Upload
others
View
16
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
Caracterización de la raza equina pottoka
mediante marcadores genéticos
Andone Estonba
Fernando Rendo
Página 1 de 3
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
1. INTRODUCCIÓN.
Desde tiempos inmemoriales existen poblaciones de caballos salvajes en las
montañas Cántabro-Pirenaicas, algunas de las cuales se mantienen aún hoy en día en
estado salvaje o semisalvaje. Fenotípicamente son primitivos y robustos encontrándose
bien adaptados a su entorno.
Entre las razas autóctonas de la región pirenaica occidental nos encontramos:
• Euskal Herriko Mendiko Zaldia: conocido también con otros nombres como
Caballo del País y Yegua de Monte; se encuentra principalmente en Araba. Se
engloba dentro del grupo de los caballos denominados pesados.
• Burguete: se localiza en el noroeste de Navarra. Se originó a partir de cruzamientos
entre hembras Jaca Navarra y machos de razas francesas. Actualmente se considera
como caballo de tipo pesado.
• Jaca Navarra: también llamado pony Navarro; es una raza nativa localizada
principalmente en Navarra, englobada dentro del grupo de los caballos ligeros.
• Pottoka: también llamado pony vasco; representa el principal objeto de estudio de
este trabajo.
El Pottoka, también llamado pony Vasco, se encuentra en las tres provincias de la
Comunidad Autónoma Vasca, así como en el País Vasco Francés, aunque son consideradas
como razas diferentes (Álvarez, 1995). Más aún, es de sobra conocida la elevada
introgresión de material genético procedente de razas Shetland y Welsh en el denominado
Pottok francés.
Teniendo en cuenta el color de la capa y sus características morfológicas, pueden ser
clasificados en tres secciones diferentes: A, B o C, siendo A la sección que engloba a
aquellos animales con color de capa negro o castaño oscuro; B, la que engloba a animales
de color de capa pía o pinta y canela; y C, la que aglutina a caballos de raza Pottoka para
Página 2 de 3
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
los que se conoce o intuye morfológicamente su cruce con otras razas equinas (>50% de
sangre Pottoka).
La situación actual de los animales de raza Pottoka refleja la historia general de la
raza, encontrándonos no sólo ante una situación de riesgo respecto de su conservación,
sino también ante una evidente mezcla poblacional, donde se pueden observar animales de
raza Pottoka cuyas características morfológicas implican una clasificación de la raza en
diferentes tipos, así como una posible diferenciación racial surgida a lo largo del tiempo
debida, sobre todo, a los cambios incorporados en su manejo y cuidado.
Son estos hechos los que, en definitiva, fundamentan el interés por la realización del
proyecto aquí descrito para la caracterización de la raza mediante marcadores genéticos.
Más aún, ante la pérdida global de biodiversidad en el planeta, y en el marco de la
conservación de los recursos genéticos animales, la estrategia de “actuaciones locales para
solucionar problemas globales”, promovida por la propia FAO, se ha convertido en una de
las alternativas de mayor eficacia para responder a tales problemas. La conservación de
poblaciones locales proporciona diversidad al conjunto manteniendo combinaciones
genéticas únicas adaptadas a condiciones singulares. De ahí su interés.
Sin embargo, no es hasta después de 1996 cuando el interés por esta raza cobra cierta
fuerza, más si cabe, con la edición por parte de la Diputación Foral de Bizkaia de un libro
dedicado íntegramente al Pottoka y la aparición del Catálogo de Razas Autóctonas Vascas.
Anteriormente, tan sólo una decena escasa de trabajos se habían preocupado de la raza
Pottoka como tal, principalmente desde el punto de vista morfológico, etológico y
zoométrico (Ferreras (1935), Carreras (1983), Maguregui et al. (1992), Intxausti (1994),
Armendariz (1994),…)
Los primeros trabajos que abordaron el estudio genético de la raza Pottoka fueron
realizados hace apenas 10 años, y pueden resumirse en dos. El llevado a cabo en 1998 por
Pascual et al., y que se vio completado en el 2001 por Arruga et al., en donde
caracterizaron genéticamente diferentes poblaciones vizcaínas de raza Pottoka mediante
cuatro polimorfismos bioquímicos concluyendo la no presencia de consanguinidad dentro
Página 3 de 3
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
de las poblaciones y sí una divergencia genética entre ellas, lo cual podría sugerir una
subestructuración poblacional significativa dentro del conjunto de animales de raza Pottoka
de Bizkaia; y el llevado a cabo por Checa et al., en 1998, completado en el 2000 por Cañón
et al., y concretado en la Tesis Doctoral de Checa en el 2004, y en donde utilizando un
total de 13 marcadores microsatélites analizaron caballos de raza Pottoka, Jaca Navarra,
Losino, Asturcón, Caballo Gallego (denominados ponis atlánticos) y Mallorquín y
Menorquín (como ponis baleares), y utilizando como grupo de referencia el Pura Sangre
Inglés. Éstos concluyeron, que si bien la separación entre los troncos balear y atlántico es
evidente, existen demasiadas similitudes entre todas las razas de ponis atlánticas, a
excepción del asturcón que parece reflejar una diferenciación mayor respecto de las otras.
Más recientemente, Royo et al., (2005) realizó un trabajo de caracterización genética de
razas equinas ibéricas utilizando ADN mitocondrial. El análisis resultó en una
diferenciación entre los denominados ponis celtas (Gallego, Asturcón y Pottoka) y el resto
de caballos ibéricos analizados. También consideró a los ponis de la cornisa cantábrica
emparentados con los británicos, sobre todo con Exmoore, por una introgresión de machos,
mientras que el origen materno, testado mediante el ADN mitocondrial sería común para
todos los caballos ibéricos y provendría de África.
Finalmente, y centrándonos en los trabajos realizados por nuestro grupo, y
recogiendo el testigo lanzado por Jesús Altuna y Koro Mariezkurrena al respecto de la
posible aportación de la Genética en la elucidación de la historia evolutiva de la raza
equina Pottoka, desde el grupo de trabajo de Genética Animal ‘Abereak’ del Departamento
de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal (Universidad País Vasco / Euskal
Herriko Unibertsitatea) nos gustaría destacar que se ha venido trabajando en dicha raza
desde el año 2000 como parte de un proyecto más amplio sobre el análisis de la diversidad
de las razas autóctonas Cántabro-Pirenaicas. Así, desde hace aproximadamente 10 años, se
ha venido analizando el polimorfismo genético de diversas razas equinas, centrándonos
principalmente en la raza equina Pottoka por su especial singularidad.
Página 4 de 4
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
Los estudios genético-poblacionales basados en marcadores genéticos o del ADN
que hemos venido realizando han pretendido aportar información útil para establecer
correctas estrategias de conservación y manejo de animales. El interés del grupo se ha
centrado en los siguientes objetivos: (1) conocer la historia evolutiva y taxonomía de las
poblaciones, (2) caracterizar la consanguinidad, diversidad genética y diferenciación de las
poblaciones, y (3) la identificación de hibridación e introgresión entre poblaciones y/o
razas.
El uso de los marcadores genéticos en los estudios realizados por este grupo de
investigación ha sido de gran utilidad para aportar la base teórica en la gestión de planes de
conservación y manejo de las poblaciones autóctonas de las siguientes especies: Ovis aries
(razas Latxa, Sasi Ardi, etc.); Bos taurus (razas Pirenaica, Terreña, Monchina y Betizu);
Equus caballus (razas Pottoka, Euskal Herriko Mendiko Zaldia, etc.); Apis mellifera (abeja
negra local, etc.); Lepus castroviejoi, L. europaeus, L. granatensis (análisis de hibridación
entre las diferentes especies de liebres de la península); Engraulis encrasicolus (anchoa
europea), Reticulitermes spp. (termitas); Thunus spp. (atún), etc.
Centrándonos en la raza equina Pottoka, objeto principal del presente trabajo, de cara
a aportar información esclarecedora a la problemática descrita, desde el grupo ‘Abereak’,
liderado por la Dra. Andone Estonba, hemos pretendido aportar la experiencia en el ámbito
de actuación requerido, adquirida desde el año 1985 en que la investigadora principal
comenzó a trabajar en aspectos genéticos, en este caso del ovino Latxo (Estonba, 1994 –
Tesis Doctoral), para el que basándose en marcadores bioquímicos llevó a cabo un análisis
poblacional de las diferentes variedades y ecotipos presentes en aquel momento en la raza
Latxa. Posteriormente, el grupo de trabajo ha continuado aumentado sus conocimientos
dentro del área de la genética de poblaciones aplicada a la caracterización y conservación
de poblaciones animales, de forma que se implementó un sistema genético basado en
marcadores de tipo microsatélite que ha venido aplicándose en los controles genealógicos
de poblaciones ovinas que llevan realizándose de forma anual desde el año 2000. Este
mismo sistema genético ha sido aplicado para la caracterización genética de diferentes
Página 5 de 5
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
poblaciones ovinas, estando alguna de ellas en situación de riesgo respecto de su
conservación (Rendo et al., 2004). De la misma forma, sistemas de marcadores genéticos
de tipo microsatélite han venido aplicándose rutinariamente para la realización de controles
genealógicos y de trazabilidad en diferentes razas bovinas, así como para la realización de
un estudio de caracterización genética de cuatro razas bovinas, donde tres de ellas se
encuentran en diferentes grados de riesgo respecto de su conservación (Rendo et al., 2004).
Respecto a poblaciones equinas, cabe destacar la Tesis Doctoral titulada “Markari
molekularren bidezko Euskal Autonomi Erkidegoko eta Nafarroako bertako lau zaldi-
arrazen karakterizazio genetikoa”, y la publicación del artículo “Genetic diversity within
and among four South European native horse breeds based on microsatellite DNA analysis:
implications for conservation; Solis A., Jugo B.M., Meriaux J.C., Iriondo M., Mazon L.I.,
Aguirre A.I., Vicario A., Estonba A.; J Hered. 2005 Nov-Dec; 96(6):670-8. Epub 2005
Nov 2”, donde, entre otros, se describen análisis de caracterización genética de cuatro
poblaciones equinas, a saber, Pottoka, Euskal Herriko Mendiko Zaldia, Jaca Navarra y
Burguete.
Página 6 de 6
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
2. OBJETIVOS.
De forma general, puesto que aquí no sólo nos referiremos a los trabajos más
recientes, sino al global de trabajos que hemos venido realizando en la raza Pottoka, los
objetivos que hemos perseguido son los que figuran a continuación:
1. Caracterización genética de la población equina fundadora de la actual raza Pottoka
mediante el uso de marcadores genéticos nucleares (microsatélites y SNPs –Single
Nucleotide Polimorphysms) y mitocondriales (Solis et al., 2005), utilizando como
grupos poblacionales a estudio los facilitados por EPOFE (Euskadiko Pottokaren
Federazioa), y que se resumen en los siguientes:
1.1. Grupos poblacionales según distribución geográfica. Observación de las posibles
divergencias genéticas entre poblaciones separadas geográficamente y bajo el
supuesto de la inexistencia de flujo genético entre ellas. Inicialmente se consideran
como poblaciones independientes las correspondientes a las tres provincias: Araba,
Bizkaia, y Gipuzkoa, incluyendo dentro de cada grupo aquellos individuos cuyo
crotal hace referencia a la provincia determinada.
1.2. Grupos poblacionales según fenotipos. Atendiendo a los diferentes caracteres
morfológicos descritos para los diferentes grupos incluidos dentro de la raza.
Observación de la posible diferenciación genética entre los diferentes grupos
fenotípicos descritos. A este respecto, inicialmente se consideran los grupos
fenotípicos que establece el estándar racial: secciones A y B.
1.3. Grupos poblacionales generacionales. Según los datos facilitados por EPOFE, se
dispone de muestras de individuos a lo largo de varias generaciones. Resulta
interesante obtener un patrón de variabilidad genética a lo largo de las
generaciones.
Página 7 de 7
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
1.4. Análisis comparativo de la/s población/es de raza Pottoka recogidas recientemente
con las estudiadas previamente por Solis et al. (2005): Pottoka, Euskal Herriko
Mendiko Zaldia, Jaca Navarra y Burguete (poblaciones muestreadas en el 2000).
1.5. Análisis comparativo de la/s población/es de raza Pottoka con otras razas equinas,
a saber:
1.5.1. Razas equinas de la cornisa cantábrica (Losino, Asturcón y Galego),
teóricamente consideradas descendientes de un tronco celta, común a la raza
Pottoka (utilizando datos obtenidos de Checa, 2004, Tesis doctoral).
1.5.2. Razas equinas del resto de zonas peninsulares, así como europeas, asiáticas
y americanas (utilizando datos obtenidos de Luís et al., 2007).
1.6. Análisis de ‘antigüedad’ de la raza Pottoka (en vías de desarrollo). En este caso
utilizaremos determinadas secuencias de ADN mitocondrial características de la
raza Pottoka comparándolas con las obtenidas a partir del ADN mitocondrial de
restos óseos antiguos, tratando de dilucidar un posible origen preneolítico de esta
población, lo que descartaría, por tanto, que el Pottoka actual tuviera su origen
únicamente en los caballos traídos por los celtas durante el Neolítico (ver Jesús
Altuna y Koro Mariezkurrena).
2. Identificación Individual y Control Genealógico mediante marcadores genéticos
microsatélite con objeto de obtener la huella genética de cada animal para que pueda
ser incluida entre los datos que recoja el Libro Genealógico de la raza, y utilizada en la
verificación de las relaciones de parentesco, así como en la trazabilidad del animal.
Para ello se seleccionará un panel de marcadores microsatélite altamente discriminante,
de forma que se obtengan valores mínimos de Pi (Probabilidad de Identidad, definida
como la probabilidad de que dos individuos al azar presenten genotipos idénticos para
un conjunto de marcadores dado), y máximos de Pe (Probabilidad de exclusión,
definida como la capacidad de detección de falsas genealogías). Se tratará de
seleccionar un conjunto de marcadores microsatélite dando prioridad a aquellos
recomendados por la ISAG (International Society for Animal Genetics), de forma que
Página 8 de 8
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
los resultados obtenidos puedan ser comparados con los obtenidos por otros grupos
investigadores.
3. Por otro lado, los datos identificativos individuales serán utilizados para:
3.1. Estima de la probabilidad de asignación racial o poblacional certera que
proporciona el conjunto de marcadores microsatélite, combinando la información
de todos ellos.
3.2. Selección de aquellos marcadores microsatélite que presenten el mayor contenido
informativo a fin de optimizar el sistema genético-molecular de caracterización
genética individual y asignación racial en raza equina Pottoka.
4. Análisis de distribución poblacional de alelos diagnósticos para la capa de color
“alazán”. Mediante el uso de marcadores genéticos, en este caso de tipo SNP (Single
Nucleotide Polymorphism), y utilizando como metodología de detección la Técnica
SnaPshot basada en una minisecuenciación diferencial, capaz de detectar hasta 10
polimorfismos tipo SNP en una sola reacción. Se tratará de observar la presencia o
ausencia de los dos alelos diagnósticos (e y eª) en la población, de forma que pueda
calcularse el porcentaje de individuos portadores. En función de dicho porcentaje, se
valorará la inclusión o exclusión de los individuos portadores dentro del registro
genealógico, y por tanto, del estándar racial, así como se dispondrá de información útil
a la hora de dirigir los cruces necesarios para la conservación de la raza.
5. Generación de Banco de Muestras Biológicas y ADN para la raza Pottoka. El total de
muestras biológicas recibidas (principalmente sangre entera), así como el ADN
extraído de cada una de ellas, serán tratadas, etiquetadas, almacenadas y conservadas
de manera óptima para que puedan ser utilizadas con posterioridad en cualquier otro
tipo de trabajo, constituyendo así un Banco de Muestras Biológicas para la raza
propiedad de E.PO.FE., pero gestionado por el grupo de trabajo de la Universidad.
Página 9 de 9
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
Con el fin de conseguir estos objetivos hemos elegido marcadores de tipo
microsatélite, ampliando los 12 marcadores utilizados por Solís et al. (2005) hasta un total
de 17, por su alto grado de polimorfismo y por la facilidad con la que pueden ser
analizados mediante PCR. Además hay numerosos estudios que documentan la utilidad de
los microsatélites para la estimación de la distancia genética entre poblaciones
estrechamente relacionadas. Por último, son muy útiles también para el análisis individual
y control de la paternidad. También utilizaremos secuencias de ADN mitocondrial,
concretamente los datos aportados por Solís et al., 2005. Y por último, para el análisis del
color de capa alazana utilizaremos marcadores de tipo SNP.
Página 10 de 10
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
3. HIPÓTESIS DE TRABAJO.
1. H01: la población equina de raza Pottoka presenta una elevada divergencia
filogenética respecto de poblaciones equinas circundantes estudiadas por Solís et
al. (2005), así como respecto del resto de poblaciones de la cornisa cantábrica,
ibéricas restantes, europeas, asiáticas y americanas, manteniendo su singularidad
genética como raza equina independiente.
2. H02: la población equina de raza Pottoka presenta una elevada diversidad
intraracial, siendo ésta una característica óptima para la puesta en marcha de un
Programa de Conservación.
3. H03: el panel de marcadores microsatélite del que disponemos actualmente
permitirá configurar un sistema genético-molecular altamente discriminante para la
caracterización genética individual y asignación racial de los individuos de raza
equina Pottoka, permitiendo, entre otras, su utilización como sistema genético de
utilidad para el control de filiación de los animales incluidos en el registro de la
raza, así como controlar la trazabilidad de los animales.
4. H04: el sistema genético seleccionado para la detección de los individuos
portadores de alelos responsables de capa alazana permitirá:
4.1. Cuantificar la incidencia en la población.
4.2. Diagnosticar la coloración de capa de los descendientes de cada cruzamiento
planificado.
De esta forma se facilitará la adopción del criterio necesario respecto al color de
capa para la inclusión de los diferentes individuos en el registro de la raza.
Página 11 de 11
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
4. METODOLOGÍA Y DISEÑO EXPERIMENTAL.
El grupo ‘Abereak’ posee una amplia experiencia en el uso de marcadores genéticos
para la obtención de la Huella Genética Individual, considerando como tal al conjunto de
características genéticas que identifica de forma prácticamente exclusiva al individuo a lo
largo de su vida, e incluso postmortem. La huella de ADN se asemeja a un código de
barras individual. Es el resultado del análisis molecular del ADN, una combinación única
de variantes de ADN (alelos, haplotipos) para cada individuo, heredada de sus progenitores
y que transmite a la descendencia.
Metodológicamente, la obtención de la Huella Genética implica una serie procesos
que comienzan con procedimientos generales de biología molecular como la extracción y
purificación de ADN, seguido de la PCR (Polymerase Chain Reaction), para
posteriormente proceder con la secuenciación y genotipado del ADN (microsatélites,
SNPs, marcadores mitocondriales) mediante analizadores genéticos automatizados que
vuelcan los resultados a un ordenador, donde son tratados mediante programas específicos.
MUESTRA ANIMAL.
Para la realización de los objetivos descritos en el apartado anterior, ha sido
necesaria la obtención de muestra biológica (sangre preferentemente, aunque también es
posible la utilización de otros tipos de tejido) de un número representativo de animales de
cada uno de los grupos poblacionales a considerar.
A este hecho debe unirse la información recabada por la asociación de cada uno de
los individuos de la población global, para los que, en su mayoría, podemos contar de datos
genealógicos (los cuales se verían ratificados por el propio análisis genético) así como de
resto de datos morfológicos, de distribución geográfica, etc., que servirían de base para la
generación de los subgrupos poblacionales a estudio.
Página 12 de 12
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
Esto supone que el estudio realizado parte de unas condiciones verdaderamente
óptimas, pudiendo definirlo, por tanto, como un análisis genético exhaustivo de la raza
equina Pottoka, evidenciando la importancia de dicho trabajo para el desarrollo de futuros
programas de conservación y mejora llevados a cabo por la asociación.
MARCADORES GENÉTICOS.
La caracterización genética de la población global de Pottoka, y de las
subpoblaciones consideradas, se llevará a cabo mediante el uso de marcadores genéticos de
tipo microsatélite (muestreo actual) y mitocondrial (Solis et al., 2005). El panel de
microsatélites a utilizar comprenderá 17 marcadores, entre los que se encuentran los 12
marcadores descritos por Solís et al. (2005) y utilizados para la caracterización genética de
una muestra representativa de la población de Pottoka presente en el año 2000, así como de
otras poblaciones equinas autóctonas de la región pirenaica occidental, como son: Euskal
Herriko Mendiko Zaldia, Jaca Navarra y Burguete. Todos los marcadores se encuentran
entre los recomendados por la International Society of Animal Genetics en los últimos
Tests de Comparación Internacionales.
Para el caso de la detección de la capa alazana, se utilizarán determinadas variantes
del gen MC1R como marcadores genéticos (Marklund et al., 1996), para el que han sido
descritas tres variantes alélicas: E, e y eª , donde la presencia en homocigosis de e y eª, así
como el heterocigoto de ambas, proporcionaría al individuo el color de capa alazana que, a
priori, podría ser un carácter no deseado, atendiendo sobre todo a la frecuencia con que
estos alelos recesivos se encuentren en la población global de Pottoka.
Página 13 de 13
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
DESCRIPCIÓN DE LA MUESTRA ANIMAL ESTUDIADA HASTA EL MOMENTO.
Junto a las muestras que ya disponíamos desde el año 2000 y que sirvieron de base
para el trabajo recogido, entre otros, en la Tesis Doctoral de A. Solís (1995), desde
E.PO.FE se han remitido al laboratorio de Genética un total de 883 muestras sanguíneas
correspondientes a animales de raza equina Pottoka. Tras descartar muestras repetidas, con
escaso material biológico y/o con signos evidentes de rotura y posible contaminación,
finalmente se contabilizaron un total de 820 muestras.
Con posterioridad se nos remitieron los datos correspondientes, entre otros, a
‘Taldea’ o ‘Sección’ y a ‘Matrikula’ u ‘Origen Geográfico’ para dichas muestras.
Considerando los datos correspondientes a ‘Taldea’, siendo Talde A = animales de
capa negra o castaña, Talde B = animales de capa pía o pinta, y Talde X = animales para
los que no figuraba su capa; así como los datos correspondientes a ‘Matrikula’ (tomada
como Origen), siendo Origen Bi = animales de Bizkaia, Origen GI = animales de
Guipúzcoa, Origen AR = animales de Araba y Origen SO = animales para los que no
disponíamos de dato de matrícula, se procedió a clasificar a los individuos en los siguientes
grupos poblacionales:
1. 4 caballos de raza Pottoka con capa negra/castaña y de Araba (AAR).
2. 254 caballos de raza Pottoka con capa negra/castaña y de Bizkaia (ABI)
3. 480 caballos de raza Pottoka con capa negra/castaña de Gipuzkoa (AGI)
4. 3 caballos de raza Pottoka con capa negra/castaña y origen desconocido (ASO)
5. 2 caballos de raza Pottoka con capa pía/pinta de Bizkaia (BBI)
6. 39 caballos de raza Pottoka con capa pía/pinta de Gipuzkoa (BGI)
7. 1 caballo de raza Pottoka de capa desconocida y de Gipuzkoa (XGI)
8. 37 caballos de raza Pottoka de capa y origen desconocidos (XSO)
Página 14 de 14
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
Lógicamente el escaso número de individuos y la falta de información nos ha llevado a
no considerar las poblaciones AAR, ASO, BBI, XGI, XSO.
Entre las muestras descritas por Solís et al. (2005) y reanalizadas para el presente
proyecto se encuentran las siguientes:
1. 35 caballos de raza Pottoka de capa negra/castaña y de Bizkaia (00ABI)
2. 53 caballos de raza Pottoka de capa negra/castaña y de Gipuzkoa (00AGI)
3. 25 caballos de raza Pottoka de capa pía/pinta y de Gipuzkoa (00BGI)
4. 15 caballos de raza Pottoka de capa pía/pinta y de Araba (00BAR)
5. 61 caballos de raza Jaca Navarra (00JCN)
6. 24 caballos de raza Euskal Herriko Mendiko Zaldia procedentes de Gorbeialdea
(00EHG)
7. 113 caballos de raza Euskal Herriko Mendiko Zaldia NO procedentes de
Gorbeialdea (00EHNG)
8. 45 caballos de raza Burguete procedentes de Navarra (00BUN)
Al total de muestras recibidas se le practicó el protocolo habitual de alicuotado y
almacenado, seguido del procesado representado en la Figura 1.
Página 15 de 15
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
Posteriormente, las muestras han sido también analizadas siguiendo el protocolo
representado en la Figura 2.
Descripción de los marcadores microsatélite analizados
Se ha utilizado un panel de 17 marcadores microsatélite coamplificados en una
reacción de PCR multiplex, y detectados conjuntamente en un proceso electroforético en
analizadores genéticos automatizados del tipo ABI PRISM 3100 Avant y 3130 XL –
Applied Biosystems – (ver Tabla adjunta)
Página 16 de 16
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
PCR / ELECTROFORESIS MICROSATÉLITE
AHT4 (analizado también por Solís et al., 2005)
AHT5 (analizado también por Solís et al., 2005)
ASB2 (analizado también por Solís et al., 2005)
ASB17
ASB23
CA425
HMS1
HMS2 (analizado también por Solís et al., 2005)
HMS3 (analizado también por Solís et al., 2005)
HMS6 (analizado también por Solís et al., 2005)
HMS7 (analizado también por Solís et al., 2005)
HTG4 (analizado también por Solís et al., 2005)
HTG6 (analizado también por Solís et al., 2005)
HTG7 (analizado también por Solís et al., 2005)
HTG10 (analizado también por Solís et al., 2005)
LEX3
17 PLEX EQUINO
VHL20 (analizado también por Solís et al., 2005)
Página 17 de 17
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
5. RESULTADOS Y DISCUSIÓN.
Dado el carácter preliminar y divulgativo del trabajo aquí presentado, no se han
incluido el total de datos obtenidos a partir de las muestras recogidas durante 2007/08, sino
que se describen de forma didáctica y lo más comprensible posible, citando en cada punto
las conclusiones más relevantes que se han podido inferir a partir de dichos datos.
1. ANÁLISIS INTRAPOBLACIONAL
Respecto a la diversidad intrapoblacional, es decir, respecto a la variabilidad
genética presente en cada una de las poblaciones de Pottoka analizadas, se han obtenido
resultados para diferentes parámetros que muestran un alto grado de variabilidad genética
dentro de las 3 poblaciones de Pottoka actuales.
Estos parámetros resultan ligeramente superiores a los observados en otras
poblaciones equinas locales de la CAPV y Navarra, españolas y europeas (ver Solís et al.,
2005), lo cual puede ser debido a 1) un mayor número de animales utilizados, quedando
por tanto las poblaciones caracterizadas genéticamente con mayor precisión, y 2) al propio
sistema de gestión y manejo tradicionales que evita el flujo génico intra e interpoblacional.
El estadístico FIS cuantifica el exceso o defecto de heterocigotos observados en
una población respecto a una población ideal en equilibrio de Hardy-Weinberg (H-W). Los
valores positivos y significativos de FIS obtenidos en las tres poblaciones en estudio
indicarían un defecto de heterocigotos, o lo que es lo mismo un exceso de homocigotos,
para los microsatélites analizados. Son varias las causas que podrían explicar este defecto
de heterocigotos (o exceso de homocigotos): 1) consanguinidad entre los individuos y/o 2)
estructuración de las poblaciones consideradas (efecto Wahlund). A pesar de que la
primera de ellas parece evidente dado que nos encontramos ante prácticamente toda la
población muestreada en los tres casos, y por tanto, ante la presencia de animales
Página 18 de 18
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
emparentados, la segunda podría explicar en gran medida este exceso de homocigotos,
demostrando que dentro de las poblaciones descritas nos podemos encontrar
subpoblaciones, lo cual podría ser testado disponiendo de una mayor información al
respecto de distribuciones geográficas más precisas y/o subgrupos poblacionales
conocidos.
2. ANÁLISIS INTERPOBLACIONAL
Respecto a la diversidad interpoblacional, es decir, la variabilidad genética
existente entre las poblaciones consideradas, los valores obtenidos para el estadístico
FST muestran una ligera divergencia genética entre los individuos de capa
negra/castaña si su origen es vizcaíno o guipuzcoano, mientras que el resto de
comparaciones entre parejas de poblaciones revela una similitud genética entre los
grupos comparados. De esto se desprende el hecho de que las poblaciones resulten más
diferentes, genéticamente hablando, en función de a qué grupo poblacional (provincia)
pertenezcan que a su coloración de capa (A, castaña/negra o B, pía/pinta).
3. ANÁLISIS FILOGENÉTICO
En este punto hemos tratado de reflejar de un modo visual las diferencias o
similitudes genéticas existentes entre las diferentes poblaciones y/o razas analizadas,
resultado de los análisis previos descritos por Solís (2005) y de los preliminares
realizados hasta la fecha actual con las muestras recientemente recogidas.
Página 19 de 19
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
3.1. MARCADORES MICROSATÉLITES
ABI
0.001
AGI
BGI
100ABI
0.001
AGI
BGI
100
Figura 3. Árbol filogenético obtenido a partir de las frecuencias alélicas para 17 marcadores mediante POPULATION, utilizando distancia de Reynolds (unweighted), algoritmo Neiborgh-Joining y 1000 iteraciones de bootstrap.
La Figura 3 representa el árbol filogenético obtenido al considerar como unidades
taxonómicas las tres poblaciones actuales descritas. La distancia existente entre las
poblaciones refleja la cercanía o similitud entre ellas, de esta forma, destacaría una mayor
similitud entre las poblaciones de animales de raza Pottoka de origen guipuzcoano
(resaltados en azul) independientemente de su color de capa, es decir, los animales de capa
negra/castaña no se diferencian significativamente de los animales de capa pía/pinta,
mientras que sí se alejan de los animales de capa castaña/negra procedente de Bizkaia.
Falta incluir información al respecto de análisis comparativos con las poblaciones de
Solís 2005, Checa 2004 y Luis 2007.
Página 20 de 20
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
3.2. MARCADORES DE ADN MITOCONDRIAL
El ADN mitocondrial (ADNmt) de los mamíferos es haploide, de herencia materna, sin
recombinación entre sus genes y con una tasa de sustitución de nucleótidos 5-10 veces
mayor que el ADN nuclear. Estas características facilitan el uso del ADNmt como una
herramienta para determinar las relaciones entre individuos de una especie y entre especies
estrechamente relacionadas, con tiempos de divergencia muy recientes. La región D-loop
del ADNmt, concretamente, es la más variable en su secuencia, por lo que es muy útil para
el análisis filogenético de grupos estrechamente relacionados.
En equino el ADNmt ha sido frecuentemente utilizado para caracterizar la variación
intraracial (Kavar et al. 1999, Kim et al. 1999, Bowling et al. 2000, Mirol et al. 2002). En
cuanto al análisis de las relaciones filogenéticas interraciales, los trabajos más extensos son
los llevados a cabo por Vilá et al. (Science 291, 2001) y Jansen et al. (PNAS 99, 2002).
Vilá et al. (2001) mediante un análisis filogenético agruparon las secuencias de diferentes
razas de caballos antiguos y modernos en 6 clados (A-F), indicando un alto número de
ancestros de origen antiguo. Posteriormente, mediante el análisis de redes Jansen et al.
(2002) definieron un séptimo clado (G). A este respecto los resultados encontrados por
Solis et al., 2005 evidenciaron que:
1. Teniendo en cuenta tanto la diversidad haplotípica como la nucleotídica, la
variabilidad encontrada en las cuatro razas nativas ha sido muy alta, lo que se
asemeja con lo hasta ahora descrito para los marcadores microsatélites.
2. El análisis filogenético basado en distancias confirma la variabilidad de las razas
autóctonas analizadas en tanto que hemos encontrado haplotipos correspondientes a
los 6 clados descritos por Vilá et al. (2001). Nuevamente observamos el
paralelismo con los resultados de microsatélites.
3. Tres de las secuencias obtenidas en las cuatro razas nativas forman un nuevo clado
no descrito por otros autores. Estos haplotipos podrían ser propios de estas razas
Página 21 de 21
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
(ver Figura siguiente). Este resultado nos parece alentador para dilucidar el origen
de la raza Pottoka, puesto que si fueran detectados estos haplotipos en las muestras
de restos óseos antiguos (preneolíticos) existentes, revelarían un origen de nuestros
caballos anterior al establecido, sin perjuicio de una más que probable introgresión
de material genético de procedencia celta.
4. En general, el análisis del ADN mitocondrial de estas cuatro razas nativas apoya el
antiguo origen de las líneas maternas en la especie equina. El análisis en
profundidad de estas puede contribuir al esclarecimiento de la historia del caballo
doméstico en Europa.
Página 22 de 22
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
Página 23 de 23
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
5. CONTROLES GENEALÓGICOS Y TRAZABILIDAD.
Respecto a los resultados obtenidos para proceder a una correcta realización de
Controles Genealógicos y de Trazabilidad de los individuos de raza Pottoka,
debemos decir, que el panel de 17 microsatélites utilizado presenta valores cercanos
a 0 de Pi (Probabilidad de Identidad, definida como la probabilidad de que dos
individuos al azar presenten genotipos idénticos para un conjunto de marcadores
dado), y cercanos a 1 de Pe (Probabilidad de exclusión, definida como la capacidad
de detección de falsas genealogías). Más aún, el hecho de aumentar de 12 a 17
marcadores, respecto a los análisis previos de Solís et al. (2005), ha provocado que
tanto el parámetro Pi como el parámetro Pe disminuya y aumente respectivamente
en varios órdenes de magnitud, dando como resultado un panel de marcadores de
mayor eficiencia aún si cabe.
6. ANÁLISIS CAPA ALAZANA. MARCADORES SNP.
En cuanto a los resultados obtenidos para el análisis de los SNPs responsables de la
coloración de capa alazana, no podemos ofrecer un dato definitivo hasta que el total
de muestras sean procesadas en su totalidad. Actualmente, y tras haber procesado
aproximadamente las tres cuartas partes del total de muestras, el porcentaje de
individuos portadores del alelo e responsable del color alazán se sitúa en torno al
45%. Consideramos que es un valor importante, sobre todo desde el punto de vista
de excluir individuos como reproductores en función de si son o no portadores de
dicho alelo. De todas formas, una gestión adecuada de los apareamientos futuros
podría resultar en una disminución de este porcentaje, lo que debe ser considerado
por los responsables de la raza una vez que les remitamos los informes individuales
al respecto.
Página 24 de 24
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
7. CONCLUSIONES FINALES.
1. En cuanto al análisis de microsatélites, podemos concluir que las cuatro
razas equinas autóctonas de la Comunidad Autónoma Vasca y Navarra, en
concreto la raza Pottoka, presentan una alta variabilidad genética intraracial.
El hecho de que estas cuatro razas presenten niveles de variabilidad
ligeramente mayores que otras razas equinas Europeas o Americanas puede
ser consecuencia del manejo tradicional que tienen las primeras. Respecto al
DNA mitocondrial, la diversidad nucleotídica y haplotípica nuevamente es
alta, y a su vez similar en las cuatro razas.
2. La presencia de un exceso de homocigotos en la raza Pottoka es
probablemente debida en mayor medida a una subestructuración interna de
la raza en subpoblaciones aisladas y manejadas de forma diferente, más que
por efecto de la consanguinidad entre individuos.
3. A pesar de las referencias históricas sobre reducción en el tamaño
poblacional de las razas Pottoka y Jaca Navarra, los análisis de demografía
poblacional, basados tanto en el DNA microsatélite como en el DNA
mitocondrial, no han detectado cuellos de botella en las cuatro razas
autóctonas.
4. Los resultados obtenidos en el análisis filogenético basado en microsatélites
reflejan que:
a. A nivel intraracial, la raza Pottoka es más diversa genéticamente que
las otras tres razas autóctonas. Además existe mayor diferenciación
genética explicada por su origen geográfico que por su coloración de
capa.
Página 25 de 25
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
b. El Pottoka y la Jaca Navarra son más parecidos entre ellos que el
resto de ponis de la cornisa cantábrica entre ellos, y además, se
diferencian de forma notable de dichos ponis cantábricos.
c. Respecto a un conjunto amplio de razas a nivel mundial, el Pottoka,
y de forma conjunta el resto de razas autóctonas, forman un grupo
independiente bien diferenciado del resto de razas, incluso de
aquellas situadas en un origen filogenético hipotéticamente cercano
como pueden ser el resto de ponis europeos de origen celta.
5. Con respecto a la domesticación caballar, el hecho de que los haplotipos
encontrados en la región D-loop del DNA mitocondrial de las cuatro razas
autóctonas se localicen junto con haplotipos de otras razas dispersos a lo
largo de los árboles filogenéticos y de la red filogenética, apoya la hipótesis
de múltiples procesos de domesticación en áreas geográficas distintas a lo
largo de un amplio lapso de tiempo. Además, los nuevos y característicos
haplotipos encontrados en las cuatro razas autóctonas, y en concreto en
Pottoka, nos presentan la posibilidad de dilucidar el origen del caballo
autóctono, en concreto del Pottoka, analizando dichos haplotipos en restos
óseos antiguos preneolíticos.
6. Teniendo en cuenta el alto valor de la probabilidad de exclusión, el panel de
17 microsatélites utilizado resulta muy adecuado para el control de
parentesco y la identificación individual de los animales de raza Pottoka, y
más aún si lo comparamos con los resultado obtenidos para los 12
marcadores analizados por Solís (2005). El aumento de 12 a 17 marcadores
ha incrementado el potencial de asignación racial en las razas analizadas,
situándolo por encima del 80%, lo cual, aún siendo satisfactorio,
consideramos insuficiente para el propósito establecido debido
posiblemente a que la estrecha relación genética y el flujo génico existente
Página 26 de 26
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
entre ellas dificulta su demarcación. Quizás con un panel de marcadores que
rondara los 25 microsatélites se conseguirían resultados cercanos al 98%.
7. Respecto a los resultados descritos para la coloración de capa alazana, a
pesar de estar inconclusos, los consideramos elevados para establecer como
motivo de exclusión del Libro Genealógico a aquellos individuos portadores
del alelo e responsable, pero creemos factible una reducción progresiva de
la incidencia de este alelo con una gestión adecuada de los apareamientos
futuros.
8. Finalmente, y desde el punto de vista de la conservación de los recursos
genéticos animales, además del interés científico, económico y cultural de
las cuatro razas analizadas, el alto nivel de variabilidad de las mismas y la
importante disminución de diversidad genética debida a la posible pérdida
de cualquiera de ellas hacen imprescindible la conservación de las cuatro
razas autóctonas de la Comunidad Autónoma Vasca y Navarra, y en
particular de la raza Pottoka.
Página 27 de 27
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
BIBLIOGRAFÍA
Álvarez. J. 1995. Morfología y caracteres raciales en Asturcones. Ed. Caja de
Asturias. Oviedo.
Armendáriz, A. 1994. Prolegómenos para la estandarización de la raza Pottoka.
CIMA. Gobierno Vasco.
Arruga, M.V., Intxausti J.I., Monteagudo L.V., Pascual I. y Tejedor M.T. 2001.
“Análisis electroforético de cuatro loci de proteínas séricas en diversas poblaciones
del pony vasco-pottoka”. Archivos de zootecnia, vol 50, núm 189-190, p. 8.
Association Nationale du Pottok. 1970. Reglament du Stud-Book du Poney Pottok.
Ministère de L’Agriculture, de la Peche et de L’Alimentation. Francia.
Bonnet, J.B. 1975. Le Pottok. Poney du Pays Basque. Tesis Doctoral. Ecole
Nationale Veterinaire de Toulouse. Universidad de Toulouse.
B.O.P.V. 1995. Orden 3192. Estándar Racial de la raza Pottoka.
Cañón, J., Checa, M.L., Carleos, C., Vega-Pla J.L., Vallejo, M. y Dunner, S. 2000.
“The genetic structure of Spanish Celtic Horse breeds inferred from microsatellite
data”. Animal Genetics, 2000, 31, 39-48
Carreras, J. 1983. El Pottoka. Tesis doctoral. Gobierno Vasco.
Checa, M.L., Vega J.L., García-Atance M.A., Vallejo M. y Dunner S. 1998.
“Distribución de la variabilidad genética en poblaciones de ponis españoles:
resultados preliminares”. Archivos de zootecnia vol. 47, núm. 178-179, p. 170.
Página 28 de 28
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
Checa, M.L. 2004. “Análisis de la variabilidad genética en razas equinas autóctonas
españolas detectada mediante microsatélites”. Tesis Doctoral. Universidad
Complutense de Madrid.
Diputación Foral de Bizkaia. 1997. Pottoka, el pony del País Vasco. Diputación
Foral de Bizkaia.
Ferreras, G. 1935. El caballo vasco. Su origen y relaciones con el caballo oriental y
occidental en Ganadería vasca. Vol. I pp 51-199. Zootecnia. Diputación Foral de
Bizkaia. Bilbao.
García Dory, M.A. S. Martínez y F. Orozco. 1990. Guía de campo de las razas
autóctonas de España. Alianza Editorial Madrid.
Intxausti, J.I. 1996. Plan de recuperación del Poni Vasco-Pottoka. Documento
interno de la Diputación Foral de Bizkaia.
Iriondo, M., Jugo, B., Rendo, F., Solis, A., Mazón, L.I. y Estonba, A. 2002.
“Analysis of genetic diversity of indigenous cattle, horse, and sheep breeds from
the Basque Country”. Comunicación. 7th World Congress on Genetics Applied to
Livestock Production. Comunicación nº 26-44 del Proceedings Book. Montpellier
(Francia).
Jefatura de Cría Caballar de Álava. 1987. Pottoka. Informe. Diputación Foral de
Bizkaia.
Página 29 de 29
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
Jordana, J. y Parés, P.M. 1999. “Relaciones genéticas entre razas ibéricas de
caballos utilizando caracteres morfológicos (prototipos raciales)”. Animal Genetic
Resources Information, No. 26.
Le Grand, S. 1995. Censo de una población equina en su cuna de origen: El Pottok
del País Vasco. Informe. Ecole de Biologie de les Organismes et les Populations.
La Val.
Maguregui, B., Albizua, J.J. y Gómez, M. 1992. Estudio de las características
zoométricas y fanerópticas del pony vasco (Pottoka). Feria Internacional Ganadera
del Quinto Centenario. Libro de comunicaciones, sección equino. Zafra.
Marklund L, Johansson Moller M, Sandberg K, Andersson L. 1996. A missense
mutation in the gene for melanocyte-stimulating hormone receptor (MC1R) is
associated with the chesnut coat color in horses; Mammalian Genome 7, 895-899.
Massaguer, P. 1995. Las razas de ponis. Ediciones El Caballo SA. Barcelona.
Massaguer, P. 1996. El Pottoka una raza española de origen milenario. El caballo,
155: 58-62.
Pascual, I. e Intxausti, J.I. 1998. “Estudio zoométrico en la raza pony vasco-
pottoka”. Archivos de zootecnia vol. 47, núm. 178-179, p. 538.
Pascual, I., Tejedor, T., Monteagudo, L.V., Intxausti, J.I. y Arruga, M.V. 1998.
“Análisis genéticos en la raza pony vasco-pottoka. Resultados preliminares”.
Archivos de zootecnia vol. 47, núm. 178-179, p. 182.
Página 30 de 30
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
Rendo, F., Iriondo, M., Jugo, B.M., Mazón, L.I., Aguirre, A., Vicario, A., Estonba,
A.; 2004. Tracking diversity and differentiation in six sheep breeds from the North
Iberian Peninsula through DNA variation Small Ruminant Research 2004, 52 (3)
195-202
Rendo F, Iriondo M, Jugo BM, Aguirre A, Mazón LI, Vicario A, Gómez M,
Estonba A; 2004. Analysis of the genetic structure of endangered bovine breeds
from the western Pyrenees using DNA microsatellite markers Biochemical
Genetics 2004, 42 (3-4) 99-108
Royo, L.J., Álvarez, I., Beja-Pereira, A., Molina, A., Fernández, I., Jordana, J.,
Gómez, E., Gutiérrez, J.P. y Goyache, F. 2005. “The Origins of Iberian Horses
Assessed via Mitochondrial DNA”. Journal of Heredity 2005:96(6):663–669.
Solís, A., Jugo, B., Rendo, F. y Estonba, A. 2000. “Genetic diversity and genetic
distances in threatened horse breeds from Western Pyrenees by Microsatellites”.
Comunicación. 27th International Conference on Animal Genetics (ISAG 00):
“Animal Genomics: synthesis of past, present and future directions. Animal
Genetics (Proceedings 2000). Univ. of Minnessota (USA).
Solís, A., Jugo, B., Rendo, F. y Estonba. A. 2000. “Variación genética basada en el
análisis de microsatélites en cuatro razas equinas del Pirineo Occidental”.
Comunicación. 1ª Reuniao da Sociedade Portuguesa de Recursos Genéticos
Animais; II Congresso Ibérico sobre Recursos Genéticos Animais. Libro Resumen
de Comunicaciones. Estaçao Zootécnica Nacional Vale de Santarém.
Solís, A., Jugo, B. y Estonba A. 2001. “Control de paternidades y potencial de
asignación racial mediante la utilización de microsatélites en 4 razas equinas del
Página 31 de 31
Genetika, Antropologia Fisikoa eta Animalien Fisiologia Saila Dpto. de Genética, Antropología Física y Fisiología Animal
Lab. Genetika; ‘Abereak’ Taldea
INFORME LIBRO DIGITAL PROYECTO POTTOKA
Euskal Herriko Unibertsitatea
Universidaddel País Vasco
eman ta zabal zazu
Pirineo Occidental”. Comunicación. Congreso de la Sociedad Española de Genética
(SEG). Libro de resúmenes del Congreso. Sevilla
Solís, A., Jugo, B. y Estonba A. 2003. “Diversidad del DNA mitocondrial en 4
razas equinas autóctonas de la Comunidad Autónoma del País Vasco y Navarra”.
Comunicación. Congreso de la Sociedad Española de Genética (SEG). Libro de
resúmenes del Congreso. San Lorenzo del Escorial (Madrid).
Solis A, Jugo BM, Meriaux JC, Iriondo M, Mazon LI, Aguirre AI, Vicario A,
Estomba A.; 2005. Genetic diversity within and among four South European native
horse breeds based on microsatellite DNA analysis: implications for conservation;;
J Hered. 2005 Nov-Dec;96(6):670-8. Epub 2005 Nov 2”
Solís, A. 2005. “Markari molekularren bidezko Euskal Autonomi Erkidegoko eta
Nafarroako bertako lau zaldi-arrazen karakterizazio genetikoa”. Tesis doctoral.
Universidad del País Vasco / Euskal Herriko Unibertsitatea.
Sotillo, J.L. y V. Serrano. Producción animal. Etnología zootécnica. Vol I. Editorial
Tebas Flores, Madrid.
Página 32 de 32