ANÁLISIS DE HPLC

El cromatógrafo de líquidos de iones está equipado con un detector UV-Vis Abs. – Variable Wave. @ 290 nm

El caudal es de aproximadamente 1ml por minuto

Cromatógrafo

Volúmenes iguales = 20uL

Registrar los cromatogramas Medir las respuestas de los picos.

Los parámetros que se estudiaron para evaluar la idoneidad del sistema fueron: a) Número de platos teóricos b) factor de asimetría c) el tiempo de retenciónd) Calibración de rango

El contenido de la fase móvil se filtró antes de su uso a través de filtro de membrana de 0,45 micras, se desgasifica con una esponja de helio durante 15 min. y se bombea desde los respectivos depósitos de disolvente a la columna a una velocidad de flujo de 1mL/min.

Fase móvil: Mezclar metanol y 0,01 M fosfato dihidrógeno de potasio (pH ajustado a 3,0 con ácido ortofosfórico) en proporción de 2:1 (V/V)

Solución estándar: Disolver 50mg de Meropenem, fue colocado en un matraz aforado de 100 ml, se disolvió en fase móvil para obtener una solución madre que contiene 500 ug/ml de meropenem. De ésta diluciones adecuadas se realizaron para obtener las concentraciones que van desde 0-150 ug/ml

Solución de prueba:

Disolver 50mg de Meropenem, fue colocado en un matraz aforado de 100 ml, se disolvió en fase móvil para obtener una solución madre que contiene 500 ug/ml de meropenem. De ésta diluciones adecuadas se realizaron para obtener las concentraciones que van desde 0-150 ug/ml

Solución estándar Solución de prueba

COLUMNA: Columna C18 kromosil con dimensiones (5μ, 250 mm x 4,6 mm)

CONDICIONES CROMATOGRÁFICAS

b) Productos químicos y reactivos:

Metanol para CLAR y agua, calidad ARdihidrógeno fosfato de potasio (0,01 M),Ácido ortofosfórico (0,2 M), cloruro férrico(0,003 M), 2,2 '- bipiridilo (0,01 M).

25°C

MEROPENEM

Gráfica: Absorbancia vs Tiempo de retención

MEROPENEM

Tiempo de Retención: 3.0 Minutos