AGAR HIERRO KLIGLER

Equipo 7.

Martínez de León Víctor

Romero Monroy Luis Angel

Fundamento

• Es un medio de cultivo utilizado para la diferenciación de

enterobacterias en base a la fermentación de lactosa y

glucosa, además de la formación de ácido sulfhídrico.

• El medio se solidifica en forma inclinada permitiendo

tener dos cámaras de crecimiento: una aeróbica, el pico

de flauta y la otra anaeróbica, el fondo del tubo.

• La fermentación de azúcares acidifica el medio lo cual se

observa con el vire del rojo de fenol a amarillo que es el

indicador ácido-base incorporado. En caso de no haber

fermentación, el medio vira a rojo.

Fermentación de carbohidratos• La fermentación de glucosa cambia el medio a

amarillo, pero debido a su baja concentración (0.1%) esto sólo se observa en el fondo del tubo, mientras que la superficie cambia a rojo.

• Una vez consumida la glucosa, el microorganismo comienza a metabolizar aminoácidos liberando amoníaco, lo cual alcaliniza el medio, esto ocurre en la superficie.

• La fermentación de lactosa cambia el medio a amarillo y dado que su concentración es mayor (1%), la formación de ácido es suficiente para mantener el color amarillo tanto en el fondo como en la superficie del tubo.

Tipos de reacciones

producidas por bacterias

que crecen en agar hierro

de kligler:

A. Sin fermentación de

carbohidratos.

B. Fermentación de

glucosa

C. Fermentación de lactosa

Koneman, E. [Et al].2008. Koneman diagnógstico microbiológico. 6°

edición. Buenos Aires; Médica Panaméricana. Página 209

Formación de gas

• La formación de gas se observa por la presencia de

burbujas, fracturas o desplazamiento del agar.

• La producción de sulfuro de hidrógeno se debe a la

utilización del tiosulfato de sodio.

• El sulfuro de hidrógeno reacciona con el citrato férrico de

amonio formando sulfuro de hierro que se observan

como un precipitado negro.

Modo de empleo

• La siembra se realiza por picadura en el agar y estría en

la superficie inclinada.

• Se incuban de 18 a 24 horas a 37 °C en condiciones

aerobias

Composición

• Mezcla de Peptonas……………………………….20.0 g

• Cloruro de Sodio…………………………………….5.0 g

• Lactosa……………………………………………...10.0 g

• Glucosa..……………………………………………..1.0 g

• Tiosulfato de Sodio …………………………………0.5 g

• Citrato férrico de amonio...…..……………………..0.5 g

• Rojo de Fenol………………………………………..0.025 g

• Agar Bacteriológico……………………………..….15.0 g

• pH 7.4 ± 0.2

Resultados• Superficie roja (alcalina), fondo rojo (alcalino):

El microorganismo no fermenta ningún carbohidrato;

glucosa (-), lactosa (-)

• Superficie roja (alcalina), fondo amarillo (ácido):

El microorganismo solamente fermenta glucosa;

glucosa (+), lactosa (-)

• Superficie amarilla (ácida), fondo amarillo (ácido)

El microorganismo fermenta glucosa y lactosa;

Glucosa (+), lactosa (+)

•

Resultados con cepas control

Manual Básico de Microbiología cultimed.

Panreac Química S.A. España 2002 página 110

http://eltecnicodelaboratorio.blogspot.mx/

2010/05/agar-hierro-kliger.html

Consideraciones•

Referencias

• Koneman, E. [Et al].2008. Koneman diagnógsticomicrobiológico. 6° edición. Buenos Aires; Médica Panaméricana

• MacFaddin. 2003. Pruebas bioquímicas para la identifiación de bacterias de importancia clínica. 3°edición. Buenos Aires; Médica Panaméricana

• Manual Básico de Microbiología Cultimed. PanreacQuímica S.A. España 2002

• http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/kliglerhierroagar.htm

• http://eltecnicodelaboratorio.blogspot.mx/2010/05/agar-

hierro-kliger.html

• http://www.bd.com/europe/regulatory/Assets/IFU/US/L007

458%2807%29%280207%29_ES.pdf

• http://perso.wanadoo.es/microdominguez/a.htm

• http://www.mcd.com.mx/pdfs/agar_hierro_kliger.pdf