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7/24/2019 bioquimica soluciones

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I. DETALLES EXPERIMENTALES

1. Materiales de laboratorio- Vasos de precipitado

- Probetas

- Embudo

- Cocinilla

- Pisceta

2. Reactivos- Cloruro de Sodio al 10%

- Solucin saturada de Sulfato de monio

!. Material "u#mico- $uevos frescos de allina- Carne molida desrasada

-&ec'e fresca de establo

- $arina de trio(. Procedimiento E)perimental

a. voalbminaSe separ la clara de la *ema de 'uevo fresco de allina. &a

solucin no se dilu*.b. Solucin diluida de albmina de huevo

+espu,s de separar la clara- se bati ener,ticamente * se

mecl en un matra con un volumen de aua destilada 10

veces ma*or. &a solucin se filtr a trav,s de una asa doblepreviamente remo/ada en aua.

c. Protenas de la carneSe colocaron de carne molida

desrasada se aadieron m&


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de cloruro de sodio al 10% * se de/ reposar la mecla por 1 a

20 minutos aitando frecuentemente. &e filtr el l#"uido ro/o a

trav,s de una asa doble.

d. Protenas de la leche la lec'e de establo- se

aadi un volumen iual de solucin saturada de sulfato de

amonio. &a solucin saturada consisti en apro)imadamente 13

de sulfato de amonio en 2 m& de aua. Se form un

precipitado blanco "ue lueo se filtr utiliando una doble asa.

e. Albmina vegetalSe meclaron 2 de 'arina de trio en con 100 m& de aua

destilada. Se ait la mecla ener,ticamente durante !0

minutos. Se filtr lueo la solucin con a*uda de una asa doble.


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cuestionario

1. 4Qu efecto tienen las sales concentradas y las salesdiluidas en la solubilidad de las protenas

Cuando se aade una sal a una solucin de prote#na ocurre un

incremento en la solubilidad * esto se conoce con el nombre de


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solubilizacin por salado 5saltin in6. Este incremento inicial en la

solubilidad se debe a la estabiliacin de la prote#na efectuada

por un descenso en el coeficiente de actividad de los rupos

iono,nicos. medida "ue se aumenta la fuera inica- se

obtiene un m7)imo en la solubilidad seuido por un descenso enla misma "ue se conoce como insolubilizacin por salado

5Saltin out6. +urante la insolubiliacin por salado- ocurre

probablemente una competencia entre la prote#na * la solucin

salina por las mol,culas de aua disponibles para su

solvatacin- * entonces las interacciones prote#na8prote#na se

'acen m7s importantes.&a relacin entre la solubilidad 5S6 * la fuera inica 596 en la

rein de la insolubiliacin por salado es:log S=KsI

dondees el loaritmo de la solubilidad 'ipot,tica cuando I; 0

* Kses el coeficiente de insolubiliacin.


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En la pr7ctica- no ocurre la separacin completa de las prote#nas

puesto "ue 'a* siempre aluna superposicin de las curvas de

solubilidad de las prote#nas en una mecla. Sin embaro- la

precipitacin por sal constitu*e un m,todo mu* valioso cuando

se usa con/untamente con otros m,todos.

!. "Qu entiende por precipitacin reversible e irreversible delas proteinas

El proceso de precipitacin est7 relacionado con la

desnaturaliacin- siendo la fuera inica el aente

desnaturaliante "u#mico. Entonces- una precipitacin reversible

es a"uella precipitacin en la cual el precipitado de prote#na

formado inicialmente vuelve a su estado inicial mediante

cambios en:- &a polaridad del disolvente.

-&a fuera inica.

- El p$.

- &a temperatura.


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Reacciones de precipitacin de protenas

9nstrumental * reactivos :

Papel de filtro - solucin de prote#nas: pectona- elatina -

albumina - case#na embudo de vidrio tubos de vidrio

sulfato de amonio -acido ac,tico 51%-10%6- cloruro de

sodio -'idr)ido de sodio 510%6- acido n#trico - acido

sulf=rico * ac,tico 5cc6- acido tricloroacetico85%6 acido

sulfisalicilico 520%6 - sulfato de cobre - acetato de plomo

%-nitrato de plata 5%6-cloruro mercurioso52%6- cloruro

f,rrico - acido piccrico- acido clor'#drico %- etanol - acido

sulf=rico50.>>?6.

Sedimentacin de protenas con sulfato de

amonio

Curso de determinacin: en un tubo de ensa*o colocamos

1.ml de solucin proteica - areamos un volumen iual

de solucin saturada de sulfato de amonio * suavemente

aitamos la mecla .apareci un sedimento de la

precipitacin de las lobulinas - filtrar el li"uido atrave de

un filtro seco - a una parte del filtrado trasparente

calentamos 'asta ebullicin * observamos la coaulacin

de las albuminas "ue se encuentran en la solucin . a la

otra parte areamos un e)ceso de sulfato de amonio con

aitacin constante 'asta la interruccion de su

disolucin - aparece una turbide o copos de la albumina"ue se precipita 5comparamos con el filtrado inicial 6 - la

precipitacin de prote#nas con sales es un proceso

reversible * con la adicin de auas las prote#nas

nuevamente se disuelven . en solucin acuosa las


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part#culas proteicas est7n caradas e 'idratadas lo "ue

determina la estabilidad de sus soluciones . pero a alta

concentracin de sales - los iones "ue tambi,n est7n

'idratados producen la destruccin de la capa acuosa de

las mol,culas proteicas *a "ue con los iones de la sal - se

"ita la cara de la prote#na "ue se absorbio de en ella .

como resultados de estos dos procesos las soluciones

proteicas pierden su estabilidad - las particulas de la

prote#na se pean unas con otras - se arandan * - al final-

caen en forma de precipitado .


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