Determinación en distintos tipos de salvado de trigo ... · coli, y en recuento total de Enterobacterias) son los subproductos del trigo derivados de la industria harinera, conocidos

Cuadro I. Ingredientes y tratamientos

Cuartas para Consumo Humano (CCH), AFL

Cuartas para Consumo Animal (OCA), AFL

Cuartas para Consumo Animal, altamente contaminadas (CCA-C1), AFL

Cuartas para Consumo Animal, altamente contaminadas (OCA-C), AFG

Hoja para Consumo Animal, altamente contaminada (HCA-C), AFL

Tercera para Consumo Animal, altamente contaminadas (TCA-C), AFL

AFL. Tratamiento líquido (a 0,3 y 0,6%)AFL. Tratamiento sólido (a 0,4 y 0,8%)

N NUTRICIÓN. HIGIENE EN PIENSOS

Determinación en distintos tipos de salvado de trigo

Capacidad bactericidade formulaciones en base a ácido fórmico

Sígfrid López y Carmen Valverde. Novus International Inc.Eva Garrido. Técnico de calidad de Harinera Riojana S.A.

En virtud del Reglamento de Higiene de piensos 183/2005 (en vigor desde el 1/1/2006), el controlde la calidad microbiológica del pienso es crucial en la cadena alimentaria a fin de limitar la apa-rición de toxiinfecciones en los consumidores finales tras ingestión de productos de origen ani-mal. Este control conlleva el seguimiento de las materias primas, las cuales presentan variabili-dades según ingrediente y forma.

os ingredientes con superiorcontaminación microbioló-gica (en frecuencia de pre-sencia de Salmonella, E.coli, y en recuento total deEnterobacterias) son los

subproductos del trigo derivados de laindustria harinera, conocidos como Sal-vados. Los salvados incluyen distintostipos de ingredientes, producto del pro-ceso de molturación y cernido del trigopara la obtención de harina y suponendel orden de un 25% del peso del grano(FEDNA, 2003).

Las diferentes fracciones obtenidasse denominan cuartas, tercerillas,segundas o harinillas y harinas bajas, y

están constituidas por diferentes pro-porciones de tegumentos, germen, capade aleurona y endospermo harinoso. Elcontenido en almidón y fibra varíasegún el ingrediente (almidón: de 20%en cuartas al 60% en harinas bajas;fibra bruta: del 10% en cuartas al 2%en harinas bajas), mientras que la prote-ína se mantiene estable (sobre el 14%).La proporción de nutrientes varía segúnel grano de base, que depende del gradode maduración, procesado, etc. Todoeste procesado implica una manipula-ción que lo convierte en un substratosusceptible de ser recontaminado y que,por lo tanto, precisa de un control en laplanta de producción.

ObjetivosEl principal objetivo del experimentollevado a cabo en una planta harineraespañola fue el poder profundizar en elconocimiento de la eficacia bactericidade dos formulaciones en base a ácidofórmico y formiato amónico (FórmicoLíquido-AFL, 80% de concentración yFórmico Granulado-AFG, 60% de con-centración) en distintos tipos de salva-do, con diferente nivel de contamina-ción microbiana y con aplicación dedosis bactericidas crecientes.

Material y métodosEl presente experimento se llevó a cabosobre salvado para consumo humano(Cuartas) o animal (Cuartas, Hoja, Ter-ceras). En este último caso, se incre-mentó artificialmente la contaminaciónde los ingredientes a fin de observar laefectividad bactericida de AFL y AFGen casos extremos. Esta contaminaciónse realizó en base a un producto alta-mente solidificado y de difícil disper-sión. El material experimental fue trata-do con dos dosis crecientes de bacterici-da (AFL y AFG), y comparados frente aun blanco no tratado (Cuadro 1).

Cada ingrediente de base no tratadofue vertido en la mezcladora, tras lo

Mundo Ganadero Enero-Febrero'07

NUTRICIÓN. HIGIENE EN PIENSOS N

Cuadro II. Recuento de Enterobacterias y Hongos en Cuartaspara Consumo Humano y Animal

d O d4 d7

CCH

Rcto. de Enterobacterias 4.675 5.975 1.005

Rcto. de Mohos y Levaduras (ufc/g) 4.400 4.575 3.200

CCH, AFL 0,3%

Acto. de Enterobacterias 3.175 9.250 5.375


CCH, AFL 0,6%



CCA


Acto. de Mohos y Levaduras (ufc/g) 4.150 7.500 9.875

CCA, AFL 0,3%



CCA, AFL 0,6%



CCH. Cuartas para Consumo Humano.CCA. Cuartas para Consumo Animal.AFL. Producto en base a ácido fórmico y formlato armónico en forma líquida, al 0,3 y 0,6%.

Cuadro III. Recuento de Enterobacterias y Hongos en Cuartaspara Consumo Animal altamente contaminadas

d O d4 d7

CCA-C

Acto. de Enterobacterias 150.000 150.000 1.500.000

Invest. Salmonella ( /25 g) 0 0 0

Invest. E. col! ( /25 g) 1 1 1


CCA-C, AFG 0,4%


Invest. Salmonella ( /25 g) O O O

Invest. E. coli ( /25 g) 1 0 0

Acto. de Mohos y Levaduras (ufc/g) 15.000 150.000 64500

CCA-C, AFG 0,8%



Invest. E. col! ( /25 g) 1 0 0


CCA-C. Cuartas para Consumo Animal, altamente contaminadas.AFG. Producto en base a ácido fórmico y formiato armónico en forma sólida, al 04 y 08%.Invest. Salmonella y E. Coli, como presencia y ausencia.Recuento de enterobacterias y hongos: 4 muestras por determinación.

cual se añadió la primera dosis de bac-tericida y se procedió a un primer mez-clado (3 mm). Tras recogida de mues-tras, se añadió la segunda dosis de bac-tericida y se procedió a un segundomezclado de tiempo similar, tras lo cualse recogió una segunda partida demuestras (dosis alta de bactericida). Encada recogida se tomaron dos muestras.

Las muestras fueron tomadas porduplicado y enviadas a dos laboratorios:B&A (Bactéries et Aliments, Francia) yLaboratorios Araba (Vitoria, España).

Las determinaciones incluyeron elrecuento de Enterobacterias (ufc/g),hongos/levaduras (ufc/g),presencia/ausencia Salmonella (50 g) yE. coli (1 g) a días 0,8 y 20 (B&A) ó 0,3, 7 (Araba) tras la aplicación del bacte-ricida.

Resultados analíticosLos resultados obtenidos en Laborato-rios Araba se presentan en los CuadrosII a IV, por grupos de ingredientes. ElCuadro II presenta los valores micro-biológicos de materias primas no conta-minadas, mientras que en los CuadrosIII a V se presentan los resultados dematerias primas sometidas a una conta-minación microbiológica externa. Losresultados analíticos obtenidos enLaboratorios Araba permiten extraeralgunas conclusiones interesantes.

El Cuadro II (CCH, CCA) presentala carga microbiana de base, que fuebaja y sin verse prácticamente afectadapor los bactericidas. Un estudio en eltiempo confirmó el reducido valormicrobiológico de dichas contaminacio-nes y permitió garantizar una relativabioseguridad del producto.

El Cuadro III y la Figura 1 presentanlos valores microbiológicos en CCA-C,tratadas con bactericida sólido. Elmejor control de Enterobacterias(ufc/g) en el tiempo lo llevó a cabo eltratamiento bactericida a dosis superior(0,8% AFG), seguido por el tratamien-to intermedio (0,4% AFG). El estudioconstató cómo la presencia inicial de E.coli (presente inicialmente en todos lostratamientos) fue erradicada en lasmuestras tratadas, manteniéndose en elControl.

Esta eficacia bactericida se vio acom-pañada de una reducción en el recuentofúngico, frente al tratamiento control.Si bien la especificidad de los principiosactivos en AFG es antibacteriana, estosácidos orgánicos también son efectivosfrente a la mayoría de hongos contami-

nantes, obteniéndose reducciones dehasta 10 veces frente al Control.

El Cuadro IV y la Figura 2 presentanlos valores microbiológicos de Cuartaspara consumo animal, altamente conta-minadas, tratadas con AFL, observán-dose resultados similares -en recuento

de Enterobacterias- al tratamiento sóli-do. De nuevo, el superior efecto bacte-ricida se obtuvo con la dosis superior(0,6% AFL), mientras que la dosisintermedia, pese a demostrar eficacia,no pudo disminuir tan efectivamente lacarga bacteriana: dosis crecientes de

Mundo Ganadero Enero-Febrero 07

ufc/ g Miles

Control0,4% AFG - bactericida sólido

• 0,8% AFG - bactenada sólido

1800

1600

1400

1200

1000

800

600

400

200

Odia 1 dia 3 dia 8

Control

• 0,3% AFL - tratamiento

• 0,6% AFL - tratamiento liquido

dia 1 dia 3 día 8

Cuadro IV. Recuento de Enterobacterias y Hongos en Cuartaspara Consumo Animal altamente contaminadas

d O d4 d7

CCA-C1


Invest. Salmonella ( /25 g) 0 0 0

Invest. E. coli ( /25 g) 1 1 0


CCA-C1, AFL 0,3%



Invest. E. col! ( /25 g) 1 0 1


CCA-C1, AFL 0,6%



Invest. E. col! ( /25 g) O O O


CCA-C1. Cuartas para Consumo Animal, altamente contaminadas.AFL. Producto en base a ácido fórmico y formiato armónico en forma sólida, al 0,3 y 0,6%.Invest. Salmonella y E. Coli, como presencia y ausencia.Recuento de enterobacterias y hongos: 4 muestras por determinación.


bactericida conllevaron reducciones enel recuento de Enterobacterias. Estosresultados se acompañaron de valoresparalelos en la presencia de E. coli: eltratamiento con 0,6% AFL aseguró laausencia de E. coli en todo momento.Igualmente, una mayor reducción en elrecuento fúngico se pudo observar enlas muestras tratadas con más AFL:diferencias exponenciales de hasta 103se pueden observar en el tratamiento

Figura 1. Recuento de Enterobacterias enCuartas para Consumo Animal (CCA-C), alta-mente contaminadas - tratamiento sólido.

con 0,6% AFL frente al Control.Por otro lado, si bien un estudio de

los valores microbiológicos de HCA yTCA permitió constatar una reducciónmicrobiana, la constancia en estos datosno fue tan elevada. Estos datos están adisposición de quien así los requiera.

Valoración de resultadosLas muestras poco contaminadas se venmenos afectadas por el bactericida

Figura 2. Recuento de Enterobacterias enCuartas para Consumo Animal (CCA-C1), alta-mente contaminadas - tratamiento líquido.

(hasta día 8 de análisis). El efecto bac-tericida de AFG y AFL se ha puesto demanifiesto principalmente en muestrasaltamente contaminadas, donde lareducción en recuentos de Enterobacte-rias es de hasta 10exp3. Esta reducciónse ve acompañada de una inferior pre-sencia de E. coli.

Resultados analíticos trasalmacenamiento (B&A)Los principales resultados obtenidospor lo que respecta a recuento de Ente-robacterias (hasta 21 d) se presentan enel Cuadro V y en las Figuras 3 (Hoja) y4 (Terceras).

Muestras sin contaminarExistieron diferentes patrones micro-biológicos (Cuadro V) según el materialanalizado: el material poco contamina-do (CCH, CCA) presentó cargas micro-bianas reducidas y homogéneas, inde-pendientemente del tratamiento experi-mental. Un exponencial de 10 2 y 10 3 fuehabitual en ambos casos, lo que garanti-za la bioseguridad en los productosfinales: el tratamiento bacteriostático nopermitió reducciones superiores endichos valores, pese a ser en esos trata-mientos donde se obtienen los valoresmás bajos de todo el experimento.

Es de destacar cómo los datos estu-vieron marcados por una elevada varia-bilidad: la reducción observada enrecuento de Enterobacterias en CCH(Consumo Humano) tras la aplicaciónde AFL 0,3 y 0,6% no puede justificar-se por el tratamiento per se, pues elControl también experimentó unareducción debida al propio muestreorealizado en el momento del análisis.

Muestras contaminadasMás interesantes se presentan los valo-res microbiológicos en muestras alta-mente contaminadas (Cuadro V, Figu-ras 3 y 4), pese a la alta variabilidad.Esta variabilidad no parece adjudicablea la eficacia bactericida del productoaplicado, sino que es necesario señalarcómo la aplicación del material conta-minante no permitió una distribuciónhomogénea (aglomerado y compactado)y, por tanto, un muestreo forzosamenteno homogéneo en el momento del análi-sis puede haber generado algún datoextraño (p.ej, enterobacterias en CCA-Ctratado con AFG 0,4%). Podemos seña-lar, sin embargo, cómo con una superiorhomogeneidad de este material conta-minante se pudo obtener en ingredien-


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Control 0.3% 0.6% Control 0.3% 0.6%

d4 d8 d4 d8 d4 d8d4 d8 d4 d8 d4 d8

1 000000

100000

10000

1000000

100000

10000

1000

100



Figura 3. Valores de Enterobacterias (ufc/g) en Figura 4. Valores de Enterobacterias (ufc/g) enHoja para Consumo Animal, altamente conta- Terceras para Consumo Animal, altamente con-minada. taminada.

Cuadro V Recuento de Enterobacterlas tras 4, 8 y 20 díasde almacenaje

Enterobacteriaceaed4 d8 d20

CCH

Control 17.000 200 600

AFL, 0,3% 3.500 1.200 700

AFL, 0,6% 1.680 200 1.700

CCA

Control 2.700 1.400 8.400

AFL, 0,3% 1.270 1.100 1.300

AFL, 0,6% 4.000 4.500 2.500

CCA - Cl

Control 22.000 4.800 7.400

AFL, 0,3% 7.900 5.500 118.000

AFL, 0,6% 14.000 24.000 17.300

CCA - CControl 350.000 61.000 900.000

AFG, 0,4% 270.000 2.440.000 85.000

AFG, 0,8% 2.310.000 10.500 25.000

HCA - CControl 19.200 15.400 12.800

AFL, 0,3% 150.000 27.000 13.800

AFL, 0,6% 920.000 21.000 31.000

TCA - CControl 4.400 16.000 20.000

AFL, 0,3% 64.000 101.000 30.000

AFL, 0,6% 870.000 41.000 8.300

CCH. Cuartas para Consumo Humano.CCA. Cuartas para Consumo Animal.CCA-C(1) Cuartas para Consumo Animal, altamente contaminadas.HCA-C. Hoja para Consumo Animal, altamente contaminadas.TCA-C. Tercerilla para Consumo Animal, altamente contaminada.AFL. Producto en base a ácido fórmico y formiato armónico en forma líquida, al 0,3 y 0,6%.AFG. Producto en base a ácido fórmico y formiato armónico en forma sólida, al 0,4 y 0,8%.Invest. Salmonella y E. Cok como presencia y ausencia.Recuento de enterobacterias y hongos: 4 muestras por determinación.

tes tratados con dosis bactericidas cre-cientes, dado el superior tiempo de mez-clado. Así, esta superior contaminación,más homogénea, redundó en superioresrecuentos iniciales de Enterobacterias adía 4 (CCA-C, HCA-C, TCA-C).

El uso creciente de un bacteriostáticorevirtió esta superior contaminación,tras su análisis a 3 semanas. Si bien elefecto bacteriostático empieza desde laaplicación del producto, se observócómo, a día 8, todos los tratamientosaltamente contaminados y tratadosredujeron los valores de contaminaciónhasta 100 veces, alcanzándose valoresde bioseguridad elevados. Así, la supe-rior reducción siempre se observó con elsuperior uso bactericida (0,6% AFL,Figuras 3, 4), mientras que el Controlse mantenía en valores similares. Lasmuestras más contaminadas con Ente-robacterias (CCA-C, 2.310.000 ufc/g)también presentaron E. coli a día 4. Lareducción observada ya a día 8 permitiósu erradicación.

Conclusiones comparativasentre análisis en distintoslaboratoriosLos ingredientes de base presentaronuna calidad microbiana relativamenteelevada (consumo humano y animal).corroborada por ambos laboratorios.

La homogeneidad microbiana enmuestras altamente contaminadas nofue mayor al carecer de un material decontaminación pulverulento no petrifi-cado. La generación de una muestra portratamiento no permitió soslayar elerror de mezclado del material contami-nante y se obtuvieron algunos artefactosdurante el proceso de análisis. No obs-tante, se pudo observar cómo el mejortratamiento bactericida fue el de mayordosificación (principalmente AFL, aun-que también AFG). Estas aplicacionespermitieron las mayores reducciones decontaminación entre los días 4 y 8, ase-gurando un mantenimiento microbioló-gico posterior. Garantizar un tiempomínimo de aplicación del bactericidapermite, pues, asegurar la calidadmicrobiológica del producto final. Elanálisis de E. coli y Salmonella tras 20días (datos a disposición) constató que,si bien a día 4 dos muestras presentaronpositividad a E. coli, tan sólo una mues-tra (no tratada) mostró positividad a lastres semanas. Es importante destacar lasuperior presencia habitual de E. colifrente a Salmonella, la cual no se obtu-vo en ninguna muestra. •

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Determinación en distintos tipos de salvado de trigo ... · coli, y en recuento total de Enterobacterias) son los subproductos del trigo derivados de la industria harinera, conocidos