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Facultad de Medicina
DIVISIÓN DE ESTUDIOS DE POSGRADO
Centro Nacional de Trasplantes.
DIRECCIÓN DE PLANEACIÓN, ENSEÑANZA
Y COORDINACIÓN NACIONAL
“Evaluación histológica de aloinjertos de piel humana
procurada por el Banco de Piel y Tejidos del
Instituto Nacional de Rehabilitación”
TESIS
Del Diplomado para la Formacion de Coordinadores de Donación de Organos y Tejidos con Fines de Trasplantes.
Que presenta la C. a D.en C.
M a r í a S i m o n a U s t o a
México D.F 2012
Universidad Nacional Autónoma de México
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
2 María Simona Ustoa
Esta tesis fue dirigida por el siguiente cuerpo académico.
Director de Tesis
D en C Francisco Martínez Flores
Jefe de División del Banco de Piel y Tejidos.
Instituto Nacional de Rehabilitacion.
Secretaría de Salud.
Profesor Titular de Farmacologia.
Facultad de Medicina.
Universidad Nacional Autonoma de México.
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
3 María Simona Ustoa
Esta tesis se desarrollo en:
Banco de Piel y Tejidos
Dirección Quirúrgica
Instituto Nacional de Rehabilitación
Secretaría de Salud
Programa de Criobiótica y Bioterapéutica Molecular
Banco de Piel y de Tejidos
Dirección Quirúrgica
Instituto Nacional de Rehabilitación
Secretaría de Salud
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
4 María Simona Ustoa
Instituciones que financiaron este proyecto de investigación:
Esta tesis deriva de los proyectos científicos financiados por el Instituto de
Ciencia y Tecnología del Distrito Federal, el Consejo Nacional de Ciencia y
Tecnología y el Instituto Nacional de Rehabilitación a través de los
proyectos:
*ICYTDF-PIFUT-08169
**CONACYT-FOSISS-2011-1- 161624
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
5 María Simona Ustoa
Agradecimientos:
Dr. Juan Antonio Madinaveitia Villanueva
Director Quirúrgico.
Instituto Nacional de Rehabilitación.
Secretaria de Salud
D en C Hilda Villlegas Castrejón
Departamento de Morfología Celular y Molecular
Instituto Nacional de Rehabilitación
Secretaria de Salud
Dra. Erika Rivera Durón
Coordinadora de Donación.
Instituto Nacional de Neurología y Neurocirugía
“Dr. Manuel Velazco”
Secretaria de Salud
Dr. Omar Sánchez Ramírez.
Profesor Titular del Diplomado para la
Formación de Cordinadores de Donación de Órganos y Tejidos.
Dirección de Planeación, Enseñanza y Coordinación Nacional
Centro Nacional de Trasplantes.
Secretaria de Salud.
Dr. Rafael Lechuga García
Profesor Adjunto del Diplomado para la Formación de Cordinadores
de Donación de Órganos y Tejidos.
Dirección de Planeación, Enseñanza y Coordinación Nacional
Centro Nacional de Trasplantes.
Secretaria de Salud.
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
6 María Simona Ustoa
Soporte Académico y Técnico
Biol. R. Araceli Barrera López
Asistente de Procesamiento de Tejidos
Instituto Nacional de Rehabilitación
Biol. Exp. Chiristian Lomeli Rodriguez
Técnico Asistente de Procuración
Banco de Piel y Tejidos
Instituto Nacional de Rehabilitación
Biol. Exp. Bruno Escobedo Guevara
Técnico Asistente de Procuración
Banco de Piel y Tejidos
Instituto Nacional de Rehabilitación
QFB. Adrian Vizcaino Dorado
Técnico Asistente de Control de Calidad
Banco de Piel y Tejidos
Instituto Nacional de Rehabilitación
Lic. Karina Guzmán Martínez
Asistente de Difusión de Donación de Piel
Banco de Piel y Tejidos
Instituto Nacional de Rehabilitación
Dra. Eréndira Estrada Villaseñor
Departamento de Patología.
Instituto Nacional de Rehabilitación
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
7 María Simona Ustoa
La bondad y belleza de una vida, no termina con la muerte …
Se manitene con la donación …
Hagámos posible este sueño!
María Simona Ustoa
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
8 María Simona Ustoa
Abreviaciones
COFEPRIS : Comisión Federal de Protección contra Riesgos Sanitarios.
CENATRA : Centro Nacional de Trasplantes.
APH : Aloijertos de Piel Humana
BPyT : Banco de Piel y Tejidos.
LGS : Ley General de Salud.
MC : Muerte Encefálica
PC : Paro cardiorespiratorio
PD : Potencial Donador
UV : Ultra Violeta
AP : Aloinjertos de piel
D1 : Donador 1
D2 : Donador 2
D3 : Donador 3
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
9 María Simona Ustoa
íNDICE GENERAL
I. RESUMEN . . . . . . . . . 10
II. INTRODUCCIÓN . . . . . . . . 11 III. JUSTIFICACIÓN . . . . . . . . 26
IV. HIPÓTESIS . . . . . . . . . 26
V. OBJETIVO GENERAL . . . . . . . 27
VI. OBJETIVOS PARTICULARES . . . . . . 28
VII. MATERIAL Y MÉTODO . . . . .. . . 29
VIII. RESULTADOS . . . . . . . . 33 IX. DISCUSIÓN . . . . . . . . . 44
X. CONCLUSIONES Y PERSPECTIVAS . . . . . 47
XI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS . .. . . . 48
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
10 María Simona Ustoa
I. RESUMEN
El uso de aloinjertos de la piel humana (APH) en años recientes, ha tomado gran
importancia para el tratamiento de pacientes con quemaduras. Las propiedades
de aloinjertos de piel cadavérica, son reconocidas por su capacidad de
cicatrización, sin embargo aún es necesario realizar estudios sobre las
características de aloinjertos de piel humana recuperada. En México, el Banco de
Piel y Tejidos del INR, tiene la función de preservar tejidos con fines terapeúticos
y de trasplante, por lo que en esta tesis se realiza la valoración histológica de
aloinjertos de piel humana, recuperada en el BPyT, a partir de dos tipos de
donaciones. Los tejidos analizados tienen una lámina basal con características
consevadas y correspondientes a una piel “viva” y “sana”, lo que sugiere que esta
es una de las caracteristicas responsables de la promoción de el proceso de
repitelización en pacientes con grave daño en la piel, al ser empleadas como
cubiertas biológicas temporales.
Este trabajo, abre las posibilidades de estudios futuros que den certeza a las
funciones proporcionadas al cierre de heridas por quemaduras, con el uso de las
cubiertas biológicas a partir de aloinjertos de piel humana. Estudios
complementarios de histología, así como de viabilidad celular,
inmunohistoquimica, permitirán conocer el efecto terapeútico de los APH.
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
11 María Simona Ustoa
II. INTRODUCCIÓN
El interés de la humanidad por preservar las funciones de órganos y tejidos, que
accidentalmente se han perdido o deteriorado, data desde épocas remotas. En lo
que respecta a los trasplantes, existe la leyenda de los santos “Cosme y Damián”,
que durante el reinado de Diocleciano (284-305), estos santos se presentaron en
sueños al sacristán de la iglesia erigida en sus nombres, quien padecía una
enfermedad en la pierna derecha. En su sueño sustituyeron su pierna derecha por
la de un etíope sepultado aquel mismo día. Al despertar del sueño el sacristán
había sanado, por lo que a estos santos se les considera los patronos de los
Trasplantes 1,2,3. Hoy día en Colombia existe la Fundación Cosme y Damián,
dedicada a los trasplantes1,4
En la India, en el año 800 a.C. existió un cirujano, considerado como el primer
autor en el proceso de trasplantes. En esa época a los reos como pena les era
impuesta de amputación de naríz, por lo cual el cirujano Sushruta, realizaba
rinoplastias reconstructivas utilizando colgajos pediculados.1, 3, 4
Durante el siglo XVI, existen ya los primeros reportes de autotransplante de piel,
realizada por Gaspare Tagliocozzi, cirujano italiano que realizó sus estudios de
Medicina en la Universidad de Bologna, fue reconocido por su habilidad en la
cirugía reconstructiva al realizar autotrasplantes tomando piel del brazo, para la
reconstrucción de nariz de los soldados caídos.
Su método de rinoplastía por autotrasplante, fue importante en Italia ya que en los
años 1400 a 1500, durante la guerra, la nariz era amputada, y la cirugía realizada
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
12 María Simona Ustoa
por Tagliocozzi, resulto con mayor estética a diferencia del implementado por
Sushruta, en la India 1, 3, 4. Más adelante en el año 1869, se atribuye al cirujano
suizo Jacques-Louis Reverdin, el éxito del aloinjerto cutáneo humano, a partir de
piel fresca. Llegó a ser jefe de cirugía del Hospital Cantonal de Geneve, y profesor
en la Universidad de Geneva. Introdujo el método de “pinch graft” que consiste en
remover piezas delgadas de piel de un área sana del cuerpo, e implantarla a una
zona donde es necesario cubirla. Este método se conoce como el Trasplante de
Reverdín, su nombre esta asociado a la Sutura de Reverdin, como un método
especializado. 1 - 4
En la historia de la Medicina, la humanidad ha mostrado gran interés por brindar
al paciente enfermo una mejor calidad de vida, en muchos casos es necesario el
reemplazo del órgano completo, por lo que se ha desarrollado la cultura de la
donación altruista de órganos, en conjunto con técnicas de preservación y
manipulación de órganos y tejidos, llegando al tratamiento y preservación de
células con fines de trasplante. Las bases brindadas por Reverdin, a través de la
manipulacion de piel, despertó el interés de la manipulación celular.
A principios del Siglo XX, en 1914, Krebich, desarrolló el primer cultivo de
queratinocitos, a partir de alojertos de piel, logrando abrir el campo de
investigación en los procesos celulares. En 1948 Medawar realizó el primer
autotrasplante de queratinocitos, con el fin de estudiar la tolerancia inmunológica
de los tejidos trasplantados.1, 3, 5, 6
Al revisar la historia de la Medicina, podemos observar gran cantidad de
experimentos arriesgados que han fijado el antecedente para dar paso a la
Medicina del Trasplante o Trasplantología, que a mediados del siglo XX toma
mayor relevancia. Con este fin se fueron estableciendo las condiciones de
preservación de los órganos y los tejidos, se introduce el uso del frío como un
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
13 María Simona Ustoa
medio de conservación.1 Hacia la década de los 70´s Borel, identificó las
propiedades de la ciclosporina como inmunosupresor, lo que en el futuro serviría
para disminuir el rechazo inmune de los pacientes que requirieran el trasplante de
un órgano de otro individuo vivo o de un cadáver.
En esa misma década Rheinwald y Green, describen una técnica para cultivar
queratinocitos humanos y diez años después, en 1983, Helton utiliza la técnica de
cultivo de queratinocitos, para realizar el trasplante celular en pacientes
quemados, lo que abre un área de estudio específico, como es brindar tratamiento
celular a pacientes quemados. 7,8
Los Bancos de Tejidos
España tiene registrado el primer banco de homoinjertos óseos en el año 1952,
en el Banco de Hueso en Madrid. Con los grandes avances en la medicina de los
trasplantes, la biología celular, la inmunología y la genética, crean en España los
Bancos de Tejidos en el último cuarto del siglo XX. En México, la apertura de un
Banco de Tejidos se inicio con el tejido óseo, sin embargo pese a los intentos y
personal capacitado no prospero. En 1944, el Hospital Central Militar y el Hospital
Infantil de México, iniciaron los procesos de creación de un banco de tejidos. En
los años 50 el hospital Rubén Leñero, en la ciudad de México y el Hospital
Regional de Monterrey iniciaron actividades para la creación de un banco de
tejidos. 9 En 1997, el Hospital Central de Petróleos Mexicanos y la Universidad
Nacional Autónoma de México realizan algunos procedimientos relacionados con
el almacenamiento de tejidos, empleando los primeros estándares internacionales
disponibles. Destaca por su actividad la del Banco de Tejidos del Instituto
Nacional de Investigaciones Nucleares (ININ), en el Edo. De México, que ese
mismo año empleó la radiación gamma para la radiación de piel de cerdo, y de
otros tejidos como las membranas amnióticas, córneas y hueso. 9
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
14 María Simona Ustoa
En el año 2009, se inagura el primer Banco de Piel y Tejidos, (BPyT) del Instituto
Nacional de Rehabilitación (INR) de la Secretaria de Salud. El BPyT del INR,
inició con la procuración, almacenamiento y liberación para trasplante de
aloinjertos de aloinjertos de piel humana para uso terapeútico y de trasplante,
utilizando los estándares internacionales que permiten criopreservar la piel con
una calidad que provea de los beneficios de utilizar un tejido vivo, posterior al
proceso de criopreservación. Los Bancos de Tejios tienen como fin contar con
tejidos que provean de las propiedades y caracterÍsticas biológicas óptimas, para
ser utilizados como cubiertas biológicas temporales.
Regulación de la donación de órganos y Tejidos en México
La Ley General de Salud en su Título Décimo Cuarto, señala todo lo relacionado a
los eventos de la donación, disposición, almacenamiento y trasplante de órganos,
tejidos y células, con fines de trasplante. Este Título esta constituído por los
Capítulos I a V, donde se definen las atribuciones, funciones y procesos de
regulación de donación de los órganos y tejidos en nuestro país. La siguiente
tabla se muestran los artículos que lo constituyen:
TÍTULO DÉCIMO CUARTO
CAPÍTULO ARTÍCULOS DEFINICIÓN
I 313 - 319 Disposiciones comunes
II 320 - 329 Donación
III 330 - 342 Trasplantes
IV 343 - 345 Pérdida de la vida
V 346 - 350 Cadáver
Tabla 1. Título XIV de la Ley General de Salud.
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
15 María Simona Ustoa
La LGS, establece la creación de los dos órganos importantes para la vigilancia,
seguimiento y regulación de los procesos de donación: procuración, preservación
y trasplante de los órganos y tejidos, por parte de los establecimientos de salud,
como es el caso del BPyT, del INR. Constituyendo asi la Comisión Federal para la
Protección contra Riesgos Sanitarios (COFEPRIS), que tiene la función de regular
y vigilar los establecimientos de salud, dedicados al manejo de órganos, tejidos y
células con fines terapeúticos. Además de el Centro Nacional de Trasplantes
(CENATRA), quien tiene las funciones de realizar el registro de los receptores y
donadores, con los datos clínicos necesarios para la identificación adecuada de
cada uno de ellos, así como de verificar que los trasplantes se realicen de
conformidad con los requisitos que establece la Ley. 10
De acuerdo con la LGS, se definen dos tipos de donación, la Donación Expresa
(Artículo 322) y la Donación Tácita (Art 323). En nuestro país, un cuando está
definido en la LGS, que en ambos casos se considera al Potencial Donador como
donante, para poder disponer de sus órganos, siempre se respetara la decisión de
la familia, al momento de la petición.
La donación de órganos y tejidos en México
El proceso de aceptar la donación de los órganos y tejidos, favorece a mejorar la
calidad de vida de quien necesita un órgano o tejido. A lo largo de estos 23 años
en México se ha observado, la mejoría en la calidad de vida de pacientes
trasplantados, sin embargo, esta mejoría no depende tan sólo del órgano recibido,
sino también de los cambios que se presentan posterior al trasplante, como son la
atención médica, la nutrición, y el acompañamiento médico y familiar.
El acompañamiento médico, se brinda con la presencia del Coordinador de
Donación, durante el tiempo que tome la disposición de los tejidos del donante.
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
16 María Simona Ustoa
Por su parte la familia juega un papel importante para llevar a cabo el deseo del
donador, tanto en la negación como en la aceptación, los familiares autorizados
por la ley para firmar son los disponentes secundarios: él o la cónyuge, el
concubinario o la concubina, los descendientes, los ascendientes, los hermanos,
el adoptado o el adoptante; conforme a la prelación señalada. 10
Para mejorar la cultura de la donación de órganos en México, es muy importante
platicar y expresar ante la familia y amigos más cercanos, y de la manera más
clara nuestro deseo ante la donación de órganos y tejidos. En México, siempre se
ha respetado la decisión de la familia de un Potencial Donador (PD).
La donación de piel.
En la experiencia del BPyT, del INR los casos de negativa familiar para la
donación de piel, se ha observado que es por el desconocimiento del proceso de
lobtención del tejido. Por lo que es importante informar a la población sobre este
procedimiento.
Procuración de Piel
Es un procedimiento quirúrgico que se lleva a cabo en condiciones estériles y en
quirófano, la región anatómica que se dispone es la espalda. El procedimiento
permite mantener en buenas condiciones al cadáver. La piel se toma en láminas
de grosor medio (0.5mm / 7.5 cm / 35 cm) ver fígura 1. Es importante señalar que
en todo momento el cuerpo del donador es tratado como un paciente vivo. Una
oportunidad de brindar tributo al donante, es através de la dignificación del
cadáver, la cual se realiza al final del procedimiento de procuración. Respecto a
la donación de piel, de acuerdo a nuestra experiencia, es notable la importancia
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
17 María Simona Ustoa
de realizar campañas de difusión sobre la donación de piel, para que la población
pueda tomar decisiones informadas.11
En el siguiente diagrama se muestra el procedimiento a partir de la identificación
del PD hasta la procuración de aloinjertos piel humana:
Diagrama 1. Actividad que se realiza a partir de la identificación del PD, la información
que se solicita al Coordinador de Donación y la procuración de aloinjertos de pie humana,
por el Banco de Piel y Tejidos, del INR.
Asi mismo en la figura 1 se muestran el ABC, del procedimiento de procuración de
aloinjertos de piel humana:
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
18 María Simona Ustoa
A. Desinfección B. Procuración C. Dignifiación del donante.
Figura 1. El ABC, de la procuración de aloinjertos de piel humana. A) Desinfección, B) -
C) Procuración: Obtención de láminas de piel de grosor medio D) Dignificación del
donante.
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
19 María Simona Ustoa
Tipos de donadores.
Durante del proceso de donación, al momento de dar el aviso del PD, es
importante conocer el tipo de donador, es decir: a) Multiorgánico (MO) que ocurre
por Muerte encefálica (MC) o b) Por Paro cardiorespiratorio (PC), el PD, se
considera donador MO, cuando puede donar órganos blandos y tejidos. Cuando
el PD presenta Paro cardiorespiratorio, es donante de tejidos, como córneas, piel,
tejido músculo esquéltico. Además se deberá registrar la hora en que fue
diagnóstifcada la muerte que deberá corresponderse con el estudio comprobatorio
(Electro encefalograma, Doppler) y la nota médica, así como también se contará
con la hoja firmada del consentimiento informado.
En ambos casos siempre se considera la hora del último latido cardiaco, y la hora
en que se realiza la procuración de cada órgano o tejido, además de los órganos
y tejidos que la familia acepte donar, con la firma de autorización del
consentimiento informado.
A partir de la aceptación familiar, y la firma del consentimiento informado el tiempo
que tarda la procuración de cada órgano y tejido, es variable para ambos tipos de
donador. Los periodos de procuración que se requieren son prologados, puede
ser un factor que modifique las propiedades histológicas de aloinjertos de piel de
cadáver. Al momento de fallecer, se presentan altreaciones fisiológicas como la
disminución metabólica, la pérdida de la temperatura, favorece la activación del
crecimiento bacteriano, inactivando la sínteis de proteínas, metaloproteinasas así
como los factores que controlan la homeostasis del sistema tegumentario. De este
modo el factor tiempo, es uno de los retos más importanes a considerar, por lo
que es un factor variable que se ha considerado en esta tesis, ya que no existen
estudios que muestren evidencia sobre la arquitectura histológica de APH
posterior a la procuración.
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
20 María Simona Ustoa
Este proyecto tiene como objetivo evaluar las características histológicas de
aloinjertos de piel humana, procurada por el BPyT del INR, a partir de los dos
tipos de donantes definidos previamente, con el fin de determinar si existe algún
efecto del tiempo.
La Piel
La piel es un órgano que recubre al organismo, es el órgano de mayor tamaño,
tiene su origen embrionario en la capa ectodérmica, y la presencia de las
interacciones celulare entre ectodermo y mesodermo son importantes para
establecer su relación con otros tejidos como el músculo esquelético y el propio
sistema nervioso que también provienen del ectodermo. La piel, por ser el órgano
más grande del organismo humano, posee funciones muy importantes asi como
propiedades metabólicas desde la sínteis de vitaminascom la absorción de calcio
para los huesos, y la secreción de lágrimas, pasando por el sudor.
La piel al ser el órgano que nos brinda protección, por ser la primera barrera física
a infecciones bacterianas, también es el órgano de mayor exposición a lesiones,
donde las más comunes son las quemaduras por escaldadura. Así mismo, los
agentes químicos, que se clasifican en ácidos y básicos, o los agentes físicos,
como la electricidad y sin dejar de lado los traumatismos, son una gran diversiad
de agenes con capacidad de producir graves daños o alteraciones a la piel.
Arquitectura de la Piel
La piel esta organizada por tres regiones celulares: Epidermis, Dermis e
Hipodermis. La epidermis es la zona más superficial, la dermis es la región
intermedia y la capa que esta en contacto con los vasos sanguíneos, musculos y
nervios es la Hipodermis, considerada de gran importancia por ser quien recibe y
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
21 María Simona Ustoa
envía los nutrientes, hormonas, protéinas y vitaminas a través de las señales
endócrinas, parácrinas y autócrinas, a las células de la dermis y epidermis,
permitiendo la piel estar en comunicación con todo el organismo.
En la figura 2, se observa la epidermis y la dermis, que son las capas superficial e
intermedias de la piel. 12
Figura 2. Histología de piel teñida con H&E, que muéstra a la epidermis, y la base de
la dermis, región intermedia de la piel.12
Epidermis. Esta formada por cinco capas celulares, las cuales tienen
características morfológicas diferentes, que intervienen en el proceso de
diferenciación celular de los queratinocitos. La diferenciación del queratinocito,
ocurre a partir de la membrana basal, hacia la capa celular más superficial de la
epidermis. Es decir que la diferenciación queratinocito ocurre a través de los
estratos de la epidermis, su morfología y expresión en factores de crecimiento se
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
22 María Simona Ustoa
van modificando hasta alcanzar su grado de diferenciación a través del proceso
de queratinización. De este modo, el queratinocito proporciona la queratina a la
capa córnea. La formación de la capa córnea, es lo que brinda a piel, su
impermeabilidad bacteriana, además las funciones de: barrera física,
termorregulación y equilibrio hidrolítico aunado a la respuesta inmunológica. 13, 14
Las células migran por la epidermis, a través de sus diferentes capas celulares
como son: estrato basal, localizado sobre la membrana basal, también es llamado
estrato germinativo, ya que en esta zona es donde se considera se encuentran las
células germinales que van a migraran al estrato corneo. En el siguiente estrato
hacia la zona apical de la epidermis, se encuentra el estrato espinoso, llamado así
su morfología celular, aquí la comunicación celular es importante por la presencia
de desmosomas. La siguiente capa es el estrato granuloso, por la presencia de
granulos citoplasmaticos de queratina, que será utilizada en el proceso de
queratinización.
Por último el estrato córneo, que esta formado únicamente por el citoesqueleto,
constituído por queratina y queratinocitos muertos con alto contenido de
filamentos intermedios consitituídos por citoqueratinas. El estrato lúcido se puede
identificar únicamente en ciertas zonas anatómicas como la palma de las manos.
13,14
En la figura 3, se pueden observar los diferentes estratos de la capa más
superficial de la piel. El proceso de queratinización es el proceso de regeneración
de la piel, el cual tarda un tiempo de 2 semanas, en realizarse, que es el periódo
que se considera para utilizar APH, como cubierntas biológicas temporales, en
tratamientos a pacientes quemado.14, 15
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
23 María Simona Ustoa
Figura 3 Esquema representativo de la composición celular de la epidermis: a través de
los hemidesmosomas las células se comunica con la membrana basal. Las capas
celulares, se comunican entre si a través de los desmosomas .16
Las citoqueratinas son una familia de proteínas que constituyen los filamentos
intermedios de las células de todo el tejido epidérmico. Por lo que están presentes
desde el inicio de la migración celular, tienen una expresión diferencial a través de
este proceso, se han utilizado para determinar cáncer epitelial, como el de mama
o de piel. 15
Dermis. Es la capa intermedia de la piel, puede ser dividia en dos tipos papilar y
reticular. La región papilar consiste de fribroblastos como de abundante matriz
extracelular, formada por fibras de colágena tipo III. También podemos encontrar
una capa de tejido laxo formado por fibras elásticas y muchos capilares.
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
24 María Simona Ustoa
La región reticular tiene paquetes de fibras delgadas constituídos, principalmente
de colágena tipo I. La gran mayoría de estos paquetes de colágena están
orientadas en forma paralela a la supeficie de la piel pero también pueden correr
de manera oblicua o casi perpendicular a la mayoría. Este arreglo celular y de
matriz extracelular provee a la piel de su particular característica elástica.13
En la figura 2 se pueden observar los surcos que se forman entre la epidermis y la
dermis, que ayudan a establecer las zonas papilares de la dermis, es decir donde
se encuentras estas papilas, así como las zonas reticulares, donde se mantiene la
matriz extracelular.
Hipodermis: Esta formada por un tejido conectivo laxo, donde las fibras de
colágena se orientan en forma paralela a la superficie de la piel, pero de una
forma contínua a las fibras de la dermis. En algunas regiones como las palams de
la mano, esta capa pemite el movimiento de la piel sobre estructuras underlying.
En esta capa podemos encontrar células adiposas cuya abundancia puede variar
de acuerdo al sexo del individuo y a su estado nutricio.13 En el 2011, realizaron
estudios para la identificación de células madre a partir de tejido adiposo del
paciente quemado, para realizar autotrasplantes de queratinocitos, al mismo
tiempo que evaluaron la potencialidad de estas células provenientes de este
tejido. 17
La piel como cubierta biológica temporal
Las cubiertas biológicas temporales son clasificadas como acelulares y celulares,
donde las acelulares son consideradas así, porque se obtienen de tejidos que son
sometidos a procedimientos de liofilización, para ser deshidratados por medio de
la sublimación, y para ser esterilizados por la radiación gamma. 9
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
25 María Simona Ustoa
Las cubiertas biológicas acelulares han sido utilizadas para dar atención a
pacientes con afecciones en la piel, siendo las quemaduras la causa más común.
Por lo que su uso se ha considerado como sustituto que ayude a cubrir las
funciones de la piel de manera temporal, tales como: barrera protectora, lo que
evita infecciones de la herida: mantener el equilibrio hidrolítico, previniendo así la
deshidrtación del paciente, estos factores evitan la expansión de las heridas.
Las cubiertas biológicas celulares, además de aportar las funciones antes citadas,
cuentan con la presencia de fibroblastos como su componente celular, aportado
factores de crecimiento que promueven la reepitelización celular de la herida, lo
que reduciendo el tiempo de tratamiento y de recuperación al paciente, así como
lo cual se ve reflejado en la reducción de costo del tratamiento, los tiempos
estancia hospitalaria.17, 18
Tomando en como base lo anterior, la procuración de aloinjertos de piel humana
realizada por el BPyT del INR son analizadas tomando en cuenta diferentes
tiempos de isquemia, a partir de difentes tipos de donador, con el objetivo de
determinar la organización celular y tisular de los aloinjertos los cuales son
utilizados en tratamiento a quemados utilizadas como cubiertas temporales.
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
26 María Simona Ustoa
IV. JUSTIFICACIÓN
Los procedimientos de la procuración, almacenamiento y liberación del aloinjertos
de piel humana, realizado en el Banco de Piel y Tejidos del INR, y donde además
de certificar la no patogenicidad del tejido donando, es importante determinar la
calidad histológica de los tejidos, lo que permitirá respaldar los protocolos de
procuración establecidos en el BP yT del INR.
Así mismo será importante conocer la histología del tejido analizadando las
diferentes varialbes con las que se expone el proceso de donación.
El análisis histológico de aloinjertos de piel humana, abre las puertas para realizar
estudios de mayor penetración estructural, además de la valoración de la
funcionalidad celular, o incluso la propia calidad celular a través de estudios de
viabilidad celular y de ultraestructura
IV. HIPÓTESIS
La recuperación del tejido con los procedimientos protocolizado en el BPyT del
INR, permitirá obtener tejidos con estructuras histológicas conservadas y con
mejor valor terapéutico, los cuales serán evaluados por tinciones de
histopatología.
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27 María Simona Ustoa
V. OBJETIVO GENERAL
Evaluar la estructura histológica de aloinjertos de piel humana a partir de dos tipos
de donantes procurada por el Banco de Piel y Tejidos, INR basados en la tinción
por Hematoxilina&Eosina.
VI. OBJETIVOS PARTICULARES
1. Determinar las variables de procuración
y para cada tipo de donador:
i) Edad, ii) Género, iii) Tipo de donador, iv) Hora de muerte
v) Hora de último latido cardiaco, vi) Hora de la procuración de piel.
2. Comparar el resultado del estudio histológico
de aloinjertos de piel recuperada dos tipos de donantes:
a) Donador multiorgánico b) Donador de tejidos
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28 María Simona Ustoa
VII. MATERIALES Y MÉTODOS
Para este estudio, se consideró el periódo del 2011. Los donantes fueron
clasificados por el tipo de deceso. En este periodo se obtuvieron donaciones de
tejidos, a partir de onador multiorgánico ocurrido por Muerte Encefálica (MC)
obtenidos el Instituto Nacional de Neurología y Neurocirugía (INNyN) y de
donadores de tejidos, por Paro cardiorespiratorio (PC) del Hospital Juárez de
México (HJM).
Procuración de Aloinjertos de Piel Humana (APH) De acuerdo al convenio de colaboración que existe con el Instituto Nacional de
Rehabilitación y el Instituto Nacional de Neurología y Neurocirugía “Manuel
Velasco Suárez”. El trabajo de la coordinación reportó que se identificaron 16
casos de Potenciales Donadores, donde 4 aceptaron la donación de órganos, y
sólo 2 familias aceptaron la donación de piel, los cuales provenían de un
diagnóstico de muerte por MC (Fuente: Coordinador de Donación. José Luis
López). Del mismo modo, en colaboración con el Hospital Juárez de México, se
identificó un Potencial Donador, (PD) con diagnóstico de muerte por PC. Para
realizar la disposicón de los tejidos, se debe considerar que en el protocolo de
petición de donación ocurre en tres etapas, y es importante el tiempo que tardan,
pues a partir de la identificación a la Coordinación puede llevarle hasta 5 horas el
proceso que consisten en:
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29 María Simona Ustoa
Para la procuración de piel, se realizó de acuerdo al protocolo desarollado por el
BPyT del INR, el cual cumple con una procuración quirúrgica. En todo momento
el procedimento se lleva a cabo en actitud ética y digna hacia el donante.
Cumpliendo con los procedimientos adecuados para la dignificación del cadáver,
este paso final coadyuva en el duelo familiar por la pérdia del ser querido. El
siguiente diagrama 3 ilustra el proceso en general de la donación hasta el
trasplante:
I
Identificación del
Potencial
Donador
I I
Petición
I I I
Firma del consentimiento
informado
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30 María Simona Ustoa
Diagrama 3. Flujo del proceso de la Donación, Procuración y Trasplante de aloinjertos
de piel humana, a partir de la identificación del Potencial Donador.
Características de los Donadores Para el análisis de los donadores procurados por el BPyT, INR , se consideraron
los siguientes datos: Hospital de origen, lugar de origen, edad, género, tipo de
donante: Multiorgánico o de Tejidos, grupo sanguíneo y serologia, órganos y
tejidos donados, hora de muerte, hora del último latido cardiáco y hora de la
procuración. Con esta información será posible evaluar el efecto del tiempo en las
propiedades de los APH.
Los potenciales donadores fueron evaluados por inspección física y de acuerdo a
los criterios establecidos por el BTyP del INR, ver Tabla 2
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31 María Simona Ustoa
CRITERIOS DE INCLUSIÓN: EXCLUSIÓN.
Mayores de 18 años. (Rango de 18 a
75 años)
Hiperglucemia + Septicemia.
Hombre o mujer Infeccion o Serologia + para VIH, Sífilis,
VHB o VHC; Cáncer (Excepto tumores
Intracraneales)
Muerte Cerebral (Donador
Multiorgánico).
Causa de muerte desconocida
Muerte por parada Cardiaca. Tatuajes, perforaciones no documentados.
Tabla 2. Criterios de inclusión y exclusión para la donación de alloinjertos de piel
humana, establecidos en el programa de donación altruista de piel.
Estudio Histológico
Con el fin de evaluar el efecto del tiempo de isquemia en los dos tipos de
donadores, se realizó un estudio histológico, que fue realizado en el
Departamenteo de Patología del INR. En este estudio se analizarón factores
tisulaes a partir de un cuadro diagnóstico, tales como: A) Edema, b) Infiltración
celular, C) Número de Capilares, D) Membrana Basal, E) Colágena, F)
Distribución de fibras, G) Grosor, H) Necrosis, I) Apoptosis, J) Indice Apoptótico K)
Cariorrexis. Se definió la siguiente puntuación numérica: 0= ausente, 1 =
Incipiente, 2 = Moderada, 3= Abundante, 4= Notable. Estos parámetros fueron
establecidos de acuerdo a parámetros observados de piel sana y de acuerdo a la
experiencia del patólogo. Las muestras fueron analizadas en un microscopio
marca Olympus.
Tinción de Hematoxilina & Eosina (H&E) Los aloinjertos de piel, fueron
procesadas para ser incluidas en parafina y teñidas con la H&E. La técnica de
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32 María Simona Ustoa
H&E, tiene como fundamento la identificación de componentes ácidos y básicos, y
permite evaluar las características de la epidermis y dermis, asi como la interfase
entre la dermis e hipodermis de la piel.
Esta técnica ha permitido establecer los estándares de la consititución de la piel,
para la identificación de alteraciones en la arquitectura histológica de la piel.13,14
}
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33 María Simona Ustoa
VIII. RESULTADOS
Análisis de los donadores de tejidos.
Para el análisis causistico de la población estudiada se etiquetó a los donantes
(n=3) como donador 1 = D1, donador 2 = D2 y donador 3 = D3.
Edad, género y grupo sanguíneo
La edad de la población de estudio mostró que el 66.6 %, se localiza en un rango
de los 55 a los 65 años (n= 2, D1 y D2) y el 33.4 % se localiza en el rango de 25 a
35 años de edad (n=1, D3). El 100% de la población (n=3) se encontró que
pertenece al genero femenino.
Con los datos de tipificación por grupo sanguíneo se encontró que cada donante
fue distinto, ya que D1 = O Rh+, D2 = A Rh+ y D3 = B Rh+. Aun cuando los
bancos de tejidos, no requieren la determinación de compatibilidad sangínea entre
el donante y el receptor, el conocer el grupo sanguíneo, es utilizado como un
estándar de calidad al momento de la donación de los aloinjertos de piel humana
por el BPyT del INR.
Lugar de origen y serología
La procuración de los APH, se realizó en hospitales localizados en el D, F, capital
del país, sin embargo los donantes provenían de otras entidades federativas
como fueron: D1 = Acapulco, Gro.; D2 = Edo de Mex. y D3 = Corregidora de
Querétaro, Qro.
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34 María Simona Ustoa
El 100% de los aloinjertos de piel humana (n=3), mostraron resultados serológicos
negativos para los agentes patógenos que se analizan de rutina por laboratorio de
gabinete al momento de la procuración (VIH, VHA, VHB y CMV) así como el
análisis determinado por pruebas moleculares (VIH, VHA, VHB, VHC, CMV yT.
Palidum) que se realizan como parte del protocolo de certificación del tejido, en el
BPyT del INR (datos no mostrados).
En el cuadro1, se muestran los datos concentrados del análisis de los donantes:
Tiempos de isquemia:
El tiempo promedio transcurrido entre el último latido cardiáco y el proceso de
toma de láminas de piel fue de 5 horas.
Los donantes D1 y D3, fueron multiorgánicos, presentando Muerte encefálica
(MC) lo que representa al 66. 6 % de la población de estudio.
El D1, representa el 44.4 % de los donantes de tejidos, el cual presentó
ParoCardiorespiratorio (PC) estudiados en este periodo (2011).
La diferencia de los tiempos de isquemia, de los donadores (D1, D2 y D3) se
puede comprar y observar en la gráfica 1.
Análisis histológico Con el fin de conocer la arquitectura histológica de los APH, se realizó el análisis
con la tinción de H&E, que permite la identifiación del la estructura del tejido
epitelial, mostrando las arquitectura de las capas de la piel. El análisis se realizó
en el Departamento de Patología del INR.
Para realizar el estudió histológico, se diseñó un cuadro diagnóstico, (ver cuadro
diagnóstico 2) para lo cual se definió la siguiente puntuación: 0 = Ausente, 1 =
Incipiente, 2 = Moderado, 3 = Evidente, 4 = Abundante.
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35 María Simona Ustoa
REGISTRO
BPyT-2011 Donador 1 Donador 2 Donador 3
Hospital
Procurador
Instituto Nacional de
Neurología
H. Juárez de
México
Instituto Nacional de
Neurología
Lugar de
Origen Acapulco, Gro Edo. México
Corregidora de Querétaro,
Qro.
EDAD 61 años 55 años 35 años
SEXO Femenino Femenino Femenino
Tipo de
muerte MC Paro Cardiaco MC
Hora de la
muerte 12:39 05:25 19:30
Hora de la
Procuración
de piel
15:00 7:30 04:00
Tiempo de
isquemia 2:30 h. 7: 00 h 8:30 h
Grupo
sanguíneo
“O” Rh (+) “A” Rh (+) “B” Rh (+)
Serología Negativa Negativa Negativa
Órganos y
tejidos
donados
Córneas
Piel
Córneas
Piel
Hígado
Riñones
Córneas
Piel
Cuadro 1. Carácterísticas de los donadores de APH procuda por del BPyT del INR.
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36 María Simona Ustoa
Gráfica 1. Tiempo de isquemia a partir de donadores procurados en el BPyT del
INR. Los donadores D1 y D3, son multiorgánicos y el D2 es donante de tejidos.
En este caso, los parámetros de Ausente, Incipiente, Moderado, y Evidente fueron
considerados de baja puntuación, lo que sera considerado como un resultado
favorable hacia una estructura conservada y en buenas condiciones del tejido.
El parámetro de Abundante, se considerará una puntuación, relacionada a una
estructura con alteración o dañada por algún efecto fisiológico, como presencia de
necrosis o apotósis.
La puntuación definida para cada una de las características a evaluadas,
correspondientes a: edema, infiltración celular, número de capilares, membrana
basal, colágena, distribución de fibras y grosor, lo que implica su presencia en el
tejido.
0 2 4 6 8 10
Tiempo de isquemia
D 1
D 2
D 3
Tiempo en horas
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37 María Simona Ustoa
Los incisos A a la G, mostraron una puntuación 3 que es igual a Presente. Lo cual
significa que el tejido mantiene las características fisiológicas esperadas para una
piel sana y viva, y que se corrroborá con los parámetros analizados de Necrosis,
Apoptósis, Indice apoptótico, Carioxinesis y que corresponden a los incisos: H a la
L, donde al análisis microscópico muestra una arquitectura tisular en condicioines
óptimas, es decir en ausencia de algún daño histológico.
Como se muestra en el cuadro de análisis histológico, desarrollado con ese fin en
el BPyT del INR:
ANÁLISIS HISTOLÓGICO DONADOR 1 DONADOR 2 DONADOR 3
A) Edema 0 0 0
B) Infiltración celular 0 0 0
C) Núm. de Capilares 5* 8* 6*
D ) Membrana Basal 3 3 3
E) Colágena 3 3 3
F) Distribución de Fibras 3 3 3
G) Grosor 1 mm 1 mm 1 mm
H) Necrosis 0 0 0
I) Apoptosis 0 0 0
J ) Indice apoptótico 0 0 0
K) Cariorrexinesis. 0 0 0
Puntuación
0 = Ausente, 1 = Incipiente, 2 = Moderado, 3 = Evidente, 4 = Abundante.
Cuadro 2. Análisis histopatológico de aloinjertos de piel obtenidos de donante
cadavérico en el BPyT del INR.
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38 María Simona Ustoa
Tinción de H&E.
Al observar las muestras histológicas de los donadores, fue posible identificar las
estructuras de la piel como son la Epidermis (D1, D2 yD3) y la Dermis papilar (D1,
D2, D3) y en algunos casos la dermis reticular (D2). Se tomo registro fotográfico
de cada una de las muestras en diferentes en el aumento 20X (figuras 4, 5 y 6),
donde es posible identificar las zonas que corresponden a la epidermis y dermis
papilar y reticular. Para las observaciones a mayor a umento el registro fotográfico
fue seleccionado al azar y es representativo de las tres muestras de APH, como
se puede observar en las figuras 6 (Aumento 60X) y 7 (Aumento 100X).
Los resultados obtenidos muestran la presencia de una estructura histológica
adecuada, en condiciones óptimas y esperadas para la piel de un paciente vivo y
sano.Esta evaluación es muy importante, ya que sugiere que la piel, procurada
con los procedimientos del protocolo implementado por el BPyT, tenga una
participación importante en la síntesis y libreación de factores de crecimiento
epidérmicos, que favorezcan notablemente su función como cubiertas biológicas
temporales en pacientes quemados.
Cabe señalar que el estudio se realizó previo a todo procedimeinto de
criopreservación, lo cual sugiere que estos aloinjertos al ser procesados lograran
mantener su gran calidad histológica y posiblemente asi también su calidad
fisiológica, dando un resultado quirúrgico óptimo al momento de su
descongelaminteo y uso quirúrgico.
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39 María Simona Ustoa
Figura 4- Tinción con H-&E. Micrografía del Análisis Histológico de Aloinjertos de Piel
Humana procurada por el BPyT del INR. Donador 1, multiorgánico por muerte encefálica,
con 2:30 h de isquemia.
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40 María Simona Ustoa
Figura 5 Tinción con H-&E. Micrografía del análisis histológico de aloinjertos de piel
humana procurada por el BPyT del INR. Donanate 2, donador de tejidos por paro
cardiorespiratorio con 7:00 h de isquemia.
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41 María Simona Ustoa
Figura 6 Tinción con H-&E. Micrografía del análisis histológico de aloinjertos de piel
humana procurada por el BPyT del INR. Donante 3, multiorgánico por muerte encefálica ,
con 8:30 h de isquemia.
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42 María Simona Ustoa
Figura 7. Tinción con H-&E. Micrografía de aloinjerto de piel humana procurada en el
BPyT en el INR. Aumento de 60 X. Se observa la estructura conservada de la epidermis
(E) y la demis papilar (D). También muestra la definición de los estratos celulares a partir
de la membrana basal hasta el estrato córneo.
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43 María Simona Ustoa
Figura 8 Tinción con H-&E. Micrografía de histología de aloinjertos de piel humana
procurada en el BPyT del INR. Aumento 100X.Se observa la arquitectura conservada de
los queratinocitos en sus diferentes estratos:A) Dermis papilar; B) Membrana basal; C)
Estrato basal; D) Estrato espinoso; E) Estrato granuloso y F) Estrato córneo.
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44 María Simona Ustoa
IX. DISCUSIÓN
La donación de tejidos, se lleva a cabo por la coordinación de donación de los
hospitales procuradores con los cuales el BPyT del INR colabora. De este modo
el Banco de Piel y Tejidos, del INR tiene establecido los protocolos de procuración
y preservación de aloinjertos de piel humana, con los estándares de que cumplen
con las norma de sanidad correspondientes.
El análisis causistico aporta información que complementa el análisis histológico
y sugiere que los procedimientos realizados durante la procuración de aloinjertos
de piel humana, muestran una arquitectura histológica que corresponde a una piel
“viva”, lo cual abre la perspectiva para realizar futuros estudios que complementen
el estado tanto fisiológico como histológico, de estos APH, uno de estos estudios
pueden ser análisis conocer como se encuentran estas células realizando análisis
de viabilidad celular.
Al analizar los periódos transcurridos entre un donador y otro, observamos que la
mayor diferencia en el tiempo de procuración fue en el D3, quien fue MO, lo cual
es consecuente con los tiempos previstos para la procuración de cada órgano. A
pesar de que el D1, se clasificó como multiorgánico por muerte encefálica, solo se
procesaron los tejidos de córnea y piel.
Por lo que el tiempo transcurrido para la procuración de aloinjertos de piel
humana, fue menor al esperado. Posiblemente solo se procuraron estos tejidos
debido a la edad del donante (61 años), lo que lo clasifica como limítrofe, aun que
son causas desconocidas.
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45 María Simona Ustoa
Y por su parte el D2, aún cuando fue por paro cardiorespiratorio, la identificación
del PD, tomo un tiempo transcurrido fue mayor al esperado, debido al protocolo
establecido el Hospital procurador, (Hospital Juárez de México). Aun cuando el
certificado de defunción registro la hora de las 5:30 AM, se presentron factores
que alargaron el tiempo de isquemia como son: 1 identificacion del PD, 2.
Trámites administrativos, 3. Coordinación de Donación y 4. Traslado del equipo
procurador, motivo por el cual el tiempo fue de 7 h, contrario a lo esperado donde
el tiempo de isquemia por paro cardiorespiratorio, recomendado es de 3 horas.
El resultado observado en el cuadro diagnóstico, muestra una composición
histologíca de aloinjertos de piel humana procurada por el BPyT del INR, es
adecuada, para llevar a cabo la función de barrera protectora, con una gran
posibilidad para ser empleada con fines terapeúticos y de trasplante.
El mantenimiento de la estructura dérmica permite la interaccion de las células
vivas provenientes del aloinjerto con las células del paciente, provocando muy
posiblementes la estimulación de la producción de factores de crecimiento e
induciendo a la piel herida del paciente a la recuperación mediando su
crecimiento celular.
Por otra parte, es necesario incorporar una técnica de tinción complementaria a la
de H&E, con el fin de obtener una información más amplia de la composición
celular, así como de conocer la arquitectura del tejido.
El mantenimiento de los estándares de calidad, durante la procuración de tejidos
por el BPyT del INR, son óptimos para obtener tejidos de gran calidad celular aun
cuando los tiempos de isquemia observados puedan ser prolognados (D3) y que
se requieren para los procesos de donación y procuración de APH.
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
46 María Simona Ustoa
Estos hallazgos fortalecen el procedimeinto de procuración implementado por el
BPyT y contundencia al uso de los APH para ser empleados como cubiertas
biológicas temporales para tratamientos de quemados u otras necesidades
quirúrgicas.
En otros países como España, y en el Continente Asiático, la obtención de piel a
partir de donadores cadavéricos ha permitido realizar avances científicos
importantes 19,20, en donde se ha propuesto que el consentimiento informado de la
donación la piel sea solictado para dos procesos: 1) Trasplante y 2)
Investigación.20
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47 María Simona Ustoa
X. CONCLUSIONES Y PERSPECTIVAS
Estos resultados son preliminares, sin embargo es posible observar una
calidad conservda en los aloinjertos de piel humana procurada por el BTyP
del INR.
Lo que hace necesario evaluar un mayor número de casos, para que el
estuido tenga validez estadísticamente significativa. Además de considerar
incluir otras técnicas histológicas que permitan validar y dar mayor
consistencia al estudio histológico.
Los resultados de esta tesis abren camino, para futuras evaluaciones en el
campo de la procuración de aloinjertos de piel cadavérica, tanto para el
conocimiento histológico, como para evaluar la calidad celular del propio
aloinjeto con fines de terapéuticos y de trasplante.
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
48 María Simona Ustoa
XI. REFERENCIAS BIBILIOGRÁFICAS.
1. Vincent Mirabet. Taller Técnico Manipulacipon de células y tejidos para trasplante.
AEBT. Congreso Internacional 2008.Valencia, Esp.
2. Cristianios. Editorial Católica SA Madrid, España 1985
3. Medicine in Literature and Art Carmichael. A G Ratzan RM (Edit), Könemann,
Verlagsegesell Schaft. 1991.
4. http://www.uthscsa.edu/allograft/myths.asp.
5. W F Bynum and H Bynum Dictionary of Medical biography. Greenwood Press, 2007.
6. Mieth, K.; González J.;Navas J.; Soto C. Influende of donor type in bone and
tissue graft outcomes in the quarentine period Fundacion Cosme y Damian, 2003
Colombia, Col. Hauben, DJ Baruchin A Mahler A On the histroy of the free skin
graft. Annals of plastic surgery. 9 (3) 242-245.1982(PMID:6753699).
8. Andrew Burd y Tor Chiu .Allogenic skin in the treatment of burns. Clinics n
Dermatology 23, 376-387. 2005.
9. Contribuciones del Instituto Nacional de Investigaciones Nucleares al avance de la
ciencia y la tecnología en México. Cap3. Avances del Banco de Tejidos
Radioesterilizados del ININ.Ma de Lourdes Reyes Frías y cols. Edo. De México.
2010.
10. Ley General de Salud. Última actualización 2011 diciembre 12. Diario Oficial de la
Federación Julio 2, 1984. México, D.F. Secretaría de Gobernación; 1984.
http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/compi/rlgsmcsdotcsh.html
11. Guzmán, M. K Tesis: Estudio de Mercado para la difusión de la donación altruista
de piel en el D.F. México. D. F. 2012.
12. Don Wayne Fawcet and Ronald P.Jensh Bloom and Fawcett Histology 1997
13. Anátomo –Histología. Tejido Epitelial. V. Barbiero, H. V. Maturi. Pág.
Evalulación histológica de aloinjertos de piel procurada por el Banco de Piel y Tejidos del Instituto Nacional de Rehabilitación
49 María Simona Ustoa
14. http: // www.anatomohistología.uns.edu.ar/plantilla. asp?zona=modopiete
histología.. Histología de Ham. 9a. Edición. Cap 17. Editor : David H. Cormac.
México, DF. 1988
16. . Martinhäo S. LR; Vassallo J; Rehder J; Glauce A.P. y Puzzi MB.
Inmmunoarchitectural characteization of human skin model reconstructres in vitro.
2009 Sao Paulo Med J 127 (1) ; 28-33.Lloyd D.H Patel A,P Estructura y funciones
de la piel Manual de dermatología en pequeños animales exóticos Cap 1 2008.
18. Xue Yang, Jung Wang, Shui-Long Gou, Kai-Ji Fan, Jun Li, You-Liang Wang, Yan
Teng and Xiao Yand m-R1 Promotes kertinocyte Migration and Re-epithelialization
during woung healing. Int. J. boil.Sci. 2011.
19. Saveria Pastore, Francesca Mascia, Valentina Mariani and Giampiero Girolomoni
The Epidermal Growth Factor Receptor System in Skin Repair and Inflamation.
128; 1365 – 1374. 2007.
20. Martínez-Lorenzo , M.; Piñero Pimpinela E.; Ibañez Solla L.; Vicente Borruel O.;
Fernández-pacheco J.; Callén Sevilla L. Tissue processing results in 2010 in the
bank tissue area of blood and tissue bank of Aragon. Banco de Sangre y Tejidos
de Aragón. Spain 6th World Congress of the European Association of Tissue
Banks. Barcelona, España 2011.
21. Flavío Manuel, A.; Pérez Luisa M.; Fariñas O.; Alemany X.; Vito S.; Oliva R.;
Luque S. Donor parameters affecting skin tissue recovery. Transplant Services
Foundation-Hospital Clínic. Barcelona. Spain. 6th World Congress of the
European Association of Tissue Banks. Barcelona, España 2011.