CARACTERSTICAS MORFOLGICASY AISLAMIENTOS DE Cercospora sojinaCARACTERSTICAS MORFOLGICAS

Y AISLAMIENTOS DE Cercospora sojinaDra. Alicia Luque

CEREMIC(Centro de Referencia de Micologa)

Fac. Cs. Bioq. y Farm. UNREE--mail: mail: agluquear@yahoo.com.aragluquear@yahoo.com.ar

Taxonoma de Cercospora sojina HaraTaxonoma de Cercospora sojina Hara

Dentro del gnero Cercospora se han nombrado ms de 3000 especies (Pollack, 1987). Recientemente ese nmero fue reducido a 659 especies (Crous & Braun 2003), con 281

especies consideradas morfolgicamente indistinguibles de Cercospora apii

El gnero Cercospora es reconocido como uno de los gneros ms grandes dentro de los Hyphomycetes

Taxonoma de Cercospora sojina HaraTaxonoma de Cercospora sojina Hara

CLASIFICACIN TAXONMICA: Phylum : Ascomycota.

Clase: Dothideomycetes.

Orden: Capnodiales.

Familia: Mycosphaerellaceae.

Gnero: Cercospora .

Especie: sojina.

El estado sexuado de este hongo hasta el momento es desconocido.

Cercospora gnero de hongos anamrficos (asexuados) vinculado con ascomicetes teleomorfos (sexuados) relacionados a

Mycosphaerella

Taxonoma de Cercospora sojina HaraTaxonoma de Cercospora sojina Hara

Cercospora sojina presenta gran nmero de razas que difieren en su capacidad de causar enfermedad en un amplio rango de

genotipos de soja

Es un hongo genticamente muy variable

Esto nos indica la posible existencia de reproduccin sexuadaen C. sojina

Los estudios genticos realizados en Cercospora beticolasugieren que algunas poblaciones se reproducen sexualmente

(Groenewald et al., 2007)

Caracteres morfolgicos de Cercospora sojinaCaracteres morfolgicos de Cercospora sojinaMacromorfologa

AZAPG

Temperatura: 25C 1C

Luz

Caracteres morfolgicos de Cercospora sojinaCaracteres morfolgicos de Cercospora sojinaMicromorfologa

Chupp, 1953

Conidiforos: 52-120 x 4-6 m

Conidios: 0-10 septos, 24-108 x 3-9 mRango ms frecuente:40-60 x 6-8 m

Tamao y forma de los conidios y conidiforos puede variar dependiendo del sustrato

Caracteres morfolgicos de Cercospora sojinaCaracteres morfolgicos de Cercospora sojinaMicromorfologa: Conidios

Conidios: 0-22 septos, 50-375 x 2.5-5 m

Cercospora kikuchiiCercospora sojina

Conidios: 0-10 septos, 24-108 x 3-9 m

Caracteres morfolgicos de Cercospora sojinaCaracteres morfolgicos de Cercospora sojinaLesiones foliares- Micromorfologa: Conidiforos

Conidiforos: 110 a 203 m.

Caracteres morfolgicos de Cercospora sojinaCaracteres morfolgicos de Cercospora sojinaLesiones foliares- Micromorfologa: Conidios

Conidios: 1-9 septos, 26-111(47,3 14,7)5,2-7,4 m (6,1 0,7)

Mtodos de aislamiento de Cercospora sojinaMtodos de aislamiento de Cercospora sojinaAislamiento a partir de lesiones foliares, de tallos y vainas

Carmona, Formento, Scandiani 2010 en prensa

Transferencia directa de conidios, a medios de cultivo agarizados:

3. Se distribuye el trocito agarizado en forma de estras en una placa de APGS. Se incuban a 25C 2C, con 12 hs de luz fluorescente y 12 hs de oscuridad.

1. Se seleccionan las lesiones ms esporuladas de C. sojina y con el menor grado de microorganismos contaminantes, observados bajo microscopio esterescpico.

2. Posteriormente se toman conidios con la aguja histolgica con un trocito de medio de cultivo, dentro de una cmara de flujo laminar.

Este mtodo ha demostrado ser el ms exitoso

Mtodos de aislamiento de Cercospora sojinaMtodos de aislamiento de Cercospora sojinaAislamiento a partir de lesiones foliares, de tallos y vainas

Trocitos de tejidos previamente desinfestados superficialmente :

II. Los trocitos de tejido vegetal se pueden colocar en cmara hmeda para lograr fructificaciones del hongo a las 48 horas y transferir las estructuras a medio de cultivo.

Carmona, Formento, Scandiani 2010 en prensa

I. Aislar en medios de cultivo: APG 2% acidificado, Agar Extracto de Tomate (AET) y Agar Caldo de Verduras (ACV). Incubar a 26C 3C durante 48 hs en oscuridad y luego en condiciones de mesada de laboratorio durante 10 das.

Mtodos de aislamiento de Cercospora sojinaMtodos de aislamiento de Cercospora sojinaAislamiento a partir de lesiones foliares, de tallos y vainas

Carmona, Formento, Scandiani 2010 en prensa

Debido a que Cercospora sojina crece ms lentamente que otros microorganismos contaminantes

Observar los cultivos cada 2 das, durante 10 das para detectar colonias sospechosas de Cercospora sojina, las cuales deben ser

repicadas en forma inmediata

Mtodo de dilucin en placaCultivos puros

Mtodos de conservacin de Cercospora sojinaMtodos de conservacin de Cercospora sojinaSubcultivos peridicos

En aguabloques de agar sumergidosen agua estrila temperatura ambiente

Luque, Tartabini, Lo Piccolo

Crecimiento en medios de cultivo apropiados y transferencia peridicaa medio de cultivo fresco

En agar Agar V8 a 25C en oscuridad transferido cada 30 da s,para mantener la esporulacin

En agar bajo capa de aceite columna de agar con capa de aceite mineral

Aislamientos argentinos de Cercospora sojinadepositados en la Coleccin de Cultivos del CEREMIC

Aislamientos argentinos de Cercospora sojinadepositados en la Coleccin de Cultivos del CEREMIC

147 aislamientosAislados de semillas: 9Aislados de hojas: 138

31

6328

19

4 2

CrdobaBs. As.

Sta. Fe

Tucumn

E. Ros

Sgo. Del Estero

Luque, Tartabini, Lo Piccolo

Aislamientos argentinos de Cercospora sojinaAislamientos argentinos de Cercospora sojinaCaracteres morfolgicos

Condiciones de incubacin:Medios de cultivo: Agar papa glucosa, Agar harina de avena, Agar zanahoria, Agar hojas de zanahoria, Agar V8, Agar plantas senescentes de soja.

Iluminacin: Luz continua, Luz oscuridad alternados, Oscuridad continua.

Obtener cultivos esporulados

Mejorar la conservacin de los aislamientos Realizar ensayos de patogenicidad Estudiar el comportamiento de los genotipos de soja Realizar pruebas de fungitoxicidad para controlar al patgeno

La transferencia de conidios en lugar de micelio produce cultivos ms esporulados

Temperatura: 25C 1C

Luque, Tartabini

Aislamientos argentinos de Cercospora sojinaAislamientos argentinos de Cercospora sojinaCaracteres macromorfolgicos

AZ AV8 APG

LuzMayor velocidadde crecimiento

Oscuridad

Luque, Tartabini

Aislamientos seleccionados de las distintas provincias presentaron caracteres macromorfolgicos similares

Caracteres morfolgicos de Cercospora sojinaCaracteres morfolgicos de Cercospora sojinaCultivos- Micromorfologa: Conidios

Conidios: 1-9 septos,20-125 x 3-8 m

AZ AV8

Luque, Tartabini

Aislamientos argentinos de Cercospora sojinaAislamientos argentinos de Cercospora sojinaCaracteres morfolgicos: micromorfologa

Luque, Tartabini

Cantidad de conidios(Esporulacin)

Temperatura: 25C 1C

Medios de cultivoAZAV8APG

Iluminacin Luz continuaOscuridad continua

Conidios

Aislamientos seleccionados de las distintas provincias presentaron caracteres micromorfolgicos similares

Longitud media: 48,8-62,7m

Ancho medio: 5,0-6,4m

Aislamientos argentinos de Cercospora sojinaAislamientos argentinos de Cercospora sojinaCaracteres morfolgicos

SNA

Temperatura: 25C 1CLuz

Luque, Tartabini

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y AISLAMIENTOS DECercospora sojina

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y AISLAMIENTOS DECercospora sojina

Reconocimiento de caracteres morfolgicos de

Cercospora sojina

Observacin:Lupa estereoscpicaMicroscopio

Aislamiento:Obtencin de cultivos puros y esporuladosMedios de cultivoT. de incubacinIluminacin

Conservacinadecuada

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y AISLAMIENTOS DECercospora sojina

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y AISLAMIENTOS DECercospora sojina

Aislamientos de Cercospora sojina

Estudios taxonmicos Taxonoma clsicaTaxonoma molecular

Ensayos de patogenicidad

Pruebas de fungitoxicidad

Estudios del comportamiento de los genotipos de soja

Realizacin de investigaciones con aislamientos locales para dar soluciones concretas a nuestros problemas