NORGENManuales para Bancos de Germoplasma No. 8Manual para el
Manejo de SemillasenBancos de GermoplasmaN. Kameswara Rao, Jean
Hanson, M. Ehsan Dulloo, Kakoli Ghosh, David Nowell y Michael
LarindeNPGSManuales para Bancos de Germoplasma No. 8Manual para
elManejo de Semillasen Bancos de GermoplasmaN. Kameswara Rao, Jean
Hanson, M. Ehsan Dulloo, Kakoli Ghosh, David Nowell y Michael
Larinde Bioversity International Via del Tre Denari 472a, 00057
Maccarese, Roma, Italia International Livestock Research Institute
(ILRI)P.O. Box 5689, Addis Abeba, Etiopa Organizacin de las
Naciones Unidas para la Alimentacin y la Agricultura (FAO)Via delle
Terme di Caracalla, 00100 Roma, ItaliaiiManuales para Bancos de
Germoplasma No. 8Bioversity International es una organizacin
internacional independiente, de carcter cientfico, que busca
contribuir al bienestar actual y futuro de la humanidad mejorando
la conservacin y el aprovechamiento de la agrobiodiversidad
enfincasybosques.Esunodelos15CentrosqueauspiciaelGrupoConsultivoparalaInvestigacinAgrcola
Internacional (GCIAI), una asociacin de miembros del sector pblico
y privado que apoya la ciencia para disminuir el hambre y la
pobreza, mejorar la alimentacin y la salud humana, y proteger el
medio ambiente. Bioversity tiene su sede principal en Maccarese,
cerca de Roma, Italia, y oficinas en ms de 20 pases. La organizacin
opera a travs
decuatroprogramas:DiversidadalServiciodelasComunidades;ComprensinyManejodelaBiodiversidad;
Asociaciones Colaborativas de Carcter Mundial; y Cultivos para
Mejorar Medios de
Vida.ElcarcterdeorganismointernacionaldeBioversityloconfiereelConveniodeCreacindelaorganizacin,que
a agosto de 2006 haba sido ratificado por los gobiernos de los
siguientes pases: Argelia, Australia, Blgica, Benin,
Bolivia,Brasil,BurkinaFaso,Camern,Chile,China,Congo,CostaRica,CostadeMarfil,Chipre,Dinamarca,
Ecuador, Egipto, Eslovaquia, Etiopa, Ghana, Grecia, Guinea, Hungra,
India, Indonesia, Irn, Israel, Italia, Jordania, Kenia, Malasia,
Mal, Mauritania, Marruecos, Noruega, Pakistn, Panam, Per, Polonia,
Portugal, Repblica Checa, Rumania, Rusia, Senegal, Sudn, Suiza,
Siria, Tnez, Turqua, Ucrania y Uganda.Los programas de investigacin
de Bioversity reciben apoyo financiero de ms de 150 donantes,
incluyendo gobiernos,
fundacionesprivadasyorganismosinternacionales.Informacinadicionalsobrelosdonantesylasactividadesde
investigacin de Bioversity aparece en los Informes Anuales de la
organizacin, disponibles en forma electrnica en la direccin
www.bioversityinternational.org, o en forma impresa en la direccin
[email protected] designaciones geogrficas
empleadas en esta publicacin al igual que la presentacin del
material no expresan en modo alguno opinin de Bioversity o del
GCIAI sobre el estatus legal de ningn pas, territorio, ciudad o
regin, ni acerca de sus autoridades o de la delimitacin de sus
fronteras. Asimismo, las opiniones expresadas son las de los
autores y no necesariamente reflejan los puntos de vista de estas
organizaciones.La mencin de alguna marca registrada se suministra
con fines informativos nicamente, no de apoyo al producto.Cita:
Rao, N.K., J. Hanson, M.E. Dulloo, K. Ghosh, D. Novell y M.
Larinde. 2007. Manual para el manejo de semillas en bancos de
germoplasma. Manuales para Bancos de Germoplasma No. 8. Bioversity
International, Roma, Italia.Publicado inicialmente como:Rao, N.K.,
J. Hanson, M.E. Dulloo, K. Ghosh, D. Novell and M. Larinde. 2006.
Manual of seed handling in genebanks. Handbooks for Genebanks No.
8. Bioversity International, Rome, Italy.ISBN 978-92-9043-757-4
(para la versin en espaol)ISBN 978-92-9043-740-6 (para la versin
original en ingls)Bioversity InternationalVia dei Tre Denari,
472/a00057 MaccareseRoma, Italia Bioversity International,
2007iiiManual para el Manejo de
SemillasiiiCONTENIDOAgradecimientosviA nuestros lectoresviiSocios
colaboradores en esta publicacinviiRevisores del manuscrito
originalxPrlogoxiPrefacioxiii1. Introduccin1 2. Adquisicin y
registro del germoplasma5 2.1 Adquisicin del germoplasma52.2
Registro del germoplasma143. Limpieza de las semillas22 4.
Determinacin del contenido de humedad y secado de las semillas31
4.1 Determinacin del contenido de humedad de las semillas314.2
Secado de las semillas405. Determinacin de la calidad de las
semillas565.1 Pruebas de viabilidad de las semillas565.2 Pruebas de
sanidad de las semillas855.3 Pruebas para verificar la introduccin
inadvertida de transgenes en las semillas916. Empaque y
almacenamiento de las semillas956.1 Empaque de las semillas956.2
Almacenamiento de las semillas1007. Distribucin del
germoplasma1078. Monitoreo y regeneracin del germoplasma1158.1
Monitoreo del germoplasma1158.2 Regeneracin del germoplasma121Anexo
I: Polticas internacionales y marcos de trabajo que afectan el
acceso al germoplasma y el intercambio de germoplasma 132Anexo II:
Mtodos serolgicos para la deteccin de patgenos vegetales135Anexo
III: Glosario137Anexo IV: Equipo especializado para bancos de
germoplasma de semillas 146Anexo V: Acrnimos164ivManuales para
Bancos de Germoplasma No. 8 DIAGRAMAS DE FLUJODiagrama de Flujo
1.1. Secuencia general de las operaciones de un banco de
germoplasma de semillas3Diagrama de Flujo 2.1. Registro del
germoplasma15Diagrama de Flujo 3.1. Limpieza de las
semillas23Diagrama de Flujo 4.1. Determinacin del contenido de
humedad de las semillas32Diagrama de Flujo 4.2. Secado de las
semillas41Diagrama de Flujo 4.3. Protocolo para determinar el
comportamiento de las semillasen almacenamiento47Diagrama de Flujo
5.1. Pruebas de germinacin58Diagrama de Flujo 6.1. Empaque de las
semillas96Diagrama de Flujo 7.1. Distribucin del
germoplasma108Diagrama de Flujo 8.1. Monitoreo de la
viabilidad117CUADROSCuadro 4.1.Mtodo recomendado para determinar la
humedad de cultivos y especies forrajeras importantes (ISTA,
2005)34Cuadro 4.2.Especies que requieren maceracin (ISTA,
2005)35Cuadro 4.3.Registro y determinacin del contenido de humedad
de las semillas36Cuadro 4.4.Contenidos de humedad en equilibrio
(aproximados) de algunas semillas de cultivos comunes, a
25C43Cuadro 5.1.Normas para realizar pruebas de germinacin en las
especies cultivadas mscomunes60Cuadro 5.2. Modelo de hoja de datos
para registrar los resultados de la germinacin78Cuadro
5.3.Concentracin, temperaturas y perodo de tincin con solucin de
tetrazolio 83Cuadro 6.1. Modelo de cuadro para registrar informacin
sobre el empaque de las semillas99Cuadro 6.2. Temperatura de
almacenamiento y contenido de humedad sugeridos paracolecciones
activas 102Cuadro 8.1. Intervalo sugerido para monitorear la
germinacin de colecciones base o activas de semillas oleaginosas y
no oleaginosas118Cuadro 8.2.Umbral de porcentajes de germinacin
para la regeneracin de accesiones118Cuadro 8.3.Plan de prueba de
germinacin secuencial para una regeneracin estndarde 85%, cuando se
evalan semillas para germinacin en grupos de 40119Cuadro
8.4.Comportamiento reproductivo y mecanismos de control de la
polinizacin para la regeneracin de cultivos importantes130vManual
para el Manejo de SemillasFIGURASFigura 2.1. Extraccin de las
semillas de frutos carnosos9Figura 4.1. Isotermas de
humedad44Figura 4.2. Prediccin del tiempo de secado45Figura 5.1.
Prueba de germinacin sobre papel absorbente, en cajas Petri67Figura
5.2. Prueba de germinacin de semillas mediante el mtodo entre
papel69Figura 5.3. Prueba de germinacin de semillas en
arena71Figura 5.4. Anormalidades de plntula en arveja74Figura 5.5.
Anormalidades de plntula en man forrajero75Figura 5.6.
Anormalidades de plntula en trigo76Figura 5.7. Anormalidades de
plntula en cebolla77Figura 5.8. Escarificacin manual de la testa de
las semillas79Figura 5.9. Patrn de tincin despus de la prueba con
tetrazolio en semillas dicotiledneas84Figura 5.10.Patrn de tincin
despus de la prueba con tetrazolio en semillas
monocotiledneas85RECUADROSRecuadro 2.1. Unidad base para el
registro18Recuadro 4.1. Alternativas para el secado
inicial50Recuadro 5.1. Humidificacin de semillas secas59Recuadro
5.2. Defectos de plntulas clasificadas como anormales73viManuales
para Bancos de Germoplasma No. 8AGRADECIMIENTOSPara la versin
original en
inglsAgradecemosdemaneraespecialaT.vanHintum,L.deGroot,L.
Boukema,A.Borner,S.Linington,C.N.Nkhoma,L.M.Engle,N.
C.Altoveros,M.Mackey,A.W.Ebert,XiaorongHu,M.Wetzel,V.
Mahalakshmi,H.KamauyW.Maranduporsuvaliosarevisindel primer borrador
del manuscrito. Expresamos nuestro reconocimiento por la ayuda de
Teodardo Calles en la elaboracin de los diagramas
deflujo.DemaneraespecialagradecemoselauspiciodelCentro
TcnicodeCooperacinAgrcolayRural(CTA)yelapoyodelos
PasesBajosenlapublicacindeestemanual.Hacemostambin extensivos
nuestros agradecimientos a Tran Hong de la Universidad
deReadingporsuexpertaasesoraenalgunostemastcnicosde
estagua.TambinagradecemosatodoelpersonaldeBioversity
International,enespecialaAnnieHuie,porsucolaboracinenla
preparacindeestemanual,yaHopeTraficanti,porlaedicinde
idiomadelaversineningls.Asimismo,agradecemosaNicols
Muemaporlasilustraciones,yaElizabethGoldberg,Jefedela
UnidaddeApoyoeInvestigacinenDesarrollodeCapacidades
deBioversityInternational,porsuorientacineneldesarrollodel manual y
del mdulo de autoaprendizaje. Igualmente, agradecemos a Paul Neate
y a su grupo de trabajo, en particular a Patrizia Tazza
yFrancesFerraiuolo,poreldiseoyladiagramacindeesta publicacin.Para
la versin en espaolLa versin en espaol de este Manual fue posible
gracias al aporte econmico del Fondo Mundial para la Diversidad de
los Cultivos, la ReddeRecursosGenticosdeAmricadelNorte(NORGEN)yel
National Plant Germplasm System (NPGS) de los Estados
Unidos.SeagradeceaMarleniRamrez,DirectoraRegionaldeBioversity
InternationalparalasAmricas,porsugestinenlaconsecucin de los
fondos; a Victoria Eugenia Rengifo, Asistente de Programa de
Bioversity International, por el apoyo en la traduccin de los
textos al espaol; y a Nelly Manosalva, editora independiente, por
la revisin
inicialdelmanuscrito.MargaritaBaena,EspecialistadeBioversity
InternationalenDesarrollodeCapacidadeseInformacinPblica,
revisyeditlostextosenespaolycoordinlaproduccindel
manualenesteidiomaydelmdulodeautoaprendizajequelo acompaa.viiManual
para el Manejo de SemillasA NUESTROS
LECTORESLosManualesparaBancosdeGermoplasmapublicadospor
BioversityInternationaltienenporobjetoproporcionarinformacin
prcticaaloscuradoresyalpersonalquelaboraenbancosde
germoplasma.Conelfindefacilitarsuutilizacin,elargollado permite
mantenerlos abiertos sobre una mesa; de igual manera, las mrgenes
amplias brindan a los lectores un espacio para escribir sus
comentarios o anotaciones sobre el
texto.Bioversityagradeceasuslectoresenviarcomentariossobreel
contenido y el formato del manual, que servirn de base para futuras
revisiones.SOCIOS COLABORADORES EN ESTA PUBLICACINPara la versin en
inglsEl International Livestock Research Institute (ILRI) trabaja
donde se entrelazan los temas pecuarios y la pobreza, aportando
ciencia de alta calidad y creando capacidad institucional para
disminuir la pobreza y hacer el desarrollo sostenible. El ILRI es
una organizacin sin nimo de lucro con sede en Nairobi, Kenia, que
realiza investigaciones en frica,
Asia,AmricaLatinayelCaribe,ytieneoficinasenelsur,orientey
occidentedefrica;enelsuryelsuroestedeAsia;enChinayen Amrica
Central. Como uno de los 15 Centros del Grupo Consultivo
paralaInvestigacinAgrcolaInternacional(GCIAI),laestrategiadel
ILRIsecentraentresactividadesdelreapecuariaparacombatir
lapobreza:(1)protegerlosbienesdelapoblacindeescasos
recursos,(2)mejorarlaproductividaddelossistemaspecuariosy
(3)incrementarlasoportunidadesdemercadoantelascambiantes demandas y
canales de un mercado que evoluciona rpidamente. El
portafoliodeinvestigacionesdelILRIcomprendetemasorientados hacia
cuatro problemticas: reconocer las oportunidades de desarrollo
einvestigacin;incrementarlasoportunidadesdemercado;utilizar
labiotecnologaparaprotegerlosbienespecuarios;ypoblacin, ganadera y
medio ambiente.LaOrganizacindelasNacionesUnidasparalaAlimentaciny
laAgricultura(FAO)lideraesfuerzosinternacionalesparacombatir
elhambre.Prestandosuapoyoapasestantodesarrolladoscomo
envasdedesarrollo,laFAOseconstituyeenunforoneutroenel
cualtodaslasnacionesserenenenigualdaddecondicionespara negociar
acuerdos y debatir polticas. La FAO es tambin una fuente
viiiManuales para Bancos de Germoplasma No.
8deconocimientoydeinformacin.LaFAOayudaalospasesen
desarrolloyentransicinamodernizarymejorarlasprcticas
agrcolas,forestalesypisciculturales,yaasegurarunabuena alimentacin
para todos. Desde su constitucin en 1945, la FAO ha
brindadoespecialatencinaldesarrollodelaszonasrurales,que
alberganel70%delapoblacinmundialagobiadaporelhambre
ylapobreza.LasactividadesdelaFAOcomprendencuatroreas principales:
hacer accesible la informacin; compartir conocimientos
especializadosenpolticas;proveerunlugardeencuentroparalas naciones;
y llevar conocimiento al
campo.ElCentroTcnicodeCooperacinAgrcolayRural(CTA)se
establecien1983bajolaConvencindeLomentreelGrupode Pases de frica,
el Caribe y el Pacfico y los pases miembros de la
UninEuropea.Desde2000,haoperadoenelmarcodelAcuerdo ACP-EC de
Cotonou. El CTA desarrolla y proporciona servicios para mejorar el
acceso a informacin sobre agricultura y desarrollo rural, y
fortalece la capacidad de los pases de frica, el Caribe y el
Pacfico para producir, adquirir, intercambiar y utilizar informacin
en esta rea. Los programas del CTA estn diseados para proporcionar
un amplio rangodeproductosyserviciosdeinformacinyelevarelnivelde
conciencia sobre fuentes de informacin relevantes; promover el uso
integradodecanalesdecomunicacinapropiadoseintensificarlos contactos
y el intercambio de informacin (particularmente entre los pases de
frica, el Caribe y el Pacfico); y desarrollar en estos pases
capacidadparagenerarymanejarinformacinagrcolayformular
estrategiasdemanejodeinformacinycomunicacin,incluyendo aquellas
relevantes para la ciencia y la tecnologa. El trabajo del CTA
incorpora nuevos desarrollos en metodologas y aspectos de alcance
transversal como el gnero y el capital social.Para la versin en
espaolEl Fondo Mundial para la Diversidad de los Cultivos tiene la
misin de asegurar la conservacin y disponibilidad de la diversidad
de los cultivosenelmundoparalograrlaseguridadalimentaria.Aunque
ladiversidaddeloscultivosesfundamentalparalucharcontra
elhambreyparaelfuturodelaagricultura,elfinanciamientoes incierto y
la diversidad se est perdiendo.El Fondo es un organismo
internacionalindependiente,establecidomedianteunaasociacin entre la
FAO y Bioversity International, a nombre del Grupo Consultivo
paralaInvestigacinAgrcolaInternacional(GCIAI).ElFondoes
elnicoorganismoanivelmundialquetrabajapararesolvereste
problema.Para mayor informacin, visite el sitio
www.croptrust.orgixManual para el Manejo de
SemillasNORGENeslaRedSubregionaldeRecursosFitogenticos,
queincluyeCanad,losEstadosUnidosyMxico,yoperaen
coordinacinybajoelauspiciodelProgramadeCooperacin
TcnicadelInstitutoInteramericanodeCooperacinenAgricultura
(IICA)paralaReginNorte(PROCINORTE).NORGENpromueve
lacomunicacinycolaboracinentreelpersonalinvolucradoen
elmanejodelossistemasnacionalesderecursosfitogenticos,
identificanecesidadesdecapacitacinyeducacin,promuevela
integracinconotrasredesderecursosfitogenticosdeAmricay
delmundoparabuscarelementoscomunes,desarrollaproyectos sobre
recursos fitogenticos de inters de los tres pases, y promueve la
participacin recproca de expertos nacionales de cada pas y de los
comits de operacin y asesora.El Agricultural Research Service (ARS)
es la agencia de investigacin
cientficadelDepartamentodeAgriculturadelosEstadosUnidos.
LainvestigacindelARSsolucionaproblemasrelacionadosconla
agricultura, la nutricin humana, la seguridad alimentaria, los
recursos naturalesyelmedioambiente.ElNationalPlantGermplasm System
(NPGS) es una red de bancos de germoplasma y estaciones de campo
coordinada por el ARS, cuya principal responsabilidad es
conservar,caracterizarydistribuirrecursosgenticosvegetalesde
importanciaagrcolayalimentaria.ElNPGSmantieneunavariedad de
colecciones de germoplasma con ms de 475,000 accesiones de
materialesvegetalesquecubrenprcticamentetodaslasespecies cultivadas
y sus parientes silvestres. El NPGS es uno de los centros
deconservacinydistribucindegermoplasmamsgrandesdel mundo. El NPGS
participa en actividades de colecta e intercambio de germoplasma y
distribucin de beneficios, coordinadas por la Oficina
deIntercambioVegetal(ARSPlantExchangeOffice)deBeltsville, Maryland.
La coleccin base de germoplasma del NPGS est ubicada
enelNationalCenterforGeneticResourcesPreservation,enFort Collins,
Colorado. Este centro mantiene ms de 700,000 muestras de semillas,
realiza ms de 20,000 pruebas de germinacin, y apoya el uso y la
transferencia de tcnicas adecuadas para la germinacin, el
almacenamiento y el manejo de las semillas.xManuales para Bancos de
Germoplasma No. 8T. van Hintum, L. Groot yL. Boukema Centre for
Genetic Resources (CGN) PO Box 16, 6700 AA WageningenPases BajosA.
BornerInstitut fr Pflanzengenetik und
KulturpflanzenforschungCorrensstrae 3D-06466 GaterslebenAlemaniaS.
LiningtonMillennium Seed Bank ProjectWakehurst
PlaceArdinglyHaywards HeathWest Sussex RH17 6TNReino UnidoC.N.
NkhomaSADC Plant Genetic Resources Centre (SPGRC) Private Bag CH6
LusakaZambia L.M. EngleGeneticist and Head Genetic Resources and
Seed UnitAVRDC The World Vegetable Center60 Yi-Ming Liao 74151
Shanhua, Tainan 741Taiwn N.C. AltoverosDeputy Director and
ResearcherInstitute of Plant Breeding University of the Philippines
Los BaosCollege 4031, Laguna FilipinasM. MackeyAustralian Centre
for International Agricultural Research (ACIAR)GPO Box 1571
Canberra ACT 2601AustraliaA.W. EbertCoordinadorRecursos
Fitogneticos yBiotecnologaCATIE7170 Turrialba Costa Rica Xiaorong
Hu ICGR, CAAS 12 Zhong Guan Cun South Street Beijing,
100081ChinaREVISORES DEL MANUSCRITO ORIGINALxiManual para el Manejo
de SemillasPRLOGOLos bancos de germoplasma son depsitos de recursos
fitogenticos queproporcionanlamateriaprimaparaelmejoramientodelos
cultivos.Estosrecursoscumplenunafuncinvitaleneldesarrollo
sostenible de la agricultura en tanto ayudan a aumentar la
produccin dealimentosyacombatirelhambreylapobreza.Enloscultivos,
sepuedeproducirunaresistenciaalasplagasyenfermedadesde manera que
se reduzca la necesidad de usar qumicos que puedan tener efectos
deletreos en los agricultores y en el medio ambiente. Las semillas
que se almacenan en los bancos de germoplasma son un recurso vital
e irreemplazable, una herencia que se debe conservar
paraproveeropcionesalaagriculturaenelfuturo,enunmundo
queafrontaelcambioclimticoyotrosdesafos.Laconservacin sostenible de
los recursos genticos depende del trabajo eficaz del personal de
los bancos de germoplasma, cuyo papel es crtico para
garantizarqueelgermoplasmaseconservedemaneraefectivay
eficiente.Estepersonaldebeaplicarprocedimientosadecuadosal manejo
de las semillas para garantizar que stas sobrevivan y estn
disponibles para las generaciones actuales y
futuras.ElmanualprcticosobreProcedimientosparaelManejode
SemillasenBancosdeGermoplasma(Hanson,1985),publicado
porelConsejoInternacionaldeRecursosFitogenticos(IBPGR, hoy
Bioversity International), ha ayudado a los curadores y tcnicos
debancosdegermoplasmaensulabordeconservarlassemillas.
Lostrabajosdeinvestigacinrealizadosendcadaspasadashan
producidoavancesenelconocimientosobrelafisiologadelas
semillasysucomportamientoencondicionesdealmacenamiento. El Convenio
sobre la Diversidad Biolgica (CDB) en 1992, el Tratado
Internacional sobre los Recursos Fitogenticos para la Alimentacin
ylaAgricultura(TIRFGAA)en2004,yotrosacuerdosrelacionados han
cambiado el contexto mundial en lo referente a la propiedad del
germoplasmayladistribucindesusbeneficios.Eldesarrollode
organismosmodificadosgenticamente(OMG)ylascontroversias
asociadastienenimplicacionesimportantesenlamaneraenque
losbancosmanejanelgermoplasma,particularmenteencuanto
aevitarlaintroduccininvoluntariadegenesexticos,incluyendo
lostransgenes.Todasestasnuevasoportunidadesydesafos
llevaronareconocerlanecesidaddeactualizarelmanualpara
bancosdegermoplasmapublicadoen1985.Laversinactual
abordaloscambiosrecientesenelmanejodelassemillasen bancos de
germoplasma y busca dar los elementos para cumplir los estndares
actuales. Est complementado por un mdulo interactivo de
autoaprendizaje, en CD-ROM, adjunto a esta publicacin. Tanto
xiiManuales para Bancos de Germoplasma No. 8el manual como el mdulo
de aprendizaje buscan tambin ayudar a
enfrentareldesafoquesuponelaescasezyfrecuenterotacinde personal
calificado en los bancos de germoplasma, particularmente en los
pases en
desarrollo.Elmanualyelmdulodeautoaprendizajeofrecenleccionese
instruccionessobrelaconservacindesemillasyelmanejodeun
bancodegermoplasmaalpersonalquenotienelaoportunidad
deasistiraunacapacitacinformalsobreestostemas.Atravs
deellos,elpersonaldelosbancosdegermoplasmapuede
aprendersobrelasactividadesqueserealizanenellos,ydisponer
deunaherramientadereferenciarpidasobrelosprincipales
procedimientos. Esperamos que esta publicacin ayude al personal
delosbancosamantenerelgermoplasmabajosucuidadoenlos ms altos
estndares de supervivencia y calidad.Laura SnookDirectora de
ProgramaComprensin y Manejo de la BiodiversidadBioversity
InternationalxiiiManual para el Manejo de
SemillasPREFACIOSeguirlosprocedimientosadecuadosenelmanejodelassemillas
enunbancodegermoplasmaesfundamentalparaconservar
losrecursosfitogenticosalargoplazoydemaneraeficientey efectiva en
costos. Estos procedimientos garantizan que las semillas
almacenadasseandelamsaltacalidadyalcancenlamxima
longevidad.Elobjetivodeunbancodegermoplasmaesmantener
accesionesdealtaviabilidadduranteperodosprolongados.Los
avancesenlabiologadelassemillasdurantelasltimasdcadas
hanpermitidocomprendermejorlafisiologadelassemillasysu
comportamientoenalmacenamiento,haciendodeellaselmedio
msfcilyconvenientedeconservacinalargoplazo.Estoha
llevadoaldesarrollodetcnicasparamanejaradecuadamentelas semillas y
prepararlas para el
almacenamiento.Enladcadade1980,elConsejoInternacionaldeRecursos
Fitogenticos(IBPGR),predecesordeBioversityInternational,
publicunaseriedemanualesparabancosdegermoplasma,
entreellosManualesPrcticosparaBancosdeGermoplasma
No.1:ProcedimientosparaelManejodeSemillasenBancosde Germoplasma de
Jean Hanson (1985), para ayudar a los curadores
yalostcnicosdelosbancosenlaconservacindesemillas.
Estemanual,cuyaedicinyaseagot,esanunareferencia
estndarparaeltrabajodelosbancosysemantienecomouna
delaspocasfuentesdeinformacinprcticaparacuradoresy
tcnicosdebancosdegermoplasma.Enaosrecientes,sehan publicado muy
pocos libros sobre el tema. Las pocas publicaciones
cientficasconsideradasexcelentessobreelmismotemason,con frecuencia,
demasiado complejas para ser utilizadas por un tcnico promedio, en
especial en pases en desarrollo. Este manual es una
actualizacindelmanualprcticoanteriorparaelpersonalnuevo
delosbancosdegermoplasmaquenoharecibidocapacitacin formal. Su
contenido se beneficia de los avances en la tecnologa de
semillas,dealmacenamientodesemillasydetcnicasdemanejo
delassemillasocurridosenlasltimasdosdcadas.Seutiliza
tecnologamodernadecomunicacinparahacerqueestemanual sea ampliamente
accesible.Lanecesidaddeesteproductosehizoevidenteenunareciente
evaluacinsobrecapacitacinynecesidadesdeformacinde
losprogramasnacionalesderecursosfitogenticos,realizadapor
Bioversity International y la FAO. Como lo expresaron algunos
socios durantevariasreunionesytalleres,lafaltadepersonalcapacitado
es un obstculo importante para que muchos bancos conserven el
germoplasma de manera efectiva y eficiente.Para muchos bancos
xivManuales para Bancos de Germoplasma No. 8de germoplasma de pases
en desarrollo, el personal encargado de
lasoperacionesderutinacarecedefundamentosenfisiologade
semillasydebuenasprcticasdemanejodelgermoplasma;otro agravante es
la frecuente rotacin del personal.Este manual, sencillo
yprctico,ayudaralpersonaldelosbancosdegermoplasmaa realizar sus
labores
cotidianas.Estapublicacintratasolamenteeltemadelalmacenamientode
semillasortodoxas,esdecir,aquellasquesepuedensecarhasta alcanzar un
contenido de humedad bajo y mantener a temperaturas bajo cero en
bancos de germoplasma.Las principales actividades y
procedimientosdelfuncionamientodelosbancosdegermoplasma
desemillasson,engeneral,losmismosparatodoslosbancos,a pesar de que
pueden variar en contenido y
alcance.Desdelaprimeraedicindelmanualprcticoen1985,sehan
dadonuevosdesarrollosqueplanteanlanecesidadderevisarlos
procedimientosdelosbancosdegermoplasma.Laentradaen
vigenciadelConveniosobrelaDiversidadBiolgica(CDB)en1992 y del
Tratado Internacional sobre los Recursos Fitogenticos para la
AlimentacinylaAgricultura(TIRFGAA)en2004hancambiadola
percepcinenelmundosobrelapropiedaddelgermoplasmayla distribucin de
sus beneficios. Estos acuerdos proporcionan nuevos
principiosparaorientarlaadquisicin,conservacinyutilizacin
delabiodiversidad,einfluyenenelfuncionamientodelosbancos de
germoplasma. En el CDB y en el Tratado Internacional sobre los
RFGAAsereconocequelabiodiversidadesunderechosoberano
delasnaciones,quelacolectadegermoplasmasedebehacer
conconsentimientofundamentadoprevio,yquelaadquisicin
delgermoplasmaestsujetaatrminosmutuamenteacordados
yalasuscripcindeacuerdosdetransferencia,bilateraleso
multilaterales.Adicionalmente,secreelFondoMundialparalaDiversidadde
losCultivos,paraapoyareldesarrolloyelfinanciamientodela
conservacindeladiversidadcultivadaentodoelmundo.Este
Fondoayudaamantenerlascoleccionescrticasparalaseguridad alimentaria
y el desarrollo sostenible. Para recibir apoyo del Fondo, los
bancos de germoplasma deben cumplir con una serie de criterios de
elegibilidad, uno de los cuales es que tengan el recurso humano
ylossistemasdemanejorequeridosparamantenerlosrecursos
fitogenticos,ypuedancomprobarquesusestndarestcnicos
ycientficosdemanejosonlosaceptados.Porello,serequieren
normasparaayudaralosbancosamantenerestndaresaltosde manejo.xvManual
para el Manejo de
SemillasUnnuevoycontroversialdesarrolloqueprobablementeafectael
manejodelgermoplasmaeseldelosorganismosmodificados
genticamente(OMG).Enlaactualidad,seesperaquelosbancos
degermoplasmatomeniniciativasparaevitarlaintrogresin involuntaria
de genes exticos, incluyendo los transgenes, que an
noseencuentranpresentesenlasmuestrasconservadasenlos
bancos.Porestarazn,elComitdePolticasparalosRecursos
Genticos(GRPC)delGrupoConsultivoparalaInvestigacin Agrcola
Internacional (GCIAI) ha desarrollado principios orientadores que
cubren los riesgos de introducir transgenes en las colecciones,
particularmenteenpuntoscrticosdelosprocedimientosdelos
bancosdegermoplasma.Estosprincipiosyloscambiosquese requieren en el
protocolo para implementarlos se explican en forma detallada en
esta nueva edicin.Lapublicacindeestemanualesunainiciativaconjuntade
BioversityInternational(antesIPGRI),elInternationalLivestock
ResearchInstitute(ILRI)ylaOrganizacindelasNacionesUnidas
paralaAlimentacinylaAgricultura(FAO),auspiciadosenparte
porelCentroTcnicoparalaCooperacinAgrcolayRural(CTA). El manual est
dirigido al personal de bancos de germoplasma, en especial a los
tcnicos que manejan semillas ortodoxas, y tiene por objeto explicar
de manera sencilla los procedimientos para el manejo cotidiano de
las semillas en los bancos. Con el fin de elevar el valor de este
manual para la capacitacin y el desarrollo de capacidades,
losautoreslohanadaptadoparacrearunmdulointeractivode
autoaprendizaje; este mdulo es una herramienta complementaria al
manual y ha sido publicado en CD-ROM y en internet, por Bioversity
International, con el auspicio del
CTA.Cabeanotarqueestemanualestenfocadoexclusivamente
enlosprocedimientosinherentesalmanejodelassemillasy
nocubreendetallelosprocesosdedocumentacin,colectao caracterizacin,
en tanto son temas que ya se han cubierto en otras publicaciones.
Los lectores podran consultar la literatura disponible para
comprender mejor estas importantes actividades de los bancos de
germoplasma.Kameswara RaoJean HansonEhsan DullooKakoli GhoshDavid
Nowell Michael Larinde11.Introduccin2. Adquisicin y registro del
germoplasma2.1 Adquisicin del germoplasma2.2 Registro del
germoplasma3. Limpieza de las semillas4. Determinacin del contenido
de humedad y secado de las semillas4.1 Determinacin del contenido
de humedad de las semillas 4.2 Secado de las semillas5.
Determinacin de la calidad de las semillas5.1 Pruebas de viabilidad
de las semillas5.2 Pruebas de sanidad de las semillas5.3 Pruebas
para verificar la introduccin inadvertida de transgenes en las
semillas6. Empaque yalmacenamiento de lassemillas6.1 Empaque de las
semillas6.2 Almacenamiento de las semillas7. Distribucin
delgermoplasma8. Monitoreo yregeneracin delgermoplasma8.1 Monitoreo
del germoplasma8.2 Regeneracin del germoplasma1. Introduccin1.
INTRODUCCINEn el campo de los recursos fitogenticos, el
com-portamiento fisiolgico en almacenamiento de las semillas de una
especie y su longevidad determinan cmo conservarlas para el uso.
Por tratarse de un mtodo prctico y econmico, el almacenamiento en
forma de semilla es el preferido para conservar
el90%delosseismillonesdeaccesionesman-tenidos en colecciones ex
situ en todo el mundo. ste es el principal mtodo de conservacin de
las especies que producen semillas ortodoxas, es de-cir, que
resisten la desecacin a contenidos de hu-medad bajos y el
almacenamiento a temperaturas muy bajas. La mayora de las especies
cultivables y forrajeras, y muchas especies arbreas producen
estetipodesemilla.Lastcnicasparaconservar semillas ortodoxas se han
venido perfeccionando durante varias dcadas e incluyen el secado de
las semillashastalograruncontenidodehumedad bajo (3-7% de peso
fresco, dependiendo de la es-pecie) y el almacenamiento en
recipientes hermti-cos, a bajas temperaturas, preferiblemente a
-18oC o menos (FAO/IPGRI,
1994).Muchasespeciesimportantesderbolestropi-calesysubtropicalesproducensemillasqueno
sobrevivenladesecacinnitolerantemperaturas
bajas.Porestarazn,estassemillas,conocidas como recalcitrantes, no
son fciles de almacenar. Sibienexistentcnicasparaalmacenaralgunas
semillasrecalcitrantes,stasporlogeneralson
decortavidaycadaespecierequieresupropio
mtodo.Sehareconocidounaterceracategora
desemillasquemuestranuncomportamientoin-termedio, es decir, que
toleran combinaciones de desecacin y bajas temperaturas. De hecho,
existe un gradiente de ortodoxa a recalcitrante, sin
lmi-tesmuymarcadosentrelascategoras.Sinem-bargo, a pesar de las
investigaciones para supe-rar los problemas asociados con la
conservacin delassemillas,pocosehaavanzado,msall del corto plazo,
en el almacenamiento de las se-millas no
ortodoxas.Estapublicacintratadelalmacenamientode
lassemillasortodoxasenbancosdegermo-plasma.Lasoperacionesbsicasdeunbanco
degermoplasmadesemillasincluyenlacolecta, 2Manuales para Bancos de
Germoplasma No.
8elprocesamiento,laconservacin,laregeneracinyladistribucin del
germoplasma. Las principales actividades y procedimientos para
elfuncionamientodeunbancodegermoplasmasonprcticamente
losmismosentodoslosbancos,aunquepuedenvariardealguna
manera.Losbancosdegermoplasmadesemillaspuedensermuy especializados;
por ejemplo, el Banco Internacional de Germoplasma
deArrozenLosBaos,Filipinas,nicamenteconservaarrozysus parientes
silvestres. Sin embargo, la mayora de los bancos naciona-les de
germoplasma de semillas almacenan semillas de todo tipo de
cultivos.Elmantenimientodelaviabilidadydelaintegridadgenti-cadelassemillascontinasiendoelprincipiobsicoenelmanejo
delosbancos.Lacalidadysostenibilidaddecualquieresfuerzode
conservacin de recursos genticos depende de cmo se procesan
yconservanlassemillas.Manejarlassemillasconprocedimientos
inapropiados acelera el deterioro de stas y hace ms costosa la
con-servacin.El funcionamiento de un banco de germoplasma involucra
una serie de actividades complejas e interdependientes (ver
Diagrama de Flu-jo 1.1). El primer paso hacia la conservacin ex
situ de la diversidad
cultivadaeslarecoleccindelgermoplasmaenreasdeconocida diversidad
gentica o mediante donaciones de otros centros. Una vez se reciben
las muestras en el banco de germoplasma, las semillas se registran
y se incorporan a la coleccin, siempre y cuando cumplan con los
estndares requeridos de cantidad y calidad, y con la informa-cin
asociada a ellas. El procedimiento para integrar una accesin a un
banco de germoplasma implica limpiar, determinar el contenido de
humedad, secar, evaluar la viabilidad y empacar. Las accesiones de
germoplasmasedebenmantenerconunaaltaproporcindesemi-llas viables,
lo cual implica almacenarlas en condiciones adecuadas,
monitorearlesperidicamentelaviabilidadyregenerarlascuandola
situacinloamerite.Laregeneracinsedebehacerencondiciones
ptimasparamantenerlaintegridadgenticaymaximizarlalonge-vidad.Parareduciralmnimoladerivagentica,sedebesembrar
unnmeroadecuadodeplantasymuestrearlas.Adems,sedebe
mantenerlaintegridadgenticadeloscultivosdepolinizacincru-zada
mediante el aislamiento o la polinizacin controlada.Las semi-llas
se deben cosechar despus de que hayan alcanzado el punto de madurez
fisiolgica, y acondicionarse y procesarse en condiciones ptimas
para asegurar una alta viabilidad y disponibilidad para el
al-macenamiento. Para que las semillas tengan buena calidad en el
mo-mento de la cosecha son tambin vitales unas condiciones
climticas favorables durante los perodos de precosecha y
postmaduracin: el clima seco acelera el secado de las semillas en
las plantas a un
con-tenidodehumedadfavorableparaelmanejo,mientrasqueelclima hmedo
(con humedad relativa alta) retrasa el proceso de secado de las
semillas en las plantas, produciendo un deterioro de stas incluso
antes de la cosecha.3Manual para el Manejo de SemillasCOLECTA EN EL
PAS INTRODUCCINEXTRACCIN Y LIMPIEZA DE LAS SEMILLASCUARENTENA
VEGETALREGENERACINREGISTROLIMPIEZA, SECADO Y PRUEBAS DE
GERMINACINREGENERACINALMACENAMIENTO
MONITOREODISTRIBUCINCARACTERIZACINY
EVALUACINEMPAQUEDOCUMENTACINDiagrama de Flujo 1.1. Secuencia
general de las operaciones de un banco de germoplasma de
semillas4Manuales para Bancos de Germoplasma No. 8La mayora de los
bancos de germoplasma tiene el mandato de dis-tribuir germoplasma a
los usuarios. Por lo general, las accesiones de germoplasma se
distribuyen utilizando acuerdos de transferencia de materiales
(ATM), que definen los trminos y condiciones de uso, y las
provisiones para compartir los beneficios que surjan del uso del
germoplasma. En la primera reunin del rgano Rector del Tratado
Internacional sobre los Recursos Fitogenticos para la Alimentacin
ylaAgricultura,enjuniodel2006,seformalizunacuerdoestn-dar de
transferencia de materiales (ATM estndar), que constituye un
contrato uniforme para todos los intercambios de germoplasma de las
especies incluidas en el Anexo I del Tratado. ste incluye trminos
especficos que rigen el acceso y la distribucin de beneficios,
facili-tando el intercambio de germoplasma en todo el mundo.El
trabajo con recursos genticos implica manejar una gran cantidad
deinformacinquesedebedocumentaryalmacenarensistemas de manejo de
informacin. El manejo de la informacin no se trata en este manual,
pero se recomienda al lector consultar la gua para documentacin de
los recursos genticos de Painting et al.
(1993).Elmanejodeunbancodegermoplasmarequierecapacidadpara tomar
decisiones de manera creativa y adaptativa. Dada la creciente
presinaquesevensometidoslosbancosdegermoplasmapara mejorar la
eficiencia en costos y la efectividad de sus operaciones, se hace
necesario desarrollar estrategias de manejo coherentes. En una
reciente publicacin de Engels y Visser (2003), se analizan
elemen-tos importantes de manejo tanto a nivel de bancos de
germoplasma como de colecciones, y se discuten opciones para un
manejo ms eficiente y efectivo en cuanto a los costos. Lectura
complementariaEngels,J.M.yVisser,L.(eds.).2003.Guaparaelmanejoeficazdeun
banco de germoplasma. IPGRI Manual para Bancos de Germoplasma No.
6. IPGRI, Roma, Italia. Disponible en la pgina
www.bioversityin-ternational.org/Publications/pubfile.asp?ID_PUB=899.FAO/IPGRI.
1994. Normas para Bancos de Genes. FAO y el IPGRI, Roma,
Italia.Disponibleenhttp://www.bioversityinternational.org/publicatio-ns/pubfile.asp?ID_PUB=1250.Painting,
K.A., Perry, M.C., Denning, R.A. y Ayad, W.G. 1993. Gua para
ladocumentacinderecursosgenticos:Unenfoqueautodidctico para la
comprensin, anlisis y desarrollo de la documentacin de los recursos
genticos. IBPGR, Roma, Italia. Disponible en la pgina
www.bioversityinternational.org/Publications/pubfile.asp?ID_PUB=507.52.
ADQUISICIN Y REGISTRO DEL GERMOPLASMA2.1 Adquisicin del
germoplasmaEn qu consiste la adquisicin de germoplasma?Adquirir
germoplasma consiste en obtener material
genticodeunaespeciecuyaconservacines
mandatodeunbancodegermoplasma.Esel
pasoinicialenlaconservacindelosrecursos genticos.Por qu se hace?La
principal razn para adquirir germoplasma es ga-rantizar suficiente
disponibilidad de diversidad para
suplirnecesidadesactualesyfuturas.Lasrazones que justifican la
adquisicin incluyen:prevenir la erosin gentica: cuando la amenaza
deprdidadeladiversidadgenticaest presenteenunadeterminadazonaynose
puede conservar in situ;llenarvacosenunacoleccin:cuandoenuna
coleccin hace falta diversidad o sta est insu-ficientemente
representada en ella;satisfacernecesidades:cuandosenecesita
germoplasmaparaelmejoramiento,lainvesti-gacin o el desarrollo;
yaprovechar una oportunidad: cuando se presen-ta la oportunidad de
hacer una colecta fortuita, noplaneadadeespeciesdefinidascomono
objetivo.Cmo se hace?El germoplasma se adquiere:a.colectando en
campos de agricultores, hbitats silvestresomercados,especialmenteen
centros de diversidad conocidos;
yb.consiguiendomaterialesdeintersatravs
decorrespondenciaeintercambioconotros
centrosdeintroduccindeplantas,bancos
degermoplasma,cientficos,agricultores,
compaasproductorasdesemillauotros proveedores de germoplasma.2.
Adquisicin1.Introduccin2. Adquisicin y registro del germoplasma2.1
Adquisicin del germoplasma2.2 Registro del germoplasma3. Limpieza
de las semillas4. Determinacin del contenido de humedad y secado de
las semillas4.1 Determinacin del contenido de humedad de las
semillas 4.2 Secado de las semillas5. Determinacin de la calidad de
las semillas5.1 Pruebas de viabilidad de las semillas5.2 Pruebas de
sanidad de las semillas5.3 Pruebas para verificar la introduccin
inadvertida de transgenes en las semillas6. Empaque yalmacenamiento
de lassemillas6.1 Empaque de las semillas6.2 Almacenamiento de las
semillas7. Distribucin delgermoplasma8. Monitoreo yregeneracin
delgermoplasma8.1 Monitoreo del germoplasma8.2 Regeneracin del
germoplasma6Manuales para Bancos de Germoplasma No. 8Polticas sobre
la adquisicin de
germoplasmaLosbancosdegermoplasmadebentenerpolticasclarassobre
laadquisicindemaneraqueelvolumendematerialadquiridose
encuentredentrodeloslmitesdecapacidaddemanejodecada banco. Cuando
el espacio de almacenamiento o los recursos para
mantenerlascoleccionessonlimitados,elgermoplasmasedebe adquirir con
base en una prioridad. Establecimiento de
prioridadesLaadquisicindegermoplasmadebebasarseensuvaloroenla
amenazadeextincin.Elvalorsepuedeestimarcomolautilidad de las
caractersticas y la adaptacin a ambientes nicos. Los
cul-tivares,lasvariedadesnativasylasespeciessilvestresyarvenses
compaerasdebenrecibiraltaprioridaddeadquisicin,seguidos por las
reservas genticas, el material lite de mejoramiento y las
va-riedades modernas y obsoletas.Antes de adquirir material
silvestre, hay que considerar si hay recursos disponibles para
manejarlo.ElConveniosobrelaDiversidadBiolgica(CDB)yelTratadoIn-ternacionalsobrelosRecursosFitogenticosparalaAlimentacin
ylaAgricultura(TIRFGAA)constituyenelmarcodetrabajoparala
adquisicinyutilizacindelgermoplasma.Lacolectaestregida por el CDB,
que cubre el acceso con consentimiento fundamentado previo, de
mutuo acuerdo y con participacin en los beneficios. El
TratadoInternacionalsobrelosRFGAAserefiereespecficamente
alasespeciescultivadasqueaparecenenlalistadelAnexoIdel Tratado,
identificadas por los pases participantes como importantes
paraserincluidasenunsistemamultilateraldeacceso.Elacceso
algermoplasmabajoestosdosinstrumentosinternacionalesest
regidohoyendamedianteelAcuerdoEstndardeTransferencia
deMateriales(ATMestndar),adoptadoporelrganoRectordel
Tratado.LostrminosdelATMestndarcubrentantoelaccesoal material
gentico como los beneficios derivados de l, y se deben tener en
cuenta durante la colecta y el intercambio.A. Adquisicin de
germoplasma mediante la colectaLas publicaciones de Guarino et al.
(1995) y Smith et al. (2003) han cubierto en profundidad la
planificacin y la realizacin de una
co-lectadegermoplasma.Parainformacinadicional,elpersonalde los
bancos de germoplasma se puede referir a estas publicaciones.Cundo
colectar las semillasIdealmente, las semillas se deben colectar
cuando alcanzan la ma-durez ptima, es decir, cuando su vigor,
tolerancia a la desecacin y longevidad se encuentran en los niveles
ms altos. Como es difcil monitorear estas caractersticas en el
campo, se pueden usar indi-7Manual para el Manejo de
Semillascadores visuales para realizar valoraciones preliminares de
la madu-rez ptima de las semillas, como los cambios en el color del
fruto, el color de la semilla o la formacin de capas negras (en los
cereales). Estoscambiossecorrelacionanbienconellogrodelamadurez,
aunquenonecesariamenteconlamximalongevidad.Apesarde
ello,estoscambiossonindicadorestilesparaloscolectoresde
germoplasma. La dispersin de las semillas tambin es un buen
in-dicio prctico de la madurez de stas.Color del frutoEn los frutos
carnosos, la madurez viene acompaada de cambios de color
generalmente de verde a amarillo, caf o
rojo.Eneltomate,elcolorrojodelfrutoindicaquelamayorade las semillas
est en su mxima longevidad. Las semillas de los frutos verdes,
rosados-amarillos o muy maduros probablemente no han madurado o se
han pasado de madurez y son de mala calidad.En Cucurbita moschata,
un cambio en el color del fruto de verde
aamarillo-cafyunpednculodecolorpajaindicanunalto vigor en las
semillas.EnCapsicumannuum,elvigordelassemillasmejoraenla medida en
que el color del fruto cambia de verde a rojo con unas pocas listas
verdes y luego a rojo intenso.En Brassica oleracea, el color del
fruto (silicua) cambia de verde a amarillo, y en la soya y muchas
otras leguminosas, de verde a amarillo-caf y luego a caf, a medida
que la semilla madura.Color de las semillasEn muchos frutos secos,
el color de las semillas cambia de verde a amarillo o caf a medida
que las semillas
maduran:Enlasoya,elcolordelasemillacambiadeverdeaamarillo-verde y
luego a amarillo.En Sesbania bispinosa, el color de la testa de la
semilla cambia de amarillo a verde oliva y luego a un caf
verdoso.Formacin de capas negrasEn los cereales, como el maz y el
sorgo, la madurez coincide con la formacin de una capa de abscisin
caf o negra, conocida como capa negra.La sequedad de la cscara y de
las hojas inferiores es tambin un indicador de madurez.La capa
negra est localizada en la base del grano, en el punto de unin a la
mazorca en el lado opuesto del embrin (maz), o en la punta del
grano (sorgo y millo). La capa negra se puede encontrar pelando con
cuidado la testa de la semilla para exponer la capa de
abscisin.8Manuales para Bancos de Germoplasma No. 8Variacin en la
madurez de las semillas
Loscolectoresdegermoplasmaencuentranconfrecuenciauna variacin en la
madurez de las semillas por diferencias en el tiempo
defloracin,tantoentreplantascomodentrodelainflorescencia
deunamismaplanta.Estosepuedesuperarcolectandofrutos
demadurezuniformesiempreycuandohayadisponibilidadde algunos
marcadores y tiempo suficiente.Recipientes para recolectar
muestrasUtilice bolsas de papel para colectar las semillas. Utilice
bolsas de tela que permitan la circulacin del aire (como bolsas de
muselina) para colectar panculas o frutos
secos.Utilicerecipientesabiertos,comocestashechasdealambreo bamb o
cubetas, para colectar frutos carnosos. Asegrese de que los frutos
no se aplasten.
Duranteeltransporte,nopermitaquelosfrutossecalienten demasiado y se
fermenten.Lasbolsasconmalladenylonsontambinmuytilespara
colectarmuestraspuespermitenlacirculacinlibredelaire.
Ademsdeservirparacolectarsemillas,vainasyfrutos,
sepuedenutilizarparaextraerlassemillasyparasecarlas.
Estasbolsasseencuentrandisponiblesenmalladedistintos tamaos.
Procesamiento de las semillas en el campoA menudo, las semillas
recientemente colectadas tienen un contenido
dehumedadalto(10-20%)ysonsusceptiblesdecontaminarse
conhongosobacterias.Losfrutosylassemillashmedostienen
altastasasderespiracin,ysieloxgenosereducedebidoauna
aireacininadecuada,sefermentan.Tantolarespiracincomola
fermentacincreancalor,locualdeterioraelmaterialcolectado.
Cuandolasmisionesdecolectasonprolongadas,esnecesario
hacerunlavadopreviodelassemillasenelcampo,yextraerlasy
secarlasparareducirelvolumenyelpesoduranteeltransporte,
eliminarloscontaminantesyllevarelcontenidodehumedadaun nivel
seguro. Emplee nicamente mtodos manuales para limpiar y extraer las
semillas con el fin de conservar la
viabilidad.Silassemillassecolectanconhumedadsuperficial,squelas
primeroalasombraoenuncuartoconbuenaventilacin, dispersndolas sobre
papel peridico o papel secante antes de transferirlas a bolsas de
papel o tela.Las semillas de frutos dehiscentes secos (como la
ocra, la colza y el ajonjol) se pueden extraer dispersando los
frutos sobre una lona, a la
sombra.Losfrutosmadurosseabrenyliberanlassemillasmientrasse 9Manual
para el Manejo de SemillasFigura 2.1. Extraccin de las semillas de
frutos carnosos123410Manuales para Bancos de Germoplasma No.
8secan.Algunasvecesnecesitanunimpactoadicionalcomo rastrillarlos o
sacudirlos.Elimine los frutos vacos y los desechos, y traslade las
semillas a bolsas de algodn, malla de nylon o
papel.Conlosfrutospulposos(comoeltomateyelpepino),extraiga las
semillas cuidadosamente con la mano, lvelas bajo un chorro de agua
corriente para retirar la pulpa y el muclago, disprselas formando
una capa delgada para maximizar la aireacin y deje que se sequen a
la sombra (ver Figura
2.1).Siempremantengalassemillasenrecipientespermeablesala humedad
como bolsas de algodn o papel, y asegrese de que el aire circule
libremente entre ellas y a travs de ellas.Cuando el clima es
caliente y hmedo y las misiones de colecta prolongadas, seque las
semillas an ms utilizando desecantes como el gel de slice (la
proporcin recomendada de semillas por gel de slice es de 3:2 a
1:1).Para reducir el contenido de humedad de las semillas, ponga en
un recipiente hermtico grande capas alternadas de gel de slice
empacado y de semillas empacadas.Con los frutos pequeos y carnosos
de muchas semillas (como
elkiwiylafresa),silasmisionesdecolectasoncortasyla logstica viable,
la opcin ms prctica es mantener las semillas dentro de los
frutos.Si los frutos requieren maduracin posterior o si las
semillas son delicadas o recalcitrantes, se debe evitar
extraerlas.Traslado del material colectado al banco de
germoplasmaElequipodecolectadebegarantizarlaseguridaddelmaterialco-lectadohastaelmomentoenqueterminelaexpedicinystese
transportealbancodegermoplasma.Exponerlassemillasacon-dicionesambientalesdesfavorablesduranteeltrasladopuedeser
muy daino.Hayquemantenerelmaterialaunatemperaturaptimaya
uncontenidodehumedadseguroauncuandoladistanciadel traslado sea
corta.Asegresedequeelrecipientequecontienelasmuestrasde las
semillas sea acolchado, y que las semillas o frutos no sufran ningn
dao durante el
traslado.B.Adquisicindegermoplasmaporcorrespondenciaein-tercambio
Cuando se sabe que ya se han hecho colectas en el rea de inters,
sepuedenobtenermuestrasporcorrespondencia.Losbancosde
germoplasmapuedenrequerirdocumentacindelospasesode entidades
independientes para certificar que el material est libre de
organismos modificados genticamente (OMG).Contrate los servicios de
una compaa de mensajera para que acompae al equipo de colecta
cuando realice expediciones prolongadas en reas remotas, y enve el
material perecedero o las semillas con viabilidad limitada al banco
de germoplasma lo ms pronto posible.11Manual para el Manejo de
SemillasIdentificacin de muestras nicas para adquisicinMantener
muestras en un banco de germoplasma es costoso; antes de adquirir
germoplasma, los bancos deben verificar que las mues-tras no formen
parte de sus colecciones. Debido a que cada banco adopta su propio
sistema de numeracin, es posible que la misma accesin se registre
dos veces con una identificacin diferente. La mejor forma de
identificar duplicados en una coleccin es comparar
camposrelevantesenlasbasesdedatosdepasaportedeotros bancos que
reciben o donan germoplasma.Adquisicin de germoplasma
nicoObtengainformacincompletadepasaporte,incluyendonombres alternos
o nmeros de identificacin, pedigr y fuente de origen.Prepare una
lista final de las accesiones que se van a
adquirir.Envelalistafinaldeaccesionesidentificadasparaadquisicin al
consignatario para facilitar la transferencia de las semillas. Si
el material se recibe del exterior, verifique los requerimientos
delasautoridadesfitosanitariasdelpasreceptorysigalos
procedimientosparalaimportacindesemillasdescritosms adelante.Las
accesiones de germoplasma que han sido seleccionadas y de-puradas
debido a caractersticas deseables, y las mutantes identi-ficadas en
cultivos de germoplasma, sirven como materia prima im-portante para
el mejoramiento de los cultivos. stas incluyen fuentes de
resistencia a problemas biticos y abiticos, lneas androestri-les,
enanas y otras reservas genticas. Los bancos de germoplasma
debenadquirirestematerialjuntoconlainformacincompletade pedigr.Los
bancos tambin pueden adquirir germoplasma lite en
progra-masdemejoramientoconcaractersticasespecficasoconrendi-miento
alto comprobado. Durante la adquisicin, asegrese de que
elmaterialvengaconinformacindetalladadepedigrydatosde
caracterizacin morfolgica.Introduccin de germoplasma y cuarentena
posterior al ingresoCon frecuencia, los bancos de germoplasma
adquieren germoplasma
dereasendondehancoevolucionadoplagas,patgenosy
especieshospederas.Lasiguienteclasificacinayudaraqueel personal de
los bancos de germoplasma evale el estado potencial de las
enfermedades del material que se va a adquirir. El riesgo de
introducir nuevas plagas y patgenos es:
1.bajoparaelgermoplasmaquehasidocolectadooproducido La mayora de
los errores se cometen durante el ingreso de los datos,
particularmente en lo referente a espacios, guiones, minsculas,
maysculas y ortografa, lo cual requiere una cuidadosa vericacin
cuando se comparan bases de datos para identicar accesiones
duplicadas.12Manuales para Bancos de Germoplasma No.
8enelreaopasendondeelbancodegermoplasmaest ubicado;2.medio para el
germoplasma colectado o producido en la misma
regingeogrficaocontinenteendondeestubicadoelpas receptor; y
3.altoparaelgermoplasmacolectadooproducidoenotros continentes y
para material
vegetativo.Parareducirelriesgodeintroducirplagas,patgenosymalezas,
algunospasestienenleyesqueregulanelingresodematerial
exticodepropagacin,incluyendosemillas.Antesdeimportar cualquier
tipo de semilla, el importador se debe asegurar de cumplir con
todos los requerimientos fitosanitarios del pas de destino.
Lascaractersticasgeneralesdelasregulacionesdeimportacin pueden
incluir provisiones como las siguientes:Puede ser necesario
importar los envos de vegetales y semillas a travs de puntos
especficos de entrada, segn lo determine la autoridad nacional de
proteccin vegetal del pas
importador.Sepuederequerirquelassemillasyelmaterialdesiembra
secultivenenaislamiento,osemantenganenunainstalacin
certificadadecuarentena,duranteunperododetiempo
especficodespusdelingreso,oquecumplanciertas
condiciones.Paraenvosdeplantasoproductosvegetales,puedenexistir
provisiones
adicionales.Engeneral,estprohibidalaimportacindematerialde
siembra,suelo,tierra,arena,abonoydesechosvegetalesque acompaen las
semillas.Los envos probablemente sern inspeccionados y, si es
necesario, desinfectadosporpersonalfitosanitarioautorizadoantesde
liberarlos,siempreycuandosehayancumplidotodoslosdems
requerimientosdelpasimportador.Elincumplimientodeestos
requerimientospuedeocasionardemorasinnecesariasypuede causar la
destruccin de
material.Elmaterialquerequieraaislamientosepuedesembrarbajocristal
apruebadeplagas,eninvernaderosoenparcelasdecampo.El personal
fitosanitario lleva a cabo inspecciones peridicas durante el perodo
de crecimiento en el cual las plantas afectadas por plagas
asociadasalassemillassedestruyen,mientrasquelassemillas colectadas
de plantas sanas se liberan y entregan a los bancos de
germoplasma.13Manual para el Manejo de SemillasProcedimiento para
la importacin de
semillasEnlafasedeplanificacindelaadquisicin,presteatencina
lasplagasqueseencuentranenlasespeciesobjetivoyalos requerimientos
fitosanitarios para introducir el
germoplasma.1.Renainformacinsobrelasplagasqueposiblementese
encuentren en el pas o en el rea de produccin o de colecta de las
semillas.2.Determineenqupartesdelaplantaseencuentranestas
plagas.3.Verifiquelosrequerimientosparalaimportacindesemillascon
laautoridadnacionalfitosanitaria.Siesnecesario,obtengaun permiso de
importacin1de plantas de la autoridad competente y envelo al
remitente antes de la importacin. Todas las solicitudes
fitosanitariassedebenpresentarantelaautoridadnacional fitosanitaria
del pas anfitrin para
aprobacin.4.Siserequierecuarentenadespusdelingreso,siembrecada
nueva accesin en condiciones de aislamiento.5.Las plantas se deben
observar peridicamente y aquellas que se sospecha estn infectadas
por plagas asociadas con las semillas se deben
incinerar.6.Todaslasplantasasintomticassedebenevaluarparaverificar
la presencia de infecciones latentes debidas a virus de conocida
existencia en el lugar de origen y en el pas de mantenimiento; las
plantas infectadas se deben incinerar.7.Las semillas se deben
colectar de plantas sanas nicamente.Organismos modificados
genticamente (OMG) Los bancos de germoplasma deben estar
conscientes de los peligros
inherentesalaintroduccininadvertidadetransgnicosocultivos
modificados genticamente durante la consecucin de germoplasma,
ydebentomarmedidasparaminimizarestasintroducciones(ver
AnexoIytambinSeccin5.3deestemanual).Cuandoseplanea colectar o
adquirir nuevas accesiones por otros medios, los bancos de
germoplasma deben realizar un anlisis de riesgo para
determinar:1.siesprobablequehayauneventotransgnico(comercialyde
investigacin) en los materiales de los taxa relevantes en el rea de
colecta o
adquisicin;2.ladistanciaentreelsitiodecolectaylasreasendondeestn
situados los eventos transgnicos;
y3.silosproveedoresdelgermoplasmapuedensuministrar
documentacinpertinentesobresusprcticasdemanejocon respecto al
material en cuestin.1
Unpermisodeimportacinesunaautorizacinescritaexpedidaporlos
servicios nacionales de proteccin vegetal para importar productos
regulados, incluyendo plantas y productos vegetales.14Manuales para
Bancos de Germoplasma No. 8Lectura
complementariaEbbels,D.L.2003.Principlesofplanthealthandquarantine.CAB
International, Wallingford, Reino
Unido.FAO(2006).ThirdSessionoftheIntergovernmentalTechnicalWorking
Group on Plant Genetic Resources for Food and Agriculture, Roma,
Italia, octubre 26 28 de 2005
http://www.fao.org/waicent/FaoInfo/Agricult/AGP/AGPS/pgr/ITWG3rd/docsp1.htm(direccinvigentea
octubre 18 de
2007).Guarino,L.,Rao,V.R.yReid,R.(eds).1995.Collectingplantgenetic
diversity. CAB International, Wallingford, Reino Unido.Hay, F.R. y
Smith, R.D. 2003. Seed maturity: when to collect seeds from
wildplants.Pp.97-133inSeedconservation:Turningscienceinto
practice.(R.D.Smith,J.B.Dickie,S.H.Linington,H.W.Pritchardy R.J.
Probert, eds.). Royal Botanic Gardens, Kew, Reino
Unido.TratadoInternacionalsobrelosRecursosFitogenticosparala
AlimentacinylaAgricultura.FAO,Roma,Italia.http://www.planttreaty.org/index_es.htm.2.2
Registro del germoplasmaQu es el
registro?Elregistroeslaasignacindeunnmerodeidentificacinnico
llamadonmerodeaccesinquepermiteubicarcadamuestrade
semillarecibidaenunbancodegermoplasmaydistinguirladelas dems.Por qu
se hace?Elregistrosellevaacaboconelfindepermitirquelosbancos
degermoplasmamantenganregistrosprecisosdelasmuestrasy
preparenlistasdeinventarioparaconservacin,distribucinyotros
aspectos de manejo del germoplasma. Cundo se
hace?Elregistrosehacecuandolamuestraingresaporprimeravezal
bancodegermoplasma.Paraunusoymanejoeficientedelas
colecciones,registrelasmuestrassicumplenconlascondiciones que se
describen ms adelante.Cmo se
hace?Elregistrosellevaacaboenvariospasos(verDiagramadeFlujo
2.1).Paso 1: Antes del
registroAntesdeaceptaryregistrarlasmuestras,elbancodebeverificar
enquestadoestnparaasegurarquecumplanlassiguientes condiciones.
15Manual para el Manejo de SemillasSEMILLAS QUE INGRESANREVISAR LOS
ACUERDOS Y PERMISOS DE ADQUISICIN ADJUNTOS AL MATERIALVERIFICAR
DUPLICACIN EN LA BASE DE DATOSSOLICITARLOS AL DONANTECOMUNICARSE
CON EL DONANTE Y OBTENER MS INFORMACINDESINFECTAR O DESECHAR LA
MUESTRAPROGRAMAR LA MUESTRA PARA RENERACINSUBDIVIDIR LA
MUESTRACULTIVAR LOS PRESUNTOS DUPLICADOS JUNTOS Y COMPARAR LAS
CARACTERSTICAS. SI SE CONFIRMA LA DUPLICACIN, JUNTAR LAS SEMILLAR Y
MANTENER EL LOTE CON EL NMERO DE ACCESIN ORIGINALEstn
disponibles?Los datos de pasaporte son adecuados?La muestraes un
posibleduplicado?El estadotosanitario dela semilla
essatisfactorio?Hay que subdividir?Regeneracin > 85%?ASIGNAR
NMERO DE ACCESIN Y ARCHIVAR LA INFORMACINLa cantidadde semilla es
sucientepara por lo menostres
generaciones?NONONONONOSSSSNOSNOSSDiagrama de Flujo 2.1. Registro
del germoplama16Manuales para Bancos de Germoplasma No. 8Acuerdos y
permisos de
adquisicinLasmuestrassedebenhaberadquiridodecolectores,bancosde
germoplasma u otras fuentes, con acuerdos y permisos apropiados
detransferenciaoadquisicindemateriales,deacuerdoconlas
regulacionesnacionaleseinternacionalessobreconservacin, distribucin
y uso (ver Anexo I para mayor informacin).Datos de
pasaporteLasmuestrasdebenestaracompaadasporunaadecuada
informacindepasaporte,especialmentenombredelcultivar,
nmerodelcolectorypedigr(parareservasgenticasymaterial
mejorado)paraverificarquelasmuestrasnoformanyaparte
delbancodegermoplasma.Losdatosmnimosdepasaporte requeridos pueden
incluir los siguientes:A.Muestras provenientes de misiones de
colecta:Nombre comn del cultivo, gnero y especieNmero de
colectaUbicacin del sitio de colectaPas de origenFecha de
colectaFenologaFuente de colecta Nmero de plantas muestreadasB.
Muestras recibidas como donacin:Nombre comn del cultivo, gnero y
especieNombredelaaccesinuotraidentificacinasociadaconla
muestraInformacindelpedigrydatosdelinstitutodemejoramiento (para
las lneas de mejoramiento)FenologaFuente de adquisicinPas de
origenNmero de accesin del donante (si corresponde)Diferenciacin
genticaLasnuevasmuestrasdebensergenticamentedistintasde cualquier
otra accesin ya registrada en el banco de germoplasma. Dos muestras
pueden tener nombres idnticos o muy parecidos, e idnticas
caractersticas de grano, pero pueden ser genticamente
muydiferentes;mientrasquelasmuestrasconnombresmuy diferentes pueden
ser genticamente
similares.Paraidentificarduplicados,sepuedenemplearmtodos
morfolgicos,bioqumicosymoleculares,dependiendodelas 17Manual para
el Manejo de Semillasfacilidades y los recursos disponibles en el
banco de germoplasma. Se pueden llevar a cabo las siguientes
pruebas:MorfolgicasEl material detectado como presunto duplicado se
cultiva junto, en el campo o en un invernadero, y se comparan las
diferencias entrecaractersticasmorfolgicascomoalturadelaplanta,
tiempo de floracin, tamao de la flor y de las hojas, y forma y
color de stas.La accesin candidata se define como distinta cuando
difiere de manera significativa en al menos una caracterstica con
respecto a las accesiones ya registradas en el
banco.Laspruebasdediferenciacinbasadasenlamorfologa pueden ser
similares al grupo de caractersticas especficas del
cultivoquecumplenconlasnormasestablecidasporlaUnin
InternacionalparalaProteccindelasObtencionesVegetales
(UPOV,1991).Siesnecesario,estascaractersticassepueden evaluar
durante dos o tres ciclos de cultivo. Sin embargo, esto puede no
resultar prctico en razas nativas con alta variabilidad dentro de
la accesin.Lapruebateselprocedimientoestadsticoparaevaluarla
diferenciacin.BioqumicasCuandolacomparacinfenotpicanoarrojasuficienteevidencia
dediferenciacin,sepuedenemplearmtodosbioqumicoscomo
laelectroforesisdelasprotenaseisoenzimasdelassemillas
paracompararmejorloscaracteresmorfolgicosydiscriminarlas muestras.
Moleculares LosmarcadoresdeADNcomolosdeAFLP(Polimorfismodela
longitud de los fragmentos amplificados), los de SSR (Repeticiones
desecuenciasimple)ylosdeSNP(Polimorfismodeunsolo
nucletido)ofrecenvaliosasherramientasdediscriminacinyse pueden
aplicar con xito para verificar la relatividad gentica entre
muestras, siempre y cuando este enfoque sea factible y efectivo en
costos. Para mayor informacin sobre los mtodos moleculares, se
sugiere consultar a de Vicente y Fulton (2003).
Siseconfirmaquelasmuestrascomparadassonduplicados,
serecomiendaalosbancosdegermoplasmahacerunsololote con las semillas
y tratarlas como una sola pieza.Si la muestra es idntica a una
accesin existente, consrvela bajo el nmero de la accesin
original.18Manuales para Bancos de Germoplasma No. 8Sanidad de las
semillasCada muestra debe ir acompaada de un certificado
fitosanitario ydedeclaracionesadicionalessegnserequieradeacuerdo
con las regulaciones fitosanitarias del pas anfitrin (ver Captulo 7
para ms
detalles).Lasmuestrasdesemillassedebeninspeccionarmedianteun examen
visual bajo un microscopio estereoscpico.stas deben
estarlibresdepatgenos,hongos,infeccionesbacterianasy virales, e
insectos.Calidad y cantidad de las semillasLas semillas deben ser
de la ms alta calidad y estar disponibles en una cantidad adecuada
para el
almacenamiento.Engeneral,elporcentajegerminadonodebeserinferior
al85%enlasespeciescultivadasniinferiora75%enlas
especiessilvestres(paramayorinformacinsobrepruebasde germinacin,
ver Captulo 5). Lacantidaddesemillasdebesersuficienteparahacerporlo
menostresregeneraciones.Estogarantizarquehayasemillas
disponiblesparaotrasiembrainclusosielprimerintentode regenerar
fracasa (ver Recuadro 2.1).Qu sucede si no se cumplen las
condiciones mnimas?Si la muestra no cumple las condiciones
requeridas, asigne un nmero
temporalhastaquelamuestraestlistapararecibirunnmerode registro
permanente. El nmero temporal se debe distinguir fcilmente de los
nmeros de otras accesiones.Recuadro 2.1. Unidad base para el
registroElnmeromnimodesemillasparaunregistro(unidadbase)sepuedecalcularapartirdeltamaodemuestra
estndar utilizado para regenerar y de la viabilidad de la muestra,
de acuerdo con la siguiente ecuacin:Nmero de semillas requeridas
para registro = Poblacin de plantas deseada para la regeneracin x
nmero mnimo de regeneraciones / (% de Germinacin x Establecimiento
de campo esperado 1*%)Ejemplo: Poblacin de plantas deseada para
cada regeneracin = 100 Germinacin = 95% Establecimiento en campo
esperado = 90%Nmero mnimo de regeneraciones (factor de seguridad) =
3 Unidad base o nmero mnimo de semillas para el registro =(100 x 3)
= 351 semillas(0.95 x 0.90) La germinacin y el establecimiento en
campo se expresan en decimales; por ejemplo, 95% se expresa como
0.95. El establecimiento de la planta es generalmente 5% menos que
el porcentaje de germinacin en malas condiciones y 1% menos en
buenas condiciones.19Manual para el Manejo de SemillasAcuerdos y
permisos Contactealcolectorodonanteparaobtenerlosacuerdosnecesarios
que definan el estatus de las muestras con respecto a conservacin y
uso posterior. Accesiones duplicadas Confirme la duplicacin y
asigne las semillas como un nuevo lote bajo el nmero de la accesin
original.Datos de pasaporte incompletos
Escribaalcolectoroaldonantedelgermoplasmaparasolicitarla informacin
que falte.Deciencias en la sanidad de las semillas
Silassemillascontienenpatgenosoinsectos,envelamuestraa
unfitopatlogooentomlogoparatratamiento.Siesposibleadquirir
unamuestraparareemplazarla,inmediatamenteincinerelamuestray
registrelaaccintomadaylajustificacin;soliciteunanuevamuestra al
donante.Cantidad y calidad inadecuada de las semillas Regenere la
muestra inmediatamente.Reestructuracin de las muestras
Encultivosdeautopolinizacin,siunamuestraconstadeuna
mezclafsicadedosomsespeciesolneasdiferentes,stasse
puedensubdividirymantenercomoaccesionesdistintas.Eneste
caso,lasubdivisindelamuestraensuscomponentesayudaa
mantenerlaintegridadgentica.Sinembargo,nosubdividasila
variacinenlamuestraoriginalescontinua,comoocurreenlos cultivos de
alta polinizacin cruzada. Paso 2: Procedimiento para el
registroSilamuestracumpleconlascondicionesmnimasdescritas
anteriormente, se puede aceptar para registro y se le puede asignar
un nmero de accesin utilizando el siguiente procedimiento:1.
Organice el material en orden alfabtico por nombre de la variedad o
en orden numrico por nmero de colecta, dependiendo de la
identificacin suministrada.2.
Revisetodoslospaquetesconellistadoqueacompaalas muestras.3. Si no
se ha entregado un listado o las semillas no corresponden
alosdatos,prepareunnuevolistado.Verifiquedenuevopara confirmar que
todos los paquetes se han incluido.4.
Reviseelarchivodedatosdepasaporteparadeterminarel ltimo nmero de
accesin asignado.Si las muestras se registran sin los datos de
pasaporte adecuados, su identidad y estado biolgico seguirn siendo
desconocidos, lo cual va a obstaculizar su uso. Si la regeneracin
arroja muestras con baja viabilidad o muy pocas semillas, la
accesin se puede perder y quedar un vaco en el inventario.
20Manuales para Bancos de Germoplasma No. 85. Asigne el siguiente
nmero de accesin, en orden ascendente, a la primera muestra en el
listado y los nmeros consecutivos a las muestras subsiguientes.6.
Con un marcador permanente escriba con claridad el nmero de la
accesin en el paquete y en el listado de las nuevas muestras.7.
Ingrese la informacin en los archivos de datos de pasaporte del
sistemadedocumentacindelbancodegermoplasma.Para
cadaaccesin,registretodoslosdatosdepasaporte,losdatos
depasaporteoriginalesylafechaderegistroenloscampos designados del
archivo de datos de pasaporte.8. Si faltan datos, deje el espacio
en blanco y contacte al donante para que proporcione la informacin
faltante.Procedimientos de numeracin para nuevos bancos de
germoplasmaElsistemadenumeracindeunbancodegermoplasmadebeser
sencillo y
prctico.Utiliceunsistemaestrictamentenumrico,queseasecuencial (1,
2, 3). A los nmeros asignados, por lo general los precede un
acrnimo(comoBGKparaBancodeGermoplasmadeKenia)
paraidentificarcadamuestraconsubancodegermoplasma
registrado.Lainformacinadicional,comoaodeadquisicin
ycdigodecultivo,nosedebeincorporaralnmerodeuna
accesin.Cuandosemantienengrandescoleccionesdegermoplasmase puede
asignar a cada cultivo una numeracin de accesin aparte, pero
secuencial.Este mtodo no se recomienda si el banco es pequeo o
tiene muchos
cultivos.Cuandoutiliceunsolosistemadenumeracin,eviteasignar nmeros
reservados a cultivos especficos (por ejemplo, 1 a 500 para maz,
501 a 1000 para caup) o a especies
silvestres.DocumentacinUnaspectoimportantedelprocesoderegistroesdocumentarla
informacin recibida con una muestra.La informacin documentada en el
registro contiene los datos de pasaporte, es decir, la informacin
bsica que permite identificar y manejar las
accesiones.Granpartedeestainformacinseregistracuandolamuestra
secolecta,ovieneconlamuestracuandostaserecibede
otrasfuentes.Elusodelistasdedescriptoresinternacionalmente
aceptadosparadocumentarlosdatosdepasaportesimplificael
intercambiodedatosentrebancosdegermoplasma.LaListade Descriptores
de Pasaporte para Cultivos Mltiples desarrollada por la FAO y el
IPGRI est disponible en
http://www.bioversityinternational.org/Publications/pdf/124_ES.pdf.21Manual
para el Manejo de SemillasLectura complementariade Vicente, C. y
Fulton, T. 2003. Tecnologas de marcadores moleculares
paraestudiosdediversidadgenticadeplantas:Mdulode
aprendizajeVol.1.IPGRI,Roma,Italia.Disponibleenladireccin
http://www.bioversityinternational.org/publications/pubfile.asp?ID_PUB=1015.Engels,
J.M.M. y Visser, L. (eds.). 2003. A guide to effective management
ofgermplasmcollections.IPGRIHandbookforGenebanksNo.6. IPGRI, Roma,
Italia. (prximamente disponible en
espaol)UninInternacionalparalaProteccindelasObtencionesVegetales
(UPOV).1991.ConvenioInternacionalparalaProteccindelas
ObtencionesVegetales.UPOV,Ginebra.Disponibleenladireccin
http://www.upov.int/es/publications/conventions/1991/act1991.htm.223.
Limpieza3. LIMPIEZA DE LAS SEMILLASEn qu consiste la limpieza de
las semillas?Lalimpiezadesemillaseslaeliminacinde
desechos,materialinerte,semillasdaadase
infectadas,ysemillasdeotrasespeciesconel
findemejorarlacalidaddelasmuestraspara almacenamiento (ver Diagrama
de Flujo 3.1).Por qu limpiar las semillas?Limpiar las
semillas:reduce el volumen durante el transporte porque se eliminan
materiales extraos;mejoralapurezadelamuestraporquese eliminan las
semillas daadas e inmaduras; optimizaelespaciodealmacenamientoy
reduce los costos.Los cultivos de frutos pueden requerir una
limpieza previapararetirarlashojasyramas,locual reduce el volumen y
evita la posible dispersin de enfermedades y plagas. Cundo se deben
limpiar las semillas?Lassemillassedebenlimpiarinmediatamente
despusdecolectarseotanprontolleguenal
bancodegermoplasma.Losfrutospuedenser suaves y carnosos, como las
drupas cuya pulpa es carnosa, o duros y coriceos como las
vainas.Por lo tanto, el primer paso en la limpieza consiste en
extraer las semillas.Silassemillasnosepuedenmanipularde inmediato,
los frutos se pueden almacenar por un
perodocortoantesdeextraerlassemillas.Los
frutossuavessealmacenanmejora10-15Cen condiciones de humedad
suficientemente alta para evitar que se sequen.Los frutos duros o
secos se almacenan mejor a la sombra, dispuestos en capas
delgadas.Es esencial que el aire circule libremente
entrelosfrutoshmedos.Parafacilitaresto,los frutos se deben mantener
en recipientes ventilados como bandejas con agujeros o mallas de
alambre en el fondo, o en bolsas de malla de nylon. 1.Introduccin2.
Adquisicin y registro del germoplasma2.1 Adquisicin del
germoplasma2.2 Registro del germoplasma3. Limpieza de las
semillas4. Determinacin del contenido de humedad y secado de las
semillas4.1 Determinacin del contenido de humedad de las semillas
4.2 Secado de las semillas5. Determinacin de la calidad de las
semillas5.1 Pruebas de viabilidad de las semillas5.2 Pruebas de
sanidad de las semillas5.3 Pruebas para verificar la introduccin
inadvertida de transgenes en las semillas6. Empaque yalmacenamiento
de lassemillas6.1 Empaque de las semillas6.2 Almacenamiento de las
semillas7. Distribucin delgermoplasma8. Monitoreo yregeneracin
delgermoplasma8.1 Monitoreo del germoplasma8.2 Regeneracin del
germoplasmaMantener accesiones en un banco de germoplasma es
costoso. Conserve en almacenamiento slo semillas limpias y de alta
calidad.23Manual para el Manejo de SemillasREVISE SI EL MATERIAL
RECIBIDO ES DE FRUTOS SECOS O CARNOSOSREVISE SI EL CONTENIDO DE
HUMEDAD DE LAS SEMILLAS (CHS) ES ADECUADO PARA TRILLAR O
LAVARREVISE SI LA MUESTRA SE PUEDE TRILLAR MECNICAMENTEDETERMINE LA
CONDICIN FSICA DE LAS SEMILLASFRUTOS SECOS SI ES DE FRUTOS
CARNOSOS, DETERMINE EL MTODO DE EXTRACCIN ADECUADOEXTRAIGA LAS
SEMILLASHAGA UN SECADO PREVIOHAGA TRILLA MECNICAHAGA TRILLA
MANUALPROCEDA A DESINFECTAR LAS SEMILLASELIMINE LOS DESECHOS QUE
VIENEN CON LA MUESTRAREGENERE LA MUESTRAOBTENGA UNA NUEVA
MUESTRATRATE DE RECUPERAR TANTA SEMILLA COMO SEA POSIBLELa muestra
requieretrilla?El CHS es ptimo?La muestraest sana?La accesinest
libre de desechos?Las semillasestn llenas e intactas?Hay
sucientesemilla para almacenar?Se puederealizar mecnicamente?Se
puedeobtener una nuevamuestra?El procesode desinfeccin es difcil o
costoso?ELIMINE LAS SEMILLAS DAADAS Y VACASARCHIVE LA INFORMACIN
SOBRE EL PROCESO DE LIMPIEZAPROCEDA CON EL SECADONO NONONONO NONONO
NOSSSSSSSSSDiagrama de Flujo 3.1. Limpieza de las
semillas24Manuales para Bancos de Germoplasma No. 8Extraccin de las
semillas de los frutosLas semillas deben estar maduras antes de la
extraccin. Si no lo estn, los frutos se pueden poner a madurar con
las semillas adentro dejndolos en un ambiente fresco, bien
ventilado. Las condiciones de almacenamiento
debensimularlasdelaplantamadre.Losprocedimientosparala extraccin de
semillas varan de acuerdo con el tipo de fruto.Extraccin de
semillas de frutos secos dehiscentesGeneralmente, los bancos de
germoplasma reciben semillas provenientes de frutos secos
dehiscentes despus de la trilla. En algunos casos, sin embargo, las
reciben en frutos como cabezuelas o como inflorescencias que es
necesario separar de la vegetacin.Muchos frutos secos dehiscentes
(cpsulas, silicuas, folculos y vainas
dehiscentes)seabrenfcilmenteduranteelsecadocuandoestn
dispersosenunacapadelgadaconsuficientecirculacindeaire.La liberacin
fsica de las semillas de sus frutos vara segn la especie. En
algunas, un movimiento leve como rastrillarlas, sacudirlas o
dejarlas caer
essuficienteparaquesalgantodas.Lassemillasdeciertasespecies
comoalgunasleguminosasmantienenunafuerteuninatravsdel funculo y las
semillas pueden requerir extraccin manual o trilla. La trilla
tambin es necesaria cuando las semillas se reciben como cabezuelas
(maz,milloperla,etc.).Estosedebehacercuandoelcontenidode humedad de
las semillas se encuentra entre el 12 y el 16% con el fin de
minimizar el dao a las
semillas.Lassemillassepuedentrillaryaseaenformamanualomecnica.Latrillamanualeselmtodopreferidoporquelaprobabilidadde
daarlassemillasduranteesteprocesoesmenor.Lassemillasse
puedentrillarcolocndolasensacosoesparcindolassobreun
pisodetrillaygolpendolasconpalos.Otromtodoparaextraer las semillas
unidas fuertemente a las vainas es frotarlas con cuidado entre dos
superficies speras, como caucho, lija o piedras, teniendo cuidado
de no escarificarlas o
aplastarlas.Cuandoseusantrilladorasmecnicas,esesenciallimpiarlas
mquinas con un cepillo o un soplador de aire entre lotes
para:-evitarcontaminacinconsemillasdeaccesionespreviamente
trilladas; y-prevenir la transmisin de enfermedades y plagas de una
accesin a otra.Extraccin de semillas de frutos secos
indehiscentesLaextraccindelassemillasdealgunosfrutosindehiscentespuede
requerirrupturamecnica.Parafacilitarquelosfrutossetornen
quebradizosysepuedanextraerlassemillas,esnecesariohacerun secado
inicial.25Manual para el Manejo de SemillasLas semillas de frutos
ms grandes (como el man y los frijoles) se pueden extraer rompiendo
cada fruto manualmente aplicando tratamiento mecnico sin daar las
semillas.Los frutos indehiscentes ms pequeos (como el garbanzo y
las brassicas) se pueden romper por medio de la trilla como ya se
describi.Lasvainasconmaterialpegajoso(comoProsopiscineraria)
necesitan varios ciclos intermitentes de trilla y secado.Tcnica de
sudoracin para las gramneas forrajerasLa sudoracin es una tcnica
til para mejorar la madurez y facilitar la trilla y la limpieza de
algunas semillas de gramneas tropicales que se
conservanmuyjuntasdentrodelasglumas.Latcnicaconsisteen apilar las
cabezuelas recin cortadas, envolvindolas en pasto o en lona para
que se calienten o suden, y dejndolas a la sombra durante tres o
cuatro das, evitando que se sequen. Pasado este tiempo, las
semillas madurasseexpulsanconfacilidadsinnecesidaddetrilla.Lapilase
debe vigilar y voltear ocasionalmente para evitar que se caliente
de ms, puesto que las temperaturas muy altas durante la sudoracin
pueden deteriorar las semillas.Extraccin de semillas de frutos
carnososElmtododeextraccindefrutoscarnososvarasegneltipode fruto.La
mejor forma de extraer las semillas es cortar el fruto en dos o
cortar el extremo distal y exprimir el contenido en un
recipiente.Lassemillaspequeasdefrutospulposossepuedenextraer
macerandolapulpaymezclndolaconagua,dejandoquelas semillas se
asienten en el fondo y vertiendo despus la pulpa con cuidado.Las
semillas grandes (como las de Citrusspp.) se pueden separar de la
pulpa con frceps. La pulpa tambin se puede retirar lavando
lassemillasencribas,enaguacorriente,ofrotndolascontra
unamalladealambreyenjuagndolaspararetirarlapulpa.Para
cantidadesgrandesdepulpa,sepuedeutilizarunalicuadora,
perohayquetenercuidadodenosobrepasareltiempode
licuadoyarruinarlassemillas.Liceporperodoscortosyen
formaintermitente,avelocidadesbajas.Cubrirlascuchillasdela
licuadora con un revestimiento de caucho puede tambin minimizar el
dao.Para evitar dao fsico a las semillas durante este proceso, es
preferible el procesamiento manual.Despus de lavar las semillas,
squelas a la sombra donde circule
elaireyevitandoelcalor,dispuestasencapasdelgadassobre hojas de
papel absorbente. 26Manuales para Bancos de Germoplasma No.
8Semillas mucilaginosasSi las semillas estn recubiertas de muclago
(como en el tomate, el pepino y en algunos melones) y ste no se
puede sacar con el lavado, existen varias opciones:Con la mano
enguantada, frote con cuidado las semillas mojadas sobre una malla
de alambre (el tamao de la malla debe retener las semillas mientras
que la pulpa pasa a travs de ella).Frote con cuidado las semillas
con arena gruesa limpia y lvelas posteriormente para retirarles la
arena y el
muclago.Tambinpuedesecarlassemillasprimeroyfrotarlasluegopara
retirarelmuclagoseco.Asegresedequelassemillasnose peguen a la
superficie de secado y que estn bien separadas para evitar que se
peguen entre s durante el
secado.Pararemoverelmuclago,tambinseutilizalafermentacinde la masa
gelatinosa (a 20-25C hasta por tres das); el tratamiento cido
(solucin de cido clorhdrico al 2-4% adicionada a la masa en una
proporcin de 1:1, durante una hora), la digestin enzimtica (solucin
de pectinasa, 0.1% peso/volumen adicionada a la masa en una
proporcin de 1:40, durante 24 horas) y el bicarbonato de sodio
(solucin a 10% mezclada con la masa en una proporcin
de1:1,durante18-24horas).Lostratamientosprolongados pueden daar las
semillas; por esta razn, se deben utilizar con cuidado.Frutos con
pulpa rmemente
adheridaLosfrutosenlosquelapulpaestadheridafirmementealas
semillas(comolaalmendra)sepuedenprocesarempleandolos siguientes
mtodos:Sumerjalosfrutosencubetasuotrosrecipientesadecuados hasta
que estn suaves, pero no por mucho tiempo pues pueden empezar a
fermentarse, como lo indicaran las burbujas y el olor. Separe las
semillas de la pulpa de forma manual.Macere los frutos mojados para
separar la pulpa de las semillas.Despus de retirar la pulpa, lave
muy bien las semillas para eliminar cualquier rastro de pulpa. El
mejor mtodo es lavar bajo un chorro de agua.Drupas (frutos de
hueso)A las drupas (como el melocotn, la ciruela y el albaricoque)
se les puede retirar la pulpa en un procesador de alimentos (las
cuchillas sedebenprotegerconcaucho)paraevitarelriesgodedaar
lassemillas.Parapequeascantidadesdesemillas,tambines
convenienteretirarlapulpamanualmenteconuncuchilloafilado.
Despusdedespulpar,laveloshuesosenaguacorrientepara eliminar
cualquier rastro de pulpa y seque la superficie. Si se deben No
intente secar las semillas si sabe que son recalcitrantes y no
pueden sobrevivir la desecacin a un contenido de humedad
bajo.27Manual para el Manejo de
Semillasextraerlassemillasparaalmacenamiento,sequeloshuesosy rompa
cada endocarpio con unas tenazas, aplicando presin en el punto ms
ancho del eje longitudinal del hueso.Una alternativa es insertar
una cuchilla resistente en la hendidura y girarla.Es importante que
las semillas ortodoxas que se han separado de
losfrutossesequenrpidamenteatemperaturasadecuadaspara
reducirleselcontenidodehumedadparaalmacenamientoalargo plazo. Cmo
limpiar las
semillasLalimpiezanodebecausarnidaonidesperdicioalgunoalas
muestras.Sepuederealizardemaneramanualoconequipos
aunqueserecomiendaalosbancoslimpiarlasaccesiones manualmente por
las siguientes razones:La limpieza mecnica puede resultar en un
proceso de seleccin deaccesionesgenticamenteheterogneas(debidoaque
elpasoporaberturasmecnicasexcluyelassemillasmuy pequeas o muy
grandes).Losequiposrequierenunalimpiezarigurosayunajuste cuidadoso
entre tandas de accesiones. Paso 1: Separacin de los desechosEl
primer paso en la limpieza de la semillas es eliminar todos los
desechos (materiales que no son semillas) de la totalidad de la
muestra.Utilice cribas manuales con diferente tamao de malla para
eliminar desechos grandes y muy finos.Al limpiar accesiones
genticamente heterogneas, es importante devolver las semillas
pequeas al lote de la
accesin.Separelassemillasvacasycualquierotromateriallivianocomo
cascarillaquenohayasidoseparadoenelcribadomediante cernido2 o
colocndolas en un soplador de semillas3.
Paso2:Inspeccindelassemillasparadetectardao ocasionado por hongos o
insectosDisperse las semillas sobre una superficie plana bien
iluminada de color contrastante y observe cualquier seal visible de
infestacin. Utilice una mesa iluminada o una mesa de trabajo para
determinacin de pureza si se dispone de
ellas.2Lassemillassecolocanencestasplanasysearrojanalaire.Elvientohace
volar el material liviano como el polvo y los fragmentos de hojas
mientras que las semillas caen de nuevo en la cesta por ser ms
pesadas.3
Loslotesdesemillasecolocanenelcilindroverticalconectadoenlaparte
inferior a una corriente de aire impulsada por electricidad. La
corriente de aire en movimiento ascendente desplaza todo el
material liviano como cascarilla hacia la parte superior, mientras
que las semillas se acumulan en la parte inferior por ser ms
pesadas.28Manuales para Bancos de Germoplasma No. 8Si descubre que
las semillas estn mohosas o infestadas: asle la muestra afectada
del resto del
material;sequelassemillashastaobteneruncontenidodehumedad bajo, en
recipientes sellados con gel de slice, para evitar mayor dispersin
de hongos o
insectos;sisospechaquehayinfestacin,almacenelassemillasauna
temperaturabajoceroenuncongelador,durantesietedas,
paramatarlosinsectosantesderetirarlassemillasinfectadas
ycontinuarconlosprocedimientosnormalesdeempaquey
almacenamiento.Paso 3: Inspeccin de las semillas para detectar dao
mecnico y semillas vacasDisperse las semillas sobre una superficie
plana bien iluminada de color contrastante, como una mesa iluminada
o una mesa de trabajo para determinacin de pureza.Examine si existe
dao fsico o alguna semilla
vaca.Manualmentesepareydescartecualquiersemillavisualmente daada o
marchita.Separelassemillasvacasyelmateriallivianomedianteuna
corriente de aire como se describi anteriormente.Paso 4: Anlisis de
purezaLa pureza es una indicacin de qu tan limpio est el lote de
semillas. Lainformacinsobrelacomposicinrealdellotedesemillases
importante; el anlisis de pureza sirve para determinar si es
necesario hacerunalimpiezaadicional.Duranteelanlisisdepureza,cada
fraccin4desemillapuradelamuestradetrabajoseseparadela materia
inerte y de otras
semillas.Conunabalanzaelectrnica,peseunamuestradetrabajodeun
determinado peso (por ejemplo 250 g) del total del lote de
semillas, escogida al
azar.Disperselamuestrasobrelamesayseparemanualmente,con
pinzas,todaslassemillaspuras,oretirelasimpurezasconuna corriente de
aire, seleccionando o dejando que las semillas rueden por una
superficie inclinada.La pureza debe atribuirse a las muestras
libres no slo de semillas de malezas y otras especies cultivadas,
desechos y material inerte, sino tambin de semillas vacas,
inmaduras, daadas e infectadas. Los bancos de germoplasma deben
buscar la pureza absoluta es importante establecer estndares tan
altos como del 95% para la proporcin de semillas puras en las
accesiones. Si una accesin no cumple este estndar despus de la
limpieza inicial, debe volverse a limpiar tantas veces como sea
necesario hasta obtener la pureza absoluta.4 La International Seed
Testing Association (ISTA, 2005) especifica que una fraccin
desemillapuracontiene:(i)semillasintactasdeespeciesrealesaligualque
semillas muertas, marchitas, enfermas, inmaduras y pregerminadas;
(ii) aquenios y frutos similares, como la smara, con o sin
perianto, sin importar si contienen o no semilla verdadera, a menos
que sea evidente que no contienen ninguna; y
(iii)fraccionesdesemillaspartidas,aquenios,etc.,quetienenmsdelamitad
deltamaooriginal.Losbancosdegermoplasmadebenatribuirpurezaalas
muestrasnoslolibresdesemillasdemalezasyotrasespeciescultivadas,
desechosymaterialinerte,sinodesemillasvacas,inmaduras,daadase
infectadas.29Manual para el Manejo de SemillasEjemplo:Peso total de
la muestra de trabajo = 250 gPeso de las semillas puras = 245.2
gMateria inerte = 3.5 gOtras semillas = 1.3 gPureza (%) = 245.2 x
100 = 98.08%250 Peselafraccindesemillapurayexpreselapurezacomoel
porcentaje de peso de semilla pura sobre el peso total de la
muestra de trabajo, como se indica a continuacin.Pureza (%) =Peso
de las semillas puras (g)x 100 Peso total de la muestra de trabajo
(g) Paso 5: Verificacin Despus de la limpieza:haga otra inspeccin
visual de las muestras para verificar la pureza y la presencia de
semillas daadas.reviselamuestradereferencia(verCaptulo6)olosdatosde
referencia para comparar el color y la forma de las semillas, si
las muestras se han recibido despus de una
regeneracin.destruyacuidadosamenteelmaterialdedesechoparaevitarla
propagacin de insectos y enfermedades a otro material.Equipo tilEl
siguiente equipo es til en la limpieza de las semillas:Cribas: un
juego de cribas graduadas y apilables como las que se
usanparaevaluacindesuelos.Lostamaosmstilessonlos
nmerosestndar5,10,18,35y60,correspondientesaorificios
conuntamaode0.1574/4mm,0.787/2mm,0.394/1mm,
0.197/0.5mmy0.0098/25mm.Sepuedenutilizartambin cedazos de cocina
con diferentes tamaos de malla o un pao de tejido
gruesoTazasmedidorasdevidriodeunavariedaddetamaos:tazas medidoras
Pyrex de 1, 2 y 4 tazasBandejas pequeas, tazones para mezclar,
coladores, escurridores
yotrosrecipientesplsticos;tambinsontileslosutensiliosde cocina
comunesUtensiliosparacortar:uncuchilloafilado,uncuchillodesierra,
cuchillas de afeitar o una navaja de afeitar con cuchillas
desechables, tijeras podadoras de punta finaTabla para
picarAlicates tipo hombre solo30Manuales para Bancos de Germoplasma
No. 8Limas, lijas, ralladores de alambre y otras herramientas
abrasivasFiltros como los Melitta para el caf, nmero 6, y papel de
filtroLmpara con lente, lupa para portar en la cabeza y lupas
manuales con aumento de 7 a 14 vecesFrceps, pinzas, tenazasSecador
de pelo manual, preferiblemente de varias velocidades con la unidad
de calor
deshabilitadaSopladordesemillasunaparatomecnicoparacernirsemillas
para reducir la cantidad de desechos, especialmente en la semilla
de las gramneas (e.g., soplador de semillas South Dakota)Ventilador
pequeoLicuadora con las cuchillas forradas en cauchoBotellas con
atomizador de perilla ajustable
DocumentacinMuchosbancosdegermoplasmatiendenanodocumentarlos
procesosdelimpiezadelassemillas,exceptolafechaenquesta
sehaefectuado.Dadoquelascoleccionesdegermoplasmacon
frecuenciacontienenmaterialesdeespeciesconcaractersticas
desemillayfrutodiversas,yconsiderandoquelosprocedimientos
delimpiezavarandeacuerdoconelcultivoylasaccesiones,es
importantequetodoslosdatosasociadossecaptenyalmacenen
parareferenciafutura.Lossiguientesdescriptoressepuedenutilizar para
documentar informacin a nivel de accesin sobre la limpieza de las
semillas:Tipo de muestraMtodo de extraccinMtodo de trillaMtodo de
limpiezaFecha de limpiezaProporcin de semilla vaca, inmadura o
daada (%)Cantidad total o peso de las semillas despus de la
limpiezaPureza de las semillas (%)Lectura complementariaEllis,
R.H., Hong, T.D. y Roberts, E.H. 1985. Handbook of Seed Technology
forGenebanks.Volumen1.Principlesandmethodology.IBPGR,
Roma,Italia.Disponibleenhttp://www.bioversityinternational.org/Publications/pubfile.asp?ID_PUB=433.ISTA.2005.InternationalRulesforSeedTesting.Edition2005.
International Seed Testing Association, Bassersdorf, Suiza. Sitio
de la ISTA en la direccin http://www.seedtest.org.Schmidt, L. 2000.
Guide to handling of tropical and subtropical forest seed. Danida
Forest Seed Centre, Humlebaek, Dinamarca.31Manual para el Manejo de
Semillas4. Contenido de humedadEn los bancos de germo-plasma, el
contenido de hume- dad normalmente se expresa con base en el peso
fresco.4. DETERMINACIN DEL CONTENIDO DE HUMEDAD Y SECADO DE LAS
SEMILLAS4.1 Determinacin del contenido de humedad de las semillasQu
es el contenido de humedad de las
semillas?Elcontenidodehumedaddelassemillas(CHS)
eslacantidaddeaguaquehayenunasemilla.
Elaguaestpresentetantoenformalibrecomo
combinadaconloscompuestosqumicosdelas clulas, como los
carbohidratos y las protenas.El CHS se expresa en trminos del peso
del agua contenidaenunasemillacomoporcentajedel peso total de la
semilla antes del secado, conocido como peso hmedo o como base de
peso fresco (pf)(InternationalSeedTestingAssociation[ISTA],
2005).CHS (% pf) =peso fresco peso secox 100 peso fresco
Elcontenidodehumedadtambinsepuede expresar con base en el peso seco
(ps), es decir, laprdidadepesocomoporcentajedelpeso seco de las
semillas. CHS (% ps) =peso fresco peso secox 100 peso seco Por qu
es importante determinar el contenido de humedad de las semillas?El
contenido de humedad es el factor ms importante para determinar la
velocidad a la cual las semillas
sedeterioran,ytieneunimpactoconsiderableen
lalongevidaddelassemillasenalmacenamiento
enunbancodegermoplasma.Inclusopequeos
cambiosenelcontenidodehumedadtienenun
granefectoenlavidaenalmacenamiento.Es
importantedeterminarelcontenidodehumedad antes de almacenar las
semillas para predecir con 1.Introduccin2. Adquisicin y registro
del germoplasma2.1 Adquisicin del germoplasma2.2 Registro del
germoplasma3. Limpieza de las semillas4. Determinacin del contenido
de humedad y secado de las semillas4.1 Determinacin del contenido
de humedad de las semillas 4.2 Secado de las semillas5.
Determinacin de la calidad de las semillas5.1 Pruebas de viabilidad
de las semillas5.2 Pruebas de sanidad de las semillas5.3 Pruebas
para verificar la introduccin inadvertida de transgenes en las
semillas6. Empaque yalmacenamiento de lassemillas6.1 Empaque de las
semillas6.2 Almacenamiento de las semillas7. Distribucin
delgermopl
