DIAGNOSTICO DE LAS PRINCIPALES ENFERMEDADES REPRODUCTIVASEN TOROS DE LA SABANA DE BOGOTA.

ENFASIS EN RINOTRADUEITIS INFECCIOSA BOVINA (RIB)*IT-D.ro-ed·d,

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RESUMEN

.Con el objeto de evaluar el es-tado sanitario en reproductores,se utilizaron las pruebas de sero-neutralización (SN) para el biotipocitopático del virus de diarrea viralbovina (VDVB-CP). doble inmuno-difusión para leucosis, aglutina-ción microscópica (MA T) paraleptospira (5 serovares), rosa debengala para brucelosis. En elcaso de IBR se utilizó SN, ais-lamiento viral (AV), microscopíaelectrónica (ME) e Inmunofluores-cencia Indirecta (IFI). Los anima-les provenían de la Sabana de Bo-gotá (Colombia) y fueron monito-reados por seis meses con mues-treos mensuales.

La tasa de reactores a VDVB,VLB y L. spp. fueron de 83%,42% Y 92% respectivamente, in-dividualmente las tasas de reac-tores por serovar para leptospirafueron de 62% para pomona ycanícola, 38% para hardjo, 23%para gryphotiphosa y 18% paraicterohaemorraghiae. No se de-tectaron reactores a Brucelosis.Las tasas de incidencia y serocon-versión para DVB fueron de 44 y75% respectivamente, con unamayor incidencia en determina-das épocas del año. La tasa dereactores a una o más enferme-dades virales y/o bacterianas fuede 83% para DVB/L. spp., DVB/VLB 42%, DVBNLB/L. spp. 33%VLB/L. spp. 31 % y DVB/IBR 17%.

En el diagnóstico de IBR la SNfue de mayor valor comparadacon las otras pruebas, 2 toros

Agustín Góngora O. * *Luis C. Vil/amilJ. * *Ytctor J. Vera A. * *

Gloria C. Ramírez N. * ***Jorge l. Parra A.

fueron reactores (15.3%) contítulos presentes durante todo elmonitoreo, no se observaron par-tículas virales por ME en muestrasclínicas; el intento de aislamientoviral no tuvo éxito en condicionesnaturales.

INTROOUCCION

La evaluación sanitaria deltoro, requiere especial atenciónpor diversas causas: la utilizaciónde animales sin control sanitarioprevio y sistemático, la latencia ypersistencia que inducen algunasinfecciones, el efecto sobre la ca-lidad del semen y la trasmisión víacoital o a través de semen con-taminado.

La diarrea viral bovina (DVB)es producida por un pestivirusclasificado dentro de la familiaFlaviridae (Franeki, 1991; citadopor Hooft et. al., 1992). Se cono-cen dos biotipos citopático (CP) yno citopático (NCP) dependiendodel efecto que producen sobre loscultivos celulares (Bolin et. al.,1987).

En Colombia, la enfermedadse introduce en 1975 por impor-tación de animales desde Holanda(Borda, 1975). Los toros inmuno-tolerantes, excretan grandes can-tidades de virus NCP a través delsemen (Bielanski et. al., 1991). elcual se ha atribuido a infeccionespersistentes o agudas posnatales(Meyling et. al., 1988; Paton et.al.,1989).

Los efectos del virus en el se-men de un toro infectado experi-mentalmente, consisten en bajadensidad, motilidad y un marcadoaumento en el número de anor-malidades primarias (Paton et. al.,1989).

En el caso de la leucosis bovi-na, es causada por un retrovirusclasificado dentro de la familia re-troviridae, subfamilia oncoviridae,subgrupo morfológico C. (Alman-sa y Mariño 1992). Los animalesinfectados permanecen como por-tadores convirtiéndosen en la prin-cipal fuente de infección (Johsony Kaneene, 1991).

Diversas controversias ha ge-nerado la transmisión del virus porel semen (Monke, 1986; Straub,1990). para Lucas et. al., 1980esta vía es importante, mientrasque otros la limitan a la contami-nación de los equipos con linfoci-tos infectados (Jhonson y Kanee-ne, 1991). El agente causal de laleptospirosis es una espiroqueta(Spira =espiral y choete =pelo)(Jawetz et. al., 1987), clasificadadentro de la familia Leptospiridaede la cual se conocen las especiesinterrogans (patógena) y biflexa(saprofítica) (Howard y Timoney,1981 ). De la L. interrogans se co-nocen actualmente 20 serogruposy más de 200 serovares (Hathawayet. al., 1986; Myers, 1986; Prescotty Nicholson, 1991).

Por análisis de endonucleasasde restricción del serovar hardjo sehan identificado dos genotipos an-tigénicamente similares pero pa-

togénicamente diferentes: la L.hardjo bovis y la L. hardjopratjino(Marshall et. al., 1991).

La leptospirosis puede producirorquitis durante la fase aguda yaunque las infeciones persistentesson frecuentes, no conlleva la elimi-nación a través del semen (Ellis et.al.,1986).

Recientemente Díaz y col.,(1993) aislaron la bacteria de riño-nes de bovinos a nivel de matadero,los aislamientos se correlacionaronpor técnicas inmunohistoquímicascon la presencia en testículo yepidídimo.

La brucelosis bovina producidapor la B. ebortus, en los toros in-fectados puede ocacionar reduc-ción de la líbido y calidad esper-mática (Lambert et. al., 1982). Elsemen contaminado puede trans-mitir la infección, siendo menor elriesgo de transmisión por montanatural (Hare, 1985).

La rinotraqueitis infecciosabovina (lBR) es producida por elherpes virus bovino tipo-1 (HVB-11, clasificado dentro de la familiaherpesviridae, subfamilia alfaher-pesvirinae, posee cubierta lipídica,cápside icosahédrica yacido nu-cleico DNA (Roizman y Batterson1985). Múltiples copias del DNAviral pueden permanecer comoepisomas e integrados al genomacelular de las neuronas en dondeestablece infecciones latentes(Hammerschsmith et. al., 1990).

Este artículo representa parte de la tesis de maestría del primer autor, dirigido por el segundo. Universidad Nacional de Colombia, Santafé de Bogotá. Facultad deMedicina Veterinaria y de Zootecnia, Maestría en Reproducción Animal. Línea de Investigación enfermedades de la Reproducción.Respectivamente: DMV., MSc. Unillanos; DMV., MSc., PhD.; DMV., MSc.; DMV., MSc. Profesores Universidad Nacional; DMV., MSc. Corpoica Villavicencio.

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Dentro de las infecciones, sereconocen varias formas clrnicas.la respiratoria (lBR) la de mayorpresentación, produce infertili-dad, mortalidad embrionaria yaborto (Miller, 1991). la genitalconocida como vulvovaginitis-balanopostitis pustular infecciosa(lPV-IPB) es una infección vené-rea caracterizada por infertilidadtemporal (Donkersgoed y Babuik,1991; Miller, 1991).

la forma encefalftica se des-cribe como una enfermedad al-tamente mortal en terneros(George, 1991). Otras formas re-portadas incluyen dermatitis,mastitis y metritis (Bwagamoi yKaminjolo, 1971; Greig y Bannis-ter, 1965; lomba et. al., 1976).

Diversos autores han descritocuadros respiratorios y genitalesen toros de centros de insemi-nación artificial (lA) (Bitsch,1973; Goffaux et. al., 1976 Jan-sen et. al., 1980). El aislamientoa partir de testículo también se hareportado (Thiry et. al., 1981 ).

Este estudio, pretendió valoraralgunas técnicas diagnósticas noconvencionales, con el objeto deofrecer alternativas orientadas asolucionar los vados existentesen este aspecto y a la vez quepermitieran conocer el estadosanitario de los reproductores es-tudiados.

MATERIALES Y METODOS

Se examinaron 13 toros de lasrazas Holstein, Pardo Suizo, y Jer-sey con edades entre 2-5 años,utilizados por monta directa comoalternativa a la inseminación arti-ficial (lA).

Pruebas diagn6sticas

Diarrea Viral bovina. Se em-pleó la prueba SN (Cortés, 1988)modificada por el laboratorio deenfermedades del PRA (Parra,1993).

Leucosis Bovina. Se utilizó laprueba de doble inmunodifusiónen agar-gel, en agarosa al 0.7%en buffer borato pH 8.6, como an-trgeno la Glicoprotefna 58 (Gp 58)obtenida a partir de la Ifnea Fetallamb Kidney-Bovine leukemia vi-rus (FlK-BlV) (Niño, 1992).

Leptospirosis. Se empleó laMAT según técnica estandarizadapor ICA-CEISA con algunas rnodi-

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ficaciones, para 5 serovares:hardjo, pomona, canícola, ictero-hemorragie y gripothyphosa.

Brucelosls. Se utilizó la pruebaRosa de Bengala (RB) a las san-grias 1,3 y 6. El control positivofue un suero hiperinmune produ-cido en conejo con título 1:200 alas pruebas de aglutinación lentaen tubo y 2-mercaptoetanol. Elcontrol negativo correspondió aun suero bovino negativo.

Rinotraqueitis Infecciosa Bovi-na. Se usaron las pruebas de SN,IFI para detección de antfgeno,AV y ME (tinción negativa) en im-prontas de tejidos y secrecionesnasales y prepuciales.

En la SN se utilizó el métodode suero variable-virus fijo, si-guiendo la técnica descrita por ellaboratorio de Virología del ICA-CEISA (Cortés, 1988). Sueroscon títulos 1:2 se consideraronpositivos. En la detección de an-trgeno por IFI se utilizaron impron-tas de tejido fijadas en laminillas,el primer anticuerpo fue un suerobovino anti-IBR donado por la Uni-versidad de IOWA (USA) y el con-jugado un suero de conejo antilgGbovina.

Se intentó el aislamiento viralde muestras nasales y prepucialesinoculando subcultivos de RFB enmonocapa con 90% de confluen-cia, la adsorción de las muestrasse realizó a 37°C por 1 hora.

la tinción negativa para mi-croscopfa etectréníca se llevó acabo según la técnica utilizada enel laboratorio de microscopfa elec-trónica del Instituto Nacional deSalud (lNS) (Rodrfguez, 1983).

RESULTADOS y DlSCUSION

Diarrea viral bovina obtuvo elmayor porcentaje de reactores(83%) entre las enfermedades es-tudiadas (Figura 1). Estos resul-tados coinciden con estudios rea-lizados por Griffiths y cot., 1982donde esta entidad presentó lamayor reactividad en la poblaciónestudiada.

la tasa de incidencia (casosnuevos presentados durante elestudio) fue de 44% denotandouna gran circulación viral en lospredios donde se encontraban losanimales, el 75% (6/8) de los ani-males seroconvirtieron (Figura 2).

la tasa de reactores para lospp fue de un 92%, para los dife-rentes serovares, la mayor tasacorrespondió a lo pomona y ca-nlcola con un 62%, lo hardjo-prat-jino 38%, lo gryppotyphosa 23%y lo icterohaemorrhagiae 18%(Figura 3).

la tasa de reactores a más de1 serovar fue de un 48% paracanfcola-pornona, 23% parahardjo-pomona y hardjo-canfcolay 15% para hardjo-canícola po-mona (Figura 4).

Para leucosis, el porcentaje dereactores fue de (42%), lo cualreafirma la alta prevalencia en laSabana de Bogotá, cuya inciden-cia cada año es mayor, en 1980era de 36.4% (Almanza y Mariño1992). Aunque el semen aparen-temente no tiene importancia enla transmisión del virus, el valorgenético y comercial del toropuede verse afectado en razón delresultado.

los resultados obtenidos paralos diferentes serovares de lep-tospira reflejan infecciones acti-vas que deben ser valorados conmayor cuidado sobre los diferen-tes parámetros productivos y re-productivos a nivel del hato.

En el diagnóstico de brucelosisa pesar de utilizar una prueba mássensible y específica frente a laprueba tamiz (aglutinación lentaen placa), no se detectaron reac-tores. Estos resultados puedenser atribuidos al manejo individu->alizado de los toros, a la muestratan pequeña, o una baja carga in-fecciosa producto de los pro-gramas de control en estas fincas,resultados que contrastan con losobtenidos por Villalobos y col.,1986 sobre una mayor población.

Solo dos toros fueron reac-tores a IBR (15.3%). la presenciade animales seronegativos en eldiagnóstico de IBR puede tenerdos significados, que el animalsea verdaderamente libre es decirque nunca estuvo expuesto al vi-rus, o contrariamente reflejar unainfección latente sin titulos se-rológicos demostrables; en estecaso se sugiere que los animalessean inmunosuprimidos parareactivar el estado latente, com-probándose que mediante esteprocedimiento el virus ha podidoaislarse (Dennett et. al., 1973).

la prueba de SN a pesar de sucosto, tiempo requerido y dificul-tad, fue de mayor valor com-parada con las otras pruebashecho que permite seguir re-comendando su uso. la estan-darización de otras técnicas (in-munoenzimáticas, histoquímicaso PCR etc.) sería de singular im-portancia principalmente en la de-tección de animales con infeccio-nes latentes.

El exceso de fluorescenciainespecífica en muestras clínicasfue el mayor limitante en la lecturade la prueba IFI, el intento de ais-lamiento viral tampoco fue fac-tible y su uso solo puede reco-mendarse durante la reactivaciónde la latencia o la fase de viremiaen infecciones primarias, en dondese eliminan un mayor número departículas al medio.

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1El uso de la ME en la detecciónde estado latentes, en secrecio-nes naturales no fue significativo,sin embargo su uso en medicinaveterinaria debe continuarse prin-cipalmente en la identificación deaislamientos virales sobre mues-tras muy purificadas.

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la presencia de animales reac-tores a una o más enfermedadesvira les (Figura 5) pone en eviden-cia la existencia de coinfeccionesactivas sin que hasta el momentose conozca su importancia.

Recientemente Everman et. al,1991 sugiere un sinergismo pa-tológico entre herpesvirus-retro-virus. la coinfección DVBI VlBtambién podría favorecer la super-infección con otros virus y bacte-rias en razón del efecto inmune-supresor de ambos virus.

Parra, 1994 analizando elefecto de la coinfecciónDVB/lBR/lo hardjo considera quela coinfección IBR/DVB puede fa-vorecer el efecto de lo hardjo so-bre el intervalo parto-concepción.Se podrfa pensar que dicho efectopuede presentarse en el macho,con la eliminación de la bacteriaen orina y semen.

los resultados obtenidos eneste estudio reflejan una preocu-pante reactividad serológica paralas enfermedades estudiadas ypone en evidencia el riesgo querepresentan estos animales a fin-cas libres.

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Tasa de Reac tores100 I I

80 _....

60 _....

40 _....

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92

oDVB(l0/12) IBR(2/13) VLB( 5/12) LEPTsp(l2/13) BRUGEL(0/13)

FIGURA 1. Tasa de toros reactores para las diferentes enfermedades estudiadas.

Tasa de Reac tores100 I I

60 · .

80 ···········75·······························

40 .44

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1NGIDENGIA (4/9) SEROGONVERSION (6/8)FIGURA 2. Tasa de incidencia y seroconversión a DVB.

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Tasa de Reae tores100. I

80

62 62

20

60

--- .~-----------------------------------------------------------------

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oL. gryphot. L.1etero.L. pomona L. ccnicoíc L. hardJo

FIGURA 3. Tasa de reactores para los diferentes serovares de L. spp.

Tasa de Reactores60· .

40

5 O 1-.......... 48 ..................... ...... .... . . . . ." . . .. ...... .. ..... ...."......... . . .. .... . .. ...

30

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Ocanlcola/pomona hardJo/pomona hardJol eeate hardl canlc/pomona

FIGURA 4. Tasa de toros reactores a más de 1 serovar de leptospira spp,

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Tasa de Reac tores100~1 -----------------------------------------------,

83

DVB/VLB DVB/VLB/Lept ap VLB/Lep ap

FIGURA 5. Tasa de toros reactores a una o más enfermedades virales y/o bacterianas.

80

60

40

20

oDVB/Lept ap

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GRADOS COLECTIVOS

La Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia informa a los estudiantes de Pre-grado que habiendo termi-nado sus asignaturas antes del primer semestre de 1993, no han presentado trabajo de grado, que por autori-zación del Consejo Académico de la universidad podrán realizar un trabajo monográfico, el cual debe ser ins-crito en la Secretaría de la Facultad y una vez aprobado y evaluado recibir su respectivo título, en ceremoniaespecial hacia fines del segundo semestre de 1995.

Informes: Secretaría Académica FMVZ 1r 368 1627

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