicin del radical 50% (EC50,
expresado como lgde extracto por
mililitro de disolvente; Tabla 2); mayor antiradicalactividad
corresponde a valores ms bajos de
-
EC50. Debido a la restringidagama de linealidad entre la
concentracin de antioxidante y
radicalinhibicin (I%), se calcularon los valores de EC50 sobre
la base de probitde regresin, de
acuerdo con el mtodo descrito por Locatelli et al.(2009). Como
ya se observ para el contenido
de fenoles totales, metanlicoextracto obtenido de MR piel
avellana mostraron la ms
bajaActividad anti radical DPPH (EC50: 10,11 lgmL_1), de
conformidadcon su solubilidad
incompleta en el disolvente de reaccin (metanol);as, la
actividad antirradical de esta muestra
tiene que considerados subestimado.Extractos etanlicos y
metanlicos se caracterizaron poraltas
propiedades de eliminacin de muestras de RM y de recursos
humanos, respectivamente.
Actividad antirradical DPPH vari desde 3,67 hasta 10,11 lgmL_1;
SRy HR actividad muestras no
fue significativamente diferente (p> 0,05),mientras
disolventes acidificados extractos eran menos
activos que los correspondientesno acidificados-uno (p 0,05),
mientras que la acidificacin de los disolventesllevado a
una disminucin significativa de la actividad antirradical (p
-
0,05, extractos parcialmente insolubles no incluidos). El
estudio deAlasalvar et al. (2009)
demostraron por acuosa de acetona y metanolextractos de piel de
avellana 6,33 y 6,36 mmol de
equivalentes de Troloxpor gramo de extracto crudo,
respectivamente. Shahidi et al.
(2007)obtenido para la piel de avellana extracto etanlico un
anin radical ABTS(ABTS__) actividad
de eliminacin de igual a 132,0 mg de equivalentes Troloxpor
gramo de extracto (TEAC); a la
misma concentracin del acuosaetanlico (80% de etanol) extracto
de piel marrn almendra
mostr una52.9 TEAC (Siriwardhana y Shahidi, 2002). Kamath y
Rajini(2007) reportaron que el
extracto etanlico de piel anacardo eraigualmente potente como
BHA en ABTS_ + barrido de
ensayo (CE50 de anacardoextracto de cscara de nuez: 1,30
lgmL_1).
-
3.4.3. Actividad quelacin
Formacin de Metal-mediada de radicales libres puede causar
variosmodificaciones a las bases de
ADN, peroxidacin lipdica intensificada ycambios en la
homeostasis del calcio y sulfhidrilo. Debido
la altareactividad, el hierro es uno de los ms importantes de
oxidacin de lpidos pro-
oxidantes,particularmente en su estado ferroso. As, los
quelantes eficaces Fe2 +puede ofrecer
una proteccin contra el dao oxidativo porinhibicin de la
produccin de ROS y la peroxidacin
lipdica (Liyana-PathiranaY Shahidi, 2007). En este trabajo, la
actividad de quelacin de hierro
extractos de piel de avellana se evalu utilizando el mtodo
ferrozina.
Al menos seis concentraciones diferentes para cada extracto se
probarony los experimentos se
repitieron al menos por triplicado. Los valores de
CE50,expresado como mg de extracto por
mililitro de disolvente, se calcularonpor anlisis de regresin
lineal; rango de linealidad entre
antioxidanteconcentracin y la actividad de quelacin (expresado
como porcentaje,CA%) se
verific por CA% valores de hasta 75 a 90%, en funcin de
diferentesmuestras analizadas.
La Tabla 4 muestra los resultados obtenidos midiendo la quelacin
ferrosola actividad de los
extractos de piel de avellana tostados. Es importanteresaltar
que no era posible evaluar la
actividad de lamuestras extradas con disolventes acidificados
(sus valores de absorbanciadado
como resultado ms alto que el control y as no se
consideran).
Si se compara con la actividad antirradical, la capacidad de
quelacin del hierro deextractos de piel
de avellana eran relativamente ms dbil, que van desde4,93 mg
mL_1 (MR acuosa extracto de
acetona) a 1,01 mg mL_1 (MRextracto metanlico) valores de EC50.
Por tanto la RM y la piel
avellana HR,metanol apareci el mejor disolvente de extraccin.
Adems, en contrastea su
solubilidad reducida, extracto metanlico de MR avellanapiel
mostr la mayor actividad quelante
del hierro (1.01 mg mL_1); ellaparecera que la fraccin insoluble
de este extracto
-
(presumiblementecompuestos polimricos) tiene una influencia
negativa en la quelacin
Propiedades del extracto total. En total, la actividad de
quelacin obtenersepara muestras de RM
y de recursos humanos fue significativamente diferente (p 0,05);
todas las otras molculasfueron ineficaces
en la concentracin de 7 mg mL_1. Etilendiaminotetraacticosal
disdica del cido (Na2-EDTA) fue
tambinprobado como control positivo, mostrando la potencia ms
alta quelante(EC50: 8,36
lgmL_1). Nuestros resultados estn de acuerdo con la
literatura;Kamath y Rajini (2007) informaron
de una mayor actividad de la quelacin con EDTAde extracto de
piel de anacardo (CE50: 6,00 mg
mL_1). Liyana-Pathirana y Shahidi (2005) revelaron para solucin
de EDTA 100 ppmuna actividad
de quelacin completa, mientras observ que Trolox no lo hizoiones
ferrosos quelato en absoluto.
Utilizando el mtodo tetramethylmurexide,Wijeratne et al. (2006)
obtuvieron un 96% de
quelacin de iones ferrosos paratanto quercetina (100 ppm) y el
extracto de piel de almendra
(quercetina 100 ppmequivalentes).
3.4.4. La inhibicin de la peroxidacin lipdica
El dao oxidativo de los lpidos ha sido reconocido de fundamental
importancia debido a
su numerosa biolgico y nutricional implicaciones (deterioro de
sabor y aroma de la
comida, la decadencia de cualidades nutricionales y de
seguridad, el dao celular
relacionado con la carcinognesis, el envejecimiento prematuro y
otras enfermedades)
(Kanner & Rosenthal,1992). Medicin de hidroperxidos de
lpidos es una parte esencial
de comprensin de los procesos de oxidacin de lpidos. Un
espectrofotomtrico
conveniente mtodo para medir hidroperxidos lipdicos es la
ferricthiocyanate
mtodo. Extractos de piel de avellana y estndar compuestos se
ensayaron a tres
concentraciones diferentes (10, 100 y 1000 lgmL_1) y su efecto
protector contra
hidroperxido generacin se monitoriz durante la oxidacin a 50 _C
(24, 48, 72 y 96 h). A
la concentracin de 10 lgmL_1 piel avellana extractos no
mostraron una inhibicin
significativa de la peroxidacin lipdica (datos no mostr). En
algunos casos, se observ
actividad pro-oxidante; Sin embargo, otros estudios ms
especficos y debe ser conducida
con el fin de evaluar las reales propiedades pro-oxidantes de
los extractos.
Las muestras analizadas en concentraciones de 100 y 1000 lgmL_1
reducidos la
formacin de complejos de tiocianato frrico, mostrando la
absorbancia valores
significativamente ms bajos que en el control (Fig. 1). La
actividad antioxidante,
expresada como porcentaje de inhibicin de la peroxidacin de
lpidos (IP%), aumento de
de una manera dependiente de la dosis y en funcin de la oxidacin
tiempo. De manera
general, se observ que la inhibicin de lpidos peroxidacin aument
con el tiempo de
oxidacin. Los valores de% IP obtenidas por RM y extractos de
recursos humanos (en
concentraciones 100 y 1000 lgmL_1, despus de 96 h de tratamiento
trmico) son
reportado en la Tabla 4. Tambin en este caso, la actividad
antioxidante de MR
extracto metanlico piel avellana tiene que ser considerado
subestimado.
Como ya se observ para la actividad de quelacin, muestras de
RRHH propiedades
antioxidantes significativamente mayores mostraron que los MR
(p
-
significativa y positiva en % Valores IP slo considerando la
concentracin 100 lgmL_1
(p
-
Pearson coeficiente (r) y los valores de probabilidad (p). Las
correlaciones fueron
considerados estadsticamente significativos para p
-
4. Conclusiones
Todos los mtodos empleados en este trabajo demostraron
significativa propiedades
antioxidantes de los extractos de piel de avellana; sin embargo,
el mecanismo principal
implicado apareci la actividad antirradical. En particular,
teniendo en cuenta la
eliminacin de radicales DPPH las concentraciones empleadas
fueron de un orden de
magnitud menor que la quelacin actividad, indicando propiedades
antirradicales ms
altas. La acidificacin de los disolventes de extraccin condujo a
una disminucin
significativa de actividad antirradical (tanto DPPH_ y ABTS_ +
ensayos), mientras que el
diferente condiciones de tostado aparecieron significativamente
influyen en la quelacin
quelacin la actividad y la inhibicin de la peroxidacin de
lpidos, que muestra mayor
efectividad para los extractos de alto tostado de la piel
avellana.
Por el contrario, Los resultados obtenidos por medida directa de
la antioxidante
actividad de pieles avellana desgrasados (mtodo extintor)
reveladas mayor ABTS_ +
propiedades de eliminacin para la muestra de mediano asado.
Concluyendo, la piel de avellana tostada puede ser considerado
un bajo costo fuente
natural de antioxidantes; sin embargo, siendo la actividad
global de los extractos depende
tanto de disolventes de extraccin y la grado de tostado, la
identificacin y cuantificacin
de fenlico (compuestos flavonoides, cidos fenlicos, y
proantocianidinas), as como las
melanoidinas formados durante el tostado, deben tienen que ser
realizado.
Reconocimiento
Este trabajo fue financiado por subvenciones de la
RegionePiemonte y FondazioneCariplo
(Proyecto Nutrial Red).
Referencias
