24

Cibio.univ Alicant

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: Cibio.univ Alicant
Page 2: Cibio.univ Alicant

2

Cuadernos de Biodiversidad

Í n d i c eVARIACIÓN EPIGENÉTICA Y SU IMPACTO EN LA BIODIVERSIDADL. Iglesias y J.L. Casas ................................................................................................................... 3

ANÁLISIS DE LA MORTALIDAD DEL MANATÍ (TRICHECHUS MANATUS MANATUS LINNAEUS, 1758) EN EL REFUGIO DE FAUNA LANZANILLO-PAJONAL-FRAGOSO, CUBAE. García Alfonso y R. Rodríguez González ................................................................................... 6

ESTUDIO DE LA ESTABILIDAD GENÉTICA MEDIANTE EL USO DE MARCADORES RAPD EN IPOMOEA: UNA ALTERNATIVA PARA LA CONSERVACIÓN DE LA DIVERSIDAD BIOLÓGICA MEDIANTE TÉCNICAS MOLECULARESO. S. González Paneque, A. Fernández, Y. Fraga, B. Pino, M.M. Hernández Espinosa,J.J. Silva Pupo, Á. Espinosa Reyes y J. Pérez Pérez .......................................................................... 11

LA MEMORIA BIOCULTURALG. Halffter .................................................................................................................................... 19

BOLETÍN DE SUSCRIPCIÓN Y NORMAS PARA LOS ARTÍCULOS ................................... 23

Publicación cuatrimestral del Centro Iberoamericano de la Biodiversidad

Cuadernos de Biodiversidad

2009

Centro Iberoamericano de la Biodiversidad (CIBIO)Universidad de Alicante

DIRECCIÓN Y COORDINACIÓN:Estefanía Micó Balaguer

Mª Ángeles Marcos García

CONSEJO ASESOR CIENTÍFICO:Javier Bellés-Ros

Gonzalo Halffter SalasSergio Guevara Sada

Ramón Martín MateoJuan Manuel Nieto Nafría

CORRESPONDENCIA:Centro Iberoamericano de la Biodiversidad (CIBIO)

Universidad de AlicanteApartado de Correos 9903080 Alicante (Spain)

www.cibio.org • E-mail: [email protected]: [email protected]

ILUSTRACIÓN PORTADA: Trigos de la región Mediterránea (de izquierda a derecha y de arriba abajo):Triticum compactum, T. dicoccum, T. spelta, T. sphaerococcum

FOTOCOMPOSICIÓN E IMPRESIÓN:Compobell, S.L.

C/ Palma de Mallorca, 4 - bajo (Edificio Abeto)E-30009-Murcia (Spain)

I.S.S.N.: 1575-5495DEPÓSITO LEGAL: MU-1286-1999

Cuadernos de Biodiversidad no se identifica necesariamente con el contenido de los artículos ni con la opinión de los autores.

EDITA:

Page 3: Cibio.univ Alicant

3

Cuadernos de Biodiversidad

L. Iglesias1 y J.L. Casas2

1 LABORATORIO DE BIOTECNOLOGÍA Y ECOLOGÍA APLICADA. UNIVERSIDAD VERACRUZANA. CAMPUS PARA LA CULTURA, LAS ARTES Y EL DEPORTE. AV. DE LAS CULTURAS VERACRUZANAS NO. 101. COLONIA EMILIANO ZAPATA, CP. 91090.

2 CIBIO. UNIVERSIDAD DE ALICANTE, CTRA. SAN VICENTE DEL RASPEIG S/N. 03690, ALICANTE, ESPAÑA.

VARIACIÓN EPIGENÉTICAY SU IMPACTO EN LA BIODIVERSIDAD

ABSTRACT

Recent advances in the field of genomics have opened up new perspectives for understanding the influence of the environment on genome expression. Epigenetics can provide a broad overview on the study of genetic variation and its impact on biolo-gical diversity. Epigenetic processes play an impor-tant role in natural variation and microevolution by generating a great number of polymorphisms on which natural selection can act on. This paper discusses gene expression modification by diverse dynamic processes, the structure of DNA formed by silent introns, repetitive elements, and DNA methylation and histone acetylation. The resulting impact on biodiversity is also discussed.

Desde que Gregor Mendel comenzara a mediados del siglo XIX a descubrir los secretos de la herencia de los caracteres hasta los avances alcanzados en el desarrollo del proyecto para descifrar el Genoma Humano, la ciencia de la Genética ha recorrido un largo camino. Hoy en día son motivo de discusión

nuevas interrogantes que ponen en tela de juicio conceptos y dogmas en el ámbito genético que hasta hace poco resultaban incuestionables. Una de las más fascinantes ha sido los esfuerzos que se han realizado para tratar de esclarecer cómo, cuándo y por qué se regula la expresión génica y comprender la influencia del ambiente sobre la expresión del genoma. Esto es lo que en la actualidad se le ha dado llamar el paradigma epigenético.

La epigenética (del griego epi, en o sobre) se refiere a un conjunto de eventos moleculares (modi-ficaciones del ADN y la cromatina) que van a ser responsables de la modulación de la expresión de los genes sin alterar la secuencia de ADN (BIRD 2007). Este término, acuñado por Conrad Waddington (WADDINGTON, 1942) y definido entonces como la relación entre el “genotipo y el fenotipo” o como el proceso mediante el cual el “genotipo genera el fenotipo” ha sido ampliamente documentado por JABLONKA y LAMB (1994) desde la perspectiva de su historia etimológica.

Los cambios epigenéticos se nos presentan como modificaciones covalentes producidas por la adición

Page 4: Cibio.univ Alicant

4

Cuadernos de Biodiversidad

mitóticas de una célula aun en ausencia de factores ambientales específicos. Así se puede afirmar que el estatus epigenético de los genes y genomas varía en mayor proporción si se compara con la secuencia de ADN relativamente estática.

Los mecanismos epigenéticos parecen ser particu-larmente activos en respuesta a estrés ambiental (LU et al., 2007) o a factores genómicos como pueden ser acontecimientos de hibridación (XIONG et al., 1999). En plantas, las alteraciones epigenéticas parecen presentarse especialmente durante la forma-ción de híbridos interespecíficos y poliploides. De igual forma se ha detectado variaciones epigenéticas asociadas a la variación que se origina en los cultivo de tejidos vegetales (KAEPPLER et al., 2000, XU et al., 2004). Los cambios epigenéticos inducidos por cultivo de tejidos pueden manifestarse como la activación de loci quiescentes o por epimutaciones de loci sensibles al control de la expresión a nivel cromatínico.

Se abre con todos estos hallazgos nuevas pers-pectivas para comprender el origen de la notable biodiversidad que existe y cómo los organismos vivos cambian espacial y temporalmente. La programación y reprogramación del genoma que se produce desde la etapa de célula germinal de todos los organismos generan nuevos fenotipos con nuevas expresiones que se manifiestan tanto a nivel molecular como morfológico. De éste modo los efectos epigenéticos generan un gran número de polimorfismos sobre los cuales actúa la selección natural (Fig. 1).

Por todo ello es posible afirmar que los procesos epigenéticos juegan un papel muy significativo en la variación natural y la microevolución (BOSSDORF et al., 2007). De hecho éstos pueden llegar incluso a incrementar el potencial evolutivo de los organismos en respuesta a estrés abiótico y jugar un papel impor-

de grupos funcionales (metilos, acetilos, fosfatos) o de proteínas (ubiquitina, SUMO) al ADN o algunas de sus proteínas asociadas, con repercusiones en la regulación transcripcional tales como activar, inhibir o modificar la expresión de genes. La metilación de los residuos de citosinas del ADN constituye el mecanismo epigénetico mejor conocido (FIN-NEGAN et al., 1993). Existen claras evidencias de que aproximadamente el 30% de los residuos de citosinas en el genoma vegetal se encuentra metilado (JANOUSEK et al., 2002). Estas metilaciones repri-men la transcripción, impidiendo que los factores de transcripción se unan al ADN (FINNEGAN et al., 2000). De esta manera, ya se ha comprobado cómo la metilacion del ADN juega un papel muy importante en el desarrollo de la planta así como en los proceso de diferenciación de órganos o tejidos y durante la embriogénesis (FINNEGAN et al., 2000, CHAKRABARTY et al. 2003).

Otro mecanismo epigenético es el de la impronta genética (imprinting) descrito en plantas entre otros por MESSING y GROSSNIKLAUS (1999). Como se sabe cada gen de nuestro genoma suele estar duplicado, siendo uno de ellos de origen materno y el otro paterno. La impronta se inicia durante el pro-ceso de la gametogénesis y se transmite al embrión (TAKEDA & PASZKOWSKI, 2006). El grado de expresión o silenciamiento por esta vía depende también de metilaciones diferenciales que se pueden reprogramar en las líneas germinales.

Aunque aun no se ha logrado descifrar comple-tamente cómo opera este lenguaje epigenético, sí se conoce que a diferencia de los procesos genéticos los epigenéticos pueden en algunos casos ser inducidos por el ambiente. Los cambios epigenéticos, una vez producidos, puede ser parcialmente estables y heredable, al menos en plantas (PATTERSON et al., 1993, CUBAS et al., 1999, RICHARDS, 2006, JIRTLE & SKINNER 2007). Al respecto se ha indicado que la herencia transgeneracional de la metilación del ADN parece descansar en la acción del enzima metiltransferasa, que replica los patro-nes de metilación durante los procesos de mitosis y meiosis (TAKEDA & PASZKOWSKI 2006). Incluso después que se han establecido los perfiles epigenómicos se puede generar variación genética sustancial durante las subsiguientes divisiones

Figura 1. La epigenética y su impacto en la biodiversidad vegetal.

Page 5: Cibio.univ Alicant

5

Cuadernos de Biodiversidad

tante en los procesos de especiación y evolución (RAPP & WENDEL 2005, RICHARDS, 2006). Esto se debe al hecho de que los procesos epigené-ticos pueden proporcionar un segundo sistema de herencia muy similar a la herencia genética que per-mite la evolución por selección natural. A diferencia de la variación genética, la epigenética puede verse afectada por interacciones ecológicas y proporcionar una vía adicional para acelerar el cambio evolutivo (BOSSDORF et al., 2007).

En definitiva, la epigenética nos ha presentado una nueva dimensión que nos puede ayudar a expli-car mejor cómo las poblaciones biológicas pueden alcanzar una alta diversidad y cómo pueden en muchos casos adaptarse “como un guante” a inespe-rados y profundos cambios en su hábitat natural.

REFERENCIAS

BIRD, A. 2007. Perceptions of epigenetics. Nature, 447: 396-398.

BOSSDORF, O. , RICHARDS, C.L . & PIGLIUCCI, M. 2007. Epigenetics for ecologists. Ecology Letters, 10: 1-10.

CHAKRABARTY, D., YU, K.W. & PAEK, K.Y. 2003. Detection of DNA methylation changes during somatic embryogenesis of Siberian ginseng (Eleuterococcus senticosus). Plant Sci., 165: 61-68.

CUBAS, P., VINCENT, C. & COEN, E. 1999. An epigenetic mutation responsible for natural variation in floral symmetry. Nature, 401:157-161.

FINNEGAN, E.S., BRETTELL, R.I.S. & DENNIS, E.S. 1993. The role of DNA methylation in the regulation of plant expression. In: J.P. Jost and H.P. Saluz (Eds.) DNA Methylation: Molecular Biology and Biological Significance, Birkhauser, Basel, pp. 218-261.

FINNEGAN, E.J., PEACOCK, W.J., AND DENNIS, E.S. 2000. DNA methylation, a key regulator of plant development and other processes. Curr. Opin. Genet. Dev., 10: 217-223.

JABLONKA, E. & LAMB, M.J. 2002. The changing concept of epigenetics. Annals of the New York Academy of Sciences, 981: 82-96.

JANOUSEK, B., MATSUNAGA, S., KEJNOVSKY, E., ZLUVOVA, J. & VYSKOT, B. 2002. DNA

methylation analysis of a male reproductive organ specific gene (MROS1) during pollen development. Genome, 45: 930-938.

JIRTLE, R.L. & SKINNER, M.K. 2007. Environmental epigenomics and disease susceptibility. Nat. Rev. Genet., 8: 253-262.

KAEPPLER, S.M., KAEPPLER, H.F. & RHEE, Y. 2000. Epigenetic aspects of somaclonal variation in plants. Plant Molecular Biology, 43: 179-188.

LU, G.Y., WU, X.M., CHEN, B.Y., GAO, G.Z. & XU, K. 2006. Detection of DNA methylation changes during seed germination in rapeseed (Brassica napus). Chin. Sci. Bull., 51:182-190.

LU, G., WU., X., CHEN, B., GAO, G. & XU, K. 2007. Evaluation of Genetic and Epigenetic Modification in Rapeseed (Brassica napus) Induced by Salt Stress. Journal of Integrative Plant Biology, 49 (11): 1599-1607.

MESSING, J. & GROSSNIKLAUS, U. 1999. Genomic imprinting in plants. Res. Probl. Cell Differ, 25: 23-40.

PAT TERSON, G.I . , THORPE, C.J . & CHANDLER, V.L. 1993. Paramutation, an allelic interaction, is associated with a stable and heritable reduction of transcription of the maize b regulatory gene. Genetics, 135: 881-894.

RAPP, R.A. & WENDEL, J.F. 2005. Epigenetics and plant evolution. New Phytol., 168: 81-91.

RICHARDS, E.J. 2006. Inherited epigenetic variation - revisiting soft inheritance. Nat. Rev. Genet., 7: 395-401.

TAKEDA, S. & PASZKOWSKI, J. 2006. DNA methylation and epigenetic inheritance during plant gametogenesis. Chromosoma, 115:27-35.

XIONG, L.Z., XU, C.G., SAGHAI MAROOF, M.A. & ZHANG, Q.F. 1999. Patterns of cytosine methylation in an elite rice hybrid and its parental lines by a methylation-sensitive amplification polymorphism technique. Mol. Gen. Genet., 261: 439-446.

XU, M.L., LI, X.Q. & KORBAN, S.S. 2004. DNA-methylation alterations and exchanges during in vitro cellular differentiation in rose (Rosa hybrida L.). Theor. Appl. Genet., 109: 899-910.

WADDINGTON, C.H. 1942. The epigenotype. Endeavour, 1: 18-20.

Page 6: Cibio.univ Alicant

6

Cuadernos de Biodiversidad

RESUMEN

El refugio de Fauna Lanzanillo-Pajonal-Fragoso, es un Área Protegida con 76.490 Ha marinas y su territorio terrestre encierra la Bahía de Nazabal, con condiciones naturales para mantener poblaciones de manatíes ya que presenta fondos con vegetación que constituyen su dieta. Además a la Bahía desem-bocan ríos que sirven de abrevaderos de agua dulce. Se tomaron datos de 12 adultos y una cría muertos

A N Á L I S I S D E L AM O R TA L I D A D D E L MANATÍ (TRICHECHUS MANATUS MANATUS LINNAEUS, 1758) EN EL REFUGIO DE FAUNA LANZANILLO-PAJONAL-F R A G O S O , C U B AE. García Alfonso1 y R. Rodríguez González2

1 REFUGIO DE FAUNA LANZANILLO-PAJONAL-FRAGOSO. EMPRESA NACIONAL PARA LA PROTECCIÓN DE LA FLORA Y LA FAUNA, VILLA CLARA. (ENPFF)

2 DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA, UNIVERSIDAD CENTRAL MARTA ABREU DE LAS VILLAS (UCLV) [email protected]

entre los años 1987-2008, realizando recorridos por toda la costa. Se confeccionó una base de datos de cada ejemplar y se determinó que el chinchorreo como arte de pesca estaba afectando la especie. Se declaró la Bahía de Nazabal como Zona Protegida o bajo Régimen Especial de Uso y Protección, decre-tado por la Secretaria de la Comisión Consultiva de Pesca. El chinchorreo en la bahía permanece todavía en un sector donde hasta la fecha no se han registrado más muertes.

Page 7: Cibio.univ Alicant

7

Cuadernos de Biodiversidad

Palabras clave: Manatí, mortalidad, Trichechus manatus manatus, área protegida.

ABSTRACT

Lanzanillo Pajonal-Fragoso Animals Shelter is a protected marine area with 76,490 Ha and in its land territory is located Nazabal Bay, with natural conditions to maintain manatees due to it has see beds vegetation that provide the diet as well as rivers that flow to the Bay and serve as drinking fresh water. There were collected data of dead individuals including 12 adults and a baby from 1987-2008, doing patrols along the coast. To determine possible causes of death it was taken into account that the fishing gear coincided with the stranding. It was drawn up a database of each analyzed specimen and it was determined that the chinchorreo gear was affecting the species. Nazabal Bay was declared a protected or under special use and protection area by the Secretary of the Advisory Committee on Fisheries. The chinchorreo gear in the bay was not completely removed, remaining a sector where that art of fishing is still practiced up to the present there have not caused more deaths.

Key words: Manatees, mortality, Trichechus manatus manatus, protected area.

INTRODUCCIÓN

El Área Protegida Lanzanillo-Pajonal-Fragoso, con categoría de Manejo Refugio de Fauna, consiste en un territorio marino costero de forma alargada, estrecha y orientada de este a oeste y abarca una superficie de 87.070 Ha (76.490 Ha marinas y 10.580 Ha terrestres), que incluye acuatorios sobre la plataforma insular, numerosos cayos y cayuelos, donde las tierras emergidas son evidentemente mino-ritarias. Posee una alta diversidad de hábitat, los más significativos son los manglares de desembocadura (en ríos, arroyos y canales) costeros, de canales entre cayos y de cayos, tales combinaciones ambientales favorecen una notable gama de hábitat que se refleja en la diversidad de la flora y la fauna.

El manatí de las Antillas (Trichechus manatus manatus) se distribuye desde el Estado de Tabasco en México hasta Recife en Brasil (LEFEBRE et al,

1989), se encuentra además en Las Antillas Mayores incluyendo Cuba, Jamaica, Puerto Rico, La Espa-ñola y pequeños reductos en las Antìllas Menores (DOMNING & HAYEK, 1986).

Debido a las diversas amenazas a las que se enfrenta la especie se encuentra catalogada en el Libro Rojo de la UICN, bajo la categoría de especie vulnerable y también se encuentra en el apéndice I de CITES, inciso b (RATHBUN et al, 1985, LEFEBVRE et al. 1989).

Los varamientos se clasifican en dos tipos: los varamientos individuales que involucran a un sólo animal o a una madre con su cría, y los varamientos masivos, que involucran dos o más animales de la misma especie, exceptuando el caso de una madre con su cría. (GERACI & LOUNSBURY, 1993).

Es necesario tener presente que los varamientos individuales o masivos son eventos inesperados que consecuentemente puede conducir a la mortandaz de cualquier especie marina y que requiere de una respuesta inmediata para reducir su probabilidad de muerte (WIIKINSON, 1996).

El objetivo de este trabajo es determinar las posi-bles causas que están provocando la muerte de esta especie en la Bahía de. Para ello se registró y estudió del varamiento de estos mamíferos marinos con el fin de proporcionar información importante para el manejo de los ecosistemas costeros.

DESCRIPCIÓN DEL ÁREA DE TRABAJO

El área de trabajo es un sistema manglar-seibadal-arrecife que por su productividad y posibilidades de refugio ofrece una garantía de soporte de la vida. Estos hábitat constituyen sitios típicos de reproduc-ción, reclutamiento o cría de numerosas especies debido a su alta productividad.

El Refugio de Fauna exhibe una alta diversidad de hábitat (ALCOLADO, 2007), compuesta por man-glares de desembocadura (en ríos, arroyos y canales), costeros, de canales entre cayos. Los seibadales se asientan sobre cieno, grava, arena y cieno-arena, los fondos duros aparecen mayoritariamente en la zona norte exterior caracterizada por especies vege-tales como Halodule wrighti, Syringodium filiforme, Thalassia testudinum, Ruppia maritima. Esta elevada diversidad de hábitat se refleja en la diversidad de

Page 8: Cibio.univ Alicant

8

Cuadernos de Biodiversidad

la flora y la fauna, donde especies de requerimien-tos muy específicos para la reproducción, como el Manatí (Trichechus manatus) tienen lugar para reproducirse.

Se realizaron recorridos de observación en busca de animales varados entre los años 1987-2008, por la costa que bordea la Bahía de Nazabal, estableciendo un sistema de información a través del personal que transita por el área conformado por los trabajadores de la Estación Biológica Manatí, pescadores deporti-vos, tropas guardafronteras y cuerpo de guardabos-que. Se realizaron tomas de muestras y necropsias para determinar la posible causa de muerte a los animales que su estado lo permitió.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Se realizó el análisis de 13 cadáveres de manatíes (12 adultos y una cría), encontrados en el Refugio de Fauna Lanzanillo-Pajonal-Fragoso, entre los años 1987 y 2008 (Figura 1). La mayoría de los varamientos ocurrieron en la bahía de Nazabal o en zonas cercanas a esta.

De los 13 animales varados 12 fueron encon-trados entre los años 2001 y 2008 (Figura 1), lo

que pudiera deberse a una mayor participación de los pobladores en la detección y comunicación de eventos de esta índole. Además en estos años se incrementó en el área de estudio el arte de pesca por chinchorreo que consiste en arrastrar mayas de pesca de menor diámetro de abertura de la misma, por el fondo de la bahía, colectando las presas en un embudo final o matadero. Esto pudo causar la alta mortalidad reportada entre los años 2006 y 2008, donde los manatíes eran víctimas de estos artes de pesca.

Los manatíes son animales que nadan lentamente (5-7 km por hora) a su vez, su cuerpo cilíndrico y de gran diámetro junto a su poca destreza hace que caigan fácilmente en las redes (MIGNUCII-GIANONI, 1990, MIGNUCII-GIANONI et al, 1991).

Los manatíes son mamíferos de comportamiento tímido, cuya estrategia para defenderse es huir y esconderse (FREEMAN & QUINTERO, 1990). Es de esperar que en áreas con excesivo movimiento antrópico, bien por tránsito de botes y por activi-dad de pesca, los manatíes tiendan a huir o por lo menos a disminuir su actividad (YOUNG et al, 1993). Al igual que todos los mamíferos, el manatí

Figura 1. Cadáveres de manatí (Trichechus manatus manatus) encontrados en el área de estudio entre los años 1987 y 2008

Page 9: Cibio.univ Alicant

9

Cuadernos de Biodiversidad

posee respiración pulmonar, por lo que cada dos o tres minutos emerge a la superficie para respirar, pudiendo realizar apneas de hasta 20 minutos, esto los hace vulnerables a las embarcaciones pesqueras que pueden ocasionarles la muerte al impactar contra su cuerpo (NACIONAL MARINE FISHERIES SERVIE, 1992).

Los resultados muestran que la actividad pesquera podría tener gran impacto en las poblaciones de manaties, siendo importante controlar un posible aumento en la actividad antrópica local, que conlle-varía al desplazamiento de los manatíes del interior de la Bahía de Nazabal.

Se les observa fácilmente en grupos de dos a cua-tro animales durante la actividad de apareamiento en los sitios donde se concentra el alimento, y en el invierno en las aguas cálidas cercanas a las desembo-caduras de ríos, siendo las muertes más frecuentes en los primeros meses de cada año de estudio en estas zonas (Figura 2).

Los cadáveres de manatíes se encontraron fundamentalmente en cuatro estados de descom-posición, los cuales fueron, huesos secos, animales en avanzado estado de descomposición, anima-les moderadamente descompuestos, y cadáveres frescos. Algunos de los manatíes se encontraron desmembrados e incluso con heridas punzantes lo que indica que la carne fue usada para el consumo humano, como muestra la Figura 3. Se registran muertes por ahogamiento, a pesar de que en algunos animales, por su estado, no fue posible determinar la causa exacta. Se tomaron muestras de material óseo, músculo etc, para futuros estudios genéticos y ecotoxicológicos así como para la determinación de la edad de los animales.

Las causas que pudieran estar causando directa-mente la muerte de los individuos de la población que vive el la Bahía Nazabal, son la pesca con chin-chorreo y el excesivo trasporte de embarcaciones pesqueras en el área.

Figura 2. Cadáveres por meses en los años estudiados.

Page 10: Cibio.univ Alicant

10

Cuadernos de Biodiversidad

Debido a las abundantes muertes de esta especie de importancia biológica y ecológica que tiene esta especie para la bahía y a raíz del presente estudio, se creó en la Bahía de Nazabal una Micro-estación Biológica, dentro de la Estación Biológica Manatí, perteneciente a la Empresa Nacional para Protec-ción de la Flora y la Fauna, con el objetivo de forta-lecer las acciones de conservación y protección del manatí, así como promover la educación ambiental y realizar estudios de abundancia, distribución y análisis de la mortalidad en dicha bahía. Se declaró la Bahía de Nazabal como Zona Protegida o bajo Régimen Especial de Uso y Protección, decretado por la Secretaria de la Comisión Consultiva de Pesca. El chinchorreo en la bahía se eliminó casi completamente, quedando un sector donde aun se realiza este arte de pesca, si bien, hasta la fecha no han aparecido más muertes.

Estos estudios de mortalidad de manatíes han servido como puente para un entendimiento entre diferentes usuarios de estas áreas, lo que permitirá un mejor manejo de la misma con la finalidad de garantizar la supervivencia del manatí.

La conservación del Trichechus manatus manatus requiere una preservación del ambiente como un todo (MIGNUCCI-GIANNONI et al 1993), incluyendo otras especies que comparten el hábitat con el manatí. Debe continuar el apoyo a la inves-tigación científica de ésta y otras especies en el Área Protegida Lanzanillo-Pajonal-Fragoso, con miras a la valoración cultural y conservación de nuestros recursos.

REFERENCIAS

ALCOLADO, M. P. 2007. Ecosistema Sabana-Camaguey. Estado actual, avances y desafio en la protección y uso sostenible de la biodiversidad. Proyecto PNUD. Editoial Academia 182 pp.

DOMNING, D.P. & L.C. HAYEK. 1986. Interspecific and intraspecific morphological variation in manatees (Sirenia: Trichechus). Mar. Mamm. Sci. 2:87-144.

FREEMAN, J. & H. QUINTERO. 1990. The distribution of West Indian manatees (Trichechus manatus) in Puerto Rico: 1988-1989. NTIS PB91-137240. Springfield, VA. 43 pp.

LEFEBVRE, L.W., T.J. O’SHEA, G.B. RATHBUN & R.C. BEST. 1989. Distribution, status,and biogeography of the West Indian manatee. Biogeography of the West Indies, 567-610.

NATIONAL MARINE FISHERIES SERVICE. 1992. Proposed Regime to Govern Interactions Between Marine Mammals and Commercial Fishing Operations. Silver Spring, MD. 96 pp.

RATHBUN, G.B., CARR, N., CARR, T., & C.A. WOODS. 1985. The distribution of manatees and sea turtles in Puerto Rico, with emphasis on Roosevelt Roads Naval Station. NTIS PB 85-151847 AS. Springfield, VA. 83 pp.

YOUNG, N.M., S. IUDICELLO, K. EVANS, & D. BAUR. 1993. The incidental capture of marine mammals in U.S. fisheries: problems and solutions. Center for Marine Conservation, Washington, D.C. 415 pp.

Figura 3. Manatíes encontrados en diferentes estados de descomposición en la costa de la Bahía de Nazabal.

Page 11: Cibio.univ Alicant

11

Cuadernos de Biodiversidad

ESTUDIO DE LA ESTABILIDAD GENÉTICA MEDIANTE EL USO DE MARCADORESRAPD EN IPOMOEA: UNA ALTERNATIVA PARA LA CONSERVACIÓN DE LA DIVERSIDAD BIOLÓGICAMEDIANTE TÉCNICASM O L E C U L A R E SO.S. González Paneque, A. Fernández, Y. Fraga, B. Pino, M.M. Hernández Espinosa, J.J. Silva Pupo, Á. Espinosa Reyes y J. Pérez Pérez1 CENTRO DE ESTUDIOS DE BIOTECNOLOGÍA VEGETAL. FACULTAD DE CIENCIAS AGRÍCOLAS. UNIVERSIDAD

DE GRANMA. APDO. 21. BAYAMO. CP: 85100. GRANMA. CUBA.2 LABORATORIO DE FISIOPATOLOGÍA. DEPARTAMENTO DE FITOPATOLOGÍA. CENTRO NACIONAL DE SANIDAD

AGROPECUARIA DE LA HABANA (CENSA). SAN JOSÉ DE LAS LAJAS. LA HABANA. CUBA.3 DEPARTAMENTO DE GENÉTICA Y MEJORAMIENTO DE LAS PLANTAS. INSTITUTO NACIONAL DE CIENCIAS

AGRÍCOLAS DE LA HABANA (INCA). GAVETA POSTAL 1. SAN JOSÉ DE LAS LAJAS. LA HABANA. CP: 32700. CUBA.

E-MAIL: [email protected]

RESUMEN

El trabajo se realizó en el Centro de Estudios de Biotecnología Vegetal de la Facultad de Cien-

cias Agrícolas, perteneciente a la Universidad de Granma, Cuba; para lo cual, se emplearon raíces tuberosas del clon de boniato (camote) INIVIT B 93-1, trasladadas al laboratorio y colocadas en fras-

Page 12: Cibio.univ Alicant

12

Cuadernos de Biodiversidad

establishment of strategies and procedures for the conservation and diffusion of the biodiversity.

Key words: ADN, sweet potato, molecular, RADP.

INTRODUCCIÓN

El boniato (Ipomoea batatas (L.) Lam.) es común-mente consumido en el mundo y la obtención de material de siembra mediante la micropropagación acelerada representa una alternativa para la pro-ducción de “semilla” de alta calidad (LÓPEZ et al., 2002) y el empleo de las técnicas in vitro posibilitan resolver esta situación favoreciendo la multiplicación del mismo.

Una vía de multiplicación acelerada de los cultivos es la embriogénesis somática, la que representa un gran avance en el empleo de las técnicas de cultivo de tejidos vegetales (MERKLE, PARROT & FLINN, 1995); siendo su aplicación de gran importancia en los cultivos de interés agrícola (FREIRE, 2001), aunque todavía no ha sido señalada para algunas especies (PARROT, 2002). Conjuntamente con ello, se hace necesario la identificación genética del material vegetal, para lo cual se emplean los mar-cadores morfológicos, bioquímicos y moleculares (CORNIDE et al., 2002). Según FORD-LLYOD (2001), la identificación basada exclusivamente en marcadores morfológicos, no es totalmente satis-factoria debido a su lentitud y de ahí la necesidad del empleo de otros medios como los moleculares (VARGAS et al., 2002).

Los marcadores pueden ser empleados para bus-car diferencias en los patrones de expresión entre plantas; lo cual indica que son específicos para cada material genético, siendo una vía que confirma que el método puede ser usado para evaluar las variaciones genéticas en las plantas (RODRÍGUEZ, 2005). De ahí que desde el punto de vista conservacionista, el empleo de las técnicas de cultivo in vitro han resul-tado ser muy útiles para la protección de la flora amenazada y se ha convertido en una alternativa muy eficaz para la conservación de las especies a nivel mundial (SERNA, 1999). Sin embargo, es necesario tener presente la estabilidad y variabilidad del mate-rial vegetal para lograr una correcta manipulación y conservación del mismo.

cos con agua para inducir la brotación de las yemas, y vitroplantas de embriones somáticos obtenidos de callos a partir de limbos foliares, sembrados en medio MS; y para ambos casos se tomaron al azar muestras de limbos foliares para estudiar la esta-bilidad del material propagado mediante análisis moleculares del ADN (RAPD), empleando diez cebadores arbitrarios (OPF y OPA), evaluándose las bandas existentes entre el donante y el regenerante por su presencia y ausencia. Es necesario el moni-toreo molecular del material vegetal para la conser-vación de la biodiversidad genética en las diferentes localidades, regiones y países. Como resultado, siete cebadores produjeron una amplificación aceptable en cuanto a la intensidad de bandas en el donante y las vitroplantas obtenidas a partir de embriones somáticos, existiendo un alto monomorfismo entre ambos materiales, lo cual puede brindar mayor y más certera información del material vegetal para el establecimiento de estrategias y procedimientos a favor de la conservación y difusión de la biodi-versidad.

Palabras clave: ADN, boniato, molecular, RAPD.

ABSTRACT

This work was conducted in the Centre of Studies of Plant Biotechnology of the Faculty of Agricultural Sciences of the University of Granma. We used tuberous roots of the sweet potato clone INIVIT B 93-1 and vitroplants derived from somatic embryos coming from calli obtained from leaf tissue grown in MS medium. Tissue samples from both types of plant material were randomly obtained and their genetic stability analyzed by molecular analysis of the ADN (RAPD), using ten arbitrary primers (OPF y OPA) and evaluating the bands in terms of presence and absence. Such a molecular monitoring is required for any study of genetic diversity conservation to be conducted in different localities, regions and countries. As a result, seven primers produced an acceptable amplification, indicated by the intensity of the bands found in the donor and the somatic embryo-derived vitroplants. The high monomorphism appearing between both materials gives more accurate information for the

Page 13: Cibio.univ Alicant

13

Cuadernos de Biodiversidad

Como una vía segura de identificación y carac-terización del material vegetal en los últimos años se han desarrollado y aplicado con éxito las técnicas de los marcadores moleculares para el estudio de poblaciones de plantas posibilitando la conserva-ción de la biodiversidad de las especies vegetales en el planeta. Al ser analizada la identificación de genotipos, específicamente mediante RAPD, podemos plantear que ha sido posible su empleo en varias especies debido a que cada cultivo pro-duce un patrón reproducible de bandas de ADN amplificado (VERA, 1999).

Como parte de los trabajos que se llevan a cabo en el estudio de la diversidad genética en el cultivo del boniato, se desarrolló la presente investiga-ción donde perseguimos como objetivo evaluar, mediante el uso de los marcadores RAPD, la estabi-lidad genética del material para lograr un adecuado manejo y conservación de los recursos vegetales en esta especie.

MATERIAL Y MÉTODOS

Se emplearon plantas provenientes de raíces tuberosas pertenecientes al clon INIVIT B 93-1, cul-tivadas en parcelas experimentales de investigación, según el Instructivo Técnico del boniato (CUBA. MINAGRI, 1998), trasladadas al laboratorio y colocadas en frascos con agua en condiciones semi-controladas para inducir la brotación de las yemas y vitroplantas (Figura 1) procedentes de embriones

somáticos (Figura 2) obtenidos a partir de callos de limbos foliares de 1 cm2 (GONZÁLEZ et al., 2001), sembrados con la superficie adaxial (Figura 3) en contacto con el medio de cultivo propuesto por MURASHIGE & SKOOG (1962); para ambos casos se tomaron los limbos foliares para realizar los análisis moleculares del ADN.

Con la finalidad de evaluar la utilización de la Técnica de Amplificación Aleatoria del ADN Poli-mórfico (RAPD), para estudiar la estabilidad del material propagado, se tomaron al azar muestras de tejido foliar de brotes de raíces tuberosas con 25 días y vitroplantas con 20 días de edad. Se extrajo el ADN genómico total, según el método descrito por DELLAPORTA, WOODY y HICH (1983). La concentración de ADN de cada muestra fue determinada por espectrofotometría y se estimó la medición a la intensidad óptica de 260 y 280 nm en un espectrofotómetro. La reacción de amplificación se realizó en un volumen total de 25 uL que con-tenía: 10 mM Tris-HCL a pH 8,3; 50 mM KCL, 2 mM MgCL2, 0,001% de gelatina; 100 uM de cada dNTPs, 5 pmoles de los cebadores Kits OPA y OPF, 5 ng de ADN genómico y 2 L de taq ADN polimerasa (Amplicen).

Se usaron diez cebadores arbitrarios que fueron los siguientes: OPF-15, OPF-14, OPA-13, OPF-13, OPF-04, OPF-07, OPF-01, OPF-03, OPA-12 y OPF-05; los cuales han sido usados con anterioridad para este tipo de estudio en diferentes cultivos por PETEIRA et al. (1999 y 2001).

Figura 1. Plantas provenientes de raíces tuberosas y vitroplantas procedentes de embriones somáticos pertenecientes al clon INIVIT B 93-1.

Page 14: Cibio.univ Alicant

14

Cuadernos de Biodiversidad

Se evaluaron las bandas existentes en el donante y el regenerante de forma binaria por su presencia (1) y ausencia (0), visualizándose a través de foto-grafías. Los resultados se expresaron en porcentajes de monomorfismo.

RESULTADOS

Como parte de la necesidad del monitoreo molecular del material vegetal y la conservación de la biodiversidad, se hace necesario llevar a cabo estos trabajos para el estudio de la diversidad genética y la conservación de los recursos genéticos en las diferentes localidades, regiones o países.

De un total de diez cebadores ensayados, siete produjeron una amplificación aceptable en cuanto a la intensidad de bandas (OPF-15, OPF-14, OPF-04, OPF-07, OPF-01, OPA-12 y OPF-05) y los ceba-dores más informativos fueron el OPF-01, OPA-12 y OPF-07, al generar el mayor número de bandas en el donante y las vitroplantas obtenidas a partir de embriones somáticos (Tabla I), coincidiendo el total de bandas obtenidas para el donante y las vitro-plantas con todos los cebadores empleados (Figura 4), existiendo un alto monomorfismo entre ambos materiales (100%).

A partir de los resultados obtenidos se puede plantear que la amplificación del ADN de los mate-riales con los cebadores utilizados, produjo un alto grado de monomorfismo, presentando las plantas procedentes de embriones somáticos patrones de bandas idénticos al donante en la región del ADN explorada por los mismos. Las semejanzas observadas en el ADN genómico de las plantas donante y las vitroplantas obtenidas a partir de embriones somá-ticos evidenciaron que no se observó polimorfismo para los cebadores empleados. Siendo de esperar que, en futuros estudios que se realicen con el empleo de un mayor número de marcadores moleculares, brinden una mayor y más certera información del material vegetal para el establecimiento de estrategias y procedimientos a favor de la conservación y difu-sión de la biodiversidad, con la seguridad genética de las especies de que se dispone y un mejor uso de las mismas.

La funcionalidad de los cebadores empleados en este trabajo, para detectar variación genética, ha sido

La amplificación fue llevada a cabo en un ter-mociclador y la reacción de amplificación se realizó durante 45 ciclos de 1 minuto a 94°C, 1 minuto a 36°C, 2 y 10 minutos a 72°C (Peteira et al., 1999). Los productos de la amplificación, separados mediante electroforesis vertical en gel de agarosa al 1,5% en solución amortiguadora de Tris-HCL ácido bórico EDTA (TBE) 0,5X a 110 volts, fueron teñidos con bromuro de etidio (5 mg.mL-1) y visua-lizados en un transiluminador ultravioleta.

Figura 2. Embriones somáticos obtenidos a partir de callos de limbos foliares.

Figura 3. Callos con estructuras embriogénicas obtenidos a partir de limbos foliares.

Page 15: Cibio.univ Alicant

15

Cuadernos de Biodiversidad

informada por PETEIRA et al. (1999 y 2001), en estudios de diversidad genética en diferentes especies vegetales del género Lycopersicon, quienes demostra-ron que los mismos son efectivos para llevar a cabo

estos estudios y no han sido señalados con anterio-ridad para el cultivo del boniato, por lo que deberán probarse otros cebadores antes de hacer conclusivos los resultados de monomorfismo encontrados para el

Tabla I. Resultados del análisis de los RAPD en el material donante y el material regenerado a partir de embriones somáticos en el clon INIVIT B 93-1

Clon INIVIT B 93-1

CebadorTotal de bandas (n) Bandas

monomórficasMonomorfismo

(%)Donante Regenerado

OPF-15 4 4 4 100

OPF-14 2 2 2 100

OPA-13 5 5 5 100

OPF-13 1 1 1 100

OPF-04 3 3 3 100

OPF-07 5 5 5 100

OPF-01 6 6 6 100

OPF-03 2 2 2 100

OPA-12 6 6 6 100

OPF-05 6 6 6 100

--- 40 40 40 100

Figura 4. Productos de la amplificación por PCR del ADN en Ipomoea batatas 1 – Material donante. 2- Vitroplantas obtenidas a partir de embriones somáticos.

Page 16: Cibio.univ Alicant

16

Cuadernos de Biodiversidad

donante y las plantas regeneradas a partir de embrio-nes somáticos del clon INIVIT B 93-1.

DISCUSIÓN

Referente al empleo de los marcadores mole-culares, diferentes autores como Ramírez (2005), plantearon que son una herramienta eficaz para monitorear la estabilidad genética del material vegetal, y por otra parte (RODRÍGUEZ & ARENCIBIA, 2002; COTO & CORNIDE, 2002), dejaron claro que los mismos brindan más información que los marcadores morfológicos, pues el polimorfismo detectado es mayor y no están influenciados por el ambiente. Estas inves-tigaciones son necesarias para poder identificar el comportamiento y los cambios que se llevan a cabo en el material vegetal en la naturaleza y los mismos no pueden ser observados de inmediato y a simple vista, trayendo consigo otras consecuencias en la biodiversidad vegetal; de igual manera, se puede conocer el impacto que ocasiona el cambio climá-tico actual y la actividad del hombre en la natura-leza, posibilitando el establecimiento de patrones moleculares de estricta observación y respeto para el estudio de la biodiversidad.

Por otra parte, las investigaciones de los marca-dores moleculares, permiten conocer de las especies identificadas la información que las mismas ofrecen de su composición molecular especifica, de su tra-yectoria genética, características y actividad; todo lo cual puede ser empleado para futuros estudios, ofreciendo posibles caminos a soluciones básicas de la conservación y estudio de la biodiversidad; a pesar de que los momentos actuales no permiten disponer de las técnicas moleculares en todos los laboratorios y áreas de conservación de la biodiversidad, si se considera una importante solución para el estudio de los problemas que existen actualmente de las pérdidas de la biodiversidad y las necesidades de su protección urgente.

Los RAPD han sido usados extensamente para determinar la diversidad genética y relaciones entre especies (IPEK & IPEK, 2003; BAMBERG & DEL RIO, 2003). En el cultivo del boniato, los estudios moleculares con el empleo de RAPD han sido usados específicamente en algunos cultivares para la estima-

ción de la diversidad genética, en el mapeo genético de los clones de interés y la localización de genes en las raíces resistentes a nemátodos (TSENG et al., 2001), no existiendo información en lo referente a estudios llevados a cabo en el material propagado vía embriogénesis somática.

Al respecto SÁNCHEZ et al. (2003), plantearon que los análisis de RAPD pueden ser usados para la identificación de cultivares; además, para distinguir diferencias entre genotipos.

Desde el punto de vista molecular, el cultivo del boniato ha sido poco investigado, aspecto que se hace necesario enfatizar, ya que según GONZÁLEZ (2003), la aplicación de las técnicas de cultivo de tejidos vegetales requieren como análisis comple-mentarios los estudios de la estabilidad genética del material obtenido. A partir de estos resultados se logra un mayor entendimiento de la necesidad de efectuar estudios moleculares del ADN en el material vegetal, para alcanzar una mayor riqueza y seguridad en las especies a conservar, proteger y extender en los diferentes ecosistemas, garantizando la protección de los mimos.

Los estudios a nivel molecular tienen especial relevancia en los momentos actuales, donde se ejecutan trabajos de selección acelerada y mejo-ramiento genético a los que están sometidos la mayoría de los cultivos aprovechando el uso de las modernas tecnologías en los cultivos agrícolas; todo ello permite evaluar la aparición de nuevas variedades y su comparación con las ya existentes, lo que permitirá el aumento de la biodiversidad del material genético.

El estudio de los recursos genéticos a nivel mole-cular se hacen cada día más necesarios para controlar y evitar la pérdida de la biodiversidad; todo lo cual pone en peligro la disponibilidad de alimentos a nivel mundial y con ello la conservación de las especies de interés para el hombre con la mayor calidad y canti-dad posible. En este sentido, el empleo de las técnicas moleculares, resulta de gran utilidad e importancia en la elaboración de futuros protocolos de investiga-ción y producción a gran escala de material vegetal genéticamente conocido y a favor de la diversidad vegetal con una función protectora y evaluadora de los posibles cambios presentados por la contamina-ción ambiental y la acción del hombre.

Page 17: Cibio.univ Alicant

17

Cuadernos de Biodiversidad

Los resultados obtenidos servirán de base a otros estudios y permitirán evaluar, controlar y trazar estrategias para la conservación y uso de los recursos genéticos, todo lo cual se traduce en la conservación de la biodiversidad vegetal y con ello la vida en el planeta.

AGRADECIMIENTOS

Los autores agradecemos a los miembros del Ins-tituto Nacional de Ciencias Agrícolas de La Habana (INCA), específicamente al Departamento de Gené-tica y Mejoramiento de las Plantas, especialmente a la Dra.C. Martha Álvarez Gil, el MSc. Juan Castillo Hernández, la Técnica Mirtha López Machado y el administrador Técnico Pedro Brito Gaspar. Al Dr.C. Benedicto Martínez Coca, perteneciente al Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria de La Habana (CENSA). A los investigadores Dr. C. Luís M. González Nuñez y el Dr.C. Ramiro Ramírez, ambos del Instituto de Investigaciones Agropecua-rias “Jorge Dimitrov”, Provincia de Granma, por las correcciones del documento y la toma de las fotos presentadas en el mismo, respectivamente. A los miembros del Instituto Nacional de Investigaciones de Viandas Tropicales (INIVIT), Santo Domingo, Villa Clara, por la facilitación del material vegetal para realizar la investigación. A los miembros del Club de Computación y Electrónica de la ciudad de Manzanillo, Provincia de Granma, especialmente a los directivos del mismo, los MSc. Dionisio Ponce Ruiz y Omar Pérez Lozada, por la facilitación de la tirada final del presente artículo.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

BAMBERG, J. & A. DEL RÍO. 2003. Vulnerability of alleles in the us potato gene bank extrapolated from RAPDs. Amer. J. of Potato Res. 80: 79-85.

CORNIDE, M. T., J. SÁNCHEZ & D. CALVO. 2002. Identificación de genotipos y progenitores. En: M. T. Cornide (ed), Marcadores Moleculares. Nuevos horizontes en la genética y la selección de las plantas. Capítulo 7. La Habana. Pp. 212-220.

COTO, O. & M. T. CORNIDE. 2002. Principales aplicaciones de los marcadores moleculares. En: M. T. Cornide (ed), Marcadores Moleculares.

Nuevos horizontes en la genética y la selección de las plantas. Capítulo 4. La Habana. Pp. 92-119.

CUBA. MINAGRI. 1998. Instructivo técnico sobre el cultivo del boniato. SEDAGRI/AGRINFOR. La Habana. 21 pp.

DELLAPORTA, L., J. WOODY & J. HICH. 1983. A plant molecular DNA minipreparation. Versión II. Plant Mol. Biol. 1: 19-21.

FORD-LLYOD, B. 2001. Genotyping in plant genetic resources. Plant genotyping: the DNA fingerprinting of plant. CAB International. 56 pp.

FREIRE, M. 2001. Nueva metodología de embriogénesis somática en caña de azúcar (Saccharum sp.) Híbrido var. C 87-51, empleando medios de cultivo líquidos. Jornada XXXV Aniversario del INIVIT, Santo Domingo, Villa Clara. 56 pp.

GONZÁLEZ, M. E. 2003. Micropropagación de cafeto (Coffea canephora P. var. Robusta) mediante la embriogénesis somática con el empleo de metabolitos de origen bacteriano. Tesis de Grado (Dr. en Ciencias Agrícolas). INCA. La Habana. 97 pp.

GONZÁLEZ, O., J. SILVA, A. ESPINOSA, E. OLIVA & I. MILANES. 2001. Efecto de la iluminación en la inducción de callos morfogénicos en boniato. Biotecnología Vegetal 1(2): 89-92.

IPEK, M. & A. IPEK. 2003. Comparing of AFLPs, RAPD markers, and isoenzymes for diversity assessment of garlic and detection of putative duplicates in germplasm collections. J. Amer. Soc. Hort. Sci. 128(2): 246-252.

LÓPEZ, J., M. TORRES, C. BORROTO, R. TRUJILLO, M. DAQUINTA, R. GÓMEZ, M. GARCÍA, V. MEDERO, J. VENTURA, N. MONTANO, A. MORALES, M. CABRERA, A. ROBAINA, A. RAYAS, & C. PONS. 2002. Metodología para la propagación in vitro del boniato. Jornada XXXV Aniversario del INIVIT, Santo Domingo, Villa Clara. 18 pp.

MERKLE, S., W. PARROT & B. FLINN. 1995. Morphogenic aspects of somatic embryogenesis. En: T. A. Thorpe (ed), In Vitro Embryogenesis in Plants. Klumer Academic Publishers. Pp. 155-203.

Page 18: Cibio.univ Alicant

18

Cuadernos de Biodiversidad

MURASHIGE, T. & F. SKOOG. 1962. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue culture. Physiology Plantar 15: 473-497.

PARROT, W. 2002. La embriogénesis somática en las angiospermas. Conferencia. VI Simposio Internacional de Biotecnología Vegetal. Instituto de Biotecnología de las Plantas, Santa Clara. Pp. 7-17.

PETEIRA, B., B. FERNÁNDEZ, P. GARCÍA, E. MIRANDA, O. LEON & I. MIRANDA. 1999. Repetibilidad de los marcadores RAPD en el género Lycopersicon. Breve estudio. Protección Vegetal 14(2): 75-79.

PETEIRA, B., E. FERNÁNDEZ, M. GONZÁLEZ, T. SHAGARODSKY & I. MIRANDA. 2001. Aplicación de marcadores RAPD al estudio de la diversidad genética en Cuba. Protección Vegetal 16(2-3): 84-91.

RAMÍREZ, R. 2005. Uso de bajas dosis de rayos x en la estimulación del crecimiento, rendimiento y calidad del fruto en plantas de tomate (Lycopersicon esculentum, Mill). Tesis de Grado (Dr. en Ciencias Agrícolas). INCA. La Habana. Pp. 99.

RODRÍGUEZ, M. & A. ARENCIBIA. 2002. Principales tipos de marcadores del polimorfismo de los ácidos nucleicos. Técnicas Analíticas. En:

M. T. Cornide (ed), Marcadores Moleculares. Nuevos horizontes en la genética y la selección de las plantas. Capítulo 1, Pp. 13-35.

SÁNCHEZ, M., M. MARTÍNEZ, S. VALLADARES, E. FERRO & A. VIEITEZ. 2003. Maturation and germination of oak somatic embryos originated from leaf and stem explants: RAPD markers for genetic analysis of regenerants. J. Plant Physiology 160: 699-707.

SERNA, M. D. 1999. Biotecnología vegetal y coservación. Cuadernos de Biodiversidad. Universidad de Alicante, España. 2:9-11.

TSENG, Y., H. LO & S. HWANG. 2001. Genotyping and assessment of genetic relationships in elite polycross cultivars of sweet potato in Taiwan based on SAMPL polymorphism. Botanical Bulletin of Academia Sinica 43: 99-104.

VARGAS, D., A. ROQUE & E. HECTOR. 2002. Empleo de la técnica AFLP para determinar la estabilidad de plantas de frutabomba (C. papaya cv. Maradol rojo) durante la micropropagación. VIII Congreso Científico del INCA. Cultivos Tropicales, La Habana. Pp. 24.

VERA, CL., M. PAREDES & V. BECERRA. 1999. Estudio comparativo de diversidad morfológica, isoenzimas y RAPDs dentro y entre clases comerciales de Frijol chileno (Phaseolus vulgaris L.). Agricultura Técnica 59(4): 247-259.

Page 19: Cibio.univ Alicant

19

Cuadernos de Biodiversidad

RESUMEN

En los últimos años se ha manifestado una tendencia creciente a valorizar el conocimiento tradicional de la naturaleza, incluyendo su manejo y conservación. Este conocimiento, transmitido en forma oral en aquellos pueblos que conservan su estructura social y tradiciones, constituye un verdadero patrimonio o memoria biocultural. Para los ideólogos y ecólogos profesionales puede resul-tar especialmente interesante conocer y aprender a valorar esta memoria biocultural.

En esta nota comentamos dos libros reciente-mente aparecidos que se refieren al tema. El de Victor Manuel Toledo y Narciso Barrera-Bassols tiene un enfoque mundial y una amplia discusión sobre la importancia de la memoria biocultural y con ella de la etnoecología que sería justamente el estudio de esta memoria. El segundo libro de Eckart Boege, centra su interés en México y su énfasis en la relación que existe entre conservación de la memoria biocultural y la apropiación del uso de los recursos naturales por los pueblos indígenas.

Ambos libros se complementan y presentan de una manera excepcional un panorama lleno de suge-rencias en esta época en que resulta ineludible buscar una estrategia de uso sustentable para los recursos biológicos y en general naturales.

ABSTRACT

In recent years there has been an increasing tendency to place greater value on traditional knowledge about nature, as well as its management and conservation. This knowledge, transmitted orally in villages where the traditions and social structure have been preserved, represent a genuine legacy: a biocultural memory. For professional biologists and ecologists it is particularly interesting to learn about and appreciate the depth of this biocultural memory.

In this note we comment on two recently published books that address this topic. In the first, Victor Manuel Toledo and Narciso Barrera-Bassols take a worldwide perspective and offer a far reaching discussion on the importance of biocultural memory and, along with it, the ethnoecology which makes up the study of this memory. Eckart Boege, author of the second book, focuses on Mexico and emphasizes the relationship that exists between biocultural memory and the appropriation of the use of natural resources by indigenous peoples.

These two books complement each other beautifully and offer an exceptionally useful panorama of suggestions at a time when it is imperative that we find strategies for the sustainable use of biological resources and natural resources in general.

G. HalffterINSTITUTO DE ECOLOGÍA, A.C. KM. 2.5 CARR. ANTIGUA A COATEPEC NO. 351. CONGREGACIÓN EL HAYA. XALAPA, [email protected]

L A M E M O R I A B I O C U L T U R A L

Page 20: Cibio.univ Alicant

20

Cuadernos de Biodiversidad

Es realmente excepcional tener la ocasión de comentar la presentación simultánea de dos notables libros1 sobre el patrimonio biocultural de los pue-blos indígenas. Sin embargo, no es inesperado. Se conjugan la creciente valorización del conocimiento tradicional ecológico y en general biológico; la importancia del patrimonio biocultural en México; y la existencia en nuestro país de varios grupos de investigación dedicados a estudiar y valorizar este patrimonio y su conocimiento tradicional.

Aunque coincidiendo en la temática y en sus principales conclusiones, los dos libros muestran diferencias importantes en su contenido. Por eso, he considerado conveniente comentarlos por sepa-rado.

Como señalan Toledo y Barrera-Bassols, de todas las expresiones que integran una cultura, los conoci-mientos sobre la naturaleza conforman una dimen-sión especialmente notable porque compendian las observaciones sobre el entorno, realizadas, manteni-das y perfeccionadas a través de largos periodos de tiempo. Conocimientos y usos de la biodiversidad han estado asociados en las culturas tradicionales a formas de conservación que hacen su utilización sus-tentable. Estas formas de uso dependen de delicados equilibrios entre el conocimiento de suelos y biota y la explotación que se hace de ellos. A medida que se extienden y penetran los procesos de globalización: culturales y comerciales, las demandas de espacio y de recursos se incrementan y ponen en peligro los conocimientos y usos tradicionales.

Los dos primeros capítulos de “La Memoria Biocultural” están destinados a explicar la esencia, estructura y dinámica de esta memoria, su impor-tancia para la conservación de la biodiversidad y las amenazas a las que se enfrenta. Basándose en un acucioso análisis de la bibliografía, los autores esta-blecen la sobreposición geográfica de las áreas más ricas en diversidad biológica, diversidad lingüística y diversidad en usos agrícolas y pecuarios. Este es

un tema que también trata con amplitud Boege en relación a México.

Resulta muy interesante el valor de la agricultura tradicional en nuestros días: la quinta parte de la población mundial la práctica y con ello satisface sus necesidades y las de una población equivalente a la suya. La importancia de los territorios indígenas para la conservación de la biodiversidad es evidente. De hecho, los pueblos indígenas controlan, legalmente o no, inmensas áreas ricas en recursos naturales (según los autores, del 12 al 20% de la superficie terrestre). Tanto la información reunida por Toledo y Barrera-Bassols, como sus propios juicios y análisis, permiten asegurar que en el pasado, como ahora y en el futuro, las estrategias tradicionales de uso múltiple han sido y son el elemento más importante para la conservación de la heterogeneidad y estabilidad de los paisajes y por lo tanto de su riqueza biótica. Un tema también tratado por Boege.

Los capítulos III y IV de “La Memoria Biocul-tural” son altamente personales. En ellos los autores incluyen no solo sus conocimientos, sino también sus pasiones, aunque en este último caso siempre con una mesura lingüística encomiable.

En el capítulo III enfocan la existencia de dos ciencias: la tradicional, integrada a través del tiempo desde la revolución neolítica que da nacimiento a la agricultura y a la ganadería; y la moderna, desarro-llada en los últimos trescientos años en las sociedades industriales de Occidente. Los autores recalcan la falta de interés de la segunda por los conocimientos acumulados por la primera. Dicen “… la fascinación por las nuevas tecnologías agrícolas, derivadas de la química y la genética y del uso de combustibles, sepultó la experiencia de manejo de la naturaleza ganada por la especie humana en su modalidad preindustrial”. Sin embargo, señalan que a partir de la década de los ochentas del siglo pasado, se inicia un movimiento importante de retorno a “la otra ecología”. Este movimiento ha sido motivado por la conciencia creciente de una crisis ambiental en el Planeta y la acumulación de evidencias que muestran la incapacidad de los sistemas productivos modernos para un uso sustentable de los recursos naturales.

El capítulo IV está destinado a describir qué son las sabidurías tradicionales, basándose en la distin-ción desarrollada por Luis Villoro entre ciencia y

1 Toledo, Victor M. y Narciso Barrera-Bassols. 2008. La Memoria Biocultural: La importancia Ecológica de las Sabidurías Tradicionales. Icaria Editorial, Barcelona. 220 p.

Boege, Eckart. 2008. El Patrimonio Biocultural de los Pueblos Indígenas de México: Hacia la Conservación In Situ de la Biodiversi-dad y Agrodiversidad en los Territorios Indígenas. Instituto Nacional de Antropología e Historia y Comisión Nacional para el Desarrollo de los Pueblos Indígenas, México, D.F. 342 p.

Page 21: Cibio.univ Alicant

21

Cuadernos de Biodiversidad

sabiduría. La ciencia es universal e impersonal; en cambio la sabiduría es local e individual. La ciencia no puede reemplazar a la sabiduría, ni ésta a aquella. A mi modo de ver, habría que hablar de complemen-tariedad, ya que en casi cualquier tipo de sociedad, aunque en muy distintas proporciones, ciencia y sabiduría forman parte de la visión global que los seres humanos tenemos de la naturaleza.

¿Dónde ubicar en esta dicotomía entre ciencia y sabiduría, la memoria biocultural indígena y local? En principio, los saberes tradicionales se encuentran más cercanos a lo que se ha definido como sabiduría, porque los conocimientos tradicionales no se gestan per se, sino en función de otros dos contextos de las culturas tradicionales: la producción y las creencias. Todo lo anterior lleva a Toledo y Barrera-Bassols a definir que debe ser la etnoecología: un estudio de la concepción de los productores tradicionales en sus dimensiones de sistemas de conocimiento, sistemas de creencias y de prácticas con las que los individuos y sus familias satisfacen sus necesidades materiales y espirituales.

El capítulo V, Agroecología y Sabiduría, contiene una serie de ejemplos bien escogidos y documenta-dos, de situaciones agroecológicas tradicionales a nivel mundial.

El capítulo VI: Globalización, Memorial Bio-cultural y Agroecología, es una síntesis de los capí-tulos anteriores y una búsqueda de planteamientos alternativos. Señalan los autores que durante su larga historia biocultural el hombre ha favorecido y usado la biodiversidad. La actual globalización, por sus propias características y propósitos, es un proceso fundamentalmente homogenizador y como tal amenaza cualquier manifestación de diversidad muy especialmente la biológica y la biocultural. La agricultura industrial tiene entre sus muchos efectos negativos, la destrucción de la memoria biocultural integrada por los saberes acumulados durante 10 000 años de interacciones entre el hombre y la naturaleza. Ubicada en franca contraposición, la agroecología busca construir los fundamentos y métodos de una “agricultura alternativa”. La agroecología contempla el reconocimiento y valorización de la experiencia de los productores locales, especialmente de aquellos con una larga presencia histórica. La agroecología reconoce en la investigación participativa una acti-

vidad fundamental, situando al “diálogo de valores” como un propósito fundamental. Todo esto con-vierte a la agroecología en una alternativa en estos momentos de crisis.

Los autores, después de examinar las deficiencias de los sistemas de áreas naturales protegidas, consi-deran que los métodos de producción tradicionales como parte de una estrategia agroecológica, son el camino más apropiado para mantener y enriquecer la diversidad genética y paisajista.

Estoy de acuerdo con ellos en el papel irrempla-zable de los usos tradicionales en la conservación de la biodiversidad. Pero no coincido en equiparar las reservas de la biosfera con los tipos convencionales de área protegida. Las reservas de la biosfera se gestan en el marco del programa MAB de UNESCO. A lo largo de tres décadas de continuas controversias, han reforzado su propósito, muy explícitamente expresado, de no sólo conservar la riqueza biológica prístina, sino también aquellas especies y paisajes ligados a los usos tradicionales. Todo ello con la participación activa de las poblaciones locales. Las reservas de la biosfera son lo más cercano a una propuesta con límites geográficos, de lo que plan-tean Toledo y Barrera-Bassols. Puede alegarse y con indudable base, que en muchos casos reservas de la biosfera declaradas como tales no cumplen con los propósitos antes señalados. Creo que en estos casos lo que cabe hacer es exigir que se cumpla con los pro-pósitos internacionales a los que cada país miembro de MAB-UNESCO se ha comprometido.

En las paginas finales, los autores señalan: “el mundo moderno ha liberado enorme, digamos que gigantescas, fuerzas naturales y sociales. Pero ello ha tenido un costo, una doble paga: la violencia intraespecífica (incluyendo la marginación social) y la destrucción de la naturaleza … Pero además, para establecer las nuevas bases de un mundo actual, la civilización industrial ha tenido que destruir expe-riencias de muy largo tiempo” … “Visualizar una modernidad alternativa significa antes que nada, recuperar la memoria histórica; porque sólo inno-vando a partir, no en vez, de la experiencia acumu-lada a través del tiempo, es decir de la tradición, es que es posible crear un mundo duradero.”

El libro de Eckart Boege se refiere a México, trata en detalle a los pueblos indígenas mexicanos y su

Page 22: Cibio.univ Alicant

22

Cuadernos de Biodiversidad

repertorio de biodiversidad. Resalta en este texto un examen detallado y excepcionalmente bien ilustrado de los maíces mexicanos. Encuentro que es un libro muy especial porque no rehúye la importancia de las soluciones políticas, principalmente el control de su territorio y de sus riquezas naturales por los pueblos indígenas. Para Boege no hay pueblo sin territorio, y al territorio están ligados medio ambiente y bio-diversidad, su uso y su conservación. Creo que este es el planteamiento central del libro, mantenido a través de distintos capítulos.

Como Toledo y Barrera-Bassols, Boege insiste en la importancia de los usos tradicionales, tanto en la actualidad como para el desarrollo de modelos de uso más sustentables. Para que estos modelos funcionen es indispensable reconocer a los pueblos indígenas como sujetos sociales centrales de la con-servación de la naturaleza y el desarrollo sustentable. Por ejemplo, en los territorios indígenas se capta el 23.3% del agua y sin embargo no existen procesos compensatorios por el uso nacional de este servicio. Ante la importancia de la conservación ecológica de las partes altas de las cuencas, no existe un acuerdo entre pueblos indígenas y Estado para protegerlas, ni para garantizar el acervo de agua de las poblacio-nes indígenas, ni políticas de retribución por este servicio ecológico.

Me ha resultado muy interesante el análisis de correspondencia entre territorios indígenas y áreas naturales protegidas. Según Boege el 71% del territo-rio indígena coincide con algún tipo de área natural protegida. En 52 de las áreas naturales decretadas por la Federación habita población indígena (un total

de 5.5 millones de has.). Simplemente este grado de coincidencia demuestra que no puede haber una política eficiente de conservación sin la participación de los pueblos indígenas.

El uso-conservación de la diversidad natural, así como de las especies cultivadas, a través de los sis-temas tradicionales ha sido efectiva, como Boege lo ilustra en el caso de los maíces. Hay que revalorarla y situarla dentro del contexto de los programas nacio-nales. Como en el caso de otros recursos y servicios ambientales, la pérdida de continuidad cultural y en general los procesos de modernización ponen en muchos casos en riesgo este uso/conservación. Boege considera que el camino a seguir requiere de un respeto de los derechos y culturas indígenas y de un reparto equitativo de los posibles beneficios. Una y otra vez aparece la necesidad de un buen gobierno en las comunidades tradicionales como condición indispensable para evitar los abusos y daños deriva-dos de los intereses personales, tanto ajenos como propios a la comunidad.

De la lectura de los dos libros me queda la impre-sión de que este buen gobierno no es sencillo, ni mucho menos algo que se puede imponer desde el exterior. Me persiste una sensación de urgencia y de responsabilidad ante una crisis. No deben perderse las culturas tradicionales y su forma de uso y con-servación de la biodiversidad, para ello es necesario valorar y respetar las estructuras y culturas tradicio-nales. ¿Pero cómo lograr ésto ante una globalización poco crítica y planteada como solución universal a los problemas de nuestro tiempo? Creo que esta es la gran cuestión a resolver.

Page 23: Cibio.univ Alicant

23

Cuadernos de Biodiversidad

Enviar a:CIBIO. Universidad de Alicante. Apartado de correos 99. 03080-AlicanteFax: +34 965903815E-mail: [email protected]

NORMAS PARA LOS ARTÍCULOS

1) Título en el idioma del texto. En el caso de existir nombres latinos de los taxones pertenecientes a las categorías de género y especie en cursiva y con referencia, en su caso a un taxón de nivel familiar y de otro nivel superior.

2) Nombre del autor o de los autores del trabajo con la(s) inicial(es) del nombre propio y uno o dos apellidos com-pletos. En párrafo a parte se añadirán las direcciones completas de cada uno de los autores.

3) Resumen en inglés. Máxima extensión del resumen, 200 palabras.4) Palabras clave en inglés, hasta un máximo de 6.5) En el Texto, deberán respetarse las normas de los Códigos de Nomenclatura, todos los taxones de las categorías

de especie y género que se mencionen en el texto deberán llevar la primera vez que se aparezcan el nombre del autor y el año de su inclusión en la literatura biológica.

6) Las citas bibliográficas en el texto se harán como muestran los siguientes ejemplos:“…como indica FERNÁNDEZ (2002)”. O bien: “…en trabajos posteriores (LÓPEZ, 2004). Cuando los autores sean más de dos se utilizará la abreviatura et al. (Ej.: GARCÍA et al., 1990).

7) Bibliografía, en ella se incluirá únicamente las referencias citadas en el texto y se darán del siguiente modo: a) para un artículo:

BRUST, G. E., B. R. STINNER & D. A. MCCARTNEY. 1986. Predator activity and predation in corn agroecosystems. Environ. Entomol. 15:1017-1021.

b) para un libro o publicación no periódica:PRIMACK, R. 2002. Essentials of conservation biology. Sinauer Associates. U.S.A. 699 pp.

c) Para un artículo de libro:CROSSELY, D. A., G. J. HOUSE, R. M. SNIDER & B. R. STINNER. 1984. Positive interactions in

agroecosystems. En: R. Lowrence, B. R. Stinner & G. J. House (eds.), Agricultural Ecosystems. John Wiley and Sons, New York. Pp. 73-82.

SUSCRIPCIÓN A CUADERNOS DE BIODIVERSIDAD:

Si desea recibir Cuadernos de Biodiversidad de forma gratuita en su institución, por favor rellene el siguiente formulario:

Apellidos: .............................................................................................. Nombre: ........................

Profesión: ................................................................................. Cargo: ........................................

Lugar de trabajo: ...........................................................................................................................

Dirección: .....................................................................................................................................

Código Postal: ............................ Localidad: .............................................. Provincia: .................

Teléfono: ......................................... Fax: ............................................ e-mail: ............................

Page 24: Cibio.univ Alicant

100%

Rec

icla

do