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8/12/2019 BDP_22_-_Relearning_ABC.pdf

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O correcto desenvolvimento da flor necessita dos genesABC e dos genes SEPALLATA (inicialmentedesignados AGAMOUS LIKE ...)

Nature - Yanofsky et al. 2000

Pela impossibilidade de converter folhas emrgos florais....

35S::AP3 35S::PI flor com os 2 crculos exterioresde ptalas e os 2 interiores com estames.

Com o 35S:: AP3::GUS surge expresso do GUS em toda a flor masno fora da flor

necessrio qualquer outro factor para induzir afuno de B fora das flores.

(experincias que utilizaram uma construo que activa a transcrio activation tagging )


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SEP AGAMOUS LIKE ...

b) Triplo mutante sep1, sep2, sep3

d) Duplo mutante B e C

A perda de funo dos genes SEP individualmente no exibe nenhumfentipo notvel, mas uma mutao tripla produz um fentipo igual aum mutante duplo B e C , ou seja, consiste inteiramente de spalas epossui um desenvolvimento indeterminado .


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Isto permite fazer 2 concluses :

1 - Os 3 genes SEP so necessrios para o correctodesenvolvimento das ptalas, estames e carpelos

2 - Estes genes funcionam redundantemente .

- Se realmente for redundante, quala vantagem selectiva, a nvelevolutivo, de manter 3 cpiasfuncionais do mesmo gene?- SEP3 tem diferente expresso deSEP1 e 2 o que sugere diferentefuno


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Interaces moleculares entre ABC e SEP

1 - A transcrio dos genes independente nos mutantes ABC o RNA dosgenes SEP acumula-se normalmente, e nos triplos sep , a expresso dos genesABC normal.

2 Interaco entre protenas as protenas com domnio MADS ligam-se invitro como dmeros (homo ou hetero) no entanto in vivo estas combinaesno so conhecidas.

Ligao - CArGbox

Em Arabidopsis AG liga-se como homodmero ou comoheterodmero com SEP1 , mas AP3 e PI s formamheterodmeros entre si e no com os genes SEP o que excluia possibilidade da heterodimerizao como explicao danecessidade dos genes SEP e classe B para formao deptalas e de estames. (2000)

Identificando quais os genes de uma biblioteca de cDNA de flor queinteractuam com o complexo

AP3/PI verificou-se que interagem com AP1 e com SEP3

Assim, possvel que as protenas MADS das flores funcionematravs de interaces protena-protena

Como as protenas MADS formam dmeros entre si,a formao de tetrmeros aumentar acapacidade de ligao s CArG boxes


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AG no interage com AP3/PI directamente mas apenasatravs de SEP3

AP1 interage com SEP3 (possuem domnios activadores de

transcrio localizados no domnio C )

E como podem formar homodmeros, um destes dmeros

suficiente para fornecer o domnio de activao do

AP3 -PI

As protenas MADS podem-se associar em complexosmaiores do que dmeros

3 modelos que mostram como as protenas ABC e SEP interactuam umascom as outras e com o DNA (sequncia conservada CArG box ) paradireccionar a transcrio dos genes que determinam a identidade dos rgosflorais.

a - modelo quaternrio onde se postula que odomnio C-terminal das protenas MADs medeiaa interaco entre os dmeros.

b um factor tercirio interage via domnio C-terminal, alterando ou especificando a ligaoao DNA

c os dmeros ligam-se a sequncias CArG boxadjacentes no envolvendo interaces entreprotenas.


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Folhas vegetativas de plantas trangnicas triplos mutantes35S::PI;35S::AP3;35S::AP1 ou 35S::PI;35S::AP3;35S::SEP3

so transformadas em rgos petalides e nos mutantes

35S:: PI;35S::AP3;35S::SEP3;35S::AG

so transformadas em rgos estaminides .


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Isto mostra a existncia de complexos tercirios e

quaternrios de interaces protena-protena comobase molecular do funcionamento do modeloABC- SEP

A expresso especfica dos genes SEP3 nas flores,

restringe a aco dos genes ABC s flores.

Nature 2001

LEAFY interage com UFO paraactivar os genes da classe B - AP3 e PI

LEAFY interage com WUS paraactivar AG


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LFY activa os genes de identidade floral juntamente com umco-activador, WUS para a classe C e UFO para o gene AP3 daclasse B.Os mutantes ufo apresentam tambm problemas noposicionamento dos orgos florais.WUS episttico para AG no que respeita a determinaofloral, pois WUS necessrio para o meristema manter o seuestado proliferativo.

Current Biology Nov 2004

SEP4

Mutantes sep4 no apresentam fentipo mas um mutante sep1,

sep2, sep3 e sep4 apresenta os rgos todos tipo folhas.

Isto indica os genes SEPALLATA como responsveis tambm pelo

desenvolvimento das spalas.

SEP4 tambm gene de identidade de meristema floral


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Modelo actualizado de aco dos genes hometicosflorais


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O modeloQUARTETOTambmactualizado

Nature 2005

Expresso dos mRNAs dos genes ABCE


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ModeloQUARTETO


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Flower DevelopmentThe Arabidopsis Book,Number 8 2010.

URL:http://www.bioone.org/doi/full/10.1199/tab.0127

Fim do meristema de Inflorescncia. O meristema gasto com a

formao dos carpelos.

AG desliga o organizing center , pois reprime WUS


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WUS e AG - negative feedback loopWUS activa a transcrio de AG , que por suavez reprime a expresso de WUS

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