Biología 2º Bachillerato

Biología 2º Bachillerato Morfología y estructura celular Copyrigth José Reig

2004

En 1665, el inglés Robert Hooke, examinando al microscopio una laminilla de corcho, observó que estaba formada por pequeñas cavidades a las que denominó células, aludiendo con ello al parecido con las celdillas de un panal.

Tema 7: LA CÉLULA, CONCEPTO


2004Tema 7: LA CÉLULA, TEORÍA CELULAR

El verdadero conocimiento de la célula y todo lo que ella representa, ha sido el resultado de una suma de descubrimientos sucesivos debidos a gran número de científicos que merecen ser mencionados

Brown, que en 1833 descubre el núcleo

Purkinje, en 1839, introduce el término de protoplasma

Todos estos descubrimientos son el pie donde descansan las investigaciones posteriores de Schleiden y Schwan (1839) que les llevaron a determinar la teoría celular

SchleidenSchwan

“la célula es la unidad anatómica y fisiológica de los seres vivos”,


2004Tema 7: LA CÉLULA, TEORÍA CELULAR

Wirchow, en 1855, enunció el principio “omnis cellula ex cellula”,

La última aportación a la teoría celular es obra de Cajal, que demuestra que todas las células son independientes, es decir, unidades, incluso las neuronas.


2004Tema 7: LA CÉLULA

La historia de los decubrimientos celulares ha

estado ligada a los avances en microscopía

Microscopio de Hooke

Microscopio de 1880Microscopio actual

Microscopio óptico de investigación


2004

El descubrimiento del microscopio electrónico en 1936, y su posterior perfeccionamiento y comercialización, a partir de los años 50, permite dar un salto cualitativo y cuantitativo muy grande.El microscopio óptico tiene un límite en su poder de resolución, la longitud de onda de la luz visible; distancias menores de esta longitud de onda entre dos puntos no podrán apreciarse y los contornos serían imprecisos.

Curso de los electrones

Condensador

Objetivo

Lugar de la preparación

Bomba de vacío

ProyectorOjo

Lupa binocular

Pantalla fluorescente

Cámara fotográfica

Tema 7: LA CÉLULA

PODER DE RESOLUCIÓN DEL MICROSCOPIO ÓPTICO CON LA LONGITUD DE ONDA DE LA LUZ VISIBLE



PODER DE RESOLUCIÓN DEL MICROSCOPIO ELECTRÓNICO CON LA LONGITUD DE ONDA DEL HAZ DE ELECTRONES




2004

Los microscopios electrónicos pueden ser de dos tipos:

• De transmisión (el haz de electrones atraviesa los objetos)

• De barrido (El haz de electrones rebota sobre el objeto, que emite un haz secundario, que es el que se ve en pantalla. Sería semejante a las lupas binoculares

MICROSCOPIO DE TRANSMISIÓN Servicio de microscopia Universidad de Valencia

MICROSCOPIO DE BARRIDO Servcio de microscopía de la Universidad de Valencia

Tema 7: LA CÉLULA


2004CÉLULA

Pero no sólo los microscopios han evolucionado de manera sorprendente, también las técnicas para confeccionar las preparaciones y las coloraciones han avanzado considerablemente a lo largo de las últimas décadas. Todo ello nos ha permitido un conocimiento casi definitivo sobre las células.TÉCNICAS PARA

CONFECCIONAR LAS PREPARACIONES MICROSCÓPICAS

Material a estudiar Fijación

Lavado

Microtomo de mano o congelación

Montaje en fresco

Deshidratación

TinciónMontaje en

glicerogelatina

Inclusión en parafina

Deshidratación

Aclarado

Microtomo Minot

Pegado cortes

Desparafinado

Hidratación

Deshidratación

TinciónMontaje en

glicerogelatinaMontaje en Bálsamo de

Canadá

Montaje en Bálsamo de Canadá

TIPOS DE MICROTOMOS

Y

OBTENCIÓN DE CORTES


2004

• Microtomo de manoBiología 2º Bachillerato Morfología y estructura

celular Copyrigth José Reig 2004

• Microtomo de congelación


2004

• Microtomo tipo Minot, se caracteriza por ser móvil el bloque y fija la cuchilla. Para tejidos blandos

El grosor de los cortes oscila entre 10 y 20 micras


2004

Inclusión en parafina.-

Las parafinas son mezclas hidrocarburos saturados con punto de fusión entre 54º y 56º C.

1. Alcohol etílico 96º 1/2 hora

2. Alcohol etílico 96º 1/2 hora

3. Alcohol etílico absoluto 1/2 hora



6. Acetato de isoamilo 1/2 hora



9. Parafina a 56-58º estufa3/4 hora

10. Confeccionar el bloque


2004

Confección de las preparaciones

• cortes en baño de María con agua a 36-40º C

• portaobjetos impregnado con albúmina de Mayer

• estufa, a unos 58º C, durante media hora


2004

Batería

Desparafinación e hidratación

1 .- Xileno 1/2 hora

2 .- Xileno 1/2 hora

3 .- Alcohol etílico absoluto 1/2 hora

4 .- Alcohol etílico absoluto 1/2 hora

5 .- Alcohol etílico de 96º 1/2 hora

6 .- Agua


2004

Safranina

Xileno

Alcohol etílico


2004

Tinción y montaje de las preparaciones

Si los colorantes se encuentran en disolución acuosa se realizarán los 6 pasos de la desparafinación..

Si se hallan en disolución alcohólica o en disolventes apolares (esencia de clavo, etc.) se llegará al punto 5.

1.- Tinción

2.- Lavado con agua destilada

3.- Deshidratación mediante goteo de etílico absoluto

4.- Aclarado con creosota, aceite de clavo, xilol, etc.

5.- Montaje con Bálsamo de Canadá, Entellán, Euparal, etc.


2004

Muestras microtomos de mano-congelación


2004

Proceso de teñido y montaje de las preparaciones


2004

CÉLULAMaterial a estudiar Fijación en glutaraldehido

Lavado

Deshidratación

Inclusión en resinas epoxi

Ultramicrotomo

Recogida de cortes en rejillas

Contrastado con citrato de uranilo

Observación

Postfijación en tetróxido de osmio

Confección de cortes para microscopio electrónico

Ultramicrotomo

Cuchilla

Balsa

Recoge cortes


2004

Confección de cuchillas para el ultramicrotomo y manejo del mismo


2004


2004

Cuchilla de diamante

0’5 cm

Rejillas portaobjetos para microscopía electrónica

MATERIAL PARA MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA


2004ALGUNAS IMÁGENES OBTENIDAS CON EL M.E.T.

Bacilos en división Célula de Schwan

Granulocito

Mitocondria

Parénquima de hoja de guisante


2004TRATAMIENTO DE LAS MUESTRAS PARA LAS OBSERVACIONES CON EL MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE BARRIDO

FIJACIÓN LAVADODESHIDRATACIÓN

EN SERIES DE ETANOL

SOMETER A PUNTO CRÍTICO

MONTAR EN PORTA MUESTRAS

DORADO DE LAS MUESTRASOBSERVACIÓN


2004TRATAMIENTO DE LAS MUESTRAS PARA LAS OBSERVACIONES CON EL MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE BARRIDO

Filamento de donde proceden los electrones

Ánodo

Condensador

imagen

Generador de barrido

Cátodo

Especimen Colector

Fotomultiplicador

Objetivo

Control de aumentosHaz

Esquema del microscopio electrónico de barrido

Punto crítico

Equipo de dorado de muestras

Varias muestras ya doradas en los portamuestras


2004IMÁGENES OBTENIDAS CON EL MICROSCOPIO DE BARRIDO

Diatomea

Ojo de mosquito

Radiolario


2004

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