ENENSAYOSSAYOS DE MIDE MIGRACIÓNGRACIÓN E ...eurolab.org.es/Newsletter/julio2013/17.Anexo.2.pdf · A,B,C alimentos hidrofílicos D1, D2 alimentos lipofílicos Jornadas de Referencia-

CENTRO NACIONAL DE ALIMENTACIÓN

ENSAYOS DE MIGRACIÓN ESPECÍFICA EN ENSAYOS DE MIGRACIÓN ESPECÍFICA EN SIMULANTE E PARA ALIMENTOS SECOS (TENAX®)

SECCION MONOMEROS Y ADITIVOSSERVICIO CONTAMINANTES

Juana BustosCentro Nacional de AlimentaciónAESAN

Jornadas de Referencia- Análisis de Alimentos – CNA, 6 junio 2013

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JUSTIFICACIÓN: BASE LEGALR l t (UE) Nº 10/2011 M t i l bj tReglamento (UE) Nº 10/2011 - Materiales y objetosplásticos para contacto con alimentos

REQUISITOS MATERIALES REQUISITOS MATERIALES PLASTICOSPLASTICOS

DE COMPOSICIÓN GENERALES DE LOS DE COMPOSICIÓN GENERALES DE LOS MATERIALES PLASTICOSMATERIALES PLASTICOSMATERIALES PLASTICOSMATERIALES PLASTICOS

• Lista de sustancias• Pureza / calidad técnica

• PAAs: migración N.D.(0.01mg/kg alimento)

• Límites de migraciónLímites de migración-GlobalEspecífica

• Metales pesados: límites máximos de migración

(Ba Co Cu Fe Li Mn Zn)-Específica• Otras restricciones

(Ba,Co,Cu,Fe,Li, Mn, Zn)


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JUSTIFICACIÓN: BASE LEGALRESTRICCIONES IMPUESTAS A LAS SUSTANCIAS

LIMITE MIGRACIÓN GLOBAL (LMG)

RESTRICCIONES IMPUESTAS A LAS SUSTANCIAS

LIMITE MIGRACIÓN GLOBAL (LMG)Cantidad máxima permitida de sustancias no volátiles liberadasdesde un material u objeto en simulantes alimentarios: ≤ 10mg/dm² materialmg/dm² material.(60 mg/kg simulante, materiales destinados a alimentos paralactantes /niños corta edad)

LIMITE MIGRACIÓN ESPECIFICA (LME; LME[T]):C ió á i d t i i di id l dCesión máxima de sustancias individuales o grupos desustancias, desde el material al alimento o simulantealimentario.(máximo: 60 mg/kg )


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JUSTIFICACIÓN: BASE LEGALVERIFICACIÓN ANALÍTICA DE LOS LÍMITES MIGRACIÓNVERIFICACIÓN ANALÍTICA DE LOS LÍMITES MIGRACIÓN:

ENSAYO DE MIGRACIÓNENSAYO DE MIGRACIÓNSIMULACION EN EL LABORATORIO DEL CONTACTOMATERIAL-ALIMENTO, EN LAS PEORES CONDICIONESMATERIAL ALIMENTO, EN LAS PEORES CONDICIONESPREVISIBLES DE USO REAL (T, t)

SE REALIZA ENSE REALIZA EN:

ALIMENTOS (ME)materiales en contactomateriales aún no en contacto

SIMULANTES DE ALIMENTOS (MG, ME) - materiales aún no en contacto

materiales aún no en contacto



JUSTIFICACIÓN: BASE LEGALSIMULANTES DE ALIMENTO

M di d i l d t l

SIMULANTES DE ALIMENTO:

Medios de ensayo convencionales para demostrar laconformidad de los materiales / objetos plásticos queaún no están en contacto con los alimentosaún no están en contacto con los alimentos.

Representan categorías de alimentosTENAX ®

p g


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Control oficial: A partir 1 enero 2013Simulantes de alimentos : Regl. 10/2011 (Anexo III)

A Etanol 10% (v/v) Alimentos acuosos

B 3% (p/v) ac acético Alimentos ácidos-pH<4.5

C Et l l 20 % ( / )Alimentos alcohólicos ≤20%

li iC: Etanol al 20 % (v/v) y alimentos con ciertocarácter lipofílicoAlimentos alcohólicos >20%

D1 Etanol al 50 % (v/v) y emulsiones grasa en agua-productos lácteos

D2 Aceite vegetal Alimentos con grasa libreD2 Aceite vegetal(especificación en distribución AG)

Alimentos con grasa libresuperficial

E:E: MPPOMPPO Alimentos secos (solo ME)E: E: MPPOMPPO Alimentos secos (solo ME)

A,B,C alimentos hidrofílicos D1, D2 alimentos lipofílicosJornadas de Referencia- Análisis de Alimentos – CNA, 6 junio 2013


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SIMULANTE E

REGLAMENTO (UE) Nº 10/2011:

Introduce el MPPO como simulanteconvencional para alimentos secos sóloconvencional para alimentos secos sólo migración específica

Introduce límites de migración de sustancias en alimentos secosalimentos secos



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SIMULANTE EREGLAMENTO (UE) Nº 10/2011 ANEXO IIIREGLAMENTO (UE) Nº 10/2011, ANEXO III

TENAX ®TENAX ®TENAX ®



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SIMULANTE Eli(ó id d 2 6 dif il f il )poli(óxido de 2,6-difenil-p-fenileno)

(MPPO) – TENAX ®POLIMERO DE ALTA POROSIDAD

ELEVADA SUPERFICIE ESPECÍFICA: gran capacidad de TENAX ®

TENAX ®g

adsorción (volátiles)

ESPECIFICACIONES simulante:ESPECIFICACIONES simulante:− tamaño de partícula: 60-80

malla− poro 200 nm



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SIMULANTE E

INCONVENIENTES:

− Elevado precio.−Requiere limpieza antes del usoRequiere limpieza antes del uso.−Dificultad en la manipulación.

VENTAJAS:

−Reutilizable (tras lavado)



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PROCEDIMIENTO DE ENSAYO

PREPARACIÓN DEL SIMULANTE

ENSAYO DE MIGRACIÓN (exposición ( pmaterial/simulante)

EXTRACCIÓN DEL SIMULANTE

DETERMINACIÓN INSTRUMENTAL DE ANALITOS



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PREPARACIÓN DEL SIMULANTELIMPIEZA: eliminación de sustancias

10 g del simulante en cartuchos para Soxhlet.

LIMPIEZA: eliminación de sustancias adsorbidas

0 g de s u a te e ca tuc os pa a So etReflujo continuo con acetona 6 horas (300 ml, mínimo 250 ml por 20 g simulante).

Pasar el simulante a placas de vidrio (ej. 150x25 mm), extendiéndolo. Tapar y dejar 24h, agitar suavemente de vez en cuandoagitar suavemente de vez en cuando. Introducir las placas tapadas en estufa a 160 ºC, 6 horas.Almacenar en desecador hasta su usoAlmacenar en desecador hasta su uso.



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ENSAYO DE MIGRACIÓN MUESTRAS TIPO FILM:MUESTRAS TIPO FILM:OPTATIVO PREVIO AL ENSAYO:Identificación del material (PP, PE,( , ,PVC, etc) por espectroscopía IR.

Placas de ensayo: Petri devidrio (60x20 mm) y aro devidrio interior (di 4 cm).( )Lavadas con disolventeadecuado.

Cortar la muestra (3 replicados),diámetro aprox. igual al exteriordel aro de vidrio. Manipulacióncon guantes de algodón!.



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ENSAYO DE MIGRACIÓN I t d i l t t d lIntroducir la muestra cortada en laplaca y colocar encima el aro devidrio.

Eliminar la electricidad estáticadel vidrio y pesar 1 g de simulantesobre la muestra de plástico.

Blanco de ensayo: 1 g simulanteBlanco de ensayo: 1 g simulante,sin muestra (film).



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ENSAYO DE MIGRACIÓNEnvolver las Estufa / climatizador: tiempo y

temperatura de ensayo en función del uso real (Reg. (UE) 10/2011).

Envolver las placas en papel

de aluminio ( g ( ) )Ej.: 10 días, 60ºC : cubre período de

contacto > 6 meses a Tª ambiente o <, incluido calentamiento hasta 70ºC, 2h ó

hasta 100ºC 15 minutoshasta 100ºC, 15 minutos


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Finalizada la fase de exposición,trasvasar el simulante desde laplaca a un vial (40 mL) conplaca a un vial (40 mL), conayuda de un embudo.Añadir 20 mL del disolvente de

t ió l d l b dextracción, lavando el embudo.

Agitador orbital, 1 min, 700 rpm.Decantar el sobrenadante enDecantar el sobrenadante enotro vial.


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Repetir extracción y combinar sobrenadantes.sobrenadantes.

GC/ MS

Concentrar el extracto si esnecesario (bajo nitrógeno).

GC/ MSHPLC/ UV- FLLC/MSetcFiltrar una alícuota (PTFE, 0.45

µm) en viales para el análisisinstrumental de las sustancias.

etc.

st u e ta de as susta c as


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DETERMINACIÓN INSTRUMENTALEJEMPLO 1) ANÁLISIS POR GC/MS

Analitos: BHT (cas 128-37-0) antioxidante

EJEMPLO 1) ANÁLISIS POR GC/MS

BHT (cas 128-37-0) antioxidanteBP (cas 119-61-9) filtro UVDIBP (cas 84-69-5) DEHA (cas 103-23-1)DEHA (cas 103 23 1) DINCH (cas166412-78-8) plastificantes

Extracción del Tenax® :Extracción del Tenax® :Disolvente de extracción: hexanoCurvas calibrado en matriz (simulante): patrones añadidos antes de extracciónpatrones añadidos antes de extracción

Técnica: Cromatografía de gases- Espectrometría de masas (GC-MS)C o atog a a de gases spect o et a de asas (GC S)Uso de benzyl butyl phthalate (BBP) como patrón interno


CENTRO NACIONAL DE ALIMENTACIÓN19

DETERMINACIÓN INSTRUMENTALCondiciones GC- MS

C l HP 5MS 5% h lAnalito

Target Ion

QualifierIon

BHT 205 1 220 2

Columna: HP-5MS 5% phenylmethyl siloxane. 30m x 250 µm, 0.25 µm

BHT 205.1 220.2

BP 104.9 182.0

DEHA 129 0 147 0

Horno: 70°C (1 min); 20°C/min → 250 ºC;10°C/min → 320°C(6 min) DEHA 129.0 147.0

DIBP 148.9 223.0

DINCH 155 0 127 0

( )Temperatura Inyector: 280ºCModo Inyección: splitlessVolumen Inyección: 1 µl DINCH 155.0 127.0

BBP 91.0 149.0

Volumen Inyección: 1 µlFlujo: 1.3 ml/minAdquisición: SIM


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DETERMINACIÓN INSTRUMENTALÓ ÁSEPARACIÓN CROMATOGRÁFICA

6x10ntens.

BBP

1.0

1.2

0.6

0.8

0.4

BHTDEHA

DINCH

6 8 10 12 14 16 Time [min]0.0

0.2

BPDiBP


matriz: simulante E

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DETERMINACIÓN INSTRUMENTALEJEMPLO 2) ANÁLISIS POR HPLC/UV

Analitos: BP (cas 119-61-9) filtro UV

EJEMPLO 2) ANÁLISIS POR HPLC/UV

DPBD* (cas 886-65-7)UVITEX ob

( 7128 64 5)

blanqueantesópticos

(cas 7128-64-5) p

* No incluido en la lista positiva

Curvas de calibrado en el simulante.Extracción del Tenax® :Disolvente de extracción: acetonitrilo

Técnica: Cromatografía de líquidos con detector ultravioleta (HPLC-UV)



DETERMINACIÓN INSTRUMENTALCondiciones HPLC- UVCondiciones HPLC- UV

Tiempo (min)

% FM A % FM B

Gradiente

Columna: LUNA C18(2), 50 x 3 mm, 2.5 µm, 30 ºC Fase móvil:

0 35 6510 5 9515 5 95Fase móvil:

A: aguaB: ACN/0.1%AcOH

Analito λ (nm)

16 35 65

Flujo fase móvil: 0.6 ml/min

Volumen Inyección: 5 µl

Analito λ (nm)

BP 280

Volumen Inyección: 5 µl

Tiempo de análisis: 20 min

DPBD 230

UVITEX OB 230

22Jornadas de Referencia- Análisis de Alimentos – CNA, 6 junio 2013

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DETERMINACIÓN INSTRUMENTALÓ Á

BP

SEPARACIÓN CROMATOGRÁFICA

Jornadas de Referencia- Análisis de Alimentos – CNA, 6 junio 2013matriz: simulante E

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VALIDACIÓNBASADA EN RESULTADOS DE:

MIGRACIÓN film polietileno en el E. Intercomparación (EURL):

precisiónexactitud y precisión

Determinación en el SIMULANTE: - 5 ANALITOS BHT

BP

simulante (10 días, 60ºC) y determinación en el SIMULANTE:

- 3 ANALITOS BPDiBPDEHA DINCH

DPBDUVITEX ob

- 3 SERIES- 3 NIVELES concentración- 4 REPLICADOS por nivel- extracción con hexano

- 5 REPLICADOS por serie- extracción con ACN


extracción con hexanoTécnica : GC/MS (ejemplo 1) Técnica :HPLC/UV (ejemplo 2)

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VALIDACIÓNENSAYO INTERCOMPARACION validación método (EURL)

E t ió SIMULANTE Emg/kg Resultado - Extracción: SIMULANTE E (Tenax®)5 ANALITOS,

ANALITO mg/kgasignado

Resultadomedio CV % repet. z-score

BHT

1.63

n=4

1.74 5,8 0.0923.47 3.4175 6.1 -0.235

3 NIVELES CONCENTR.

- GC/MS

0.205 0.29 2.8 0.708

BP

0.4867

n=4

0.475 5.3 -0.1360.9583 1.06875 1.4 0.8290.2521 0.24 7.6 0.708

DiBP

1.6463

n=4

1.35 7.9 -0.7780.9769 1.075 8.4 0.2120.7928 0.5925 13.8 -0.723

17.4297 17.295 1.5 -0.054DEHA n=4

0.05433.4127 32.8325 2.6 -0.1872.8681 3.0575 10.3 0.229

DINCH

45.3443

n=4

39.5425 5.2 -0.73990.4588 73.3 13.4 -1 258


1.2588.976 10.755 2.6 0.692

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VALIDACIÓNMIGRACION BP DPBD UVITEX ob desde FILM PE al SIMULANTE /MIGRACION BP, DPBD, UVITEX ob desde FILM PE al SIMULANTE /

EXTRACCION SIMULANTE Y ANALISIS POR HPLC/UV

Resultados migración (10 días 60ºC) / HPLC-UVResultados migración (10 días, 60 C) / HPLC-UV

ANALITO

resultado medio migración

mg/kg simulante (S/V = 6)

CV % repet. CV % Reprod.

0.948 6.3 7.2DPBD 3 SERIESd

BP 2.710 4,5 16,7

0.170 16.1 29.7Uvitex ob

de n= 5 replicados



SECCIÓN DE MONÓMEROS Y ADITIVOSSECCIÓN DE MONÓMEROS Y ADITIVOS

Juana Bustos jbustos@msssi esJuana Bustos [email protected]ª Luisa LomoPatricia MartínMarian PugaMarian Puga

Carmen TejedorLuisa Tello


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