Presentacin de PowerPoint

ESTUDIO COMPARATIVO DEL EFECTO GASTROPROTECTOR (ULCERAS) DEL EXTRACTO HIDROALCOHOLICO DE LAS HOJAS DE PLANTAGO MAJOR Y EL OMEPRAZOL, EN RATAS ALBINAS EN EL LABORATORIO DE LA UNIVERSIDAD INCA GARCILASO DE LA VEGA EN LA FACULTAD DE CIENCIAS FARMACUTICAS Y BIOQUIMICA, 2015

Autores: Hirano Toyama, Katherine AdanaMelndrez Atencio, Luis Ricardo Zarate Campos, Debby Jhared

Asesor: Salazar De la Torres, Milagros EmperatrizLIMA - PER2015

FACULTAD DE CIENCIAS FARMACETICAS Y BIOQUIMICA

PROBLEMA DE INVESTIGACION

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMALa lcera es una patologa frecuente a nivel mundial y latinoamericano. Existen alrededor de 14.5 millones de personas en el mundo que padecen de dicha patologa con una mortalidad de 4 millones anuales, secundario a complicaciones o mal manejo de esta.

Actualmente el tratamiento est basado en el uso de medicamentos antiulcerosos, principalmente inhibidores de la bomba de protones, antagonistas H2 y el tratamiento enfocado a la erradicacin de Helicobacter pylori cuando existe evidencia de su infeccin. Los principales problemas encontrados en estos tratamientos son su alto costo.

Plantago major tiene presencia de flavonoides como apigenina, luteonina, y escutellarina, las cuales van realizar una accin gastroprotectora.

Formulacin del problemaCual es el estudio comparativo del efecto gastroprotector (ulceras) del extracto hidroalcohlico de las hojas de plantago major y el omeprazol, en ratas albinas?PROBLEMA GENERAL

En un informe presentado por Accin Internacional para la Salud (AIS) en el ao 2000, se report que el tratamiento de lcera gstrica con un medicamento innovador alcanzaba un costo de 7.35 soles por da adquirido en un establecimiento; considerando que el tiempo de tratamiento mnimo es 56 das, la adquisicin y cumplimiento de la terapia es prcticamente imposible en familias que tienen como ingreso un salario mnimo.Frente a este problema y por razones tradicionales, parte de la poblacin hace uso de productos naturales como alternativas teraputicas para sus dolencias, precisamente el Plantago major, es una de las especies vegetales empleadas para usos medicinales.JUSTIFICACION

MARCO TEORICOANTECEDENTES DEL ESTUDIOSabag y colaboradores, (2010), Formulacin de un fitomedicamento con actividad gastroprotectora a partir de extracto de llantn (Plantago major)Dedalos, Bustamante, (2008), Evaluacin de la actividad gastroprotectora de los extractos de llantn (Plantago major)Gonzlez y colaboradores. (2002); Antiinflamatorios inhibidores selectivos de la ciclooxigenasa -2 (COW-2)

Plantago majorQUE ES?Es una herbcea perenne, de tallos subterrneos no ramificados. Popularmente es conocida como llantn comn o llantn grande. Por ser una planta de fcil localizacin, no se cultiva. Su ciclo de vida entre seis y siete meses. Musclagos Iridoidescidos fenoles TaninosVitamina C FlavonoidesOtros componentes como: cumarinas, cido saliclico, sales minerales, especialmente zinc y K

Componentes qumicosEmolienteAntiinflamatorioAntimicrobianaCicatrizanteAntioxidantetratamiento de otras anomalas de la piel, como dermatitis, llagas, pstulas, etc.SecadoPulverizacinExtraccin de principios activosExtracto hidroalcoholicoAccin farmacolgica

Ulcera GstricaQUE ES?Puede ser de naturaleza crnica o aguda de forma redondeadaEs una enfermedad de origen multifactorial que se caracteriza desde el punto de vista anatomopatolgico por una lesin localizada y en general solitaria de la mucosa del estmago o del duodenoInfeccin por Helicobacter pyloriLa pepsinaEl etanol, el cigarrilloLas alteraciones en la microcirculacin que conducen hipoxia, la isquemia y los AINESEstrs severo (trauma, quemaduras)Reflujo biliarRadiacinMala alimentacinEstrs emocional

DesencadenantesFrmacos neutralizantes de la acidez gstricaFrmacos inhibidores de la secrecin cido gstricoFrmacos con efecto antisecretor y protector de la mucosa gstricaFrmacos con efecto protector de la mucosa gastroduodenalTratamiento de la Infeccin por H. pilory

Medicin MacroscpicaEscala de lacroix & GuillaumeCuantificacin de ulcerasTratamientoHIPOTESISEl extracto hidroalcohlico del Plantago major tiene igual o mayor actividad gastroprotectora que el Omeprazol frente a un agente gastrolesivo como la indometacina.

Hipotesis GeneralHipotesis EspecificoExiste un elevado grado de eficacia gastroprotectora (ulceras) del extracto hidroalcohlico de las hojas de plantago major. Existe un elevado grado de eficacia gastroprotectora (ulceras) del Omeprazol.. VariablesDefinicin DimensinIndicadoresEscalaValorINDEPENDIENTEExtracto hidroalcohlico de hojas de Plantago major (Llantn)Sustancia obtenida a partir de la concentracin de los principios activos totales de las hojas mediante la maceracin alcohlica, para una posterior evaporacin del componente alcohlico y cristalizacin de los componentes activos.Extracto alcohlico de Plantago majoDilucin del extracto alcohlicoCuantitativaINDEPENDIENTEOmeprazol Frmaco antiulceroso utilizado en la inhibicinde la secrecin cida gstrica. Su mecanismo principal de accin es la inhibicin de la enzima (H+/K+) ATPasa gstricaPresentacin del frmacoDosis de OmeprazolCuantitativaDEPENDIENTEGastrolesin Lesin causada por un agente gastrolesivo (AINES), el cual puede ser clasificada de acuerdo a su gravedad en erosin, lcera

Lesiones gstricas Cantidad de lesionesCuantitativaOPERACIONALIZACION DE VARIABLES

DISEO Y METODOTipos de Investigacin: Segn su tendencia: Cuantitativa, porque nuestra investigacin analiza, describe y experimenta la muestra problema frente al Plantago Major y el Omeprazol.Segn su Orientacin: Bsica, porque vamos a ampliar los conocimientos de Plantago Major en los tratamientos farmacolgicos (Gastroprotector).Segn el tiempo de ocurrencia de los hechos investigados: Prospectivo, debido a que la recoleccin de datos se realizara segn el desarrollo del estudio conforme vayan sucediendo los hechos.Segn el periodo y secuencia de la investigacin: Estudio longitudinal debido a que se evaluaran los resultados durante toda la ejecucin del proyecto.Segn el anlisis y resultado y alcance de sus resultados: Exploratorio, descriptivo y explicativos.

mbitos de Investigacin: El siguiente trabajo se ejecutara en el Laboratorio de Farmacologa en la Facultad de Ciencias Farmacuticas y Bioqumica de la Universidad Inca Garcilaso de la Vega.06 Ratas Albinas.03 Estmagos de las Ratas Albinas.

Tcnica e instrumento de recoleccin de datosTcnica: listado (materiales, equipo y reactivo). Instrumento: se utiliz en la investigacin consisti en una escala macroscpica. La escala consta de dos partes (puntaje y caractersticas) que describe la gravedad de las ulceras.

Para estratificar las variables de conocimiento se hizo uso de la metodologa contemplada segn la escala de Lacroix & Guillaume

Conocimiento sobre aspectos generales de las ulceras (tamao y cantidad):GRAVE: 4 a 5 puntos. MODERADO: 2 a 3 puntos.LEVE: igual o menor a 1 puntos.GruposCantidadFarmacoDosisDuracin del tratamientoAgente InductorDosis Agente InductorFrecuenciaVa de AdministracinCantidad de ulcerasPuntajeGravedadControl2 RatasAgua Destilada1ml7 DiasIndometacina50ml/kgC/8hVia OralPatron2 RatasOmeprazol20ml/Kg7 DiasIndometacina50ml/kgC/8hVia OralProblema2 RatasLlanten ( Plantago Major)500ml/Kg7DiasIndometacina50ml/kgC/8hVia OralInstrumento de Recoleccin de datosMateriales de Laboratorio:Caja de guantes, mascarillas y guantesGuardapolvoHojas de Bistur Beacker 250 y 500 mLPorta y cubre objetoTijeraAlgodn Placa PetriPinzas Tabla de diseccinAlfileres Afeitador Jeringa de 5 mLPiseta VernierMortero y Piln Frasco mbar de 500 mLPapel Kraft

Equipos:Estufa MicroscopioBalanza Analtica

Reactivos: Agua DestiladaOmeprazol 20 mgIndometacina 25 mg Etanol 70 y 96CloroformoMaterial Biolgico:06 Rata albina Llantn (Plantago Major)Materiales:LupaCampos de TelaJaulaCampana de vidrioEmbudoPapel filtro

Procedimiento y tcnica:

Plantago major(hojas del llantn)Control de calidad evaluar sus caractersticas organolpticas (color, textura, olor), su estado de conservacin, y de pureza. Luego las hojas del llantn son lavadas y secadas durante 24 horas a 50 C y almacenadas.

Lavado y secadoSe trituraron 3 kg de hojas de llantn, hasta homogenizar la muestraPara obtener la dosis 500mg/kg de nuestro extracto pesaremos 50g de hojas secas de llantn (Plantago major) y aadimos 100ml de etanol (60): agua (7:3), luego se trasladaron a maceracin, en un envase de vidrio mbar, por 7 das con agitacin peridica.El primer filtrado se realiz con un colador de cocina, con la cual se separ el lquido de los fragmentos gruesos triturados. Luego se procedi a un segundo filtrado, el cual se realiz con papel filtro y un embudo, para separar slo el lquido

Preparacin del extracto hidroalcoholicoProcedimiento y tcnica:

Material biolgicoCriterios de inclusin.Para el ensayo se emplearon ratas de la misma cepa, mismo sexo, peso aproximado y edad comprendida dentro el mismo rango.

Criterios de exclusin. No se tomaron en cuenta para el ensayo aquellos animales que ya fueron empleados en un ensayo anterior. As tambin se descart el ensayo con hembras debido a que la mayor parte de la camada eran machos.

Agente ulcerognico: La Indometacina (50 mg/Kg) para cada rata albina.

Preparacin del patrn: Se disolvi en agua destilada la cantidad necesaria de Omeprazol para administrar una dosis de 20mg/kg.Se utilizaron 06 ratas albinas de 2 a 3 meses cuyo peso oscila entre 150 a 200gr.Los animales fueron preparados 24 hrs. antes de la prueba, privndoles de toda alimentacin y dejndoles solo con aguadestilada.Descripcin de la tcnica:1er lote (control): Tratados nicamente con el vehculo (agua destilada)2do lote (patrn): Tratados con el medicamento (Omeprazol)3er lote (problema): Tratados con el extracto hidroalcohlico del Plantago major (llantn) a concentracin de 500mg/kg peso.Los productos se administraron va oral media hora antes de la administracin del agente ulcerognico, en una proporcin de 1 ml/ 200 g de peso de animal, tal como reporta la fase de estandarizacin.Transcurrida una hora de la administracin de la Indometacina, los animales fueron sacrificados por asfixia con cloroformo, e inmediatamente se les efectu la laparotoma en el tercio anterior de la lnea media abdominal, extrayndose el estmago que fue abierto por la curvatura mayor. Se lav cuidadosamente con una corriente suave de agua. Se extendieron los estmagos sobre una tabla de plastoformo mediante alfileres. La severidad de las lesiones gstricas se analiz por observacin al microscopio estereoscopio, procedindose a su valoracin, midiendo el tamao de las lesiones en milmetros; as como contando el nmero de los mismos en cada caso.Aspectos ticosSe opt por todo momento por el bienestar de la persona, teniendo en cuenta el beneficio del tratamiento de productos naturales precisamente Plantago major; ya que el tiempo del tratamiento de ulcera gstrica es prolongado y de alto costo Plan de procesamiento y anlisis de datosUna vez obtenido los datos se realizara a la digitacin de los mismos,segn la actividad gastroprotectora en relacin al nmero de lesiones y grado de lesiones, as poder establecer cuadros estadsticos mediante porcentajes.RESULTADOS, DISCUSION Y CONCLUSIONESresultadosLos resultados del porcentaje de actividad gastroprotectora para el extracto hidroalcoholico del llantn en relacin al nmero de lesiones producidas por el agente ulcerognico es de 11,11% mientras el del Omeprazol es de 5%, con respecto al grado de lesiones el porcentaje de actividad para el extracto hidroalcoholico es de 20 % y para el Omeprazol es de15%.resultadosGruposCantidadFrmacoDosisDuracin del tratamientoAgente InductorDosis Agente InductorFrecuenciaVa de AdministracinCantidad de ulcerasPuntajeGravedadControl2 RatasAgua Destilada1ml7 DiasIndometacina50ml/kgC/8hVa Oral4 ulceras grandes04GravePatrn2 RatasOmeprazol20ml/Kg7 DiasIndometacina50ml/kgC/8hVa Oral2Ulceras pequeas01LeveProblema2 RatasLlantn ( Plantago Major)500ml/Kg7DiasIndometacina50ml/kgC/8hVa Oral5 Ulceras pequeas01LeveDiscusionesDel estudio Davalos y Bustamante se observ que a una dosis de 500 mg/Kg, los extractos acuosos y etanlicos dePlantago major,protegen significativamente la mucosa gstrica de ratas contra el dao inducido por etanol, frente al omeprazol como medicamento controlZalles y otros autores han reportado que el extracto etanlico de llantn provoca una significativa disminucin en la secrecin de cido y pepsina por atenuacin de factores agresivos; as como una estimulacin de la secrecin de mucus por potenciacin de factores defensivos posterior a la administracin oral de etanol, lo que sugiere que puede existir un mecanismo de citoproteccin33As tambin De Lucca ha reportado quePlantago majorposee principios activos antiulcerognicos como los flavonoides y los taninos que protegen contra el dao mucosal gstricoCon este trabajo se logr estandarizar la tcnica de lcera gstrica inducida por Indometacina en ratas albinas, determinndose que las hojas dePlantago major(llantn) utilizados por la medicina tradicional presentan muy buena actividad gastroprotectora. Todo lo descrito nos permite concluir que de acuerdo al anlisis de comparacin del extracto hidroalcoholico del llantn no presentan diferencias estadsticamente significativas con respecto al medicamento, Omeprazol.Conclusiones SUGERENCIAS

Aplicar las Buenas Practicas de Laboratorio en el laboratorio para el manejo de ratones y evitar contaminacin. Realizar estudios mayores de la planta de Llanten debido a que existe escasa informacin de este vegetal sobre efecto gastroprotetor ya que es mas conocido como desinflamante.Utilizar una zonda a la hora de administrar el extracto y el farmaco para no daar ni maltratar a la rata. Probar el efecto gastroprotector del extractos en otras concentraciones determinando si presentan mejores resultados.ANEXOSTABLA N1

Escala de lacroix & Guillaume indicada en el current Protocols in Pharmacology (CPP).

Sedacin Administracin del ExtractoPreparacin del extractoExtraccin