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Casos prácticos PCR
Julián Sanz Ortega
Caso1
Varón 67 con antecedentes de Gammapatía monoclonal IgG (no mieloma múltiple).
Masa linfoganglionar en raíz de mesenterio con ganglios a ese nivel y en epiplón. Insuficiencia respiratoria tipo I Disfunción renal aguda. Síndrome poliúrico. Síndrome confusional de estancia en UCI Infección pulmonar por Pseudomona Aeruginosa (posterior estado de portador)
Diagnóstico: Enfermedad de Whipple
Tropheryma whipplei
2001 primer cultivo y caracterización
Enfermedad: Artralgia inicial, diarrea, corazón, SNC…
PAS carece de especificidad.
Target: secuencia 16S ARNr.
Biopsia: duodenal, ganglio, sinovial, saliva, sangre..
Caso2
Mujer 49 años, lesión oclusiva intestinal.
Diagnóstico: Adenocarcinoma de colon moderadamente diferenciado; T3N1M1 (metástasis hepáticas)
¿Familiar?
Diagnóstico: CCHNP (Cáncer de Colon hereditario No polipósico)
por mutación MLH1
Caso 2
Bat
25
Bat
26
346
(APC) Tejido
Normal.
Tejido
Tumoral.
CT32
Estabilidad de microsatélites
Riesgo de CRC
Población en general: 2-5%
Un familiar afectado: 6-10%
CCHNP: 70-80%
FAP: 100%
Cáncer de colon familiar
5-15% CRC es familiar.
Poliposis adenomatosa familiar (FAP) 0.5-1%, Cáncer de colon hereditario no polipósico (CCHNP) 5-13%.
Otros: Poliposis familiar juvenil, Sindrome de Turcot, Peutz-Jeghers..
Protocolo CCHNP en HCSC:
Anatomía Patológica: Extracción tumoral de ADN con
microdisección
Inmunohistoquímica MLH1, MSH2, MSH6. PMS2
PCR y estudio de inestabilidad de microsatélites
Oncología: Estudio de mutaciones.
Consejo genético
Caso 3: Dos bloques de parafina con el mismo número:
A B
Estudio de Filiación: Microsatélites:
Errores de filiación
Metástasis de laboratorio
Confirmación de identidad
Caso 4
Varón fumador de 64 años, nódulo único pulmonar
PAAF: diagnóstico carcinoma pulmonar no microcítico
¿Es sensible a inhibidores de EGFR?
www.ensembl.org (SNPs) K
ACTTCCTTATGATCACAAATGGGAGTTTCCCAGAAACAGGCTGAGT --
L--P--Y--D--H--K--W--E-=F=-P--R--N--R--L--S--F--G--K--T--
Mutaciones c-KIT (exón 9 y 11) y
EGFR (exón 18,19, 20, 21)
Concocer SNPs
Asociada respuesta a gefitinib Ca pulmón.
2 hot spot: DELECIONES EXON 19, 46%:
a) Análisis de fragmentos
b) Secuenciación directa
Exon 21 L858R, 43%: c) Secuenciación directa
d) Enzimas de restricción
Exon 19 del, 48%
Mutaciones EGFR:
a)
b)
Exon 21 L858R,43%
c)
d)
Virus BK
Trasplantes renales (1-5%)
Causa importante de rechazo (45-
67% de infectados).
Virus ubicuo: 90% seropreval.
Origen : infección respiratoria infantil, permanece latente en células uroteliales.
Inmunosupresión reactiva infección.
En: Biopsias renales. Orina?
Cómo: PCR, Real time-PCR, HIS (No tests aprobados por FDA)
Especificidad 100%,
sensibilidad 70% en gel,
85% en secuenciador.
Reordenamientos de IgH
(Fragmentos V-J):
Agradecimientos
Dr. Julián Sanz Esponera
Dr. Julián Sanz Ortega
Dr. Jose A López Asenjo
Dra. Elena Sierra
Susana Hernández
Mónica Fernández