BIOLOGIA

FUNDAMENTO

El tipo de microscopio más utilizado es el microscopio óptico, que se sirve de la luz visible para crear una imagen aumentada del objeto. El microscopio óptico más simple es la lente convexa doble con una distancia focal corta. Estas lentes pueden aumentar un objeto hasta 15 veces. Por lo general se utilizan microscopios compuestos, que disponen de varias lentes con las que se consiguen aumentos mayores. Algunos microscopios ópticos pueden aumentar un objeto por encima de las 2.000 veces.

http://www.biologia.edu.ar/microscopia/microscopia1.htm

Entre los instrumentos ópticos conocidos con el nombre de microscopio se incluyen los llamados microscopios simples o lupas, compuestos por una sola lente, o un solo sistema de lentes convergentes; y los microscopios compuestos, cuya parte óptica consta de dos lentes, o dos sistemas de lentes convergentes: ocular y objetivo. El micoscopio simple da una imagen aumentada, derecha y virtual. El microscopio compuesto da una imagen aumentada, invertida y virtual.

USOS

Química (en el estudio de cristales)

Física (en la investigación de las propiedades físicas de los materiales)

Geología (en el análisis de la composición mineralógica de algunas rocas)

Biología (en el estudio de estructuras microscópicas de la materia viva)

Laboratorios de histología y anatomía patológica, donde la microscopía permite determinadas aplicaciones diagnósticas como el diagnóstico de certeza del cáncer, numerosas estructuras cristalinas, pigmentos, lípidos, proteínas, depósitos óseos, depósitos de amiloide entre otras

http://www.ecured.cu/index.php/Microscopio_%C3%B3ptico#Aplicaciones

TIPOS DE MICROSCOPÍA

Microscopía de campo brillante Esta forma de iluminación se utiliza para analizar elementos biológicos transparentes y sin manchas, invisibles con iluminación normal.

Microscopía en contraste de fase se usa principalmente para aumentar el contraste entre las partes claras y oscuras de las células sin colorear. Es ideal para especimenes delgados, o células aisladas.

Nomarski, microscopía diferencial de contraste de interferencia (DIC) Fue diseñado para observar relieves de especimenes muy difíciles de manejar, es muy utilizado en los tratamientos de fertilización in-vitro actuales. DIC se usa cuando el espécimen es muy grueso para usar contraste de fases

Microscopía de fluorescencia una sustancia natural en las células o un colorante fluorescente aplicado al corte es estimulado por un haz de luz, emitiendo parte de la energía absorbida como rayas luminosas

Microscopio confocal es un microscopio capaz de obtener imágenes tridimensionales de la célula

http://www.ipb.csic.es/servicios/Microscopia/uploads/3/6/2/2/3622788/microscopia_a_grandes_rasgos.pdf

Partes del microscopio compuesto moderno

• Sistema mecánico: Conjunto de piezas que sirven de soporte a las lentes y demás elementos (pie o base, columna, mecanismo de enfoque, platina, revolver, tubo).

• Sistema óptico: Conjunto de lentes responsables del poder de aumento y resolución (objetivos y ocular)

• Sistema de Iluminación: Elementos que producen las radiaciones (luz visible o no) y transmiten, reflejan y regulan tanto la intensidad como la cantidad de rayos que van a incidir sobre el espécimen (lámpara o fuente de iluminación, espejo, condensador y diafragma).

• Accesorios: Son aditivos que permiten extender las capacidades del instrumento (cámaras fotográficas, de video, computadoras, accesorios para dibujar, entre otros).

http://www.medic.ula.ve/histologia/anexos/microscopweb/MONOWEB/capitulo4_2.htm

La iluminación Köhler

La iluminación Köhler consiste en regular la marcha de los rayos de luz, centrando la mayor intensidad de luz y cubriendo exactamente el diámetro frontal de cada lente objetiva en su apertura numérica específica, de esta manera, poder aprovechar al 100% la luz emitida por la fuente emisora.

http://www.uv.mx/personal/jzamudio/files/2011/06/MANUAL-DE-INSTRUMENTACION-BASICA.pdf

Instrucciones

1Coloca un portaobjetos preparado en la bandeja de visionado de tu microscopio.

2Mira a través del ojo de tu microscopio para ver la muestra sobre el portaobjetos.

3Gira lentamente la perilla de enfoque en el microscopio hasta que puedas reconocer lo que estás viendo.

4Gira la perilla de enfoque fino hasta que los intrincados detalles de tu muestra comiencen a ser visibles.

5Gira el diafragma de tu microscopio.

6Date cuenta del claro contraste entre el modelo y el portaobjetos

7Ajusta la diapositiva en la bandeja para ver si es necesario obtener una vista completa de la muestra.

http://www.ehowenespanol.com/enfocar-microscopio-como_39337/

Instrucciones

1Encuentra el aumento en el lente ocular del microscopio compuesto. El lente ocular es la pieza por dónde miras. Normalmente, el lente tiene una magnificación de 10x.

2Busca el aumento impreso en el lente objetivo del microscopio que usas.

3Multiplica el aumento del lente ocular por el aumento del lente objetivo para determinar el aumento total. Si el lente ocular es de 10x y el lente del objetivo es 10x, por ejemplo, entonces el aumento total es de 100x. La ecuación es: magnificación ocular x aumento del objetivo = aumento total.

http://www.ehowenespanol.com/calcular-aumento-total-observa-microscopio-compuesto-como_185688/

PODER DE RESOLUCIÓN: es la capacidad de mostrar la imagen en sus detalles más finos. Está en relación inversa con el límite de resolución.

DISTANCIA FRONTAL: es la distancia de la lente frontal al preparado colocado en la platina, cuando está enfocado. Disminuye cuando aumenta la escala de reproducción del objetivo.

http://www.anatomiahumana.ucv.cl/biologia/top7.html

OBJETIVOS DE INMERSIÓN

La ventaja de los objetivos de inmersión consiste en la disminución o eliminación de la refracción de los rayos luminosos entre el aire y el objetivo, en consecuencia la luminosidad de la imagen está aumentada, mientras que en los objetivos secos, está disminuida.

http://www.medic.ula.ve/histologia/anexos/microscopweb/MONOWEB/capitulo4_4.htm

CUIDADO DEL MICROSCOPIO

1. Para transportar el microscopio deben utilizarse siempre las dos manos, sujetándolo por el brazo con una mano y por el pie con la palma de la otra.

2. Una vez colocado el microscopio en su sitio, no debe moverse hasta que finalice la práctica. Cuando se vaya a cambiar de observador se debe mover él y no el microscopio.

3. Mover siempre suave y lentamente cualquier elemento del microscopio.

4. Nunca poner los dedos en las lentes del ocular ni del objetivo. Si se ensucian dichas lentes se limpiarán con un paño suave de algodón, sin utilizar ningún disolvente.

5. No sacar de su sitio el ocular ni los objetivos, a no ser que vayan a ser sustituidos, en cuyo caso la operación debe realizarse lo más rápidamente posible, para evitar la entrada de polvo.

6. Asegurarse de que el portaobjetos está bien seco cuando va a ser colocado sobre la platina.

7. Al enfocar, sobre todo con los objetivos de mayor aumento, hay que evitar que el extremo del objetivo choque con la preparación. Para ello acercaremos el objetivo a la preparación mirando lateralmente y luego, mirando ya a través del ocular, enfocamos alejando el objetivo.

http://www.moodle19.manuelgvs.com/cuidado.htm