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DETERMINACIÓN DE DEXTRANA EN JUGOS 1. OBJETIVO El método considera la dextrana como el material polisacárido precipitado en etanol al 50 %, a partir de una solución de sacarosa, libre de almidones y proteínas. De acuerdo con el procedimiento, el ácido tricloroacético precipitó la proteína del jugo, el cloruro de bario precipita las sales, la filtración subsecuente remueve los sólidos suspendidos, las proteínas y una gran parte del almidón que no es soluble en el jugo frío. Una vez formada la turbiedad con etanol, se lee en el espectrofotómetro a longitud de una onda igual a 720 nm. Con el valor de la absorbancia se encuentra la concentración en la curva de calibración previamente calibrada. 2. EQUIPOS Espectrofotómetro 720 nm Celdas de absorción Refractómetro Cronómetro 3. REACTIVOS Solución de cloruro de bario al 10% P/V. Solución de acido tricloroacético al 10% P/V Etanol absoluto Solución de sacarosa pura al 50 % de P/V Ayuda filtrante

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DETERMINACIN DE DEXTRANA EN JUGOS

DETERMINACIN DE DEXTRANA EN JUGOS1. OBJETIVO

El mtodo considera la dextrana como el material polisacrido precipitado en etanol al 50 %, a partir de una solucin de sacarosa, libre de almidones y protenas. De acuerdo con el procedimiento, el cido tricloroactico precipit la protena del jugo, el cloruro de bario precipita las sales, la filtracin subsecuente remueve los slidos suspendidos, las protenas y una gran parte del almidn que no es soluble en el jugo fro. Una vez formada la turbiedad con etanol, se lee en el espectrofotmetro a longitud de una onda igual a 720 nm.

Con el valor de la absorbancia se encuentra la concentracin en la curva de calibracin previamente calibrada.

2. EQUIPOS

Espectrofotmetro 720 nm

Celdas de absorcin

Refractmetro

Cronmetro3. REACTIVOS Solucin de cloruro de bario al 10% P/V.

Solucin de acido tricloroactico al 10% P/V

Etanol absoluto

Solucin de sacarosa pura al 50 % de P/V

Ayuda filtrante

Solucin patrn de dextrana T-2000 1 mg/cm3 (Esta solucin puede conservase refrigerada durante una semana)

4. CURVA DE CALIBRACIN

En el erlenmeyer de 50 cm3, preparar las siguientes soluciones estndar, a partir de la solucin patrn de dextrana de 1 mg/cm3.

SolucinEstndar123456789BLANCO

cido tricloroactico (10%), cm30.50.50.50.50.50.50.50.50.5

Solucin de sacarosa(50%), cm340.040.040.040.040.040.040.040.040.0

Solucin estndar de dextrana, cm30.00.51.01.52.03.04.05.00.0

Agua destilada, cm35.55.04.54.03.52.51.50.515.5

Volumen total,cm310.010.010.010.010.010.010.010.020.0

Adicionar con una bureta y gota a gota, 10 cm3 de etanol absoluto al primer patrn de dextrana. Agitar suavemente el erlenmeyer durante la adicin de alcohol.

Inmediatamente despus de terminar la adicin de etanol, empezar a contar el tiempo con cronmetro.

De la misma manera descrita, adicionar etanol a cada una de los patrones con intervalos de dos minutos, exceptuando el blanco (erlenmeyer N 9).

Despus de 20 minutos, leer la absorbancia de cada uno de los patrones en el espectrofotmetro a longitud de onda igual a 720 nm, usando el blanco para cuadrar el cero del instrumento.

Elaborar la curva de calibracin colocando mg de dextrana/cm3 en la abcisa y lectura de absorbancia en la ordenada. Debe elaborarse una nueva curva patrn cada vez que se use un nuevo frasco de alcohol.5. PROCEDIMIENTO

Determinacin del Brix del jugo.

Tomar 100 cm3 del jugo previamente filtrado.

Adicionar 20 cm3 de la solucin de acido tricloroactico al 10 % y 10 cm3 de la solucin de cloruro de bario al 10 %.

Adicionar aproximadamente 2.0g de ayuda filtrante mezclar bien y filtrar bien a travs de papel filtro Wathman N5, descartando los primeros cm3 del filtrado.Del filtro tomar dos alcuotas de 10 cm3 en erlenmeyer de 50 cm3.

A una de las alcuotas agregar 10 cm3 de agua destilada (blanco)

A la otra alcuota adicionar gota a gota 10 cm3 de etanol absoluto desde una bureta, agitando suavemente el erlenmeyer durante la adicin de alcohol (muestra).

Inmediatamente despus de terminar la adicin del alcohol, contar exactamente 20 minutos.

Despus de transcurridos los veinte minutos, leer la absorbancia de la muestra en el espectrofotmetro a una longitud de onda de 720 nm, usando el blanco para cuadrar el cero del instrumento.

6. RESULTADO.

Determinar el contenido de dextrana (mg/cm3) en la muestra usando la curva de calibracin.

El contenido de dextrana en el jugo se expresa en ppm referido al Brix de acuerdo a la ecuacin.

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