AVANCES EN EL DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICO DE SEPSIS Dr. Marcelo Grijalva, M.D., Ph.D. 2013 2012 _______________________________________________________

AVANCES EN EL DIAGNOSTICO

MICROBIOLOGICO DE SEPSIS

Dr. Marcelo Grijalva, M.D., Ph.D.

20132012

_______________________________________________________INSTITUTO ECUATORIANO DE SEGURIDAD SOCIAL

HOSPITAL “CARLOS ANDRADE MARIN” SERVICIO DE LABORATORIO CLINICO

LABORATORIO DE DIAGNOSTICO MOLECULAR

MORBILIDAD Y MORTALIDAD

En EEUU hospitalizaciones por sepsis/septicemia (por 100.000 habitantes): 221 (2001), 377 (2008)

Riesgo de mortalidad a 5 años mayor al doble que controles en hospitalización

Mortalidad por sepsis severa (sepsis + disfunción orgánica) aprox. 30%

Ecuador (2011), 1375 reportes, mortalidad 35.4%




Overview




Microbiology

www.biosciences.bham.ac.uk




www.biografix.de













ESTRATEGIAS DIAGNOSTICAS

MARCADORES BIOLOGICOS

• PCT, CRP, IL-1β, IL-6, LPS-LBP, TREM-1

TECNICAS MICROBIOLOGICAS

• HEMOCULTIVO GOLD STANDARD• LIMITACIONES




MARCADORES BIOLOGICOS

• PCT: Varios años en uso, aprobado por FDA para riesgo en admisión en UCI, perfil cinético favorable.

• CRP: De uso común para screening de sepsis neonatal , baja especificidad para sepsis en adultos.










Metaanálisis HC vs multiplex PCR (23 estudios hasta el año 2013)




DIAGNOSTICO MOLECULAR DE SEPSIS - HCAM

• PCR en Tiempo Real multiplex multisonda + análisis Tm, capacidad cuantitativa para discriminación de posibles contaminantes.

• 25 patógenos en panel, cobertura 90% de patógenos causantes de bacteremia/fungemia.

• Laboratorio BSL -2• Norma de bioseguridad WHO 2010• Cabinas de bioseguridad Clase II, extracción robotizada

de ácidos nucleicos_______________________________________________________

INSTITUTO ECUATORIANO DE SEGURIDAD SOCIAL HOSPITAL “CARLOS ANDRADE MARIN”

SERVICIO DE LABORATORIO CLINICO LABORATORIO DE DIAGNOSTICO MOLECULAR

• SeptiFast MGRADE (Roche) en pacientes con sospecha de sepsis (2012-2013)

• 424 pacientes, procedencia cuidados intensivos• Positividad global: SF 38%, HC: 20%• Positividad GS compuesto: 45%• Concordancia (+/- y especie): 70.4%









• Aumento de sensibilidad analítica de ensayos moleculares – DNA genómico humano? CXXC finger protein 1 en cromatografía.

• Significado biológico de DNAemia• Cinética de DNAemia• Marcadores moleculares de resistencia

antimicrobiana?




DIAGNOSTICO MOLECULAR DE SEPSIS - PERSPECTIVAS

.

•“Omics”: PCR+ LC-MS, “transcriptomic profiling”.•Paneles de marcadores moleculares•Identificación de patógenos y evaluación de respuesta del huésped

DIAGNOSTICO MOLECULAR DE SEPSIS - PERSPECTIVAS




HOSPITAL CARLOS ANDRADE MARIN

• UCI • UCI Neonatal• UCI Pediatría

• Servicio de Infectología• Laboratorio de Bacteriología




ROCHE APPLIED SCIENCELABORATORIO DE BIOTECNOLOGIA MEDICA –

ESPEAREA DE MATEMATICAS - UCE

2013

2010

GRACIAS




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AVANCES EN EL DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICO DE SEPSIS Dr. Marcelo Grijalva, M.D., Ph.D. 2013 2012 _______________________________________________________