Congreso Medicina Genomica

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Memorias del Congreso

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II Congreso Nacional de Medicina Genómica

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Miércoles 25

9:00 - 10:00Conferencia inauguralAnálisis de expresión en lainvestigación genómica en cáncerDr. Patrick O. Brown

10:00 - 11:00Conferencia MagistralEstructura del mapa dehaplotipos en el genoma humanoDra. Stacey Gabriel

11:00 - 11:35InauguraciónDr. Julio FrenkSecretario de Salud

11:35 – 11:50Receso

11:50– 13:20Simposio 1.Enfermedades multifactoriales I

13:20 – 13:40Receso

13:40 – 14:30Conferencia MagistralImplicaciones raciales y étnicasen la práctica médicaDr. Neil Risch

14:30 – 16:30Comida

16:30 – 18:00Simposio 2.Enfermedades multifactoriales II

18:00 – 18:15Receso

18:15 – 19:05Conferencia MagistralGenómica de la obesidad humanaDr. Philippe Froguel

Noche libre

Viernes 27

9:00 - 9:50Conferencia MagistralIdentificando elementosfuncionales en el genomahumano mediante secuenciacióncomparativaDr. Eric Green

9:50 - 10:30Lanzamiento de la RevistaGenomic MedicineDr. Davendra KumarDr. Gerardo Jiménez Sánchez

10:30 - 10:45Receso

10:45 - 11:35Conferencia MagistralFarmacogenómica yterapeútica individualizadaDr. William E. Evans

11:35 - 11:50Receso

11:50 – 13:20Trabajos libresModalidad presentaciones orales

13:20 – 13:40Receso

13:40 – 14:30Conferencia MagistralProteómica: Una ventanahacia la función y disfunción enbiologíaDr. Daniel C. Liebler

14:30 – 16:30Comida

16:30 – 18:00Simposio 4.Farmacogenómica y nutrigenómica

18:00 – 18:15Receso

18:15 – 19:05Conferencia MagistralIntegrando genética, genómica ybiología hacia una medicina masindividualizadaDr. Jeffrey Trent

Clausura

Programa general

Jueves 26

9:00 - 9:50Cátedra Gonzálo Río ArrontePredisposición genómicaa las adiccionesDr. George R. Uhl

9:50 - 10:30Panel de expertos:Propiedad intelectual enmedicina genómica

10:30 - 10:45Receso

10:45 - 11:35Conferencia MagistralBases genómicas de lasenfermedades cardiovascularesDr. Stephen Liggett

11:35 - 11:50Receso

11:50– 13:20Trabajos libresModalidad posters

13:20 – 13:40Receso

13:40 – 14:30Cátedra INMEGENBiología de sistemas, medicinagenómica y el futuro en elcuidado de la saludDr. Leroy Hood

14:30 – 16:30Comida

16:30 – 18:00Simposio 3.Oncología genómica

18:00 – 18:15Receso

18:15 – 19:05Conferencia MagistralMedicina genómica:Tendencias emergentes en éticaDra. Ellen Wright Clayton

Coctel de bienvenida Affimetrix

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Miércoles 25

9:00 - 10:00 Conferencia inauguralAnálisis de expresión en la investigación genómica en cáncerDr. Patrick O. BrownStanford University

10:00 - 11:00 Estructura del mapa de haplotipos en el genoma humanoDra. Stacey GabrielThe Broad InstituteMIT - Harvard University

13:40 – 14:30 Implicaciones raciales y étnicas en la práctica médicaDr. Neil RischUniversity of California in San Francisco

18:15 – 19:05 Genómica de la obesidad humanaDr. Philippe FroguelInstituto Pasteur

Jueves 26

9:00 - 9:50 Cátedra Gonzálo Río ArrontePredisposición genómica a las adiccionesDr. George R. UhlNational Institute of Drug AddictionsNational Institutes of Health

10:45 - 11:35 Bases genómicas de las enfermedades cardiovascularesDr. Stephen LiggettUniversity of Maryland

13:40 – 14:30 Cátedra INMEGENBiología de sistemas, medicina genómica y el futuro en el cuidado de la saludDr. Leroy HoodInstitute of Systems Biology

18:15 – 19:05 Medicina genómica: Tendencias emergentes en éticaDra. Ellen Wright ClaytonVanderbilt University

Viernes 27

9:00 - 9:50 Identificando elementos funcionales en el genomahumano mediante secuenciación comparativaDr. Eric GreenNational Human GenomeResearch InstituteNational Institutes of Health

10:45 - 11:35 Farmacogenómica y terapeútica individualizadaDr. William E. EvansSt. Jude Children´sResearch Hospital

13:40 – 14:30 Proteómica: Una ventana hacia la función y disfunción en biologíaDr. Daniel C. LieblerVanderbilt University Medical Center

18:15 – 19:05 Integrando genética, genómica y biología hacia una medicina mas individualizadaDr. Jeffrey TrentTranslational Genomics Research Institute (TGen)

Conferencias Magistrales

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Miércoles 25

11:50– 13:20 Simposio 1. Enfermedades multifactoriales ICoordinadora: Dra. Clara GorodezkyInstituto Nacional de Diagnóstico y Referencia Epidemiológicos

Mapa de haplotipos de los mexicanosDr. Alfredo Hidalgo Miranda, INMEGENPredisposición genómica a diabetes mellitusM.C. Ruth Gutiérrez, Institute Pasteur, ParísDiversidad del genoma humanoDr. Andrés Moreno, Univ. Pompeu Fabra, BarcelonaVariaciones genómicas y riesgo cardiovascularDr. Eros Balam Ortiz, INMEGEN

16:30 – 18:00 Simposio 2. Enfermedades multifactoriales IICoordinador: Dr. David KershenovichFacultad de Medicina, UNAM

Rasgos metabólicos asociados a diabetes mellitusDra. María Teresa Tusié, INCMyNSZGenómica del Síndrome MetabólicoDra. Margarita Terán, Pennington Biomed Research CenterDegeneración macular asociada a la edadDra. Irma Silva Zolezzi, INMEGENGenómica de las enfermedades autoinmunesDra. Lorena Orozco, INMEGEN

Jueves 26

16:30 – 18:00 Simposio 3. Oncología genómicaCoordinador: Dr. Alejandro García CarrancáInstituto Nacional de Cancerología

Carcinogénesis en piel y de cérvix uterinoDr. Patricio Gariglio, CINVESTAVGenómica funcional y su impacto en quimioterapiaDr. Alejandro Sweet Cordero, Universidad de StanfordExpresión genómica y progresión de cáncer de mamaDr. Mauricio Salcedo Vargas, IMSSIdentificación de genes de susceptibiildad para cáncer de próstataDr. John Carpten, TGen Institute, Phoenix, AZ

Viernes 27

16:30 – 18:00 Simposio 4. Farmacogenómica y nutrigenómicaCoordinador: Dr. Héctor BourgesInstituto Nacional de Ciencias Médicas y Nutrición Salvador Zubirán

Individualidad genética y nutriciónDr. Armando Tovar, INCMyNSZNutrigenómica: Implicaciones en Salud PúblicaDr. Jim Kaput, NutrigenomicsVariaciones de número de copias y su impacto en la farmacogenómicaDr. Charles Lee, Univ. de Harvard, EUAFarmacogenómica de la hipertensión arterialM.C. Samantha Alvarez MadrazoBHF Glasgow Cardiovascular Research Center

Simposia

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Panel de expertos

Jueves 28

9:50– 10:30 Propiedad intelectual en medicina genómicaCoordinador: Lic. Carlos Eduardo RepresasPatronato Fundador del INMEGEN

Participantes:Dr. Jorge Rosenkranz WeinerGrupo Roche Syntex de México S.A. de C.V.Junta de Gobierno, INMEGEN

Lic. Jorge Amigo CastañedaInstituto Mexicano de la Propiedad Industrial

Ing. Enrique Taracena FigueroaInstituto Panamericano de Alta Dirección de Empresas (IPADE)

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Presentación

La medicina genómica avanza a nivel global y México no es la excepción. A dos años de haber celebradoel primer congreso en su género en América Latina y de los primeros en el mundo, este 2006 celebramosel II Congreso Nacional en Medicina Genómica. A tres años apenas de haberse terminado lasecuenciación completa del genoma humano y de conocerse en forma sistemática sus variaciones masfrecuentes, hoy contamos con los primeros mapas de haplotipos de diversas poblaciones y comienzan asurgir con mayor vigor las asociaciones entre variaciones genómicas y enfermedades comunes.

México por su parte, cuenta hoy con el Instituto Nacional de Medicina Genómica (INMEGEN) quecoordina el desarrollo de esta disciplina en el país, con una masa crítica de investigadores que desarrollanimportantes actividades científicas en este campo. Entre ellas, el desarrollo del primer mapa de haplotiposde la población mestiza mexicana, que servirá como detonante para la identificación de mas genesasociados a enfermedades comunes. Así también, hoy contamos con una creciente comunidad científicaque le da forma y vigor a la Sociedad Mexicana de Medicina Genómica (SOMEGEN), fundada en Juniode 2003. Una vez mas, estas dos organizaciones sumamos esfuerzos para llevar a cabo esta reunióncientífica que contribuye en forma importante al desarrollo de la plataforma nacional en medicina genómica.

El programa científico del Congreso incluye temas de gran actualidad como genómica poblacional, análisisde haplotipos, genómica de la obesidad, enfermedades cardiovasculares, cáncer, adicciones,farmacogenómica, proteómica y el estudio de los retos éticos y legales a lo que nos enfrenta esta nuevadisciplina. Además, se ha incluido un panel de discusión sobre propiedad intelectual en medicina genómica.Sin duda, la participación de líderes académicos en estas áreas asegurarán su alto nivel académico. Esteaño además, el Congreso servirá de plataforma para el lanzamiento en América Latina y el Caribe, de lanueva revista científica internacional Genomic Medicine editada por Springer, a la que auguramos ungran éxito.

Nuestro reconocimiento al valioso apoyo que el INMEGEN y la SOMEGEN reciben de la Secretaría deSalud, la Universidad Nacional Autónoma de México, el Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología, laAcademia Nacional de Medicina, la Academia Mexicana de Ciencias y la Fundación Mexicana para laSalud, en la planeación y organización de este evento que, sin duda, esta destinado a convertirse en unode los eventos académicos más importantes de la medicina genómica.

Presidentes del Congreso

Desarrollando innovación

científica en medicina genómica.

Dr. Gerardo Jiménez SánchezDirector General

Instituto Nacional de Medicina Genómica

Dr. Francisco Bolivar ZapataPresidente

Sociedad Mexicana de Medicina Genómica

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Presidentes del CongresoDr. Gerardo Jiménez SánchezDr. Francisco Bolívar Zapata

Comité OrganizadorDr. Santiago March Mifsut, Coordinador

Lic. José Bedolla CastroMtra. Victoria Castellanos Xolocotzi

Ing. Carlos Dávila GarcíaLic. Alejandro López Franco

Lic. Mariana Salazar HernándezLic. Verónica Saucedo Zenteno

Act. Cuauhtémoc Valdés OlmedoDra. Ma. Teresa Velasco Jiménez

Ing. Isaac Vera Ramírez

Comité CientíficoDra. Rocío Ortíz López, Presidente

Dr. Miguel Cruz LópezDra. Laura del Bosque PlataDr. Luis Figuera VillanuevaDr. Alfredo Hidalgo Miranda

Mtro. César Lara AlvarezDr. Alejandro Sweet Cordero

Dra. Astrid Rasmussen AlmarazDra. Irma Silva Zolezzi

Comité AsesorDr. Guillermo Soberón, PresidenteDr. Gustavo Chapela Castañares

Dr. Emilio García ProcelDr. Juan Pedro Laclette San Román

Lic. Antonio López de SilanesLic. Carlos Eduardo Represas

Dr. José Narro RoblesDr. Manuel Ruíz de ChávezDr. Jaime Sepúlveda AmorDr. Misael Uribe Esquivel

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Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

Colegio de Posgraduados

Escuela Médico Militar

Escuela Nacional de Antropología e Historia

Escuela Superior de Medicina,

Hospital General de México

Instituto Politécnico Nacional (IPN)

Centro de Investigación en Ciencia Aplicada y

Tecnología Avanzada

Centro de Investigaciones y de Estudios Avanzados

Ciidir Durango

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

Escuela Superior de Medicina

Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnología

Instituto Tecnológico Autónomo de México (ITAM)

Instituto Tecnológico de Estudios Superiores Monterrey

(ITESM)

Escuela de Medicina

Universidade Luterana Do Brasil

CRDP, Universidad de Montreal

Universidad Anáhuac

Facultad de Bioética

Universidad Autónoma "Benito Juárez" de Oaxaca

Universidad Autónoma de Aguascalientes

Universidad Autónoma de Chiapas

Facultad de Ciencias Químicas Civ, UNACH

Universidad Autónoma de Guerrero

Maestría en Ciencias Biomédicas

Universidad Autónoma de la Ciudad de México

Universidad Autónoma de Nuevo León

Facultad de Medicina

Instituto de Biotecnología

Universidad Autónoma de Querétaro

Universidad Autónoma de Sinaloa

Universidad Autónoma de Tabasco

Universidad Autónoma de Tlaxcala

Universidad Autónoma de Yucatán

CIR, Dr. Hideyo Noguchi

Facultad de Química

Universidad Autónoma de Zacatecas

Universidad Autónoma del Carmen

Centro de Tecnologías de la Información, Des-Daci

Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo

Universidad Autónoma del Estado de México

Facultad de Farmacia


Universidad Autónoma del Estado de Morelos


Universidad Autónoma Metropolitana

Unidad Iztapalapa

Unidad Xochimilco

Universidad Autónoma de Puebla

Universidad Central del Ecuador

Centro de Biomedicina

Universidad de Antioquia

Universidad de Chile

Facultad de Ciencias Químicas y Farmacéuticas

Universidad de Guadalajara

Universidad de Guanajuato

Universidad de las Américas

Universidad de Sonora

Universidad Iberoamericana

Universidad Iberoamericana León

Universidad Juárez Autónoma de Tabasco

Universidad La Salle

Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

Universidad Nacional Autónoma de México

Centro de Ciencias Genómicas

Facultad de Ciencias

Facultad de Ciencias Políticas y Sociales

Facultad de Estudios Superiores Cuautitlán

Facultad de Estudios Superiores Iztacala


Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia

Facultad de Química

Instituto de Biotecnología

Instituto de Física

Instituto de Fisiología Celular

Instituto de Investigaciones Biomédicas

Instituto de Neurobiología, Campus Juriquilla

Universidad Pedagógica Nacional

Universidad Pompeu Fabra

Universidad Simón Bolívar

Universidad Tecnológica de la Mixteca

Universidad Veracruzana


Instituto de Neuroetología

University of Toronto

Universidad Autónoma de Querétaro

Vanderbilt University

Instituciones participantes

Instituciones de Educación Superior

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Secretaría de Salud

Secretaría de Salud del Estado de Querétaro

Secretaría de Salud de Guerrero

Servicios de Salud de Tamaulipas

Servicios de Salud de Yucatán

Servicios de Salud de Zacatecas

Servicios de Salud Pública del D. F.

Coordinación General de los Institutos Nacionales de Salud

Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias

Instituto Nacional de Ciencias Médicas y Nutrición

“Salvador Zubirán”

Instituto Nacional de Cancerología

Instituto Nacional de Cardiología "Dr. Ignacio Chávez"

Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias

Instituto Nacional de Neurología y Neurocirugía “Manuel

Velasco Suárez”

Instituto Nacional de Pediatría

Instituto Nacional de Perinatología

Instituto Nacional de Psiquiatría “Ramón de la Fuente”

Instituto Nacional de Rehabilitación

Instituto Nacional de Salud Pública

Instituto Mexicano del Seguro Social (IMSS)

Hospital de Pediatría, CMN Siglo XXI

Centro de Investigación Biomédica del Noreste

Centro de Investigación Biomédica de Occidente (CIBO)

ISSEMYM, Estado de México

Instituto de Salud del Estado de México

Hospital General "Lic. Adolfo López Mateos”

Instituto de Salud y Seguridad Social de los Trabajadores

del Estado (ISSSTE)

Centro Médico Nacional “20 de Noviembre”

Hospital Regional "1° de Octubre"

Centro Médico “Adolfo López Mateos”

Hospital Ángeles de Querétaro

Hospital Ángeles del Pedregal

Hospital Ángeles Lomas, Consultorio 320

Hospital Central Sur de Alta Especialidad, Pemex

Hospital Civil “Fray Antonio Alcalde”

Hospital de Apoyo Sullana

Hospital de Especialidades de la Ciudad de México "Dr.

Belisario Domínguez"

Hospital de la Mujer

Hospital de la Niñez Oaxaqueña

Hospital General "Dr. Aurelio Valdivieso"

Hospital General de México

Hospital Infantil de México

Hospital Juárez de México

Hospital Lee Moffitt Cancer Center & Research Institute

Hospital Médica Sur

Hospital Naval Veracruz

Hospital Psiquiátrico “Fray Bernardino Álvarez”

Sistema Nacional de Salud

Centros de Investigación Organismos Públicos

Centro de Estudios Tecnológicos, Industrial y de

Servicios

Centro de Investigaciones en Bioética

Institute of Medical Genetics

Instituto Roche

Institut DÉtudes Politiques, Paris

Inifap-Cenid-Microbiología

Comisión Nacional de Bioética

Desarrollo Integral de la Familia (DIF)

Instituto Mexicano de la Propiedad Industrial

Secretaría de Relaciones Exteriores

Fundación Altius

Fundación Gónzalo Rio Arronte

Instituciones participantes

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Patrocinadores

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Contenido

Presentación 7

Conferencias magistrales y simposia

Conferencistas magistrales 14

SimposiaEnfermedades multifactoriales I 22

Enfermedades multifactoriales II 24

Oncología genómica 25

Farmacogenómica y nutrigenómica 25

Trabajos libres: Presentaciones orales y carteles

Presentaciones orales 28

CartelesInvestigación básica 36

Investigación clínica 44

Genómica poblacional 60

Farmacogenómica y terapéutica molecular 67

Aspectos éticos, legales, socialesy educativos sobre la medicina genómica 70

Bioinformática 72

Tecnología genómica 75

Ïndice de autores 79

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Biología de sistemas, medicina genómica y el futuro del cuidado de la saludDr. Leroy HoodPresidente del Instituto para la Biología de Sistemas, Seattle, WA, EUAM.D. de la Facultad de Medicina de la Universidad Johns Hopkins, 1964Ph.D. en Bioquímica del Instituto Tecnológico de California, 1968

La investigación del Dr. Hood se ha centrado en el estudio de la genómica, la biotecnología, y lainmunología molecular. Inició su carrera profesional en Caltech, donde él y sus colegas participaron enel desarrollo de cuatro instrumentos: el secuenciador y sintetizador del gen del ADN y el sintetizador ysecuenciador de proteínas que constituyen las bases tecnológicas de la biología molecularcontemporánea. El secuenciador de ADN ha revolucionado la genómica de manera muy particular,permitiendo que exista una secuenciación rápida y automatizada, hecho crucial que durante la décadade 1990 contribuyó de manera muy importante al exitoso mapeo del genoma humano. En 1992, el Dr.Hood se trasladó a la Universidad de Washington, donde fundó y asumió la Dirección del DepartamentoInterdisciplinario de Biotecnología Molecular. En el año 2000, fue cofundador del Instituto para laBiología de Sistemas en Seattle, Washington, siendo pionero en los abordajes de sistemas aplicadosa la biología y la medicina. Las contribuciones que el Dr. Hood ha hecho a la biotecnología a lo largo desu vida, le llevaron recientemente a recibir el prestigiado Premio a la Excelencia 2004 en el área deDiagnóstico Molecular, que es otorgado por la Asociación para la Patología Molecular (AMP, por sussiglas en inglés). Asímismo, fue galardonado con el Premio Lemelson 2003 para la Innovación y laInvención, otorgado por MIT, con el Premio Kioto 2002 en Tecnología Avanzada, y con el PremioLasker de 1987, por sus estudios sobre los mecanismos de la diversidad inmune. Ha publicado más de500 artículos revisados por pares, ha logrado 14 patentes, y ha sido el coautor de algunos libros detexto en bioquímica, inmunología, biología molecular y genética. El Dr. Hood es miembro de la AcademiaNacional de Ciencias, de la Sociedad Filosófica Americana, de la Asociación Americana de Artes yCiencias y del Instituto de Medicina. El Dr. Hood también ha desempeñado un importante papel en lafundación de un gran número de empresas biotecnológicas, entre las cuales se encuentran Amgen,Applied Biosystems, Systemix, Darwin y Rosetta.

Cátedra INMEGEN

Análisis de expresión en la investigación genómica en cáncerDr. Patrick O. BrownUniversidad de Stanford, Stanford, CA, EUAPatrick O. Brown, M.D., Ph.D.

El Dr. Brown es también Profesor de Bioquímica en la Facultad de Medicina de la Universidad deStanford. Obtuvo sus títulos de licenciatura, maestría y doctorado de la Universidad de Chicago. Realizósu tesis de posgrado en colaboración con Nick Cozzarelli, el tema fue el estudio de los mecanismos delas topoisomerasas del ADN. Después de concluir su residencia en pediatría en el Hospital Children'sMemorial de Chicago, empezó a estudiar los mecanismos de la integración retroviral dentro de suprograma de postdoctorado en la Universidad de California, en San Francisco, en un trabajo conjuntocon J. Michael Bishop y Harold Varmus. El Dr. Brown es miembro de la Academia Nacional de Ciencias.Patrick Brown utiliza los microarreglos de ADN - (laminillas de microscopio en las que se imprimendecenas de miles de genes en arreglos diminutos), con el fin de observar los genomas en acción. Él ysus colegas caracterizan sistemáticamente el guión genético que controla la expresión de nuestrosgenes, tanto en las células sanas que desempeñan sus funciones dentro de un desarrollo y fisiologíanormales, como en patologías tales como el cáncer.

Conferencia inaugural

Conferencias magistrales

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Estructura del mapa de haplotipos en el genoma humanoDra. Stacey GabrielInstituto Broad del Instituto Tecnológico de Massachusetts (MIT)Universidad de Harvard, Boston, MA, EU

Directora de la Plataforma de Análisis Genético del Instituto Broad de la Universidad de Harvard yMIT, en Cambridge, MA. Directora Adjunta de Biología de Alto Rendimiento. Programa de GenéticaMédica y Poblacional. Centro para la Investigación del Genoma del MIT / Instituto Broad, Cambridge,MA. De Diciembre de 1998 a Enero del 2002 Científica Investigadora / Programa Gerencial deGenotipificación de Polimorfismos de un Solo Nucleótido (SNPs) en Genética Médica y Poblacional,Centro para la Investigación del Genoma del Instituto Whitehead, Cambridge, Egresada del Programade Maestría del Departamento de Genética de la Universidad Case Western Reserve, en Cleveland,OH. Asesor: Aravinda Chakravarti, Ph.D., Asistente de Investigación del Departamento de Genéticahumana de la Universidad de Pittsburgh, en Pittsburgh, PA

Implicaciones raciales y étnicas en la práctica médicaDr. Neil RischUniversidad de California en San Francisco, San Francisco, CA, EUA

El Dr. Risch, genetista estadístico y epidemiólogo genético, participa en una serie de proyectos tantode naturaleza teórica como aplicada. Sus estudios incluyen proyectos de genética clínica y genomicapoblacional. Por ejemplo, uno de ellos consiste en la identificación de genes que subyace a lasdistonías de torsión. Hasta la fecha, el Dr. Risch y sus colaboradores han identificado varios genespara los subtipos específicos de distonía idiopática; sin embargo, aún no se han mapeado algunasde sus formas variantes. Sus investigaciones actualmente incluyen el mapeo adicional y la clonaciónposicional de estas formas variantes. El Dr. Risch también ha colaborado en importantes proyectosmulticéntricos sobre la susceptibilidad genética a la hipertensión y las complicaciones de la enfermedadcardiovascular. Estos proyectos involucran el análisis de ligamientos, la clonación posicional y losestudios de asociación poblacionales. Recientemente, uno de estos estudios llevó a la identificaciónde las regiones en los cromosomas 6 y 21 mediante el análisis del desequilibrio en ligamiento demezclas de sujetos afroamericanos hipertensos. El Dr. Risch planea expandir los estudios de mezclasa otros fenotipos cardiovasculares y metabólicos, tanto en sujetos de estudio afroamericanos, comohispanos. En colaboración con algunos colegas canadienses, el Dr. Risch ha emprendido un proyectode colaboración sobre la susceptibilidad genética en la esclerosis múltiple. Estos estudios investiganciertas hipótesis ambientales y genéticas. Dentro del campo de la genética, continúa examinando losproyectos de ligamientos y la clonación posicional de más de 1,000 familias de casos multiples, yemprendiendo nuevos estudios de genes candidatos, así como abordajes de desequilibrio delligamiento. Uno de sus mayores intereses seguirá siendo el análisis de las contribuciones genéticasa la región del HLA. El Dr. Risch tiene varios estudios genéticos poblacionales en curso que examinanla relación entre la variación genética y las categorizaciones sociales tales como raza y etnicidad y laimportancia de estas relaciones en la identificación de los factores genéticos que subyacen a laspatologías comunes y complejas, así como formas más raras, Mendelianas. Colabora en proyectossobre la genética del autismo, la enfermedad de Crohn y los trastornos genéticos en la poblaciónjudía.

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Genómica de la obesidad humanaDr. Philippe FroguelInstituto Pasteur, Lille, Francia

Philippe Froguel, MD, PhD. Egresado de la Facultad de Medicina de St Antoine en la UniversidadParis 6), y su doctorado en 1991 (Universidad Paris 7). En ese entonces era jefe del laboratorio dediabetes mellitus del Centro de Estudios de Polimorfismos Humanos (CEPH de Paris, cuyo directorera el ganador del Premio Nobel, Dr Jean Dausset). Fungió como Secretario General del CEPH y fuemiembro del consejo del centro genómico French Genethon. En 1995, asumió el puesto de Directorde Genética Humana en el Instituto de Biología CNRS del Instituto Pasteur, en Lille, Francia. En elaño 2000, fue nombrado Profesor de Genética Molecular y Diabetes Experimental en el Queen MaryCollege y fundó el Barts y el London Genome Centre. En el año 2003 empezó a impartir cátedra deMedicina Genómica en el Imperial College. En la actualidad, está a cargo del Departamento de GenéticaMédica y es Director del Centro del Genoma del Imperial College, ubicado dentro del HospitalHammersmith donde se realiza secuenciación y genotipificación de DNA de alto rendimiento,microarreglos y proteómica. En el Reino Unido, Philippe Froguel trabaja en un programa sobre"obesidad poligénica" y en la nueva red clínica para la Diabetes del Sistema Nacional de Salud(NHS).

Bases genómicas de las enfermedades cardiovascularesDr. Stephen LiggettUniversidad de Maryland, Baltimore, MD, EUA

Obtuvo su título de Licenciatura en Física del Instituto Tecnológico de Georgia y su grado de Maestríade la Facultad de Medicina de la Universidad de Miami. Realizó estudios post doctorales en laUniversidad de Washington en St. Louis y en el Centro Médico Howard Hughes de la Universidad deDuke. Fue Profesor Adjunto de Medicina y Farmacología en la Universidad de Duke, además de Profesorde la Cátedra Taylor de Medicina y Genética Molecular y Profesor Investigador Universitario Distinguidoen la Facultad de Medicina de la Universidad de Cincinnati. En la actualidad, es Profesor de Medicinay Fisiología, además de Director del Programa de Genómica Cardiopulmonar en la Facultad de Medicinade la Universidad de Maryland, en Baltimore. Sus principales áreas de interés son la biología moleculary la genética de los receptores acoplados de la proteína G.

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Medicina genómica: Tendencias emergentes en éticaDra. Ellen Wright ClaytonUniversidad de Vanderbilt, Nashville, TN, EUAProfesora de la Cátedra Rosalind E. Franklin de Genética y Políticas de SaludProfesora de PediatríaProfesora de DerechoCo-Directora del Centro para la Ética Biomédica y la Sociedad

Ellen Wright Clayton, MD, JD, es Profesora de la Cátedra Rosalind E. Franklin de Genética y Políticasde Salud, además de Profesora de Pediatría, Profesora de Derecho y Sub Directora del Centro parala Ética Biomédica y la Sociedad, en la Universidad de Vanderbilt. Egresada de las Universidades deDuke, Stanford, Yale y Harvard, la Dra. Clayton ha dedicado más de un cuarto de siglo al estudio delas implicaciones de nuestro cada vez mayor conocimiento sobre la genética. Durante todo estetiempo, ha ocupado el puesto de Vicepresidenta del Grupo de Trabajo sobre las Implicaciones Sociales,Legales y Éticas del Proyecto Internacional HapMap, ha sido también miembro del National AdvisoryCouncil for Human Genome Research (Consejo Consultor Nacional para la Investigación del GenomaHumano), del Social Issues Committee of the American Society of Human Genetics (Comité paraAsuntos Sociales de la Sociedad Americana de Genética Humana) y de dos comités del Instituto deMedicina relacionados con la genética, a la vez que ha fungido como la asesora experta en genéticapara el Council of International Organizations of Medical Sciences (Consejo de OrganizacionesInternacionales de las Ciencias Médicas) encargada de la revisión más reciente de los LineamientosÉticos Internacionales para la Investigación Biomédica en Seres Humanos (International EthicalGuidelines for Biomedical Research Involving Human Subjects). Sus principales áreas de interésactualmente incluyen la ética en la investigación internacional, con particular énfasis en los biobancos,la genética y las poblaciones vulnerables, así como el impacto psicosocial de las pruebas genéticasmoderadamente predictivas y el desarrollo de políticas para el tamizaje neonatal.

Predisposición genómica a las adiccionesDr. George R. UhlInstituto Nacional de AdiccionesInstitutos Nacionales de Salud, en Baltimore, MD, EUAM.D., Ph.D., de la Facultad de Medicina de la Universidad Johns Hopkins, 1979 / 1978Institutos Nacionales de Salud NIDA IRP MNRB

El Dr. Uhl trabaja en la definición y el estudio de los productos de a) los genes que contienen variantesalélicas humanas que confieren vulnerabilidades de adicción a los seres humanos, b) los genes queestán regulados por las sustancias de abuso c) los genes cuyos productos son importantes para larecompensa activada por las sustancias de abuso y d) los genes implicados en aquellos rasgos de laadicción que son similares a la memoria. Ha realizado estudios que han definido los roles deltransportador de dopamina y el receptor opioide mu en la recompensa activada por los estimulantes ylos opiáceos, estudios que han definido las funciones de las variantes alélicas humanas en variosgenes candidatos en la vulnerabilidad a la adicción y en otros fenotipos humanos, así como en estudiosque han sido pioneros y han utilizado novedosos abordajes de barrido genómico con base en laasociación, a fin de encontrar variantes genéticas relacionadas con la adicción. Sus intereses en elárea de la Investigación: Abuso de las Drogas y el Alcohol, Genética y Genoma Humano, BiologíaMolecular, Neurociencias y Enfermedades Degenerativas, Farmacología / Fisiología, Psiquiatría / SaludMental.

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Novel approaches to identify all functional elements in the human genomeDr. Eric GreenNIH Intramural Sequencing CenterNational Human GenomeResearch InstituteNational Institutes of HealthBethesda, MD, USA

Dr. Green's research focuses on three major areas: (1) sequencing and comparing targeted stretchesof DNA from a wide variety of species en route to unraveling the complexities of genome function, (2)developing innovative research tools and technologies for performing genome analysis, and (3)identifying and characterizing genes associated with human disease. In his multiple roles as ScientificDirector of NHGRI, Chief of the Genome Technology Branch, and Director of the NIH IntramuralSequencing Center (NISC) [nisc.nih.gov], he has fundamental interests in mapping, sequencing,andinterpreting vertebrate genomes. The major activities in Dr. Green's laboratory, performed in partnershipwith NISC, center on a novel comparative sequencing program. Specifically, targeted regions of thehuman genome are selected and then mapped and sequenced in multiple other vertebrates, includinga diverse set of primates, numerous other mammals (including marsupials and monotremes), birds,fish, amphibians, and reptiles. The resulting data sets are providing unprecedented abilities to performevolutionarily diverse sequence comparisons.

Farmacogenómica y terapéutica farmacológica individualizadaDr. William E. EvansHospìtal Pediátrico de Investigación St. Jude, Memphis, TN, EUA

El Dr. William E. Evans es Director y Presidente del Consejo del St. Jude Children's Research Hospital(SJCRH), así como Primer Profesor de la Cátedra Tennessee Bank en las Facultades de Medicina yFarmacología de la Universidad de Tennessee. Durante los últimos 30 años, su labor de investigaciónen el Hospital St. Jude se ha concentrado en la farmacogenómica de los agentes anticáncer en losniños, por lo cual el Instituto Nacional contra el Cáncer le ha otorgado tres Reconocimientos al MéritoNIH (Institutos Nacionales de Salud) consecutivos. Su investigación en el área de la farmacogenómicaha prestado particular interés a una enfermedad, la leucemia linfoblástica aguda infantil. El Dr. Evanses el autor de más de 300 artículos y capítulos de libros, así como el editor de varios libros de texto ypublicaciones científicas, y ha sido galardonado con premios nacionales por sus investigaciones. En elaño de 2002, pasó a formar parte del Instituto de Medicina de la Academia Nacional de Ciencias.

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Proteómica: Una ventana hacia la función y disfunción en biologíaDr. Daniel C. LieblerCentro Médico de la Universidad de Vanderbilt, en Nashville, TN, EUA

Director del Instituto Jim Ayers para la detección y el Diagnóstico del Precáncer, Centro para elCáncer Vanderbilt-Ingram (2006), Southwest Environmental Health Sciences Center, University ofArizonaDirector, Analytical Core Laboratory, Southwest Environmental Health Sciences Center andArizona Cancer Center, University of Arizona Assistant Professor, 1993-98 Associate Professor, 1998-present, Professor, Department of Pharmacology & Toxicology, College of Pharmacy, University ofArizona, Tucson, AZ. Director de Proteómica del Centro de Investigación de Espectrómetro de Masas(Mass Spectrometry Research Center), Profesor de la Facultad de Medicina en la Universidad deVanderbilt, Director de los Departamentos de Bioquímica, Farmacología e Informática Biomédica enla Facultad de Medicina de la Universidad de Vanderbilt, Director del Centro de Ciencias de la SaludAmbiental del Suroeste de la Universidad de Arizona, Sub Director de los Departamentos de Bioquímica,Farmacología e Informática Médica de la Facultad de Medicina en la Universidad de Arizona, ProfesorAdjunto del Centro de Ciencias de la Salud Ambiental del Suroeste y del Arizona Cancer Center,Analytical Core Laboratory, De 1993 a 1998 Profesor Adjunto, De 1998 a la fecha, Profesor delDepartamento de Farmacología y Toxicología en el College of Pharmacy de la Universidad de Arizona,en Tucson, AZ.

Integrando genética, genómica y biología hacia una medicina mas individualizadaDr. Jeffrey TrentInstituto de Investigación en Genómica Translacional (TGen), en Phoenix, AZ, EUA

El Dr. Jeffrey Trent es Presidente y Director Científico del Instituto de Investigación de GenómicaTranslacional, o TGen. La misión del TGen es realizar descubrimientos genómicos y traducirlos enavances dentro del campo de la salud humana. Con el fin de alcanzar este objetivo, el TGen estáintegrando un importante equipo de científicos de laboratorio, expertos en informática, ingenierosbiomédicos y asociados clínicos, quienes aprovecharán el conocimiento adquirido a partir del Proyectodel Genoma Humano para crear descubrimientos prácticos que, en última instancia, habrán de ayudara diagnosticar y tartar un gran número de enfermedades. Este estilo de vinculación entre la ciencia y lamedicina ha dado origen a una nueva visión de la investigación mucho más cercana al paciente, queestá modificando la manera en que percibimos la enfermedad. Antes de fundar TGen, el Dr. Trent habíaprestado sus servicios durante diez años en el instituto de investigaciones biomédicas más grande delmundo el Instituto Nacional de Salud en Bethesda, Maryland. Ahí fundó y dirigió la división de laboratoriosde la agencia federal encargada de la coordinación y finalización del Proyecto del Genoma Humano.Antes de ocupar su puesto en el NIH, el Dr. Trent impartió cátedra en la Universidad de Michigan yestuvo a cargo del Comprehensive Cancer Center (Centro Integral para el Cáncer) de esta mismauniversidad. Había tenido puestos similares previamente en el Arizona Cancer Center de Tucson. ElDr. Trent ha dedicado su vida profesional a la lucha contra el cáncer. Su carrera en el campo de lainvestigación ha dado como resultado una mayor comprensión sobre la base genética del cáncer y hallevado a mejores diagnósticos y tratamientos, que resultan de mucha mayor eficacia para quienesluchan contra el cáncer de mama, el melanoma y otras formas de esta debilitante enfermedad. Es elautor de más de 300 manuscritos dentro de la literatura científica, ha recibido numerosos premios yreconocimientos, y forma parte de los consejos editoriales de una docena de publicaciones de caráctercientífico.

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Biología de sistemas, medicina genómica y el futuro delcuidado de la saludDr. Leroy Hood

The Human Genome Project has catalyzed fundamental changesin the practice of biology and medicine. One of these has beento generate a genetics parts list that includes all human genes(and by inference all human proteins). Analysis of the informationfrom the Human Genome Project has also catalyzed the viewthat “biology is an informational science.” Together, theseadvances have promoted the idea of systems biology—the viewthat biology can only be understood through an analysis of theinformation processing of biological machines and networks. Thecorresponding systems view of disease has catalyzedrevolutionary changes in how to think about diagnosis, therapyand even prevention. Fueled by dramatic changes in in vitro andin vivo measurement technologies, systems medicine is pushingtoward a revolution in health care—one that over the next 5-20years will lead away from the current reactive medicine (wait untilone gets sick before treating) to a medicine that is predictive,preventive, personalized and participatory. Increasingly, the focuswill be on wellness rather than disease. P4 medicine will requirebillions of measurements on each patient and the means ofreducing these measurements to coherent hypotheses about thehealth and disease of individual patients. How the acquisition,storage, mining, integration (of different data types), modelingand eventually distribution of the data and the resulting inferenceswill occur will be one of the grand challenges of this future inhealth care. Security and access will be critical considerations.This P4 medicine will catalyze fundamental changes in virtuallyevery aspect of the healthcare system and it will require rethinkingthe educational requirements for physicians. It will lead to thedigitalization of medicine with changes even more profound thanthe digitalization of information technologies and communications.It will also lead to a turn around in the inexorably increasinghealthcare costs—with the possibility of bringing developed worldmedicine to the developing world. Medicine will truly become aninformational discipline—with the enormous potential forindividuals to take an active role in helping to guide their futurehealth choices. The digitalization of medicine will transform thecomputational requirements of health care in ways that we canonly begin to imagine.

Genómica de la obesidad humanaDr. Philippe Froguel

Twin and family studies have shown that polygenic forms ofobesity have a genetic basis (explaining 50-70% of the varianceof the BMI), especially in children. Apart from rare monogenicrecessive forms of human obesity caused by mutations in leptinand its receptor, prohormone convertase 1 and POMC (alphaand beta MSH), most monogenic early onset obesity areautosomal-dominant due to mutations in the melanocortin 4receptor, with a prevalence of 2–5%. Several candidate geneshave been proposed such as adrenergic receptors but their effectis at best modest. Recently, positional candidate gene studieshave revealed variants contributing to both obesity and associatedtype 2 diabetes (“diabesity”) in the ACDC/AdipoQ gene encodingfor the adipokine adiponectin and in ENPP1 encoding for theinsulin receptor inhibitor PC-1, which both contribute to childhoodand adult obesity but have an inverse effect on associated insulinresistance and risk of diabetes. In this context, variation in theCannabinoid Receptor 1 have been found to predispose to obesityand to various components of the metabolic syndrome. Thesestudies partially explain the phenotypic heterogeneity of obesity

which is the main risk factor for T2D but may also be metabolically“neutral” depending of the genetic background.To unravel the molecular basis of obesity and T2D, WholeGenome Scans based on association studies using high densitySNP microarrays now offer a unique opportunity to screen up to70% of the human genome In collaboration with McGill Universityand Genome Canada, we have been recently completed in theFrench population an association WGS in 1,500 diabetic subjectsfollowed by a replication of best results in 5,500 additionalsamples. Our data show potential breakthroughs in the etiologiesof T2D. Especially, we have now strong and replicated indicationfor the role of genes involved in glucose homeostasis throughtheir pivotal role in the WNT pathway or in insulin exocytosis.These data and their implication for T2D and obesity physiologywill be discussed.The identification of potent biomarkers predicting the developmentof severe forms of obesity, T2D and vascular complications isnow an achievable task in the near future. Genomic Medicinebased on these discoveries should lead to very important progressfor the assessment of the obesity risk for health and tobreakthroughs in the treatment of metabolic diseases.

Medicina genómica: Tendencias emergentes en éticaDra. Ellen Wright Clayton

As genomic medicine is incorporated into clinical care, questionsthat were merely hypothetical in the past are becoming real. Usingexamples such as newborn screening, pharmacogenomics,ethnopharmacology, direct to consumer advertising and sales,nutrigenetics, and growing appreciation of the complexity of theinteractions among genes, behavior and the environment, thistalk will address current perspectives on the following questions.Whose benefit matters in deciding how to make genomic medicineavailable? What risks are posed by how genomic medicine isactually implemented? Differential access remains a concern,particularly when viewed on a global scale. Numerous actors –patients, clinicians, testers, regulators, payers — have a role inshaping the scope of genomic medicine. What roles should theseactors play, and how effective can they be? A final question willbe how to use genomic knowledge to understand and intervenein interactions with behavior and the environment.

Novel approaches to identify all functional elements in thehuman genomeDr. Eric Green

The comparison of genomic sequence generated from differentextant vertebrates has emerged as a powerful strategy foridentifying functionally important regions of the human genome.As a complement to ongoing efforts to sequence entire genomes,the NISC Comparative Sequencing Program is pursuing multi-species genome explorations by sequencing and analyzing thesame orthologous regions in many different vertebrates. To date,we have generated over 1 Gb of comparative sequence data frommore than 65 different species.Comparative analyses of these data are revealing importantinsights about the patterns of sequence conservation amongspecies. In particular, we are developing approaches for utilizingmulti-species sequence comparisons to identify highly conservednon-coding sequences, which likely correspond to regulatory andother functionally important elements. In addition, we areexamining the relative contributions of different species’sequences for identifying such highly conserved regions; forexample, this has included some interesting comparisonsinvolving eutherian versus non-eutherian mammals. We are also

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investigating the quality of genomic sequence that is needed foridentifying evolutionarily conserved regions in a reliable fashion.The majority of our Program is now dedicated to generatingcomparative sequence data for the ENCODE project, a large,consortium-based effort that aims to establish a complete catalogof functional elements within a selected 1% (~30 Mb) of the humangenome. This project is allowing important integration ofexperimental and computational data sets in a fashion that isproviding new insights about the functional roles of evolutionarilyconserved sequence elements, in particular those correspondingto non-coding sequences.Together, our studies should advance the utility of comparativesequence analyses and make important contributions towardsunraveling the functional and evolutionary complexities of thehuman genome.

Proteómica: Una ventana hacia la función ydisfunción en biologíaDr. Daniel C. Liebler

Protein thiols are targets for alkylation damage by reactiveelectrophiles associated with inflammation, degenerative diseasesand chemical toxicity. The objective of our studies is to identifyprotein targets of reactive electrophiles and map the adducts atthe level of amino acid sequence. A major challenge incharacterizing adducts is the relatively low abundance of adductsin complex proteomes. To circumvent this problem, we haveemployed biotin-tagged electrophiles as model electrophiles.Analysis of human cytoplasmic, nuclear endoplasmic reticulum(ER) and mitochondrial protein targets of two different thiol-reactive electrophiles identified approximately 2,000 cysteinetargets, which mapped to over 1,200 proteins. Targeting wasselective and reproducible, yet differed markedly betweenelectrophile structures. Selective modification of several proteindomain structures and motifs indicates that certain protein familiesare particularly susceptible to alkylation. Approximately 15% ofthe total identified targets were consistently modified by bothelectrophiles and we hypothesize that these thiol targets representsystems that are critically susceptible to damage by diverseelectrophiles. Other studies of the oxidant and electrophile sensorprotein Keap1 and the signaling regulator protein phosphatase2A have revealed how differences in site-selective adductiondictate the molecular consequences of damage. Selective proteinadduction underlies the induction of stress responses, includingthe activation of c-Jun-N-terminal kinase (JNK), the induction ofstress response genes regulated by the transcription factor Nrf2,the ER stress response and the induction of apoptosis. Studiesof these are underway to provide insights into stress adaptationand apoptosis in toxicity and disease.

Integrando genética, genómica y biología hacia unamedicina mas individualizadaDr. Jeffrey Trent

Genome wide profiling of gene states (structure, expression, etcetera) has emerged as a means for molecularly defining disease.The next challenge is to match the specific molecular context ofdisease with the most appropriate therapy. Systems medicine isemerging as a new field of research, which seeks to identifycontextual vulnerabilities that arise in disease context. Towardsthis end, TGen has developed and applied a number of genomewide and genome compatible technologies and strategies to bothprofile the disease context (structural and functional genomics),as well as profile context selective drug targeting (cellulargenomics). Our group has focused primarily on cellular genomics

using very high throughput RNAi to systematically knockdowngenes, and determine the functional role of each gene in variouscellular processes including cell growth, survival, molecular endpoints, and drug response. The computational ‘fusion’ ofmultidimensional data sets to integrate structural, functional, andcellular genomic information has proven to be a very powerfulstrategy for generating new predictive models of contextdependent targeting. In oncology, this research has led to thediscovery of context specific vulnerabilities, enabling us toprioritize pharmacologically and clinically relevant drug targetsand support more personalized medicine oriented drug discovery.Additionally, we have shown that this approach can lead to thediscovery of genes that are casually involved in determing specificresponse to cancer drugs. These genes are currently beingadvanced as candidate predictive markers to select patientpopulations that would respond to specific cancer drugs, and asputative combination targets to enhance response in patients thatare not responding. Such information can improve and acceleratethe clinical development of emerging cancer therapies. Thisstrategy represents a new paradigm for both drug discovery anddrug development, and has the potential to some day impact onhow therapeutic decisions are made.

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Simposio 1.Enfermedades multifactoriales I

Coordinadora: Dra. Clara GorodezkyInstituto Nacional de Diagnóstico y Referencia Epidemiológicos

Mapa de haplotipos de los mexicanosDr. Alfredo Hidalgo Miranda, INMEGEN

México desarrolla una plataforma de medicina genómica paramejorar el cuidado de la salud de los Mexicanos. Un componenteclave en este esfuerzo es la generación del mapa de haplotiposde su población. Esfuerzos similares se llevan a cabo en otraspoblaciones del mundo para identificar etiquetas de polimorfismosde un solo nucleótido (“tag SNPs”), lo que disminuirá el númerode variantes a analizar, sin perder resolución ni cobertura enestudios de asociación en enfermedades comunes. En laactualidad más del 80% de la población Mexicana se consideraMestiza, una mezcla entre cualquiera de los más de 62 gruposindígenas y los españoles que se inició hace 500 años durantela conquista. Estas características pueden complicar el análisisde los resultados de estudios de asociación dada la presenciade estratificación en las poblaciones analizadas. Tomando enconsideración los puntos anteriores, el Instituto Nacional deMedicina Genómica (INMEGEN) puso en marcha en junio de2005 el proyecto “Variabilidad Genómica y Mapa de Haplotiposde la Población Mestiza Mexicana”, con la finalidad de analizarlos similitudes y diferencias en el genoma de la población dediversas regiones de nuestro país y comparla con aquella deotras regiones del mundo. Las muestras analizadas son departicipantes voluntarios en las “Jornadas para la elaboracióndel Mapa Genómico de los Mexicanos”, provenientes de seisestados de la República (Guanajuato, Guerrero, Sonora,Veracruz, Yucatán y Zacatecas). Estas Jornadas involucraron unproceso de consentimiento tanto a nivel comunitario, a través delas autoridades políticas, educativas y de salud en cada estado,como a nivel individual, a través de la publicación delconsentimiento informado en las Universidades estatales ypresentaciones públicas del proyecto días antes de la Jornadade colecta. A la fecha, el banco del INMEGEN contiene ~1,200muestras de DNA purificadas y codificadas usando códigos debarras que aseguran el anonimato del donante. Un grupo de 300de estas muestras han sido genotipif icadas uti l izandomicroarreglos de alta densidad de Affymetrix, que permitenanalizar 116,000 SNPs en cada una de ellas (100K). Asimismo,se tiene mas de un 50% de avance en el análisis de las 600muestras planteadas incialmente en el proyecto usandomicroarreglos de 500,000 SNPs (500K). Desde febrero de 2005a la fecha, la Unidad de Genotipificación y Análisis de Expresiónha procesado más de 1,500 microarreglos, totalizado más de150 millones de genotipos, con un promedio en el porcentaje deSNPs genotipificados >99.5% para el caso del 100K y >96% parael 500K. Nuestros datos han sido comparados con aquellosgenerados por el Proyecto Internacional del HapMap usandodiferentes herramientas bioinformáticas para analizar patronesde desequilibrio de ligamiento en relación a distancias físicassobre el genoma, análisis de ancestría, polimorfismos de númerode copias y relaciones genéticas entre las poblaciones, entreotras cosas. Los resultados de estos análisis sugieren que eltamaño de los bloques de haplotipos en los Mexicanos pareceser similar al de las poblaciones no africanas analizadas en el

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sia HapMap internacional. Sin embargo, la presencia de un menor

porcentaje de marcadores con baja frecuencia alélica indica unamayor heterogeneidad genética en el contenido de esos bloques,sugiriendo que la población Mexicana podría presentar “tag SNPs”particulares. Los análisis de ancestría han permitido identificarmarcadores que contribuirán a fortalecer la investigación clínicamediante la estratificación genómica de la población, mejorandode forma importante los resultados de los estudios de asociacióna enfermedades comunes en población Mestiza mexicana. Elanálisis de número de copias ha identificado regiones polimórficasdonde se alojan genes relevantes para la salud humana. Enresumen, este esfuerzo constituye el análisis mas profundo ycon mayor cobertura del genoma que se haya realizado a la fechade la población Mestiza Mexicana y sus resultados inicialesaportan herramientas que serán de utilidad para mejorar elcuidado de la Salud de nuestra población.

Predisposición genómica a diabetes mellitusM.C. Ruth Gutiérrez, Institute Pasteur, París

Introducción: Recientemente, se ha demostrado que el factortranscripcional KLF11, inducible por TGF-, afecta la regulacióntranscripcional del gen de la insulina. Variantes genéticas delgen KLF11 están asociadas a la diabetes mellitus tipo 2 (DMT2)en la población francesa, incluyendo la variante Q62R y la delpromotor –1659G>C (p-SNP) que se encuentran en LD completo.El objetivo de este trabajo es la replicación del estudio de lasvariantes de KLF11 asociadas a la DMT2 en la población danesay la regulación transcripcional de KLF11 afectada por p-SNP. EsteSNP se encuentra situado en una secuencia putativa de uniónde RBP-Jk o STAT3 ((G>C)TGGGAA). La transición G>C de p-SNP predice una pérdida de la unión de los factores detranscripción anteriormente mencionados. RBP-Jk juega un rolmuy importante en la vía de senalización de Notch en ladiferenciación endócrina de las células -pancreáticas. Por otraparte, STAT3 es necesario para la regulación de lagluconeogénesis en hepatocitos.Materiales y métodos: Para hacer este estudio se genotipificó lavariante Q62R en 4,443 individuos con tolerancia normal a laglucosa (TNG), 491 individuos con deterioro de la glucosa enayuno, 679 individuos con intolerancia a la glucosa, 251 nuevosdiabéticos y 118 sujetos con historia de DMT2 (INTER 99 cohorte)y se analizó su asociación con rasgos cuantitativos asociados ala glucosa. Por otra parte, se analizaron las proteínas nuclearescapaces de unirse a la secuencia de p-SNP por medio deretardamiento en gel (EMSA). Se clonó el promotor de KLF11conteniendo la secuencia salvaje o mutante de p-SNP en el vectorpGL3-luciferase y se obtuvo la actividad relativa de luciferasa.Resultados: En los sujetos TNG el alelo 62R está asociadosignificativamente a niveles más altos de insulina en ayuno,niveles elevados del péptido C en ayuno, así como incrementode los índices de resistencia a la insulina HOMA (P= 0.00004,P= 0.006 and P=0.00002, respectivamente). Se demostró queun complejo proteíco se une al alelo salvaje de p-SNP, el cual nose observa en el alelo mutante. Nuestros resultados pruebanque STAT3 está presente en este complejo. El análisis de laactividad del promotor de KLF11 muestra una inhibición del alelosalvaje G comparado al alelo mutante C, sugiriendo que p-SNPafecta la expresión de KLF11.Conclusión: KLF11 está asociado a la resistencia a la insulina enla población danesa. El hecho que p-SNP altere la asociaciónde STAT3 y reprima al promotor de KLF11 sugiere que laregulación de esta proteína juega un rol importante en lasensibilidad de la glucosa en el hígado, lo cual pudiera explicarla asociación de KLF11 a la resistencia a la insulina.

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Diversidad del genoma humanoDr. Andrés Moreno, Univ. Pompeu Fabra, Barcelona

La diversidad genética humana ha sido moldeada por diferentesprocesos biológicos e históricos durante la evolución de nuestraespecie, dando lugar a una compleja variación fenotípica entreindividuos y entre poblaciones, incluyendo diferencias desusceptibilidad a enfermedades multifactoriales. Sabemos queel genoma de dos individuos varía en un pequeño porcentajeque puede explicar estas diferencias, y a su vez, que el genomahumano diverge del de otras especies cercanas al acumularcambios que también nos informan de la composición genéticaque nos caracteriza como humanos.En este proceso la selección positiva juega un papel fundamental,ya que puede ser responsable de la mayoría de innovacionesfuncionales ocurridas en el linaje humano después de suseparación de la rama del chimpancé. Con las técnicas degenotipado disponibles actualmente, es posible detectar la huellaque la selección positiva deja en los genomas a nivel molecular.Esto ha demostrado ser una buena estrategia para encontrarvariaciones funcionales, incluyendo caracteres específicos deespecie, variantes asociadas a la resistencia de enfermedadeso a diferentes respuestas farmacológicas; por lo cual se haconvertido en un área de especial interés en evolución yrecientemente en biomedicina.En el presente estudio utilizamos datos inter e intra específicospara seleccionar genes con evidencias de una evoluciónacelerada en el linaje humano y genotipar SNPs de dichasregiones en poblaciones humanas representativas de la variacióngenética mundial (provenientes del Human Genome Diversity CellLine Panel, HGDP-CEPH).Un total de 365 SNPs de 19 genes han sido genotipados en 1049individuos de 39 poblaciones diferentes con la tecnología deSNPlex. Además de analizar parámetros de diversidad genéticapoblacional, hemos aplicado diferentes métodos para detectarseñales compatibles con selección positiva: diferenciaciónpoblacional (F

ST), distribución de frecuencias alélicas menores

(MAF), distribución de frecuencias alélicas derivadas (DAF) yhomocigosidad haplotípica extendida (EHH).Los resultados muestran una alta conservación en este grupode genes, en general no hay señales de selección diferencialentre poblaciones. Algunos genes, como el receptor olfativoOR5I1, parecen estar bajo selección positiva en todas lasregiones geográficas, probablemente debido a su importanciafuncional para la fisiología humana.

Variaciones genómicas y riesgo cardiovascularDr. Eros Balam Ortiz, INMEGEN

Introduction. Cardiovascular diseases are the leading cause ofdeath in Mexico and constitute an important finantial burden toits Health Care System. The B

1-adrenergic receptor (ADRB1),

the B2-adrenergic receptor (ADRB2) and angiotensin-II receptor

type 1 (AGTR1), mediate the effects of endogenouscatecholamines and angiotensin II, increasing heart rate,contractility, renin release and lipolysis. Recent studies1,2 haveshown that SNPs in those genes influence the risk forcardiovascular disease and the therapeutic response to antagonistof B

1, B

2 and angiotensin II receptors.

ADRB1, ADRB2 and AGTR1 genes are located in chromosome10q23-24, 5q31-32 y 3q21-25, and encode proteins of 477, 668,359 amino acids, respectively. Here we describe allele frequenciesof 8 SNPs in 5 Mexican Mestizo populations, allele distributionand comparison with populations included in the InternacionalHapMap Project, as well as calculations of the unphased LDbetween them.

Materials and Methods. We obtained genomic DNA from MexicanMestizo blood simples. Volunteers were from 6 geographicallydistant states in Mexico: Zacatecas (ZAC), Sonora (SON),Yucatan (YUC), Veracruz (VER), Guerrero (GRO) and Guanajuato(GTO). We genotyped 8 polymorphisms in three genes: ADRB1(145A>G and 1165C>G); ADRB2 (46A>G, 79C>G, and 491C>T);AGTR1 (43732C>T, 44221 A>G and 44325A>C), in 184individuals from each population (n=1,104) using direct allelicdiscrimination with TaqMan probes on a 7900HT RT-PCR System(AB, USA). We determined alllelic frequencies, Hardy Weinbergequilibrium as well as differences beetwen populations using two-sided Fisher Exact Test, P < 0.05 was considered statisticallysignificant. Unphased haplotypes and linkage disequilibrium (LD)measurements (D’ and R2) were determined using the Gabriel´sMethod3 and Haploview.Results. Table 1 shows MAFs of 7 SNPS in the ADRB1, ADRB2and AGTR1 genes in 6 Mexican Mestizo Populations. Thesevariants are in HW equilibrium in the studied populations.Comparative analysis between mestizo populations showdifferences when were compares between them, these resultsare show in Table 2a, 2b, 2C.Comparative analysis of genotypic frequencies in these genesbetween Mestizos and other populations is shown in Table 3. Allthe SNPs but one show significant differences with Caucasians(CEU), Han Chinese (CHB), Japanese (JPT) and Yorubas fromAfrica (YRI) from the international HapMap, only 491C>T(ADRB2), showed no differences between these populations.Unphased haplotypes and analysis of linkage disequilibrium (LD)between 145A>G and 1165C>G (1 Kb) in these Mestizopopulations was calculated. The degree of LD show significantvariations between groups; the ZAC population show completeLD. In contrast, Population from GRO show very low LD.Discussion. The modern Mexican Mestizo population resultedfrom admixture of Spaniards, several native ethnic groups fromMesoamerica and African groups, in the last 500 years. Thegeographical distribution of these groups differ significantly withinthe country. Comparative analysis of these polymorphisms among6 mestizo populations from distant parts of Mexico showedsignificant MAF differences in some cases. When we comparedthis data with that of the International HapMap Project, we foundthat Mexican Mestizo populations have particular genotypicfrequencies in these loci. Moreover, analysis of haplotypedistribution show different patterns among Mexican groups.Particulary, the ZAC population show the highest degree of LDand the GRO population the lowest LD. The latter is similar to LDfound in the YRI population from Africa in International HapMapProject that showed a site of recombination between those twovariants.This is consistent with the fact that GRO is one of thestates of Mexico with the highest African ancestral contribution.Our data support differences in these loci between MexicansMestizo populations and those populations studied by theHapMap. At these loci, differences too support geneticstratification between mestizo populations that can influenceresults in genetic association studies.Similar differences in functional SNPs related to cardiovasculardisease may arise as we continue to systematically analyze thegenomic structure of the Mestizo population of Mexico.Our data support the notion that Mestizo populatins in LatinAmerica conserve SNPs frequencies that differ from those inother populations, including functional polymorphisms associatedto cardiovascular disease and drug response. Differencesbetween Mexicans groups support genetic stratification betweenMestizo populations that can influence results in geneticassociation studies. Similar differences in functional SNPs relatedto other common disease, may arise as we continue tosystematically analyze the genomic structure of the Mestizopopulation of Mexico.

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Simposio 2.Enfermedades multifactoriales II

Coordinador: Dr. David KershenovichFacultad de Medicina, UNAM

Rasgos metabólicos asociados a diabetes mellitusDra. María Teresa Tusié, INCMyNSZ

Genómica del Síndrome MetabólicoDra. Margarita Terán, Pennington Biomed Res Ctr

The concept of a metabolic syndrome (MetS), a cluster of pre-clinical metabolic alterations commonly associated with obesity,is the object of much debate. Is the MetS a true disease? Geneticstudies have the potential to contribute to some of the keyquestions including the factual nature of the cluster of pre-clinicalfeatures and whether it is associated with human genetic variation.Information for the familial aggregation of individual componentsof MetS and an overview of the studies that have dealt withcandidate genes will be presented. Genome-wide linkage scandata for the principal components of the MetS in the HERITAGEFamily Study will be used as an example. In addition, highlightsfrom recent published data will be discussed. Further progress inthe understanding of the genetic basis of MetS should occur assoon as a consensus is reached on the true nature of MetS, itscomponents and diagnostic criteria. The debate is largely fueledby two differing schools of thoughts, one promoting an “insulin/glucocentric”, the other a “cardio/lipocentric” approach to the MetSconcept. It could be assumed that obesity, ectopic fat depositionand abnormal adipose tissue metabolism are responsible foralterations in lipid metabolism. In turn, this disarrangedmetabolism generates the commonly observed pre-clinical shiftsin glucose tolerance, lipids and lipoprotein profile, blood pressure,inflammatory markers, endothelial function and prothromboticstate that progress to a clinical condition. The MetS challengedwells in distinguishing among genes involved in its predisposition,development and or causality and further understanding theirphysiopathologic role.

Degeneración macular asociada a la edadDra. Irma Silva Zolezzi, INMEGEN

La degeneración macular asociada a la edad (DMRE) es la causamás común de pérdida de visión entre personas de más desesenta años. Esta enfermedad se caracteriza por pérdidaprogresiva de la visión central, causando disminución de laagudeza visual debido al deterioro de la mácula, parte central dela retina del ojo rica en células fotosensibles. Existen dos formasavanzadas de DMRE: atrofia geográfica (seca) yneovascularización coroidea (húmeda), que pueden ocurrir enuno o ambos ojos. Existe poco conocimiento sobre losmecanismos moleculares involucrados en el desarrollo de DMRE,sin embargo, recientemente diversos estudios permitieronidentificar dos genes asociados a la enfermedad, cada uno conuna contribución importante pero independiente: El factor H delcomplemento (CFH) en población blanca no-hispánica y laproteína hipotética LOC387715 (LOC387715) (NCBI Build 35.1)en población blanca. Con la finalidad de evaluar la participaciónde CFH y LOC387715 en el desarrollo de DMRE en poblaciónmestiza mexicana, se genotipificaron cuatro polimorfismos deun solo núcleotido (SNPs) previamente asociados a DMRE enun grupo de pacientes y un grupo de controles poblacionales.Para realizar el estudio de casos y controles de utilizaronmuestras de sangre total de 72 pacientes mestizos norelacionados, con alguna de las dos formas de DMRE avanzadade un hospital oftalmológico del Distrito Federal, y 300 controles

poblacionales provenientes de 6 regiones del país (Guanajuato,Guerrero, Sonora, Veracruz, Yucatán y Zacatecas). El DNAgenómico se extrajo del paquete de células blancas por métodosconvencionales (QIAamp DNA Blood Maxi Kit, QIAGEN,Alemania). Posteriormente, se genotipificaron tres SNPs del genCFH, dos intrónicos (rs1410996, rs380390) y la variante Y402H(rs1061170); y un SNP en LOC387715 (rs10490924) medianteensayos de discriminación alélica, usando sondas TaqMan®(Applied Biosytems, EUA). Para todos los SNPs se calcularonlas frecuencias alélicas y genotípicas, y se evaluó si seencontraban en equilibrio de Hardy-Weinberg en la poblacióncontrol mediante una prueba exacta de Fisher. Las pruebas deasociación se realizaron mediante un análisis de chi-cuadrada.Los resultados obtenidos mostraron una asociación significativadespués de corregir por Bonferroni (p<0.0125) de dos SNPs, elrs1061170 (Y402H) de CFH (OR=6.076, C.I. [1.567-23.557],p=0.003); y el rs10490924 de LOC387715 (OR=6.222, C.I. [2.981-12.986], p=1.679x10-07) con DMRE avanzada. En el caso de losotros dos SNPs analizados no se encontró asociación significativacon DMRE. Los resultados obtenidos sugieren que CFH yLOC387715 contribuyen al desarrollo de DMRE avanzada en lapoblación mestiza mexicana de manera similar a lo que ocurreen otras poblaciones. Para confirmar estos resultados e identificarloci adicionales asociados a la susceptibilidad a DMRE en lapoblación mestiza mexicana, se está realizando un estudio deasociación de genoma completo con aproximadamente 115,000SNPs utilizando microarreglos de oligonucleótidos (GeneChip®Human Mapping 100K Set, Affymetrix, EUA).

Genómica de las enfermedades autoinmunesDra. Lorena Orozco, INMEGEN

Introducción: Los mecanismos patogénicos responsables de laautoinmunidad aún no están bien dilucidados. Diversos estudioshan demostrado que las enfermedades autoinmunes (EAs) sonde origen multifactorial, donde la predisposición genética es elprincipal factor implicado en su etiopatgenia. Se estima que estasentidades afectan el 4-5% de la población, predominandogeneralmente en el sexo femenino. Recientemente, diversosestudios han identificado varios genes que han mostradoevidencia de asociación alélica con las EAs de inicio en la etapaadulta, sin embargo estos estudios no han sido replicados entodas las poblaciones y en edad pediática se conoce muy poco.La enfermedad reumática más común en la infancia es la artritisreumatoide juvenil (ARJ) y el prototipo de las EAs es el lupuseritematoso sistémico (LES).Objetivo: Identificar los factores genéticos implicados en lasusceptibilidad para desarrollar ARJ y LES en pacientespediátricos mexicanos.Materiales y metodos: Se incluyeron un total de 133 pacientescon ARJ y 250 pacientes con LES, diagnosticados antes de los16 años de edad, sus padres y 355 controles sanos. Se analizaronpolimorfismos de un solo nucleótido (SNPs) en genes queparticipan en las respuestas inmune e inflamatoria tales como:PTPN22, PDCD-1, IRF5, TYK2, FCRL3, TNF-alfa, IL-10, IL-6,MCP1, IKBL, MIF y RANTES y ER-alfa. Los SNP’s fueroncaracterizados por el método Taqman y secuenciación. Lasfrecuencias genotípicas y alélicas así como la frecuencia dehaplotipos cuando fue el caso fueron comparadas entre casos ycontroles mediante diversos programas estadísiticos.Resultados: Se identificaron varios polimorfismos en genesasociados con LES y con ARJ, ninguno de los genes quemostraron asociación fueron compartidos entre LES y ARJ. Seobservó una asociación significativa con susceptibilidad paradesarrollar LES en edad pediátrica cuando se analizaron lospolimorfismos 1858C/T del gen PTPN22 y PD1.3G/A del genPDCD-1, entre otros. También se identificó un polimorfismo con

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efecto protector a desarrollar LES. Interesantemente en estetrabajo se documenta por primera vez la identificación de unnuevo gen de riesgo para desarrollar LES.Por su parte, los genes MIF, IKBL y FCRL3 mostraron asociacióncon ARJ.

Simposio 3.Oncología genómica

Coordinador: Dr. Alejandro García CarrancáInstituto Nacional de Cancerología

Carcinogénesis en piel y de cérvix uterinoDr. Patricio Gariglio, CINVESTAV

Como sabemos, el cáncer se origina cuando clonas de célulasmutadas sobreviven y proliferan en forma inapropiada, rompiendoel balance entre la proliferación celular y la apoptosis. En losúltimos años, la investigación en cáncer ha hecho avancesnotables en relación con la biología y la genética de la célulacancerosa. Entre los logros más importantes está el conocimientodetallado de genes, proteínas y procesos que controlan el ciclocelular y el entender que la apoptosis y los genes que la controlanjuegan un papel fundamental en el desarrollo de tumoresmalignos. Para que un tumor maligno se desarrolle, se debenmutar 4-5 genes que controlan el crecimiento celular.Actualmente, se ha llegado a establecer que en el desarrollo delas primeras etapas de una neoplasia intervienen básicamentedos grupos de genes: los oncogenes y los genes supresores detumores (o antioncogenes). Las proteínas oncogénicas tienenuna actividad aumentada si se comparan con las proteínas proto-oncogénicas (normales). Por otro lado, una característicaimportante de los antioncogenes es la de inhibir el crecimiento yla proliferación celular. Se ha descubierto que tanto los oncogenes(por ejemplo c-myc, ras, bcl-2) como los antioncogenes másestudiados (rb, p53) participan activamente en apoptosis, lo cualimplica que las vías que controlan este proceso juegan un papelimportante en cáncer. En cáncer cervical, existe evidenciaindicando que la infección persistente por HPV de alto riesgo esnecesaria pero no suficiente para el desarrollo de esta neoplasia.Además de la expresión de los oncogenes virales (E6, E7), senecesitan otros cofactores (cancerígenos del tabaco, estrógenos,deficiencia en el consumo de retinoides, etc.) para inducir uncáncer invasor. Con el objetivo de profundizar en las basesmoleculares del cáncer cervicouterino y del cáncer de piel, nuestrogrupo trabaja en 2 sistemas modelo murinos: A.- En colaboracióncon el Dr. P. Lambert (Madison, Wisconsin), empleando ratonesK14E7, hemos estudiado recientemente la participación deoncogenes y antioncogenes en el desarrollo del cáncer cervical.En particular estudiamos la vía supresora de tumores del TGF-beta. B.- En colaboración con el grupo del Dr., Pierre Chambon(Estrasburgo, Francia), empleando un ratón al que se le puedeeliminar en el adulto un gen que codifica para un importantereceptor a retinoides (RXRalfa), hemos estudiado los efectos deesta mutación en el desarrollo de cáncer de piel y del cáncercervical. Se observó que tanto el melanoma como los diversostipos de cáncer no-melanómico, son inducidos en ausencia delgen RXRalfa. Experimentos preliminares sugieren que laeliminación del gen RXRalfa coopera con los oncogenes E6 yE7 de HPV en el desarrollo de lesiones cervicales.

Genómica funcional y su impacto en quimioterapiaDr. Alejandro Sweet Cordero, Univ. de Stanford

En los últimos años hemos visto visto un aumento vertiginoso ennuestra capacidad para analizar en forma global los cambios queocurren a nivel molecular durante la patogénesis de un número

muy amplio de enfermedades. Mientras que anteriormente nosveíamos limitados a estudiar solo un gen o una proteína a la vez,la llamada era “ómica” nos está permitiendo cada vez mascomprender como el genoma, el transciptoma y el proteoma seven afectados en su conjunto por enfermedades como el cáncer.Unos de los ejemplos mas sobresalientes de esta nueva era enla medicina es el uso de los microarreglos de cADN para elanálisis de la expresión genética. Por medio de esta tecnología,es posible medir el nivel de expresión de miles de genes a la vezen una muestra determinada

Uno del los genes mas frecuentemente mutados en el cancerpulmonar y en otros tipos de cancer (pancreas, colon) es laGTPasa Kras. Utilizando un método para comparar patrones deexpresión en un modelo animal y el cáncer pulmonar en humanos,hemos identificado una signatura de expresion que se relacionacon la mutación del oncogen Kras (Sweet-Cordero et al NatureGenetics, 2005). Utilizando este mismo modelo tambien hemosutilizado los patrones de expresión por microarreglos paraidentificar nuevos genes involucrados en la resistancia a laquimioterapia.

Hemos desarollado una metodologia que permite analizar laimportancia funcional de estos genes tanto in vitro como in vivo.Utilizando la tecnología del ARN de interferencia, estamosllevando a cabo tamizajes de todos los genes de la signatura deKras para analizar su función en la oncogenesis. Utilizandoesta metodologia hemos identificado varios genes que influyenen la capacidad de Kras de producir un tumor.

Expresión genómica en progresión del cáncercervicouterinoDr. Mauricio Salcedo Vargas, IMSS

Identificación de genes de susceptibiildadpara cáncer de próstataDr. John Carpten, TGen, Phoenix

Simposio 4.Farmacogenómica y nutrigenómica

Coordinador: Dr. Héctor BourgesInstituto Nacional de Ciencias

Médicas y Nutrición Salvador Zubirán

Individualidad genética y nutriciónDr. Armando Tovar, INCMyNSZ

Nutrigenómica: Implicaciones en Salud PúblicaDr. Jim Kaput, Nutrigenomics

The science of nutrigenomics seeks to provide a molecularunderstanding for how common dietary chemicals (i.e., nutrition)affect health by altering the expression and/or structure of anindividual’s genetic makeup. The conceptual basis for this newbranch of genomic research can best be summarized by thefollowing Five Tenets of Nutrigenomics:

• Improper diets are risk factors for diseases• Dietary chemicals alter gene expression and/or genome

structure• Influence of diet on health depends upon an individual’s genetic

makeup• Genes regulated by diet play a role in chronic diseases• “Individualized nutrition” – diets based upon genotype,

nutritional requirements and status - prevents and mitigateschronic disease

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Applying the concepts of nutrigenomics to individuals ischallenging because of the diversity of genetic makeups and theirindividual responses to the complexity of food. We haveestablished the Laboratory of Nutrigenomic Medicine to studyindividuals with type 2 diabetes (T2DM). The complexpresentation of impaired glucose tolerance (IGT), hyperglycemia,hyperinsulinemia, insulin resistance, and other abnormalities ofthis disease and the differences in effectiveness of dietary anddrug treatments among individuals indicates an underlyingmolecular, genetic, and environmental (including diet)heterogeneity of this disease. Specifically, we are analyzingcandidate gene variants, clinical phenotypes, diet histories, andgenetic ancestry in patients with different severities andcomplications of type 2 diabetes (T2DM). We anticipate thatcertain genetic, dietary, and disease state patterns will identifytype 2 diabetic subjects likely to develop more severemanifestations of disease. It is anticipated that the developmentof improved diagnostic capabilities will enable greater accuracyin prescribing early preventative treatment. Power calculationsindicate that larger populations will be needed to assess validityof these results. Toward that end, we are participating with othersto develop an international Nutrigenomics Societythat will enablecollaborations among various research groups throughout theworld. Progress of this effort will be presented.

Variaciones de número de copias y su impactoen la farmacogenómicaDr. Charles Lee, Univ. de Harvard, EUA

Genomic variability can be present in many forms, including singlenucleotide polymorphisms (SNPs), variable number of tandemrepeats (VNTRs: e.g., mini- and microsatellites), presence/absence of transposable elements (e.g., Alu elements) andstructural alterations (e.g., deletions, duplications, and inversions).Until recently, SNPs were thought to be the predominant form ofgenomic variation and to account for much normal phenotypicvariation. However, recently, our laboratory and others showedthat widespread structural variation (including copy numbervariants – CNVs) existed in the human genome (Iafrate et al.2004; Sebat et al. 2004; Tuzun et al. 2005). These regions ofstructural variation appear to be enriched for “environmentalsensor” genes that affect the way individuals adapt to thesurrounding environment and include genes involved in immunity,inflammation, cell surface antigens, and cell surface adhesion.The Genomic Structural Variation Consortium’s copy numbervariation project has been to obtain a global profile of copy numbervariation in the human genome by screening all 270 HapMapindividuals (representing four populations) with two independent,genome-wide array platforms: a whole genome tiled BAC arrayand the Affymetrix 500k SNP array. From these studies, we haveidentified and characterized over a thousand copy number variableregions. These studies clearly demonstrate the prevalence ofCNVs and suggest that these and other structural variants needto be considered and incorporated in future disease-based andpharmacogenomic-based association studies.

Farmacogenómica de la hipertensión arterialM.C. Samantha Alvarez MadrazoBHF Glasgow Cardiovascular Research Center

La prevalencia mundial de la hipertensión arterial varía del 25-35% en la población adulta.A pesar de los avances significativos en el tratamiento de lahipertensión y de haber más de un centenar de antihipertensivosdisponibles, menos de un tercio de los pacientes hipertensosson tratados adecuadamente. Las principales razones de losbajos niveles de control son la inadecuada adherencia de lospacientes, las reacciones adversas y la respuesta subóptima a

los medicamentos antihipertensivos. Sin embargo, los factoresgenéticos, la raza y la etnia también juegan un papel importante.La aplicación de estrategias genéticas para estudiar la naturalezamultifactorial y poligénica de la hipertensión han llevado a unmejor entendimiento de la patogénesis de la enfermedad. Por loque es probable que con el conocimiento de las bases genéticasde la hipertensión y las diferentes vías involucradas en laregulación de la presión arterial sea posible individualizar eltratamiento para cada paciente. Esto esta ejemplificado en eltratamiento de varias formas monogénicas de hipertensión.El Sistema Renina-Angiotensina-Aldosterona (SRAA) tiene unpapel importante en la regulación de la presión arterial y por lotanto ha sido un blanco valioso para la intervención terapéutica.No es sorprendente que la mayoría de las clases demedicamentos (inhibidores de la ECA, inhibidores del receptorde angiotensina II, bloqueadores beta adrenérgicos,bloqueadores de los canales de calcio y diuréticos) esténrelacionados con este sistema. Con el fin de determinar lavariabilidad en la respuesta del tratamiento con antihipertensivos,varios polimorfismos del SRAA se han estudiado. Sin embargo,los resultados han sido inconsistentes. Por ello nuestros gruposusaron una estrategia de barrido genómico para definir losmarcadores genéticos involucrados en la respuesta de la presiónarterial. La población del Estudio Británico de Genética de laHipertensión (BRIGHT) se estratificó en grupos de acuerdo a larespuesta a diferentes clases de antihipertensivos: 89 pares dehermanos con terapia antihipertensiva que inhibe la renina (AB)y 76 pares de hermanos con antihipertensivos que no la inhiben(CD). Se llevo a cabo un análisis de ligamiento no paramétricoen el genoma completo usando 37 marcadores espaciados cada10cM. Se encontró ligamiento significativo en el grupo AB en elcromosoma 2p (LOD score = 4.84, en 90.68 Kosambi cM) y unligamiento con tendencia significativa para el grupo CD en elcromosoma 10q (LOD score = 2.83, en 125.96 Kosambi cM). Seidentificaron 25 genes en el locus AB susceptible de ligamientocomo candidatos potenciales para la hipertensión sensible a lasal y/o asociados con la respuesta a los medicamentosantihipertensivos. Estudios posteriores se están llevando a cabopara validar estos resultados.Además de la estrategia de barrido genómico, también se estáempleando en nuestro grupo la estrategia de análisis de genescandidatos para investigar los genes de la 11-beta hidroxilasa yaldosterona sintasa con el fin de obtener un conocimiento másprofundo acerca de la patogénesis de la hipertensión y lafarmacogenómica.El éxito futuro de los estudios de farmacogenética depende delequilibrio costo-beneficio, la baja tasa de error y eficiencia queofrezcan. Los beneficios prácticos de la farmacogenómicanecesitan verificarse mediante estudios clínicos antes de queésta realmente se convierta en una herramienta clínica.

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Presentaciones orales

Salón AViernes 27

Horario

11:50 - 12:00

12:00 - 12:12

12:14 -12:24

12:26 - 12:36

12:38 - 12:48

12:50 - 13:-00

13:02-13:22

Trabajo

Polimorfismo genético del CYP3A4*18,CYP2B6*22 y CYP1A2*1F en unapoblación de YucatánMarco Antonio Sánchez GuerraCINVESTAV-IPN

CYP2D6*3, *4 Y *5 Y asociación conenfermedad de ParkinsonMarisol López LópezUniversidad Autónoma Metropolitana

La variante R230C de la proteína ABCA1afecta los niveles plasmáticos de HDL-colesterol y el Índice de masa corporal enmexicanos: Asociación con obesidad ysíndrome metabólicoMa. Teresa Villarreal MolinaInstituto Nacional de Ciencias Médicas yNutrición Salvador Zubirán

Caracterización de la expresión de un arnmensajero que codifica para una proteínaRHEB-LIKE involucrada en la enfermedadTSCMaría del Rosario Gonzaga PérezInstituto Nacional de Psiquiatría“Ramón de la Fuente Muñiz”

Evaluación de la contribución ancestralen poblaciones mestizas mexicanas y susefectos en la preservación deldesequilibrio de ligamientoJesús Karol Estrada GilInstituto Nacional de Medicina Genómica

SACGEN: Software para el AnálisisComparativo de GenomasErnesto Francisco Bautista ThompsonUniversidad Autónoma del Carmen

Selección multivariada de biomarcadoresen datos de genómica funcionalVictor Treviño AlvaradoInstituto Tecnológico y deEstudios Superiores de Monterrey

Salón BViernes 27

Trabajo

Relación de los polimorfismos -308 deTNF-alfa y -174 de IL-6 con factores deriesgo cardiovascular en pacientes conobesidad y diabetes tipo 2Isela Parra RojasUniversidad de Guadalajara

Participación del gen Inducido porInsulina-2 (INSIG2) en obesidad ymetabolismo de lípidos en poblaciónmexicanaMarisela Villalobos ComparánInstituto Nacional de Ciencias Médicas yNutrición Salvador Zubirán

Identificación de un nuevo gene desusceptibilidad para la enfermedad deCrohn por medio de asociación genéticadirecta con un panel de 19,779 SNPscodificantesFrancisco Miguel De La Vega VacaApplied Biosystems

Distribución geográfica en México depolimorfismos en genes del metabolismode folatosIrma Silva ZolezziInstituto Nacional de Medicina Genómica

Asociación de polimorfismos en genes delmetabolismo del folato (MTHFR, CBS,MTRR y GCPII) y riesgo para defectos decierre de tubo neural en Yucatán, MexicoLizbeth Josefina González HerreraUniversidad Autónoma de Yucatán

Hacia una terapia génica para elalcoholismo: estrategia y avanceAmalia Sapag Muñoz de la PeñaUniversidad de Chile

Evaluación in vitro de DNAzimas dirigidascontra ARNm del gen E6 de VPH-16Pablo Reyes GutiérrezCINVESTAV-IPN

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sPOLIMORFISMO GENÉTICO DEL CYP3A4*18, CYP2B6*22 YCYP1A2*1F EN UNA POBLACIÓN DE YUCATÁN.

Sánchez Guerra, Marco, Elizondo Azuela, Guillermo, PérezHerrera, Norma, Reyes Hernández, Octavio y Quintanilla Vega,B.Sección Externa de Toxicología, CINVESTAV, México, D.F.,México.

El metabolismo de la mayoría de los xenobióticos es dependientede los citocromos P450 (CYP) y es llevado a cabo en muchoscasos por enzimas polimórficas, las cuales pueden causarsupresión o incremento en el metabolismo. Dentro de estosxenobióticos están los plaguicidas organofosforados (OF), loscuales sufren una activación metabólica para la formación deloxón, metabolito que ocasiona los efectos neurotóxicos, a travésde la inhibición de la acetilcolinesterasa. Se han descritovariaciones genéticas para los CYP involucrados en estabioactivación de los OF: 3A4, 2B6 y 1A2, que corresponden alas variantes CYP3A4*18 , CYP2B6*22 y CYP1A2*1F ,respectivamente. Estos polimorfismos están relacionados con unincremento en la actividad enzimática, por lo cual pudieran serun factor de riesgo para las poblaciones que utilizan estosplaguicidas. En el presente estudio determinamos lospolimorfismos CYP3A4*18 por PCR-RFLP y CYP2B6*22 yCYP1A2*1F por PCR-Tiempo real, en una población detrabajadores agrícolas del sexo masculino del municipio de Muna,Yucatán, quienes util izan OF. Aceptaron participar 101agricultores de 48 ± 16 años de edad (previa firma delconsentimiento). De los 3 polimorfismos estudiados en estapoblación de fuerte ascendencia maya, solo observamos elpolimorfismo CYP1A2*1F, con una frecuencia del 4% para elgenotipo C/C (silvestre), del 28% para el genotipo C/A(heterocigoto) y del 68% para el genotipo (A/A) (mutado),frecuencias similares a las reportados en otra población mestizamexicana. La alta frecuencia observada de la variante genéticaCYP1A2*1F(A/A) que se asocia con un incremento en la actividadenzimática, sugiere que la población agrícola estudiada puedeser más susceptible a la toxicidad por la exposición a plaguicidasOF. De igual manera, considerando que esta isoforma participaen la activación de pre-carcinógenos, como los hidrocarburosaromáticos policíclicos y dioxinas, esta población puede tambiéntener un factor de riesgo a sufrir efectos tóxicos por la exposicióna estos contaminantes que son muy frecuentes en nuestro país.Agradecimientos: CONACYT/SALUD (donativo otorgado a BQV),a las autoridades y voluntarios participantes de Muna, Yuc.

CYP2D6*3, *4 Y *5 Y ASOCIACIÓN CON ENFERMEDAD DEPARKINSON

López López Marisol,1 Guerrero Camacho Jorge Luis,2 AlonsoVilatela María Elisa.2

1Departamento de Sistemas Biológicos, UAM-Xochimilco.2Departamento de Genética y Biología Molecular, INNNMVS.

Antecedentes. La enfermedad de Parkinson (EP) es una entidadcompleja resultado de la combinación de factores genéticos yambientales. Se ha propuesto que la EP puede ser causada porsusceptibilidad genética a neurotoxinas ambientales. CYP2D6es un gen candidato para EP porque regula el metabolismo dedrogas y toxinas. El locus CYP2D6 se localiza en el cromosoma22q13.1, es muy polimórfico y consta de más de 70 alelosdiferentes. Entre los más frecuentes están CYP2D6*4, unasustitución G

1934A; CYP2D6*3, identificado por una deleción A

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y CYP2D6*5, que es la deleción del gen. Las variacionesindividuales en la expresión de CYP2D6 pueden influir en el riesgode desarrollar padecimientos ligados a factores ambientales como

la EP. Sin embargo, el polimorfismo de CYP2D6 y su relacióncon el desarrollo de la EP ha mostrado resultados inconsistentes.Objetivo. Determinar si CYP2D6*3, *4 y *5 están asociados conla enfermedad de Parkinson.Pacientes y metodos. Se analizaron pacientes y controles paracada alelo: 212 y 225, CYP2D6*3; 212 y 230, CYP2D6*4; 122 y93, CYP2D6*5, respectivamente. La genotipificación deCYP2D6*3 y *4 fue realizada por PCR-RFLP, y CYP2D6*5 fueidentificado por PCR alelo-específico. El análisis estadísticoincluyó las frecuencias genotípícas y alélicas, asociación a riesgocon la prueba c2 y prueba exacta de Fisher; y regresión logísticacon nivel de confianza del 95 %. Las poblaciones están enequilibrio Hardy-Weinberg.Resultados. La frecuencia alélica de CYP2D6*3 fue 3.05% enpacientes, y 0.90% en controles (OR = 3.61, p = 0.019). Seobservó diferencia significativa entre los casos de EPheterocigotos *1/*3 respecto a controles (6.1 vs. 1.8%; OR = 3.61,IC 95% = 1.1 – 15.4, p = 0.019). Se analizó el efecto de CYP2D6*3en la edad de inicio de EP, dividiendo al grupo de pacientes en £40 y > 40 años, y encontramos diferencia significativa con inicio£ 40 años (17.9 vs. 4.4%; OR = 4.75, p = 0.006). No encontramosasociación entre los polimorfismos CYP2D6*4 y *5, y el desarrollode EP ni con edad de inicio. CONCLUSIÓN. Estos resultadosmuestran que CYP2D6*3 es factor de riesgo para EP, y sugierenque está asociado con EP de inicio temprano. Para confirmarestos datos es necesario ampliar la muestra para CYP2D6*5.

LA VARIANTE R230C DE LA PROTEÍNA ABCA1 AFECTALOS NIVELES PLASMÁTICOS DE HDL-COLESTEROL Y ELÍNDICE DE MASA CORPORAL EN MEXICANOS:ASOCIACIÓN CON OBESIDAD Y SÍNDROME METABÓLICO.

Villarreal-Molina Ma. Teresa1,2, Aguilar-Salinas Carlos3,Rodríguez-Cruz Marisela4, Riaño Daniela3, Villalobos-ComparánMarisela1, Guerra-García Teresa1, Coral-Vazquez Ramón4, Ortiz-López Guadalupe5, Menjívar Marta5, Yescas-Gómez Petra6,Könisberg-Fainstein Mina2, Tusié-Luna Ma. Teresa1, Canizales-Quinteros Samuel1.1Unidad de Biología Molecular y Medicina Genómica, InstitutoNacional de Ciencias Médicas y Nutrición “Salvador Zubirán”(INCMNSZ), Instituto de Investigaciones Biomédicas de la UNAM;2División de Ciencias Biológicas y de la Salud, UAM-Iztapalapa;3Departmento de Endocrinología y Metabolismo, INCMNSZ;4Hospital de Pediatría, CMN XXI-IMSS; 5Facultad de QuímicaUNAM; 6Instituto Nacional de Neurología y Neurociencias “ManuelVelazco Suarez”.

Aunque el papel de la proteína transportadora ABCA1 en el eflujode colesterol y la formación de lipoproteínas de alta densidad(HDL) es bien conocido, ABCA1 se expresa en muy diversostejidos, donde probablemente tenga diferentes funciones. Lahipo-alfalipoproteinemia tiene una alta prevalencia en México,por lo que secuenciamos el gen gen ABCA1 en individuosmexicanos con los niveles más bajos y más altos de HDL en lapoblación, buscando posibles variantes funcionales. Se encontróuna variante no sinónima (R230C) muy frecuente en individuoscon HDL-C bajos, pero no en individuos con HDL-C altos(P=0.00006). Por este motivo buscamos dicha variante en lapoblación general y analizar posibles asociaciones con otrosrasgos metabólicos. Se buscó la variante R230C con sondasTaqman, encontrándose en el 20.1% de 429 mestizos mexicanos.R230C mostró asociación estadísticamente significativa no solocon niveles bajos de HDL-C y Apo A-I, sino también con obesidad(OR=2.708; P=0.008) y con síndrome metabólico (OR=1.926;P=0.013), observándose un efecto de dosis alélica para los 2últimos pero no para los niveles de HDL-C/Apo A-I. R230C seencontró con una frecuencia aún mayor en varios grupos

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amerindios, y parece ser exclusiva de poblaciones concomponente amerindio. Este es el primer estudio que reporta laasociación de una variante de ABCA1 con obesidad y síndromemetabólico, que a la vez es relevante epidemiológicamente en lapoblación mexicana.

CARACTERIZACIÓN DE LA EXPRESIÓN DE UN ARNMENSAJERO QUE CODIFICA PARA UNA PROTEÍNA RHEB-LIKE INVOLUCRADA EN LA ENFERMEDAD TSC.

Gonzaga Pérez, R, Matus Ortega, ME, Antón Palma, B.Instituto Nacional de Psiquiatría “Ramón de la Fuente Muñiz”,México, DF.

En nuestro laboratorio se desarrolló un proyecto de investigaciónorientado hacia la identificación, aislamiento y caracterizaciónde nuevas proteínas funcionales, basado en tecnologíasinmunomoleculares de identificación y clonación de ARNmensajeros, con las que se aisló, identificó y se caracterizó unamolécula de ARNm a partir de una biblioteca de expresión deADNc de cerebro total de ratón. La secuencia primaria de esteARNm de 1541 nt de longitud, cuyo marco de lectura abierto detraducción de 552 nt, codifica para una proteína de 184 aa. Lacomparación de la secuencia de este ARNm dio como resultadouna identidad completa de más del 90% con la secuencia delARNm de Ras-Homolog Enriched in Brain de Mus musculus. Lasecuencia del ADNc se reportó por nuestro grupo en la base dedatos del GenBank (acceso AY197373). Rheb se define comouna nueva y única familia dentro de la superfamilia de proteínasRas, mostrando secuencias consenso características de estasuperfamilia.. Rheb ha tomado importancia ya que participa enla regulación celular, ciclo celular y se ha reportado que participaen el complejo de esclerosis tuberosa (TSC), una enfermedadgenética asociada con ataques y retraso mental, así como laaparición de tumores benignos (hamartomas) en diferentes partesdel cuerpo. A pesar de su importancia biológica, su distribución yexpresión no ha sido establecida completamente, por lo que ennuestro laboratorio, para iniciar la caracterización funcional deRheb se llevaron a cabo estudios de RT-PCR en áreas neuronalesy órganos periféricos de ratón para identificar la expresión deRheb ante estímulos específicos. Nuestros resultados mostraronque el gen Rheb en condiciones fisiológicas (i.p. SSI) esexpresado ampliamente en todas las áreas neuronalesexaminadas (bulbo olfatorio, cerebelo, corteza, estriado,hipocampo, médula espinal, ojos, tálamo-hipotálamo y tallocerebral); también fue detectado en tejidos periféricos comocorazón, hígado, riñón y glándulas suprarrenales. En el tejidodonde no se detectó expresión fue pulmón. En el grupo deanimales tratados con PTZ (i.p. 40 mg/kg), la expresión semantuvo en áreas neuronales, inhibiéndose en hígado y pulmón.En el grupo tratado con cocaína (i.p. 20 mg/kg) se inhibió enojos, bulbo olfatorio y glándulas suprarrenales. La expresión deRheb en forma ubicua, en condiciones fisiológicas, sugiere suparticipación en funciones esenciales del SNC y órganosperiféricos. Al modificarse su expresión en hígado (PTZ) yglándulas suprarrenales (cocaína) sugiere su participación enprocesos metabólicos. El desarrollo de un ensayo para detectarexpresión de Rheb-like dentro dentro de tumores podría ser uninstrumento valuable para diagnosticar y determinar el origen deun tratamiento para TSC y el desarrollo de estudios orientadoshacia la implementación de terapias para las enfermedades enlas que se involucra Rheb.

EVALUACIÓN DE LA CONTRIBUCIÓN ANCESTRAL ENPOBLACIONES MESTIZAS MEXICANAS Y SUS EFECTOSEN LA PRESERVACIÓN DEL DESEQUILIBRIO DELIGAMIENTO.

Jesús Estrada Gil, Alfredo Hidalgo Miranda, Irma Silva Zolezziy Gerardo Jiménez Sánchez.Instituto Nacional de Medicina Genómica,.Secretaria de Salud,México.

Antecedentes. La población mexicana tiene un origen genéticoúnico, más del 80% de la población es considerada “mestiza”,resultado de la mezcla de grupos étnicos amerindios con losespañoles. Si bien se han hecho estudios que muestrandiferencias de mestizaje entre algunos estados de la RepúblicaMexicana estos, se han limitado a evaluar solamente algunasregiones genómicas como el HLA, cromosoma Y y DNAmitocondrial. El estudio integral y sistemático del mestizaje a nivelgenómico permitirá tener un conocimiento detallado de laheterogeneidad en nuestra población y servirá como marco dereferencia para optimizar el diseño de estudios de asociación enmedicina genómica.Objetivos. Este estudio está enfocado a estimar la contribuciónancestral europea, africana y asiática a la población mestizamexicana de diferentes regiones del país, utilizando un grupo de105 polimorfismos de un solo nucleótido (SNPs) distribuidos a lolargo del genoma, que previamente fueron utilizados para evaluarancestralidad. Además, se procederá a evaluar el efecto de lasdiferencias de contribución ancestral en la preservación deldesequilibrio de ligamiento en poblaciones mestizas mexicanas.Materiales y métodos. Se genotipificaron 104 muestras de losestados de Sonora (n=20), Yucatán (n=17), Guerrero (n=21),Zacatecas (n=19), Veracruz (n=18) y Guanajuato (n=8) utilizandomicroarreglos de oligonucleótidos que evalúan aproximadamente115,000 SNPs (GeneChip® Human Mapping 100K Set,Affymetrix, EUA). Como información de las poblacionesancestrales se utilizaron resultados obtenidos con la mismaplataforma tecnológica del proyecto del HapMap Internacional(60 Yorubas de Nigeria, 60 caucásicos de Utah, 45 chinos Han y44 japoneses de Tokio). A partir de 3,055 SNPs informativos deancestralidad reportados por Smith et al. y Choundhry et al., seidentificaron 105 presentes en el microarreglo 100K, los cualesse utilizaron para calcular la contribución de cada poblaciónancestral a la población mestiza. Para inferir el porcentaje deancestralidad utilizamos el software Structure bajo el modelo demestizaje utilizando información a priori. Además, la preservacióndel desequilibrio de ligamiento (LD) entre la población Europea yla Mexicana se evaluó de dos maneras, primero dividiendo lapoblación mestiza por estado, y después separándola en cuatrogrupos generados utilizando datos de ancestralidad europea porindividuo (<50%, 50-60%, 60-70% and >70%). Definimos lapreservación de LD (PLD) como la proporción de pares de SNPsen LD en una población denominada ‘A’, que se encuentrantambién en LD en otra población denominada ‘B’.Resultados. La contribución poblacional promedio en las 104muestras para componente europeo, africano y asiático fue de58.96%, 10.03%, 31.05% respectivamente. Los estados conmayor y menor contribución europea fueron Sonora (70.63%) yGuerrero (51.98%) respectivamente. Siendo este último el estadocon la contribución asiática mas alta (37.17%). La contribuciónafricana se presentó en un rango desde 7.8% en Sonora hasta11.13% en Veracruz. El estado de Guerrero obtuvo el valor másbajo de PLD con la poblacion caucásica (74%) y Sonora el másalto (77%), lo que correlaciona con los resultados deancestralidad. El grupo de individuos mestizos con mayorancestralidad europea (>70%) tuvo el valor mas alto de PLD con

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la población caucásica, por otro lado, el grupo con menorancestralidad europea (<50%) tuvo el valor mas bajo de PLDcon la población caucásica.Conclusiones. Las diferencias observadas en los niveles deancestralidad entre estados del norte y de las costas de Méxicosugieren que la población mestiza mexicana es heterogénea. Elhallazgo de la existencia de diferencias en la preservación deLD en estos estados, da evidencia de que la estructura genómicade las poblaciones mestizas mexicanas podría favorecer lageneración de resultados falsos positivos en estudios deasociación que involucren datos genéticos. Lo anterior subrayala importancia de realizar correcciones por estratificación deancestralidad basadas en información genómica en este tipo deestudios.

SACGEN: SOFTWARE PARA EL ANÁLISIS COMPARATIVODE GENOMAS.

Garza-Domínguez, Ramiro, Bautista-Thompson, Ernesto,Velázquez-Jerónimo Fabiola.Centro de Tecnologías de la Información, DES-DACI,Universidad Autónoma del Carmen, Ciudad del Carmen,Campeche, México.

Se presenta una herramienta de software para el análisiscomparativo de genomas, la cual integra en un ambiente visuala técnicas de origen estadístico, de inteligencia artificial y desistemas dinámicos para el análisis de secuencias de nucleótidos.El creciente número de bases de datos sobre genomas requieredel desarrollo de nuevas herramientas y metodologías para laextracción y análisis automatizado de la información almacenada.También se requiere de explorar el uso de técnicas para análisisde datos cuyo origen no necesariamente esta relacionado conlas ciencias genómicas, que ayuden al experto humano aidentificar, extraer, comparar y clasificar patrones de interésmedico o biológico de los genomas bajo estudio. La herramientaque se presenta integra técnicas estadísticas clásicas, porejemplo, análisis de frecuencias de palabras (frecuencias,porcentaje de frecuencias), ordenación de palabras en base aíndice de Breslauer (en el caso de dímeros); con técnicas deinteligencia artificial como K-means, K-means Evolutivo para elagrupamiento de secuencias de nucleótidos, Fuzzy Item Setspara la generación de categorías e identificación de reglas; ytécnicas de sistemas dinámicos como los Mapas de Recurrenciapara visualizar correlaciones espaciales de datos. El conjuntode técnicas se encuentra integrado en un ambiente visual quefacilita el análisis y comparación de secuencias de genomasalmacenadas en bases de datos. La combinación de técnicaspermite además, generar información sobre diferentes aspectoso facetas de una secuencia de nucleótidos y comparar lainformación para conjuntos de secuencias. A futuro, se integrarannuevas técnicas de análisis que están en proceso de evaluación,tales como Mapas Auto Organizados Jerárquicos para lageneración de clases jerarquizadas y Análisis de Gramáticas paracaracterizar la complejidad computacional de las secuencias degenomas.

SELECCIÓN MULTIVARIADA DE BIOMARCADORES ENDATOS DE GENÓMICA FUNCIONAL.

Treviño, Victor1,3, Raza, Karim2, Young, Stephen2, Salmon, Mike2,Falciani, Francesco1

1School of Biosciences, 2Division of Immunity and Infection,University of Birmingham, UK. 3Instituto Tecnológico y de EstudiosSuperiores de Monterrey, Campus Monterrey, México.

Actualmente, enfermedades y cáncer se estudian usandoensayos genómicos que generan una enorme cantidad de datoscomo transcriptómica, proteómica y metabolómica. Una de lasaplicaciones directas más importantes de estos ensayos es laselección de biomarcadores entre personas sanas y enfermas.Estos marcadores se utilizan para diseñar modelos estadísticospredictivos que puedan ser usados en diagnóstico clínico, paraproponer nuevas drogas como tratamiento y para dirigirsubsecuentes esfuerzos de investigación. Existe una grancantidad de herramientas bioinformáticas para seleccionar talesbiomarcadores, las cuales pueden ser divididas en univariadas ymultivariadas. La gran mayoría de estas herramientas utilizaestrategias univariadas en las que se considera un solo gen,proteína ó metabolito a la vez, es decir, se pruebaestadísticamente una variable independiente de las demás. Sinembargo, la función biológica de cada gen, proteína o metabolitono es independiente sino que ejercen su función en un contextocooperativo dentro de una compleja red de conexionesbioquímicas. Por estas razones, hemos diseñado estrategias deselección multivariada que consideran combinaciones devariables y sus posibles interacciones que en conjunto modelanmejor la realidad biológica. En este trabajo mostramos quenuestra herramienta bioinformática multivariable puede generarmodelos más robustos, más predictivos y con menos cantidadde variables que las que usan estrategias univariadas. Al mismotiempo, demostramos que nuestra herramienta ha funcionadoexitosamente con datos obtenidos de muestras clínicas comotranscriptómica de diversos cánceres, proteómica de artritisreumatoide y metabolómica de fluídos oculares.

RELACIÓN DE LOS POLIMORFISMOS -308 DE TNF-ALFA Y-174 DE IL-6 CON FACTORES DE RIESGOCARDIOVASCULAR EN PACIENTES CON OBESIDAD YDIABETES TIPO 2.

Parra-Rojas Isela, Ruíz-Madrigal Bertha, Martínez-López Erikay Panduro Arturo.Servicio de Biología Molecular en Medicina, Hospital Civil deGuadalajara “Fray Antonio Alcalde”. Centro Universitario deCiencias de la Salud, Universidad de Guadalajara.

Polimorfismos en el promotor de los genes de TNF-alfa y de IL-6 se han asociado con resistencia a insulina, diabetes tipo 2 yenfermedad cardiovascular. Objetivo. Determinar la asociaciónde los polimorfismos –308 G/A de TNF-alfa y –174 G/C de IL-6con factores de riesgo cardiovascular en pacientes con obesidady con diabetes tipo 2. Metodología. Se incluyeron en el estudio100 individuos con obesidad (IMC>27 kg/m2) y 100 pacientescon diagnóstico previo de diabetes tipo 2. La glucosa y los lípidosséricos se midieron en el autoanalizador CX5-Delta (Beckman),la insulina mediante el equipo automatizado IMx (AbbottDiagnostics) y la citometría hemática con el CELL-DYN 3700(Abbott Diagnostics). La resistencia a insulina fue estimadamediante el índice HOMA. La determinación de los polimorfismosse realizó por PCR-RFLPs. Resultados. En los individuos conobesidad, los genotipos GC/CC del polimorfismo de IL-6 seasociaron significativamente con resistencia a insulina (HOMA3.6 vs. 2.5) y con un aumento en los niveles de glucosa (92.4 vs.80.0 mg/dL) e insulina (16.0 vs. 13.1 mU/mL). El genotipo GGdel polimorfismo de TNF-alfa fue relacionado significativamentecon un incremento en las concentraciones de colesterol (167.7vs. 156.9 mg/dL), VLDL-c (22.4 vs. 18.1 mg/dL) y triglicéridos(117.2 vs. 100 mg/dL) con respecto al genotipo GA. En lospacientes con diabetes tipo 2, los genotipos GA/AA delpolimorfismo de TNF-alfa se asociaron significativamente conun incremento en los niveles de glucosa (234.7 vs. 179.5 mg/dL), HbA1c (12.4 vs. 8.8%), cuenta de leucocitos (7.4 vs. 6.4

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103/mL) y plaquetas (288.1 vs. 260.8 103/mL). El genotipo GGdel polimorfismo de IL-6 solamente se relacionó con laconcentración de glucosa (210.8 vs. 170 mg/dL). Conclusiones.En individuos con obesidad, los genotipos GC/CC de IL-6 serelacionaron con resistencia a insulina y el genotipo GG de TNF-alfa se asoció con un incremento en las concentraciones delípidos séricos. En los pacientes con diabetes tipo 2, se encontróque el polimorfismo de TNF-alfa tiene un efecto sobre el controlglucémico, el estado de inflamación y trombosis, siendo de mayorriesgo cardiovascular para los portadores del alelo A.

PARTICIPACIÓN DEL GEN INDUCIDO POR INSULINA-2(INSIG2) EN OBESIDAD Y METABOLISMO DE LÍPIDOS ENPOBLACIÓN MEXICANA.

Villalobos-Comparán M, Aguilar-Salinas CA, Tusié-Luna MT,Villarreal-Molina MT, Canizales-Quinteros S.Unidad de Biología Molecular y Medicina Genómica, InstitutoNacional de ciencias Médicas y Nutrición Salvador Zubirán e IIBm,UNAM.

La obesidad en la mayoría de los casos ha sido definida comouna patología multifactorial, siendo el componente genéticoresponsable de un 30 a 70% de la variación del índice de masacorporal (IMC). Uno de los hallazgos recientes más prometedoresobtenido a través del escrutinio completo del genoma (116,204SNPs), mostró una variante común del gen INSIG2 (funciónprincipal en el metabolismo del colesterol en mamímeros)asociada de manera importante a la obesidad en poblacióncaucásica y afro-americana. Con el objetivo de evaluar laparticipación de este gen en la población mexicana, se realizóun estudio de asociación caso-control que incluyó 88 individuosobesos (IMC ≥ 30Kg/m2) y 159 individuos delgados (IMC < 25Kg/m2), todos adultos (>20 años) mexicanos en al menos tresgeneraciones. La genotipificación del SNP rs7566605 se realizócon sondas TaqMan en un PCR tiempo real, y se confirmó através de secuenciación directa. El análisis estadístico de losdatos se llevó a cabo con el programa SPSS (v10). Los resultadosobtenidos muestran una frecuencia significativamente menor delos genotipos G/C y C/C para el SNP rs7566605 en obesos vs.delgados (37.5% vs. 52.2%, p=0.026; OR= 0.549, IC95% [0.323-0.935]). Resultados similares fueron observados para el alelo C(obesos 19.3% vs. delgados 30.8%, p=0.006). En contraste a loobservado en población caucásica y afro-americana (genotipoCC riesgo aumentado de obesidad), en este estudio se presentaun riesgo disminuido de obesidad para dicho genotipo; lo quepodría sugerir que el SNP rs7566605 no es causal de obesidad;sin embargo, podría estar en desequilibrio con alguna(s)variante(s) funcional(es) del gen INSIG2 o cercanas a este locus.De manera interesante, se observó que los individuos delgadosportadores de los genotipos GC o CC mostraron nivelessignificativamente menores de colesterol total, triglicéridos y ApoBque los portadores GG (p=0.009; 0.048; 0.008; respectivamente,ajustado por edad, género e IMC), siendo éste el primer reporteen el que se evidencia la participación del gen INSIG2 en elmetabolismo de lípidos en humanos y la variación del IMC enpoblación mexicana.

IDENTIFICACIÓN DE UN NUEVO GENE DESUSCEPTIBILIDAD PARA LA ENFERMEDAD DE CROHNPOR MEDIO DE ASOCIACIÓN GENÉTICA DIRECTA CONUN PANEL DE 19,779 SNPS CODIFICANTES.

De La Vega, Francisco M.1, Franke, Andre2, Hampe, Jochem2,Rosenstiel, Philip2, Hill, Andreas2, Huse, Klaus4, Albrecht, Mario5,Mayr, Gabriele5, Briggs, Jason1, Wenz, Michael1, Günther,Simone1, Gilbert, Dennis A.1, Prescott, Natalie6, Lengauer,

Thomas5, Mathew, Christopher6, Krawczak, Michael3, y Schreiber,Stefan2.1Applied Biosystems, Foster City, California, EEUU; 2Institute forClinical Molecular Biology, 3Institute of Medical Statistics andInformatics, Christian-Albrechts-University Kiel; 4Leibniz Institutefor Age Research, Jena; 5Max Planck Institute for Informatics,Saarbrücken, Alemania; 6Department of Medical and MolecularGenetics, King’s College London School of Medicine, Londres,Reino Unido.

La ejecución de estudios de asociación genética directa conjuegos de SNPs codificantes no sinónimos (cSNPs) puede facilitarel descubrimiento de variantes genéticas de susceptibilidad aenfermedades multifactoriales. Tal es el caso de la enfermad deCrohn (EC), una enfermedad gastrointestinal inflamatoria concomponente genético complejo. Para llevar a cabo un estudio anivel genómico de esta enfermedad, seleccionamos un juego de19,779 cSNPs de función putativa a partir de una base de datoscon mas de 60,000 cSNPs candidatos compilada de fuentespúblicas y privadas, filtrados por su probable heterosigosidad enpoblaciones de origen Europeo y Africano. Una muestra de 735pacientes con EC y 368 controles obtenida en Alemania fuegenotipificada para dichos SNPs por medio del ensayo deSNPlex™ (Applied Biosystems), identificando 7,832 SNPsinformativos. Estos últimos SNPs fueron subsecuentementetipificados en una muestra independiente de 386 trios, 946 casos,y 1091 controles. El análisis estadístico jerárquico de losresultados identifico un único cSNP asociado significativamentecon la enfermedad (p=8.4x10-6 caso-control sencillo, OR=1.70[95% CI: 1.33-2.16], p=2.9x10-5 TDT). Esta asociación fuereplicada en muestras independientes obtenidas en Inglaterra(661 controles, 515 casos) y Alemania (736 controles, 736 casos).No se lograron obtener cSNPs adicionales que expliquen estaasociación por re-secuenciación completa de la región génicainvolucrada. El nuevo alelo de susceptibilidad muestra unainteracción estadística con otras variantes previamenteinvolucradas con EC en el gene CARD15 (p=0.046, prueba deBreslow-Day). La función hipotética del gene portador de lavariante descubierta en este estudio sugiere que los afectadospresentan una protección disminuida contra la invasiónintracelular de bacterias en células del epitelio gastrointestinal.Nuestros resultados demuestran que la utilización de un juegoexhaustivo de cSNPs puede agilizar la identificación directa devariantes genéticas de susceptibilidad para enfermedadesmultifactoriales.

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA EN MÉXICO DEPOLIMORFISMOS EN GENES DEL METABOLISMO DEFOLATOS.

Silva Zolezzi Irma1, Alfaro Luis Alberto1, Contreras Alejandra1,Estrada Jesús1, Goya Rodrigo1 y Jiménez Sánchez Gerardo1.1Instituto Nacional de Medicina Genómica, México.

La hiperhomocistinemia y la deficiencia de folatos son factoresde riesgo para malformaciones congénitas, complicaciones delembarazo, enfermedades cardiovasculares, desórdenespsiquiátricos y cáncer. Diferentes estudios, han encontradoasociaciones entre estas condiciones con polimorfismos de unsolo nucleótido (SNPs) en genes que codifican para enzimas dela vía de homocisteína dependiente de folatos y para otrasproteínas del metabolismo de folatos. Dada la interacción entreel metabolismo de homocisteína y folatos se espera quecombinaciones particulares de polimorfismos en genesrelacionados a estas vías, modifiquen la susceptibilidad a diversascondiciones clínicas. Con excepción del SNP 677C>T del genMTHFR, las asociaciones observadas en diferentes poblaciones

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no han sido replicadas o han presentado resultadoscontroversiales, lo que indica la necesidad de realizar estudiosde asociación para analizar la contribución de estas variantes enpoblación mexicana. En este estudio se evaluó la distribucióngeográfica en México de las frecuencias alélicas y genotípicasde 8 SNPs previamente asociados a diversos fenotipos en 7genes del metabolismo de folatos: MTHFR, MTR, MTRR,

MTHFD1, TCN2, FOLH1 y SLC19A1. Para realizar el estudio seutilizaron muestras de sangre total de ~1100 individuos depoblación abierta de 6 regiones del país (Guanajuato, Guerrero,Sonora, Veracruz, Yucatán y Zacatecas). El DNA genómico seextrajo del paquete de células blancas por métodos estándar.Posteriormente, se genotipificaron con TaqMan®, dos SNPsfuncionales del gen MTHFR 677C>T (A222V, rs1801133),1298A>C (E429A, rs1801131); y un SNP funcional de cada unode los siguientes genes: MTR 2756A>G (D919G, rs1805087),MTRR 66A>G (I22M, rs1801394), MTHFD1 1958G>A (R653Q,rs2236225), TCN2 776G>C (R259P, rs1801198), FOLH1

1571C>T (Y75H, rs202676) y SCL19A1 80G>A (5’-UTR,rs1051266). En todos los casos se evaluó el equilibrio de Hardy-Weinberg y se analizaron diferencias en frecuencias alélicas ygenotípicas entre poblaciones utilizando un análisis de C2. Lasfrecuencias promedio de los 8 alelos y genotipos asociados afenotipos de los SNPs analizados en la población mexicana, asícomo el rango observado en los 6 estados son los siguientes: 1)MTHFR 677C>T, T 0.501 (0.428-0.572) y TT 0.246 (0.186-0.332);2) MTHFR 1298A>C, C 0.143 (0.077-0.256) y CC 0.028 (0.006-0.073); 3) MTR 2756A>G, G 0.169 (0.163-0.191) y GG 0.030(0.006-0.049); 4) MTRR 66A>G, G 0.237 (0.147-0.330) y GG0.067 (0.038-0.118); 5) MTHFD1 1958G>A, A 0.577 (0.468-0.626)y AA 0.334 (0.207-0.392); 6) TCN2 776C>G, G 0.338 (0.289-0.351) y GG 0.115 (0.082-0.157); 7) FOLH1 1561T>C, C 0.263(0.237-0.302) y CC 0.053 (0.028-0.087); 8) SLC19A1 80A>G, A0.423 (0.409-0.443) y AA 0.219 (0.159-0.207). En el caso deMTHFR las frecuencias alélicas y genotípicas obtenidas para losSNPs analizados son similares a algunas reportadas previamenteen población mexicana, 677C>T, T (0.43-0.58), TT (0.170-0.357),y 1298A>C, C (0.147-0.280), CC (0.023-0.155). En conclusión,encontramos diferencias significativas en las frecuencias alélicasy genotípicas de SNPs en genes del metabolismo de folatos entrealgunos estados de la República Mexicana. Lo anterior subrayala importancia de analizar la distribución geográfica de estasfrecuencias para optimizar el diseño de estudios de asociacióncon estos SNPs en población mestiza mexicana.

ASOCIACIÓN DE POLIMORFISMOS EN GENES DELMETABOLISMO DEL FOLATO (MTHFR, CBS, MTRR YGCPII) Y RIESGO PARA DEFECTOS DE CIERRE DE TUBONEURAL EN YUCATÁN, MEXICO.

González-Herrera L, Rodríguez-Estrada L, Contreras-CapetilloS, García-Escalante MG, Pinto-Escalante D.Departamento de Salud Reproductiva y Genética. Centro deInvestigaciones Regionales. Universidad Autónoma de Yucatán.

Los defectos de cierre de tubo neural (DCTN) representan lasmalformaciones congénitas de mayor prevalencia en Yucatán(22.31 en 10,000). Polimorfismos en genes del metabolismo ytransporte del folato se han asociado como factores de riesgoque aumentan la susceptibilidad a DCTN. Se han incluido comogenes candidatos relacionados al folato, el MTHFR, MTRR, CBSy GCPII, ya que sus variantes alélicas muestran un riesgo mayorpara DCTN, así como gran variación étnica y poblacional. Dadala naturaleza interconectada de los genes del folato es posibleque combinaciones particulares de variantes genéticasinteractúen para aumentar la susceptibilidad a los DCTN. En esteestudio, se determinó la frecuencia de cinco polimorfismos:

C677T-MTHFR, A128C-MTHFR, ins68bp-CBS, A66G-MTRR yC1561T-GCPII, y se evaluó su asociación con el riesgo paraDCTN en Yucatán, México.Se llevó a cabo un análisis de asociación, incluyendo 108 reciénnacidos con DCTN, 147 madres y padres de ellos como casos, y120 sujetos control. Se aisló el ADN y se determinaron los cincopolimorfismos mediante PCR-RFLPs. Se compararon lasfrecuencias genotípicas y alélicas entre casos y controles y seobtuvieron valores de riesgo (OR, IC 95%) usando el paqueteestadístico EpiInfo 2000. Las distribuciones genotípicas en elgrupo control se ajustaron a las expectativas de Hardy-Weinbergpara los cinco polimorfismos (p>0.33). La frecuencia de lospolimorfismos C677T-MTHFR e ins68bp-CBS no mostródiferencia significativa entre casos y controles (p>0.05). En tantoque, la frecuencia del polimorfismo A66G-MTRR fuesignificativamente mayor en controles (48.8%) que en los casos(8.4%) (p<0.0001). La frecuencia de la variante A1298C-MTHFRdemostró distribución de acuerdo al genero, así como diferenciasignificativa en el grupo de madres (p= 0.009). El análisis de losresultados arrojó que el polimorfismo A1298C-MTHFR representaun factor de riesgo asociado con tener descendencia con DCTNúnicamente en el grupo de madres, mientras que el polimorfismoA66G-MTRR se asocia con los DCTN como factor de protecciónen todos los grupos estudiados. Así mismo, los polimorfismosC677T-MTHFR e ins68bp-CBS no se asocian con el riesgo parDCTN en la población de Yucatán.

HACIA UNA TERAPIA GÉNICA PARA EL ALCOHOLISMO:ESTRATEGIA Y AVANCE.

Sapag Amalia1, Ocaranza Paula1, Karahanian Eduardo2, LobosLorena1, Cortínez Gabriel1, Quintanilla María Elena3, TampierLutske3, Israel Yedy1,3.1 Laboratorio de Farmacoterapia Génica, Departamento deQuímica Farmacológica y Toxicológica, Facultad de CienciasQuímicas y Farmacéuticas, Universidad de Chile, 2 Facultad deCiencias de la Salud, Universidad Diego Portales, 3 Programade Farmacología Molecular y Clínica, Facultad de Medicina,Universidad de Chile. Santiago, Chile.

La vulnerabilidad al alcoholismo está determinada en un 60 %por factores genéticos. Algunos individuos están muy protegidosde la enfermedad por una mutación en el gen de ladeshidrogenasa aldehídica mitocondrial (ALDH2), enzima quedegrada el acetaldehído proveniente del etanol y lo oxida aacetato. El acetaldehído circulante es aversivo y causa rechazoal consumo de alcohol. Esta protección se repite en la terapiafarmacológica con disulfiram, un medicamento eficaz, pero tóxicoe inespecífico, que inactiva la ALDH2 por modificación covalente.Una alternativa promisoria para disminuir la actividad de la ALDH2es inhibir la expresión del gen de la ALDH2 por degradación obloqueo del transcrito, estrategia que hemos abordado por tresvías.Un RNA de antisentido que bloquea el mensajero en toda suextensión se administró a ratas a través de un vector adenoviralportador de un gen de antisentido para el mRNA de la ALDH2.Una única inyección (i.v.) del virus en ratas alcohólicas (cepaWistar, línea UChB) bajó la actividad de la ALDH2 hepática en80 %, elevó 6 veces el acetaldehído arterial al inyectarles alcohol(i.p.), y redujo el consumo voluntario de alcohol al 50% durante34 días. Por otro lado, hemos ensayado RNAs pequeñosinterferentes (siRNAs) y ribozimas en células en cultivo; ambosse unen a segmentos de menos de 20 nt del mRNA de la ALDH2.Un siRNA (dúplex de RNA que dirige la maquinaria celular adegradar el mRNA), disminuyó la actividad de la ALDH2 en 65 %al proporcionarse como tal, mientras que un plasmidio codificantede una horquilla precursora (shRNA) otorgó una disminución del

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52 %. En forma similar, la lipofección con plasmidios portadoresde genes de ribozimas de horquilla (RNAs que digieren el sustratopor acción autónoma) redujo la actividad de la ALDH2 en un 42% aparente (24 % debido al corte del sustrato, 18 % a un efectode bloqueo) que corresponde a una disminución del ~70 % de laactividad al considerar la vida media de la ALDH2 y la eficienciade la lipofección.En suma, estos resultados avalan continuar el desarrollo defármacos genéticos basados en disminuir la expresión del gende la deshidrogenasa aldehídica mitocondrial para tratar elalcoholismo.

EVALUACIÓN IN VITRO DE DNAZIMAS DIRIGIDASCONTRA ARNM DEL GEN E6 DE VPH-16.

Reyes-Gutiérrez, Pablo y Alvarez-Salas, Luis Marat.Laboratorio de Terapia Génica, Departamento de Genética yBiología Molecular, CINVESTAV, México.

El Virus de Papiloma Humano tipo 16 (VPH-16), es el agentemás común asociado al cáncer cérvico-uterino. Nuestro grupoha utilizado ácidos nucleicos terapéuticos para impedir laP

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les expresión de genes importantes para la supervivencia del VPH-

16. En el presente trabajo se ha evaluado el reconocimiento ydegradación del ARNm del gen E6 de VPH-16 mediado porenzimas de ADN (DNAzimas), las cuales son moléculas de ADNcatalíticamente activas que pueden reconocer y cortar ARNcomplementario. A partir de los prototipos de DNAzima 10-23 y8-17, se diseñaron y probaron en un sistema in vitro variasDNAzimas dirigidas contra ARNm del gen E6 de VPH-16. LaDNAzima 1023-434 fue capaz de reconocer de manera específicael blanco y promover un corte dentro de este. Un análisisbioquímico y genético de la actividad in vitro de 1023-434 permitióestablecer las bases requeridas para catálisis, hibridación con elblanco y dependencia de [Mg++]. Las características de 1023-434 difieren de la DNAzima 10-23 prototipo indicando que laadaptación a un blanco distinto altera la conformación de laDNAzima con su ARN complementario y afecta su actividad. Estosdatos son relevantes para elaborar criterios de diseño y permitiránel desarrollo de DNAzimas como agentes terapéuticos contra elcáncer cervical.

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InvestigaciónBásica

IB-01MEDICINA GENÓMICA: ¿EL FUTURO EN LA DETECCIÓNDE ENFERMEDADES?

Halabe-Bucay,Alberto1. Hospital Angeles de las Lomas, México

El desarrollo de nuevas tecnologías para la secuenciación deDNA ha dado como resultado la identificación del mapa genéticohumano y con esto el desarrollo inicial de la Medicina genómica,que tiene como base el conocimiento de las variaciones delgenoma humano para implementar recomendaciones individualesdirigidas a retrasar o evitar las enfermedades a las que se tienepredisposición genética; es necesario recordar que aunque estépresente un gen determinado en el genoma de un individuo, porejemplo el gen para hipertensión arterial, el gen para cáncer depáncreas o el gen para esclerosis múltiple, no necesariamentese tiene que expresar en la vida de un individuo. Los mecanismosde expresión genética son muy variados y aún desconocidos parala ciencia, existen factores que determinan la expresividad de ungen como factores nutricionales, factores metabólicos, factoresendocrinológicos, factores inmunológicos, factoresneurohumorales, factores membranales y de segundosmensajeros, factores ambientales, factores psicológicos, factoressociales, e incluso, factores culturales.En base a estos preceptos, la Medicina genómica debe considerarque la presencia de un gen en un individuo no lo sentencia apresentar la enfermedad que codifica dicho gen; para demostrareste hecho, convendría realizar secuenciación de DNA y mapeogenético en personas longevas o en cadáveres de pacientesfallecidos por alguna causa, y valorar si presentan los genes paradeterminadas enfermedades a las que pudieron estarpredispuestos y que no se hayan expresado durante su vida.

IB-02VARIACIONES ELECTRÓNICAS Y ESTRUCTURALES DE LACITOSINA DEBIDO A SU INTERACCIÓN CON AZUFRE.

Mollinedo-Rosado, Pamela1, Santamaría-Ortiz, Rubén1.1Instituto de Física, Universidad Nacional Autónoma de México,México Distrito Federal.

Cuando el azufre se convierte en un contaminante puede afectarimportantes procesos biofísicos y bioquímicos. En este trabajoinvestigamos la interacción de la citosina con azufre. Hemosencontrado dos lugares igualmente probables donde el azufrepuede enlazarse a la citosina. Los cambios en la energía, espectrovibracional, momento dipolar, poblaciones y distribuciones decarga, con respecto a la citosina sola, fueron cuantificados. Lamagnitud de estos cambios depende de la posición donde elazufre se enlaza a la citosina. Los cálculos fueron realizados deacuerdo a la versión Kohn - Sham de la Teoría de Funcionalesde la Densidad. Concluimos que es posible que el azufre,enlazado a la citosina, interfiera localmente en la formación depares de Watson - Crick y en el apilamiento de las bases nucleicasen las hélices de ADN o ARN.

IB-03EFFECT OF AGE ON ACETYLATOR PHENOTYPE IN WISTARRAT.

Lares-Asseff Ismael 1, Pérez Guillé Ma. Gabriela 2, ToledoAlejandra 2 , Camacho Angélica 2 Bradley Francisco 1.1IPN-CIIDIR Durango. Laboratorio de Farmacogenómica yBiomedicina Molecular. 2 Laboratorio de Farmacología yFarmacocinética. Torre de Investigación “ Dr. Joaquín Cravioto “.Instituto Nacional de Pediatría-SSA. México City.

Acetylation capacity during drug metabolism differs betweenspecies, gender and age groups. Objective:The purpose of thiswork was to determine variations in the acetylating phenotype(AP), in a longitudinal study, as a function of growth anddevelopment.Methods: Twenty male Wistar rats were studied. AP wasdetermined on days 21, 48, 114, 180, 457 and 780 with oral dosesof 30mg/Kg of sulphadiazine (SDZ) by urine collection. TheSchröeder and Vree methods were used to obtain SDZconcentrations both acetylated and not acetylated. Rats wereclassified as slow or fast acetylators in accordance with previouslyvalidated metabolic indicators.Results: Of the 20 rats phenotyped at 21 and 48 days of age, 18were slow and 2 were fast acetylators. As age and consequentgrowth progressed, changes in the expression of AP wereregistered. At 114 days, 16 rats were slow and 4 were fastacetylators; at 180 days, 12 were slow and 8 were fast; at 457days, 6 were slow and 14 were fast; and at 780 days, the 20 ratswere fast acetylators. Slow acetylation predominates at youngerages.Conclusions: The effect of growth and developmental progresson AP is evident and relates to previous reports of changes in AP,determined by age in animal and human models. The relevanceof changes determined by growth and development should beconsidered in rational drug management.Key words: Metabolism, Age, Rat, Acetylator Phenotype.

IB-04DETECCIÓN DEL VIRUS DE EPSTEIN BARR PORREACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA

Audirac-Chalifour Asride Stephanie1,2, Gutierrez-Rubio SusanAndrea1, Rosales-Gómez Roberto Carlos1, Mendizabal-RuizAdriana Patricia3, Suárez-Rincón Ángel Emilio4, Sánchez-CoronaJosé1, Morán-Moguel María Cristina1

1Centro de Investigación Biomédica de Occidente, DivisiónMedicina Molecular, IMSS; 2 Universidad Autónoma deGuadalajara, 3Doctorado en Genética Humana CUCS-UDG;4Hospital General Regional No 45, IMSS.

Introducción Se ha descrito la presencia del genoma del virusoncogénico de Epstein-Barr (VEB) en tejido mamario provenientede pacientes con cáncer de mama invasivo y se ha asociado conla agresividad del tumor. Debido a que el VEB puede ser uncofactor en el desarrollo de cáncer invasivo de mama, es derelevancia hacer este estudio en nuestra población.Objetivos Estandarizar un método de amplificación específicade dos regiones de ADN que corresponden a los genes gp200 yEBNA-2 del VEB para utilizarlo en el estudio de pacientes concáncer de mama de nuestra población. La primera región (gp200) sería utilizada para la detección del virus y la segunda(EBNA-2) para la tipificación. Material y métodos. Se utilizó ADN extraído de una muestra desangre de un paciente con infección por EBV como controlpositivo de la amplificación y los iniciadores denominados Gp1 yGp2 para el gen gp200 y E2p1 y E2p2 para el gen EBNA-2. Se

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estandarizó el método de RCP a partir del descrito en la literaturapara la amplificación del gen gp200. Se realizó una curva deMg+ y se utilizaron 12.5 pmol de cada iniciador por reacción, asícomo 1.25 U de Taq polimerasa. Los productos amplificadosfueron sometidos a una electroforesis en gel de poliacrilamida29:1 al 8% teñido con nitrato de plata. Para el gen EBNA-2 seestandarizó de la misma manera. Los productos amplificadosfueron sometidos a una electroforesis en gel de poliacrilamida29:1 al 6% con tinción de nitrato de plata.Resultados. Se obtuvieron los mejores resultados con unaconcentración de 4.5mM de MgCl2, para el gen gp200. Para elgen EBNA-2 el mejor rendimiento se obtuvo con unaconcentración de MgCL2 3mM.Conclusiones. La implementación de estas metodologías ennuestro laboratorio nos permitirá en un futuro establecer lafrecuencia de este virus en la población que presente cáncer demama y que tipo de VEB es el predominante.

IB-05EL GENOTIPO DE LA APOLIPOPROTEINA “E” ENHUICHOLES, MESTIZOS Y EN ENFERMOS CONALZHEIMER.

Rosales Gómez RC1,2, Aguilar Aldrete M3, Cacavelos R4,Sandoval Ramírez L5, Gutierrez Rubio S1,2, Rodríguez Vega M3,Moran Moguel M1.

1División de Medicina Molecular, Centro de InvestigaciónBiomédica de Occidente. 2Doctorado en Genética Humana,Centro Universitario de Ciencias de la Salud, Universidad deGuadalajara. 3Departamento de Salud Pública, CentroUniversitario de Ciencias de la Salud, Universidad deGuadalajara. 4Euroespes 5Laboratorio de Bioquímica 4, Centrode Investigación Biomédica de Occidente.

Introducción: El alelo E4 de la Apolipoproteina E (APOE) ha sidoconsiderado un factor de riesgo para la demencia Alzheimer (DA)especialmente en demencia de inicio tardío. La DA es la terceracausa de muerte en países desarrollados. En México estáenfermedad se está convirtiendo en un nuevo problemaepidemiológico. El estudio del genotipo de la APOE en nuestrapoblación permite obtener información básica sobre ésteproblema.Objetivo: se determinó el genotipo de la APOE en pacientes conDA, y dos grupos controles huicholes y mestizos con el fin decomparar las frecuencias con los casos.Material y Método: Se obtuvo el DNA de 40 pacientes con DA,45 mestizos y 57 Huicholes. Los genotipos fueron identificadospor PCR y Hha I digestión en gel de poliacrilamida al 20% teñidocon nitrato de plata.Resultados: La frecuencia de alelos fueron: para el grupo demestizos E2=0.04; E3=0.84 y E4=0.12 para los Huicholes:E2=0.05; E3:0.76 y E4:0.19; Tarahumaras: E2=0, E3=0.79 y E4:0.21 y de los pacientes E2=0, E3=0.60 y E4=0.40. Conclusión:La distribución de los alelos en pacientes comparado con losgrupos control muestran una significante diferencia. Ladistribución de alelos entre controles fue diferente y estos congrupo de casos, el alelo. El alelo más frecuente en controles fueE3 y en casos fue el alelo E4. Llama la atención que el alelo E2considerado como protector de demencia fue superior en el grupocontrol de Huicholes.

IB-06DETECCIÓN DE LA DUPLICACIÓN GÉNICA DE PMP22MEDIANTE ELECTROFORESIS CAPILAR Y DIAGNÓSTICOINTEGRAL DE CHARCOT-MARIE-TOOTH 1A ENPACIENTES MEXICANOS DEL INSTITUTO NACIONAL DEREHABILITACIÓN.

Hernández-Zamora, Edgar1, Arenas-Sordo, María de la Luz1,Escobar-Cedillo, Rosa Elena 2, González-Huerta, Norma Celia1,Leyva-García Norberto1, Maldonado-Rodríguez Rogelio3.1Servicio de Genética. 2Servicio de Electrodiagnóstico. INR.3Departamento de Bioquímica, ENCB, IPN.

Antecedentes: La enfermedad de Charcot-Marie-Tooth (CMT) esel desorden hereditario más común del sistema nervioso periféricohumano, con una prevalencia de 1 en 2500. Presenta atrofiamuscular peronea y pie cavo. El subtipo más frecuente CMT1Acon una trasmisión autosómica dominante está asociado, en lamayoría de los casos con una duplicación en tandem de 1.5 Mben 17p11.2-p12, que codifica para la proteína PMP22. Laseveridad de la enfermedad varía entre pacientes, aún dentrode la misma familia.Objetivos: Los objetivos de este trabajo fueron identificar laduplicación del gen PMP22 por medio de la amplificación delexón 2 de PMP22 y electroforesis capilar en pacientes con CMTdel INR y realizar un estudio integral que incluyó aspectos clínicos,electrofisiológicos y moleculares.Material y métodos: Se realizó un estudio descriptivo yprospectivo, en el cual se incluyeron a 17 pacientes condiagnóstico clínico y electrofisiológico de CMT del INR. Para elestudio de la duplicación se amplificaron simultáneamente el exón2 (155 pb) de PMP22 y el exón 51 de distrofina (388 pb), comocontrol interno, en una reacción de PCR múltiple y fueronanalizados mediante electroforesis capilar (EC) en un ABI PRISM310 Genetic Analyzer.Resultados: Mediante EC capilar encontramos que en el controlnegativo el pico correspondiente al exón 51 fue mayor que el delexón 2 de PMP22, como esperábamos; en contraste, el controlpositivo para CMT1A y las muestras de pacientes con laduplicación, presentaron un pico mayor que correspondía al exón2. Detectamos en seis pacientes la duplicación, y fueroncorroborados mediante FISH.Conclusiones: Por lo anterior concluimos que nuestros resultadosnos permiten asegurar que la electroforesis capilar es un métodofácil y confiable para detectar la duplicación del gen PMP22, yque es fundamental realizar un estudio integral que incluyaaspectos clínicos, neurofisiológicos y moleculares en pacientesCMT1A para establecer un diagnóstico correcto.

IB-07FENOTIPIFICACIÓN MOLECULAR DEL PROCESO DEREPARACIÓN EPITELIAL EN RATONES TRANSGÉNICOSBK6-E6/E7: P53 Y PRB COMO POSIBLES BLANCOSTERAPÉUTICOS EN REGENERACIÓN DE HERIDAS.

Bonilla-Delgado José1*, Valencia-García Concepción2, Ocádiz-Delgado Rodolfo1, Cruz-Colin José Luis1, Gariglio-Vidal Patricio1

y Covarrubias-Robles Luis2.1 Centro de Investigación y de Estudios Avanzados del InstitutoPolitécnico Nacional (CINVESTAV-IPN), 1* Programa de Maestríadel Departamento de Genética y Biología Molecular, (CINVESTA-IPN), 2 Instituto de Biotecnología de la Universidad NacionalAutónoma de México (IBT-UNAM).

La piel, dentro de sus múltiples funciones, es ante todo unabarrera protectora contra el medio ambiente, y por tal motivo,cualquier ruptura debe ser rápida y eficientemente reparada. Paralograr esto, el sellado de una herida se divide en tres fases: 1)Inflamatoria, 2) De formación de tejido y 3) De remodelación detejido. No obstante, si alguna de estas tres fases es deficiente oexcesiva se generan distintos tipos indeseables de cicatrizaciónque a menudo afectan el estilo de vida de millones personas entodo el mundo. Partiendo de un trabajo previo en ratonestransgenicos en el que reportamos el efecto de los oncogenes

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E6 y E7 (Que inactivan a las proteínas p53 y pRBrespectivamente) sobre el ciclo del folículo piloso (1), y de losexperimentos de Vollmar B. el cual reporta que la inhibición parcialde p53 mediante PFT- puede mejorar considerablemente elsellado de una lesión (2), nuestro grupo se interesó en el efectoque los oncogenes E6 y E7 puedan tener durante el proceso deregeneración de heridas profundas cuando se expresan bajo elcontrol del promotor bovino de la citoqueratina 6b (bK6-E6/E7).Nuestros resultados demuestran que los oncogenes E6 y E7tienen el efecto no sólo de generar una epitelización aceleradamediante el aumento de células de amplificación transitoria (TAs),sino que además, la expresión de E6 y E7 disminuye tan prontocomo la expresión de la citoqueratina 6b se apaga(aproximadamente 2 semanas post-herida). Nuestros resultadossugieren que p53 y pRb podrían ser blancos potenciales paramejorar considerablemente el proceso de sellado de una herida.

IB-08ESTUDIO DE ASOCIACIÓN DE POLIMORFISMOS DE UNASOLA BASE (SNPS) EN GENES CANDIDATOS CAPN10,IRS-1 Y PPAR-GAMA A DIABETES TIPO 2 EN POBLACIÓNMEXICANA.

García-Fajardo Luz Verónica1,2, García Mena Jaime1, Wacher-Rodarte Niels2, de la Vega Francisco3, Kumate, Jesús, Cruz-López Miguel2.1Departamento de Genética y Biología Molecular. CINVESTAV.i2Unidad de Investigación en Bioquímica. Hospital deEspecialidades. Centro Médico Nacional Siglo XXI. IMSS.3Applied Biosystems, Foster City California, USA.

México es un país en donde la Diabetes Tipo 2 (DT2) se haincrementado ya que el 7.8% de la población la padece. Tresgenes candidato y algunos de sus polimorfismos de un solonucleótido se han seleccionado para este estudio: El SustratoReceptor de Insulina 1 (IRS-1) y su SNP (Gly972Arg), que seasocia con una alteración en el transporte de glucosa. La proteasaCalpaína 10 (CAPN-10) en donde se encuentran los SNP 43 (G)y 44 (T) que se han asociado a un aumento en el riesgo depadecer DT2 en población México Americana. El Receptor-gamaActivado por Proliferador de Peroxisomas (PPAR-gama), el cualtiene un SNP (Pro12Ala) que se asocia a un aumento en lasensibilidad a insulina y una disminución en el riesgo de DT2 enotras poblaciones, sin embargo en México existen muy pocosestudios de genotipificación en los que se asocie a DT2 con genescandidato. Objetivo. Determinar el genotipo de los genesCAPN10, IRS-1 y PPAR-gama en una muestra de poblaciónmexicana de la Ciudad de México y establecer si existe unaasociación de estos genotipos y de una combinación de estosSNPs (cSNPs) al fenotipo de DT2. Materiales y Métodos. Seseleccionaron 577 pacientes con DT2 y 708 individuos sanos.Los participantes fueron sometidos a estudios bioquímicos ensangre periférica. Estos incluyen niveles de glucosa y perfil delípidos, así como mediciones antropométricas. Se clasificaronen dos grupos: Pacientes con DT2 e individuos sanos. Se realizóla extracción de DNA, se verificó su integridad y pureza y serealizó la detección de los genotipos correspondientes a cadagen por medio de PCR en tiempo real utilizando sondas TaqMan.Resultados.- El análisis estadístico reveló que existe asociacióndel SNP44 del gen CAPN10 al fenotipo DT2 (p< 0.05), mientrasque el SNP43 del mismo gen, el SNP Pro12Ala de PPAR-gamay el SNP Gly972Arg de IRS-1 no tuvieron asociación a DT2. LacSNPs 2212 también se asoció a este fenotipo y se presentóúnicamente en los pacientes con DT2. Conclusiones.- De maneraindividual no todos los SNPs se encuentran asociados a DT2pero cuando se encuentran formando una cSNPs como la 2212esta puede servir como un marcador de predicción para el

desarrollo de DT2 en la población mexicana de la Ciudad deMéxico.

IB-09EL CERDO PELÓN MEXICANO: UN POSIBLE MODELOANIMAL PARA EL ESTUDIO DE LA OBESIDAD HUMANA.

Camacho-Rea Maria del Carmen1, Bautista Rodríguez Marcos2,Arechavaleta Velasco Miguel 3, Spurlock Michael4, GutiérrezAguilar Carlos1, Herradora Lozano Marco Antonio1, AlonsoMorales Rogelio1

1 Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia-UNAM,2Laboratorio de Análisis Clínicos Jilotepec, 3Centro Nacional deInvestigación Disciplinaria en Fisiología Animal, INIFAP., 4 IowaState University.

El cerdo es un modelo importante en biomedicina debido a sussimilitudes fisiológicas y anatómicas con el ser humano. El cerdoPelón Mexicano (CPM) es una variedad local, el cual llega adesarrollar obesidad, característica que lo coloca como un posiblemodelo para el estudio de la obesidad y sus complicaciones. Elobjetivo de este estudio fue comparar las concentraciones demetabolitos y hormonas asociados a la obesidad entre CPM(n=12) y cerdos magros Landrace-Yorkshire (CLY) (n=14) desde1 mes hasta los 9 meses de edad. Se evaluaron concentracionesséricas de glucosa (GLU), colesterol total (CT), triglicéridos (TG),lipoproteínas de alta densidad, (HDL) lipoproteínas de bajadensidad (LDL) hormona del crecimiento (HC), leptina (LEP),insulina (INSU), ácidos grasos no esterificados (NEFAS) así comoel espesor de la grasa dorsal (EGD). Los resultados mostraronque los CPM tuvieron mayores concentraciones de CT (F=11.61;gl=1,13; P<0.05), TG (F=11.47; gl=1,13; P<0.05), LDL (F=9.38;gl=1,12; P<0.05), INSU (F= 39.78; gl=1,24; P<0.0001), LEP (F=8.08; gl=1,16; P<0.05) y NEFAS (F=10.19; gl=1,24; P<0.05). Sinembrago, no se encontraron diferencias entre genotipos en lasconcentraciones de GLU (F=0.05; gl=1,13; P>0.05), HDL (F=2.78;gl=1,13; P>0.05) y HC (F=0.61; gl=1,24; P>0.05). El perfil delípidos y las concentraciones de leptina detectados en los CPMson semejantes a los reportados en el ser humano y en otrosmodelos animales de estudio de la obesidad. A pesar del fenotipoobeso de los CPM, estos no presentan alteraciones en lasconcentraciones de glucosa lo que también ha sido observadoen seres humanos obesos. Finalmente, el incremento detectadoen las concentraciones de insulina podría tener un papelimportante en el desarrollo de la adiposidad del CPM. Estosresultados, junto con los estudios de expresión genética en tejidoadiposo que realiza nuestro grupo, constituyen los primeros pasospara determinar las bases genéticas y moleculares quedeterminan el fenotipo obeso del CPM así como establecer supotencial como modelo de estudio de la obesidad humana.

IB-10POLIMORFISMOS ECORI AND BGLII ASOCIAN CONPROTECCIÓN A METÁSTASIS EN PACIENTES MEXICANASCON CÁNCER DE MAMA.

Gutierrez Rubio S1,2, Mendizábal Ruiz A1, Rosales Gómez R1,2,Suárez Rincón A3, Arévalo Lagunas I3, Vázquez Camacho J4,Flores Martínez S1, Sánchez Corona J1, Morán Moguel MC1.1División Medicina Molecular. Centro de Investigación Biomédicade Occidente (CIBO-IMSS). 2Doctorado en Genética Humana,Centro Universitario de Ciencias de la Salud, Universidad deGuadalajara. 3Hospital de Ginecobstetricia, Centro MedicoNacional de Occidente. 4Unidad de Anatomía Patológica, CentroMedico Nacional de Occidente.

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La reducida expresión del gen NME1 ha sido descrita en célulascon alto potencial metastásico, observado en cáncer de mama,cáncer gástrico y melanoma maligno. Los polimorfismos bialélicosEcoRI y BglII no han sido estudiados en asociación conmetástasis de cáncer de mama. Objetivo: analizar lospolimorfismos EcoRI y BglII del gen NME1 en pacientes concáncer de mama. Materiales y Metodos: Se obtuvo el ADN de110 bloques de tejido de mama incluidos en parafina (70 casosde cáncer de mama: 23 con metástasis y 18 sin metástasis; y 41pacientes con enfermedad benigna) y 186 muestras de sangrede individuos de población general. Mediante PCR-RFLPdiseñado por nuestro equipo se realizó la tipificación de lospolimorfismos. Resultados. Los polimorfismos se encuentran enequilibrio Hardy-Weinberg. El genotipo polimórfico (3) de EcoRIes un factor protector (p<0.05), el genotipo (3) y el alelo (2)polimorficos de BgIII son un significativo factor de riesgo (p<0.05),las combinaciones de los genotipos 1/3 y 2/3 (EcoRI/BglII) sonun factor de protección (p<0.001), y el haplotipo 1-2 (EcoRI/BglII)es factor protector (p<0.01). No se consideró la pérdida deheterocigocidad, sin embargo, es de 13% para el gen NME1.

Conclusion. El polimorfismo EcoRI parece ser un factor protectory el polimorfismo BglII parece ser un marcador genético de riesgo,ambos para el desarrollo de metástasis. Encontramos unacombinación de genotipos (1/3) y un haplotipo (1-2) que confierenprotección para metástasis en la población Mexicana estudiada.

IB-11ANÁLISIS GENOTIPICO Y FENOTIPICO DE LAMETILMALONIL-COA MUTASA EN PACIENTES CONACIDEMIA METILMALÓNICA.

Méndez ST1,3, Vela M1, Belmont L1, Olivares Z1, Ibarra I2,Velázquez A2 y Flores ME3.1Unidad de Genética de la Nutrición, INP; 2Depto de MedicinaGenómica y Toxicología Ambiental; 3Depto. de Biología Moleculary Biotecnología, Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM

Introducción. La acidemia metilmalónica (AMM) es un error innatodel metabolismo debido a la deficiencia de la metilmalonil-CoAmutasa (MCM), una enzima de la matriz mitocondrial queisomeriza del metilmalonil-CoA a succinil-CoA. Se conocen 2fenotipos de esta enfermedad: mut- que implica disminución enla actividad de la enzima y el fenotipo mut0 cuando hay carenciade dicha actividad. Este método se realiza actualmente de formaindirecta. En el humano este gen se localiza en el cromosoma6p12-21.2, consta de 35 Kb conteniendo 13 exones, un transcritode 2,798 pb y una proteína de 750 aa. A la fecha se hanidentificado más de 180 mutaciones al rededor del mundo, siendounas cuantas las prevalentes en determinadas poblaciones, talescomo la japonesa (E117X), negros (G717V), caucásicos (N219Y)e hispanos (R108C).Objetivos. Identificar las mutaciones y la frecuencia en pacientesmexicanos diagnosticados con AMM, así como correlacionar elgenotipo con el fenotipo de los pacientes mediante la construcciónde las mutaciones y la determinación de la actividad enzimática.Métodos. Se obtuvo el DNA genómico de 18 pacientes con AMMy se realizaron las amplificaciones por PCR de todos los exonesde la MCM. Por otro lado, se están realizando mutagénesisdirigidas, incluyendo las mutaciones R108C, R616C y V136F. Lacuantificación de la actividad enzimática se realizará por HPLC.Resultados. A la fecha se han secuenciado 179 exones de untotal de 234 y se localizaron 9 mutaciones; su frecuencia alélicafue para la R108C (20%), R616C (6%), R228X (3%), V227NfsX16(3%), A631fQfsX17 (3%), N341KfsX20 (3%), R694W (3%),c.385+3insTAAGGGT (3%) y V136F (3%), siendo ésta última unamutación nueva. El gen MUT se obtuvo por RT-PCR a partir deRNA total de una muestra control. Se está utilizando un plásmido

para hacer las construcciones y producir por mutagénesis dirigidalas mutaciones antes descritas y expresarlas en E coli paracuantificar la actividad enzimática de las proteínas mutantesutilizando la técnica de HPLC.Conclusiones. De 9 mutaciones que se identificaron, 8 ya seencuentran reportadas. Al igual que en el trabajo reportado porWorgan en 2006, en nuestra población encontramos que lamutación R108C es la que se encuentra con mayor incidencia(en el 20% de los alelos).

IB-12ESTUDIO PRELIMINAR EN GENES MODIFICADORESRELACIONADOS CON LA EXPRESIVIDAD VARIABLE ENUN GRUPO DE PACIENTES MEXICANOS CON FIBROSISQUÌSTICA.

Chávez-Saldaña Margarita1, Carnevale-Cantoni Alessandra2,Lezana-Fernández José Luis3, Villarroel-Cortés Camilo1,Yokoyama-Rebollar Emiy1, García-de Teresa Benilde2 , OrozcoLorena 4.1. Laboratorio de Biología Molecular INP, 2. CoordinaciónNacional de Medicina Genómica ISSSTE, 3. Departamento deNeumología, Hospital Infantil de México, 4. Laboratorio deGenómica de Enfermedades Multifactoriales, INMEGEN.

Introducción. La fibrosis quística (FQ) es la enfermedadautosómica recesiva más frecuente en la población caucásica.Las manifestaciones clínicas de la FQ pueden variar desde laesterilidad primaria hasta la afección pulmonar grave, coninsuficiencia pancreática y desnutrición que pueden llevar alpaciente a la muerte. Los estudios de correlación genotipo-fenotipo muestran que la función pancreática correlacionadirectamente con el genotipo, mientras que las otrasmanifestaciones varían en pacientes con el mismo genotipo eincluso entre hermanos que comparten el mismo ambiente. Porlo que se postula que existen otros factores genéticos que noson los directamente responsables de la enfermedad, pero queinfluyen sobre su gravedad. Estudios recientes documentan laexistencia de genes modificadores en FQ como TNF-alfa1, MBL,alfa 1-AT, alfa1-ACT, beta-2AD, IL-10, entre otros.Objetivos. 1) Determinar las frecuencias de las variantes alélicasen los genes potencialmente modificadores TNF alfa, IL-10, MBL,beta-2AD, alfa1-AT y alfa1-ACT en un grupo de pacientesmexicanos con FQ. 2) Determinar la asociación de los genesalfa1-AT y alfa1-ACT con la afección pulmonar de los pacientescon FQ. Material y Métodos. DNA genómico de 34 pacientes congenotipo CFTR, TAQMAN Universal PCR Master Mix, Amplitaqpolimerasa (Applied Biosystems), Enzimas de restricción AluI,TaqI, DdeI y BstNI (Biolabs). Se realizó el análisis dediscriminación alélica en 34 pacientes con FQ mediante el métodode TAQMAN en los genes TNF-alfa1, IL10, MBL, beta-2AD, asícomo mutagénesis dirigida y RFLP´s en los genes alfa1-AT yalfa1-ACT. Se determinó la afección pulmonar mediante la mejormedición de FEV1, tipo de cultivo de secreciones bronquiales alingreso, edad del primer cultivo por P. aeruginosa, estado actualvivo o muerto. Se realizó el análisis estadístico para determinarla asociación de la afección pulmonar con los genes alfa1-AT yalfa1-ACT. Se consideró significativo un valor de p<0.05.Resultados. En un grupo de 34 pacientes con genotipo CFTR,se analizaron 13 variantes alélicas en los genes modificadoresya mencionados y se determinaron las frecuencias para cadauno de ellos. En la correlación de la afección pulmonar con lasvariantes alélicas de los genes alfa1-AT y alfa1-ACT se encontróhomogeneidad en cuanto a edad y género, y no hubo diferenciassignificativas para las variables de respuesta (determinación deFEV1, tipo de cultivo de secreciones bronquiales al ingreso, edaddel primer cultivo por P.aeruginosa, estado actual vivo o muerto).

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Discusión. Las frecuencias de las variantes alélicas en esteestudio son acordes a lo reportado en la literatura, tanto enpoblaciones similares a la nuestra como en población caucásica.En un estudio reciente del gen MBL en población general degrupos amerindios de Argentina y Perú, reporta frecuenciasalélicas para los alelos B, C y D de 42%, 3% y 0%. De igualforma, en población caucásica con FQ, la frecuencia de los alelosS y Z del gen alfa1-AT se reporta del 8% y 4%. El no haberencontrado relación de las variantes alélicas de alfa1-AT y alfa1-ACT con la afección pulmonar, puede deberse a la ausencia deinfluencia de estos genes o bien al reducido tamaño de muestrade nuestro estudio. Consideramos que es importante identificarlos genes que influyen en la afección pulmonar en estospacientes, lo que probablemente logre predecir la evoluciónclínica e individualizar el tratamiento.

IB-13APLICACIÓN DE VECTORES ADENOVIRALES PARA LAEXPRESIÓN TRANSITORIA DE GFP EN CULTIVOSPRIMARIOS DE CÉLULAS BIPOLARES DE RETINA.

Martínez-Delgado, Gustavo1, Martínez-Dávila, Irma1, Miledi,Ricardo1 y Martínez-Torres Ataúlfo1.Instituto de Neurobiología, Universidad Nacional Autónoma deMéxico–Campus Juriquilla, Querétaro, México.

El estudio de las propiedades moleculares de neuroreceptores ycanes iónicos de células de retina se ha visto limitado debido ala baja eficiencia que ofrecen las técnicas convencionales detransfección de DNA. Como alternativa para lograr la introducciónde genes en células bipolares en cultivo se exploró la capacidadde vectores adenovirales. Los adenovirus además de ofrecer unvehículo potencial para la terapia génica, son también muyeficientes en la transducción de células de linaje neuronal. Porlo que el objetivo de este trabajo fue el expresar la proteína verdefluorescente (GFP), en neuronas bipolares en cultivo utilizandovectores adenovirales (Ad5).Ad5-GFP se propagó en células HEK 293, el sobrenadante deestos cultivos se utilizó para la transducción de células de retina,las cuales se obtuvieron de ratas de 9 días postnatales. Despuésde 7-10 días in vitro se observó la diferenciación de varios tiposneuronales y gliales. Las células bipolares mostraron su típicamorfología, con un soma del cual parten los procesos axonal ydendrítico. 24 h post-infección con Ad5-GFP, se observó pormicroscopía de fluorescencia que el 70-90 %90 % de la población celular expresaba GFP (Figuras a y b).Estos resultados presentan un importante paso para el uso devectores adenovirales marcados con proteínas fluorescentes parael estudio de neuronas bipolares de retina. Eventualmente estametodología se aplicará en el desciframiento de los mecanismosenvueltos en la señalización y tráfico de canales iónicos, de susposibles implicaciones fisiopatológicas y de como estos estudiosposteriormente pudieran llevar a la aplicación directa de vectoresadenovirales en terapia génica de la retina.

IB-14EL ALELO CYP2C19*2 ESTA ASOCIADO CON NIVELESALTOS DE COLESTEROL EN MUJERES Y EN PACIENTESCON DIABETES TIPO 2.

Los citocromos P450 (CYP) se encuentran entre los genes conmayor relevancia clínica debido a su papel sobre el metabolismode fármacos. Uno de los miembros de la familia 2C, el CYP2C19,es quizá el gen más variable entre poblaciones humanas debidoa la presencia de tres alelos principales: 1, 2 y 3. Este últimosolo esta presente en poblaciones orientales, por lo que seesperaría que también estuviera presente en la población

mexicana. Entre los sustratos de esta enzima se encuentran elomeprazol, la mefenitoína, el proguanil, algunas benzodiazepinasy el propranolol. Se sabe que la población mexicana en eloccidente presenta tres fenotipos: 6% metabolizadoresdeficientes, 90% metabolizadores extensos y 4% metabolizadoresultra-extensos. Sin embargo no se cuenta con datos de susgenotipos. Dado que la expresión del CYP2C19 depende deglucocorticoides y dada la alta prevalencia de la diabetes tipo 2en la población mexicana se planteo la posibilidad de que ambosestuvieran relacionados. Con este objeto se analizaron casi 700sujetos. La mitad pacientes con diabetes tipo 2 y la mitadvoluntarios sanos, contando con la firma de su consentimientoinformado. Se encontró una frecuencia del alelo CYP2C19*2 de10% entre los pacientes con diabetes tipo 2 y de 8% en losvoluntarios sanos. Ambos grupos se encontraban en equilibriode Hardy-Weinberg. El alelo CYP2C19*3 no se encontró enningún sujeto. No se encontró que ninguna de las combinacionesde los genotipos del CYP2C19 estuviera asociada con la diabetes.Se encontró una asociación significativa entre niveles altos decortisol y los portadores del haplotipo CYP2C19*2 en pacientescon diabetes tipo 2. Así mientras los pacientes hombres tienenun promedio de 200 mg/dL de colesterol en los homocigotossilvestres, los portadores del alelo 2 lo tienen en 216 mg/dL. Lasmujeres con diabetes tipo 2 tienen 195 mg/dL si son silvestres y212 si son portadoras del CYP2C19*2. En cambio no haydiferencias en los hombres sanos con un promedio de 195 mg/dL y adicionalmente las voluntarias sanas sin portar la mutacióntienen 198 mg/dL contra los 212 de las portadoras. En conclusión,este trabajo muestra que la frecuencias de los principales alelosdel CYP2C19 son relativamente bajas en comparación con otraspoblaciones, de hecho no se encuentra el alelo *3. El CYP2C19no esta asociado con la diabetes pero si con los niveles decolesterol en ambos géneros de los pacientes con diabetes tipo2 y en mujeres sanas.

IB-15EFECTO PROTECTOR DEL ALELO 2 DE APOE ALDESARROLLO DE ESQUIZOFRENIA EN UNA MUESTRA DEPARES DE HERMANOS AFECTADOS.

Tovilla-Zarate, Carlos Alfonso1, Camarena-Medellín, Beatriz2,Fresan, Ana2, Nicolini Humberto1.1 Posgrado en Ciencias Genómicas Universidad de la Ciudad deMéxico., 2 Laboratorio de genética del Instituto Nacional dePsiquiatría Ramón de la Fuente, México D. F.

La esquizofrenia se caracteriza por la presencia de delirios,alucinaciones, disminución de pensamiento, la efectividad, ydeterioro cognitivo. Esta enfermedad es muy común y afecta al1% de la población mundial, sin embargo, la etiología permanecedesconocida. Diversos genes son considerados de riesgo, entreellos el gen de la ApoE. La literatura sugiere que el alelo epsilon4 del gen de la ApoE es un factor de riesgo para el desarrollo dela esquizofrenia y que disminuye la edad de inicio de laenfermedad. Nosotros evaluamos la asociación de los alelos deApoE y esquizofrenia en una muestra de pares de hermanosafectados. En este estudio participaron 60 familias mexicanascon al menos dos pacientes con esquizofrenia. El diagnostico sebasó en los criterios diagnósticos del DSM-IV. También se incluyouna muestra control. El ADN genómico se extrajo de sangreperiférica mediante el método modificado de Lahirí. Las muestrasfueron amplificadas por técnicas de PCR, los productos de PCRfueron digeridos utilizando la enzima Cfo-I. Los fragmentos dedigestión fueron resueltos en geles de poliacrilamida al 6%,teñidos con bromuro de etidio. Cuando se analizaron lasfrecuencias de los diferentes grupos (probando, hermanosafectados, hermanos no afectados, control) no se encontraron

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diferencias por alelos (2=4.202, gl=6, p=0.6493) ni por genotipos(2=7.827, gl=9, p=0.5517). Sin embargo cuando dividimos lamuestra por genero se observo un exceso del genotipo 2/3 enlos hombres del grupo de hermanos no afectados (23.8%)respecto a probandos (12.8%) y hermanos no afectados (0%)Lo cual fue estadísticamente significativo por alelos (2=8.41, gl=2,p=0.0149) y por genotipos (2=8.010, gl=2, p=0.0182). En nuestrotrabajo no observamos una asociación del alelo 4 de ApoE y lasusceptibilidad al desarrollo de esquizofrenia, sin embargoobservamos que el alelo 2 podría estar asociado como un alelode protección al desarrollo de esquizofrenia.

IB-16IDENTIFICACIÓN DE ANTÍGENOS ASOCIADOS A LASMEMBRANAS DE VESÍCULAS DE HELICOBACTER PYLORI

Ayala, Guadalupe1, Mendoza-Hernández Guillermo2, Gutiérrez-Xicotencatl, Lourdes1, Fierros-Zárate, Geny1, Pedroza-Saavedra,Adolfo1, Chihu, Lilia 1, Chagolla, Alicia 3 y González de la VaraLuis G3. 1Instituto Nacional de Salud Pública, Cuernavaca, México,2Facultad de Medicina, Universidad Nacional Autónoma deMéxico, DF, México. 3CINVESTAV-INP, Irapuato, México.

Helicobacter pylori (H. pylori), patógeno humano consideradocomo el principal agente etiológico de enfermedades como lagastritis, la úlcera péptica y el cáncer gástrico. Algunos de losfactores de virulencia son secretados por H. pylori al medioextracelular causando el daño que lleva a la transformacióncelular promoviendo el desarrollo de las enfermedadesgastroduodenales graves. Se ha reportado que H. pylori liberaconstantemente vesículas de membrana externa (VME) y se haencontrado que la citotoxina vacuolizante (VacA) –uno de losprincipales factores de virulencia- está asociada a dichasvesículas. Se ha observado en cortes de biopsias gástricasobtenidas de pacientes infectados con H. pylori que las vesículaspueden unirse y aún entrar a las células epiteliales gástricas.Por lo que se ha propuesto que las vesículas podrían funcionarcomo un mecanismo alterno para la secreción de factores devirulencia. En este trabajo analizamos la composición de las VMEderivadas de aislamientos clínicos de H. pylori, utilizando elfraccionamiento, la secuenciación de Edman y la electroforesisde geles bidimensionales seguida de análisis por espectrometríade masas para la identificación y resolución de proteínas. Tambiéninvestigamos la frecuencia con la que los factores de virulenciapresentes en las vesículas fueron reconocidos por los sueros depacientes infectados por H. pylori. Entre las proteínas asociadasa las membranas de las vesículas que fueron identificadas: lacitotoxina vacuolizante VacA, alkil hidroperóxido reductasa(AhpC), flagelin A (FlaA), catalasa, factor de elongación (EF-G),factor de elongación Tu (EF-Tu), ureasa subunidades A y B. Laureasa, VacA y la catalasa fueron los antígenos más reconocidos.Nuestros resultados demostraron que algunos factores devirulencia son secretados por las VME producidas por H. pylori.Estos resultados apoyan la propuesta de que la liberación devesículas de membrana externa por H. pylori representa unmecanismo para transportar toxinas y antígenos bacterianos ala mucosa gástrica.

IB-17UN HAPLOTIPO DEL FACTOR REGULADOR DELINTERFERON 5 (IRF5) COMO FACTOR DE RIESGOGENÉTICO EN LA SUSCEPTIBILIDAD A DESARROLLARLUPUS ERITEMATOSO SISTÉMICO DE INICIO EN LA EDADPEDIÁTRICA.

Velázquez-Cruz R.1,2, Baca-Ruíz V.3, Salas-Martínez G.1,4,Espinosa-Rosales F.5, Morales-Marín M.1, Orozco L.1,4.1Instituto Nacional de Medicina Genómica, SS. 2Programa deDoctorado en Ciencias Biomédicas, UNAM. 3Hospital de PediatríaCentro Médico Nacional Siglo XXI, IMSS. 4Programa de Posgradoen Ciencias Genómicas, UACM. 5Instituto Nacional de Pediatría,SS.

El Lupus Eritematoso Sistémico (LES) es una enfermedadautoinmune compleja que se caracteriza por la activación de laruta del interferón (IFN) tipo I. Recientemente varios estudioshan identificado SNPs en el gen IRF5 (factor regulador deinterferón 5) asociados con la susceptibilidad a desarrollar LupusEritematoso Sistémico (LES) y artritis reumatoide (AR), enpoblación adulta. El gen IRF5 es un miembro de una familia defactores de transcripción, crítico para la producción de lascitocinas pro inflamatorias TNF-alfa, IL-12 e IL-6 siguiente a laseñalización del receptor Toll-Like (TLR), también es importantepara la transactivación del IFN tipo 1 y genes sensibles-IFN. Dadoel papel crucial propuesto para el gen IRF5 en la susceptibilidaddel LES, es necesario analizar la participación de este gen enpacientes mexicanos, por lo que el objetivo de este trabajo esdeterminar si los SNPs rs2004640 G/T y rs2280714 C/T del genIRF5, se encuentran asociados a la susceptibilidad paradesarrollar LES. Para evaluar esta asociación se realizó unestudio de casos y controles en una muestra de 250 pacientespediátricos mexicanos con LES y 314 controles mexicanos sanosno relacionados, pareados por sexo y origen étnico. Ladiscriminación alélica se llevó al cabo por el método fluorescentede 5’ exonucleasa (Taqman). La asociación de los SNP’s del genIRF5 fue analizada por la prueba de chi-cuadrada entre casos ycontroles. La construccion de haplotipos y la prueba dedesequilibrio de transmisión (TDT), se realizó con el programaHAPLOVIEW v3.2.El alelo T del SNP rs2004640 mostró una frecuenciasignificativamente mayor en los pacientes que en los controles,(63% vs 47%; P=2.98 x 10-7; OR=1.86, 95% IC= 1.47-2.37). Asímismo, también el alelo T del SNP rs2280714 mostró unafrecuencia más alta en los pacientes que en los controles; 66%vs 56% P=0.00083, OR=1.51, 95% IC=1.19-1.93). Con elpropósito de eliminar la posibilidad de estratificación, estosresultados fueron confirmados mediante un estudio de asociaciónbasado en familias (n=133 tríos), usando la prueba de TDT (IRF5rs2004640, P=0.014 y IRF5 rs2004640, P=0.05). Mediante elanálisis de haplotipos se logró documentar que aquel formadopor ambos alelos de riesgo (TT) muestra desequilibrio detransmisión en los casos analizados, (Transmitido:No Transmitido,82:51; P=0.007). Nuestros resultados apoyan la asociación deIRF5 con LES y muestran la identificación de un haplotipo deriesgo que podría jugar un papel importante en el LES de iniciotemprano en la población mexicana.

IB-18ASOCIACIÓN DE SNP’S DEL GEN CTLA4 EN PACIENTESPEDIÁTRICOS MEXICANOS CON LUPUS ERITEMATOSOSISTÉMICO.

Salas-Martínez G.1,2, Baca-Ruíz V. 3, Velázquez-Cruz R.1,Espinosa-Rosales F.4, Jiménez-Morales S.1, Orozco L.1,2.1. Instituto Nacional de Medicina Genómica, SS. 2. Programade Posgrado en Ciencias Genómicas, UACM. 3. Hospital dePediatría Centro Médico Nacional Siglo XXI, IMSS. 4. InstitutoNacional de Pediatría, SS.

El lupus eritematoso sistémico (LES) es el prototipo de lasenfermedades autoinmunes cuya prevalencia es de 1 en 2,000individuos, de los cuales del 15-17% se manifiestan durante la

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infancia. El LES se caracteriza principalmente por la formaciónde autoanticuerpos, complejos inmunes y pérdida de tolerancia.Existen evidencias de que el gen que codifica para el antígeno 4de linfocito T citotóxico (CTLA-4) cuya función es inhibir laactivación de las células T y el mantenimiento de la toleranciaperiférica tiene una participación importante en el desarrollo deesta entidad. A la fecha se han descrito 3 SNP’s que confierenriesgo para desarrollar LES. Con el objetivo de conocer sí SNP’sen el gen CTLA4 se encuentran asociados a LES en pacientespediátricos mexicanos, se analizaron tres polimorfismos

(-318C/T, 49A/G y CT60A/G). Se realizó un estudio de casos ycontroles en el que se incluyeron 245 pacientes con diagnósticode LES y 360 controles sanos no relacionados. Los SNP’s secaracterizaron por el método fluorescente de 5’ exonucleasa(Taqman). La comparación de las frecuencias de alelos,genotipos y haplotipos se realizó utilizando los programasEPIINFO y HAPLOVIEW v3.2. mediante la prueba de chi-cuadrada. La distribución de las frecuencias alélicas y genotípicasde los polimorfismos 318C/T y 49A/G no mostró diferenciassignificativas entre los pacientes con LES y los controles. Sinembargo el análisis del polimorfismo CT60A/G mostró unafrecuencia mayor comparada con los controles (47.35% vs41.67%, P = 0.05, OR=1.26 95% CI = 0.99-1.59). El haplotipoCGG fue más de dos veces más frecuente en los pacientesfemeninos comparado con lo reportado en la literatura (42.14%vs 20.3%, P= 0.03). Nuestros resultados sugieren que elpolimorfismo CT60A/G es un factor de riesgo para el desarrollode lupus eritematosos sistémico en población pediátricamexicana. Por otra parte, la discrepancia entre la frecuencia delos haplotipos observada en nuestro estudio y lo reportado en laliteratura podría ser explicado por la heterogeneidad genética ylas diferencias étnicas que existen entre las poblaciones.

IB-19ANÁLISIS DE LA EXPRESIÓN DEL GEN RB-1 A NIVEL DESU TRANSCRIPCIÓN A MRNA EN TUMORES DEPACIENTES AFECTADOS CON RETINOBLASTOMA.

Macías-Vega Miguel 1*, Ocadiz Delgado Rodolfo 2, PachecoEspinosa Cesar 2, Cruz Colín J. Luis 2, Gariglio Vidal Patricio2, Ridaura Sanz Cecilia 3, García Vázquez Francisco 3, OrozcoOrozco Lorena 4

1.-Instituto Nacional de Pediatría, Lab. Biología Molecular *, 2.-CINCESTAV-IPN, Lab. Genética y Biología Molecular, 3.- InstitutoNacional de Pediatría, Depto. Patología, 4.- Instituto Nacionalde Medicina Genómica, Laboratorio de Genómica deEnfermedades Multifactoriales.

Introducción En un proceso celular normal la expresión del genrb-1 es fundamental para controlar la proliferación celular de losretinoblastos, y cualquier mutación que altere la secuencia delgen puede inhibir su expresión y dar lugar a un procesoneoplásico en la retina (1), sin embargo existen reportes en laliteratura donde se han detectado mutaciones solamente en el15-20% de los pacientes con retinoblastoma(2,3,4). En un estudioprevio realizado en 48 pacientes del INP se detectaronmutaciones solamente en el 29% de los pacientes estudiados,incluyendo pacientes con antecedentes hereditarios y nohereditarios. Resulta interesante determinar si el gen rb-1 se estáexpresando en los tumores de aquellos pacientes que resultaronnegativos en el rastreo de mutaciones y que pudiesen estarasociadas al desarrollo del tumor tal y como lo indica la literatura.Por lo anterior, el objetivo de este trabajo fue analizar la expresióndel gen rb-1 al nivel de su transcripción a mRNA en los tumoresde pacientes sin mutaciones asociadas al desarrollo del tumor.Material Se captaron 68 muestras de tumores, todos fueronincluidos en parafina y 66 de ellos se incluyeron en alcohol al

70%. Métodos Para determinar un proceso de transcripciónpositiva, se sintetizó por transcripción reversa el cDNAcorrespondiente al mRNA del gen rb-1. De 68 pacientes captados68 se analizaron por RT-PCR in vitro Fig. a) y de ellas 26 seanalizaron por RT-PCR in situ Fig. b). Se consideró cada resultadocomo positivo si se lograba obtener cDNA por RT-PCR in situ oin vitro, o en ambas pruebas. A cada muestra de RNA extraídose le realizó como prueba de integridad la identificación del RNAribosomal 16s y 18s. Para evitar falsos positivos los vestigios deDNA se eliminaron mediante la aplicación de DNAsas antes decada procedimiento. Resultados Encontramos que sólo 32 de68 pacientes (47%) resultaron con una expresión positiva delgen RB1 lo cual resulta muy interesante si tomamos en cuentaque sólo el 29% de nuestros pacientes tienen una mutaciónasociada al gen rb-1 y que la incidencia de casos unilaterales nohereditarios que ocurren durante el primer año de edad es mayora lo reportado en la literatura para otras poblaciones.Conclusiones. Estos resultados junto con los de estudios previossugieren que en el 30% de nuestros pacientes el tumor sedesarrolla sin la intervención de mutaciones en el gen rb-1, locual podría explicar el comportamiento del tumor unilateral nohereditario. Una vía alterna para un funcionamiento erróneo delgen rb-1, podría estar asociada a los mecanismos que regulanla transcripción del gen rb-1. Sin embargo, aún es necesario realizar en las muestras positivas la búsqueda de laproteína pRB110 para poder confirmar la expresión positiva delgen rb-1 y así mismo explicar el comportamiento delretinoblastoma en pacientes que no tienen mutaciones asociadasal desarrollo del tumor.

IB-20LA ACTIVACIÓN HEPÁTICA INAPROPIADA DE PPARA_ SEASOCIA A DEFECTOS EN EL METABOLISMOENERGÉTICO DEL RATÓN ABCD3.

Silva-Zolezzi Irma1,2, Bradley Sean3, Valle David3,, Jiménez-Sánchez Gerardo2,3.1Programa Doctoral en Biomedicina Molecular, CINVESTAV,México. 2Instituto Nacional de Medicina Genómica, México.3McKusick-Nathans Institute of Genetic Medicine, Johns HopkinsUniversity, Baltimore, MD, USA.

Hasta ahora se han descrito 4 medios transportadores ABC enla membrana peroxisomal humana: ALD, ALDR, PMP70 y P70R,codificados por los genes ABCD1, 2, 3, y 4, respectivamente.Mutaciones en ABCD1 causan Adrenoleucodistrofía ligada al X,no se conoce la función y la asociación a enfermedad de losotros tres genes. Los ratones Abcd3-/- son viables; presentanglucógeno hepático reducido; aciduria dicarboxílica; oxidacióndeficiente de los ácidos grasos a-ramificados: fitánico y pristánico;y tienen un defecto en la termogénesis adaptativa. Proponemosque PMP70 contribuye al transportador peroxisomal de ácidosgrasos a-ramificados, en su ausencia, los ácidos fitánico ypristánico se acumulan, causando la activación inapropiada dePPARa_a y por lo tanto la activación del metabolismo energético.Esta hipótesis se apoya en la sobreexpresión hepática sostenidade blancos de PPARa en ratones Abcd3-/-. Para continuar elanálisis de los mecanismos moleculares relacionados a estefenotipo, realizamos un análisis de expresión en hígados Abcd3-

/- y controles con microarreglos Affymetrix âU74Av2. En esteexperimento identificamos cambios en la expresión >1.8X en 78genes que se sabe son regulados por PPARa, incluyendo aquellosque habíamos analizado por Northern blot. En total, encontramoscambios en la expresión de 209 genes, incluyendo 94incrementados y 115 disminuidos con respecto a los controles.Clasificamos estos genes por proceso biológico de acuerdo aGene Ontologyä. Del total de genes, 40 (19%) se relacionaron al

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metabolismo de lípidos, incluyendo a genes relacionados alanabolismo y catabolismo de ácidos grasos, formando el grupomás grande, en el cual la mayoría mostraron incrementos en elcambio de expresión; 28 (13%) se relacionaron a la respuestainmune, la mayoría mostrando decrementos en el cambio deexpresión, lo que es consistente con el conocido papel anti-inflamatorio de PPARa. Particularmente, llama la atención lareducción en la expresión de lipocalina 2 (Lcn2) y el componenteP del amiloide sérico (Apcs), pues previamente se ha reportadoincrementada en carcinomas hepatocelulares de ratonessometidos a exposiciones prolongadas a agonistas endógenosy sintéticos de PPARa. Estos resultados apoyan nuestra hipótesisque identifica como causa del severo fenotipo metabólico de losratones Abcd3-/-, a una activación inapropiada de PPARa_ queda lugar a la activación del metabolismo energético. Este modeloenfatiza las profundas y generalizadas consecuencias quepueden ocurrir a partir de un defecto monogénico.

IB-21COHORTE DE LA FRECUENCIA DE ANTIGENOSLEUCOCITARIOS DEL HUMANO (HLA) EN POBLACIONMEXICANA MESTIZA CON DERMATOPOLIOMISITIS

Delgado-Ochoa, M. D*; Núñez-Farfán, R*; Vidal-Saucedo, F*;Piña-Olvera,V* López-Morales, E*; Lugo Zamudio G. E.º* Laboratorio de Histocompatibilidad, º Servicio de Reumatologíadel Hospital Juárez de México, SSa.

Introducción: La dermatopoliomisitis (DM) es una enfermedaddel tejido conjuntivo que afecta a personas jóvenes, la extensióny la gravedad de las lesiones no guardan correlación con laamplitud y gravedad de la miositis, las principales afectacionesse presentan en piel, dolor muscular y articular, inflamación,telangectasias periunguele, las extremidades presentancontracturas, calcicosis cutánea, vasculopatía sistémica,infiltración celular, daño renal y pulmonar que en ocasiones tienesignificancia de malignidad. Los HLA están involucrados en estetipo de padecimientos ya que existen factores genéticos quecontribuyen a la etiología.Objetivo: Determinar los alelos de HLA más frecuentes enpacientes mestizos mexicanos con dermatopoliomisitis.que acudieron al Servicio de Reumatología del Hospital Juárezde México.Material y Métodos: Estudio de casos y controles donde seestudiaron a 23 pacientes con diagnóstico de dermatopoliomisitisde acuerdo a los criterios descritos por de Bohann y Peters,comparándolos con el grupo control de 100 personas sanas(pertenecientes al protocolo de donador vivo relacionado detrasplante renal). La determinación de HLA se realizo por latipificación de los siguientes alelos: Clase I 32 sueros y HLA 22sueros,. Análisis de datos: la distribución de la frecuencia deantígenos de HLA en los 23 pacientes fue computada ycomparada con la frecuencia de 100 sujetos controles, la pruebade X2 fue utilizada para la significancia estadística, se aplico latabla de contingencia 2x 2 con una P<0.05 y la prueba de Fisher’sexacta, el riesgo relativo (OR) de la DM con un intervalo deconfianza del 95%.Discusión: El análisis de la frecuencia de los 100 controlesconcordaron con los reportes de los Drs. Arellano y Gorodesky,donde los HLA frecuentes en mestizos mexicanos son A2, A28,B5 y B35, en el grupo de pacientes estudiados estadísticamentesignificativos fueron los alelos B37 y DR8 (17.3 y 8.68) y control(1 y 0) y el riesgo relativo fue de 4.97 y 5.67 respectivamente,comparándolos con estudio realizados en raza africana, japonesay caucásica donde han obtenido los HLA B8, DQ3 (Tezack 2002),DQ8 (Enas 2004), A24,B7,B52 (Furuya 1998) y

DQ1, DQ2,DQ3 (Reed 1999) respectivamente.Conclusión: Se puede sugerir que los alelos B37 y DR8 presentesen la raza mestiza mexicana tienen mayor riesgo relativo depresentar dermatopoliomisitis, así mismo se obtuvo que el aleloB35 pudiera ser un antígeno de protección para no desarrollarla enfermedad. El presente estudio es un primer reporte ya quese deberá realizar estudios por biología molecular para tenermayor conocimiento de la enfermedad en nuestra población.

InvestigaciónClínica

IC-01

POLIMORFISMO TTTA DEL GEN DE LA AROMATASA Y SURELACIÓN CON LA DENSIDAD MINERAL ÓSEA EN UNAMUESTRA DE MUJERES MEXICANAS.

Casas A. Leonora*, Gómez O. Rocío*, Magaña A. Jonathan*,Castro H. Clementina+, Rubio L. Julieta+, Diez G. Pilar*, y ValdésF. Margarita*.*Servicio de Genética, Instituto Nacional de Rehabilitación, SS;+Instituto de investigaciones Biomédicas, UNAM.

Antecedentes. La osteoporosis (OP) es un padecimiento que secaracteriza por reducción de la densidad mineral ósea (DMO) ydeterioro de la micro-arquitectura. La Organización Mundial dela Salud (OMS) considera que la OP es el segundo problema desalud pública mundialmente y calcula que 200 millones demujeres la padecen. La OP es el segundo problema de saludpública en México. Las etadísticas en México indican que el 27% de las mujeres mayores de 50 años tienen una masa óseanormal, mientras que el 57% cursan con osteopenia y el 10 %con OP, es decir que 5 millones de mujeres en nuestro país tienenOP. Este es un desorden multifactorial y poligénico y se haestimado que del 60 al 80% de la varianza en la DMO se debe alcomponente genético. Existe una cantidad considerable de genesinvolucrados en el control de la DMO y se han reportado un grannúmero de polimorfismos asociados con la OP. El gen de laaromatasa (CYP19) es uno de ellos. En él se ha identificado unmicrosatélite tetranucleótido (TTTA) en el intrón 4.Objetivo. Analizar la distribución de un polimorfismo microsatéliteen el gen CYP19 en una muestra de mujeres mexicanas con ysin OP.Material y Métodos. Se estudiaron 62 mujeres mexicanas conOP y 65 sin OP en columna vertebral. El diagnóstico se realizópor absorciometría dual de rayos X (Hologic 2000), según loscriterios establecidos por la OMS para definir la presencia oausencia de OP. De cada mujer se obtuvo DNA de leucocitos desangre periférica para el análisis molecular, realizado medianteelectroforesis capilar. Con el fin de analizar la distribución delpolimorfismo en población abierta, se analizaron sólo desde elpunto de vista molecular 414 individuos no relacionados entresí.Resultados. La media de edad fue de 63.77 y 49.12 años paralos grupos con y sin OP respectivamente. De acuerdo con loreportado, el porcentaje de pérdida de DMO aumenta con la edad.Se detectaron 7 alelos en las 3 poblaciones (A-, A, B, D, E, F yG). El alelo más frecuente en los tres grupos es el A- (44.35% enmujeres con OP; 44.62 en mujeres sin OP y 41% en poblacióngeneral). La frecuencia genotípica fue del mismo modo, similaren los tres grupos, siendo el más frecuente el A-,A-, con 23.07%.

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Las poblaciones se encuentran en equilibrio, de acuerdo a la leyde Hardy-Weinberg.Conclusiones. No se ha detectado asociación de alguno de losalelos o genotipos con la pérdida de DMO, a pesar de que estepolimorfismo ha sido relacionado con OP en diversas poblaciones(9 o menos repeticiones TTTA, se asocian con baja densidadmineral ósea en población Italiana y belga). El análisis enpoblación mexicana, es un reflejo de las diferencias genéticasque de forma natural existen entre razas. Las tres poblacionesse encuentran en equilibrio de acuerdo a la ley de Hardy-Weinberg, sin embargo, tienen una heterocigocidad (Hz) de 0.675(con OP), 0.6920 (sin OP) y 0.6775 (población general), lo cualindica que este marcador es poco polimórfico y que su distribucióndentro de los grupos analizados, no es suficientementehomogénea para utilizarse como marcador genético. Es necesarioincrementar la muestra de los grupos con y sin OP, para descartardefinitivamente o bien identificar posibles asociaciones.

IC-02DETECCIÓN DE POLIMORFISMOS DEL GEN DE LAPARAOXONASA (PON) POR PCR EN TIEMPO REAL Y SUASOCIACIÓN CLÍNICA CON PACIENTES HIDALGUENSESDIABÉTICOS TIPO 2 EN EL DESARROLLO DEATEROSCLEROSIS.

1Betanzos-Cabrera, Gabriel, 1Téllez-Cedillo Liliana, 2Cancino-Díaz, J. Carlos, 3Domínguez-López, Aarón y 4Miliar-García, Angel.1Área Académica de Nutrición, Instituto de Ciencias de la Salud,Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo, Abasolo 600Pachuca de Soto, Hidalgo 42000 México, 2Depto. de MicrobiologíaGral. Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, IPN. 3Depto. deGastroenterología, INCMNSZ y 4Sección de Estudios dePosgrado e Investigación, Escuela Superior de Medicina, IPN.

Introducción. La variación genética entre diferentes organismosde la misma especie hace posible entender por qué algunosindividuos son más susceptibles a ciertas enfermedades queotros. Resulta necesario entonces, estudiar la variación genéticaasí como metodologías nuevas que sean accesibles, rápidas yconfiables. La paraoxonasa (PON) sérica humana(arildialkilfosfatasa; EC 3.1.8.1) es una glicoproteína de 44 kDalocalizada sobre la superficie de lipoproteínas de alta densidad(HDL). La PON circula por la sangre unida a las apo AI y apo Jde las HDL, y su expresión se inhibe por estímulosproaterogénicos. Además del gene de la PON humana, seidentificaron dos genes designados como PON2 y PON3 ligadosal gen PON1 en el cromosoma 7q21-q22. Los dos polimorfismosson del tipo SNP y están en los codones 55 (L M) y 192 (Q R),ambos se han asociado con el incremento de riesgo deenfermedades cardiovasculares en pacientes diabéticos tipo 2.Objetivo. Determinar la distribución de polimorfismos de la PONen una población hidalguense y su asociación con la diabetestipo 2 y en el desarrollo de la aterosclerosis. Material y Métodos.El grupo de estudio se integró por 200 individuos de ambos sexos,que asisten a consulta en Centros de Salud del Estado de Hidalgo,no relacionados genéticamente; 100 diabéticos tipo 2 y 100 nodiabéticos. La detección de los polimorfismos se realizó por PCRen tiempo empleando sondas de hibridación. La actividad de laPON se realizó por un método semiautomatizado empleandoparaoxón como substrato El perfil lipídico se realizó mediantepruebas enzimático-colorimétricas y mediciones antropométricasfueron realizadas para determinar el índice de masa corporal(IMC), índice de cintura-cadera (ICC) y porcentaje de grasacorporal (% GC). Discusión y Conclusiones. El presente estudioes el primer reporte de las frecuencias de los polimorfismos enuna población mexicana y apoyan la hipótesis que lospolimorfismos están asociados con la diabetes mellitus tipo 2 y a

variables clínicas relacionadas con obesidad como factor de

riesgo para aterosclerosis.

IC-03DISPLASIA OSEA TIPO MAJEWSKI: A PROPÓSITO DE UNCASO EN EL HOSPITAL DE LA MUJER.

Sierra PF*,Hurtado HL*, Cid RJ*, ValleTJ*, Cácerez SJA*,Camacho QJ**, Calvario HG**.*Departamento de Genética, Hospital de la Mujer SSA, Puebla,pue. **Estudiantes de Medicina Benemérita UniversidadAutónoma de Puebla.

Las anomalías esqueléticas son únicas dentro de los defectos alnacimiento. Aunque muchas displasias son letales, algunosindividuos afectados sobreviven. El síndrome Costilla corta-Polidactilia tipo Majewski es una displásia ósea letal que secaracteriza por acortamiento de las extremidades, tòrax estrecho, costillas horizontales, anomalías cardiacas y renales ademásde labio y paladar hendido.Caso Clínico. Se trata de paciente recién nacido que fallece alnacimiento. Nace producto vía cesárea con polihidramnios ymultiples defectos detectados a las 32 SDG por Ultrasonido. Esproducto de la primera gesta de madre de 17 años y padre de 19años, sanos sin antecedentes de consanguinidad ni endogamia.A la EF presenta talla 30cm, peso 1630kg, cráneo dolicocéfalo,fontanela anterior amplia, hendiduras palpebrales horizontales,puente nasal amplio, labio y paladar hendido bilateral, tóraxasimétrico, genitales ambiguos, ano imperforado, extremidadescon acortamiento rizo-meso-acromélico, polidactilia y sindactiliabilateral .Conclusión. De acuerdo con las características clínicas yradiológicas se estableció el diagnóstico de síndrome de costillacorta – polidactilia tipo II o Majewski entidad autonómica recesivacon riesgo del 25% , cuyo diagnóstico se puede realizar durante

la etapa de la gestación.

IC-04SÍNDROME DE COCKAYNE. INFORME DE UN CASO.REVISIÓN DE LA LITERATURA.

Arenas-Sordo María de la Luzπ, Hernández-Zamora Edgar1,Montoya-Pérez Luis A.2, Aldape-Barrios Beatriz C.31Servicio de Genética Instituto Nacional de Rehabilitación, 2

Servicio de Cirugía Maxilofacial, Hospital Juárez de México,3Servicio de Patología Bucal Facultad de Odontología, UNAM.

Antecedentes: El Síndrome de Cockayne (CS) es un desordengenético con herencia autosómica recesiva, descrito porCockayne (1936). Los pacientes presentan detención delcrecimiento, talla baja, envejecimiento prematuro, anormalidadesneurológicas, fotosensibilidad, retraso en la erupción de losdientes primarios, ausencia congénita de dientes permanentes,macrodoncia parcial, atrofia de los procesos alveolares y cariesdental. Puede ser causado por mutación en CKN1 (ERCC8) y elERCC6, localizados en los cromosomas 5 y 10 respectivamente;originando: CS-A que tienen mutación en ERCC8 y CS-B conmutación en ERCC6, este último provoca sensibilidad a la luzultravioleta, secundaria a una deficiencia en la reparación de DNA.También se ha asociado el síndrome a mutaciones de los genesXPB, XPD y XPG.Objetivo: Dar a conocer las características del Síndrome deCockayne a través de un caso.

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Presentación del caso clínico: Paciente de 9 años con talla de94 cm, peso de 8.6 kg y perímetro cefálico de 42 cm. Hábitocaquéctico, problemas posturales con encorvamiento, así comomicrocefalia, cara ovalada, ojos hundidos, nariz delgada y afilada,falta de grasa en la cara, más notorio en el tercio medio y orejasgrandes que le confieren una apariencia de “pajarito”. Marcadafotosensibilidad en toda la piel expuesta al sol. Presenta retrasopsicomotor y mental. Intrabucalmente se aprecia higienedeficiente, gingivitis, caries cervical, hipoplasia dental, malaposición dentaria de los incisivos laterales superiores ymacrodoncia de los dientes centrales superiores.Radiográficamente ausencia congénita de los dientes: 14, 23,24, 33, 34, hipoplasia mandibular, atrofia de hueso y raíces cortas.Discusión: La posibilidad de correlación con una mutaciónpresente en el gen CS-B no es posible, aunque asumimos queésta permitió la existencia de la proteína que codifica este gen, apesar de no ser normal, ya que la ausencia de la mismaprovocaría un fenotipo mucho más grave.Conclusiones: La importancia de este caso radica en que es unpadecimiento poco frecuente y que entre otras, presentamanifestaciones bucales importantes. No se conoce cómo laproteína anormal del gen CS-B produce las alteracionesestomatológicas, ni muchas otras, por lo que pueden considerarsecomo futuras líneas de investigación. En los informes de laliteratura son pocos los casos que se presentan con CS.

IC-05EL SNP-43 G/G ASOCIADO A DIABETES TIPO 2 NOAFECTA EL MECANISMO DE SPLICING DE LOS EXONESADYACENTES NI LA ESTABILIDAD DEL PRE-MRNA DELGEN CAPN10.

López Orduña, Eduardo1,2, Kumate Rodríguez, Jesús3, CruzLópez Miguel2 y García Mena, Jaime1.1Departamento de Genética y Biología Molecular, CINVESTAV,2Unidad de Investigación Médica en Bioquímica, Hospital deEspecialidades, CMN siglo XXI, IMSS, 3Fundación IMSS.

La CAPN10 pertenece a la superfamilia de cisteina-proteasasactivadas por calcio, no lisosomales, intracelulares similares acalmodulina. El polimorfismo SNP-43 G/G de calpaina se haconsiderado un marcador de asociación y riesgo en poblaciónmexico-norteamericana. Análisis in vitro han demostrado que lapresencia del genotipo G/G aumenta expresión de CAPN10. Invivo esta variación, G/G, se ha relacionado con nivelesdisminuidos de RNAm en músculo esquelético y tejido adiposode sujetos sanos y en pacientes con DT2. Objetivo: estudiar larelación del genotipo G/G del SNP-43 y su probable contribucióna la alteración del splicing de CAPN10 y la estabilidad del mRNAde CAPN-10 en las líneas celulares 293T y Jurkat.Materiales y Métodos: en una muestra de 12 individuos residentesen la ciudad de México (6 individuos sanos y 6 individuos conDT2), se genotipificó el SNP-43 empleando la tecnología Taqman.El análisis de splincing se efectuó determinando la presencia yorden de los exones 3 y 4 por RT-PCR en linfocitos de sangreperiférica de individuos sanos y DT2. La vida media de CAPN10se midió en las líneas celulares 293T (SNP-43 G/G) y Jurkat(SNP-43 A/A) empleando RT-PCR en tiempo real.Resultados: Se demostró que el genotipo G/G no altera el splicingde los exones 3 y 4 de CAPN10 en sujetos sanos y DT2 y que lavida media de CAPN10 en ambas líneas celulares es de 8 horas.Conclusiones: la presencia del genotipo G/G de CAPN10 noafecta el orden de los exones 3 y 4 tanto en sujetos sanos comoDT2. La estabilidad de los mensajeros de CAPN10 no se veafectada por el genotipo G/G del SNP-43 al presentar una vidamedia igual a cuando está presente el genotipo A/A.

IC-06INCONTINENCIA PIGMENTI (IP2): INFORME DE UN CASOFAMILIAR CON VARONES AFECTADOS. REVISIÓN DE LALITERATURA.

Arenas-Sordo María de la Luzπ, Hernández-Zamora Edgar1,Montoya-Pérez Luis A.2, Aldape-Barrios Beatriz C.31Servicio de Genética Instituto Nacional de Rehabilitación, 2

Servicio de Cirugía Maxilofacial, Hospital Juárez de México,3Servicio de Patología Bucal Facultad de Odontología, UNAM.

Antecedentes: La Incontinencia Pigmenti (IP2) es unagenodermatosis descrita por Garrod y definida por Bloch,Sulzberger, Siemens y Bardach en 1920. Es un desordenectodérmico que afecta piel, dientes, ojos y al sistema nervioso.El nombre de IP2 describe la característica histológica de laincontinencia del pigmento melánico de los melanocitos en lacapa basal de la epidermis, y su consecuente presencia en ladermis superficial. El patrón de herencia clásico es dominanteligado al X, letal para el varón, sin embargo se refiereheterogeneidad genética.Objetivo: Dar a conocer las características de la IP2 a través deun caso clínico y la descripción general reportada en la literatura.Recordar que la hipodoncia puede ser un hallazgo sin mayorimplicación clínica , pero también puede acompañar a algúnsíndrome o enfermedad, por lo que el examen minucioso en estospacientes nos permitirá hacer un diagnóstico adecuado.Presentación del caso clínico: Paciente de 4 años 5 meses.Presentó cabello delgado y escaso, cara ovalada, cejas ypestañas escasas, nariz de puente alto, delgada, protrusión labial,cuatro dientes centrales cónicos y retraso en la erupción de losdemás; estrabismo, hipoacusia, defectos del lenguaje ydermatosis en tronco, piernas, pies, glúteos y cara, constituidapor presencia de ampollas, lesiones verrucosas yhiperpigmentadas en un patrón lineal. El padre presentó máculashipopigmentadas en ambas en las zona posterior de ambaspiernas. Los exámenes intraorales y radiográficos de ambosmostraron alteraciones diversas. Los cariotipos de ambos fueronnormales.Conclusiones: En el presente caso notamos que el padre presentala IP2 sin tener X supernumerarias y con antecedente de que sumadre también padece algo semejante. Puede considerarse quese trata de herencia autosómica dominante o de una mutacióndiferente del gen NEMO (NF-kappa-B essential modulator), a ladescrita clásicamente, que ha sido encontrada en algunosvarones afectados. En esta familia por referencia se mencionanotros varones afectados sin embargo, es necesario realizar elestudio molecular de estos pacientes.

IC-07ANÁLISIS DE REPETIDOS CAG EN EL GEN ATAXINA-2 ENPACIENTES CON ATAXIA ESPINOCEREBELAR TIPO 2 Y ENPOBLACIÓN MEXICANA.

Magaña-Aguirre Jonathan1,3 , Vergara Dolores2, Leyva Oscar1,Sierra-Martínez Mónica2, Gómez-Ortega Rocío3, Váldes-FloresMargarita3, Cisneros Bulmaro1.1Departamento de Genética y Biología Molecular, CINVESTAV-IPN, México D.F. 2Unidad de Investigación Genética, HospitalJuárez de México, México D.F. 3Departamento de Genética,Instituto Nacional de Rehabilitación, México D.F.

Las ataxias cerebelosas autosómicas dominantes (ACAD) sonclínica y genéticamente un grupo heterogéneo de trastornosneurodegenerativos que incluyen la distrofia progresiva delcerebelo, los ganglios basales, la corteza cerebral, la medulaespinal y los nervios periféricos y se caracteriza por la pérdida

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generalizada de la coordinación. La sintomatología esindistinguible entre los diferentes tipos de ataxia lo que haceimposible un diagnóstico clínico preciso; por lo tanto, solo esposible identificar cada una de ellas mediante técnicas de biologíamolecular. Con algunas excepciones, las mutaciones que causanlas ataxias son expansiones en el número de tripletes repetidospresentes en cada gen particular. La ataxia tipo II (SCA2) escausada por la expansión del triplete CAG presente en el gen deataxina 2.En el presente trabajo se analizó mediante las técnicas dereacción en cadena de la polimerasa (PCR) y electroforésiscapilar (EC) el número de repetidos CAG del gen de la ataxina 2en tres familias con sintomatología característica de SCA2. Apartir del diagnóstico molecular se confirmó la presencia de laSCA2 en diferentes miembros de dos de las familias analizadas,mientras que en la tercer familia se descartó la presencia de lamutación. En resumen, se identif icaron 15 individuosheterocigotos afectados que presentaron un alelo mayor de 36repetidos (entre 36 y 54 repetidos). Se estableció que un númeromayor de repetidos correlaciona con una mayor severidad de laenfermedad.Por otra parte, se analizó una muestra de 300 individuos norelacionados entre si de la población mexicana, las cuales nopresentaron ningún síntoma o antecedente de la enfermedad.En esta muestra se identificaron alelos entre 16 y 30 repetidos,de los cuales el alelo más frecuente fue el que presenta 22repetidos (frecuencia de 91.9%). Las frecuencias alélicas de lapoblación mexicana son muy parecidas a las de otras poblacionesde diferentes grupos étnicos.

IC-08TIPIFICACIÓN DEL GEN DRD4 EN PACIENTESMEXICANOS CON TDAH.

Martínez-Levy G., Briones-Velasco M., Gómez-Sánchez A.,Reyes E., Díaz-Galvis J., Aguirre-Samudio A., Ricardo J., Cruz-Fuentes C.Instituto Nacional de Psiquiatría “Ramón de la Fuente Muñiz”.

Antecedentes: Estudios previos han mostrado asociación entrediferentes polimorfismos y el trastorno por déficit de atención/hiperactividad (TDAH). Entre las asociaciones más consistentesestá la que relaciona al alelo de 7 repetidos localizado en el exón3 del gen receptor de dopamina D4 (DRD4) con TDAH. Esteestudio pretendió replicar esta asociación en una muestra depacientes mexicanos, población para la cual aún no existenreportes.Metodología: El grupo de pacientes se constituyó por 70individuos (64 hombres y 6 mujeres de entre 12 y 18 años), quecumplieron con los criterios diagnósticos para TDAH según elDSMIV-R, para establecer el diagnóstico se aplicó la entrevistadenominada BPRS-C (Brief psychiatric raiting scale for childrens).El grupo control se formó por 169 individuos (86 hombres y 83mujeres, entre 19 y 70 años), evaluados con el instrumento detamizaje para distress psicológico SCL

90-R (Symptom check List

90 revised).Se tomó una muestra de sangre a la población estudiada,extrayéndose el ADN mediante la técnica de Laihiri. Se tipificoel polimorfismo tipo VNTR del exón 3 del gen DRD4 por PCR.Se analizó la frecuencia de alelos y genotipos en los grupos decasos y controles empleando la prueba de Chi 2.Resultados: No se observaron diferencias significativas entre losgrupos en la frecuencia de alelos (chi 2= 1.35, g.l. 5, p=0.9) ygenotipos (chi 2= 9.28, g.l.= 11, p= 0.6) (tabla1). Por lo tanto nose detectó un incremento en la frecuencia del alelo de 7 repetidosen el grupo TDAH.

Discusión: Este es el primer estudio que reporta las frecuenciasalélicas y genotipos para el polimorfismo del exón 3 del gen DRD4en pacientes con TDAH de la población del DF. Este resultadoaunque negativo debe ser considerado como preliminar, siendonecesario ajustar algunos detalles del diseño (e.g.. incrementartamaño de muestra, parear con grupo control por edad y sexo).Agradecimientos: Este trabajo se pudo realizar con el apoyoparcial del proyecto de CONACYT SEP-2004-C01-46594 y eltrabajo realizado por la clínica de adolescentes y el departamentode psicología de la dirección de servicios clínicos del INP RF, asícomo todo el personal del laboratorio de genética psiquiátrica

del INP RF.

IC-09ESTUDIO MOLECULAR DEL GEN PMP22 EN CHARCOT-MARIE-TOOTH TIPO 1A.

Leyva-García Norberto1, González-Huerta Norma1, Bautista-Tirado Ma. Teresa 1, Hernández-Zamora Edgar 1, Kofman-EpsteinSusana 2,3, Cuevas-Covarrubias Sergio 2,3.1Servicio de genética, Instituto Nacional de Rehabilitación S.S.,2Departamento de Genética, Hospital General de México. 3UNAM,México D.F.

Las neuropatías hereditarias motoras-sensoriales o enfermedadde Charcot-Marie-Tooth (CMT), representan un grupo deenfermedades clínica y genéticamente heterogéneo que afectanlos nervios periféricos. Midiendo las velocidades de conducciónmotora (vcm) se pueden distinguir dos tipos principales: CMT1 yCMT2. CMT1 es una neuropatía desmielinizante caracterizadapor disminución de las vcm (<40 m/s), inicia generalmente en lasegunda década de la vida y su patrón de herencia es autosómicodominante. El subtipo CMT1A es debido a la duplicación del genPMP22 en 70-90% de los casos, mientras que 10-30% presentanmutaciones puntuales. El gen PMP22 se ubica en una región de1.5 megabases en el locus 17p11.2-p12, este sitio codifica parauna proteína de 22KDa que se expresa principalmente en elnervio periférico.Se analizaron 12 pacientes no relacionados con diagnósticoelectromiográfico, histopatológico y clínico de CMT1. Se procesóla sonda utilizando 100 ng de DNA genómico, amplificando laregión que incluía al exón 3 y 4 del gen PMP22 mediante PCR,utilizando DNA polimerasa rTth la cual amplifica segmentos de 5a 40 Kb con base en el programa XL del termociclador modelo9700 (PE). Los oligonucléotidos utilizados fueron el F del exón 3(5’tggccagctctcctaac3’) y el R del exón 4 (5’cctatgtacgctcagag3’)a una concentración de 0.1 mM, en un volumen final de 50 mL.Las condiciones fueron: desnaturalización inicial 94°C por 1 min.,seguido de 16 ciclos consistiendo de una desnaturalización a94°C por 15 seg., alineación a 63°C por 10 min., una segundaetapa de 12 ciclos con desnaturalización a 94°C por 15 seg.,alineación a 63°C por 13 min. y un ciclo final de extensión a72°C por 10 min, Posteriormente se realizó Nick translation paramarcar la sonda y se procedió a la Hibridación con métodosestándares. El método de secuenciación de los 4 exones serealizó en un analizador genético AB_310.Se observó duplicación en tres de los pacientes estudiadosmediante el análisis de FISH, lo que corresponde al 25%, lostres presentaban una disminución de las vcm por debajo de 20m/s y manifestaban una afección clínica grave. En los casos queno presentaron duplicación el análisis de secuencia mostró 3polimorfismos: G45C (Val15Val) en el exón 1, T159C (Cys53Cys)en el exón 2 y G471C (Arg157Arg) en el exón 4 de PMP22 loscuales no han sido reportados previamente. Los pacientes erandel sexo femenino y manifestaban una afección clínica menosgrave con vcm de 24 m/s en promedio. Estos hallazgos sugieren

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la necesidad de realizar el examen molecular en los casos con

CMT para ofrecer un asesoramiento genético adecuado.

IC-10

GENOMA MITOCONDRIAL HUMANO EN POBLACIÓNMEXICANAENCEFALOMIOPATÍA MITOCONDRIAL,ACIDOSIS LÁCTICA Y ACCIDENTESCEREBROVASCULARES (MELAS) CON LA MUTACIÓNA3243G EN EL GEN DEL ARNtLeu(UUR) DEL ADNMITOCONDRIAL EN EL HAPLOGRUPO B2NATIVOAMERICANO.

Delgado-Sáncheza, R., Zárate-Moysenb, A., Monsalvoc, A.,Herrerod, MD., Ruiz-Pesinid, E., López-Pérezd, MJ., Montoyad,J., Montiel-Sosaa dJF.

aFacultad de Estudios Superiores Cuautitlán, UNAM, México.bDepartamento de Neurología Pediátrica HGZ 194, InstitutoMexicano del Seguro Social (IMSS), México. c Facultad deEstudios Superiores Iztacala UNAM, México. dDepartamento deBioquímica y Biología Molecular y Celular, Universidad deZaragoza – Instituto Aragonés de Ciencias de la Salud, España.

Introducción. La encefalomiopatía mitocondrial, acidosis lácticay accidentes cerebro vasculares (MELAS) es uno de lossíndromes mitocondriales multisistémicos mejor definidos desdeel punto de vista clínico. Esta enfermedad se ha asociadopreferentemente con la mutación A3243G del ADN mitocondrial.Aunque los estudios descritos hasta ahora no han mostrado unaparticipación relevante de los haplogrupos mitocondrialeseuropeos en variables fenotípicas que poseen la mutaciónA3243G, no hay trabajos parecidos en haplogruposnativoamericanos.Caso Clínico. Presentamos un caso de MELAS en una pacientemexicana a quien, además del seguimiento clínico neurológico ylas pruebas bioquímicas y citológicas, se le realizó un estudiogenético de su ADN mitocondrial, que consistió en el análisis demutaciones puntuales asociadas a MELAS y posteriorsecuenciación del genoma completo para determinar elhaplogrupo al que pertenecía. Este estudio detectó la presenciade la mutación puntual A3243G en el paciente y familiaresrelacionados por vía materna (madre y 6 hermanos, todosasintomáticos). El haplogrupo resultó ser el nativoamericano B2y es portador de dos polimorfismos no sinónimos privados.Discusión. La mutación A3243G se encuentra en distintoporcentaje de heteroplasmia en los diferentes miembros de lafamilia siendo mayor en el paciente. El genotipo mitocondrialcorresponde al haplogrupo nativoamericano B2 y las mutacionesprivadas no parecen conferir ninguna modificación fenotípica enel síndrome MELAS.

IC-11DETECCIÓN MOLECULAR DE STAPHYLOCOCCUS

AUREUS METICILINO -RESISTENTES (SAMR) YSTAPHYLOCOCCUS COAGULASA NEGATIVOSMETICILINO-RESISTENTES (SCONMR) OBTENIDAS DEPACIENTES CON INFECCIONES.NOSOCOMIALES (IN).

Cabrera Roberto, Ramírez Maritoña, Morelos Rubén y MeléndezEnrique.Facultad de Medicina, UNAM, México.

Introducción: Los staphylococci: (SARM) y (SCoNMR) son lasetiologías mas frecuentes de las IN en los países desarrolladosy en desarrollo. La secuenciación completa de genomas de SAMRy de SCoNMR permite desarrollar nuevos métodos de diagnóstico

molecular con alta especificidad y sensibilidad. Objetivo:Detección de los genes coa (coagulasa) y mecA (resistencia ameticilina “ME”) por PCR dúplex en cepas clínicas de SAMR yde SCoNMR.Análisis in silico. En los genomas de SA MRSA252 y SA N315resistentes a ME, se búscaron las secuencias de nucleótidos(sq-nt) del gene mecA. Para el gene coa en SA NCTC8325,RF122, MSSA476 y 3 mas en TIGR-CMR por internet. Los genesse alinearon con CLUSTAL W. Las sq-nt seleccionadas seaplicaron al programa PRIMER3 y se obtuvieron los iniciadoresde PCR (Tm 50 ºC). Con el programa BLAST del NCBI secompararon con los genomas de SA y S. epidermidis (SE)ATCC12229 y RP62A, siendo iniciadores únicos a coa y mecA.Métodos: Previamente los 119 staphylococci de pacientes conIN se identificaron por “MicroScan” (MS), apoyado con coagulasa(CoT) y fermentación de manitol (MaT). La caracterización deSAMR y SCoN se hizó por: disco de cefoxitina (30 µg) (D-Cf),determinación de MIC´s a oxacilina (MC-Ox) (rango 0.5-4.0 µg/ml) y aglutinación con latex para la PBP2a (Lt). La PCR duplexse hizó con iniciadores: coa-1(5´-AACTTGAAATAAAACCACAA-3´)y coa-2 (5´TACCTGTACCAGCATCTCTA-3´) con amplicon de240 pb, mecA-1 ( 5´- ATGGCAAAGATATTCAACTA-3´) y mecA-2 (5´-GAGTGCTACTACTCTAGCAAAGA-3´) con un amplicon de458 pb.Resultados: De 119 cepas clínicas con PCR (coa), se confirmóel 82% (98) como SA y el 18 % (21) fue negativo al gen. El 95%(93) de 98 positivas para coa, se identificaron como SA por CoTy MaT. Estas 98 cepas de SA, se evaluaron para resistencia aME por 3 pruebas fenotípicas. La PCR mecA fue el “estándar deoro” de comparación de la sensibilidad y especificidad (SEN/ESP)de pruebas para detección de SARM en IN. La mejor SEN/ESPla dió D-Cf (97/87), enseguida MC-Ox (92/69) y por último Lt (66/90). Conclusión: El análisis genómico y experimental muestraque se pueden detectar de manera confiable y relativamenterápido las cepas de SARM y SCoN de IN y a la vezsimultáneamente se puede discriminar SA de los SCoN.

IC-12FACTORES DE RIESGO ASOCIADOS A ALTERACIONESMOLECULARES EN LEUCEMIA AGUDA INFANTIL.

Saavedra Herrera MV1, Leyva Vazquez MA1 , Terán PorcayoMA2, Rivera AB2 .1 Maestría en Ciencias Biomédicas, Laboratorio de BiomedicinaMolecular FCQB-UAG, México. 2 Instituto Estatal deCancerología “Arturo Beltrán Ortega”, Acapulco, Guerrero,México.

Resumen: Entre los factores de riesgo asociados a la leucemiaaguda (LA) encontramos a la predisposición genética, laexposición a radiaciones, a sustancias químicas , a tratamientosquimioterapéuticos y factores ocupacionales. Las translocacionescromosómicas son las alteraciones moleculares mejorcaracterizadas en la LA, las de mayor significancia pronósticason la t(9;22) , la t(12;21), la t(8;21) y la Inv (16), sin embargoéstas no se presentan en todos los pacientes por lo que esimportante identificar los factores asociados a dichas alteraciones.Objetivo: Realizar la detección de las translocaciones t(9,22),t(8,21), t(12,21) e Inv (16) en pacientes con LA infantil con elpropósito de mejorar el diagnóstico, y determinar si existeasociación entre la presencia de translocaciones y los factoresde riesgo presentes en la población como son: exposición aagroindustriales, solventes y antecedentes familiares de cáncer.Métodos: De Junio de 2005 a Junio de 2006 se captaron 40pacientes con diagnóstico de LA en el Instituto Estatal deCancerología “Arturo Beltrán Ortega”, se realizó RT-PCR paradetectar las translocaciones t(9,22), t(8,21), t(12,21) e Inv (16) a

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partir de sangre periférica y se aplicó una encuesta a los padrespara conocer los factores de riesgo presentes en la población.Resultados: Se observó presencia de translocaciones en el 17.5%de los pacientes, la frecuencia fue de 10% en el caso de la t(9,22),5% para la t(8,21), 2.5% para la t(12,21) y 0% para Inv (16), Encuanto a los factores de riesgo presentes en la población sedetectó , el 20% con antecedentes familiares de cáncer, 5% conantecedentes familiares de defectos genéticos, 50% conexposición a agroindustriales, 10% con exposición a solventes y5% con exposición a radiaciones, al realizar la regresión logísticapara detectar las asociaciones entre la presencia detranslocaciones y los factores de riesgo se detectó que lospacientes con antecedentes familiares de cáncer (RM=8, IC=1.06-60), con exposición a agroindustriales (RM=1.6, IC=0.15-17) ocon exposición a solventes (RM=4.7, IC=0.55-44), tenían unriesgo mayor de portar alguna de las translocaciones que sebuscaron en este trabajo.Conclusión: Se encontró una frecuencia aumentadan el caso dela t(9,22), se detectó un mayor riesgo de portar translocación enlos pacientes que presentaban antecedentes familiares de cáncer,exposición a agroindustriales y a solventes.Agradecimientos: al Dr. Guillermo Ruiz Argüelles por su apoyocon las técnicas moleculares.

IC-13POLIMORFISMOS EN LOS GENES ESR1 Y ESR2 Y SURELACIÓN CON LA DENSIDAD MINERAL ÓSEA EN UNGRUPO DE MUJERES MEXICANAS CON Y SINOSTEOPOROSIS.

Gómez-Ortega M.R., Magaña-Aguirre J.J., Casas-Avila L.,Castro-Hernández C., Rubio-Laightbourn J., Díez-García P. yValdés-Flores M.Instituto Nacional de Rehabilitación, Torre de Investigación,Departamento de Genética.

La osteoporosis (OP), es una enfermedad multifactorialdiscapacitante, caracterizada por la disminución de la densidadmineral ósea (DMO), la desorganización de la integridadesquelética y de la microarquitectura ósea y por el aumento dela susceptibilidad a fracturas. Según cifras de la OMS, la OP esel segundo problema de salud pública a nivel mundial. La OP esun desorden poligénico y diferentes y múltiples estudios enhumanos y en diferentes modelos animales han mostrado ungrado elevado de susceptibilidad genética con relación a estedesorden. Objetivos:Identificar la frecuencia de dos polimorfismostipo microsatélite (STR) en los genes ESR1 y ESR2 en unamuestra de mujeres mexicanas con y sin OP. Metodología: Seestudiaron 70 mujeres pre y postmenopáusicas con OP (63.1 ±11.06 años) y 70 mujeres pre y post menopáusicas sin OP (48.56± 13.58 años). La DMO fue evaluada mediante absorciotometríadual de rayos X (Hologic 2000) y tomando en cuenta los criteriosde la OMS. En cada caso, se obtuvieron muestras sanguíneas,se extrajo el DNA y se procedió al análisis molecular de lospolimorfismos. Finalmente, se realizó la determinación alélicamediante electroforesis capilar, empleando un analizador genético310. El análisis de genética poblacional se realizó mediante losprogramas Genetix, PopGen 32, Structure y Strat.Simultáneamente, se analizaron solamente desde el punto devista molecular, 500 individuos no relacionados (ambos sexos)con el fin de conocer las frecuencias de distribución alélica en lapoblación abierta. Resultados: En las poblaciones analizadas seencontraron 15 alelos diferentes para el ESR1 y 25 alelosdiferentes para ESR2. Las frecuencias de distribución alélica nomuestran diferencias significativas entre las poblaciones decasos, controles y la población abierta para ambos loci. Conrespecto a los genotipos, se encontraron cerca 90 genotipos

diferentes, de los cuales los más frecuentes para el gen ESR1fueron: EE, FD, FE, GE, HG, ND, NE, OD y PE, todos confrecuencias menores o iguales al 10%. En estos genotipos no seencontraron diferencias significativas entre los casos y loscontroles, salvo el genotipo ED, el cual presenta una diferenciasignificativa (P≤0.05), estando presente en los casos, pero noen los controles. Con respecto a ESR2, los genotipos másfrecuentes fueron: FE, OD (~14%) y NE, GD y FD (~10%), y losgenotipos que presentan diferencias significativas entre casos ycontroles fueron: HC y HF, los cuales se encuentran presentesen los controles, pero no así en los casos. Con respecto al análisispoblacional, se determinó que la muestra de la poblaciónestudiada no se encontraba en equilibrio con relación a la ley deHardy-Weinberg (Fis:0.00762 en alfa y 0.0436 para beta), lo quesugiere que existe una subestructuración en la poblaciónmexicana, la cual presenta por lo menos 3 subgrupos(confirmados por Structure). Finalmente, se buscó una posibleasociación entre los genotipos y fenotipos a pesar de estasubestructuración, esta se realizó mediante el programa Strat,el cual nos indicó que no hay ninguna relación aparente entrelos genotipos y la OP. Conclusiones: A la fecha, no hemosencontrado ninguna relación entre los diferentes alelos ygenotipos y la presencia de OP, sin embargo, los genotipos ED(ESR1) y HC y HF (ESR2) podrían presentar alguna asociaciónde pérdida y de protección respectivamente. Sin embargo, debidoa la subestructuración de nuestra población debemos considerarampliar el tamaño de muestra y analizar la asociación porsubgrupos. De existir una asociación está podría estarenmascarada debido a la propia subestructuración de nuestrapoblación.

IC-14COMBINATION OF GENETIC POLYMORPHISMS ANDSMOKER STATUS IN CARDIOVASCULAR RISK .

Stoll Mario1, Esperón Patricia1,2, Raggio Víctor1, LorenzoMariana1, Artucio María Clara1

1. Área Genética Molecular, Comisión Honoraria para la SaludCardiovascular, Montevideo, Uruguay. 2. Biología Molecular,Facultad de Química. Montevideo, Uruguay.

The goal of the study is to evaluate the clinical aplicability ofgenomic profiling in guiding preventive interventions in high riskpatients. Most genetic association studies in highly complexdiseases, like coronary artery disease, do not take into accountcombination of risk alleles of low additive effect in thedetermination of risk and genome-environment interactions. Asa result many single locus associations have not been replicatedgiving rise to controversial results. Several gene polymorphismspreviously associated with cardiovascular risk were determinedand the additive effect of different genotype combinations(genomic profile) and smoker status were tested.The study involved 172 patients of a high cardiovascular riskpopulation, selected by premature disease and familialaggregation of cardiovascular events according to a cualitativerisk score. Phenotypic data on cardiovascular risk factors andcardiovascular events were obtained from clinical records andinterrogatory. After informed consent, blood samples wereobtained, DNA extracted and genotyping performed forApolipoprotein E (Apo E) E2, E3, E4 and Angiotensin ConvertingEnzyme (ACE) insertion/deletion polymorphisms.Carriers of ApoE E4 allele have almost twice the frequency ofevents in all outcomes considered (revascularization, coronayartery disease, acute myocardial infarction and atherosclerosisin any vascular territory), compared with E3 homocygotes. A genedose and additive effect for higher risk alleles could be observed:for all variables studied ACE D/D genotype combined with ApoE

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E4+ raised risk significatively. For instance, 18% of patients ofgenotype ApoE E4+ and ACE D/D underwent revascularization;in contrast no one of ApoE E4- and ACE I/I patients neededmyocardial revascularization. Again a gene dose effect for higherrisk alleles was observed since 7% of patients of genotype ApoEE4- and ACE D/D or ApoE E4+ and ACE I/I required cardiacrevascularization.An interactive raise in risk was observed for individuals who smokeand carry these risk variants, especially ApoE E4: 26% ofindividuals ApoE E4- who don´t smoke had atherosclerosis inany territory versus 50% of ApoE E4- smokers, 42% of ApoEE4+ non smokers and 83% of ApoE E4+ smokers.ApoE E4 alelle was associated with a higher risk of developmentof CAD, myocardial infarction and need for revascularization. Thisassociation is stronger in patients with other risk genotypes (D/Dgenotype for ACE) and smokers. The combined informationderived from genomic risk profiles and classical risk factors couldbe used in preventive programs aimed at avoidance of morbi-mortalilty specially in young adults from high risk families forcardiovascular disease.

IC-15MOLECULAR BASIS OF FAMILIALHYPERCHOLESTEROLEMIA IN URUGUAY

Esperón Patricia1 2, Raggio Víctor1, Stoll Mario1

1. Área Genética Molecular, Comisión Honoraria Para la SaludCardiovascular, 2. Cátedra de Biología Molecular Facultad deQuímica. Montevideo, Uruguay.

Autosomal-dominant hypercholesterolemia (ADH) has beenidentified as a major risk factor of morbility and mortality for earlyatherosclerotic coronary vascular disease (CVD). Since 2001 webegan a pilot study of preventive cardiovascular disease in youngadults for the first time in Uruguay. All patients included wereclinically diagnosed with definite hypercholesterolemia using auniform protocol and internationally accepted criteria. All studysubjects provided written informed consent, and the study protocolwas approved by our institution’s ethics review board. DNAsamples from clinically diagnosed hypercholesterolemic patientshave been analyzed for the presence of LDLR gene mutationsand the APOB3500R mutation. All patients who tested negativefor the APOB R3500Q mutation, were routinely analyzed for thepromoter region, all exons and intronic boundaries of the LDLRgene after SSCP or direct sequencing.Results: we have found 8 different causative genetic variants inthe LDLR gene of probands. These variants were confirmed inother family members, both symptomatic and pre-symptomatic.In Uruguay, where there is a very heterogeneous population, it isunlikely that any of described mutations will be present at a highfrequency in ADH patients. Nevertheless, two family groupspresented the Lebanese mutation C2043A in exon 14 accordingto their christian-lebanese origin. The distribution of othermutations were: Afrikaner-1 and Padua-1 (exon 4), G1103>A(exon 8), T1352>C (exon 9), ins4 1384 (exon 10), and InsC2058(exon 14). Besides, we found 2 new mutations. The first is locatedat the promoter: A-141>C within the SP1 binding site; the secondis located at exon 14 as an insertion at C2058.If we consider a frequency of 1:500 for this disease, we cansuppose that about 6000 individuals would be carrier of FH inour country, that configure a group of high risk, sub-diagnosedand therefore not appropriately treated. This pilot program hasdemonstrated the usefullness of ADH patient identification and aNational Register will be developed.

IC-16

ESTUDIO DE ASOCIACIÓN ENTRE EL GEN DEL RECEPTORA DOPAMINA D4 (DRD4) Y EL TRASTORNO OBSESIVOCOMPULSIVO.

Camarena, Beatriz1, Loyzaga, Cristina1, Aguilar, Alejandro1,Weissbecker, Karen2, Nicolini, Humberto3.1Instituto Nacional de Psiquiatría Ramón de la Fuente, México,D.F., México; 2Tulane University Health Science Center, NuevoOrleans, US; 3Universidad Autónoma de la Ciudad de México,México, D.F., México.

Evidencia obtenida de datos neuroanatómicos y farmacológicossugieren que el sistema dopaminérgico se encuentra involucradoen el desarrollo del trastorno obsesivo compulsivo (TOC). Se hareportado el desarrollo de síntomas obsesivo-compulsivos enpacientes que reciben clozapina. El receptor dopaminérgico D4(DRD4) tiene una alta afinidad por la clozapina. En el gen delDRD4 se ha reportado un polimorfismo que se caracteriza porser una región de repetición de 48 pb, expresando 11 diferentesvariantes. Nuestro grupo reportó una asociación entre la variante7R y pacientes TOC con tics. De tal manera, decidimos re-analizareste polimorfismo en pacientes TOC en una muestra de mayortamaño. Además, se analizó la transmisión de alelos en 86familias. El análisis entre 210 pacientes TOC y 202 sujetos sanosmostró diferencias estadísticamente significativas (c2=9.33,p=0.0027). El análisis por género mostró una mayor frecuenciade alelos largos en los pacientes TOC hombres que en el grupocontrol. Sin embargo, no fueron replicados los hallazgospreviamente reportados entre el alelo 7R y los pacientes TOCcon tics, pero se observó una alta frecuencia del alelo 6R eneste grupo. El análisis de las familias no mostró desequilibrio deenlace entre el TOC y el gen DRD4. En conclusión, el gen delDRD4 parece identificar diferencias por género en el TOC y queel subtipo de pacientes TOC que presentan tics presenta unaalta frecuencia del la variante de 6 repetidos, lo cual pudiera estarasociado con los reportes que muestran una mayor afinidad delreceptor al tratamiento con clozapina en este tipo particular depacientes.

IC-17NEW APOA1 MUTATION ASSOCIATED TO SEVERE HDL-CHOLESTEROL DEFICIENCY AND PREMATURECORONARY ARTERY DISEASE.

Esperón Patricia1,2, Vital Marcelo2, Raggio Víctor1, AlallónWalter3, Stoll Mario1.

1Área Genética Molecular, Comisión Honoraria Para la SaludCardiovascular.2Cátedra de Biología Molecular Facultad deQuímica. 3Departamento de Laboratorio Clínico. Facultad deMedicina. Montevideo, Uruguay.

Our aim consisted in the identification of the genetic variationsunderlying the very low HDL-C phenotype in high risk families forcoronary artery disease.All studied subjects were examined and their informed consentwas obtained in the context of a pilot program for highcardiovascular risk families identification and a new risk factorsevaluation program of the uruguayan «Comisión Honoraria parala Salud Cardiovascular» (CHSCV).Serum HDL-C, total cholesterol, triglycerides, ApoA-I and ApoBlevels were measured using standard commercial proceduresassays. PCR amplified DNA was sequenced for the detection ofAPOA1, ABCA1, and LCAT gene mutations.A medical family pedigree was established from the a 58-year-old female proband with extremely low serum HDL-C (4,3 mg/

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dL) and advanced CAD with ApoA-1 serum level value of 26 mg/dL (rv: 104-205) and Apolipoprotein B value of 73 mg/dL (rv: 60-117). Triglyceride levels were normal. No retinopathy, cataracts,or tendon xanthomata were present nor other clinical findingssuggestive of amyloidosis were found. Other identifiablemodifiable risk factors for premature CAD such as cigarettesmoking, obesity, sedentarism, or nutritional misconduct wereabsent.After the genetic analysis we found a novel single point mutationin the APOA-I gene of the woman and her son. This mutation is aG>C transvertion at nucleotide position 2006, exon 4, leading toa substitution of an arginine by a proline at amino acid 153(R153P), located in an evolutionary conserved residue within theregion for LCAT activation.We have identified a novel point mutation in the human APOAIgene, that we propose to be named APOA-I

Montevideo This change

is associated with a severely diminished serum HDL-C and ApoA-I levels and a strong tendency to develop premature CAD withoutamyloidosis. Both the mother and son presented the mutation inheterozigocity and it cosegregated with the ApoA1 and HDL-Cdeficiency suggesting a dominant negative patogenic mechanism.

IC-18

SECUENCIA TRAP .REPORTE DE UN CASO Y REVISIÓNDE LA LITERATURA.

Sierra PF*, Cortés MJ*, Cid RJ*, ValleTJ*, Cácerez SJA*,Camacho QJ**, Calvario HG**.*Departamento de Genética, Hospital de la Mujer SSA, Puebla,pue. **Estudiantes de Medicina Benemérita UniversidadAutónoma de Puebla.

La acardia Fetal (AcF), conocida como Secuencia de PerfusiónArterial en Reversa (TRAP), es una anomalía congénita asociadaa embarazos múltiples, se presenta en el 1% de los gemelosmonocigóticos con una frecuencia de 1:35,000 – 48,000embarazos. Se caracteriza por ausencia de corazón en uno delos gemelos, por lo que el feto normal se encarga de proveer elflujo sanguíneo a acardio para su supervivenciaCaso clínico: Se trata de paciente multigesta de 28 años de edadcon diagnóstico de embarazo gemelar de 31SDG, con unproducto óbito diagnosticado a las 20SDG se resuelve embarazovía cesárea obteniendo producto de sexo femenino con peso de1520gr, Apgar 7-8 ,sin defectos congénitos, se obtiene unsegundo producto con múltiples defectos con peso de 1800gr.sereporta placenta biamniótica, bicoriónica.Conclusión. Uno de los riesgos que ocurren en los embarazosgemelares es la disrupción de la perfusión vascular normal y eldesarrollo de anastomosis arterio-arterial entre los gemelosocasionando la secuencia TRAP.

IC-19

NUEVA MUTACIÓN DE HPRT EN UN LACTANTE CONSÍNDROME DE LESCH-NYHAN.

Zamora UA1, Vázquez FR1, Zamora CA1, Morán BV1, O’Neil P2

1. Hospital Infantil de México Federico Gómez (HIMFG), 2.Departamento de Genética, Universidad de Vermont, NE, EUA

Introducción. El defecto en la codificación de hipoxantina-guaninafosforribosiltransferasa (HPRT) se localiza en el gene Xq26-q27.2y se caracteriza por hiperuricemia, retraso mental, cuadriparesiaespástica, coreoatetosis, y automutilaciones. Su incidencia esde 1:380000 y se han descrito mas de 200 mutacionesrelacionadas. La edad de presentación mas común es entre los3 y 12 meses de vida.

Reporte de Caso. Se trata de masculino de 2 meses de edad sinantecedentes heredofamiliares ni perinatales de importancia, alos 30 días de vida la madre nota aumento de volumen en regióndorsal de pie derecho, ingresa al HIMFG a los 2 meses de vida,con aumento de volumen en ambos pies y dedo índice izquierdo;laboratorios con BUN 43 mg/dL, creatinina 2.4mg/dL, ácido úrico22mg/dL, por lo que se sospecho una deficiencia de la HPRT. Seenviaron muestras del paciente y de la madre al laboratorio debiología celular de la UNAM donde por medio de lizadoeritrocitario se encontró una deficiencia grave de dicha enzima,por lo cual las muestras fueron enviadas a la Universidad deVermont en EUA, donde se realizó el estudio molecularencontrando una deleción de 2 bases en el exon 3 (269-270 delAT) del gen de la HPRT; dicha deleción no ha sido reportada enla literatura, y se corroboró el diagnostico de una deficiencia gravede la HPRT y síndrome de Lesch-Nyhan.Discusión. La deficiencia de HPRT conduce a la sobreproducciónde purinas a través debido a la disminución de la reutilización(vía de salvación) de hipoxantina y guanina, provocando por unlado la acumulación de pirofosfato el cual estimula la síntesis depurinas y por otro se disminuyen los niveles de IMP y GMP loscuales actúan como retroinhibidores de la fosforribosil pirofsfatoaminotransferasa, con lo cual se favorece también la síntesis depurinas. El aumento en la síntesis de purinas por déficit de HPRTproduce hiperuricemia e hiperuricosuria con gota y nefrolitiasisañadidas. La forma principal de presentación es con hipotonía yretraso en el desarrollo psicomotor, sin embargo existe unpequeño grupo de pacientes que se pueden presentar concomplicaciones relacionadas a la sobreproducción de ácido úrico,tal es el caso de este paciente que debutó con gota y nefrolitiasis,resultado de la deficiencia enzimática grave en este paciente, auna edad nunca antes reportada en la literatura.

IC-20HISTORIA FAMILIAR DE ENFERMEDADES CRÓNICAS ENMÉXICO: HERRAMIENTA PARA EL ESTABLECIMIENTODEL RIESGO EN SALUD PÚBLICA.

Oliva-Sánchez Pablo Francisco 1, Velasco- Mondragón Héctor1, López-Ridaura Ruy 1, Manzano-Patiño Abigail .1 Instituto Nacional de Salud Pública..

El objetivo de este estudio es evaluar la asociación entreenfermedades crónicas, como la diabetes tipo 2 (DT2), lahipertensión arterial sistémica (HAS) y el síndrome metabólico(SM), con la historia familiar (HF) en sus diferentes componentes(antecedente paterno, materno o ambos), en la población adultade México. Se realizó un análisis de la Encuesta Nacional deSalud 2000 (ENSA 2000) implementada por el Instituto Nacionalde Salud Pública y la Secretaría de Salud, mediante la aplicaciónde un cuestionario, con una muestra probabilística de adultos detodo el país de 20 y más años de edad de las 32 entidadesfederativas del país. Se calcularon las RM no ajustadas yajustadas por medio del análisis de regresión logística paraevaluar la asociación entre enfermedades crónicas e historiafamiliar. El tamaño de muestra de los sujetos con 20 años y másde edad, participantes en la encuesta fue de 42,372. El 7.5%(3,197) de ellos presentó DT2, el 31.6% (14,462) HAS, el 2.5%(712) SM. Al realizar el análisis ajustando, se observó que existe5.11 (p < 0.0001) veces la posibilidad de padecer DT2 en aquellaspersonas con antecedente heredo familiar de DT2 en ambosprogenitores en comparación con las personas sin antecedentede esta enfermedad. Con respecto a SM se encontró que existe9.15 (p < 0.0001) veces la posibilidad de padecerlo, en laspersonas que con antecedente heredo familiar de DT2 en ambospadres en comparación con las personas que sin antecedentesde esta enfermedad. En cuanto al antecedente heredo familiar

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materno de DT2, mantuvo su significancía estadística al ajustarpor otras variables observando una riesgo de 2.36 (p < 0.0001)con respecto a DT2 y 3.53 (p < 0.0001) con respecto a SM. Conbase a estos resultados, consideramos que la HF es unaherramienta en salud pública, que sirve para detectar grupos demayor vulnerabilidad tanto genética como ambiental, en eldesarrollo de enfermedades crónicas como la DT2. En el periodoen que no se conozca los genes relacionados con unaenfermedad y la terapia necesaria para controlar su expresión.La HF representa una herramienta para detectar individuos y/ofamilias en riesgo, en las cuales se apliqué políticas de saludpreventivas mejor dirigidas, en términos del control de lasenfermedades.

IC-21FRECUENCIA DE LOS POLIMORFISMOS -108 (C/T) Y -909(G/C) EN EL GEN PARAOXONASA- 1 EN ASOCIACIÓNCON LOS DEFECTOS DE CIERRE DEL TUBO NEURAL ENUNA POBLACIÓN DE YUCATÁN.

Alvarado Yaah Julio E, González Herrera Lizbeth, PintoEscalante Doris.Departamento de Salud Reproductiva y Genética. CIR-UADY,Dr. Hideyo Noguchi.

Los defectos de cierre de tubo neural (DCTN) son un grupo demalformaciones congénitas de etiología multifactorial y de mayorprevalencia en Yucatán. El Registro de MalformacionesCongénitas externas del CIR-UADY, sugiere exposición apesticidas órganofosforados (OF) en familias afectadas, debidoa que aproximadamente el 50% de los progenitores de reciénnacidos con DCTN tienen ocupación laboral vinculada con el usode OF. La paraoxonasa-1 (PON1) es una fosforilfosfatasa tisularque participa en la inactivación y metabolismo de los OF,detoxificando al organismo de estos compuestos. Lospolimorfismos -108 (C/T) y -909(G/C) del gen PON1, regulan laexpresión y concentración de la enzima codificada. Por tal motivoen el presente estudio se analizó la frecuencia de estospolimorfismos en asociación con los DCTN en la población deYucateca.Se llevó a cabo un estudio de asociación tipo caso-control,incluyendo 161 muestras de ADN de recién nacidos con DCTN ysus progenitores como el grupo de casos y 108 muestras desujetos sanos como control. Los polimorfismos se determinaronpor amplificación mediante PCR-RFLP´s con la endonucleasaBstUI para el polimorfismo -108 (C/T) y PCR-ASO para elpolimorfismo -909 (G/C). Se compararon las frecuencias entrecasos y controles con una prueba de X2 y se calculó el riesgorelativo (OR, IC 95%).La comparación entre las frecuencias alélicas y genotípicas entrecasos y controles no arrojó diferencias significativas, excepto parael grupo de madres con hijos con anencefalia en el alelo -108T(p= 0.045, OR=0.4, IC=0.15-1.08), sugiriendo asociación comofactor de protección. Los polimorfismos analizados no se asociande manera independiente con el riesgo para DCTN, así mismo lainteracción entre ambos polimorfismos o haplotipos no parecenaumentar el riesgo para presentar algún DCTN o para tenerdescendencia afectada en la población estudiada. Excepto parael haplotipo GC/CC que se hallo en los limites de significanciaestadística (p=0.06, OR=5 IC=0.73-38.52).La frecuencia alélica de los polimorfismos -909(G/C) y -108(C/T)en la población Yucatán fue de 51.86% y 45.38%respectivamente, con similitud con China, Estados Unidos y Suiza(p>0.05) para -108T y menor para -909C en EE.UU. (p=0.027) ySuiza (p=0.0003).

En el presente estudio se concluye que el alelo -108T se asociacomo factor de protección materno para anencefalia, mientrasque el alelo -909C no representa un factor de riesgo asociadocon los DCTN en la población estudiada, así mismo las diferenciasde -909C con las poblaciones de EE.UU. y Suiza reflejanvariación étnica entre las poblaciones.

IC-22POLIMORFISMOS EN EL CODÓN 72 DE P53 Y EN ELCODÓN 31 DE P21 EN CARCINOMA CERVICAL.

Arcos-Román A,1 Fernández-Tilapa G,1 Illades-Aguiar B,1

Enríquez-Rincón F,2 Flores-Alfaro E.1Facultad de Ciencias Químico Biológicas, 2Universidad Autónomade Guerrero, Departamento de Biología Celular, CINVESTAV-IPN.

El gen supresor de tumor p53 y su efector río abajo p21 jueganpapeles importantes en el desarrollo de malignidades humanas.Se ha reportado que las variantes polimórficas de p53 en el codón72, y en el codón 31 de p21 se asocian con la susceptibilidadpara desarrollar cáncer, pero pocos estudios han investigado suefecto sobre el riesgo de carcinoma cervical del cuello uterino.Con el propósito de investigar si los polimorfismos de un solonucleótido (SNP) de p53Pro/Arg-72 y p21ser/Arg-31, pueden ser factoresgenéticos de susceptibilidad para desarrollar carcinoma cervicalescamoso del cérvix uterino (CaCU), se realizó un estudio decasos y controles que incluyó 241 muestras cervicales de mujeresdel estado de Guerrero: 50 con diagnóstico histopatológico deLIEGB, 36 de LIEGA, 53 de CaCU y 102 controles (citologíanormal). El polimorfismo p53Pro/Arg72 se detectó por PCR-aleloespecífica y el polimorfismo p21Ser/Arg31 por PCR-RFLPs. Parap53Arg/Arg72 la frecuencia fue de 56% en los casos y de 42% en loscontroles, la frecuencia alélica fue de 0.70 y 0.60,respectivamente. Para p21Ser/Ser31 la frecuencia genotípica fuede 49% en los controles y del 51% en los casos, la frecuenciaalélica, fue de 0.65 en casos y controles.Los resultados sugieren que las mujeres guerrerenses portadorasdel genotipo p53Arg/Arg72 tienen más riesgo de desarrollar CaCU,mientras que p21ser/ser31 no se asocia con esta patología. Noobstante, el efecto combinado de los genotipos p53Arg-Arg72 / p21Ser-

Ser31 potencia el riesgo de CaCU.

IC-23ANÁLISIS DE LOS POLIMORFISMOS A19A DEL GEN LEP,GLN 223ARG Y PRO1019PRO DEL GEN LEPR EN UNGRUPO DE HERMANDADES CON AL MENOS UNINDIVIDUO CON DIABETES MELLITUS TIPO 2.

López Cardona M. Guadalupe1, Flores Martínez Silvia E.2, OrtizCárdenas Alfredo3, Moran Moguel M. Cristina2, Troyo SanrománRogelio1, García Zapien Alejandra2, Lara Rodríguez Roberto3,Cruz Quevedo Edhit2, Sánchez Corona José2.1Instituto de Genética Humana, Departamento de BiologíaMolecular y Genómica CUCS; Universidad de Guadalajara.2División de Medicina Molecular, CIBO, IMSS. 3Endocrinología,Hospital General de Occidente (Zoquipan), Secretaria de Salud.

Introduccion: La obesidad frecuentemente cursa con resistenciaa la insulina y es factor de riesgo para desarrollar DM tipo 2 (DM2)además contribuyen de forma importante factores genéticos depredisposición para estas dos patologías. Se conocen variosgenes candidatos entre ellos LEP y LEPR. Objetivo: Analizar lasfrecuencias genotípicas y alélicas de los polimorfismos A19G deLEP, Gln223arg y Pro1019pro de LEPR en un grupo constituidopor hermandades con al menos un individuo con DM2 (Grupo

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HDM) y compararlas con las frecuencias observadas en lapoblación general de Jalisco (Grupo PGJ), además de analizarsi existe diferencias en variables clínicas y bioquímicasrelacionadas con DM2 entre individuos con diferente genotipo.Material y metodos: Se estudiaron un total de 50 individuos delgrupo HDM y 101 del grupo PGJ. La tipificación se realizomediante PCR-RFLPs; en el análisis estadístico se utilizó elprograma SPSS, se estableció como valor de significancia una pmenor de 0.05. Resultados: FRECUENCIAS GENOTÍPICAS:Polimorfismo A19G, grupo HDM 0.18, 0.58 y 0.24; grupo PGJ0.29, 0.47 y 0.24 (A/A, A/G, GG). Polimorfismo Gln223arg, grupoHDM 0.34, 0.50 y 0.16, grupo PGJ 0.29, 0.51 y 0.20 (Gln/Gln,Gln/arg y arg/arg). Polimorfismo Pro1019pro, HDM 0.48, 0.44 y0.08; PGJ en los y 0.51, 0.40 y 0.08 (Pro/Pro, Pro/pro y pro/pro).FRECUENCIAS ALÉLICAS: A:047, G:0.53, Gln:0.59, arg:0.41,Pro:0.70, pro:0.30 en los HDM y A:0.52, G:0.48, Gln:0.54,arg:0.45, Pro:0.72, pro:0.28 en PGJ. ANALISIS DE LASVARIABLES RELACIONADAS CON DM2 Y GENOTIPO. No seencontraron diferencias significativas con respecto al genotipo ymedia de las variables: glucosa, triglicéridos, colesterol HDL, LDL,hemoglobina glucosilada, microalbominuria, creatinina y nivelesde insulina del grupo HDM. Solo los homocigotos Pro/Pro tuvieronuna media mayor para triglicéridos (p=0.02). Conclusiones: Losresultados obtenidos sugieren que no existe una probableagregación familiar de algún genotipo o alélo de estos lospolimorfismos entre diabéticos y no diabéticos del grupo HDM,ni en comparación con la PGJ, ya que no hubo diferenciassignificativas en las frecuencias observadas entre estos grupos.Son necesarios otros estudios para conocer la asociación delpolimorfismo Pro1019pro con niveles elevados de triglicéridos.

IC-24

EPILEPSIA MIOCLÓNICA JUVENIL: NUEVAS MUTACIONESEN EL GEN MIOCLONINA/EFHCI EN FAMILIAS DEHONDURAS, MÉXICO Y JAPÓN.

Medina MT1, Toshimitsu S2, Durón R1, Alonso ME3, Bailey J4,Martínez IE3, Bai D5, Inoue Y7, Yoshimura I7, Kaneko S7, MontoyaMC1, Ochoa A3, Jara A3, Tanaka M5, Machado SJ5, YamakawaK2, Delgado-Escueta A.5.1Univiversidad Nacional Autónoma de Honduras, TegucigalpaHonduras, 2RIKEN Brain Science Inst. Saitama, Jap, 3InstitutoNacional de Neurología y Neurocirugía, Mex. 4Selweis Instituteof Neurosciences, Neuropsychiatric Institute David Geffen Schoolof Medicine, Los Angeles CA, USA, 5Epilepsy Center ofExcellence, Dept. of Veterans Affairs, Greater Los Angeles HealthCare Sciences and David Geffen School of Medicine at UCLA,Los Angeles CA, USA, 6National Epilepsy Center, ShizuokaMedical Inst. of Neurological Disorders, Shizuoka, Jap, 7Dept. ofNeuropsychiatric, School of Med, Hirosaki University, Aomori. Jap.

La epilepsia mioclónica juvenil (EMJ) es heterogénea. Haymutaciones en 3 genes que pueden producirla, entre ellos el genmioclonina-1/EFHCI encontrado por nuestro grupo en familiasde México y California. Este gen tiene 11 exones y codifica parauna proteína de 640 aminoácidos (isoforma A). Tiene unprocesamiento alternativo en el exón 4 produciendo una proteínatruncada (isoforma B). En este trabajo buscamos nuevasmutaciones en el gen EFHCI en familias de México, Honduras yJapón. Se estudiaron 29 casos índice con EMJ de México,15 deHonduras y 47 de Japón. A los participantes se les tomó muestrapara extracción de DNA previa firma de consentimiento informado.El gen se amplificó por PCR y los productos se secuenciaron.También se buscaron mutaciones en la región promotora 5’UTRdel gen en 39 casos índice de Japón y 44 de México y Honduras.En los casos con mutación el estudio se extendió a otros

miembros de la familia con EMJ o un EEG anormal. Se detectaron2 mutaciones nuevas heterocigotas con sentido equivocado en1 familia mexicana y 1 japonesa, otra sin sentido en el transcritoB en 3 pacientes y 7 individuos asintomáticos pero conalteraciones EEGs en 1 familia de Honduras. Este mismo cambiose vio como mutación de novo en el probando de otra familiahondureña. En 1 familia mexicana se identificó una delección enel transcrito B. En 2 miembros de 1 familia japonesa se encontróen forma heterocigota una delección de 3 pares en la región5’UTR. Estas mutaciones con excepción de la localizada en región5’UTR, predicen cambios estructurales o pro de la síntesis de laproteína. Mutaciones en este gen se han descrito en variaspoblaciones y son frecuentes en México.

IC-25ASOCIACIÓN DE LA DENSIDAD MINERAL ÓSEA CON ELPOLIMORFISMO 174GC EN EL GEN DE IL6 EN MUJERESMEXICANAS. MAGAÑA.

Aguirre Jonathan1,2 , Gómez-Ortega Rocío1, Cisneros-VegaBulmaro2, Casas-Ávila Leonora1, Díez-García Pilar3, Elizondo-Azuela Guillermo4, Valdés-Flores Margarita1.1Departamento de Genética, Instituto Nacional de Rehabilitación,México D.F. 2Departamento de Genética y Biología Molecular,CINVESTAV-IPN, México D.F. 3Servicio de Ortopedia, InstitutoNacional de Rehabilitación, México D.F. 4Sección externa deToxicología, CINVESTAV-IPN, México

La Osteoporosis (OP) es una enfermedad esqueléticamultifactorial y poligénica caracterizada por la disminución de lamasa ósea y el deterioro microestructural del tejido óseo, con elconsiguiente aumento de la fragilidad del hueso y de lasusceptibilidad para el desarrollo de fracturas, en la actualidadse considera como uno de los principales problemas de saludpública en México y en el mundo. La Interleucina 6 (IL6) es unacitocina importante en la diferenciación osteoclastogénica y porlo tanto en la resorción ósea. IL6 juega un papel importante en elmetabolismo óseo y variaciones genéticas en este gen o en zonasadyacentes pueden estar asociadas a variaciones de la densidadmineral ósea (DMO). En el presente estudio analizamos lacorrelación entre el polimorfismo 174GC SNP presente en el gende IL6 y la DMO en 70 mujeres con OP y 70 mujeres sin OP. LaDMO de columna fue medida a través de estudiosdensitométricos, usando absorcimetría de rayos X de doble nivelde energía (DEXA). Se estudiaron además 168 individuosmexicanos de la población general. El análisis genotípico serealizó a través de PCR tiempo real.Se encontró que el alelo G esta presente en el 90% de las mujerescon OP, mientras que en el grupo sin OP solo en el 78%,presentando diferencias estadísticamente significativas (p<0.05),la presencia del alelo G presentó un factor de riesgo (OR) de2.45 veces de padecer OP. El genotipo GG es muy frecuente enel grupo de mujeres con OP (80%) comparado con el grupo sinOP (60%) presentando un factor de riesgo de 2.7 veces depadecer osteoporosis, sin embargo las frecuencias en lapoblación general son muy parecidas a las del grupo con OP,esto podría generar resultados falso positivos, por lo que elanálisis poblacional es importante en este tipo de estudios. Porotra parte el alelo C es más frecuente en el grupo sin OP (22%)con relación al grupo con OP (10%) y a la población general(11.6%) (p<0.05), cabe señalar que solo en el grupo sin OP seencontraron homocigotos CC, mientras que en el grupo con OPno se encontró ninguna mujer con éste genotipo, es posible queel alelo C, principalmente en su forma homocigota podríarepresentar un factor protector para OP (OR: 0.41 y 0.0respectivamente).

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Estos resultados sugieren que el polimorfismo 174GC SNP dellocus de IL6 puede estar asociado con algunos determinantesde DMO, y el alelo C puede ser un factor protector para la OP. Esnecesario aumentar el número de sujetos de estudio para detectaren forma precisa la posible asociación. Además es importanteseñalar que el análisis poblacional es importante para fortalecerla validez de esta investigación.

IC-26CORRELACIÓN GENOTIPO-FENOTIPO EN UN GRUPO DEPACIENTES MEXICANOS CON FIBROSIS QUÍSTICA:RESULTADOS PRELIMINARES.

Yokoyama Rebollar, Emiya, Chávez Saldaña, Margaritaa,Villarroel Cortés, Camiloa, Carnevale Cantón, Alessandrab, DeTeresa García, Benildeb, Lezana Fernández, José Luisc, Orozco,Lorenad.aLaboratorio de Biología Molecular, INP; bCoordinación Nacionalde Medicina Genómica, ISSSTE; cDepartamento de Neumología,AMFQ y HIM; dLaboratorio de Genómica de EnfermedadesMultifactoriales, INMEGEN.

Introducción. Hasta la fecha se han descrito más de 1500mutaciones del gen CFTR (regulador de conductanciatransmembranal de la fibrosis quística). La delta-F508 es la máscomún en la población caucásica (70%). Las mutaciones en estegen se clasifican, de acuerdo a su efecto en la proteína, en graveso leves. Se ha visto que existe una alta correlación del genotipocon la afección pancreática, en donde se ha demostrado que lasmutaciones leves son dominantes sobre las graves, a diferenciadel resto de las manifestaciones en donde no se ha encontradouna clara correlación. Objetivo: Establecer la correlación genotipoCFTR con las manifestaciones clínicas en un grupo de pacientesmexicanos con diagnóstico de fibrosis quística (FQ). Material yMétodos. Se incluyeron 34 pacientes mexicanos con diagnósticode FQ, genotipo CFTR. A partir del genotipo, se dividió a lospacientes en 3 grupos (1: homocigotos delta-F508; 2: dosmutaciones graves; 3: al menos una mutación leve). Se realizóel análisis estadístico del genotipo con los datos clínicos y seconsideró significativa una p<0.05. Resultados. Una vezagrupados los pacientes, se observa que la mutación delta-F508es la más frecuente, como se había reportado previamente porOrozco et al. Los pacientes de los 3 grupos fueron homogéneosen cuanto a edad y sexo. Se encontraron diferencias significativascon respecto al estado pancreático, nivel de cloruros en sudor yedad al primer cultivo de P. aeruginosa. No hubo diferencias eníleo meconial, fenotipo pulmonar medido por FEV1, así comomortalidad. Discusión. La correlación entre el genotipo CFTR yel estado pancreático es acorde con resultados de estudiosprevios, siendo evidente en el caso de los pacientes con mutacióngrave en ambos alelos. Los grupos 1 y 2 presentaron el primercultivo de P. aeruginosa a menor edad en comparación con elgrupo 3, lo cual aunado con la alteración pancreática, puederepercutir en el estado de salud del paciente. De igual forma, losgrupos con mutaciones graves, presentaron incremento en losniveles de cloruros en sudor, comparado con el grupo que tieneal menos una mutación leve. El íleo meconial, así como el fenotipopulmonar medido por FEV1, no se lograron correlacionar con elgenotipo CFTR, lo cual puede deberse al tamaño de muestra delestudio o a que existan otros genes modificadores involucrados.

IC-27POLIMORFISMO EN EL GEN DE LA COLÁGENA TIPO 1A1 YSU RELACIÓN CON LA DENSIDAD MINERAL ÓSEA ENPOBLACIÓN MEXICANA.

Falcón Ramírez Edith, Casas Avila Leonora, Gómez OrtegaRocío, Magaña Aguirre Jonathan, Diez García Ma. del Pilar,Valdés Flores Margarita.Departamento de Genética, Instituto Nacional de Rehabilitación,SSA. México, D.F.

Introducción. La osteoporosis (OP) es una enfermedadcaracterizada por una reducción en la masa ósea que lleva aldeterioro de la microarquitectura del hueso, aumentando así elriesgo de fracturas. En la patogénesis de la OP los factoresgenéticos juegan un papel importante y varios polimorfismos engenes involucrados en el control genético de la densidad mineralósea (DMO) han sido implicados en la regulación de este proceso.Uno de los más estudiados es un polimorfismo en el primer intróndel gen de la colágena COL1A1, en donde la sustitución de unsólo nucleótido G®T afecta un sitio de unión para el factor detranscripción Sp1. Este polimorfismo ha sido asociado con unabaja DMO y un incremento del riesgo de fractura. Diversosestudios han informado que mujeres con el polimorfismo en unsolo alelo (genotipo sS), presentan un riesgo mayor a presentarfracturas en relación con las mujeres con el genotipo SS.Evidentemente, el riesgo de fracturas es aún mayor en lasmujeres homocigotos para el polimorfismo (ss). Es posible queen la práctica clínica la identificación de este polimorfismogenético pudiera emplearse como marcador de predisposicióndel riesgo de fracturas. El objetivo de este estudio fue analizar elpolimorfismo en el gen COL1A1 y determinar su relación con laDMO en una población de mujeres mexicanas con o sin pérdidade la DMO en columna o cadera y en sujetos de población abiertamexicana. Material y métodos. En una población de 180 demujeres mexicanas, se realizó densitometría en cadera ycolumna con un equipo HOLOGIC 2000. Por otra parte, a partiruna muestra sangre periférica se efectúo la extracción de DNA.Para el análisis molecular los genotipos para el polimorfismofueron determinados por PCR y mediante la técnica de RFLPque utiliza la enzima Ita I. Los productos de PCR y digestiónenzimática se visualizaron por electroforesis en gel de agarosa,teñidos con bromuro de etidio. Resultados. El análisisdensitométrico de 180 pacientes, muestra que 53% de lapoblación presenta pérdida de DMO de más del 30% tanto encadera como en columna. La distribución de los genotipos en losdiferentes grupos estudiados mostró que la presencia del alelo“s” en sus formas homo o heterocigoto es más común en lasmujeres con OP de cadera y columna, mientras que el alelo “S”predomina en las mujeres sin OP. Por otra parte, el análisis delpolimorfismo en los 100 sujetos de población abierta mexicana,mostró que existe diferencia significativa en la distribución delos alelos “s y S”, dicha distribución es similar a la observada enlos grupos sin OP, sin embargo, cuando se realizancomparaciones con los grupos con OP, las diferencias sonsignificativas. Los resultados del estudio genotípico en estapoblación confirman claramente que el polimorfismo es propiode una población con OP y no de una muestra seleccionada alazar. Conclusiones. Se encontró correlación entre la pérdida dela DMO y el alelo “s” en las regiones anatómicas analizadas. Elgenotipo “ss” esta presente en la población con OP y las mujeresque lo presentan tienen pérdidas óseas severas en cadera ó encolumna. Conocer la distribución del polimorfismo en la poblaciónabierta fortalece la asociación del alelo “s” y de los genotipos Ss,ss con la presencia de OP.

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IC-28

DISTRIBUCIÓN ÚNICA DE LAS ATAXIAESPINOCEREBELOSA AUTOSÓMICO DOMINANTES ENPOBLACIÓN MEXICANA.

Yescas Petra,1Martínez-Ruano Leticia1, Mader Christopher1,Ochoa Adriana1, De Biase Irene2, Gutiérrez Roxana1, CaudleMisti3, Ruano Luis1, Fragoso-Benítez Marcela4, Ashizawa Tetsuo3,Bidichandani Sanjay2,5, Alonso Elisa1, Rasmussen Astrid1,2

1Depto. de Neurogenética y Biología Molecular y Div. deNeurología, Instituto Nacional de Neurología y NeurocirugíaManuel Velasco Suárez, México, D.F.; 2Department ofBiochemistry and Molecular Biology and 5Department ofPediatrics, University of Oklahoma Health Sciences Center,Oklahoma City, Oklahoma; 3 Department of Neurology, TheUniversity of Texas Medical Branch, Galveston, Texas; 4CentroMédico Nacional 20 de Noviembre, México, D.F.

Las ataxias espinocerebelosas autosómico dominantes (ADCA)son clínica y genéticamente un grupo heterogéneo deenfermedades ligadas a 28 diferentes loci. La prevalencia de cadasubtipo individual muestra una amplia variación geográfica,siendo la ataxia espinocerebelosa tipo 3 (SCA3) la mas frecuentea nivel mundial, al contribuir con 21.0% de los casos. Dos tiposprincipales de mutaciones causales se han identificado: 9 de lasADCA se asocian a expansiones de microsatélites repetidosinestables, mientras que SCA4, 5, 13, 14 y 27 se deben amutaciones de sentido erróneo o deleciones pequeñas. En elpresente estudio se analizaron las mutaciones en los genes deSCA1, 2, 3, 6, 7, 8, 10 ,12, 17 y DRPLA en 108 familias conataxia autosómica dominante (717 individuos) y 123 pacientescon ataxia esporádica. La ataxia mas frecuente fue SCA2,responsable de casi la mitad de los casos dominantes (45.4%),seguida por SCA10 en 13.9%, SCA3 (12%), SCA7 (7.4%) ySCA17 (2.8%). No identificamos mutaciones en los genescausales de SCA1, 6, 8, 12 o DRPLA. Comparado con losreportes de la literatura, esta tasa de detección de mutacioneses alta: solo el 18.5% de los pacientes con ADCA no tuvierondiagnóstico molecular. En los casos esporádicos, identificamosmutaciones en SCA2 en 6 pacientes (4.9%), y mutaciones enSCA3 y SCA17 en un paciente cada una (0.8%). Concluimosque la distribución de mutaciones de las ataxiasespinocerebelosas autosómico dominantes en mestizosmexicanos es única. Su conocimiento nos ha permitido laimplementación de una eficiente estrategia diagnóstica.

IC-29IDENTIFICACIÓN DE POLIMORFISMOS DE UN SOLONUCLEÓTIDO EN EL GEN NFE2L2: UN REGULADORCLAVE EN LA RESPUESTA CELULAR CONTRARADICALES LIBRES.

Córdova Emilio1 y Orozco Lorena1.1Instituto Nacional de Medicina Genómica, México.

La generación de las especies reactivas de oxígeno (ROS) esun proceso normal y necesario durante el metabolismo celular.Sin embargo, un incremento en los niveles intracelulares de lasROS puede causar un estrés oxidativo, generando daños en DNA,proteínas y lípidos. La vía de señalización Nrf2-Keap1 es uno delos principales mecanismos de defensa contra el estrés oxidativo.En condiciones normales, el factor de transcripción Nrf2(codificado por el gen NFE2L2) es retenido y degradado en elcitoplasma a través de su interacción con Keap1. Sin embargo,en respuesta a un aumento en los niveles de las ROS, Keap1libera a Nrf2, el cual se transloca al núcleo donde promueve la

expresión de diversas enzimas antioxidantes. Se ha demostradoen modelos animales que la ruta Keap1-Nrf2 juega un papelesencial en la protección contra diversas enfermedadesasociadas al estrés oxidativo, como el lupus eritematososistémico, asma y cáncer entre otras. Hasta el momento existenpocos estudios acerca de la presencia de polimorfismos de unsolo nucleótido (SNPs) en el gen NFE2L2 y su asociación condiversos padecimientos. Por lo tanto, el objetivo de este trabajoes determinar la existencia de nuevos SNPs en el gen NFE2L2 yconocer su frecuencia alélica en una muestra de individuosmexicanos sanos. Se incluyeron en el estudio 100 individuossanos no relacionados, captados del banco de sangre del InstitutoNacional de Pediatría. La detección de nuevos polimorfismos serealizó mediante secuenciación directa de los productosamplificados obtenidos por PCR tanto de la región promotoracomo de la codificante de grupos formados por 10 individuos. Ladiscriminación alélica para determinar la frecuencia de los SNPsse realizó a través del método fluorescente de la 5' exonucleasa(TaqMan). Se identificaron 2 SNPs en la región promotora (-686G>A y -650C>A), los cuales se han reportado previamentesólo en población japonesa. En la región codificante no seencontró ningún SNP. En nuestra población, ambos polimorfismosestán presentes en una alta frecuencia (-686G>A = 43% y -650C>A = 27%), muy semejante a la reportada previamente. Enconclusión se cuenta con la caracterización completa de los SNPsdel gen NFE2L2, lo cual constituye una herramienta valiosa paraevaluar la posible asociación de genes involucrados en larespuesta al estrés oxidativo con cáncer, padecimientosautoinmunes y el asma, entre otros.

IC-30

ANÁLISIS DE POLIMORFIMOS EN GENESINVOLUCRADOS EN LA RESPUESTA INFLAMATORIA ENPACIENTES PEDIÁTRICOS MEXICANOS CON ASMA.

Jiménez-Morales S1,2,, Cuevas F3, Martínez-Aguilar N4,Velázquez R1, Ramírez-Bello J1, Salas-Martínez MG1, SaldañaY1, Escamilla G5, OrozcoL1.1Lab. de Genómica de Enfermedades Multifactoriales, INMEGEN,SS; 2Programa de Doctorado en Biología Experimental, UAM-I;3Depto. de Neumología y Cirugía del Tórax, Instituto Nacional dePediatría SS.; 4Servicio de Alergia, Hospital Regional 1° deOctubre, ISSSTE; 5Banco de Sangre, Instituto Nacional dePediatría, SS.

El asma es una de las enfermedades inflamatorias crónicas máscomunes en los países industrializados. Esta entidad secaracterizada por una respuesta inmune que aunque espredominantemente de tipo TH2, la participación de moléculasde respuesta TH1 y de moléculas coestimuladoras involucradasen la interacción de las células presentadoras de antígenos conlas células T juegan un papel fundamental. A la fecha, se hanreportado en poblaciones caucásicas, afro-americanas y asiáticasque polimorfismos de un sólo nucleótido (SNPs) en genes quecodifican para estas proteínas confieren riesgo para desarrollarasma, atopia u otras entidades inflamatorias. Para conocer elpapel de los polimorfismos en los genes IL4, FCER1B, RANTES,IL12, CTLA4 y PDCD1 en la susceptibilidad a padecer asma enla población infantil mexicana, se realizó un estudio de casos ycontroles en el que se analizaron 12 polimorfismos distribuidosen estos genes. En el estudio se incluyeron 100 pacientespediátricos con diagnóstico clínico de asma y 259 controles sinantecedentes de asma y atopia. El estudio de genotipificaciónse realizó mediante la técnica de la 5éxonucleasa (TaqMan). Enla construcción de haplotipos se utilizó el software HAPLOVIEWy en el análisis estadístico los programas EPIINFO y FINETTI.

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Los resultados mostraron que la distribución de los polimorfismosanalizados se encontraba en equilibrio de Hardy-Weinberg. Lasfrecuencias alélicas y genotípicas no mostraron diferenciasestadísticamente significativas entre los casos y los controles nien la distribución de los haplotipos generados. Los resultadosobtenidos sugieren que estos polimorfismos no confieren riesgopara desarrollar asma o atopia en la población mexicana, sinembargo con base a los datos obtenidos en otras poblacionesno se descarta la posibilidad de que otros SNPs en estos genescontribuyan como factores genéticos de riesgo para asma.

IC-31ANÁLISIS DE LA EXPRESIÓN DE PROTEÍNAS ASOCIADASA DISTROFIAS MUSCULARES EN PACIENTESMEXICANOS CON DIAGNÓSTICO CLÍNICO DE ESTASENFERMEDADES E IDENTIFICACIÓN DE UNA NUEVAMUTACIÓN EN EL GEN DE DISFERLINA

Escalante-Bautista D6, Gómez-Díaz B6, Roque-Ramírez B6,Badillo-Vázquez S6, Sánchez-Pineda A6, Fernandez-Valverde F1,Ruano-Calderón LA1, Meza-Espinoza PA6, Hernandez-VarelaKA6, Garcia-Ramirez R3, Ramírez-Navarrete E3, Piña-Mora E2,Rivera-Gámes E2, Escobar-Cedillo RE3, Miranda Duarte A5,Salamanca-Gómez F6, Rosas-Vargas H3, Coral-Vázquez RM3.1Instituto Nacional de Neurocirugía; 2Servicio de Cirugía de AltaEspecialidad Hosp. de Pediatría; 3Servicio de Neurocirugía Hosp.de Pediatría; 4Servicio de Electrodiagnóstico Instituto Nacionalde Rehabilitación, 5Servicio de Genética Instituto Nacional deRehabiloitación, 6Investigación Médica en Genética Humana,Hospital de Pediatría, Centro Médico Nacional Siglo XXI – IMSS.

La comprensión genética de las distrofias musculares haavanzado considerablemente en las dos décadas pasadas. Alpresente se conocen alrededor de 30 genes que producendistrofia muscular y para cada uno de ellos son varias lasmutaciones que se han descrito. Esta variabilidad genéticatambién está acompañada por una alta diversidad fenotípica.Asimismo, es frecuente que las características clínicas dediferentes distrofias musculares se asemejen, lo que dificulta sudiagnóstico. Por otra parte, se ha observado que la presencia deuna mutación en una misma familia se puede asociar a distintosfenotipos, en los que se puede afectar tanto el músculoesquelético así como la función cardiaca. Además se sabe quela alteración en un gen no solo puede modificar la expresión dela proteína que codifica, sino también la de otras proteínasasociadas, debido a alteraciones en la interacción proteína-proteína. La explicación para la variabilidad del fenotipo en lasdistrofias musculares actualmente se está explorando. Pero paraello primero es necesario conocer el patrón de expresión de lasproteínas asociadas a distrofias musculares, para identificar ladeficiencia primaria en el paciente y posteriormente realizar labúsqueda de la mutación.Nosotros analizamos, mediante inmunofluorescencia indirectacon anticuerpos para distrofina, disferlina, alfa, beta, gama y delta-sarcoglicanos, emerina, laminina alfa 2, teletonina, lamina A ylamina C, 182 biopsias de músculo esquelético de pacientes quepresentan un cuadro clínico heterogéneo de distrofia muscular.La deficiencia de distrofina 67/182 fue la más frecuente,secundada por la deficiencia de disferlina 17/182. MedianteWestern blot cuantificamos esta última proteína y en el análisispor secuenciación del gen DYSF de 3 pacientes, encontramosuna nueva mutación en el exón 39, que cambia la producción deun aminoácido (Gly 1418 Asp) en la proteína. Además analizamospor Western blot la expresión de calpaina 3 en muestras de 24pacientes que mostraron por inmunofluorescencia una expresiónnormal para el resto de las proteínas examinadas en este estudio,en dos pacientes calpaina tres esta ausente y en cinco más esta

deficiente, por lo que reubica como la tercera en deficiencia masfrecuente, a diferencia con lo reportado en Brasil y Europa, dondese ubica en segundo lugar, solo después de la deficiencia pordistrofina. En cuarto lugar encontramos la deficiencia de lamininaalfa 2 en tres muestras y por último una muestra presentoausencia por imunofluorescencia y por Western blot paracaveolina 3 además de una deficiencia secundaria de disferlina.

IC-32EL XMRV ES ALTAMENTE PREVALENTE EN TEJIDO DECÁNCER DE PRÓSTATA Y NO CORRELACIONA CON ELPOLIMORFISMO 462 DEL GEN RNASEL.

Martinez-Fierro M,1 Leach RJ,2 Pais-Johnson T,2 Troyer D,2

Beuten J,2 Thompson IM,2 Ortiz-Lopez R,1 Silva-Platas C,1

Gomez-Guerra LS,1 Garza-Guajardo R,1 Martinez-Rodriguez HG,1

Martinez-Villarreal RT,1 Rojas-Martinez A.1

1. Grupo de Monterrey para Investigación en Cáncer de Próstata,Facultad de Medicina, UANL, Monterrey, México y 2. Programade Biomarcadores de Riesgo para Cáncer de Próstata (SABOR),University of Texas Health Science Center at San Antonio.

Resumen. El virus xenotrópico relacionado al virus de la leucemiamurina (XMRV), un gamma-retrovirus humano descubiertorecientemente, ha sido asociado con cáncer de próstata,particularmente en sujetos homocigotos para el alelo 462Q delgen RNASEL (involucrado en la respuesta natural antiviralinducida por interferón) 1.Material y Métodos. En un estudio piloto, una colección de 27tejidos tumorales de próstata del proyecto SABOR fuerontamizados para XMRV por RT-PCR anidada y genotipificadospara el codon 462 del gen RNASEL (ensayo TaqMan).Conclusiones: Este estudio confirma la presencia del XMRV entejido tumoral prostático, pero con una prevalencia mayor (37.0%)que la reportada previamente (10.4%) y también sugiere que nohay correlación entre la infección con XMRV y el genotipo 462Q/

Q en el gen RNASEL.

IC-33ANÁLISIS DE POLIMORFISMOS EN EL FACTOR H DELCOMPLEMENTO (CFH) Y EN EL GEN LOC387715 ENPOBLACIÓN MESTIZA MEXICANA CON DEGENERACIÓNMACULAR RELACIONADA A LA EDAD.

Silva Zolezzi Irma1, Contreras Alejandra Virginia1, HidalgoMiranda Alfredo1, Inchaústegui Aldana Alejandro1, Cano HidalgoRené Alfredo1, Zenteno Ruiz Juan Carlos2, Ayala Ramírez Raúl2,Pérez Cano Héctor2, March Misfut Santiago1, Graue Enrique2,3 yJiménez Sánchez Gerardo1.1Instituto Nacional de Medicina Genómica, Secretaria de Salud,México; 2Fundación de Asistencia Conde de Valenciana IAP, ,México DF; 3División de Investigación y Estudios de Posgrado,Facultad de Medicina, UNAM.

La degeneración macular asociada a la edad (DMRE) es la causamás común de pérdida de visión entre personas de más desesenta años. Esta enfermedad se caracteriza por pérdidaprogresiva de la visión central, causando disminución de laagudeza visual debido al deterioro de la mácula, parte central dela retina del ojo rica en células fotosensibles. Existen dos formasavanzadas de DMRE: atrofia geográfica (seca) yneovascularización coroidea (húmeda), que pueden ocurrir enuno o ambos ojos. Existe poco conocimiento sobre losmecanismos moleculares involucrados en el desarrollo de DMRE,sin embargo, recientemente diversos estudios permitieronidentificar dos genes asociados a la enfermedad, cada uno con

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una contribución importante pero independiente: El factor H delcomplemento (CFH) en población blanca no-hispánica y laproteína hipotética LOC387715 (LOC387715) (NCBI Build 35.1)en población blanca. Con la finalidad de evaluar la participaciónde CFH y LOC387715 en el desarrollo de DMRE en poblaciónmestiza mexicana, se genotipificaron cuatro polimorfismos deun solo núcleotido (SNPs) previamente asociados a DMRE enun grupo de pacientes y un grupo de controles poblacionales.Para realizar el estudio de casos y controles de utilizaronmuestras de sangre total de 72 pacientes mestizos norelacionados, con alguna de las dos formas de DMRE avanzadade un hospital oftalmológico del Distrito Federal, y 300 controlespoblacionales provenientes de 6 regiones del país (Guanajuato,Guerrero, Sonora, Veracruz, Yucatán y Zacatecas). El DNAgenómico se extrajo del paquete de células blancas por métodosconvencionales (QIAamp DNA Blood Maxi Kit, QIAGEN,Alemania). Posteriormente, se genotipificaron tres SNPs del genCFH, dos intrónicos (rs1410996, rs380390) y la variante Y402H(rs1061170); y un SNP en LOC387715 (rs10490924) medianteensayos de discriminación alélica, usando sondas TaqMan®(Applied Biosytems, EUA). Para todos los SNPs se calcularonlas frecuencias alélicas y genotípicas, y se evaluó si seencontraban en equilibrio de Hardy-Weinberg en la poblacióncontrol mediante una prueba exacta de Fisher. Las pruebas deasociación se realizaron mediante un análisis de chi-cuadrada.Los resultados obtenidos mostraron una asociación significativadespués de corregir por Bonferroni (p<0.0125) de dos SNPs, elrs1061170 (Y402H) de CFH (OR=6.076, C.I. [1.567-23.557],p=0.003); y el rs10490924 de LOC387715 (OR=6.222, C.I. [2.981-12.986], p=1.679x10-07) con DMRE avanzada. En el caso de losotros dos SNPs analizados no se encontró asociación significativacon DMRE. Los resultados obtenidos sugieren que CFH yLOC387715 contribuyen al desarrollo de DMRE avanzada en lapoblación mestiza mexicana de manera similar a lo que ocurreen otras poblaciones. Para confirmar estos resultados e identificarloci adicionales asociados a la susceptibilidad a DMRE en lapoblación mestiza mexicana, se está realizando un estudio deasociación de genoma completo con aproximadamente 115,000SNPs utilizando microarreglos de oligonucleótidos (GeneChip®Human Mapping 100K Set, Affymetrix, EUA).

IC-34

ESTUDIO DE HIBRIDACION GENOMICA COMPARATIVA ENPACIENTES CON LEUCEMIA LINFOCITICA AGUDA

Macias García, B1; Lugo Trampe, A1; Méndez Ramírez, N2; Dela Rosa Alvarado, R3; Jaime Pérez, J2; Gómez Almaguer, D2;Salazar Riojas, R2; Rojas Martínez, A1; Martínez de Villareal, L3;Villareal Quiroga, P4; Decanini Arcaute, H4; Ortiz López, R1

Departamentos de 1Bioquímica, 2Hematología, y 3Genética de laFacultad de Medicina de la UANL, 4Hospital Santa Engracia,Monterrey, Nuevo León

Introduccion: Las alteraciones en el número de copias de DNAes una de las maneras por las que la expresión y función de ungen es modificada(Wessendorf 2003) al grado que pueden llevar a lacélula a desarrollar diversos tipos de cáncer, incluyendo loshematológicos. La técnica de Hibridación Genómica Comparativaen microarreglos (aCGH) nos permite ver un mapa del númerode copias relativas de las secuencias del DNA entre genomasen función de su localización cromosómica(Kallioniemi 1992, Pinkel 2005) .El objetivo de este estudio es conocer mediante aCGH lasregiones cromosomicas que se encuentran amplificadas odeletadas en muestras de pacientes con Leucemia LinfocíticaAguda.Materiales y metodos: Se utilizó DNA de muestras de sangreperiférica y a concentraciones iguales de muestra problema y

control se marcó con el kit Microarray Random Priming (Vysis)para hibridar sobre GenoSensor Array 300 (Vysis) que contiene274 clonas de BACs de autosomas humanos y 14 clonas decromosomas X y Y. Los microarreglos se escanearon y analizaronutilizando el GenoSensor Reader (Vysis).Resultados: Se examinaron 10 muestras de pacientes con LLA.Los resultados arrojados por el aCGH muestran una amplificaciónde regiones cromosomicas principalmente de las regiones 6q16y de los genes ERG1 y CCND2. Las regiones que se encontraroncon pérdida de material genético corresponden a la región 5q33y a los genes MYCN, REL, TIF1, MTAP, ATM, RB1.Conclusiones: Los resultados encontrados muestran ganancia opérdida de regiones cromosomicas en genes asociados a cáncer.Resulta interesante que en las regiones 5q33 y 6q16 seencontraron alteradas en 6 de los 10 pacientes. Estas regionescontienen genes de proteínas recientemente asociadas aprocesos neoplásicos, pero que aun no han sido totalmentecaracterizadas. La validación de estos resultados se estarealizando por FISH,

IC-35

POLIMORFISMOS -455G/A Y -148C/T Y NIVELES DEFIBRINOGENEMIA COMO BIOMARCADORES DEENFERMEDAD CORONARIA CARDIOVASCULAR.

Canseco-Avila Luis M1,2, Jerjes-Sanchez, Carlos3, Guzmán-

Ramírez Denisse2, Asssad-Kottner Christian3, Rojas-MartínezAugusto,1Ortiz-López Rocío2

1Unidad de Diagnostico Inmunológico Molecular, Facultad deCiencias Químicas C IV, Universidad Autónoma de Chiapas,2Departamento de Bioquímica, Facultad de Medicina, UniversidadAutónoma de Nuevo León, 3Departamento de Emergencia,Hospital de Enfermedades Cardiovasculares y del Tórax, IMSS.Monterrey, N.L., Mexico.

Resumen: La hiperfibrinogenemia se ha identificado como unevento directamente asociado a los síndromes coronarios agudos(SCA). Algunos polimorfismos en los genes que codifican parafibrinógeno se han correlacionado con los niveles plasmáticosde este factor de la coagulación y varios estudios han analizadolas probabilidades de que estos polimorfismos estén asociadosa los resultados clínicos de los eventos patológicos agudos. Enel presente estudio se seleccionaron dos grupos de pacientescon SCA y enfermedad coronaria estable (ECE) y un grupo desujetos control (n=50/grupo), se reclutaron en el Servicio deUrgencias del Hospital de Especialidades de Tórax del InstitutoMexicano del Seguro Social en Monterrey, México, y se les dioseguimiento durante seis meses. Los grupos se aparearon poredad, sexo, índice de masa corporal y sedentarismo. Secompararon los niveles de fibrinógeno plasmático y lospolimorfismos -455G/A, -148C/T, +1689T/G y Bcl I del genbeta_del fibrinógeno en los tres grupos. La comparación de lasmedias de los niveles plasmáticos de fibrinógeno demostróniveles significativamente superiores a 414 mg/dl en los sujetoscon enfermedad coronaria (ECE y SCA). Valores de fibrinógenoplasmático superiores a 450 mg/dl se asociaron a muerte en elseguimiento del grupo SCA (p=0.04). Las cargas alelicas del -455A y -148T se asociaron con niveles de fibrinógeno plasmáticosuperiores a 450 mg/dl (p<0.0001 y p=0.0014, respectivamente)y con enfermedad coronaria en general (p=0.0013 y p<0.0001,respectivamente). Un análisis del seguimiento de los eventosadversos post-SCA mostró que la carga genética del alelo -148Ten cualquiera de los genotipos que lo portan se asoció a eventosadversos post-SCA en general (RR=1.6, IC 95% rango 1.0-11.2,

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p=0.04). En conclusión la determinación en conjunto de lospolimorfismos (-455G/A y -148C/T) y los niveles elevados del Fg(>450 mg/dl) podrían ayudar a la estratificación de riesgo yseveridad de la enfermedad para un mejor tratamiento en lospacientes.

IC-36

ESTUDIO FAMILIAR DE ANTIGENOS LEUCOCITARIOS DELHUMANO (HLA) CLASE I Y II CON ESCLEROSIS MÚLTIPLE

López-Morales, E*; Núñez-Farfán, R*; Vidal-Saucedo, F*; Piña-Olvera, V*; Aguilar-Ángeles, Dº, Delgado-Ochoa, M.D*.º División de Medicina Interna y *Laboratorio deHistocompatibilidad del Hospital Juárez de México, SSa.

Introducción: La esclerosis múltiple (EM), es una enfermedadprogresiva y generalizada que involucra procesos dedesmielinización activados de forma multifactorial, como son lasinfecciones por retrovirus, puerperio, anticuerpos anti-tiroideos,por interrelación y mimetismo molecular entre epitopescompartidos con mielina, anticuerpos anti-topoisomerasa,elevados niveles de prostanglantina E2, regulada por laciclooxigenasa 2; además de una predisposición hereditaria yfactores ambientales. Debido a que es de gran ayuda aldiagnóstico el estudio y determinación de las moléculas de HLAen estas alteraciones y a que es utilizado como marcador depredisposición para el desarrollo de la EM y de otras patologíascomo la artritis reumatoide, espondilitis anquilosante y diabetes.La manifestación de la EM oscila entre los 20 y los 40 años,siendo raro el inicio antes de los 10 o después de los 50 años,además se observa que el sexo femenino es más comúnmenteafectado.Existe una fuerte asociación entre la esclerosis múltiple ymarcadores HLA específicos, se reporta en poblaciones deNorteamérica y norte de Europa. Los haplotipos HLA DR52,DR15, DQ6, Dw2 (equivalente a DRB1*1501, DRB5*0101,DQA1*0102, DQB1*0602), son comunes en la EM, en donde loshaplotipos Dw2, B35 está presentan en Europa, Estados Unidosy en diferentes grupos étnicos, como los nativos norte americanosy mestizos en donde se observa un incremento en la frecuenciade B8, DR4, D3, A9, A19, B39 y B35. En los Japoneses son másfrecuentes los: HLA-DR3, DQ2, B35, B7, RB1, DRB3, DRB4, Dw2.Debemos recalcar la fuerte relación de Dw2, B35 y B7 enmecanismos de respuesta autoinmune, por lo que el estudio delos distintos haplotipos en la EM, en nuestra población es desuma importancia. El 55% de los pacientes afectados por la EMpresenta DR2, DR4, lo que contrasta con el 18% entre lapoblación general.Objetivo: Estudiar los alelos de HLA Clase I y II presentes enuna familia mestiza con esclerosis múltiple.Material y Métodos: Se estudiaron a 11 integrantes de una familia:padre, madre y 9 hijos (7 mujeres y 2 hombres) con diagnósticode EM, por medio de la técnica de tipificación de HLA Clase Iutilizando 32 sueros y HLA Clase II con 22 sueros.Discusión: Los haplotipos obtenidos, nos muestran que los nuevehijos presentan el alelo B27, ocho presentan el B35 y cuatro elDR4, todos relacionados con la predisposición a la enfermedad.En la familia de estudio existe una fuerte relación entre lapresencia del los alelos B27, B35 y DR4, en el desarrollo agudode la EM, y en este caso se evidencia dominancia en latransferencia de alelos.Conclusión: En nuestra población (mestizo-americano) seobserva una frecuencia baja de EM, sin embargo el estudio de lamisma demuestra que los alelos que con mayor frecuencia sepresentan en este padecimiento son A2, A28, B5, B35, B40; Espor esto que se abre un campo mayor para el estudio de esta y

otras patologías. Se espera en un futuro inmediato, el ampliareste estudio por medio de biología molecular.

GenómicaPoblacional

GP-01

ESTUDIO DE LAS MUTACIONES C677T EN EL GEN DE LAMTHFR, G20210A EN EL GEN DE LA PROTROMBINA,G1691A DEL FACTOR V LEIDEN Y DE LA INSERCIÓN/DELECIÓN 4AB EN EL GEN DE LA SON EN UN GRUPO DEPACIENTES CON DISECCIÓN CERVICAL ARTERIAL.

Jara Prado A1., Alonso Vilatela ME1., Martínez Ruano L1.,Guerrero Camacho JL., Arauz Góngora A2.1Departamento de Genética y Biología Molecular, 2Clínica deTerapia Vascular, Instituto Nacional de Neurología y NeurocirugíaMVS.

Antecedentes: La disección cervical arterial (DCA) es una causapoco frecuente de isquemia cerebral que suele afectar a pacientesadultos jóvenes. En los últimos años se ha sugerido que algunasmutaciones son un factor de riesgo para el desarrollo deenfermedades vasculares. La presencia de la mutación C677Ten el gen de la metilentetrahidrofolato reductasa (MTHFR), ensujetos homocigotos induce hiperhomocisteinemia y ha sidorelacionada con eventos isquémicos. La mutación G20210Areportada como causante de enfermedad isquémica en el gende la protrombina, provoca que sujetos portadores de estamutación presenten niveles elevados de protrombina. En másdel 90% de los casos la Resistencia Proteína C activada es acausa de una mutación en el gen del FV. La heterocigocidadpara la mutación en este gen esta asociado con un incrementoen el riesgo de desarrollar trombosis. Genes que regulan elsistema endotelial, como los de la sintasa del óxido nítrico (SON),han sido asociados con alteraciones en la actividad del promotorencontrándose una relación con el desarrollo de infarto lacunarsintomático. La inserción/deleción de 27 pb en el intrón 4 es unode ellos.Objetivo: Investigar si la asociación entre la presencia de lasmutaciones C677T en el gen MTHFR, G20210A del gen de laprotrombina, G1691A del factor V Leiden y de la inserción/deleción 4ab en el intrón 4 de la SON en un grupo de pacientescon Disección Cervical Arterial.Material y métodos: Se estudiaron 48 pacientes con DCA, 27hombres y 21 mujeres con un promedio de edad de 38 años(rango 17-60, D.E.+/-10.73 años) y se aparearon con controlespor sexo y edad en una proporción 2 a 1 con un promedio deedad de 37.8 años (rango 18-56, D.E. 10.17 años). Se les tomómuestras de sangre periférica para extracción de DNA, laidentificación de los polimorfismos se realizó mediante PCR yRFLP´s a excepción del polimorfismo 4ab, los productos fueronresueltos en geles de agarosa para su genotipificación.Resultados: Se determinaron las frecuencias de los diferentesgenotipos y los odds ratio como medida del riesgo relativo, juntocon su intervalo de confianza para el 95%. La frecuencia dehomocigotos para la mutación C677T de la MTHFR en pacientes,los homocigotos para la mutación fue de 16.7% contra 11.7% enlos controles (OR=1.55, IC95%=0..5-4.59), para la mutaciónG20210A de la protrombina se encontró una frecuencia deheterocigotos del 8.3% para los pacientes y del 2.1% para loscontroles (OR=4.27, IC 95%= 0.48.37), para G1691A del factor

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V Leiden se encontró una frecuencia de heterocigotos del 2.1%para los pacientes y 3.3% para los controles (OR=0.65,IC95%=0.01-8.31) y para la inserción/deleción 4ab, la frecuenciade heterocigotos fue de 22.2% para los pacientes y 22.5% paralos controles (OR=1.23, IC95%=0.45-3.23), también secompararon las frecuencias por género entre pacientes ycontroles y se encontró que para la mutación C677T de la MTHFRla frecuencia de homocigotos para la mutación fue de 18.5% paralos pacientes y de 3.7% para los controles (OR=5.91, IC95%=0.86-64.88) con una p=0.03. Conclusiones: No se encontróasociación con ninguno de los polimorfismos y el desarrollo dela enfermedad. Consideramos que es necesario ampliar lamuestra para confirmar esta conclusión.

GP-02CREACIÓN DE UN BANCO DE ADN PARA EL ESTUDIO DEFACTORES GENÉTICOS ASOCIADOS A TRASTORNOSMENTALES EN ADOLESCENTES.

Mendoza- de la Rosa, Graciela1, Gómez, Sánchez Ariadna1,CruzFuentes Carlos1,Benjet Corina2.Departamento de Genética Psiquiátrica; Subdirección deInvestigaciones Clínicas1 y Dirección de InvestigacionesEpidemiológicas y Psicosociales INPRF2.

Los trastornos mentales son considerados como un graveproblema de salud pública. La adolescencia es particularmenteimportante porque en esta se gestan muchos de los problemasde las etapas subsecuentes. La creación de un banco deinformación genética de adolescentes, primero de su tipo ennuestro país, nos permitirá evaluar el papel de los genes en lostrastornos psiquiátricos durante esta etapa del desarrollo humano.Esta iniciativa se inscribe dentro de un plan mundial deinvestigación sobre epidemiología genética de trastornosmentales en adolescentes impulsado por la Organización Mundialde la Salud. Los resultados obtenidos permitirán comparar losfactores relevantes comunes o específicos entre países oculturas. El protocolo para el estudio fue revisado y aprobadopor el comité científico y de ética del Instituto Nacional dePsiquiatría. Se recolectaron muestras de adolescentes deedades de 12 a 17 años, estas fueron representativas de lapoblación que radican en el D.F y área metropolitana. Para lacolecta se utilizo un enjuague bucal (Scope®), el cual se congelóhasta su procesamiento. Posteriormente se realizo la extraccióndel ADN usando el kit de aislamiento PureGene®. (Gentra). Laconcentración y calidad total de ADN fueron determinadasmediante espectrofotometria. Se aisló el material genético de2522 muestras. El rendimiento promedio fue de 87 microgramosADN/muestra, y la absorbancia 260/280 nm = 1.6 ± 0.2. Laintegridad de las muestras se analizó por electroforesis enagarosa 0.8%. Finalmente, algunas de las muestras mediante laamplificación de 3 polimorfismos de genes candidatos estudiadosen trastornos psiquiátricos como son APOE, DRD4 y SLC6A4.La calidad y cantidad de ADN obtenida con esta técnica es similaral que se obtiene en metodologías que utilizan sangre periférica.La metodología utilizada es recomendable para estudios queimpliquen la obtención de muestras de gran escala.

GP-03ELEMENTOS CLAVE SOBRE LA DIVERSIDAD GENÉTICADE POBLACIONES INDÍGENAS MEXICANAS.

Sandoval-Mendoza, Karla1, Buentello-Malo, Leonora2 Peñaloza-Espinosa, Rosenda3 y Comas, David1.1Unitat de Biologia Evolutiva, DCEXS, Universitat Pompeu Fabra,Barcelona, España. 2Laboratorio de Genética, Instituto deInvestigaciones Antropológicas, UNAM, Mexico D.F. 3Unidad de

Investigación Médica en Genética Humana, CMN Siglo XXI,IMSS, México D.F.

A pesar de la creciente utilización de técnicas molecularesempleadas para la reconstrucción de la historia de la humanidad,aún existen limitaciones, como la falta de un muestreo poblacionalsistemático y la disponibilidad de poblaciones de diferentesregiones geográficas, las cuales pueden ser específicamenteinformativas con respecto al proceso de evolución y dispersiónhumana. Norteamérica es una de estas regiones, que debido asus características étnicas y lingüísticas puede contribuir con graninformación al esclarecimiento del proceso de colonización delnuevo continente, el cual sigue siendo muy controvertido.El presente trabajo se enfoca en el estudio de la dinámica delpoblamiento de América por medio del análisis molecular depoblaciones indígenas actuales de México. Estas han sidoanalizadas conjuntamente con datos publicados de poblacionesnativas del Norte, Centro y Sudamérica. Para el presente estudiose obtuvieron muestras sanguíneas de seis poblacionesindígenas: Tarahumara, Purépecha, Otomi, Mixteca, Nahua yTriqui, cada una de estas pertenece a alguna de las seis familiaslingüísticas descritas en México. Se analizó la región hipervariableI y algunos marcadores bialélicos dentro de la región codificantedel ADN mitocondrial. Se determinó la composición haplotípicade 293 individuos, encontrando cuatro haplogrupos (A, B; C y D)pertenecientes a poblaciones Amerindias. No se encontró elhaplogrupo X, también descrito en Amerindios, ni tampocohaplotipos no Amerindios. Los índices de diversidad desecuencias, distancias genéticas y composición haplotípicarevelan que estos grupos Mexicanos son muy homogéneos. Seanalizarán marcadores genéticos en el cromosoma Y paracomparar ambos linajes. Los datos que se generen se enfocaránsobre la reconstrucción de la colonización de América, el pasadobiológico y las relaciones filogenéticas de las poblacionesindígenas actuales. De esta manera se podrán dirigir futurosmuestreos para la realización de mapas genómicos de lapoblación indígena mexicana, que será de vital importancia paracorregir la subestructura de poblaciones mezcladas en posiblesestudios de asociación a enfermedades.

GP-04

ASOCIACIÓN DEL POLIMORFISMO +62G/A EN LA REGIÓN3’UTR DEL GEN DE LA RESISTINA CON OBESIDAD YDIABETES.

Fierro-Torres A1, Martinez-Sandoval E2, López-Silva S2,González-Jasso E3, Bernabe A1, Espinoza-Rojo M1.1Unidad Académica Facultad de Ciencias Químico-Biológicas,Universidad Autónoma de Guerrero. 2Unidad Académica deMedicina Universidad Autonoma de Guerrero. 3CICATA.

La resistina es una proteína liberada por adipocitos caracterizadapor la relación directa de la misma con la resistencia a insulina,en el gen (rstn) que la codifica se han encontrado varios SNPs,algunos localizados en regiones no codificantes que pueden influiren la acción de la insulina en interacción con obesidad, en el año2001 Cao y Hegele reportaron dos SNPs uno en la posición+39C>T y otro en la posición +62G/A en la región 3’UTR delexón 4, éste último se estudió en una población chinaasociándose el genotipo GG a hipertensión y diabetes sugiriendoque este SNP podría influenciar la diferenciación y maduraciónde adipocitos contribuyendo a la patogénesis de resistencia ainsulina y DMT2 . En este estudio nuestro objetivo fue detectarel SNP +62G/A localizado en la región 3’UTR en trabajadores dela Universidad Autónoma de Guerrero zona Acapulco yrelacionarlo con la presencia de diabetes y obesidad. El SNP

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+62G/A se identificó por PCR y RFLPs en 204 individuosagrupados en pacientes con DMT2 e individuos normales.RESULTADOS: La variante AA se encontró en menor proporción(22.4%), que la variante GG (77.6%). La frecuencia alélica +62A,fue mayor en los pacientes con DMT2 (0.664) en comparacióncon los controles (0.401). El riesgo bivariado crudo mostróasociación significativa con obesidad abdominal (RM=3,IC95%1.1 a 5.8 p=0.01) y con glucosa arriba de 126 mg/dl (RM=4,IC95%1.8 a 7.0 p=0.000), sin embargo al realizar análisis estratificadola variante AA ya no mantuvo su asociación con la presencia deobesidad abdominal pero si con un riesgo cuatro veces mayorde presentar DMT2 (RM=4, IC95% 2.0 a 8.2 p=<0.000). Lapresencia de DMT2 y el genotipo AA fueron asociados condislipidemias: hipertrigliceridemia (RM=8,IC95% 0.95 a 9.6p=0.002) e hipercolesterolemia en (RM=3,IC95% 1.3 a 7.5p=0.005). Por análisis de regresión logística hubo asociación delgenotipo AA con glucosa alterada en DMT2 (RM=726.5,IC95%87.5 a 6029.8 P=<0.000), encontrando cinco veces masprobabilidad de presentar DMT2 en presencia de dicho genotipo(RM=5, IC95%1.6-18.2 P=0.007). Los resultados del presentetrabajo, determinan que el genotipo homocigoto AA delpolimorfismo +62 G/A en la región 3ÚTR del gen rstn se asociacon la presencia de DMT2 y alteración en la glucosa.

GP-05VARIANTES COMUNES EN LOS GENES QUE CODIFICANPARA LOS CANALES DE K+ SENSIBLES A ATP (SUR1(ABCC8) Y KIR6.2 (KCNJ11)) Y SU RELACIÓN CONDIABETES TIPO 2 (DT2) EN POBLACIÓN ADULTA DE LACIUDAD DE MÉXICO.

Sánchez-Contreras Ma. Elena1; Alonso-García Ana Lucía1;Sánchez-Barrera Reyna Gabriela1; Hernández Saavedra Daniel1;Cruz-López Miguel1.1 Unidad de Investigación Médica en Bioquímica, Centro MedicoNacional Siglo XXI.

La DT2 es un desorden multifactorial caracterizado por defectosen el control de la glucosa y secreción y acción de la insulina.Se ha reportado asociación de DT2 con polimorfismos en losgenes SUR1, KIR6.2; que codifican para proteínas del canal depotasio sensible a ATP (de las células beta-pancreáticas), sensormetabólico crítico en hiperglucemia. Nuestro objetivo fue evaluarsi polimorfismos en los genes SUR 1 y KIR 6.2 se asocian conDT2.Se estudiaron 666 individuos sanos y 485 con DT2 con edadesde 35-65 años. Los polimorfismos analizados fueron: A-1273G(A/G), A1369S(G/T), G-1561A(A/G) en SUR1 y E23K(E/K) enKIR6.2. La discriminación alélica se realizó con sondas TaqManen el equipo 7900HT (AplBios). Y el análisis por estadísticadescriptiva de todos los parámetros y la distribución defrecuencias genotípicas fue validada utilizando X2.Las poblaciones estudiadas se encuentran en equilibrio de Hardy-Weinberg. Las frecuencias genotípicas de la población con DT2para estos polimorfismos no fue significativamente diferente dela encontrada en sujetos sanos. Los polimorfismos evaluadosno muestran asociación con DT2.No se encontró asociación entre los polimorfismos estudiados,particularmente en la asociación alélica reportada en otraspoblaciones para A1369S / KIR 6.2.

GP-06GENOTIPO PON1 192 Y SU ASOCIACIÓN CON EL PERFILDE LÍPIDOS EN UNA POBLACIÓN YUCATECA.

Pérez Herrera, Norma1, May Pech, Carlos1,2, Polanco Minaya,Hilda1,2, Castro Mañé, Jorge2, Gamboa Llanes, Roque2, Alvarado

Mejía, Jorge3, González Navarrete, Leticia3, Hernández Ochoa,Isabel1, Rojas García, Elizabeth1,4, Quintanilla Vega, Betzabet1.1Sección Externa de Toxicología, CINVESTAV, México, D.F.,2Facultad de Química y 3Facultad de Medicina, UniversidadAutónoma de Yucatán, Mérida, Yuc., 4Dirección deFortalecimiento de la Investigación, Universidad Autónoma deNayarit, Tepic, Nay.

México se encuentra en un proceso de transición epidemiológica,en el cual los padecimientos crónico-degenerativos handesplazado a las enfermedades infecciosas. En Yucatán, lasenfermedades cardio- y cerebro-vasculares se encuentran entrelas 3 principales causas de mortalidad. Se han reportado factoresgenéticos de susceptibilidad para estas enfermedades, entre ellosel polimorfismo 192 de la enzima paraoxonasa (PON1), a la cualse le atribuye un papel antioxidante, porque se asocia a laslipoproteínas de alta densidad (HDL), previniendo la oxidaciónde lípidos. Estudios epidemiológicos muestran que la altafrecuencia del alelo PON1

192R se asocia con el riesgo de presentar

enfermedades vasculares. Nuestro objetivo fue conocer elgenotipo PON1

192 en una población mestiza Yucateca y

determinar su asociación con el perfil de lípidos. Se realizó unestudio transversal en Muna, Yucatán (febrero-septiembre de2005) y se incluyeron 90 individuos sin relación consanguínea(previa firma de consentimiento). Se aplicó un cuestionario paraevaluar: características generales, hábitos, dieta e historia clínicay la muestra de sangre se tomó en ayunas. Se determinó elpolimorfismo PON1

192 por PCR en tiempo real y el perfil de lípidos

por métodos colorimétricos. La frecuencia del polimorfismoPON1

192 en esta población mestiza (de fuerte ascendencia maya)

es similar a otras poblaciones mestizas de México. El colesterol-HDL y el índice de Rouffy se encontraron por debajo de los valoresnormales. El análisis multivariado, ajustado por confusores (peso/talla, dieta, etc), mostró que los niveles de colesterol-HDLestuvieron asociados con el genotipo: los sujetos con el genotipoQQ presentaron niveles más altos que los sujetos con el genotipoRR (p=0.039). Este estudio sugiere que el genotipo PON1

192RR

se asocia con bajos niveles de colesterol-HDL y puede ser unfactor de riesgo de enfermedad aterosclerótica. Proyectofinanciado por CONACYT-SALUD; donativo otorgado a BQV. Seagradece a las Autoridades de Muna y a los voluntariosparticipantes.

GP-07HEREDABILIDAD Y CORRELACIONES GENÉTICAS DEFENOTIPOS RELACIONADOS A ENFERMEDADESMETABÓLICAS EN MÉXICO: REPORTE PRELIMINAR DELESTUDIO EN FAMILIAS GEMM.

Raul A. Bastarrachea1, Jack W. Kent Jr.1, Guadalupe Rozada2,Felipe Vadillo2, Jean W. Maccluer1 Y Anthony G. Comuzzie1

1 Department of Genetics, Southwest Foundation for BiomedicalResearch, San Antonio, Texas, USA. 2 Instituto Nacional dePerinatología, México, D.F., México.

La enfermedad cardiovascular aterosclerosa (ECA) es una delas mayores causas de mortalidad en México, y el síndromemetabólico, un conjunto de factores de riesgo de ECA, va enaumento. Hasta ahora, ha habido pocos estudios deepidemiología genética del síndrome metabólico en México.Como un primer paso antes de implementar el estudiomulticéntrico en familias GEMM (Genética de EnfermedadesMetabólicas), se reclutaron 375 individuos de 21 familias extensasen 9 instituciones médicas de México. La selección de las familiasse hizo a conveniencia sin considerar ninguna enfermedad. Serecolectaron datos antropométricos (estatura, peso y perímetroabdominal), hemodinámicos (presión arterial y ritmo cardíaco), y

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se midieron las concentraciones en sangre en ayuno de glucosa,colesterol y triglicéridos. Los análisis de genética cuantitativabasada en los componentes de la varianza se realizaron en elprograma SOLAR. Todos los fenotipos excepto la presión arterialdiastólica fueron significativamente heredables. Algunos fenotipospresentaron un efecto de región aleatorio significativo,posiblemente debido a diferencias sistemáticas del ambiente porel nivel de la población o la frecuencia alélica (p.ej estatura), odiferencias en la técnica de medición (p. ej. Presión arterial).Consistente con la definición del síndrome metabólico, muchosfenotipos presentaron correlaciones ambientales significativas;se encontraron también correlaciones genéticas significativasentre las mediciones de adiposidad, glucosa en ayuno ytriglicéridos en ayuno.Estos datos preliminares representan las primeras estimacionesde heredabilidad para estos fenotipos en México. Los resultadosindican que este diseño ofrece un poder excelente para eldescubrimiento de genes relacionados a enfermedadesmetabólicas.

GP-08EFECTO DE LA DEFICIENCIA DIETÉTICA MATERNA DEVITAMINA B

12 Y LOS POLIMORFISMOS DE LA

METILENTETRAHIDROFOLATO REDUCTASA SOBRE ELNEURODESARROLLO INFANTIL.

Del Río Garcia, Constanza1,2, Torres Sánchez Luisa1,2, ChenJia3, Schnaas Lourdes4, Hernández Chávez Carmen4,OsorioErika4,Cebrián Mariano5,Galván Portillo Marcia1,2, López CarrilloLizbeth1

1Instituto Nacional de Salud Pública,Morelos,Mexico. 2SelikoffFellowship International Training Program in Environmental andOccupational Health. 3Community Medicine Department, MountSinai Medical Center, New York.4Instituto Nacional dePerinatología, Departamento de Neurobiología, MéxicoDF.5Centro de Investigación y de Estudios Avanzados del InstitutoPolitécnico Nacional, México DF.

Objetivo: Evaluar la relación entre la ingesta dietética maternade vitaminas del grupo B y folato durante el primer trimestre delembarazo y el neurodesarrollo infantil de acuerdo con lospolimorfismos maternos de la metilentetrahidrofolato reductasa(MTHFR 677C>T y MTHFR 1298A>C).Material y metodos: Como parte de un estudio de cohorte perinatalrealizado en cuatro municipios del estado de Morelos, seevaluaron a 253 niños productos de embarazos simples, sincomplicaciones al momento del parto, cuyas madres fueronseguidas antes y durante el embarazo. La ingesta dietética devitaminas B

2, B

6, B

12 y folato durante el primer trimestre del

embarazo se estimó mediante un cuestionario semi-cuantitativode frecuencia de consumo de alimentos. A través de técnicas dePCR-RFLP se determinaron los polimorfismos maternos de laMTHFR (677C>T y 1298A>C). El desarrollo mental (DM) ypsicomotor (DPM) de los niños al 1, 3, 6 y 12 meses de edad, seevaluó mediante la aplicación de la prueba de Bayley (BSID-II).El efecto de la ingesta dietética materna de vitaminas B

2, B

6, B

12

y folato durante el primer trimestre del embarazo y lospolimorfismos maternos de la MTHFR sobre el neurodesarrolloinfantil se estimó mediante un análisis multivariado con modelosgeneralizados de efectos mixtos.Resultados: Las frecuencias alélicas 677T y 1298C fueron del59 y 10%, respectivamente. La deficiencia en el consumo devitamina B

12 durante el primer trimestre se asoció de manera no

significativa con una disminución en DPM y una reducciónestadísticamente significativa de 1.4 puntos sobre el DMindependientemente del genotipo MTHFR materno. La ingestadietética <400 mg/d de folato durante el primer trimestre del

embarazo, se asoció de manera no significativa con el DPM yDM sólo entre los niños cuyas madres fueron portadoras delgenotipo MTHFR 677TT.Conclusiones: Nuestros resultados sugieren que la deficienciamaterna de vitamina B

12 durante el embarazo tiene un impacto

negativo sobre el desarrollo mental independientemente delgenotipo de la MTHFR materno. Por el contrario, el efectonegativo del consumo materno deficiente de folato sobre elneurodesarrollo infantil podría estar mediado por el genotipoMTHFR materno. Por lo tanto, se justifica que durante elembarazo la suplementación vitamínica debe incluir vitamina B

12

además del folato.

GP-09RIESGO DE ABORTO ESPONTÁNEO Y POLIMORFISMOSMATERNOS DE LA METILENTETRAHIDROFOLATOREDUCTASA EN MUJERES MEXICANAS.

Rodríguez-Guillén Maria del Rosario 1,2 Torres-Sánchez Luisa1,2 Chen Jia3, Blanco-Muñoz J1, Galván-Portillo M 1,2, Silva-ZolezziI4, López-Carrillo L1.1Instituto Nacional de Salud Pública,Morelos,Mexico. 2SelikoffFellowship International Training Program in Environmental andOccupational Health. 3Community Medicine Department, MountSinai Medical Center, New York, 4Instituto Nacional de MedicinaGenómica, México DF.

Con el objetivo de evaluar el riesgo de aborto espontáneo enmujeres mexicanas portadoras del polimorfismo de lametilentetrahidrofolato reductasa (MTHFR) (677 C>T y 1298

A>C); se llevó a cabo un estudio de casos y controles anidadoen una cohorte perinatal de mujeres residentes en cuatromunicipios del estado de Morelos, México. Veintiocho casos deaborto espontáneo (edad gestacional ≤ 20 semanas) fueroncomparados con 106 mujeres aún embarazadas para el momentode aparición del caso. Al inicio de la cohorte, se aplicó uncuestionario estructurado, con el que, se obtuvo informaciónacerca de las características sociodemográficas y dietéticas, elconsumo paterno de alcohol y el hábito tabáquico materno ypaterno. La determinación de los polimorfismos maternos de laMTHFR (677 C>T y 1298 A>C) se realizó mediante técnicas dePCR-RFLP y la concentración sérica de homocisteina se evaluómediante cromatografía de líquidos (HPLC). El riesgo de abortoespontáneo según tipo de polimorfismo bajo estudios se estimóa través de modelos de regresión logística.Resultados: En comparación con los controles, los casospresentaron una mayor frecuencia genotípica MTHFR 677TT

(35.7% vs. 25.4%), aunque esta diferencia no fueestadísticamente significativa. El genotipo MTHFR 1298CC sepresentó sólo en uno de los casos. Entre los controles ambosgenotipos se encontraron en equilibrio de Hardy-Weinberg. Bajoun modelo de herencia recesivo, las mujeres portadoras delgenotipo 677TT tuvieron un incremento significativo en el riesgoajustado de aborto espontáneo (OR=5.0; IC

95%:1.2; 20.9)

comparado con las portadoras del genotipo 677CC/CT. Asímismo, una asociación positiva y marginalmente significativa conel aborto espontáneo (OR=5.5 95%CI: 0.9; 11.5) se observócuando comparamos a las portadoras del genotipo 1298AA vs.

1298AC/CC.Conclusión: Nuestros resultados concuerdan con reportesprevios, en los que se sugiere la importancia de los polimorfismos(MTHFR 677 C>T y 1298 A>C) como potenciales determinantesdel aborto espontáneo.

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GP-10DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA DE LOS POLIMORFISMOSASOCIADOS A DIABETES MELLITUS TIPO 2 ENPOBLACIÓN MEXICANA.

L. del Bosque-Plataπ, A. Inchausteguiπ, K. Carrillo-Sanchezπ,G. Jimenez-SanchezππInstituto Nacional de Medicina GenómicaLa diabetes mellitus tipo 2 (DT2) afecta aproximadamente al 5%de la población general; en Mexico la prevalencia es de ~10.8%.Se han reportado varios genes con variantes asociadas alincremento de riesgo a la DT2; sin embargo, solo pocas de esasasociaciones han sido replicadas. Más del 80% de la poblaciónmexicana es mestiza, resultado de la mezcla entre los españolescon cualquiera de los 62 grupos étnicos que vivian en Meso-América. Para explorar la hipótesis de la existencia de diferenciasentre las frecuencias alélicas de las variantes asociadas a DT2en diferentes regiones geográficas de México, analizamosvariantes en 9 genes previamente asociados a la enfermedad(p<0.01): receptor de la sulfonilurea (ABCC8), canal rectificadorde potasio (KCNJ11), receptor de glucagón (GCGR), receptoresactivados por el proliferador de peroxisomas gama (PPARG),factor nuclear de hepatocitos 4 alfa (HNF4A), miembro 1 de lafamilia clase 2 de acarreadores de solutos (SLC2A1), calpaína10 (CAPN10), glucocinasa (GCK) y el factor de transcripción 7similar al 2 (TCF7L2). Incluimos 1104 individuos de 6 estados deMéxico (50% mujeres y 50% hombres): Guanajuato, Guerrero,Sonora, Veracruz, Zacatecas y Yucatán. Los resultados inicialesincluyen las frecuenicas alélicas menores (FAM) promedio, asícomo los rangos entre las frecuencias más bajas y más altas porestados: 1) PPARG (rs1801282) G=0.12 (0.06-0.17); 2) CAPN10

(rs297576) G=0.09 (0.07-0.13); 3) KCNJ11 (rs5219) T=0.39 (0.36-0.44); 4) HNF4A (rs2144908) A=0.49 (0.43-0.58); and, 5) TCF7L2

(rs185384) A=0.19 (0.15-0.26). Comparamos el promedio deFAMs de las poblaciones mexicanas mestizas con las reportadaspor el HapMap. Interesantemente, el SNP común funcional delgene KCNJ11 analizado muestra FAMs mayores en todos losestados de Mexico (Zacatecas 0.45, Sonora 0.39, Veracruz 0.39,Guanajuato 0.38, Guerrero 0.37, y Yucatán 0.37), que lasreportadas para caucásicos de Utah (0.34), africanos de Yoruba(0.08), chinos Han (0.24) y japoneses de Tokio (0.30). En algunosde las otras variantes estudiadas existen estados con FAMsmayores a las reportadas en las poblaciones del HapMap. Losresultados iniciales soportan la hipótesis de que la poblaciónmestiza mexicana tiene diferencias entre regiones geográficas yen con otras poblaciones del mundo (HapMap); esta informacióncontribuirá a estratificar las poblaciones en los estudios deasociación y incrementará nuestro conocimiento de lapredisposición genética a la DT2.

GP-11POLIMORFISMOS -148C/T Y -455G/A EN EL PROMOTORDEL GEN QUE CODIFICA PARA LA CADENA BETA DELFIBRINÓGENO EN PACIENTES CON DIABETES TIPO 2 YOBESIDAD.

Torres-Rojas, Carolina1; Flores-Alfaro, Eugenia1; Velasco-Mondragón, Eduardo2; Parra-Rojas, Isela1; Espinoza-Rojo,Mónica1.1Unidad Académica Facultad de Ciencias Químico Biológicas.Universidad Autónoma de Guerrero. 2 Instituto Nacional de SaludPública. Cuernavaca, Mor., México.

Uno de los avances más importantes hasta el momento ha sidola identificación de los principales factores de riesgo aterogénicospara las enfermedades cardiovasculares (ECV), como la

hipertensión arterial, las dislipidemias, el tabaquismo, la obesidad,la DM-2 y el incremento en los niveles del fibrinógeno. En lasíntesis del fibrinógeno el gen de la cadena beta ejerce funciónreguladora, de modo que varios polimorfismos de este gen hansido identificados y están asociados con elevados nivelesplasmáticos de fibrinógeno y con la ECV. Los polimorfismos quese han asociado con el aumento de la proteína del fibrinógenoson el -148C/T y -455G/A. Dada la relación existente entre lapresencia de Diabetes y las enfermedades cardiovasculares, yla estrecha relación de esta última con el incremento de los nivelesdel fibrinógeno, es importante evaluar la asociación de lospolimorfismos -148C/T y -455G/A con la presencia de DM-2 yobesidad en personas de Chilpancingo, Gro. Para ésto se realizóun estudio transversal en donde se analizaron 335 muestras deDNA por PCR y RFLPs para detectar los polimorfismos, 117muestras de pacientes aparentemente sanos, 50 DM-2 conobesidad, 88 DM-2 sin obesidad y 60 obesos. En donde el ORcrudo y ajustado obtenido evidenció asociación del genotipo CTdel polimorfismo -148C/T, con la presencia de obesidad y DM-2con obesidad, en donde el grupo de pacientes obesos tuvo unOR ajustado de 3.3 (IC

95% 1.7-6.2). El grupo de DM-2 con

obesidad el OR obtenido mostró que este grupo de pacientestiene mayor probabilidad de presentar el genotipo CT encomparación con el grupo de obesos, con un OR ajustado de 7.8(IC

95% 2.9-21.2). Con respecto al genotipo de riesgo AA del

polimorfismo -455G/A, esté se asoció con la presencia deobesidad, encontrando un OR ajustado de 4.0 (IC

95% 0.7-21.7),

aunque está asociación no fue estadísticamente significativa. Elgenotipo GA se asoció significativamente con la presencia deDM-2 con obesidad (OR ajustado, 2.4; IC

95% 1.1-5.1). Por lo que

se sugiere que los polimorfismos analizados en este estudio, seasociaron con la presencia de obesidad y no con DM-2, y queesta asociación se potencia más en los pacientes que presentan

DM-2 con obesidad.

GP-12MESTIZAJE EN LA CIUDAD DE MÉXICO: IMPORTANCIA DELA MEZCLA GÉNICA EN LA IDENTIFICACIÓN DEFACTORES GENÉTICOS DE RIESGO ASOCIADOS ADIABETES TIPO 2.

Valladares Adan, PhD1, Cameron Emily A, BSc2, Martinez-Marignac Veronica L, PhD2, Chan Andrea, BSc2, Perera Arjuna,BSc2, Globus-Goldberg Rachel, BSc2, Wacher Niels, MD, M.Sc3,Kumate Jesus, MD, PhD4, McKeigue Paul M, PhD5, O’DonnellDavid, PhD5, Shriver Mark D, PhD6, Parra Esteban J, PhD2, CruzMiguel, PhD1.1Unidad de Investigación Médica en Bioquímica, Hospital deEspecialidades, Centro Médico “Siglo XXI”, IMSS, México;2Department of Anthropology, University of Toronto, Mississauga,Ontario, Canada, L5L 1C6; 3Unidad de Investigación Médica enEpidemiología Clínica, Hospital de Especialidades, Centro Médico“Siglo XXI”, IMSS, Mexico; 4Fundación IMSS, México; 5ConwayInstitute, University College Dublin, Dublin, Ireland and6Department of Anthropology, Penn State University, USA.

Se identificó el porcentaje del componente genético en un grupode 286 individuos con diabetes tipo 2 (DT2) y 275 individuossanos no relacionados, sin antecedentes familiares de DT2,ambos grupos viven en la Cd de México. La proporción de lamezcla génica fue evaluada con 69 marcadores autosómicosinformativos ancestrales (AIMs). También se estimó lacontribución materna mediante polimorfismos del mtDNA y lacontribución paterna mediante los polimorfismos del cromosomaY. La contribución génica de la población nativa americana,europea y africana fue de 65%, 30% y 5 %, respectivamente. La

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contribución nativa americana vía materna fue estimada en 90%y la paterna en 40 %. El número de generaciones ancestrales seestimó en 6.7 (95%, IC 5.7-8.0), por lo tanto, se requieren 1,400AIMs para mapear todo el genoma. También se requerirá untamaño de muestra de 2000 casos aproximadamente paradetectar aquellos locus que contribuyan con un riesgo de al menos1.5 veces. Este enfonque, probablemente, nos permita identificarvariaciones en los genes de riesgo a enfermedades para lapoblación mexicana y europea.

GP-13ANÁLISIS DE SNP´S EN GENES CANDIDATOS QUECONFIEREN SUSCEPTIBILIDAD A DESARROLLARARTRITIS REUMATOIDE JUVENIL EN PACIENTESPEDIÁTRICOS MEXICANOS.

Ramírez-Bello J.1,2, Baca-Ruíz V. 3, Velázquez-Cruz R.1, Morales-Marín M. 1, Espinosa-Rosales F. 4, Zarco, O 4, García-Díaz E.1,Orozco L1,2

1. Instituto Nacional de Medicina Genómica, SS. 2. Programa deMaestría en Ciencias Genómicas, UACM. 3. Hospital de PediatríaCentro Médico Nacional-Siglo XXI, IMSS, 4. Instituto Nacionalde Pediatría, SS.

La Artritis Reumatoide Juvenil (ARJ) es la artropatía autoinmunecrónica más común en niños, se caracteriza por inflamaciónarticular persistente, dolor, rigidez, e incapacidad para realizarmovimientos. La prevalencia de esta enfermedad multifactoriales de aproximadamente 1 de cada 1000 niños. Entre los factoresgenéticos que confieren susceptibilidad se han encontradopolimorfismos de un solo nucleótido (SNP´s) en los genes IL1

alfa, CCL5, TAP2, TSNP, MCP1, IKBL. Estas variantes alélicasse encuentran asociadas a la enfermedad sólo en ciertaspoblaciones, por lo que el objetivo de este trabajo es determinarsi SNP´s localizados en estos genes se encuentran asociados ala susceptibilidad para desarrollar ARJ. Para evaluar estaasociación se incluyeron 132 pacientes pediátricos mexicanoscon diagnóstico de ARJ con una edad de inicio menor a 16 añosy como controles 250 individuos sanos sin antecedentes de ARo cualquier otra enfermedad autoinmune. Todos los casosincluidos fueron diagnosticados siguiendo los criterios del ColegioAmericano de Reumatología. Tanto los casos como los controlesfueron individuos no relacionados y fueron parearos por sexo yorigen étnico. Para realizar la genotipificación de los SNP´s seutilizó el método fluorescente de 5’ exonucleasa (Taqman). Laasociación de los SNP´s con ARJ se determinó comparando lasfrecuencias genotípicas y alélicas entre los casos y controlespor medio de chi-cuadrada y la prueba exacta de Fisher. Nuestrosresultados muestran que la frecuencia de los SNP´s en los genesIL1 alfa -889G/A, CCL5 –28C/G, TAP2 Ala565Thr, TPSN

Thr265Arg, MCP1 –2518G/A fueron similares entre casos ycontroles. Sin embargo, la frecuencia de los SNP´s – 403G/A deCCL5 y – 62T/A de IKBL mostraron diferencias estadísticamentesignificativas entre pacientes y controles (SNP –403G/A: p=0.02,OR: 2.4, IC: 1.12-5.10; SNP –62T/A: p=0.015, OR: 2.19, IC: 1.15– 4.17). Los resultados obtenidos en este estudio sugieren quelos SNPs – 403 G/A de CCL5 y –62 T/A de IKBL participan en lasusceptibilidad para desarrollar ARJ en pacientes pediátricosmexicanos.

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ANÁLISIS COMPARATIVO DE LA VARIACIÓN DE LOSPOLIMORFISMOS EN EL NÚMERO DE COPIA ENTREPOBLACIONES MESTIZA MEXICANA Y EUROPEA.

Uribe-Figueroa Laura, Hidalgo-Miranda Alfredo, Silva-ZolezziIrma, Estrada-Gil, Jesús, Arrieta Maylen, Contreras Alejandra,Jiménez-Sánchez Gerardo.Instituto Nacional de Medicina Genómica. México.

Las variaciones en el número de copia (VNC) se han identificadorecientemente como una forma de diversidad genómica entreindividuos. Inicialmente, las VNC fueron relacionadas consusceptibil idad a enfermedades como el cáncer, perorecientemente se ha demostrado que también puedencaracterizar diferencias genéticas importantes entre grupospoblacionales.El objetivo del presente trabajo fue analizar las variantes en elnúmero de copia de 300 muestras de ADN de voluntarios mestizosde 6 estados de la República Mexicana utilizando microarreglosde Genotipificación 100K de Affymetrix . Los resultados seanalilzaron con el software DChip y se compararon con datos de60 muestras de la población caucásica (CEU) del proyectoInternacional del Mapa de Haplotipos analizadas con la mismaplataforma tecnológica. Para el análisis comparativo entrepoblaciones, se calculó el cambio en el número de copias de lapoblación mexicana y luego se comparó con los datos de las 60muestras europeas que, para fines del análisis, se consideraroncomo control normal diploide. Los resultados muestran que enlos individuos de los distintos estados de la Repúbica Mexicanano se observan diferencias en VNC entre los seis estadosanalizados. Sin embargo, al compararlos con los datos de las 60muestras europeas, se observaron en más del 20% de los casos,regiones con menos de una copia (deleciones) y regiones conmás de 5 copias (amplificaciones) en un 15% del total analizado.El análisis comparativo in silico con las muestras europeas mostróuna importante variabilidad en VNC, siendo estas tanto delecionescomo amplificaciones, en más del 50% de la población mexicana.Los resultados muestran que la población Mestiza Mexicanaanalizada es, homogénea en las VNC, y tiene diferencias clarasal compararse con las muestras de origen caucásico. Lacaracterización de las diferencias en VNC entre distintos grupospoblacionales es importante para entender la influencia de estasvariantes estructurales en la enfermedad humana. La validaciónde las VNC encontradas en la población mexicana al compararlacon la europea son el siguiente paso para determinar el poderde discriminación de estas variantes para el estudio a nivelgenómico de nuestra variabilidad. El conocer las VNC inherentesa una población específica resulta de gran valor para establecerun patrón de comparación que permita identificar aquellas VNCde relevancia médica.

GP-15ALTERACIONES EN DNMT1 Y 3B Y METILACIÓN DEPROMOTORES DE LOS GENES MGMT, FHIT, HMSH2,HMLH1 DURANTE LA CARCINOGÉNESIS CERVICAL

Daniel Hernández Sotelo, Berenice Illades Aguiar, Marco AntonioLeyva Vázquez, Yaneth Castro Coronel, Julio Ortiz Ortiz, AuroraCastillo Laguna, Diana Canela Campos y Yaliccia Jahel GonzálezBarrientos.Unidad Académica Facultad de Ciencias Químico Biológicas, Labde Biomedicina Molecular.

Introducción: La metilación de promotores de genes supresoresde tumor y reparadores de DNA es un evento común en cáncer

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cervical. Existen evidencias que señalan que la metilación enpromotores ocasiona disminución o silenciamiento en la expresiónde genes. La metilación es catalizada por DNA-metiltransferasas,las cuales se dividen en dos, de mantenimiento (DNMT1) y de

novo (DNMT3B). En distintos tipos de cáncer se han encontradoalteraciones en el nivel de expresión de DNMTs. Recientementese reportó el polimorfismo C46359T en el promotor de laDNMT3B, del cual el genotipo CT confiere un promotor másfuerte, además pacientes con este genotipo tienen mayor riesgode desarrollo de cáncer de mama. Por lo que las DNMTs, enespecial la 3B, tienen un papel clave en la metilación anormal yen consecuencia en el desarrollo de cáncer.Objetivo: Investigar el papel de la DNMT1 y 3B en la metilaciónde genes reparadores de DNA y supresores de tumor durante lacarcinogénesis cervical.Métodos: Se realizó un estudio transversal analítico. Serecolectaron 140 muestras en el Instituto Estatal de Cancerología“Dr. Arturo Beltrán Ortega” de Acapulco Guerrero, 40 de citologíacervical normal, 39 de lesión escamosas intraepitelial de gradobajo (LEIGB), 20 de lesión intraepitelal escamosa de alto grado(LEIGA) y 41 de cáncer cervical. Se detectó, mediante PCR-SM,la metilación de los promotores de los genes MGMT, FHIT, hMSH2y hMLH1. Mediante RT-PCR semicuantitativa se determinó elnivel de expresión de MGMT, FHIT, DNMT3B y DNMT1 ymediante PCR y RFLPs se genotipificó el polimorfismo C46359Tde DNMT3B. Por PCR (MY09/MY11)-RFL¨s se detectó ygenotipificó al VPH. Las asociaciones entre variables seestablecieron mediante la prueba exacta de Fisher’s o X2. Lasdiferencias en el nivel de expresión de los genes MGMT, FHIT,DNMT3B y DNMT1 se establecieron con la prueba de MannWhitney. P < 0.05 se consideró estadísticamente significativa.Resultados: En citología normal se detectó metilación en losgenes MGMT 17.5%, FHIT 37.5% y hMLH1 77.5%. En LEIGB,MGMT 38.5%, FHIT 46.1%, hMSH2 14.3% y hMLH1 90.5%. EnLEIGA, hMSH2 25% y hMLH1 55%. En cáncer cervical, MGMT36.6%, FHIT 53.6%, hMSH2 5% y hMLH1 95%. El nivel deexpresión de los genes MGMT y FHIT fue significativamente masbajo en cáncer cervical que en citología normal (P=0.01 yP=0.009, respectivamente). La expresión de DNMT1 y 3B fuemás alta en cáncer cervical y LEIGA que en LIEGB y citologíanormal. El genotipo CT de la DNMT3B fue el más frecuente encáncer cervical, LEIGA, LEIGB y citología normal (88.8%, 82.1%,69.9% y 86%). Los heterocigóticos CT mostraron un incrementode casi 5 veces el riesgo de cáncer cervical, comprados con loshomocigóticos CC (OR=4.9, IC 95%, 0.45-247.2).Conclusión: Existen alteraciones en la expresión de las DNMTsen cáncer cervical y lesiones precancerosas. La expresión de laDNMT3B es alta en cáncer cervical y el genotipo heterozigóticoCT del polimorfismo C46359T de la DNMT3B, es el más comúnen la población estudiada, lo que indica que todas las alteracionesen las DNMTs podrían ser las responsables de la metilaciónanormal en los genes MGMT, FHIT, hMLH1 y hMSH2 durante eldesarrollo del cáncer cervical.

GP-16MESTIZAJE Y BLOQUES GENÉTICOS DEL HLA:IMPLICACIONES EN EPIDEMIOLOGÍA MOLECULAR.

Barquera, Rodrigo1,2, Torres-García, Diana1, Montoya-Gama,Karla1, Hernández-Díaz, Raquel2, García-Salas, Claudia3, Acuña-Alonzo, Víctor1,2 y Granados, Julio4.1Laboratorio de Genética Molecular, ENAH, México, 2Laboratoriode Fisiología, Bioquímica y Genética, ENAH, México,3Departamento de Farmacia, Facultad de Química, UNAM,México, 4Departamento de Reumatología e Inmunología,INCMNSZ, México

La definición de mestizo mexicano es muy general y pocoinformativa desde el punto de vista genético. La relación genes-ambiente va estrechamente ligada al contexto del mestizaje enla medida en que este último introduce nuevas variantes alélicasen una población. La única manera confiable de estudiar bloquesgenéticos en marcadores autosómicos sujetos a recombinaciónes la tipificación de tríadas padre-madre-hijo para armarhaplotipos, teniendo un reflejo fiel de la asociación en vez deuna estimación estadística. De esta manera se puede calcularadecuadamente el valor delta para medir el Desequilibrio deLigamiento (LD) entre dos alelos de loci cercanos. Los genes delAntígeno Leucocitario Humano (HLA, por sus siglas en inglés)codifican para proteínas presentadores de antígenos, siendofundamental su estudio y entendimiento como parte de muchasenfermedades, tanto infecciosas como autoinmunes. Estesistema genético es el más polimórfico en el ser humano y aunquesus alelos se encuentran distribuidos globalmente existencontrastes entre algunas frecuencias alélicas y haplotípicas quepermiten utilizarlo para estudios poblacionales. Mediante elestudio de las frecuencias de los alelos y los bloques genéticosdel HLA se estudió la composición genética y se estimó elcomponente ancestral amerindio, europeo y africano que poseen3 poblaciones mestizas de México: la Ciudad de México, Pueblay Sinaloa, siendo el primer reporte para esta última. En losmestizos, se encontraron alelos y haplotipos previamentereportados en las poblaciones ancestrales. Las asociaciones másfuertes en los tres casos son aquellas previamente reportadasen poblaciones europeas, seguidas por asociaciones amerindias.La diferencia en la contribución ancestral observada entre losdistintos grupos mestizos justifica la necesidad de contar congrupos control bien caracterizados para elaborar estudios deasociación que controlen la variación etnogenética de acuerdo ala procedencia de la muestra.

Farmacogenómica yTerapéutica Molecular

FTM-01EL PULQUE; ALIMENTO FUNCIONAL DE ETNIASMESOAMERICANAS.

Lemus-Fuentes, EnriqueInstituto de Agroindustrias, Universidad Tecnológica de la Mixteca,Huajuapan de León, Oax.

Una mezcla de información, obtenida tanto de técnicas de análisissofisticadas actuales así como de registros arqueológicos ydocumentos de la colonia, permiten sugerir al pulque que contieneprebióticos y probióticos entre otros nutrientes, como alimentofuncional. Escalante et al, 2004, usando la técnica 16S rDNA,reportan una importante cuantificación de microorganismos enel pulque, es de destacar que los microorganismos encontradosse consideran probióticos. El alto contenido de fructoligosacáridoen el aguamiel, permite señalar su función como prebiótico. Eluso del pulque en Mesoamérica ha quedado registrado en vasijasque se datan entre el año 600 al 800 dC. Sus aplicaciones tantoceremoniales como medicinales también se han mencionado porSahagún [4] y en documentos de la colonia como el códiceFlorentino o el códice Badiano. En vista de la actualidad de losprobióticos y prebióticos como altamente efectivos en la supresiónde tumores cancerígenos [1, 2, 3, 5], flatulencias, etc., cobraespecial relevancia los antecedentes del consumo prehispánicodel pulque. Así, el pulque debe considerarse como un vehiculode administración de probióticos y prebióticos. Los consumidores

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ya no esperan que los alimentos solo los nutran con proteínas,calorías y vitaminas, sino que además les ayuden a mejorar elfuncionamiento del organismo. El pulque ha sido consumido porlas etnias que poblaban originalmente Mesoamérica, con esto,se puede inferir de que el consumo del pulque en dosismoderadas tiene un riesgo bajo en estas poblaciones.

FTM-02USEFULNESS OF CYP2C9 GENOTYPING AND INDIVIDUALVARIABILITY IN RESPONSE TO WARFARIN.

Raggio Víctor1, Esperón Patricia1,2, Tabú Irene3, LorenzoMariana1, Cuesta Alejandro3, Rodríguez Adriana3, Ortiz Virginia3,Kuster Fernando3, Lluberas Ricardo3, Stoll Mario1

1Área de Genética Molecular, Comisión Honoraria para la SaludCardiovascular. 2Cátedra de Biología, Fac. Química Montevideo.3Depto. Cardiología del Hospital de Clínicas, Facultad deMedicina. Montevideo, Uruguay

Warfarin is a widely used oral anticoagulant whose dosificationrequires serological monitoring with INR (International NormalizedRatio) because narrow therapeutic index and potencially severeadverse effects. Polymorphic variants in various genes modulateindividual response to this drug, especially CYP2C9. We studiedthe influence of these genetic variants on interindividual variabilityin response to warfarin and the risk of adverse reactions in anuruguayan population.Methods:The study involved 55 patients undergoing chronic oralanticoagulant treatment. Data on maintenance dose,pharmacokinetic response, and adverse reactions were obtained.CYP2C9 *1, *2 and *3 genotype was analyzed using commercialkits (ATGen Sistemas Moleculares–Celsius, Uruguay).Results:Carriers of CYP2C9 *3 allele requiered the lessermanteinance doses, followed by *2 allele carriers and then *1homocygotes (4.4±1.0 vs 5.4±2.3 vs 7.0±3.6 mg/d, p=0.049). NoCYP2C9*3 allele carrier received a maintenance dose of 8 mg/dor higher vs 13% of *2 carriers and 39% of *1 homocygotes(p=0.015). CYP2C9 *3 allele carriers had an increased risk ofbleeding and overanticoagulation (67% vs 57%), and requiredalmost twice dose adjustments to achieve a properanticoagulation, compared with *1 homocygotes. The group ofCYP2C9 *2 allele carriers did not have an increased risk ofbleeding. The two episodes of mayor bleeding ocurred in patientscarrying CYP2C9 variant alleles.Conclusions: this study is the first carried out on this subjet in auruguayan population and confirms an increased sensibility towarfarin in carriers of CYP2C9 *2 and *3 alleles, as widelydescribed in previous reports.We propose, as a clinical application of pharmacogenetics in apreventive program, that genotypic data should be consideredwhen establishing the best individual dose in patients: 1-at highrisk of bleeding, 2- who suffered an adverse effect, or, 3-youngpeople who would potentially face a long term anticoagulanttherapy.

FTM-03ENZIMAS DE ARN COMO HERRAMIENTAS DE SUPRESIÓNGÉNICA CONTRA EL VPH-16.

Aquino-Jarquin Guillermo y Alvarez-Salas Luis Marat.Laboratorio de Terapia Génica. Departamento de Genética yBiología Molecular. CINVESTAV-IPN.

Una estrategia atractiva para conseguir un bloqueo específicode la expresión génica, es mediante el empleo de ácidos nucleicosantisentido. Las ribozimas son moléculas de ARN dotadas deactividad catalítica, identificadas como las primeras moléculas

de naturaleza no proteica capaz al mismo tiempo de almacenarinformación genética y de manifestar una actividad enzimática.La demostración de que el ARN puede ser cortado por ribozimasque actúan en cis (intramolecularmente) y en trans

(intermolecularmente), ha permitido el diseño de un nuevoconcepto de sistemas de expresión de múltiples ribozimas.Nosotros utilizamos ARNs catalíticos como modelo para eldesarrollo de ARNs terapéuticos contra el cáncer cervical.Previamente desarrollamos dos ribozimas hairpin (HP), R419 yR434, que inducen la supresión específica del ARNm del Virusdel Papiloma Humano tipo 16 (VPH-16). Esto produjo la inhibiciónde la proliferación tanto de células inmortalizadas con VPH-16como de células tumorales. Ahora, hemos desarrollado dossistemas de expresión de múltiples ribozimas basados en el corteen cis y en trans de ribozimas HP, que permite la actividadindependiente de varias ribozimas terapéuticas provenientes deun solo transcrito dentro de un ambiente intracelular. Debido asu diseño original, uno de ellos potencia la supresión del ARNmde E6/7 del VPH-16 y previene el escape de mutantes alincrementar la cantidad y tipo de ribozimas desplegadas..

FTM-04PRODUCCIÓN DE RATONES KNOCK-IN QUE EXPRESANPROTEÍNAS DE FUSIÓN WAP-GNRH.

Macías-Riveros, Dolly1; Vázquez-Chagoyán, Juan Carlos1;Alonso-Morales Rogelio2 y Cajero-Juárez Marcos3.1Centro de Investigación y Estudios Avanzados en Salud.Universidad Autónoma del Estado de México. 2Laboratorio deGenética y Biología Molecular de la FMVZ de la UNAM y 3Centrode Estudios Multidisciplinarios en Biotecnología de la UniversidadMichoacana de San Nicolás de Hidalgo.

Un organismo genéticamente modificado (OGM) es aquel quelleva en su genoma fragmentos de ADN exógeno, ya seandeleciones o inserciones con pérdida o ganancia de función ytransmite esos cambios a sus descendientes por vía germinal.La generación animales con genes recombinantes dirigidos paraque se expresen en determinados tejidos mediante promotoresespecíficos, constituye una valiosa herramienta para el estudiode la función génica, de la fisiología del desarrollo y del origen de algunasenfermedades, así como el posible diseño de tratamientos y laproducción de proteínas de valor farmacológico. El procesopostraduccional de una proteína es definido por el organismoque la produce aprovechando la maquinaria enzimática naturalcelular para obtener un péptido específico. Así, se planteó comoobjetivo producir proteínas recombinantes en leche a través demutagénesis dirigida. Se han generado transgenes de inserciónaleatoria y específica, pero no se ha producido la proteínarecombinante de fusión WAP-GnRH. Se eligió la GnRH,neurohormona gonadotrópica péptidica de 10 aminoácidos,importante en la reproducción, porque actúa sobre los receptoresespecíficos hipofisiarios de las hormonas luteotropas y folículoestimulantes (LH y FSH) y genera los pulsos determinantes dela función reproductiva. El fragmento resultante de la fusión demWAP del inglés Whey acidic protein, proteína ácida sérica dela leche más GnRH, se purificó y se transfectó en células madrede ratón (ES). Blastocistos obtenidos de ratonas donadoras semicroinyectarán con las ES transfectadas y purificadas; estosembriones híbridos se transfieren a hembras receptoras. Elestudio se ha dividido en tres fases que obedecen a lametodología de la de producción de animales knock in. Fase I:Diseño y construcción del vector. Fase 2: Cultivo, transfección ypurificación de células ES. Fase 3: Producción de ratones quegeneren proteína recombinante de fusión,.

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FTM-05EL INHIBIDOR DE DESACETILASA DE HISTONAS ÁCIDOVALPRÓICO INDUCE LA TRANSCRIPCION DELRECEPTOR ADENOVIRUS-COXACKIEVIRUS (CAR) INVITRO E IN VIVO.

Avalos, Berenice1, Rangel, Edgar1, Segura, Blanca1, Benítez,Jorge1, Velázquez, Dora1, Barrón, Eva1,3, Pérez, Delia3, Aguilar,José Luís2, Martínez-Said, Héctor4, Cabrera, Gustavo1 .

1Laboratorio de Vectorología y Terapia Génica y Departamentosde 2Oncología, 3Patología y 4Cirugía, Instituto Nacional deCancerología, México DF, México.

Introducción- El éxito de las estrategias de transgénesis para eltratamiento del cáncer depende de la transducción eficiente delas células tumorales. La presencia del receptor adenovirus -coxackie (CAR) en las células que constituyen la masa tumorales un requisito indispensable para lograr una eficiente infecciónadenoviral. Se ha documentado que en diferentes líneas celularesde cáncer existe una baja o nula expresión del receptor CARasociada con el grado de des-diferenciación celular con laconsecuente repercusión en perfiles sub-óptimos de transducciónadenoviral. Se ha propuesto que dicho obstáculo podría serresuelto mediante la inducción transcripcional farmacológicautilizando inhibidores de desacetilasas de histonas (HDACi) yaque reportes recientes indican que la transcripción del gen CARes regulado por mecanismos epigenéticos, principalmente laacetilación de histonas. El ácido valpróico ha sido utilizado parael tratamiento de desordenes bipolares y epilepsia y posee lacaracterística de ser un inhibidor de HDACs. Objetivo- En elpresente trabajo estudiamos el efecto del ácido valpróico sobrela actividad de HDACs, acetilación de histonas H3 y H4, nivelesdel mRNA de CAR y transducción adenoviral en células de cáncerde mama (MCF-7), de cervix (HeLa) y de de vejiga (T24), y enmuestras de pacientes con cáncer cervico uterino tratadas convalproato de magnesio. Resultados- Se documentó lahiperacetilación de histonas H3 y H4 como resultado de la accióninhibitoria de la enzima desacetilasa de histonas del valproatode magnesio. Se observó la inducción transcripcional del genCAR mediante RT-PCR semi cuantitativo; así como un incrementoen el perfil de transducción adenoviral en las líneas celularesestudiadas. Finalmente se documentó la inducción del receptorCAR en muestras de cáncer cérvico uterino de pacientes tratadascon valproato de magnesio. Conclusiones- El valproato demagnesio es un inhibidor eficiente de HDACs el cual generahiperacetilación de las histonas H3 y H4 y libera la represióntranscripcional del gen CAR mediada por HDACs en células HeLa,MCF-7 y T24. Así mismo, se incremento la transducción génicamediada por adenovirus recombinantes. Se observóhiperacetilación de las histonas H3 y H4 en muestras de tejidotumoral de cáncer cervico-uterino de pacientes tratadas convalproato de magnesio. Estos resultados respaldan la propuestade adicionar iHDACs a los esquemas de transgénesis terapéuticadel cáncer en estudios clínicos con el objeto de mejorar los perfilesde transducción adenoviral tumoral.

FTM-06INHIBIDORES DE DESACETILASAS DE HISTONASSUPRIMEN LA EXPRESIÓN DEL TRANSGEN REGULADOPOR UN PROMOTOR GLIAL ESPECÍFICO EN CÉLULAS C6.

Benítez, Jorge Alejandro1, Avalos, Berenice1, Rangel, Edgar1,Segura, Blanca1, Velázquez, Dora1, Barrón, Eva1,3, Pérez, Delia3,Aguilar, José Luís2, Martínez-Said, Héctor4, Segovia Jose5

Cabrera, Gustavo1

1Laboratorio de Vectorología y Terapia Génica y Departamentosde 2Oncología, 3Patología y 4Cirugía, Instituto Nacional de

Cancerología y 5Departamento de Fisiología, Biofísica yNeurociencias, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados,México DF, México.

Introduccion- Para lograr un efecto anti-neoplásico específico sindañar el tejido no neoplásico mediante transgénesis terapéutica,se han empleado promotores tumor o tejido específicos. Noobstante, los niveles de expresión de los genes terapéuticosregulados por promotores específicos no son óptimos, debidoen parte, a cambios epigenéticos sobre el genoma del vector detransferencia viral en la célula transfectada. Una forma de regularestos cambios epigenéticos e incrementar la expresión deltransgen terapéutico, es empleando inhibidores de des-acetilasasde histonas (iHDACs), como el valproato de magnesio (VPA) y latricostatina A (TSA).Objetivo- Optimizar el perfil de expresión de genes reporteros apartir de un promotor viral ubicuo (CMV) y de un promotor glial-específico (gfa2), mediante el uso de adenovirus recombinantescomo vectores de transferencia génica, en una línea celularderivada de astrocitoma murino (C6) utilizando dos iHDACs: VALy TSA.Resultados- Inicialmente, demostramos un incremento dosis-dependiente en la actividad de expresión del gen reporteroluciferasa, en células C6 transducidas con Ad-CMV-Luc tratadascon VAL y TSA. Este incremento se correlacionó con un aumentoen el estado de acetilación de la histona 4 (H4). Posteriormente,estudiamos el efecto de los dos iHDACs sobre la expresión deb-Gal regulada por un promotor glial-específico (gfa2).Sorprendentemente, el tratamiento con VPA y TSA en célulasC6 transducidas con Ad-gfa2-LacZ suprimió la expresión del genreportero a pesar de haber documentado un aumento en laacetilación de la histona 4 (H4). Adicionalmente se observó uncambio morfológico indicativo de un proceso de diferenciaciónen las células C6 tratadas con dichos fármacos acompañado deuna disminución en los niveles endógenos de GFAP y GDNF.Dicho efecto de diferenciación podría ser el mecanismoresponsable del silenciamiento del promotor glial específico.CONCLUSIONES- Los cambios en los niveles de expresión deltransgen están asociados directamente al promotor tejidoespecífico empleado y a los cambios en la cromatina de la célulahospedera generados farmacológicamente. Estos son, por tanto,aspectos importantes a considerar dentro de la terapia génicaespecífica y en el uso de inhibidores de desacetilasas de histonas.

FTM-07IDENTIFICACIÓN DE SEÑALES DE SELECCIÓN NATURALRECIENTE EN LOS GENES DE LAS ENZIMASMETABOLIZANTES DE FÁRMACOS.

De La Vega, Francisco M.1, Hyland, Fiona1, Lazaruk Katherine1,Haque, Kashif2, Welch, Robert A. 2, y Yeager, Meredith2. 1AppliedBiosystems, Foster City, California; 2Core Genotyping Facility,Division of Cancer Epidemiology and Genetics, SAIC Frederick,National Cancer Institute, Gaithersburg, Maryland, EEUU.

Las enzimas metabolizantes de fármacos (EMF) participan en labiotransformación de varios substratos endógenos y exógenos,incluyendo los fármacos terapéuticos. Se ha reportado quediversos polimorfismos funcionales en estos genes, y cuyafrecuencia varia entre poblaciones, afectan la respuestaterapéutica y toxica a los fármacos, así como la susceptibilidad aciertos tipos de cáncer. Por lo tanto, la identificación ygenotipif icación de los mismos es importante para lafarmacogenética y la medicina personalizada. Ya que lacomposición de xenobióticos en el medio ambiente varía con ladieta y el estilo de vida humanos, los genes de EMF podrían serblancos importantes de la selección natural adaptativa que haya

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operado durante la reciente expansión de las poblacioneshumanas. Estudios previos han identificado patrones de variaciónsugerentes de huellas de selección natural en miembros de lafamilia de citocromos CYP3A y otros genes de EMF. Aunquerecientemente se han efectuado varios análisis a nivel genómicocon los datos del HapMap en búsqueda de señales de selecciónnatural, estos no representan adecuadamente los genes de EMF,debido a que es muy difícil obtener ensayos de genotipificaciónfuncionales para polimorfismos en esta familia de genesaltamente similares. Con objeto de hacer una búsqueda masexhaustiva de huellas de selección natural en genes de EMF,genotipificamos las muestras de poblaciones del proyectoHapMap (africana, europea, y asiática) con un grupo de ensayosTaqMan® ampliamente validados para 2,394 SNPs codificantesno-sinónimos que cubren 217 genes de EMF (TaqMan® DrugMetabolism Genotyping Assays). El análisis de los datos se realizotanto independientemente como en combinación con los datosdel HapMap, estudiando la distribución de indicadores dediferenciación poblacional (Fst, Pexcess, y d), y la identificaciónde homocigosidad extensiva de haplotipos hipotéticamenteseleccionados. Nuestros resultados identifican un numero degenes de EMF que al parecer sufrieron historias selectivas muydiferentes en las poblaciones estudiadas, incluyendo NAT2,ALDH2, ADH1B, y miembros de la familia de transportadoresABC y citocromos P-450, algunos de los cuales son consistentescon reportes previos. La combinación de nuestros resultados conlos del HapMap, permite por primera vez obtener un perfil mascompleto de las señales de selecciona natural reciente en losgenes de EMF, importantes mediadores de la adaptación einteracción de las poblaciones humanas con su medio ambiente.

Aspectos Éticos,Legales, Sociales y Educativossobre la Medicina Genómica

ELSI-01ASPECTOS BIOÉTICOS DEL ESTUDIO DEL MAPAGENÓMICO DE LOS MEXICANOS EN EL ESTADO DEGUANAJUATO.

Anaya-Velázquez, Fernando1,2 y Navarrete-Cruz, Victoria2.1Instituto de Investigación en Biología Experimental, Fac. deQuímica y 2Centro de Investigaciones en Bioética, Instituto deInvestigaciones Médicas, Universidad de Guanajuato.

La necesidad de realizar la investigación científica en sereshumanos con bases éticas se ha plasmado en variasdeclaraciones de la UNESCO. En la más reciente, se reconocela importancia de la libertad de investigación científica y elbeneficio del desarrollo científico y tecnológico, destacando quelos consiguientes adelantos se realicen en el marco de principioséticos universales. Actualmente, la medicina genómica seenfrenta a nuevos retos éticos, legales y sociales, los cualesrequieren ser abordados. Se han reportado variaciones en lasecuencia del genoma humano, como los cambios de un solonucleótido (SNPs). Los grupos de SNPs, son representativos decada región del genoma humano. Los haplotipos son bloques devariaciones que se heredan conjuntamente y tienen alrededorde 50 SNPs cada uno. El proyecto HapMap pretende conocer elcatálogo de bloques de haplotipos en el genoma humano yanalizar las variaciones encontradas en diferentes gruposhumanos. Se han observado variaciones en las poblaciones

caucásica, africana y asiática. El proyecto del mapa genómicode los mexicanos a cargo del INMEGEN pretende conocer lavariabilidad genómica y el mapa de haplotipos en la poblaciónde nuestro país y, contribuir al estudio histórico y antropológicode México. La hipótesis es que los mexicanos, mestizos en sumayoría, t ienen diferencias genéticas particulares. Elconocimiento de tales diferencias genéticas permitirá diseñarnuevas medidas de prevención, de diagnóstico y tratamientos.Se han tomado muestras en 6 estados de la república. El proyectocomenzó después de la aprobación de las comisiones deinvestigación, ética y bioseguridad del INMEGEN, confinanciamiento del propio Instituto. Se han considerado lossiguientes aspectos éticos y legales: información a los pacientes,firma del consentimiento informado, comunicación a la comunidadlos resultados y, aspectos de propiedad intelectual. Además, lasmuestras son anónimas y no se incluyeron muestras de poblaciónvulnerable. En Guanajuato, el proyecto lo aprobaron autoridadesde salud y universitarias. Sin embargo, faltó la revisión yaprobación del proyecto por un comité de bioética local.Consideramos que el seguimiento de los resultados por un comitéestatal de bioética será determinante para analizar el beneficiodel proyecto para los participantes, así como lo relativo a la

confidencialidad de los datos obtenidos.

ELSI-02ETICA Y PATENTABILIDAD DE INVENCIONESBIOTECNOLÓGICAS DIRIGIDAS A LA MEDICINAGENÓMICA.

García-Calderón Norma; Barrón Pastor Daniel.Propiedad Industrial y Desarrollo Tecnológico.

Las nuevas tecnologías derivadas de las ciencias biológicas,particularmente aquellas relacionadas con la biotecnología y laMedicina genómica, representan un reto desde el punto de vistaético para las Oficinas de Patentes alrededor del mundo. En estesentido, México no es la excepción, y es necesario establecerun marco de trabajo ético para la determinar la patentabilidad detecnologías emergentes.La Ley de Propiedad Industrial permite la patentabilidad de unaamplia gama de invenciones en el campo de la genética y labiología molecular, con respecto a productos y procesos, siemprey cuando se cumpla con los requisitos mundiales de novedad,actividad inventiva y aplicación industrial, así como la suficienciade la descripción y reproducibilidad (habilitación y soporte).No obstante lo anterior, aún cuando una solicitud de patentesatisfaga los requisitos de Ley, es necesario evaluar el aspectoético de cada invención. En este sentido, la Ley de la PropiedadIndustrial marca en su Artículo 4 algunas condicionesrelacionadas con la ética y patentabilidad de invenciones quedeben ser analizadas cuidadosamente al momento de presentaruna solicitud de patente. Asimismo, existen excepciones a lapatentabilidad en los Artículos 16 y 19 que deben serconsideradas.En este trabajo se provee un análisis de estos artículos paraestablecer el marco de patentabilidad vigente a la luz de la Leyde la Propiedad Industrial y cómo se están estandarizando los

criterios de patentabilidad en el área biotecnológica.

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ELSI-03EDUCACIÓN EN MEDICINA GENÓMICA EN MÉXICO.

Santiago March, Alejandro López, José Bedolla, Carlos Dávila,Victoria Castellanos, María Teresa Velasco, Alfredo HidalgoMiranda, Irma Silva-Zolezzi, Gerardo Jiménez-Sánchez.Instituto Nacional de Medicina Genómica, México.

El Instituto Nacional de Medicina Genómica (INMEGEN) tienecomo misión contribuir al cuidado de la salud de los mexicanosdesarrollando investigación científica de excelencia y formandorecursos humanos de alto nivel, que conduzcan a la aplicaciónmédica del conocimiento genómico a través de una culturainnovadora, tecnología de vanguardia y alianzas estratégicas,con apego a principios éticos universales. El INMEGEN concentrasus actividades educativas en dos vertientes: 1) Formación derecursos humanos especializados en medicina genómica; y 2)Divulgación sobre medicina genómica, sus aplicaciones y susretos éticos, legales y sociales. La primera incluye los tresprimeros cursos de posgrado en medicina genómica:“Introducción a la medicina genómica”, “Aplicaciones genómicasen pediatría” y “Aplicaciones genómicas en medicina interna”,así como el curso: “Accesando la secuencia del genoma humano”,producto de la colaboración con el Wellcome Trust SangerInstitute y Cold Spring Harbor Laboratories. Adicionalmente, sehan establecido sinergias con la Asociación Mexicana deFacultades y Escuelas de Medicina (AMFEM) con el propósitode incluir a la medicina genómica en el programa de competenciasprofesionales del médico general. El INMEGEN iniciará suprograma de Doctorado en medicina genómica a partir de 2007.Los programas de divulgación en medicina genómica delINMEGEN cuentan con diversos instrumentos educativos entrelos que destacan: la transmisión, en inglés y español, de cursosy conferencias en tiempo real por internet. Esto ha permitidotransmitir 8 conferencias a 6,500 personas en diferentes partesde América y Europa. Por otra parte, el portal de internet delINMEGEN (www.inmegen.gob.mx) recibió más de 1.9 millonesde consultas durante el último año, y ha proporcionado más de1.3 millones de documentos a usuarios en más de 38 países,dentro de los cuales 48% corresponden al sector privado. Esteinstrumento educativo, incluye el primer portal de bionformáticaen español, que ofrece servicios de cómputo avanzado a másde 110 usuarios en el México y el extranjero, a través de líneasseguras que ofrecen acceso en español a diversas bases dedatos como BlastP, BlastN, NCBI, ENSEMBL y Med Geneid. En2006 el INMEGEN produjo el cómic titulado: “El genoma humano”dentro de la serie “La medicina genómica”, el cual inició sudistribución en todas las instituciones de educación básica delpaís. Por otra parte, el INMEGEN, en conjunto con otrasinstituciones académicas, ofrece talleres sobre Innovación enCiencias de la Vida y sobre Aplicaciones Matemáticas del Estudiodel Genoma Humano. El fortalecimiento de los programaseducativos es una herramienta fundamental para el desarrollopleno de una plataforma nacional en medicina genómica enMéxico.

ELSI-04ENSAYO: LOS BENEFICIOS DE LA EPIDEMIOLOGÍAGENÉTICA EN LA ERA POST -GENÓMICA.

Oliva-Sánchez Pablo Francisco 1, Pruefer Franz, Lara-ÁlvarezCésar2, López-Ridaura Ruy1.1 Instituto Nacional de Salud Pública, Dirección de EnfermedadesCrónicas, Cuernavaca México.2 Instituto Nacional de Medicina Genómica, México.

El Proyecto Genoma Humano (PGH), las ciencias genómicas yla salud pública en su meta de alcanzar un mejor control,prevención y diagnóstico de las enfermedades, se congregan ennuevas disciplinas como la epidemiología genética. Lasherramientas de la medicina genómica junto con los métodosepidemiológicos, han conseguido éxitos importantes en la saludpública como la detección temprana de algunas enfermedades yun mejor entendimiento de los mecanismos patogénicos yetiológicos de carácter genético y sus determinadas interaccionesgeno – ambientales. Este panorama nos indica, que el“conocimiento altruista” generado por las ciencias genómicas,otorga grandes beneficios. Sin embargo, el conocimiento delgenoma humano aplicado a estudios poblacionales produceinterrogantes en torno a las implicaciones éticas, sociales,económicas y políticas dentro de su utilización. En este ensayose realizó una análisis ético de los límites de la epidemiologíagenética y su aplicación en programas salud pública, con baseen la experiencia de los países en donde se han desarrolladolas ciencias genómicas; que han dado como resultado nuevaslegislaciones y políticas públicas, en torno a la investigacióngenética en humanos y sus problemas éticos y socialesgenerados. Además, se analizó los aspectos generales, de cómoeste “conocimiento altruista” puede cambiar su dirección a unconocimiento no benéfico, afectando a los individuos y laspoblaciones. Se definió el papel que juega la bioéticadeontológica (el deber ser) del conocimiento del genoma humanoy su aplicación en epidemiología en donde la causa final presenteun verdadero beneficio (teleología). Y finalmente dentro de todoeste contexto se situó las leyes en investigación en humanos deMéxico, como preámbulo de una actualización dentro de estanueva “Era post – genómica”. El “deber ser” de un conocimientono debe ir en contra de los derechos humanos de los individuosy de las diferentes comunidades humanas.

ELSI-05ACTITUDES Y REACCIONES DE LOSDERECHOHABIENTES DEL ISSSTE ANTE LAS PRUEBASGENÉTICAS DE RIESGO PARA CÁNCER DE MAMA YPRÓSTATA.

Carnevale Alessandra1, Urraca Nora1, Romero-Hidalgo Sandra1,Lisker Rubén2, Villa Antonio2.1Coordinación Nacional de Medicina Genómica, ISSSTE, México.2Instituto Nacional de Ciencias Médicas y Nutrición “SalvadorZubirán”, México.

El rápido descubrimiento de genes y polimorfismos genéticosrelacionados con diferentes tipos de cáncer, está produciendoen otros países cambios en la práctica clínica al contar conmarcadores moleculares que ayudan a identificar personas enriesgo. En México, la introducción de estas pruebas genómicasdebe ir acompañada del conocimiento sobre sus implicacioneséticas, legales y sociales.Objetivo: Investigar las creencias, reacciones y actitudes, de losderechohabientes del ISSSTE, ante las pruebas genómicas decáncer de mama y próstata.Métodos: Se aplicaron cuestionarios a una muestra de 800derechohabientes mayores de 30 años en hospitales regionalesdel ISSSTE en el D.F. El análisis estadístico incluye la prueba dediferencias por medio de chi-cuadrada y análisis multivariadomediante regresión logística.Resultados: Los hallazgos preliminares muestran que alrededordel 80% de los encuestados considera que una prueba genéticapuede salvar sus vidas y que ésta proporciona información valiosasobre el riesgo que tienen sus familiares de padecer cáncer. Porotra parte, el 65% de los derechohabientes manifiesta temor deque el gobierno o el hospital pueda utilizar los resultados sin su

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autorización o de forma indebida. Este temor es significativamentemayor entre aquellos con menor escolaridad. Más del 70% delas personas estaría dispuesta a modificar su estilo de vida,independientemente del resultado de la prueba. Suponiendo unresultado positivo, el 95% no dudaría en seguir las indicacionesdel médico. De manera general, las mujeres manifiestan mayorpreocupación por el cáncer de mama que los hombres por elcáncer de próstata.Conclusiones: Estos resultados sugieren que es necesariopreparar a los profesionales de la salud para aprovechar ladisposición y el conocimiento actual de las personas acerca delos posibles beneficios de las pruebas genómicas, y para reducirsu temor ante la posibilidad de discriminación genética o usoindebido de la información. A la vez, es indispensable que losmédicos se capaciten sobre este tema ante la responsabilidadque implica contar con la confianza casi absoluta de suspacientes.

ELSI-06RIESGOS Y OPORTUNIDADES EN TORNO A LAPROPIEDAD INTELECTUAL DEL MATERIAL GENÉTICO ENAMÉRICA LATINA.

Rendón Cárdenas Alma Eunice.Institut dÉtudes Politiques, Paris

Al momento de crearse el sistema de propiedad intelectual, nose tenía pensado patentar elementos vivos, la protección fueplaneada para cosas inanimadas. Es por ello que la inclusión delmaterial vivo en la esfera de lo patentable no ha sido fácil y generaimportantes dilemas. La posibilidad de patentar material vivo hasuscitado innumerables debates y polémica entre aquellos queopinan que no se debería patentar material vivo, por pertenecera la esfera viviente y aquellos que dicen que los objetos y materialpatentable son creados por el hombre de manera inventiva einnovadora y por ello se deben otorgar los derechos de propiedadindustrial para incitar el desarrollo tecnológico en la materiaEn el caso de América Latina la evolución de la propiedadintelectual esta intrínsecamente relacionada con los tratados ynormas impulsadas por los países desarrollados, especialmenteEstados Unidos, que ha estado a la vanguardia de la situación.Sin embargo vemos que existen riesgos y oportunidadessignificativas que los países latinoamericanos debemos identificarpara evitar abusos y desarrollar nuestras capacidades en tornoal tema.Algunos de los rasgos más comunes que intervienen en las trabasde los sistemas de propiedad intelectual en América Latina y porlos cuales se explica que la mayoría de las patentes en nuestrospaíses pertenezcan a extranjeros son la existencia de diversosinhibidores de la difusión biotecnológica, como son los débilessistemas de difusión existentes, los problemas de regulación, lafalta de tomadores de riesgo, escaso interés estratégico decorporaciones, y la baja capacidad de absorción de programasnacionales, entre otros.La protección de la propiedad intelectual debe actuar como motorde la innovación y no como impedimento para el desarrollonacional. Por ello, el reto actual para América Latina, es manejarel sistema de propiedad intelectual para fomentar el desarrollode capacidades nacionales, así como para el flujo de capital yde tecnología. Para conseguir esto, se necesita de políticaspúblicas que incluyan a la propiedad intelectual en una estrategianacional que busque la competitividad de nuestra biotecnologíay la protección de nuestros recursos genéticos.

ELSI-07BASES JURÍDICAS EN LA PROTECCIÓN DE DATOSGENÉTICOS.

Hidalgo-Valadéz, Carlos1,3; Rodríguez-Corona J. Antonio2;Navarrete-Cruz Victoria3.1Facultad de Medicina, 2Facultad de Derecho y AdministraciónPública, 3Centro de Investigaciones en Bioética, Universidad deGuanajuato.

La protección jurídica de los datos genéticos ha adquirido en elámbito internacional y en nuestro país significativa importanciaa raíz del conocimiento que sobre el genoma humano se posee,en la consideración de que, en efecto, no existe concepto querefleje con mayor certeza y solidez el principio de intimidad queacompaña a la condición humana.En esta idea, podemos afirmar que –no obstante el surgimiento

denominado derecho genómico-, en nuestro país, el genomahumano se encuentra protegido desde nuestra Ley Fundamental;es decir, su artículo 1, tercer párrafo establece la prohibición arealizar actos discriminatorios que atenten –entre los valores-,

contra la dignidad humana, razón por la cual, en una correctainterpretación de este precepto constitucional, podemos arribara la conclusión de que el respeto al genoma humano y lainformación que éste comprende, es una perfecta expresión derespeto de dignidad humana.En la legislación secundaria, si bien es cierto que no existe unanormatividad expresa que contemple la protección del genomahumano –a pesar de la existencia de algunas propuestas

legislativas para fortalecer en este sentido la Ley General de

Salud-, debemos destacar que, en el ámbito federal, existe laLey Federal de Acceso a la Información Pública Gubernamental,la cual posee una apartado normativo vinculado a la protecciónde datos personales, que en la última instancia y de modoimplícito, tutelaría lo relativo a la información genética que todoindividuo posee.En Guanajuato, recientemente se publicó la Ley de Protecciónde Datos Personales para el Estado y los Municipios deGuanajuato, la cual, entre otras notables características, poseela de explicar –coincidiendo con ello con la norma federal-, elconcepto de datos personales como “La información concerniente

a una persona física identificada o identificable, relativa a su

origen racial o étnico o que esté referida…a su intimidad, entre

otras”.

En consecuencia, la legislación en materia de datos personalespuede jurídicamente defender y proteger lo relativo al genomahumano puesto que se trata de información intima, merece yexige privacidad y, eventualmente, la imposición de una sancióna quienes realicen actos tendientes a vulnerar los bienes jurídicostutelados que se han descrito.

Bioinformática

BIO-01VISUALIZACIÓN Y ANÁLISIS DE INFORMACIÓNGENÓMICA CON MAPAS DE RECURRENCIA.

Bautista-Thompson, Ernesto, Velázquez-Jerónimo Fabiola,Garza-Domínguez Ramiro.Centro de Tecnologías de la Información, DES-DACI,Universidad Autónoma del Carmen, Ciudad del Carmen,Campeche, México.

Se presenta la aplicación y evaluación de la técnica de AnálisisCuantitativo con Mapas de Recurrencia como una herramienta

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s para la visualización y análisis de información genómica. Elanálisis con mapas de recurrencia es una técnica que permitelocalizar patrones ocultos recurrentes, no estacionarios y cambiosestructurales en series de datos. Los mapas de recurrenciaequivalen a una matriz de correlación espacial de los datos queal ser visualizada multiplica la información disponible paraidentificar patrones tales como: periodicidad, determinismo yaleatoriedad; de esta forma es posible visualizar relacionesespaciales entre diferentes segmentos de una cadena de datos,en nuestro caso cadenas de bases del DNA humano.Adicionalmente, la técnica genera una serie de parámetroscuantitativos tales como Entropía Espacio Temporal,Determinismo, Recurrencia y Entropía de Información (Shannon);que permiten caracterizar desde el punto de vista de la dinámicano lineal al sistema representado por el conjunto de datos bajo

estudio.

BIO-02ANÁLISIS DE GENES EN ESPACIO FASE.

Rivera, Ana Leonor, Ramírez, Leslie & Castaño, Víctor M.Centro de Física Aplicada y Tecnología Avanzada, UniversidadNacional Autónoma de México, Juriquilla, Querétaro, México.

Se realiza el análisis de secuencias genómicas en espacio fasecon el fin de localizar genes en secuencias del genoma humano.Para ello se elaboró un programa de software que a partir de lasecuencia en formato fasta obtiene la secuencia numérica comofunción de la posición y la transformada de Wigner de dichosdatos. La transformada de Wigner mide la autocorrelación en lasecuencia y nos permite localizar genes específicos dentro deuna secuencia dada. Este programa también nos permitirácomparar secuencias. La diferencia con los métodostradicionalmente implementados (por ejemplo en Ensembl) esque el tratamiento es totalmente numérico y se basa en un ajustematemático del comportamiento de la secuencia.

BIO-03ANÁLISIS BIOINFORMÁTICO DE LA REGULACIÓNTRANSCRIPCIONAL DURANTE LA RESPUESTA INMUNEDE ANOPHELES SP.

Hernández Romano Jesús, Martínez Barnetche Jesús, SalgadoOsorio Heladia, Lamadrid Figueroa Héctor, Solano GonzálezMaritza, Carlos Rivera Francisco Javier, Rodríguez López MarioHenry.CISEI, Instituto Nacional de Salud Pública.

La disponibilidad de los genomas de Anopheles gambie,Drosophila melanogaster y otros organismos, aunado a ladisponibilidad datos de expresión temporal frente a distintos retosinmunológicos obtenidos por microarreglos, permiten analizar laregulación de la respuesta inmune en insectos vectores deenfermedades humanas y detectar mecanismos de regulacióntranscripcional potencialmente conservados entre distintasespecies. Utilizando herramientas bioinformáticas se analizaronlas secuencias 5’ de genes de An. gambiae y D. melanogaster

sobre-expresados frente a diferentes retos inmunes, buscandomotivos de ADN estadísticamente sobre-representados y motivosconservados en cuanto a secuencia y posición al sitio de iniciode la transcripción, además se evaluó el potencial nucleosomalde estas secuencias. En ambos insectos se identificaron gruposde genes con perfiles transcripcionales similares (genes co-expresados) que presentaban motivos de ADN similares a loselementos de respuesta reconocidos por factores de transcripción

de la familia NFkB (motivos kB-like), además de otros dos motivosdenominados por los autores como CATGA2 y M7 cuya secuenciano ha sido reportada, estos tres motivos se localizan en zonasconservadas de las secuencias 5’ de múltiples genes co-expresados. Adicionalmente, las regiones 5’ de genes sobre-expresados pertenecientes a la clase funcional de inmunidad(GO:0006952) mostraron una sobre-representación de motivosricos en A y T asociados siempre a un elevado potencialnucleosomal. Estos resultados sugieren que los motivos kB-like,CATGA2 y M7 podrían estar regulando programas de defensaconservados entre An. gambiae y D. melanogaster, y la expresiónde los genes involucrados podría estar estrechamente asociadacon modificaciones en la estructura de la cromatina. Se validaránexperimentalmente estos hallazgos, y extenderá el análisis agenes reprimidos durante la respuesta inmune, y a otras especies,como el humano.

BIO-04DESARROLLO E IMPLEMENTACIÓN DE UN ANÁLISISBAYESIANO DE LIGAMIENTO GENÉTICO.

Romero-Hidalgo, Sandra1, Gutiérrez-Peña, Eduardo2,Rodrigues, Eliane3, Tusié-Luna, María Teresa1. 1Instituto deInvestigaciones Biomédicas, UNAM, México. 2Instituto deInvestigaciones en Matemáticas Aplicadas y Sistemas, UNAM,México. 3Instituto de Matemáticas, UNAM, México.

Introducción. La herramienta estadística más eficaz paraidentificar genes con una contribución mayor en el desarrollo deuna enfermedad ha sido el método de lod score. La primeraversión de este método la propuso Morton (1955) y fue diseñadapara familias nucleares. Este autor estableció un valor de lodscore de 3 como evidencia a favor de ligamiento y de -2 comoexclusión de ligamiento. A pesar de que este método ha sufridomodificaciones, obtener un valor de lod score mayor o igual a 3,independientemente de la estructura y el tamaño de las familias,sigue siendo una garantía para publicar el hallazgo. Por otra parte,en el método de lod score el parámetro de interés es la fracciónde recombinación, que contiene la información relativa a ladistancia que hay entre el locus de la enfermedad y el marcadorgenético. Sin embargo, hay otros elementos involucrados comoson la penetrancia y las frecuencias alélicas, cuyos valores engeneral se desconocen en la población de estudio. Utilizando unenfoque Bayesiano, en conjunto con los métodos de Monte Carlovía cadenas de Markov, es posible estimar estos parámetrosdurante el análisis. Adicionalmente, a través de un enfoqueBayesiano se obtiene la probabilidad de ligamiento asociada ala(s) familia(s) bajo estudio.Objetivo. Desarrollar e implementar en un programa un análisisBayesiano de ligamiento genético de dos puntos para unmarcador multialélico utilizando métodos de Monte Carlo víacadenas de Markov.Resultados. Con el programa generado se probaron tresejemplos: el primero con evidencia contundente de ligamiento(lod score = 7.02), el segundo con evidencia sugestiva deligamiento (lod score = 2.5), y el tercero con evidencia de ausenciade ligamiento (lod score = -6.57). En los tres casos se utilizó unaprobabilidad inicial de ligamiento de 4.5%, obteniendo unaprobabilidad final de ligamiento de 100%, 49.1% y 3.6%,respectivamente. De acuerdo a estos resultados en el primercaso se tiene absoluta certeza de ligamiento entre la enfermedady el marcador estudiado; en el segundo caso, se tiene evidenciade la presencia de ligamiento, ya que observamos un incrementoconsiderable de la probabilidad, sin embargo, existe también unporcentaje considerable de incertidumbre; y en último ejemplo,se tiene suficiente evidencia para considerar que no hayligamiento.

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Conclusiones. En los casos de evidencia contundente deligamiento o exclusión de ligamiento ambos análisis sonconcluyentes. Sin embargo, en el segundo ejemplo, la conclusióna la que se llega en uno u otro análisis es distinta. Es decir, por elmétodo de lod score, un valor de 2.5 es muy cercano al valorcrítico de 3 que representa suficiente evidencia en favor deligamiento, mientras que una probabilidad de ligamiento del 50%no proporciona la misma confianza que en el caso anterior. Lohace evidente la utilidad del análisis Bayesiano como herramientapara considerar o no ligamiento a un determinado locus.

TecnologíaGenómica

TG-01DESARROLLO DE UN SISTEMA DE MICROARREGLOS DEcDNA PARA LA TIPIFICACION DEL VIRUS DEL DENGUE.

Diaz-Badillo A., Altuzar-Aguilar V. M., Herrera-Pérez J. L.,Sánchez-García G., Gariglio-Vidal P., Luna-Arias J. P., Rodríguez-Fragoso P., Mendoza-Álvarez J. G., Sánchez-Sinencio F., MuñozM. L.CINVESTAV-IPN, CICATA-IPN.

El dengue es una enfermedad causada por cualquiera de cuatrovirus estrechamente relacionados (DEN-1, DEN-2, DEN-3 ó DEN-4). Los virus son transmitidos a los humanos por la picadura deun mosquito infectado. El Dengue y sus formas potencialmentefatales—el dengue hemorrágico y el síndrome de choque deldengue—se han intensificado alcanzando niveles alarmantes enesa última década. A medida que se deterioraron las campañasde erradicación del mosquito Aedes aegypti durante las décadasde 1970 y 1980, el mosquito proliferó y se propagó por casi todoslos rincones de la Región. La mayoría de los países se hanreinfestado y han sufrido brotes explosivos. El ascenso alarmantedel dengue hizo necesario contar con acciones para suprevención y control, en especial porque los manuales deprocedimientos y guías publicados con anterioridad estánincompletos o descentralizados, al igual que los planes de acciónpuestos en práctica. A la fecha no hay medicamento o vacunaespecíficos para tratar la infección del dengue. Como con elDengue Clásico, no hay medicamento específico para el DH(Dengue Hemorrágico). Sin embargo, este puede tratarseefectivamente con terapia de reemplazo de líquidos si se haceun diagnóstico clínico temprano. Esta serie de complicacioneshacen necesario el apoyo clínico con técnicas moleculares a finde proporcionar un diagnóstico acertado en el menor tiempoposible, entre ellas han destacado el PCR y el RT-PCR, el usode sondas marcadas, y mas recientemente la aplicación demicroarreglos de cDNA. Los biochips o microarreglos, matricesordenadas de DNA, RNA o proteínas son un herramienta recienteque empieza a permitir analizar los genes presentes en una célula(genoma) y su expresión, tanto en el nivel de RNA (transcriptoma)como de proteínas (proteoma). La tecnología de los microarreglos(microarrays) de DNA permite realizar análisis genéticos sobremiles de genes simultáneamente. El análisis de estosexperimentos supone un reto desde el punto de vista estadístico,ya que los métodos clásicos de análisis deben adaptarse a laenorme multiplicidad de hipótesis que se prueban. Además, lagran variabilidad observada en los experimentos y su elevadocosto exigen un diseño cuidadoso. En este momento, el usointensivo de estas tecnologías «masivas» está sujeto a serias

limitaciones técnicas y supone un costo muy elevado. El objetivode este proyecto es el desarrollo y la aplicación de nuevastecnologías de diagnóstico molecular para enfermedades virales,principalmente el Dengue, contemplando la micro-manipulaciónde líquidos y la optimización de “grafos”, al proceso de deposicióndel menor volumen posible de muestra del mayor número posiblede “muestras de pacientes” diferentes, en la menor superficieposible, compatibles con la resolución de los instrumentos ópticosdisponibles. Se diseñarán experimentos que determinen ladensidad máxima, reproducibilidad, robustez y velocidad defabricación de los DNA chips para Dengue.

TG-02ALTERACIONES CROMOSOMICAS EN DIFERENTESESTADIOS DE LA CARCINOGENESIS MEDULARTIROIDEA.

González-Yebra B1, Guerrero-Martínez FJ1, Martínez I2, VázquezG2, Alatorre B2, Vázquez K2, Piña P2, Hermsen M3, Salcedo-Vargas M2.1Facultad de Medicina, Universidad de Guanajuato, 2Laboratoriode Oncología Genómica, Unidad Investigación Médica enEnfermedades Oncológicas, Centro Médico Nacional Siglo XXI-IMSS, 3Department of Pathology, Free University Medical Center,Amsterdam, The Netherlands.

El carcinoma medular tiroideo (CMT) se origina en las célulasparafoliculares de la glándula tiroides, la fase precursora aldesarrollo de la neoplasia es una hiperplasia que posteriormenteevoluciona a tumor, las metástasis comúnmente se presentanen ganglios linfáticos, pulmón, hígado y sistema óseo. Lacarcinogénesis medular tiroidea es un proceso de múltiples pasos,en el que puede ocurrir pérdida y/o ganancia de regionescromosómicas. Las mutaciones puntuales en el oncogén ret sonla causa necesaria para el desarrollo del CMT, sin embargo noestán bien descritas otras alteraciones moleculares y/ocromosómicas implicadas en la progresión de este tumor primarioa metástasis; por lo que en este trabajo nos propusimos investigara nivel cromosómico cuales son las alteraciones implicadas enel desarrollo y progresión del tumor medular tiroideo. Se estudióel ADN proveniente de leucocitos de sangre periférica, tejidotiroideo normal (TN), tumor primario (CMT) y metástasis MET deun mismo paciente con CMT esporádico. El ADN se extrajomediante el protocolo establecido (digestión con proteinasa K,purificación fenol-cloroformo y precipitación con isopropanol). Sebuscaron las mutaciones en el oncogén ret tanto en el ADN deleucocitos como en el tejido tumoral y MET, mediante PCR ysecuenciación de los exones 10, 11 y 16. Para determinar lasalteraciones cromosómicas presentes se realizó la hibridacióngenómica comparativa (HGC) en todas las muestras de ADN. Elprotocolo detallado se encuentra en la página de internet http://amba.charite.de/cgh. La mutación del oncogén ret encontradaen el ADN de los tejidos CMT y MET fue M918T. No seencontraron alteraciones cromosómicas en el ADN de leucocitosni en el tejido tiroideo normal. En el tumor primario se encontrótanto pérdida de las regiones cromosómicas 6p y 16p, y gananciade 18p; mientras que en la metástasis se encontraron variasalteraciones cromosómicas: pérdida de 1p, 1q, 6p, 6q, 8p, 8q,9q, 10p, 10q, 11q, 12q, 15q, 16p, 16q, 17p, 17q, 19p, 19q, 20p,20q, 22q y ganancia de las regiones 2q, 4q, 8q, 12q, y 13q,entre otras. Estos resultados confirman que la carcinogénesismedular tiroidea es un proceso donde intervienen variasalteraciones moleculares y cromosómicas. De tal forma que eloncogén ret promueve el desarrollo de la neoplasia, sin embargopara que el tumor adquiera un fenotipo más agresivo y hayaprogresión, las células van adquiriendo nuevas alteraciones

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cromosómicas, estas pueden ser tanto ganancia como pérdidade regiones cromosómicas que contienen genes involucradosen la invasión y metástasis.

TG-03ALTERACIONES CROMOSOMICAS EN TEJIDOS DECARCINOMA PAPILAR TIROIDEO INVASOR.

González-Yebra B1, Guerrero-Martínez FJ1, Martínez I2, VázquezG2, Alatorre B2, Vazquez K2, Piña P2, Hermsen M3, Salcedo-VargasM2.1 Facultad de Medicina, Universidad de Guanajuato, 2Laboratoriode Oncología Genómica, Unidad Investigación Médica enEnfermedades Oncológicas, Centro Médico Nacional Siglo XXI-IMSS, 3Department of Pathology, Free University Medical Center,Amsterdam, The Netherlands.

El carcinoma papilar de tiroides (CPT) es el más común de loscarcinomas de la glándula tiroides y se origina en las célulasfoliculares. Más de la mitad de los casos muestran invasiónganglionar. Algunos genes se han visto involucrados en lacarcinogénesis del CPT, como es el caso de los proto-oncogenesret y trk. Se ha demostrado que los rearreglos intracromosómicosdel gen ret con otros genes son la causa para el desarrollo delos CPT. Por otro lado, también se han encontrado algunasalteraciones cromosómicas en algunos CPT sin antecedentesde radiación, por ejemplo ganancias de fragmentoscromosómicos en 1q, 5q, cromosoma 7, 17 y 21q; pérdidas en16q y puntos de ruptura en las regiones 1q y 10q. Sin embargo,no se han reportado las alteraciones moleculares nicromosómicas asociadas a la invasividad de los CPT, por lo quese realizó este trabajo con la finalidad de conocerlas. Seanalizaron los ADNs provenientes de ocho CPTs invasores conhistoria negativa a radiaciones (positivos para la inversiónintracromosómica RET/PTC3), mediante la técnica de hibridacióngenómica comparativa. El protocolo detallado de esta técnica,se encuentra en la página de Internet http://amba.charite.de/cgh. Se observaron varias alteraciones cromosómicas: gananciasen las regiones 2q, 3q, 4q, 5q, 6q, 7q, 8q, 12q, 13q y pérdida deregiones cromosómicas en 1p, 9q, 10q, 16, 17, 19, 20q, 21q,22q, entre otras. Los datos obtenidos muestran alteracionescromosómicas consistentes tales como la ganancia en elcromosoma 4q1.1-2.6 y la pérdida en los cromosomas 1p2-ter,19, 20q y 22q, siendo la de más incidencia la pérdida delcromosoma 19 completo en el 100% de los casos. Los resultadossugieren la probable presencia en el cromosoma 19 de algunosgenes asociados a invasión y/o metástasis en el carcinoma papilartiroideo.

TG-04GANANCIA DE LOS GENES EGFR Y RBP1 EN UNSUBGRUPO DE TUMORES DE LARINGE.

Peralta-Rodríguez R1, Juárez S1, Martínez-Sanabria I1, VillegasV1, Arreola H1, VázquezG1, Piña P1, Fragoso V1, Alatorre B1,

Vázquez K1, Gallegos F2, Mantilla A3, Hernández DM4, Ortiz R5,Gonzalez-Yebra B6, Baudis M7, Salcedo-Vargas M1.1Laboratorio de Oncogenómica, Unidad Investigación Médica enEnfermedades Oncológicas, 2Servicio de Cabeza y Cuello,3Depto.Patología, 4U.Epidemiología, Centro Médico NacionalSiglo XXI-IMSS, 5Depto.Biología Molecular, Hospital SantaEngracia de Nuevo León, 6Fac. Medicina, U. Guanajuato, México.7Medizinische Klinik und Poliklinik V der Universität Heidelberg,Germany.

La etiología genética del cáncer (Ca) de laringe es compleja.Aunque se ha encontrado al virus de papiloma humano (VPH)en este tipo de neoplasia, no se ha determinado si juega un papelimportante dentro de la etiología multifactorial de estaenfermedad. Tampoco han sido identificados los genes queparticipan en el desarrollo de los tumores de laringe. Los objetivosde este trabajo fueron: 1) determinar la frecuencia del VPH entumores de laringe y 2) encontrar los genes alterados medianteHibridación Genómica Comparativa sobre microarreglosgenómicos (HGCm). Se extrajo el ADN de 19 tumores primariosde Ca de células escamosas de laringe, se sometió a PCR condos juegos de oligonucleótidos universales (GPs y MYs) paradetectar el gen L1 del VPH. El genotipo presente se determinómediante secuenciación automatizada de los productosamplificados y alineamiento de las secuencias con una base dedatos. Se realizó HGCm para detectar los posibles genesalterados, para lo cual, los ADNs se marcaron e hibridaron sobremicroarreglos que contienen 287 clonas por triplicadocorrespondientes a genes asociados al proceso decarcinogénesis. Brevemente, el DNA tumoral se marcó con Cy3y el DNA normal con Cy5, seguido de digestión con DNAsa ypurificación. La mezcla de hibridación se hizo con cantidadesequimolares del DNA normal y tumoral, la mezcla se hibridó y secolocó sobre cada microarreglo, finalmente se tiñeron con DAPI.Los datos se analizaron para encontrar las regiones ganadas yperdidas, considerándose un radio >1.25 (log2=0.32) comoganancia y <0.75 (log2=-0.41) como pérdida. Se utilizó elconvertidor ISCN2matrix (http://www.progenetix.de). El 41%de los tumores fueron positivos para HPV, estando presente entodos los casos el VPH-16, mientras que el 59% fue negativopara el VPH. Las principales alteraciones encontradas fueron laganancia de RBP-1 (retinol binding protein 1) en el 53% y deEGFR (epidermal growth factor receptor) en el 47% de lasmuestras. No se encontró asociación entre el HPV y los genesalterados. Concluimos que 1) la infección por el VPH-16 puedetener un rol etiológico importante en un subgrupo de tumores delaringe; 2) la ganancia de RBP1 y EGFR sugiere que estos genesparticipan de manera importante en el desarrollo y/o progresiónde un subgrupo de tumores de células escamosas de laringeque comparten determinadas características clínicas.

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A

Aguirre Jonathan 54

Alvarado Yaah Julio E 53

Anaya-Velázquez, Fernando 70

Aquino-Jarquin Guillermo 68

Arcos-Román A 53

Arenas-Sordo María de la Luz 45, 46

Audirac-Chalifour Asride Stephanie 36

Avalos, Berenice 69

Ayala, Guadalupe 42

B

Barquera, Rodrigo 67

Bautista-Thompson, Ernesto 72

Benítez, Jorge Alejandro 69

Betanzos-Cabrera, Gabriel 45

Bonilla-Delgado José 37

C

Cabrera Roberto, Ramírez Maritoña 48

Camacho Rea Maria del Carmen 38

Camarena, Beatriz 51

Canseco Avila Luis M 59

Carnevale Alexandra 71

Casas A. Leonora 44

Chávez Saldaña Margarita 39

Córdova Emilio 56

D

Daniel Hernández Sotelo 66

De La Vega, Francisco M. 32, 69

Del Río Garcia, Constanza 63

Delgado-Ochoa, M 44

Delgado-Sáncheza, R. 48

Diaz Badillo A.

E 75

Escalante-Bautista 58

Esperón Patricia

F 51

Falcón Ramírez Edith 55

Fierro Torres A 61

G

García Calderón Norma 70

García Fajardo Luz Verónica 38

Garza Domínguez, Ramiro. 31

Gómez Ortega M.R. 50

Gonzaga Pérez, R 30

González-Herrera L 33

González-Yebra B 75

González-Yebra B 76

Gutierrez Rubio 38

H

Halabe-Bucay,Alberto 36

Hernández Romano Jesús 74

Hernández-Zamora, Edgar 37

Hidalgo-Valadéz, Carlos 72

J

Jara Prado A 60

Jesús Estrada Gil 30

Jiménez-Morales S 56

L

L del Bosque Plata 64

Lares Asseff Ismael 36

Lemus Fuentes, Enrique 67

Leyva García Norberto 47

López Cardona M. Guadalupe 53

López López Marisol 29

López Orduña, Eduardo 46

López Morales, E 60

M

Macias García, B 59

Macías Riveros, Dolly 68

Macías Vega Miguel 43

Magaña Aguirre Jonathan 46

March M Santiago 71

Martínez Delgado, Gustavo 40

Martinez Fierro M 58

Martínez Levy G., 47

Medina MT 54

Ïndice de autores

79


Méndez ST 39

Mendoza de la Rosa 61

Mollinedo Rosado, Pamela 36

O

Oliva Sánchez Pablo Francisco 52, 71

P

Parra Rojas Isela 31

Peralta Rodríguez R 76

Pérez Herrera, Norma 62

R

Raggio Víctor 68

Ramírez-Bello J.1 66

Raul A. Bastarrachea 62

Rendón Cárdenas Alma Eunice 72

Reyes Gutiérrez, Pablo 34

Rivera, Ana Leonor, Ramírez 74

Rodríguez-Guillén Maria del Rosario 63

Romero Hidalgo, Sandra 74

Rosales Gómez RC 37

S

Saavedra Herrera MV1 48

Salas Martínez G. 42

Sánchez Contreras Ma. Elena 62

Sánchez Guerra, Marco 29

Sandoval Mendoza, Karla 61

Sapag Amalia 33

Sierra PF 45

Sierra PF 52

Silva Zolezzi Irma 32, 43, 58

Stoll Mario 50

T

TorresRojas, Carolina 64

Tovilla Zarate Carlos Alfonso 40

Trevino, Victor 31

U

Uribe Figueroa Laura 66

V

Valladares Adan, 64

Velázquez Cruz R. 42

Villalobos Comparán M. 32

Villarreal Molina Ma. 29

Y

Yescas Petra 56

Yokoyama Rebollar, Emiya 55

Y

Zamora UA 52

80


Memorias del II Congreso Nacional de Medicina Genómica

Instituto Nacional de Medicina Genómica

Tiraje 2000 ejemplares

Octubre 2006

Diseño:

Departamento de Diseño y Difusión

Lic. Alejandro López Franco

Lic. José Bedolla Castro

Lic. Lucia Orozco Islas

Impresión:

MAN Medios

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Congreso Medicina Genomica