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Temas Selectos de Biología
Equipo:
Argueta Ayala Zaira
Guillen Palma Irais
Grupo: 612 Sección A
Escuela Nacional Preparatoria
Plantel 5: “José Vasconcelos”
Introducción generalLa microbiología, es la ciencia que estudia los microorganismos en su naturaleza, vida y acción. El término, etimológicamente, es de amplio significado, pero suele utilizarse en sentido limitado para comprender determinadas formas microscópicas de vida.
Su campo incluye las bacterias, las rickettsias, los virus, las levaduras, los mohos y los protozoos en relación con el hombre y sus actividades, los animales, las plantas y entre ellos mismos.
Los microorganismos pueden estar constituidos por una sola célula (unicelulares), así como pequeños agregados celulares formados por células equivalentes ; estos pueden ser eucariotas (células con núcleo) tales como hongos y protistas o procariotas (células sin núcleo definido) como las bacterias.
La existencia de este mundo microbiano se desconocía hasta la invención del microscopio (principios del siglo XVII), instrumentos ópticos que sirven para ampliar objetos que son tan pequeños que no se puede ver claramente por el ojo humano sin ayuda, abriendo el reino biológico de lo muy pequeño a la exploración científica sistemática. La mayoría de los microorganismos son de vida libre.
La microbiología permite conocer los microorganismos con sus características morfológicas, biológicas y antigénicas; su relación con la infección y con la enfermedad en el hombre; las vías de penetración del hospedero, las acciones y los cambios quimiofisiológicos y celulares que ocasionan; la resistencia natural adquirida que ofrece el organismo, así como otros estados inmunitarios a que dan lugar.
Ésta práctica está dividida en tres partes correspondientes a: bacterias, hongos y protistas, pues resulta más fácil explicar y entender el desarrollo de cada uno.
MICROBIOLOGÍA
Objetivo:
INICIA CON UN VERBO EN INFINITIVO
Para BACTERIAS:
Para HONGO:
Para PROTISTAS:
Planteamiento del problema:
Es una pregunta
De BACTERIAS:
De HONGO:
De PROTISTAS:
Hipótesis:
SI…ENTONCES.
Para BACTERIAS:
Para HONGO:
Para PROTISTAS:
Marco Teórico: 2
Que El texto describirá la morfología y taxonomía de bacterias, hongos y protistas.
Diseño Experimental:
Es la descripción paso a paso de la metodología usada, consulten la bitácora para usar la misma secuencia de pasos.
Les dejo este material por si desean usarlo pero no es requisito.
NO USEN FOTOGRAFÍAS DE INTERNET PORQUE TIENEN BASTANTE MATERIAL PROPIO.
Cuiden citar así sus fotos, porque habrá concurso de microfotografía y es importante tener la referencia de autor en formato apa.
LES DEJO EL EJEMPLO:
Adolfo Christian Montes Medina.Amazona finschi. Jaslico, México. 6 de abril de 2011.Imagen tomada con microscopio de campo claro a 40x.
MATERIAL:
Uso de bata en todo el procedimiento del diseño experimental. Cabello recogido. Esterilizar área de trabajo al inicio y final de la práctica.
Para medio de cultivo:
Siembra: Tinción Gram:
Agar Mac ConkeyAgar BacteriológicoPesa de monoplanoVidrio de relojGuantesAgua destiladaAlgodónMatraz ErlenmeyerMechero de BunsenHisopoTubos de ensayoMarcador indeleble
Medios de cultivo natural (frutas ó/y verduras jugosas)Caja de petriTubos de ensayoAsaAlgodónLámpara de alcohol
Cristal violetaAzul de metiloPortaobjetosAguaAlcoholSafraninaLugolGuantesCubre bocaMicroscopio óptico
Encendedor
Procedimientos:
Para medio de cultivo:
Para ello se requerirá ocupar Agar bacteriológico y Agar Mac Conkey de a cuerdo al modo de preparación de cada uno.
Agar Bacteriológico Agar Mac ConkeyProcesado especialmente para ser utilizado como agente solidificante enmedios de cultivo microbiológicos.Ajustar y/o suplementar como se requiera para cumplir los criterios de funcionalidad.
Sobre la pesa de monoplano colocar el vidrio de reloj y medir 50g de Agar Mc Conkey. Vaciar al matraz erlenmeyer y suspender los 50g del medio en 1L de agua purificada. Calentar con agitación suave hasta su completadisolución y hervir durante un minuto. Retirar del fuego y con algodón se tapará la boca del matraz.Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Enfriar a una temperatura entre 45-50°C. Vaciar en placas de Petri y tubos de ensayo estériles.
Tanto para los tubos de ensayo como cajas petri, se verterá Agar Mac Conkey de la siguiente manera:
Encender la lámpara de alcohol.
Se retira el algodón que tiene el matraz erlenmeyer para poder esterilizar la boca de este.
Se esteriliza también la boca del tubo de ensayo y las cajas petri y se vacía el Agar.
A los tubos de ensayo se les pone como tapón un poco de algodón y se colocan en horizontal, recargándolos con su boca
sobre el recipiente.
Se concluye la preparación para los medio de cultivo cuando los tubos de ensayo que se inclinaron estén fríos y el medio de cultivo se haya solidificado, se procede a sembrarlos.
Para siembra:
Se empleará siembra en estría simple y siembra cuadrante cruzada.
Siembra cuadrante cruzada
Se enciende la lámpara de alcohol y se coloca cerca la caja de petri para la siembra (siembra en cuadrante cruzada) y los tubos de ensayo (siembra en estría simple).
El asa para sembrar debe tener el extremo del alambre formando un círculo (pequeño).
Se toma el asa por la extremidad del mango con los dedos pulgar, índice y medio de la mano derecha. En seguida se flamea al rojo vivo del alambre del asa, se deja enfriar sobre un poco de Agar solidificado.
Se coloca la punta del asa sobre la colonia de bacterias que se elija, pare que tocando la superficie se adhieran gran número de bacterias.
Se destapa la boca del tubo de ensayo y se esteriliza (se flamea un poco con la lámpara de alcohol) para luego introducir el asa, haciéndola pasar suavemente por la superficie del medio solidificado, haciendo una estría simple, que se inicia en la parte más interna del tubo, teniendo cuidado de no romper el Agar al hacer la siembra.
Se saca el asa del tubo, se tapa el tubo y el asa se flamea al rojo vivo, quedando lista para otra siembra; en este caso la siembra en cuadrante cruzada que tendrá el mismo procedimiento.
Finalmente se marcarán las cajas de petri con el grupo que las sembró.
Para tinción:
Con un asa previamente esterilizada se coloca en un portaobjetos una pequeña cantidad algún cultivo bacteriano, anteriormente hecho.
Se hace fijación de las bacterias al portaobjetos (Frotis): Se coloca una pequeña gota de agua al portaobjetos inmediatamente pasar tres veces el portaobjetos por la llama durante unos segundos. Dejar enfriar el portaobjetos entre los pases.
Una vez seco, se agrega cristal violeta reposar 1min.
Luego se sustituye cristal violeta por azul de metilo 1 min.
Se elimina el exceso: lavado.
Se cubre la preparación con una solución yodo-yodurada: Lugol
1min.
Se elimina exceso: lavado
Se agrega alcohol para decolorar (5-10 gotas), con esto las células Gram positivas retienen el compuesto de cristal-violeta-yodo y conservan su color azul, mientras que las Gram negativas se decoloran completamente por la acción del alcohol.
Se elimina exceso: Lavado
Se aplica un colorante contraste, el rojo de safranina 1min, con el cual las células Gram negativas que antes se habían decolorado se tiñen después.
Eliminar exceso: Lavado
Finalmente dejar secar y luego se podrá observar al microscopio.
resultados:
MEDIO DE CULTIVO: Agar Mc Conkey
SIEMBRAS: Estría simple
y en cuadrante cruzada.
TINCIÓN GRAM:
Paso 1: Poner en portaobjetos un poco de cultivo bacteriano.
Conclusión:
Paso 2: Fijar muestra (Frotis).
Paso 3: Cristal violeta
(1min).
Paso 4: Azul de metilo (1 min)
Paso 5: Eliminar exceso
Paso 6: Lugol (1min)
Paso 7: Eliminar exceso
Paso 8: Alcohol (5-10
gotas)
Paso 9: Eliminar exceso
Paso 10:
Safranina
Paso 11: Eliminar exceso
Paso 13:
Observar en
microscopio
Paso 12:
Secar al aire
Paso 13:
Resultados
REFIERAN LA TAXONOMIA Y MORFOLOGIA HALLADA EN CADA REINO MONERA, FUNGI Y PROTISTA.
FUENTES DE CONSULTA:
Velasco M., López R., Romero M., Salamanca C. Biología 2º Bachillerato: Editex, España 2006. Piña López C.: Diversidad microbiana, tipos de microbios.http://www.unad.edu.co/fac_ingenieria/pages/Microbiologia_mutimedia/bact_clasif.htm
Franco Martínez F.: UNAM Facultad de Odontología, Microbiología, guía de estudio 2002. http://132.248.225.10/licenciatura/guiasyprogramas/guias/2_microbiologia.pdf
Microbiología clínica: http://danival.org/600%20microbio/6200microclin/bhim/bhim_2-3.html
http://www.mcd.com.mx/pdfs/AGAR%20MAC%20CONKEY.pdf
http://www.mcd.com.mx/pdfs/agar_bacteriologico.pdf
http://www.joseacortes.com/practicas/frotisbact.htm
