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CATEDRA DE FARMACOLOGIA
FACULTAD DE VETERINARIA
UNIVERSIDAD COMPLUTENSEDE MADRID
ESTUDIO CRONOFARCOCINETICO
DEL ACETATO DE CIPROTERONA
EN EL CONEJO
JuanCarlosBoggio
Madrid, 1993.
TRABAJO QUE PRESENTA EL LICENCIADO O.
JUAN CARLOSBOGGIOPARA ASPIRARAL GRADO
DE DOCTOR
CarlosBoggio
Madrid, Noviembre 1993.
D. MANUEL 1. SAN ANDRES LARREA, ProfesorTitular
de Universidadde Farmacologíay TerapeúticaVeterinarias de la
Facultadde Veterinariade la UniversidadComplutensede Madrid.
CERTIFICA:
Que la memoriapresentadapor el Licenciado
en Veterinaria D. Juan Carlos Boggio con el título
“Estudio cronofarmacocinético del acetato de
ciproterona en el conejo” ha sido realizada bajo
nuestradirecciónen los laboratoriosde la Cátedrade
Farmacología.
Fdo: M.I. San Andrés Larrea.
A mis padres
A M~ Angustias
A mi abuelo,JoseM~,
in memoriam
Si tuviera que nombrar a todas ks personasque de alguna forma me
ayudarona realizarestetrabajocreo quepodríaescribirun libro. No obstante,en
esteapartadoquiero agradecera todos los que me prestaronsuapoyo, tanto moral
como material. El orden que ocupan en estas páginas, no es un orden de
importancia,puestodos merecenser citadosen primer lugar.
Quiero agradecerde una forma muy especiala mi director de Tesisel Prof.
Dr. D. Manuel SanAndrés Larrea, por su dirección, susconstantesestímulosy su
comprensión.
Al Prof. Dr. D. Emilio BallesterosMoreno, Catedráticode Farmacologíay
TerapeúticaVeterinaria,por habermebrindadola oportunidadde realizarestaTesis
en su grupo de trabajo.
A la Facultadde Agronomíay Veterinariade la Universidad Nacional de
Litoral, a la cual pertenezco,que me permitió realizarmis estudiosde post-grado
en la UniversidadComplutensede Madrid.
Al Prof. Dr. D. EduardoCostasCostas,ProfesorTitular de Genética,por
sus consejosy valiosasaportaciones.
A SheringEspaña,S.A., por la aportacióndel fármacoy de diversomaterial
bibliográfico.
Al Prof. Dr. D. Tomás Pérez García y al Prof. Dr. D. Juan Carlos
FontanillasPérez,por facilitarmeel trabajoen sus laboratorios.
A la Prof. Dra. Dña. MargaritaArboix, Catedráticade Farmacologíade la
Facultadde Veterinariade Barcelona,por facilitarme el soporteinformático, y a
CarmenFranquelo,por supaciencia.
A Teresita,por su colaboracióny apoyopermanenteen lo científico y en lo
personal,sin lo que no hubierasido posiblela realizaciónde estetrabajo.
A Casilda,por todos sus consejos,en cromatografía,cinética y estadística,
y cómo no, por todo el diseñográfico.
A ManIó, por su ayuda,y porquesiemprepudecontarcon ella para lo que
sea.
A Mara, Emmay Chemapor sudisposiciónpermanente.
A Marianopor todo el trabajomanual,perotambiénporsuconstantealiento
y estimulo, y por supuesto,los cepos DIAZ-FLORES®.
A Jose, por su ayuda inestimable en la construcción de las jaulas
cronobiológicasy en el cuidadode los animales.
A todos los demásintegrantesde la Cátedrade Farmacología.A D. Rafael,
Rafa, Javier, Julio, Fernando,Carlitos, JoséManuel, Mariangelesy Juanito.
Al Prof Dr. D. Marcelo Rubio, a Eduardo Baron¡, Enrique Formentini,
HéctorFernándezy M~ Victoria Romero,miembrosde la Cátedrade Farmacología
de la F.A.V.E., sin ellos y sin su trabajono hubierapodido realizar mi doctorado.
A todos los miembros del Departamentode PatologíaAnimal II que me
apoyaron. En especial, a ConcepciónGarcía Botey, Paloma García, Mercedes
Sánchezde la Muela y a Floren.
A Raúl, Antonio y M~ Angeles,con quienesempecémi andaduracientífica
en España,por su amistad.
A M~ Angustias,por su apoyo, su paciencia,su aguante,y sacrificiospara
que estaTesissalgaadelante.
A mis padres, que con su prédica y ejemplo, me enseñaronque todo
sacrificio tienesurecompensay que lo importanteno es la metasinoel esfuerzopor
llegar a ella.
A mi familia, a mis amigos argentinosy españoles,y en especial a los
miembrosde la Sociedadde Misiones Africanas que, aunquelejos de mi país,
hicieronqueme sintieracerca.
A todos, muchas gracias.
INDICE
1.- JUSTIFICACION
11.- REVISION BILIOGRAFICA .
II. 1.- CRONOFARMACOLOGIA
11.1.1.- INTRODUCCION
11.1.2.-TIPOS DE RITMOS BIOLOGICOS
11.1.3.-PARAMETROSDEL RITMO
11.1.4.-RITMOS CIRCADIANOS
11.1.5.-SINCRONIZADORESDE LOS RITMOS
11.1.6.-ASPECTOSFARMACOLOGICOS
11.1.6.1.-Cronofarmacocinética
II. 1.6.2.-Cronotoxicología
11.1.6.3.- Cronoterapeútica
4
5
5
6
8
12
14
18
20
29
31
33
• . 33
33
41
44
• . 47
50
59
59
59
60
62
65
66
11.2.- ANDROGENOS
11.2.1.-REGULACION DE LA PRODUCCIONDE
ANDROGENOS
11.2.1.1.-La hipófisis y el hipotálamo
11.2.1.2.-Producciónandrogénicatesticular
11.2.1.3.-Producciónandrogénicaadrenal
11.2.2.-ANDROGENOS Y CANCER DE PROSTATA ...
11.2.2.1.-Terapiashormonalesespecíficas
11.3.- ACETATO DE CIPROTERONA
11.3.1.-FARMACOLOGíA
11.3.1.1.-Introducción
11.3.1.2.-Estructuraquimica
11.3.1.3.-Mecanismode acción
II.3.i.4.- Farmacocinética
11.3.1.5.-Propiedadesfarmacológicas
.1
11.3.2.-USOSCLíNICOS DEL ACETATO DE
CIPROTERONA
11.3.2.1.-Problemasde próstata
11.3.2.2.-Alteracionescutáneasinducidaspor
andrógenos
11.3.2.3.-Pubertadprecoz
11.3.2.4.-Desórdenessexualesen machos .
III.- MATERIAL Y METODOS
III. L- ESTUDIO CRONOTOXICOLOGICO
111.1.1.-MATERIAL
111.1.2.-METODO
111.2.-ESTUDIO CRONOFARMACOCINETICO
111.2.1.-MATERIAL
111.2.2.-METODO
111.2.2.1.-Administracióndel fármacoy recogida
de muestras
111.2.2.2.-Análisis de las muestras
111.2.2.3.- Tratamientocronofarmacocinético
111.2.2.4.-Tratamientoestadístico
71
71
76
80
82
83
• . . . 84
84
• . . . 86
• . . . 90
• . . . 90
• . . . 93
IV.- RESULTADOS
IV. 1.- ESTUDIO CRONOTOXICOLOGICO ....
IV.1.1.- CALCULO DE LA DL50
IV. 1.2.-ESTUDIO CRONOBIOLOGICO
IV.2.- ESTUDIO CRONOFARMACOCINETICO.
IV.2.1.- METODO ANALíTICO
IV.2.2.- CRONOFARMACOCINETICA
y.- DISCUSION
V.1.- ESTUDIO CRONOTOXICOLOGICO
V.2.- ESTUDIO CRONOFARMACOCINETICO
94
96
100
101
102
103
103
103
106
106
117
150
151
154
V.2.1.- METODO 154
V.2.2.- ACONDICIONAMIENTO DE LOS ANIMALES
Y TOMA DE MUESTRAS 157
V.2.3.- INFLUENCIA DEL TIEMPO SOBRELOS PROCESOS
FARMACOCINETICOS 160
V.2.4.- FARMACOCINETICA 162
V.2.5.- ELECCION DE PARAMETROS 163
V.2.6.- ESTUDIO INDIVIDUALIZADO DE LOS
PARAMETROS 165
V.2.7.- ESTUDIO GLOBAL DE LOS PROCESOS
CINETICOS
VI.- CONCLUSIONES
VII. - RESUMEN
VIII.- BIBLIOGRAFIA
173
175
178
183
1.- JUSTIFICACION
JUSTIFICAGION
1.- JUSTIFICACION
Desdehaceañosseconocela relaciónqueexisteentreel desarrollode ciertos
tumores malignos y algunos niveles hormonalesde ese organismo, puestoque
dependende los mismospara crecery mantenersu identidadmorfológica.
Esta relación es más evidente en los tumores que asientansobre tejidos
relacionadoscon los órganosreproductores,pueslas modificacionesen los niveles
de hormonaspuedenalterarel cursodel procesoe incluso detenerlo.
Concretamente,en el tratamientode tumoresprostáticosmedianteel control
de andrógenos,se hanobtenidounosresultadosesperanzadores.Basadoen ésto, y
en vistade que la prostatectomíasuelerequerira continuaciónunaorquiectomía,es
por lo que la terapiacon antiandrógenosha cobradouna gran importancia,unas
veces como alternativa y otras como tratamiento coadyuvantea los métodos
quirúrgicos.
Dentro de los compuestos antiandrogénicosdestaca el Acetato de
Ciproterona,que, en los tejidosandrógeno-dependientescompitecon la testosterona
y la dihidrotestosteronapor su receptor.Ademásde estapropiedadposeeactividad
progestacionaly suprimela secreciónde gonadotropinas.
2
JUSTIP 1 GAGION
También sabemoslas grandesvariaciones de secreción que hay en un
organismo, tanto estacionalescomo diarias, especialmente,en los niveles
hormonales.La Cronobiologíaestudiaestasvariacionesen los seresvivos. Una de
las consecuenciasde estasactividadesrítmicases la de la susceptibilidady respuesta
de los organismosa medicamentos,agentes químicos e incluso físicos. Una
importanteramade la Cronobiologíala constituyela Cronofarmacología,que incluye
a la Cronofarmacocinéticay a la Cronoterapía.
Por todo ello, pretendemos profundizar en el conocimiento de la
farmacocinéticadel Acetatode Ciproteronadesdeun puntode vista cronobiológico,
para así poderaplicar unaspautascronoterapeúticasque permitan adaptarla dosis
a los nivelesfisiológicosde cadaorganismosin perdereficaciay reducir al máximo
los efectossecundariosy colaterales.
3
II.- REVISION BIBLIOGRAFICA
REVTSION BIBLIOCRAFICA
II.- REVISION BIBLIOGRÁFICA
11.1.-CRONOFARMACOLOGIA
11.1.1.-INTRODUCCION
Las múltiples actividadesbiológicas de los seresvivos, incluidas las del
hombre, no se manifiestande maneraconstante.Por el contrariovaríande forma
periódica, regular y predecible. Actualmentese admite que la ritmicidad es una
propiedadfundamentalde todos los organismos,desdelos unicelulareshastalos
pluricelulares más complejos, y en estos últimos, a todos los niveles de
organización: desde el subcelular hasta el sistema orgánico en su totalidad
(HALBERG, 1969; REINBERG, 1979)
La CRONOBIOLOGIAestudiaestasvariacionesen los seresvivos, y unade
las consecuenciasde estas actividadesrítmicas es la susceptibilidady el tipo de
respuestade los organismosa medicamentos,agentesquímicose incluso físicos; por
ello, una importante rama de la cronobiología la constituye la
CRONOFARMACOLOGIA y la CRONOTOXICOLOGIA (REINBERG y
HALBERO, 1971; HALBERG y HALBERG, 1984; REINBERG, 1979 y 1992).
5
REVISION BIBLIOGRAFIGA
11.1.2.-TIPOS DE RITMOS BIOLOGICOS
Los ritmos biológicos son de origen genético (HARDIN y col., 1990;
YOUNG, 1992), no presentansolución de continuidad,son característicosde cada
especieanimal, aunquepuedenobservarseacusadasvariacionesinterindividuales,y
estáninfluidos o condicionadospor factoresexternosambientales,o por hábitosde
vida, denominadossincronizadores(STEIMBACH y col., 1976;REINHERG, 1979).
Segúnla evolucióntemporaldel sincronizador,se tendránciclos de duración
diferente. Los más estudiadosson los ciclos que se repiten cada 24 horas,
denominadosciclos circadianos.El tiempo que mediaentredos repeticionesde un
ritmo biológico sedenominaperíodo,y en el hombreviene definidopor los ciclos
de vigilia-sueñoo actividad-reposo.Los animalesde experimentaciónseregulanpor
los períodosluz-oscuridad,que debenser correctamenterespetadosen la ejecución
de los ensayos.
Se han tomadocomoprototipo los ritmos circadianos,en los que el período
equivaleal tiempoque tardala tierra en unarotacióncompleta,sin embargo,hay
ritmos de alta frecuenciao ultradianos,en los queel períodoes máscorto. Incluyen
entreotros a los circaoctohoranos(8 horas ) y a los circasemidianos(12 horas), y
ritmos de baja frecuenciao infradianos,entre los cualestenemoslos circaseptanos
6
REVISTaN PIBLIQGRAFICA
(7 días), circatrigintanos(30 días), circaanuales(1 año), etc (REINBERG, 1982;
CADORNIGA, 1990).
.7
REVISION BTBLIOCPAFICA
11.1.3.-PARAMIETROS DEL RITMO
Como primeraaproximación,unavariación regular y previsible puedeser
asimiladaa una funciónperiódica.La función másutilizadaparala aproximacióna
un ritmo es la forma sinusoidal. Esta semejanzatiene la ventajade permitir la
caracterizaciónde un ritmo y su cuantificación por la estimación de varios
parámetros:el período(r), la faseo acrofase(~), la amplitud (A), y el nivel medio
o Mesor (M).
Período (r): esel primer parámetro a estudiar para la cuantificación de un
ritmo. Podríamosdefinirlo comounavariaciónregulary previsiblede un fenómeno,
en estecasobiológico, o en otra palabras,comola duraciónde un ciclo completo
en una variaciónrítmica (HALBERG y col., 1977).
El análisisdelas oscilacionesperiódicasde unavariablefisiológicaregistrada
durante suficiente tiempo, puede revelar la existencia de varios períodos
preponderantes(I3INGHAM y col., 1982); así, la actividadcardíacase manifiesta
segúnritmos dondelos períodosson de alrededorde un segundo,de alrededorde
24 horas,o de alrededorde un año (BINGHAM y col., 1984).Parael conocimiento
y situaciónenel tiempode los períodos,componentesde un fenómenobioperiódico,
constituyenuna operaciónque puedehacersede maneraprecisay rápidapor medio
8
REVISION BIBLIOCRAFICA
de programasespecialesde cálculo electrónico (CORNELISSEN y col., 1980).
Partiendo,entreotrosde la fórmula siguiente:
y=M+Acos(w-4-~)
en la cual t= tiempo; w= velocidadangular; A= amplitud; M= Mesor o nivel
medio y 4= acrofase; fórmula que indica el tipo de función matemáticausada
generalmente.
El períodotiene unarelaciónindirectamenteproporcionalcon la frecuencia
(fl, de estaforma:
f 1K obien r uf
esdecir, cuantomenoresel período,mayores la frecuenciay a la inversa;así , por
ejemplo, grandesfrecuencias,como puedenser los 1000 latidos por minuto del
corazóndel murciélagoenanoo las ondasneuronalesque alcanzanfrecuenciasde
envíodel ordende 1000 1 seg. o los aletazosde los colibrís, corresponderána ritmos
ultradianoso menores(MONSALVATJE, 1981). Por otra parte, a ritmos de baja
frecuencia,comopuedenser el ritmo sexualde las hembrasmonoéstricas,es decir,
las que entran en celo una vez al año, les correspondenritmos infradianos o
mayores.
9
REVISTaN BIBLIOGRAFICA
El ritmo medio o de medianafrecuenciaes, comoanteshemosindicado,el
ritmo circadiano.
Faseo Acrofase(4) : Es la distanciaque hay desdeun tiempode referencia
dado (como puedeser la medianocheo el despertar),hastael momentoen que se
produce el valor máximo de un ritmo (pico), definida mediante una función
matemáticaajustadaa los datos.La acrofaseseexpresaengrados(negativos),donde
3600 equivalenal períodoelegido (circardiano,circaseptano,etc...) y se toma 00
comoel tiempode referencia.En el casode los ritmos circardianos,cuandose elige
00 como la medianoche,la acrofasetambiénse puedeexpresaren horasy minutos
(HALBERG y col., 1977).
Amplitud (A): Sedefine como la mitad de la variabilidad total del ritmo por
el períodoconsiderado,o como, la mitad del cambiopredecibleque seproduceen
un ciclo estimadomedianteuna función (sinusoidalu otra). En unacurva coseno
ideal es la diferenciaquehaydesdeel pico de la curvahastael MESOR. El cambio
total predeciblees la dobleamplitud (2A) (HALBERG y col., 1977).
Mesar(M): Acrónimode ‘Midline EstimaigStatiscOfRhym’. Valor medio
de una función rítmica (curva coseno)ajustadaa los datosde una serie temporal,
normalmentees el punto medio entrelos picos y descensode la curvacoseno. Es
El-o
REVISION BIELTOCRAFIGA
una mediaajustadaal ritmo (HALBERG y col., 1977).
El análisisde los ritmos se realizapor diferentesmétodos,el másutilizado
es el método COSENORque involucra un procedimientoanalítico, queequivaleal
ajustede una funcióncosenoidalde periodofijo, a los datospor mínimoscuadrados
y unarepresentacióngráfica de los resultados(HALBERG, 1969>. Este métodoha
sido implementadoen diferentes sistemasoperativos (MONK y FORT, 1983;
VOKAC, 1984).
II
REVTSION BISLIOGRAFICA
11.1.4.-RITMOS CIRCADIANOS
El ciclo diario, de la misma forma que el lunar y el estacional,poseeuna
correlaciónexterior que no se constataaparentemente,en los ritmos más rápidos,
esdecir, los ultradianos.Debidoaello seconsideródurantemuchotiempocomo una
consecuenciapasivade nuestrociclo sueño-vigilia,que nos ha sido impuestopor el
día solar y por la necesidadde trabajarcon la luz. Posteriormentesecomprobóque
esteritmo continúaen un ambienteconstante,de la mismaforma que otros muchos
ritmos más rápidos, difuminándosela distinción artificial que se había hecho con
estos otros ritmos.
Son característicasde estosritmos (REINBERG y HALBERG, 1971):
- La duracióndel ciclo que podrá apartarsede las 24 horas,pero oscilará
entrelas 16 y las 32 horas.Son circadianos,etimológicamentede circa=alrededor
y diem=día.
- La variación de un individuo a otro, aunqueel períodoes constante,con
una oscilación de pocos minutos para cadauno, sin embargo,puede variar de
repentey permanecerasí durantesemanaso meses.
12
REVISION BIELIOGPAFIGA
- La frecuencia que se modifica con al intensidad luminica del medio
ambiente.Los organismosconactividaddiurnase muevencon mayorrapidezcuanto
más intensaes la luz; en los animalesnocturnossucedelo contrario.
- La frecuencia essensiblea la temperatura, pero sólo cambia sensiblemente
en condicionesconstantesde temperatura.
El comportamientocircadiano aparecetanto en el hombre como en los
animalesy las plantas,como sedemostróaislandoa perrosen minas y bunquers
abandonadoso en cámarasde control (MONTSALVATJE, 1981). El procesomás
seguro para medir el tiempo es el despertar, que es autónomo, claramente
delimitado, y surge de un estadosubconsciente.Utilizamos los ritmos circadianos
a modode cronómetro.Unacuartapartede las personas,aproximadamente,pueden
“dar bien la hora’, estiman el tiempo transcurrido, se despiertana una hora
predeterminadao duermenun ciertonúmerode minutos.Estereloj estásincronizado
normalmentecon el tiempo longitudinaldel medio ambiente(STEIMBACH y col.,
1976).
13
REVISTaN BIBLIOCRAFICA
11.1.5.-SINCRONIZADORES DE LOS RITMOS
Los ritmos secorrespondencon adapatacionesbiológicasal ambiente,y así
los circadianos,circamensualesy circaanualesse explican comoadecuacionesa la
variación día-noche, lunar (mareas)y estacional,respectivamente(REINBERG,
1982; JURADO, 1989). Sin embargo, el reciente descubrimientode ritmos
infradianos y ultradianos no puede explicarse como adaptación a parámetros
ambientalesde variacióncíclica. Esto nos hacepensarque todavíaestamoslejos de
conocimientoprofundo de la estructuratemporal de los organismos(COSTAS,
1989).
No obstante, un cierto número de factores del entorno, susceptiblesde
variacionesperiódicasson capacesde influenciar ciertos ritmos biológicos. Estos
factoressondenominadossincronizadoreso Zeitge¡ber(STEIMBACH y coL, 19’76;
REINBERG, 1979).
Hay sincronizadoresde varios tipos: físicos, químicosy sociales. Ejemplo
de los primeroses la luz, muy especialmenteparalos ritmos circadianos(de luz
oscuridado de actividad-reposo)y la temperatura(calor-frío),quetambiénserámuy
útil paralos ritmosinfradianosde tipoestacional(comoel de la reproducción);como
ejemplode sincronizadoresde tipo químicopodríanserciertosproductos orgánicos
14
REVISION EI8LIQSRAFICA
de tipo hormonal, como son las feromonas, que tendrán acción sobre ritmos
circaestacionaleso circaanualesen la esferasexual; finalmente,los sincronizadores
socialestípicos de los antropoides,especialmentede los homínidosy concretamente
del hombre, como puedeser la presenciao ausenciade la madre (o personaque
ocupa su lugar) para el recién nacido, también los horarios alimenticios,
especialmenteparael neonato,en cambio,paralos adultostiene másimportanciael
ruido silencio, íntimamente ligado, en general, al de la luz-oscuridad
(MAYERSBACH, 1976; STEIMBACH y col., 1976; REINBERG, 1979;
MONSALTVAJE, 1981; JURADO, 1989).
Los factoresambientales,cuya alternanciajuegaun papel de sincronizador,
no tienentodos la misma importanciani la misma influencia, sino que varíasegún
la especie animal y las circunstancias,es decir que existe una jerarquía de
sincronizadores(REINBERG, 1979; MONSALTVAJE, 1981).
En otroordende cosas,existeuna integraciónde ritmos ultradianoscon los
circadianosy de éstoscon los infradianos;un ejemplode ello es el ritmo del cortisol
plasmático(LOPEZ-CALDERON, 1992).
Es típica la integración circaanualde la sincronizacióncircadianaen las
plantas(plantasde días largos, plantasde díascortos o mejor de noches largas y
15
REVISION BIELIOGRAFICA
plantas indiferenteso neutras). Todo ello, está relacionadocon el fenómenodel
fotoperiodo,que tambiéninfluye en los órganosde reproducciónde los vegetales
(flores) y de los animales(testículosy ovarios); en estosúltimos es muy importante
el efectode la luz sobreel eje diencéfalo-hipófiso-gonadal(MAYERSBACH, 1976).
Tanto en aves como en mamíferos, hemos de aceptar la existenciade
animalesde día largo y animalesde día cortoen relacióna la influenciade la luz.
Así, ciertos pájaros migradores,como las golondrinas, son sensiblesa los días
cortos. En eneroy febrero,cuandoel díaseacortaal surdel Ecuador,los testículos
y los ovarios de las golondrinas empiezande nueva actividad normal, vuelan
entonceshaciael sur de Europay seacoplanen primavera,estaciónde sumadurez
sexual(MONSALTVAJE, 1981).
El hurónessensibleal aumentode la duracióndel día, asícomoel ratón. Por
el contrario, el estro de las ovejas y ciervasse sitúa en otoño cuandolos días son
más cortos. Los cobayosson insensiblesa la duracionde los días y las noches
(MONSALTVAJE, 1981).
Los sincronizadorespuedenser manipulados,lograndocambiosde período
y/o un desplazamientode la acrofase,esdecir, que esposibleimponera los ritmos
biológicosultradianos,circadianose infradianosun períododiferentede superíodo
16
REVTSION BIBLIOGRAFICA
natural,siempreque se respentenciertascondiciones.Unade estascondicionesserá
que los estímulosdebentenerun períodocercanoal periododel sistemaexcitado
(PHILIPPENS. 1976; COSTAS, 1989).
En el hombre, los cambios de la fase circadianadel sincronizadorsocio-
ecológico sin modificación de su período, se realizan en dos circunstancias
particulares: en los vuelos transatlánticosy en los cambios horariosde trabajo a
turnos.En estos casosel organismotiene quevolver a “ponerseen hora”, esdecir,
desplazar las acrofasesde sus diferentesritmos a fin de “ajustarse” a su nuevo
horario. Esteajustea las nuevascircunstanciasdependeráde varios factores: 1) de
la variable considerada;así, parael ciclo actividad-reposoel reajustees bastante
rápido, para la temperaturamenosrápido y mucho más lento para la actividad
suprarrenal,y 2) para una mismavariable:de la especieanimal,de la manipulación
del sincronizador, de la edad, del individuo, de su tipo constitucional, etc...
(STEIMBACH y col., 1976; MAYERSBACH, 1976; JURADO, 1989).
17
REVISION BJBLJQGRAFTCA
11.1.6.-ASPECTOS FARMACOLOGICOS
Lo anteriormenteexpuestotiene unaseriede aplicacionesconcretas.Desde
nuestropunto devista la Cronofarmacología,estudialos efectosde los fármacosen
función de la estructuratemporaldel organismoconsiderado,dicho de otra forma,
de la hora de tratamiento,teniendoen cuentala sincronizaciónde esteorganismo.
Tambiénestudialos efectosde los fármacos,asícomolas eventualesalteracionesdel
período,la acrofase,la amplitud y el mesorsobrelos mismos(REINBERG, 1992).
La cronofarmacologíaes el pasoobligadopara la aplicacióncorrectade los
medicamentos a efectos terapéuticos, cuyo estudio es la cronoterapéutica
(HALBERG y col., 1984).
Tantoparael estudiode la cronofarmacología,comode la cronoterapéutica,
hay que conocerbien los ritmos secretoriosglandularesy las oscilacionesrítmicas
orgánicas(HAUS y col., 1979; KUHN y col., 1980; NELSON y col., 1980;
LAGOGUEY y REINBERG, 1981).
Los hechosexperimentalesen Cronofarmacologíapermitenconsiderarque
los efectosde un agentefarmacológicamenteactivo varían segúnuna periocidad
circadianay eventualmentecircamensualy circanual (DESCOVICHy col., 1974;
18
REVISTON BIELIOGRAFICA
TAYLOR y col., 1983 y 1984; LEVI y col., 1986; OLLANGNIER y col., 1987;
GUISSOUy col., 1987).
19
REVISION BIBLIOCRAFIGA
11.1.6.1.-Cronofarmacocinética
Se han aceptado experimentalmenteuna serie de nuevos conceptos
farmacológicos. Se trata de la Cronofarmacocinéticade una sustancia, la
Cronoestesiade los órganosdianafrente a unasustanciay la Cronoergíao resultado
global (HALBERG y col., 1977; REINBERG, 1982; CARDONIGA, 1990).
A partir del momentoen queuna sustanciase introduceenel organismo(por
vía enteral o parenteral), su concentración en los fluidos orgánicos
(sangre,sudor,orina,etc...),aumentará,alcanzaráun máximo y decrecerá,excepto
por vía endovenosa,que solo disminuirá. Los efectos farmacológicosdependerán,
en gran medidade la concentraciónde la sustanciaen la sangreen un momento
dado. Las variacionesde la concentraciónpuedenser cuantificadas.Teniendoen
cuenta la hora de la administración de un fármaco, se constata que su
farmacocinéticano es constante, sino que varía, según los ritmos biológicos
(RENBERG, 1982; HALBERG y HALBERG, 1984; CARDONIGA, 1990).
La cronofarmacocinética,que Ritschel considera“una nueva subdisciplina
entre la cronobiología y la farmacocinética”, estudia los cambios rítmicos en
biodisponibilidad, aclaramiento,metabolismo y excreción de fármacos por el
organismo en función del momento del ciclo biológico en el que se hace la
20
REVISION BIELTOGRAFICA
administración(CADORNIGA, 1990).
Cuandose modifica la forma o ritmo de administraciónse puedenobtener
diferenciassignificativas demostrablesen valoresde concentraciónmáxima (Cmax),
tiempo máximo (t,,,ax), t112 o biodisponibilidad. También se modifican la toxicidad,
efectos adversosy tolerancia, lo que puede mejorar de forma muy acusadael
resultadoobtenidoy el cumplimientopor el pacientede la terapiamedicamentosa
(CADORNIGA, 1990).
En función de la hora del día a que se hace la administraciónde un
medicamento, se puede modificar su absorción,distribución, metabolismo y
excreción.La alteraciónpuedeafectara una solao varias de las fasesindicadas;así,
la Griseofulvinapresentauna absorciónmáxima cuandoseadministraa mediodía,
y mínima a las seis de la mañana(datosobtenidospor el estudiode la excreción
acumuladaen setentay dos horas) (KABASAKALIAN y col, 1970). El t’/z de
absorcióndel Hexobarbitales de 1,16 horasa las 2 horas y de 0,44horasa las 18
horas. La disminución simultáneade las constantesde velocidadde absorcióny
eliminaciónincideen el valor de la biodisponibilidadquees cinco vecesmayora las
18 horas quea las 2 horas (ALTAMAYER y col, 1979).
La diferenciaen la cinéticade absorciónno se limita a administraciónoral.
21
REVISION BIBLIOCRAFIGA
Se encuentranconstantesde velocidad de absorción3,5 veces más altas en la
administraciónintramuscularde Petidinaenel período6-10horas queen el período
18-23 horas (BELANGER y col., 1982).
El volumende distribución, real o aparente,experimentavariacionesentre
períodosde actividady reposopor la influencia de factores tales como: volumen
plasmático, flujo sanguíneo,pH o concentraciónde proteínas plasmáticas.En
electrolitos débiles,el leve descensodel pH duranteel periodo de sueño,puede
modificar la distribución de fármacospor transferenciaintercompartimental.El
metabolismoy excreciónson, probablemente,los procesosmás afectadospor los
ritmos circadianos(CADORNIGA, 1990; REINBERG, 1992).
Las diferencias que sepuedenobservar entre los datos aportados por distintos
autores,trabajandocon protocolosexperimentalesanálogos,son habitualmentede
tipo cuantitativo y puedenatribuirse a las inevitablesvariacionesinterindividuales
en estudiosde esa naturaleza.Desde el punto de vista cualitativo se obtienenen
general,resultadoshomogéneos.Así, Chauhany col. (1986) encuentranvaloresde
semividaparala Teofilina de 7,9 horas a la 7 a.m. y de 11,41 horasa las 7 p.m.;
Giaconay col. (1983), en un estudiosemejante,dan valoresde t’/z de 6,6 y 7,8
horas con administracióna las 7 y 19 horas, respectivamente.Taylor y col. (1984)
de 6,64 y 7,5 horas a las 9 y 21 horas. Por el contrario, y éstaes la excepción,
22
REVISION BIBLIOGRAPIGA
Vematsu y col. (1986) no encuentrandiferenciassignificativas en la constantede
velocidadde eliminación en el transcursodel día.
Todoslos autoresque han realizadoel seguimientode los niveles hemáticos
de Teofilina encuentran variaciones periódicas en la concentración que se
correspondeconlos ciclos circadianos.En todos los casosseobtienenniveles más
altos cuandola Teofilina se administrapor la mañanaque cuandose hacepor la
tardeo por la noche, tanto si la liberación es inmediatacomo si es liberación
sostenida(GIACONA y col., 1983; TAYLOR y col., 1984; CHAUHAN, 1986).
Sehan sugeridodistintas interpretacionesfarmacocinéticasparaexplicareste
distinto comportamiento:
1) La velocidad de absorción es diferente por la mañana que por la noche.
Estadiferencia,generalmenteaceptada,puedeexplicar cualitativamenteel distinto
perfil de las curvasconcentración-tiempo,pero no satisfaceun análisis cuantitativo
riguroso de los resultadosexperimentales,ya quese hancomprobadolas mismas
variacionesperiódicasen concentraciónhemáticacuandola administraciónse hace
por perfusiónendovenosaa velocidadconstante.
Se observanvariacionescircadianasen la disposiciónde la Teofilina durante
23
REVISTON BIELIOGRAFIGA
la perfusiónendovenosaa velocidadconstanteen perros.El tiempo de perfusiónse
estableceen 48 horas y el seguimientode los niveles hemáticossecomienzaa las
24 horas de iniciada la perfusión,momentoen que, por consideracioneselementales
farmacocinéticas,sehabráconseguidoel equilibrio dinámico.
Las concentracionesmáximassepresentanentrelas 24 y 30 horascuandola
perfusiónse inicia por la mañana(entre las 11 y las 12) y las mínimasentrelas 39
y 42 horas.Si la perfusión se inicia a las 11 de la noche, los máximosy mínimos
seobtienena las 39 y 24 horas,respectivamente.En consecuencia,las variaciones
periódicas en las concentracionesde Teofilina, en equilibrio dinámico, no son
imputablesexclusivamentea la velocidadde absorción(RACKELEY y col., 1988).
2) Variacionesen la constantede velocidadde eliminación. Casi todos los
autorescoincidenen que la velocidadde eliminaciónes mayorpor el día quepor la
noche.Ateniéndonosaeste dato, seríaprevisibleel fenómenoinverso. Los niveles
nocturnosseríanmás altos que los diurnos (CADORNIGA, 1990).
3) Modificación del volumen de distribución. La relación aparenteentre
volúmenesde distribuciónde día y de nochees de apenasdel 10%, notablemente
inferior a la variación que experimentala concentraciónen equilibrio que oscila
entre el 20 y el 30 %. No obstante, éste es el factor que contribuye a las
24
REVISION BIELTOGRAFIGA
fluctuacionescírcadianasde las concentracioneshemáticas(TAYLOR y col., 1984;
RACKLEY y col., 1985).
4) Variación periódica del aclaramiento.El cociente entre velocidad de
perfusión y aclaramientototal es la concentraciónen equilibrio. Si la velocidadde
perfusión es constante,el aclaramientoconstituye la variable independientey la
concentraciónen equilibrio la variabledependiente.Algunos autoresno encuentran
variacionessignificativasen el aclaramientoen el transcursodel día (GIACOMA y
col., 1983; TAYLOR y col., 1986).
De las consideracionesapuntadas,se puede decir que las variaciones
circadianas, periódicas y rítmicas de las concentracionesen equilibrio de la
Teofilina, tienenfácil interpretaciónen la administraciónoral, pero en perfusión
endovenosaa velocidadconstantela interpretaciónpuedeser objetode controversia.
Como ya se apuntó con anterioridad, la cronofarmacocinética,
cronofarmacología,cronoeficaciay cronotoxicidad,proporcionanlasbasesracionales
a la cronoterapia,que tiene por objeto establecerlas pautasposológicasadecuadas
a los ritmos biológicos,afin de aprovecharal máximolos efectosdeseadosy reducir
los adversos(REINBERG, 1979 y 1992).
25
REVISION BIELICORAFICA
Otro grupo de fármacos que constituyen un magnífico ejemplo en el capitulo
de la cronofarmacoterapia,es el de los antiinflamatoriosno esteroides,de los cuales
existeunaabundanteliteraturafarmacocinéticay cronofarmacocinéticaen animales
de laboratorioy en humanos.Entre estos seleccionaremoscomorepresentantedel
grupo a la Indometacina.
Se ha comprobado la existencia de variaciones circadianas en la
farmacocinéticade la Indometacinatras administrara ratasunadosisde O,Smg/kg
por vía 1.V. en cuatrotiemposdistintos (GUISSOUy col., 1987).
Del estudiodel comportamientofarmacocinéticode la Indometacinaen ratas,
tras administrar3 mg/kg por via oral. Se concluyeque la velocidadde absorciónes
notablementemayor a las 21 que a las 8 horas por las variacionesde los valores
de C,,~ y t.~,<, no se modifica sensiblementela biodisponibilidady la semividaes
mayor por la nocheque por la mañana(BELANGER y col., 1982).
En los hombresse observaque una diferenciade 12 horasen el tiempode
administración(de7 a 19 horas)reducela concentraciónplasmáticaa la mitady esta
diferencia guarda relación con la tolerancia al medicamento(CLENCH y col.,
1981).
26
REVISTON EIBLIOGRAFTCA
Es interesanteresaltar la acusadafluctuaciónalrededordel mesor, de los
valores de Cm.x y tm.x, sin variación significativa de la biodisponibilidad
(CADORNIGA, 1990).
En un estudiorealizadoenenfermosaquejadosde reuma,dondeseevaluaron
los niveles plasmáticos de Indometacinay su metabolito0-demetilindometacina,
después de administrar 75 mg de Indometacina. Se observó que el grupo
correspondientea la admistracióna las 20 horas sediferenciabadel de las 8 horas,
tanto en los valoresde Indometacinainalteradacomode su metabolitodemetilado.
La mayor demetilaciónde la indometacinaen estegrupo de ensayopuededeberse
en parte,ala granactividadenzimáticadel sistemamicrosomalque, comoessabido,
experimentavariacióncircadianaconincrementode actividadenel último terciodel
día. Probablementecoadyuvenal mantenimientode los niveles plasmáticosla
modificaciónde la unión aseroalbúminay las constantesde velocidadde absorción
y excreción(GUISSOU y col., 1983).
Los efectos indeseablesmanifestadospor los individuos tratados con
Indometacina,como trastornos gastrointestinales,nerviososo cutáneos,guardan
relacióncon la hora de administración;a las 20 horascausamenostranstornosque
a las 8 horas.Ello sedebeprobablemente,al valor acusadamenteinferior de la C~
en la administración vespertina que en la matutina (CLENCH y col., 1981;
27
REVISION BIELTOGRAFICA
GUISSOU y col., 1983).
Se han realizado estudios análogos, aunque con diferentes resultados
cuantitativos, con otros analgésicosantiinflamatorios no esteroides, como la
fenilbutazona,piroxican, ibuprofen,ketoprofen,etc...
En un estudiosobrecronofarmacocinéticadel Ketoprofenen administración
oral, a cuatro horas diferentes (1 ;7;13;19 horas) seencontraronvariacionesmuy
acusadasen todos los parámetrosfarmacocinéticosquedependende la horay deldía
en que se realiza la administración(OLLANGNIER y col., 1987).
28
REVISION BTBLTOGRAFTGA
11.1.6.2.-Cronotoxicolo2ía
Al igual que existenvariacionescircadianasen la susceptibilidady en los
efectosadversos,tambiénse manifiestanmodificacionescircadianasy estacionales
en la toxicidad. Si se admite que todo organismo vivo, es sede de una
bioperiodicidad,es fácil comprenderque reaccionaráde forma diferentefrente a un
mismoestímulo,seatóxico, patogénicoo medicamentoso,segúnel momentoen que
esteactúe (REINBERG, 1979).
Probablemente,en los productosen los que mejor se ha estudiadola
cronotoxicidadesen los metalespesadosy en los antibióticosaminoglucósidos.Con
los antibióticos que se han utilizado en estudiosde crononefrotoxicidad,se ha
comprobadola existenciade variacionescircadianascon indicaciónde la horay del
día a la que sepresentamayor toleranciao toxicidad. Es interesanteseñalarque la
hora de máxima toxicidad en primavera,coincideexactamentecon la de mínima
toxicidad en otoño para la Amicacina(DORIAN y col., 1987).
La nefrotoxicidadde los metalespesadospresentamáximosde toxicidada las
20 horas y mínimosa las 2 horas,manifestaciónvinculadaa la cronofisiologiarenal
(CAL y col., 1985).
29
REVISTON BIBLIOSRAFIGA
En la misma línea se demostró,trabajandocon ratas, que la mortalidad
inducidapor el Cis-Platinoes máximaen el veranoy mínimaen el invierno (LEVY,
1982).
En consecuencia,cadavez es másnecesarioen toxicologíaprecisarno sólo
la especieanimal,víade administración,protocolodetrabajoy tratamientode datos,
sino tambiénhora y épocadel año en que se ha realizadoel ensayo(JURADO,
1989).
30
REVISION BIBLIQORAFICA
11.1.6.3.-Cronoteraucútica
La cronofarmacología y la cronotoxicología deben necesariamente
desembocaren una cronoterapéutica(CONSO, 1979; HALBERG y HALBERG,
1984: REINBERG, 1992).
Actualmente
los problemasde la
consisteen saberde
el interés de la cronoterapeúticasecentraen tratar de resolver
optimizacióndel uso de los medicamentos.Estaoptimización
que manerasepuedenreducir los efectosindeseables.
Un ejemplomuy
debe teneren cuentael
puestoque los niveles
notablemente (KIIJHN y col.,
REINBERG, 1982; SANCHEZ y
importanteson los tratamientoshormonales,en los que se
efecto de la luz sobre el eje diencéfalo-hipófiso-gonadal,
de la ACTH, la prolactina, la HCG, etc.., se modifican
1980; LAGOGUEY y REINBERG, 1981;
col., 1983).
Otro ejemplo de optimización con un esquemacronofarmacológico, es el de
los agentesantitumorales,ya que setratade sustanciasparalas cualesel margende
seguridadentre la dosisantitumoraleficaz y la dosistóxica es muy estrecho.En
efecto, estassustanciasproducenla muertede las células tumoralesy/o les impide
multiplicarse, interviniendo en uno o varios de los procesosfundamentalesque
31
REVISION BISLIOCRAFICA
implican entreotros, al metabolismode los ácidos nucleicos. Así, resultaque las
célulassanaspuedenverseafectadastambiénpor estassustancias.
La nuevaestrategiafundamentadaen la cronofarmacologiaconsisteen sacar
provecho de las variacionesde cronotoxicidaddel medicamentocon respectoal
huésped,portadordel cáncer,y/o frente al tumor mismo. Consisteen modular,por
ejemplo, la distribucióndel medicamentoen las 24 horas,de forma que la fracción
máxima de la dosis cotidianase aplique en el momento en que se tolera mejor,
mientras que la fracción mínima se administra a la hora en que el agente
anticancerosoes má tóxico. El momento se determinapor diferentes técnicas
(termografia,actividadenzimática,etc...) y seaplicano solamentea fármacos,sino
en tratamientosfísicos, como la crioterapialas por radiaciones.(CAVALLINI y
col., 1987, COSTAS, 1989; HALBERG y col., 1992).
32
REVISION SIELIOGRAFIGA
11.2.-ANDROGENOS
11.2.1.-REGULACION DE LA PRODUCCION DE ANDROGENOS:
11.2.1.1.-La hipófisis y el hipotálamo
La hipófisis es una glándula endocrina, localizada en la silla turca del
esfenoides,y puedefuncionarcomounaextensiónanatómicay funcionaldel sistema
nervioso central. Se subdivide anatómicamenteen: neurohipófisis o hipófisis
posteriory adenohipófisiso hipófisis anterior.
Embriológicamenteambas provienende primordios diferentes de origen
ectodérmico.Duranteel desarrolloembrionario,unaporcióndel techode la faringe
avanzadorsalmenteparaalcanzarunaevaginaciónde direcciónventralde la basedel
diencéfalo.La evaginaciónproyectadadorsalmente,conocidacomoDivertículo de
Rathkeo Ducto Craneofaringeo,forma la adenohipófisis,mientrasque la dirigida
ventralmente,de tejido neuronal, forma la neurohipófisis.
El tejido de la hipófisis anteriorse expandedorsalmentepararodearel tallo
infundibular y la eminenciamedia formandola pars distalis (porción secretora
principal de la adeno-hipófisis> y la pars tuberalis. El tallo infundibular y la pars
tuberalis, constituyenel pedículohipofisiario. La pan intermedianormalmentese
33
REVISION BIBLIOGRAFICA
forma a partir del Ducto Craneofaringeocercadel punto en que se fusionacon la
pars nervosa (VALLOTON, 1985; CAPEN y MARTIN, 1991).
El desarrolloembriológicoestade acuerdocon la inervaciónfinal de estos
lóbulos. La neurohipófisis presenta una inervación directa de los núcleos
hipotalámicos,perohastala fechano seha demostradoningunainervaciónfuncional
significativa de la hipófisisanterior por vía hipotalámica,es más, la comunicación
conel hipotálamose establecepor unarutahumoralprovistapor el sistemade venas
portalesde la hipófisis.
El sistemaportal comienzaen la eminenciamedial del Tuber Cinereuma
modode buclescapilaresquedrenanen venasparalelasqueatraviesanel pedúnculo.
En en lóbulo anterior los vasosportalesdesembocanen sinusoidesque irrigan las
células hipofisarias.La sangrevenosade la glándula,drenaen el senocavernoso.
Aunque puedehaber un pequeñoaportearterial a la hipófisis anterior, los vasos
portalescomponenel principal aportesanguíneo.En adición a estosvasosportales
“largos”, hay conexionesportalesvenosas“cortas” que alcazanal lóbulo neuraly
atraviesanel lóbulo intermedio hacia la hipófisis anterior (NEUMANN, 1987;
FLOREZ y AMADO, 1992).
Los sinusoidesvenososde la glándulaestánformadospor diversostipos de
células hipofisarias, que pueden ser clasificadas como eosinófilas, basófilas y
34
REVISION SIBLIQGRAFICA
cromófobassegún su afinidad por distintos colorantes.Se pensabaque cadatipo
celular producíauna única hormona,pero actualmentees sabidoque determinadas
célulasson capacesde secretarmásde una hormona.
La acidófilassesubdividenen somatotrofasy luteotrofasy secretanhormona
del crecimiento(STH) y prolactina(LTH) respectivamente.Las basófilas incluyen
tanto granos gonadotrofos que secretan hormona luteinizante (LH) y
foliculoestimulante(FSH), comogránulostirotrofos que secretanhormonatirotropa
(TSR). Las cromófabasincluyencélulasendocrinaque intervienenen la síntesisde
adrenocorticotropa(ACTH) y hormona estimulantede los melanocitos(MSH),
células foliculares no secretorasy células indiferenciadasdel tallo (VALLOTON,
1985; CAPENy MARTIN, 1991). Dentrode estegrupode hormonas,presentanun
papel reconocidoen la terapiadelcáncerde próstatala prolactina, la ACTH y la LH
(Mc CONNELL, 1991; CARPEN Y MARTIN, 1991).
La prolactinatieneconsiderablesemejanzaestructuralcon la STH; induceal
crecimientode la glándulamamariay a la secreciónláctea(hormonalactógena).En
roedoresafecta a la función gonadal con efecto estimulantedel cuerpo lúteo y
tambiénayudaal mantenimientode la estructuray funciónde los órganossexuales
accesorios.Tiene un efectoestimuladorde las células prostáticasen cultivo, por lo
que secreeque participaen la regulacióndel crecimientoprostático(NEUMANN,
1987; Mc CONNELL, 1991).
35
REVISION BIELTOGRAFIGA
La ACTH es la hormona de la hipófisis anterior que regula la función de la
cortezaadrenal.Este pequeñopolipéptido,de unacadenade 39 aminoácidos,es
partedel sistemaprecursorde la propiomelanocortina.En la adenohipófisis,el
precursoresprocesadohaciala ACTH y ¡3-endorfina,un péptidoopiáceoendógeno.
La secreciónde ACTH aumentapordiversosestímulosestresantesy la secreciónes
inhibidapor glucocorticoidespero no por andrógenos(Mc CONNELL, 1991).
La adenohipófisissecretados glucoproteinas,la FSH y la LH o ICSH, que
tienenefectogonadotrópicoespecíficosobre los testículos.La primera, promueve
la espermatogénesispero no estimulala producciónde andrógenospor las células
de Leydig, y tiene un papel desconocidoen el cáncerde próstata,sin embargo,la
FSH puede regular parcialmenteel número de receptores LH de las células de
Leydig a los esteroides(NEUMANN, 1987). La hormonaLI-I es estructuralmente
semejantea la FSH y actúadirectamentesobre las células de Leydig provocando
la producción de testosterona. Aparentemente,algunas células gonadotropas
hipofisiarias secretansolo LH, mientrasque otrassecretanFSH y LH.
A través del sistemavenosoportal descrito, la función de la adenohipófisis
es reguladapor e] hipotálamo.Lesionesque destruyenla eminenciamediaprovocan
disminuciónen la secreción,por lo tanto, hay una influenciaestimuladoranetadel
hipotálamoen la secreciónde la mayoríade las hormonasde la hipófisis anterior,
con excepciónde la prolactina.
36
REVISTON BIELIOQRAFWA
Las hormonas hipotalámicas liberadoras e inhibidoras, influencian la
liberación de las adenohipofisarias.La hormona liberadorade corticotropinao
CRH, junto con la ADH u hormona antidiurética o vasopresina(neurohipofisaria),
controlan la secreción de ACTH. Las hormonas liberadoras de LH y de FSH son
probablementeidénticas, aunque se cuestiona la existencia de una FSHRH.
Actualmentese hacereferenciaa esta RH como GnRH u hormona liberadorade
gonadotropinas(NEUMANN, 1987; Mc CONNELL, 1991).
Todaslas hormonaspolipeptidicas, incluidas las hormonasliberadorasdel
hipotálamo,activan las células de la hipófisis por unión a receptoresaltamente
específicosen la membranaexternade la célula diana. La unión al receptoractiva
la adenil-ciclasa,conduciendoa la producciónde AMPc y a un aumentodel Ca~+
intracelular.El AMPc activaunaprotein-cinasaquemediaen la mayorpartede los
efectosde los nucléotidoscíclicos o de la función celular. En la célula hipofisiaria
la activación de la protein-cinasa provoca fosforilación de determinados
constituyentesde membranaque promuevenla secreciónde la hormona.Estaruta
del AMPe esel principal mediadordel efectoestimuladordel CRH en la secreción
de ACTH. Por el contrario,el sistema de AMPe juegasolo un papel parcial en el
mecanismode acción de la GnRH. Los productosdel metabolismo del ácido
araquidónico (eicosanoides>,están involucrados en la inducción de exocitosis.
Específicamentelos leucotrienosy los epóxidosparticipande forma importanteen
la movilizaciónintracelulardel calcio (VALLOTON, 1985; FLOREZ y AMADO,
37
REVISTON BIBLIOGRAEIGA
1991).
La regulaciónde la secreciónde hormonasdependede varios mecanismos:
humoral, nerviosoy genético. El control humoral de la regulaciónde una hormona
adenohipofisariapor concentraciónde otra hormona,se lleva a cabopor un sistema
de retroalimentación.Enel casode la ACTH, los esteroidesadrenalesretroalimentan
directamentela hipófisis para inhibir la respuestaliberatoria; estaretroalimentación
también tiene lugar a nivel del hipotálamopara inhibir la liberación de CRH y
vasopresina. La relación entre los esteroidesgonadalesy el eje hipotálamo-
hipofisarioes la basede distintos tipos detratamientoshormonalesparael cáncerde
próstata. Los agonistas-antagonistasGnRH, estrógenosy agentesprogestacionales
inducen a un estadode castraciónmédicaen el hombre,por interrupción de la
función gonadotrópicade la hipófisis. La castracióny eliminación del efectode
retroalimentaciónpor acciónde la testosterona,produceun aumentode los niveles
de FSHy LH (DE VOOGT y col., 1990; Mc CONNELL y col., 1991).
La regulación de la secrecióny liberación de estashormonashipofisarias
espulsátily rítmica. En ciertasespeciesanimales,y en el hombre, el incremento
de la duración diurna envía señalesal hipotálamo que regulan la liberación
pulsáfil de GnRH que a su vezincrementa la liberación o cambia la tasa de
gonadotropinashipofisarias (FSH y LH); estodeterminae indica la existenciade
unos ritmos circadianosy circanualesde secreciónpara estashormonas. Siendo
38
REVISTON BIBLIOGRAFICA
muy importante el efecto de la luz sobre el eje diencéfalo-hipófiso-gonadal
(MONSALTVAJE, 1981; Mc CONNELL, 1991).
El cese de la retroalimentaciónnegativa mejora la liberación GnRH,
aumentandotanto la síntesis como la descargade gonadotropinas.Dosis bajas de
estrógenoso andrógenospuedensuprimir la respuestaa GnRH. En el caso de los
estrógenosesta supresiónpuedetenerlugar al cabode unahora.
La terapiacon esteroidesa largo plazo inducea la supresiónno sólo de la
secreción,sino tambiénde la síntesis,disminuyendoconsecuentementeel contenido
de gonadotropinasen la hipófisis; estedeclive va asociadoa un descensoposterior
de la respuestaa GnRH que puedeser causadoen partepor unadesensibilización
de los receptoresa la GnRH (Mc CONNELL, 1991).
La acciónde retroalimentaciónnegativade andrógenosy estrogenosen el
hipotálamoy en la hipófisis, regulala secreciónde LH. Tanto la testosteronacomo
el estradiol puedeninhibir la secreciónde LH. Aunque el cerebroy la hipófisis
puedenpasar la testosteronaa estradiol, ambashormonasprobablementeactúan
independientemente. El hechode queel metabolitoDihidrotestosterona(DHT), que
no puedeser aromatizadoa estrogeno,ejerzaretroalimentaciónnegativasobre la
secreciónde LH, sugiereque la testosteronano requiere convertirseen estradiol
para inhibir la secreciónde estrógenos.
39
REVISION BTBLIQGRAFIGA
La testosteronatambiénpareceproducirunaretroalimentaciónnegativasobre
la secreciónde LH en la hipófisis, ya que aumentosmoderadosen los niveles de
testosteronaplasmáticadisminuyenla respuestaa la estimulaciónagudapor GnRH
en presenciade nivelesplasmáticosnormalesde estradiol.La testosteronaactúaen
el sistemanerviosocentral disminuyendoel pulso generadorhipotalámico, y por
tanto la frecuenciade pulsos de LH; es más, la testosteronapareceproducir una
retroalimentaciónnegativadirectasobrela secreciónde LH a nivel hipofisiario (Mc
CONNELL, 1991; FLOREZ y AMADO, 1992).
40
REVISTON EIBLIOGRAFIGA
11.2.1.2.- Producciónandrogénicatesticular
La LH hipofisaria alcanzalas células de Leydig testicularesa través de la
circulaciónsistémica. La unión de LH a su receptorde membrana,cataliza la
formación de AMPc. La activación de la protein-cinasade la célula de Leydig,
produceel estimulopara la conversióndel colesterolen pregnenolona.La cantidad
de testosteronasintetizadase relacionamásdirectamenteconel gradode ocupación
de las subunidadesreguladorasde la protein-cinasapor el AMPc, que con la
cantidad total de AMPc en las células. El complejo LH-receptor desencadena
probablementela endocitosisy la subsiguientedegradación.Los receptoresde LH
disminuyenenrespuestaa la administraciónde LH o HCG (gonadotropinacoriónica
humana)y este descensode los receptoresesta asociadoa unadisminuciónde la
respuesta(desensibilización); sin embargo, la desensibilizaciónno puede ser
exclusivamenteel resultado del descensoen el número de receptores . Las
reaccionespost-receptorialesprobablementeson másimportantesque la regulación
por receptores,ya que el AMPc es incapaz de revertir esta desensibilización
(NEUMANN, 1987).
El colesterol,principalesteroideprecursorde la testosterona,puedetambién
ser sintetizadoa partir de la Acetil CoA, o ser derivadodel pooí plasmáticode
LDLP. Cinco enzimas(o complejosenzimáticos)estáninvolucradosen el pasode
colesterol a testosterona. Además de la testosterona, la DHT, androsterona,
41
REVISION BIBLIOGRAFTGA
androstenodiona,progesteronay 17-dihidroxiprogesteronason secretadaspor las
célulasde Leydig (VALLOTON, 1985>.
La testosteronaen el plasma se encuentrafundamentalmenteligada a
proteínasplasmáticas,principalmentealbúminasy globulinas, y en forma de enlace
testosterona-estradiol(TeBG). En la sangreaproximadamenteel 2 % de testoterona
estaen forma libre, el 44 % va ligada a TeBG y el 54 % se une a albúminasy
otrasproteínas;sólo la porción libre estadisponible paraentraren el tejido diana,
sin embargo,la fracciónactiva de la hormonaes funcionalmentemayordel 2%, ya
que la testosteronapuededisociarsede la TeBG y de la albúmina.
El transportede hormonasesteroidesen las células,escomplejo,necesitando
la disociaciónde la hormonaligada a proteínasdentro del capilar, por tanto, la
cantidadde hormonadisponibleparaentraren las célulasdependede la combinación
del tiempo de tránsito capilar, de la cantidad de hormona ligada y de la
permeabilidadde membrana.El tiempo medio de disociaciónde la testosteronaes
menor de 1 segundo,desdela albúmina,mientrasque es de 22 segundosdesdela
TeBG, por tanto, toda la testosteronaligadaa albúminasestamásdisponibleque la
TeBG. Debidoal tiempode tránsitoen la mayoríade los tejidos,estádisponibledel
40 % al 50 % de la testosteronaplasmáticatotal (NEUMANN, 1987).
La testosteronasirvede precursorcirculanteo prohormonaparala formación
42
REVISTaN BIELIOCRAFIGA
de dos tipos de metabolitos activos, que median muchos de los fenómenos
fisiológicos involucrados en la acción androgénica. La testosterona puede
transformarseen esteroides5 a reducidos, como la DHT, por la enzima 5 a
reductasa.Alternativamente,los andrógenoscirculantespuedenser aromatizados
haciaestrógenosen los tejidos periféricos;estosestrógenosen algunoscasosactúan
en unióncon los andrógenosparainfluir en los procesosfisiológicos,pero también
puedenejercerefectosindependientesy opuestosa los de los andrógenos.Pequeñas
cantidadesde estradioly DHT sonsecretadasdirectamentedesdelos testículos,sin
embargo la conversión periférica constituye la mayor fracción de estos dos
metabolitos(NEUMANN, 1987; FLOREZ y AMADO, 1992).
43
REVISTON BIBLIQQRAFICA
11.2.1.3.- Producciónandro~énicaadrenal
La glándulaadrenalsegregacuatro compuestosde 19 átomos de carbono:
testosterona, dihidroepiandrosterona(DHEA), sulfato de dihidroepiandrosterona
(DHEAS) y androstenodiona.
Las glándulas adrenalesy los testículos, comparten un mecanismode
biosíntesisde testosterona,sin embargo,la actividad de la 17 j3-hidroxiesteroide
deshidrogenasaen los testículos,es más importante;por tanto, la androstenodiona
y la dihidroepiandrosterona,son los principalesandrógenosadrenales(VELLOTON,
1985).
El efectode los andrógenosadrenalessobre células tumoralesprostáticas,
tantobenignascomomalignas,escontrovertido.Enanimalesdeexperimentaciónla,
adrenalectomíainfluye pocoen el tamañode la próstata,el ADN o la morfologíade
los tejidos sexualesaccesorios,es más, la castracióninduce a una reducción
significativa en el tamañoprostáticosin adrenalectomíaconcomitante.Ciertamente,
los andrógenosadrenalesno son suficientespara restaurarel tamañode la próstata,
sin embargo,la estimulaciónadrenalACTH puedeinducir a crecimientoprostático
(MOBBS y col., 1983; SCHULZE y col., 1987).
La tasa de producción de DHEA en hombre es de 10-30 mg/día, sin
44
REVISION BIBLIOGRAFIGA
embargo,menosdel 1 % de la testosteronaplasmáticaprovienede la DHEA. El
tejido prostáticotiene la capacidadde hidrolizar el DHEAS a esteroideslibres
medianteuna sulfatasa.Aunque unaporciónconsiderablede androstenodiolaparece
como epiandrosteronay androsterona,sólo pequeñascantidadesde potentes
metabolitos5 ex reducidos comoel DHT, seformanen fuentesadrenales,por tanto,
el DHEAS no es un andrógenomuy potente.
Los andrógenosadrenalesDREA y androstenodionapasana testosteronaen
la célula prostáticapor la enzima17 8-hidroxiesteroidedeshidrogenasa.Estaenzima
y su ARNm están presentesen gran cantidad en tejidos procedentesde cáncer
prostático(LAI3RIE y col., 1989).
La importaciade los andrógenosadrenalessedemuestracuandodespuésde
unaorquiectomíadesciendenen un 60% los nivelesde DHT en el tejido prostático
cancerígeno(GELLER y col., 1984). En otros estudios,sinembargo,la castración
médicaha desmostradoque desciendenlos nivelesprostáticosde DHT al 90%; de
hecho,evidenciasclínicas,sugierenquelos andrógenosadrenalesjueganun pequeño
papel en pacientesconcáncerde próstata(SCHULZE y col., 1987). Realmente,en
condiciones normales, los andrógenosadrenales no producen un crecimiento
significativo del tejido prostático. Estudiosanteriores, que demostrabanniveles
significativos de DHT en hombrescastrados,con cáncer de próstata, tienen el
defectode que en los gruposde pacientestratadosconestrógenos,no se informa de
45
REVISION BIBLIOGPAFIGA
los nivelesde testosteronasérica(ELLER y col., 1984), es más, la opiniónde que
el bloqueo de receptoresdisminuye los niveles de DHT en el tumor no puede
explicarse fácilmente a no ser que la transcripción del gen 5 cx-reductasasea
andrógenodependiente;además,los andrógenosadrenalesno median efectosde
retroalimentaciónen la secreciónde ACTH; tambiénel cortisol participa de la
retroalimentaciónnegativa(NEUMANN, 1987; LABRIE y col., 1989).
46
REVISION BIBLIOGRáFICA
11.2.2.-ANDROGENOS Y CANCER DE PROSTATA
Todos los procesos celulares andrógenodependientesen la próstata,
aparentementeestánmediadosa través del receptorandrogénico.
La concentraciónde receptoresandrogénicoses mayor en los órganos
accesoriosde reproducciónmasculinosy dependende los andrógenospara su
crecimiento. Otros tejidos como el músculo esquelético,hígado y corazóntienen
menor cantidad de receptores(GELLER y col. 1989). También se ha descrito la
mayor o menor sensibilidad androgénicade una línea tumoral, en función del
númerode receptoresa dicha hormona(DIAMOND y col., 1984; LIN y SHAIN,
1989; SHUURMANS y col., 1990).
El receptor es activado por la testosteronao por la DHT, que es un
metabolitode la primerapor acciónde la 5 a- reductasa.
Aunque las hormonasactúansobre el mismo receptor, la DHT, tiene más
afinidad. Presumiblementela unión hormona-receptorinteractúacon secuencias
especificasdeADN a contracorrienteconlos genesandrógeno-reguladosmejorando
la tasade transcripcióny producciónde ARN especifico.
Estoscomplejoshormona-receptortambiénpuedeninhibir la transcripciónde
47
REVISTON BIBLIOGRáFICA
genes,conduciendoa la muertecelular. Este mecanismopuede incluir, en menor
grado, la activaciónde genesespecíficos(BANDYK y col,. 1990).
En estudiossobre líneas celulares se ha observadodiferencias entre las
células prostáticasnormales y las tumorales,que se basan entre otra serie de
cuestiones,en que las segundastienen menoresconcentracionesde 5 c~-reductasa
(GELLER y col., 1989) y que la unión andrógeno-receptory la subsiguiente
expresióndel receptorARNm tambiénes menor (QUARMBY, 1990);estohaceque
el comportamientoy tipo de respuestasepuedanmodificar entreambasclases de
células.
Desdeel punto de vista terapéutico,se ha observadoque los tumoresde
próstatao de mamasin receptoresa andrógenoso a estrógenosrespectivamente,no
respondena la terapiaendocrina(KING, 1990); pero este hecho tambiénse ha
producidoen tumorescon presenciade receptores.Esto seexplicó por un defecto
del procesode transcripción(KING, 1990), pero actualmentese sabe que este
procesoes máscomplejo.
Hay un mecanismode desensibilizaciónpor mutaciónde proteínas,cambios
en la expresióndel gen, o la adaptaciónde pequeñosgruposcelularesandrógeno
dependientesa un ambientehormonalalterado(ISAACS y KYPRIANOU, 1987;
BRUCHOVKY y col., 1990); influyen también los factores de crecimiento,
48
REVISION BIBLIOGRAFICA
busquedasde rutas proliferativasalternativas(independenciahormonal),etc... En
conjunto el origen celular multifocal y la inestabilidad genética de las células
tumorales.
Por todo ello se puede decir que la eficacia de la terapia del cáncerde
próstata,dependeráno sólamentedel númerode células hormono-dependientesu
hormono-independientes,sino también de la capacidadde adaptacióny de la
presenciade diversosfactoresde crecimiento(CHANG y col., 1989; HUSMANN
y col., 1990; SADI y col., 1990).
49
REVISION BIBLIOGRAFIGA
11.2.2.1.- Terapiashormonalesespecíficas
Aunque las terapiashormonalessuelenser aplicadasen combinación,las
trataremosde forma independiente:
- CastraciónQuirúrgica:
La eliminaciónquirúrgicade los testículos(orquiectomíabilateral),disminuye
los nivelesde testosteronacirculanteen un plazo corto de tiempo. Aunque tanto la
FSHcomoLH plasmáticasestánelevadassignificativamente,debidoa la pérdidade
la retroalimentaciónnegativapor los esteroidesgonadales,los nivelesde testosterona
permanecenal nivel de castración a lo largo de toda la vida del paciente
(NEUMANN y col., 1990; DE VOOGT y col., 1990).
Los niveles tisulares de DHT se
descensodel sustratoprimario.
reducen de forma significativa debidoal
- CastraciónMédica:
Estrógenos: los estrógenoshan sido la forma más común de terapia
privativa hormonalparapacientescon cancerde próstata.Su efectoprincipal es la
supresiónde la regulaciónde la LH hipofisaria,perotambiénaumentala síntesisde
50
REVISION BIBLIOGRAFIGA
TeBG en el hígado, disminuyendo por tanto la cantidad de testosterona
biodisponible.Ademáslos estrógenosinhiben la 5 cx-reductasa,interfierenel enlace
de la testosteronay la DHT con el receptor androgénico,e inhiben la ADN
polimerasa.No existe la evidenciade un efectocitotóxico directo en la célula.
El DES (Dietilestilbestrol) administradopor vía oral, es la preparación
estrogénicaactiva más ampliamenteutilizada. Su uso reducela testosteronasérica
a nivelesde castración(CITRIN y col., 1985).
El fosfatode Estrasmutinacombinalos efectoshormonalesde los estrógenos,
con una actividad citotóxica específica, sin embargo, el mecanismoexacto de
actividadde la estrasmutinano estátotalmentedilucidado;ensayosclínicosrecientes
no indicanningunaventajade estetratamientofrente al DES.
.Agonistas LHRH (GnRH)): desde la determinaciónde la secuenciade
aminoácidosde la GnRH, se han producidouna serie de análogossintéticoscon
igual o mayoractividadque los naturales.Por ejemplo,el reemplazode la 6-glicina
por leucinaaumentafuertementela potencia.
La administraciónde dosiselevadasacorto píazode un análogo,produceun
aumento de LH y consecuentementede testosteronasérica, sin embargo, el
tratamientoa largoplazo terminacon unamarcadasupresiónde la secreciónde LH,
51
REVISION BIBLIOGRAFICA
debido tanto a autoregulaciónde los receptoresGnRH de la hipófisis, comoa otros
acontecimientospost-receptoriales.Estos acontecimientoshacen a la hipófiosis
refractariaa unaposteriorestimulaciónpor la GnRH, suprimiendola secreciónde
LH y eventualmentedisminuyendola testosteronaplasmáticaanivelesde castración.
El efectoestimulanteinicial de los análogosGnRH terminacon el llamado
“fenómeno de fiare” (LABRIE y col., 1982). El pretratamientocon distintos
compuestosantiandrógenos,tantocomocon DES, evitaneficazmenteel “fenómeno
fiare” medianteel bloqueoindependientede la regulaciónde la LH (DES), o por
bloqueode la acciónde la testosteronacuyos nivelesseencuentranincrementados
en los tejidos (antiandrógenos>.
Los análogosGnRH mantienenlos nivelesplasmáticosde testosteronaen el
mismorangoque cuandoexistecastración,durantetodala terapia.Los másusados
son: la Leuprolidaque fue el primer análogoGnRH estudiadoen ensayosclínicos
al azar,la Buserelinay la Nafarelina(GLODE y col., 1987; LABRIE y col., 1987;
DE VOOGT y col., 1990).
.Ketoconazol:esun compuestoimidazólicodioxolanosintéticomuy utilizado
comoagenteantifúngico.El desarrollode ginecomastiaen pacientestratadoscon
Ketoconazolcondujoal descubrimientode que la drogaafectaa la biosíntesisde la
52
REVISION SIBLIQOPAFICA
testosterona.Específicamenteinhibe la síntesis del andrógeno,tanto en testículo
como en la glándulaadrenal,por bloqueodel sistemacitocromo P-450, de la liasa
C14-20, responsablede la conversiónde pregnolonaen 17-hidroxiprogesterona,y
del pasode la 17,20dehidroxiprogesteronaa andrógenos.El efectodependede la
dosis y es reversibledespuésdel cesedel tratamiento.La LH plasmáticaaumenta
comoresultadode la disminuciónde la testosterona.
La terapia con Ketoconazol debe limitarse por los efectos colaterales;
además,su capacidadpara mantenerla tasa de testosteronasérica a niveles de
castración,durantemuchotiempo, ha sido cuestionada,debidoa queel bloqueode
la síntesisde andrógenospueda ser parcialmentecontrarrestadocon un aumento
suplementariode los precursoresandrogénicossecundariospor progresivoaumento
en los niveles plasmáticosde LH; no obstante, la disminución puntual de la
testosteronaplasmáticapor la terapiaconKetoconazoly la reversibilidaddel efecto,
hacende ¡a drogaunapreparaciónválidadeusoselectivo.El Ketoconazolno parece
producir respuestasignificativa en pacientescon cáncer de próstataandrógeno
independiente(PONT y col., 1982; JUBELIRERy HOGAN, 1989).
53
REVISTON BIBLIOGRAFICA
- AntiandrógenosPuros:
Antailonistasandrósenoreceptor
:
La Flutamidaes uno de los compuestosmás estudiadosdel grupo de los
antiandrógenosno esteroides,que actúanpor inhibición del enlacede testosterona
y DHT al receptorandrogénico.El metabolitoactivo de la fiutamidaesun derivado
hidroxilado. Los nivelesde testosteronaplasmáticaaumentanduranteel tratamiento,
comoresultadode un incrementode la LH plasmática.La producciónde andrógenos
adrenalesno se ve afectada.
El uso de la Flutamida generalmenteha sido en combinación con la
castraciónmédicao quirúrgica(bloqueototal de andrógenos).En modelosteóricos,
los tratamientos llevados a cabo únicamente con Flutamida, pueden tener
limitacionespor el aumentode testosteronaen plasma.La ginecomastiaseproduce
en una proporción significativa de pacientesdebido a que los efectos de los
estrógenos no son contrarrestados en la mama; los efectos colaterales
gastrointestinalestambiénson comunes.La Flutamidaes eficaz para bloquearel
“fenómenofiare” inducidopor los agonistasGnRH (SCHRODER,1990; SCHULZE
y SENGE, 1990; DI SILVERIO y col., 1990; GAILLAR-MUGUILEWKY, 1991).
El Anandron((RU 23098)es un antiandrógenono esteroideconpropiedades
54
REVISION BIBLIOGRAFIGA
de unión a receptorsemejantesa las de la Flutamida. Igual queesta inducea una
elevaciónen la testosteronaplasmática,comoconsecuenciade un aumentode LH.
En ensayosclínicos el Anandrónmuestraunaeficaciasimilar a la de la Flutamida,
tantosolocomoencombinaciónconunacastraciónmédicao quirúgica(RAYNAUD
y col., 1984).
El Casodex(ICI 176.334)es un nuevo compuestono esteroide, inhibidor
competitivodel receptorandrogénico.Estudiospreliminaressugierenqueesteagente
es activo sólo en tejidos periféricosy no va asociadocon un aumentode LH o
testosterona(FURR, 1989).
Un nuevoantagonistade receptorandrogénicoesteroide,el Win 42596,está
siendosometidoa ensayospreclínicos. Dosis altas de Win 49,596, aumentanla
testosteronaplasmáticaen perrosy en ratas(WINNEKER y col., 1990).
Inhibidoresde la 5 a-reductasa seobservóun síndromede deficienciade
5 cx-reductasa,secundarioa un daño en la producción de DHT en los tejidos
andrógenodependientes.Estasenzimas actúanselectivamentea nivel de los tejidos
dianaevitando la conversiónde testosteronaen DHT. Un inhibidor , el 4MA,
producedisminución de la tasade crecimientode tumoresandrógeno-dependientes
en modelosanimales(ANDRIOLE y col., 1987).
55
REVISION BIBLIOGRAFIGA
La importanciade la 5 a-reductasaen el metabolismode los andrógenosque
intervendríanen el desarrollodel cáncerde próstatano esta claro. Los niveles de
testosteronaen el plasmano se modifican por acciónde los inhibidores de la 5 cx-
reductasa,y las células tumoralespuedencontinuar su desarrollocon un soporte
único de testosterona.
Actualmenteseestánrealizandopruebasclínicaspreliminaresconinhibidores
selectivos de la 5 a-reductasa,como el Finasteride, obteniéndoseresultados
esperanzadores.El uso de compuestosque poseen,tanto propiedadesantagonistas
andrógeno-receptor,como de inhibidoresde 5 cx-reductasa,espreferibleal uso de
inhibidores selectivosde la 5 a-reductasa(NEUMANN, 1987).
- Agentescon mecanismosde acciónmixtos:
Pro2estágenos:varios agentesprogestágenosincluidos el Acetato de
Me~estrol,la HidroxiDro2esteronay la Medroaestone,seutilizan parael tratamiento
delcáncerde próstata.Los progestágenosinhibenla secreciónhipofisariade la LH,
con la consecuentedisminución de testosteronay DHT plasmáticas;además, los
agentes progestagenospresentanuna actividad antagonista de los receptores
androgénicos. El acetatode Megestrol ha producido una respuestaparcial en
algunospacientes,no obstante,apareceun aumentoen la LH y la testosterona
plasmática(GELLER y col,. 1978).
56
REVISION BIBLIOGRáFICA
• Acetatode Ciproterona:es un esteroideantiandrógenoque no solamente
compiteconla testosteronay la DHT por el receptorandrogénico,sino quetambién
poseepropiedadesprogestágenas,glucocorticoideasy de supresiónparcial de LH
(NEUMANN, 1977 y 1987; NEUMANN y col., 1990; GOLDEMBERG, 1991).
- SupresiónAdrenal:
El entusiasmoinicial por la adrenalectomíabilateralparael tratamientodel
carcinomade próstata,estasiendoreconsideradapuessueficaciaesmínima; además
puedeser reemplazadapor unaterapia médica(SHULZE y col., 1987).
Entre los fármacosutilizados en la supresiónde los andrógenosadrenales
tenemos:
• Ketoconazol: coml=anteriormentemencionamos,bloquea el sistema
citocromo P-450, e inhibe de la producciónde andrógenosadrenalesy testiculares
(PONT y col., 1982).
• Aminoglutemida:bloqueael sistemacitocromo P-450
mediantereacciónesde hidroxilación, que incluyen la conversiónde colesterolen
pregnolonay la hidroxilaciónde los esteroidesC21, Cli y CIS. Estadroga,en los
años60, fue usadacomoanticonvulsivante,pero se retiró del mercadopor producir
5-7
REVISION BIBLIOGRáFICA
enalgunospacientesuna insuficienciaadrenal.En el cáncerde próstataes usadaen
combinaciónconHidrocortisona,paraprevenir la insuficienciaadrenal;así, algunos
de los efectosclínicosobservadospuedenseratribuidosmása la hidrocortisonaque
al bloqueode la producciónde andrógenospor las adrenales(PLOWMAN y col.,
1987).
Spironolactona:tambiéninhibe el sistemaenzimáticocitocromoP-450,en
los testículosy en las adrenales,pero no es tan efectivacomola Aminoglutemida
o el Ketoconazolpara inhibir la producciónde andrógenosadrenales(BABA y col.,
1978).
- BloqueoAndrogénico“Total”:
La combinaciónde la castraciónmédica,con la quirúrgicay conla inhibición
de los receptoresandrogénicosperiféricossedenominabloqueoandrogénico“total”.
La castraciónmédico-quirúrgicabloquealos niveles de andrógenosadrenalesque
puedenestimular las células cancerígenasprostáticas(SCHULZE y col., 1987;
NEUMANN y col., 1990; DE VOOGT y col., 1990).Aunque la importanciade los
andrógenos adrenales, es aún controvertida, pruebas clínicas realizadas con
Leuprolida más Flutamida,, demostraronuna ligera ventaja con respecto a
tratamientoscon Leuprolidasola(GELLER y col., 1978; IMAI y col., 1990).
58
REVISION BIBLIOGRAFIGA
11.3. ACETATO DE CIPROTERONA
11,3.1.-FARMACOLOGIA
11.3.1.1.-Introducción
El efecto antiandrogénicodel acetatode ciproterona(AC) fue descubierto
en 1962. Inicialmente, este esteroideera usadocomo progestágeno.Duranteuna
pruebade las propiedadespotencialesde virilidad en ratas, sedescubrióque este
compuestono virilizaba a los fetos femeninos, pero si feminizabaa los fetos
masculinos,con ausenciade todos los gradosde diferenciaciónsexual andrógeno-
dependientes(NEUMANN, 1987>.
Sobre esta base se descubreque el AC puede inhibir la biosíntesisde
andrógenosen los testículosdel feto y la acciónde estosen los órganosdiana. Todo
esto se corroboracon estudios posterioresde Junkmanand Neuman (1964) y
comienzaa usarseclinícamentecomo antiandrógeno(NEUMANN y TÓPERT,
1986; NEUMANN, 1987).
59
REVISION HIBLIOGRAFICA
11.3.1.2.-EstructuraOuímica
:
Químicamenteel AC es un derivadode la hidroxiprogesterona.Su acción
antiandrogénicasedebea la sustitucióndel radical metilo en la posición 1 y 2 de la
moléculadel esteroide.Aunque se han desarrolladoun gran númerode derivados
conpotenciaantiandrogénica,ningunopuedeequipararseal AC (NEUMANN y col.,
1982; NEUMANN, 1987) (FIGURA 11.1).
Los alcoholes libres derivados de la hidroxiprogesteronacarecen de
propiedadesprogestágenas,perotienenactividadantiandrogénica,aunqueconmenos
potenciaque el AC. Esto tambiénocurre con otros derivadosalcohólicosdel AC;
en constraste con ellos, el AC, posee propiedades progestágenas y
antigonadotróficas,es un antiandrógenopuro, igual que los antiandrógenosno
esteroides(GAILLARD, 1991; IMAI, 1990).
Inicialmente, las propiedadesprogestágenasy antigonadotróficasdel AC
fueron consideradascomo una desventajapara el uso de un antiandrógeno;
posteriormenteesta opinión fue cambiando,al demostrarseque este espectrode
actividadeseran ventajosasen muchasde las indicacionesdel AC (NEUMANN y
TOPERT, 1986; Mc CONNELL, 1991).
60
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REVISTaN BTBLTOGRAFICA
11.3.1.3.-Mecanismode Acción
:
El control neuroendocrino,de la función gonadal, lo observaremosen la
FIGURA 11.2.
La síntesis de testosteronapor las células de Leydig del testículo es
estimuladapor LH de la hipófisis, y el 90 ~ o másde la DHT es sintetizadaen la
próstata; el resto de la testosteronaes aportadaen pequeñascantidadespor las
glándulasadrenalesy los andrógenosde la dieta. La testosteronasérica, por un
sistemade retroalimentaciónnegativa,regulaa través del hipotálamo,que segrega
GnRH, la liberaciónde LH (FIGURA 11.2).
La actividad predominantedel AC es la inhibición de los andrógenos,
principalmentetestosteronay DHT, por bloqueocompetitivo de sus receptores,a
nivel de las célulasdiana (BROWN y col., 1981; NEUMANN y col., 1982).
Despuésde administrarestefármaco,disminuyefuertementelaconcentración
del DHT en los receptoresnuclearesandrogénicos.El AC no tiene efectosobrela
conversiónde testosteronaen DHT por la 5 a-reductasa,no obstante,el bloqueode
la DHT producea nivel nuclearla inhibición de la síntesisde ADN y ARN, que
conducea unareducciónde la síntesisde proteínas,un aumentode la autofagitación
y muertecelular (GOLDENBERGy BRUCHOVSKY, 1991).En cánidosy roedores
62
REVISION BIBLIOGRáFICA
de experimentación,el AC da lugar a la pérdidatotal de la actividad secretorade
la próstatay una reducciónde su tejido.
Estudioshistológicosde estetejidoprocedentedeperrostratados,demuestran
la desaparicióncasi completadel epitelio con un incrementoaparente de los
componentesestromales(NEUMANN y col., 1985).
El AC, por su actividad semejantea la progesterona,producetambiénla
inhibición de la retroalimentaciónnegativahipotálamo-hipofisaria.El resultadoes
una supresiónde GnRH; consecuentementedisminuiría la secreciónde LH y la
producciónde andrógenospor los testículos.
64
REVISION BIBLIOGRAB’IGA
11.3.1.4.Farmacocinética
:
Existe unagran diferenciaen la cinéticade este fármacoentre las distintas
especiesanimalesy el hombre(DOSTERBERGy col. 1981,DUSTERBERG,1984).
La absorciónen el tracto gastrointestinales completa,si se la utiliza en
suspensiónmicrocristalina.La absorciónparenteral(subcutáneae intramuscular),
tambiénes muy buenaen soluciónoleosa,prolongandoseel tiempo de absorción.
La biodisponibilidad es muy alta, porque el AC es una sustanciamuy
lipofílica; es de casi el 100 % en el hombre(BECKER y col., 1980); lo mismo
ocurreen el mono Rhesus(91%) y en la rata (100%), siendoen el perro beagleun
poco másbaja, de alrededordel 75% (DUSTERBERG, 1984).
La metabolizacióny la excreción es muy lenta. En el hombre la semivida
(despuésde la administraciónoral) es de 48±9.6horas (HUMPEL y col., 1977ay
1977b), en la rata y el mono Rhesusde 25 ±6.4horasy en el perro beaglede 109
+ 42 horas;en estastresúltimasespeciestrásadministraciónIV (DUSTERBERG
y col., 1981). La excreciónse realizafundamentalmenteen las hecesy en la orina.
65
REVISION BISLIOGRAFIGA
11.3.1.5.-ProniedadesFarmnacoíó2icas
:
- Propiedades antiandrogénicasy sus efectossobre la diferenciación sexual de
los machos:
Conpocasexcepciones,el AC inhibe la acciónexógenay endógenade todos
los receptoresandrogénicosen los distintos órganos, incluyendola próstata,las
vesículasseminales,los testículosy los vasosdeferentes;antagonizaen menorgrado
los efectos sexo-específicosde los andrógenos,por ejemplo la osificación del
cartílagoepifisario, las funcionesde las glándulassebaceasy la densidadde la piel.
Ademásinhibe los procesosandrógeno-dependientesde la diferenciaciónsexualen
machos(NEUMANN, 1977 y 1987).
El efecto feminizante de los fetos masculinoses un riesgo en hembras
preñadasque son tratadas con contraceptivosque contienen AC (MURAD y
HAYNES, 1982).
Dosisaltas de antiandrógenosdurantela gestacióndan comoresultadouna
forma muy particular de intersexualidad.Las gonadasestánpresentespero no el
tractosexual internoy susglándulasaccesorias(próstata,vesículasseminales,etc...)
(BHIWGADE y col. 1990). Los genitales externos sufren una diferenciación
femenina, incluyendo una rudimentaria vagina. Esta intersexualidad ocurre
66
REVISION BIBTJTQGRAFYtCA
espontáneamenteen hombresy esconocida como“feminizacióntesticular” o “mujer
peluda” (MURAD y col., 1982; NEUMANN, 1987>.
- PropiedadesProgestágenas:
La potenciaprogestágenadel AC es importanteclinicamentetanto en hembras
comoen machosno orquiectomizados.
El AC es uno de los progestágenosmásefectivosdel grupode los derivados
de la hidroxiprogesteronay tiene los mismos efectos que la progesterona
(NEUMANN, 1987; SCIARRA y col., 1990).
En el siguiente cuadro se muestranalgunosde los efectosprogestágenos
típicos del AC en distintasespeciesanimales(NEUMANN, 1987):
TEST EFECTO
¡ Test de Clauberg (conejo) Transformación endometrial
Test de Clauberg <cánido) Transformación endometrial
Mantenimiento de la preñez Mantiene la preñez en
en ratas castradas combinación con estrógenas
Retraso de la implantación (conejo> Implantación retrasadaParto (rata) Inhibición del parto
Inducción permanente al estro (rata) Interrupción permanente del estro 1
67
REVISION BIBLIOGRAFIGA
En el testde Claubergse observóun efectodepoten el AC administradopor
vía subcutánea.Estohay quetenerloen cuentaen las terapiascondosisaltas,en los
casosde hirsutismoy en otrasaplicacionesclínicas de estecompuesto.
- PropiedadesAntiestrogénicas:
En distintaspuebasfarmacológicassedemuestranlosefectosantiestrogénicos
del AC, que estánrelacionadoscon sus propiedadesprogestacionales.
Producesupresióndel estropermanenteen ratasinducidoexperimentalmente
con estrógenos.En ratonascastradas,los estrógenosreducenel contenidode ácido
siálico en vagina; estos cambiosson comparablesa la secrecióncervical bajo la
influencia de los estrógenos.La administraciónde progestágenosproduce una
mucificacióndel epitelio vaginaly un incrementoen el contenidode ácido siálico,
como consecuenciadel aumentode la mucina. Esto también se ha demostrado
experimentalmentecon el AC (NEUMANN, 1987).
- PropiedadesAntigonadotróficas:
Al igual queotrosprogestágenos,el AC tieneefectosantigonadotróficos,más
notablesen hembrasqueen machos,pero con dosis máselevadas.
66
REVISION BIBLIOGRáFICA
La inhibición de la ovulación, es un claro ejemplo de la actividad
antigonadotrófica (SCIARRA y col., 1990; WILLIANS, 1990).
- PropiedadesGlucocorticoideas:
El AC y otros compuestosesteroides, tienen propiedades semejantesa los
glucocorticoides (NEUMANN, 1987), por ejemplo, el peso de las adrenales y del
timo disminuyenen ratas y en otras especiesde animales de laboratorio. La atrofia
adrenal es debida a reducción de la hormona adrenocorticotropa (ACTH) dando
comoresultadouna disminuciónde la síntesisy secreciónde glucocorticoides;por
otra parte, no tiene propiedades antiinflamatorias (test del granuloma), ni
antialérgicas(test de eosinófilos). Todo esto, demuestraque el AC y otros
antiandrógenos similares, solamente presentan algunas propiedades de los
glucocorticoides,pero no se apreciansignosde insuficienciaadrenalsecundaria.
Clinicamentehay quetenerencuentaestosefectosglucocorticoideosdel AC,
en los tratamientoscon dosisaltasquese aplicanen los casosde pubertadprecoz
(NEUMANN, 1977;, GIRARD y col., 1978ay 1978b).
69
REVISTaN BIBLIOGRáFICA
- Importancia del espectro de actividades endocrinas para el uso clínico en
machos:
Los antiandrógenos puros, que no tienen actividad progestágenay
antigonadotrófica,comola Nilutamiday el Flutamide,ejercenunaretroalimentación
negativasobreel hipotálamo;estoproduceun incrementode gonadotropinaspor la
hipófisis (LII y FSH) y en consecuenciaun aumentode la biosíntesisde andrógenos,
que suprimirían total o parcialmente el efecto de los antiandrógenospuros
mencionados.Por eso se buscanantiandrógenoscon actividadesendocrinasmás
amplias,esdecir, progestagenay antigonadotrófica,que bloqueenal eje hipotálamo-
hipofisario, como el AC. No obstante para que se produzca el efecto
antigonadotróficohacen falta dosis altas tanto en animales como en hombres
(KNUTH y col., 1984).
Los antiandrógenosque presentan también actividad progestágenay
antigonadotróficason los másapropiadospara usarseen tratamientossistémicosy
de largaduraciónen machosno castrados(NEUMANN, 1987; SCHRODER,1990;
GAILLARD y MOGUILEWKY, 1991).
‘70
REVISTON BIBLIOGRAFIGA
11.3.2.-USOS CLINICOS DEL ACETATO DE CIIPROTERONA
11.3.2.1.-Problemasde Próstata
:
- Cáncerde Próstata:
Aunqueno seconocela etiologíadel cáncerde próstata,en trabajos iniciales
sedescubrió,queel desarrollode los carcinomasandrógenodependientesseproduce
en períodosmás cortosde tiempo. Privandode andrógenosa los pacientesocurría
un alargamientoen el proceso;por todoello esel principal tratamientode metástasis
de cáncerde próstata inoperable; cerca del 70% de los pacientessufrirían una
subjetivamejoríade los síntomas.La orquiectomiay la terapia con estrógenosson
el procedimientoclásicode privación de andrógenos(GELLER y col., 1978).
Teóricamentela terapia con antiandrógenossería mejor que los métodos
clásicosde privaciónde andrógenos,porque potencialmenteda lugar a una menor
cantidadde efectossecundariosen comparacióncon los estrógenosy elimina los
efectosde los andrógenosadrenales(GELLER y ALBERT, 1985; NEUMANN,
1987; STUDER y MUNCH, 1990; ROSEMBERGy VON ESCHENBACH, 1990;
GOLDEMBERG, 1991).
71
REVISION BIBLIOGRáFICA
Los efectosdel AC sobreunapróstatanormalson semejantesa los de una
castraciónquirúrgica.La actividadde secrecióny proliferacióncesacompletamente.
Las característicasde las enzimas (por ejemplo la ácido fosfatasa) y los
constituyentesde la próstata(zinc) no muestrancambioalguno (DALESIO, 1990;
STUDER y MUNCH, 1990).
Algunos autores recomiendancombinar un agonista del GnRH con un
antiandrógeno(RAYNAUD y col., 1984; NEUMANN y TOPERT, 1986; IMAI y
col., 1990; WILLIANS, 1990; DE VOOGT y col., 1990). La razónde esto es la
siguiente: con la castraciónquímicacon agonistasde GnRH (por aumentode LH
hasta refracciónde la hipófisis) suprimimos los andrógenostesticularesy con el
antiandrógenoeliminamoslos restantesandrógenosproducidospor las adrenales;no
obstante,no estademostradosi los andrógenosadrenales(eliminadoslosandrógenos
testiculares>puedencausar progresióndel tumor (GELLER y ALBERT, 1985;
MIJAIN y col., 1990). Es importanteconsiderarsi es mejor el uso del AC o de un
antiandrógenopuro del tipo de la Flutamida para la terapia combinada (DI
SILVERIO y col., 1990;, SCHULZE y SENGE, 1990; GAILLARD-
MOGUILEWSKY, 1991).
Experimentalmenteen ratas está demostradoque en la fase inicial del
tratamiento se produceun gran incremento de la concentraciónde LH y de
testosteronacuandoaplicamosuna terapiacombinadade análagosde GnRH con un
72
REVISION BIBLIOGRáFICA
antiandrógenopuro, pero no cuando lo combinamoscon AC, por la actividad
progestágena/antigonadotróficade este último fármaco(NEUMANN y col., 1985;
DI SILVERIO y col., 1990; DE VOOGT y col., 1990).
Esto fue demostradoen una experienciacon pacientes voluntarios. El
incrementoinicial de LH y testosteronadespuésdel tratamientocon análogosde
GnRH es pequeñocuandoel individuo espretratadoduranteunasemanacon AC
(GOLDEMBERG, 1991).
Estosefectosde los antiandrógenospurossobrela LH y la testosteronaduran
3 semanascuandoel tratamientosecombinacon análogosde la GnRH; pasadoeste
tiempocomienzala regulacióndel receptorGnRHy los antiandrógenospurosno son
capacesde prolongar la estimulaciónde la secreción de LH y testosterona.Así en
principio un tratamientocon un antiandrógenopuro del tipo de la Flutamiday un
antiandrógenodel tipo del AC, en combinacióncon un agonistadel GnRH sería
equivalente.Enel casode un agonistaGnRHcombinadoconun antiandrógenopuro,
llevaríamástiempoaparentementela supresióncompletade los andrógenos,porque
los niveles de LII y testosteronaen el suero inicialmente estaríanmuy elevados
(LABRIE y col., 1987; SHULZE y SENGE, 1990: DI SILVERIO y col., 1990).
El primercasoregistradodel uso del AC, fue publicadoporScotty Schirmer
(NEUMANN, 1987)). Ellos describenel efectodel AC enun pacienteconun cáncer
.73
REVISION BIBLIOGRAFICA
de próstatacon metástasisy muchodolor. El dolor desaparecey el pacienterecupera
peso.
Motivadosporestarespuesta,Scotty Schirmerrealizarónun estudiocondiez
pacientes;ningunofue tratadoconhormonoterapiani orquiectomizado.Cinco dieron
una buena respuestay en tres hubo un fracaso total. Perocon una terapia con
estrógenostampocohuborespuestaen estosúltimospacientes.Gelter (NEUMANN,
1987) realizó estudiossimilaresusandodosis altasde 250 mg de AC. En uno de
estosestudiosnuevede oncepacientespresentaronunarespuestafavorable,objetiva,
con descensodel dolor, aumentodel apetito y unamejoríageneral(NEUMANN,
1987; RASMUSSEN, 1990>.
Despuésde revisar otros estudioscomo ]os anterioresdondese evalúala
efectividad del AC y se comparacon la terapia con estrógenos,los resultados
confirman que el tratamientoconestrógenoses tan efectivocomocon AC, pero la
diferencia radica en que el AC no tiene tantos efectos secundarioscomo los
estrógenos; por ejemplo, la ginecomastiao los problemas cardiovasculares
(STUDER y MUNCH, 1990; ROSEMBEURG y VON ESCHENBACH, 1990;
GOLDEMBERG, 1990).
El AC es una terapia muy útil en el cáncerde próstataavanzado,y una
alternativataneficazcomootrosmétodosde supresiónde andrógenos,conla ventaja
74
REVISION EISLIOCRAFICA
de dar lugar a menosefectossecundarios(NEUMANN, 1987; DALESIO, 1990;
EATON y GRIFFITHS, 1990; NEUMANN y col., 1990; KOELOWSKY y col.,
1991).
- Hiperpíasiaprostáticabenigna:
Estudiospiloto en un pequeñonúmerode pacientesdemostrarónque el AC
esposible quemejoreel flujo urinario. El efectopareceser debido a la inhibición
de componentesdel epitelio del la hiperpíasiabenignade próstata.Estaenfermedad
pareceprimariamentede origenestromal;la terapiacon antiandrógenosunicamente,
no seriamuy eficaz. Seríamejor unacombinaciónde AC y un antiestrógeno,porque
el crecimientoestromalse deberíaa los estrógenosy el epitelial a los andrógenos
(NEUMANN, 1987; Mc CONNELL, 1990; SIKES y col., 1990).
75
REVISION BIBLIOGRáFICA
11.3.2.2.-Alteracionescutáneasinducidaspor andrósenos
:
- Acné y seborreaoleosa:
Seha demostradoen hombrey en variasespeciesanimalescomorata,ratón,
hamsterdoradoy conejo,que los andrógenosestimulanel desarrolloy la actividad
de las glándulassebáceas.El númeroy tamañode estasglándulasdecrecendespues
de la castración(NEUMANN, 1987).
Antes de comenzar la pubertad, las glándulas sebáceaspresentanpoco
desarrolloy pequeñadiferenciación.Su tamañoy actividadseincrementansolamente
durantela pubertad,cuandose aumentala producciónde andrógenosque ocurre
tanto en machoscomo en hembras (AMER y col., 1985; CUNLIFFE, 1985;
NEUMANN, 1987).
No hay dudade que el incrementode la actividadde las glándulassebáceas
es una causa primaria del acné y de la seborrea. La cornificación del mfra-
infundíbulo que precede a la formación de la espinilla es consecuenciadel
incrementodel sebo. La infecciónbacterianadel acnées el último eslabónde esta
cadenade eventos(POCHI y STRAUSS, 1974; PLEWIG, t974). La cornificación
del mfra-infundíbulo produce alteracionesen el drenaje de la secreción y la
formación de espinillas sería andrógeno-dependiente(AMER y col., 1985;
76
REVISTON BIBLIOGRAFICA
CUNLIFFE, 1985).
Es sabidoque el contenido de lípidos de la piel está incrementadoen el
pacienteconacné. Es altamentesignificativala correlaciónexistenteen ambossexos
entrelos nivelesde secreciónsebáceay la gravedaddel acné. El incrementoen el
metabolismode los andrógenosen piel especialmentepor el aumentode la enzima
Sa-reductasa,también influye en el desarrollodel acné. (LUDERSCHMIDT y
PLEWIG, 1977).
En basea estos conocimientos,parecenatural el empleode antiandrógenos
en el tratamiento de esta enfermedad.El efecto inhibitorio del AC sobre las
glándulas sebáceasha sido demostradoen distintas experienciasusando varias
especiesanimalescomoratón, rata, hamster,conejo y tambiénen hombrey mujer
(HAMMERSTEIN, 1975; CUNLIFFE, 1985; AMER y col., 1985, GREENWOOD
y col., 1985).
El efectoinhibitorio del AC sobrelas glándulassebáceasha sidoconfirmado
en el hombre; en primer lugar se midió la secreción sebáceaen machos
hipersexualestratadoscon este fármaco(BURTON y col., 1973) y en voluntarios
sanos(NEUMANN, 1987).Enesteestudio,seadministraron100 mg de AC por día
por vía oral durante20 días; la tasade secreciónsebáceadisminuyóun 60%.
77
REVISION EIBLIOGRAFTGA
En basea los estudiosrealizadosexperimentaly clínicamente,sedesarrolló
unapreparaciónconpropiedadesanti-acnéy contraceptivasimultaneamente,porque
el AC (antiandrógeno,progestágeno,antigonadotrófico)demostróser una terapia
eficaz paraevitar la concepción(ERKOLA y col., 1990).
Hay unapreparaciónclínica que contiene2 mg de AC en combinacióncon
50 ~¿gde etinil-estradiol (DIANE), que se utiliza con fines anticonceptivosen
problemasde ovariospoliquisticos,acnéy en androgenizaciónde mujeres,con muy
buenosresultados(HAMMERSTEIN, 1980; RAJ y col., 1982; AYDINLIK, 1987;
VERMEULEN y RUBENS, 1988).Parareducirlos efectoscolateralessedisminuyó
la dosificacióndel componenteestrogénicoy aparecióun nuevoproductocon 35 ~g
de etinil-estradiol (DIANE 35) (FALSETTI y col., 1986; AYDINLIK, 1987;
PREVELIC y col., 1989 y 1990).
- Hirsutismoy Alopecia Androgénica:
En variosestudiosse ha demostradoque existeunaelevadaconcentraciónde
andrógenosen suero de mujeres con hirsutismo idiopático (NIELSEN, 1985;
PEDERSENy col., 1985; RABOCH y col., 1990; STULBERG y CARUTHERS,
1990; MARCONDESy col., 1990;SCHINDLER, 1990). Los andrógenossonparte
activa en la etiología del hirsutismo, entoncesparecerazonableasumir que los
antiandrógenosseríanadecuadosparala terapiasintomáticade estaenfermedady de
78
REVISION BIBLIOGRAFIGA
la alopeciaandrogénica(NEUMANN, 1987). La presenciade andrógenosy una
apropiadadisposición genéticason necesariaspara el desarrollode la alopecia
androgénica(RAMSAY y RUSHTON, 1990).
79
REVISION BIBLIOGRAFIGA
11.3.2.3.-PubertadPrecoz
La etiología de esta enfermedades desconocida. La pubertad precoz
idiopáticaen humanoscomienzaantesde los 6 añosen niñasy 8 añosen niños. Dos
problemaspredominanen la terapia de estaenfermedad;por un lado, la madurez
sexual a tan poca edad dificulta la integración social, y por otro produceuna
reducciónfinal de la estaturade estos chicos. Aunque inicialmentesu tamañoes
mayor que el de los niños de su mismaedad,mástardeno llegan a sobrepasarlos
150 cm de altura(CHAUSSAIN y col., 1988; KHANDEKAR y DASH, 1990).
La pubertadprecozha sido retrasadacon tratamientode AC, al mismo
tiempo, el efectoestimulantede los andrógenossobrela osificación de los cartílagos
epifisarios es inhibido y por tanto la fase de desarrollo del hueso se prolonga
(NEUMANN, 1977).
Bajo el tratamientoconAC , el desarrolloprematurosomáticoy psicosexual
sesuprimepor el efectoantiandrogénicoperiféricoy antigonadotróficocentralde la
droga. Decreceel grado de desarrolloy la maduracióndel hueso, mejorandoel
pronósticode la enfermedad.También previeneel crecimientodel vello axilar y
púbico (TANAKA y col., 1990; KHANDEKAR y DASH, 1990).
En niñas, disminuyeel desarrollomamario, no se producela cornificación
80
REVISTON BIBLIOGRáFICA
del epitelio vaginal, ni la aparicióndel períodomenstrual.En niños, disminuye el
tamañode los testículos y del pene. La polución nocturnay la masturbación se
suspenden(GIRARD y col., 1978b; HELGE y KORTH-SCHUZ, 1980; TANAKA
y col., 1990).
Engeneral,tantoniñascomoniñosbajo tratamiento,tienenpocasdificultades
de integraciónsocial, puedenconcentrarsey rendir normalmenteen la escuela.
El tratamiento tiene mayores posibilidades de éxito, cuanto más
tempranamentese instaure;suduraciónpuedeser de variosaños(GIRARD y col.,
1978b; HELGE y KORTH-SCHUZ, 1980).
Durantela terapia, sesuprimela función gonadal,es inhibida la ovulación
y la espermatogénesis.La toleranciaes buena. No se han registradoalteraciones
serias en el metabolismode los lípidos y carbohidratos.Los efectossecundarios
pueden ser: obesidad (por aumento del apetito) y supresión de la función
adrenocortical,que es atribuible a su acciónglucocorticoidea(inhibición de la
secreciónde ACTH); no obstante,la insuficienciaadrenocorticalno seha observado
(KHANDEKAR y DASH, 1990).
81
REVISION BIBLIOCRAFICA
11.3.2.4.- Desordenessexualesenmachos
Mientras el AC no suprimela libido en animalesde laboratoriocomorata,
ratón y hamster, si lo hace en otras especies, tales como cánidos, cerdos y
probablementeen hombre.
El AC induce a la perdidade la libido y de la erección, seguidospor la
imposibilidadde alcanzarel orgasmo,despuésde 14 díasde tratamiento(100 - 200
mg diarios vía oral ó 300 mg semanalesvía intramuscular). Al suprimir el
tratamientoel efecto es reversible. Esto puede ser descrito como una castración
químicareversible.El aspectode la reversibilidades importantedesdeel punto de
vista de la reinserciónsocial del individuo.
Cuando la dosis es reducida (en general a 50 mg diarios vía oral), las
relacionessexualescon la pareja pueden ser factibles. La terapia disminuye la
hipersexualidadagresivay normalizalas relacionesentrela pareja. El 75 - 80 % de
los pacientesrespondenal tratamiento.El pronósticoes desfavorableen individuos
conproblemasen la conduccióncerebro-espinal.En los pacientesqueno responden
tampocoesaconsejablela castraciónquirúgica.
El AC en general es bien tolerado; como efectos secundariospueden
aparecer:indiferencia,depresióny ginecomastia(NEUMANN, 1987).
82
III.- MATERIAL Y METODOS
MATERIAL Y NIETODOS
III.- MATERIAL Y METODOS
111.1.- ESTUDIO CRONOTOXICOLOGICO
111.1.1.-MAThRIAL.
- Animales
.
utilizaron un total de 30 ratones (Mus musculus) machos,
homocigóticos, CS7BL/6, cuyos pesos oscilaron entre 22,8 - 24,9 gramos.
EstudioCronobiológico:se utilizaron un total de 70 ratones (Musmusculus),
machos homocigóticos CS7BL/6, cuyos pesos oscilaron entre 23,2 - 27,9 gramos.
- Alotamientoy Alimentación
.
- Jaulasestandarpararatones
- CámarasCronobiológicascon programadoresde períodosluz-oscuridad,
temperaturay humedad.
- PiensoDieta Rata/RatónRMM (INTERFAUNA IBERICA>.
DL50: se
84
MATERIAL Y METODOS
- Producto
.
Acetato de Ciproterona, suministrado como tal producto puro por el
laboratorio Schering España S.A.: vehiculizado para su administración en Propilen-
glicol (PANREAC).
- Instrumentaly Material Fun2ible
.
- Granatario(SAUTER MM 160).
- Balanza(METFER AE 160).
- Jeringuillasy Agujasde insulinadesechables.
- Algodón hidrófilo.
85
MATERIAL Y N~ETODOS
111.1.2.-METODO
- Cálculode la DL0
.
Se utilizaron 30 ratones, con las caracterÍsticas mencionadas,que se
distribuyeron en 6 lotes (5 animales/lote),de los cuales 5 se utilizaron como
problema y uno como control.
El Acetato de Ciproteronafue ensayadoa unas dosis de 800, 1000, 1100 y
1200 mg/kg P.V., administradopor vía intraperitoneal a la concentración dc 100
mg/ml. Al lote control se le inyectó Propilenglicol por vía intraperitoneal a dosis
de 5 ml/kg P.V. Los productos eranadministradoa las 10 horas y el período de
observación fue de 72 horas.
El método utilizado para
Wilcoxon (1949>, modificado con
(STEEL y col. 1960). Los datos
“PharmacologicCalculationSystem
el cálculo de la DL50 fue el de Litchfield y
la aplicacióndel ajuste por mínimoscuadrados
se procesaroncon el programa informático
4.0” paraordenadorcompatible.
86
MATERIAL Y METODOS
- EstudioCronobioló2ico
.
Acondicionamientode los animales:
Seutilizaron70 ratones,conlas característicasmencionadas,distribuidosen
7 lotes (10 animales/lote),de los cuales6 seutilizaroncomoproblemay uno como
control.
Los animales de los lotes problema fueron alojados en las cámaras
cronobiológicas,bajo condicionesestandarizadasde temperatura(240±1 “C) y de
humedad(50 a 55 %).
Las mismasestabansincronizadasen períodosde luz-oscuridad(LO) de 12
horas (PHILIPPENS,1976), existiendoun desfasede 4 horas entreunacámaray
la siguiente (TABLA 111.1). Al lote control se le manteníaen jaula, en idénticas
condicionesambientalesy ritmos de luz del animalario.
Los animalesde los lotes problemafueron alojadosen las cámarasdurante
los 15 díaspreviosa la prueba,paravariar y sincronizarsu reloj biológico, y asíasí
tener los animalesa “diferentes horas” en un mismo instante . La alimentacióny
bebidaseadministraban“ad libitum”.
87
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oo
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oC
MATERIAL Y METODOS
Administraciónde la DL50:
La DL50 fue administradapor vía intraperitoneal(1023 mg/kg P.V.), a las
10 horas y el períodode observaciónfue de 72 horas.
Análisis deDatos:
Los resultadosobtenidosseanalizaronporel métodoCOSINOR(HALBERG,
1969),para suestudiocronotoxicológico.
89
MATERIAL Y METODOS
111.2.-ESTUDIO CRONOFARMACOCINETICO
111.2.1.-MATERIAL
- Animales
.
Seutilizaron36 conejosde razaBlancoGiganteCaliforniano,conunospesos
comprendidosentre1700 y 2200 gramos.
- Alojamiento y Alimentación
.
- Cámaras Cronobiológicasunidas a torres de jaulas de conejos, con
programadoresde períodosluz-oscuridad,de temperaturay humedad.
- PiensoDieta ConejoCRB (INTERFAUNA IBERICA).
- Productos
.
- Acetato de Ciproterona, suministradocomo tal producto puro por el
laboratorio SCHERING ESPAÑA S.A.; vehiculizado para su administración en
Propilenglicol (PANREAC).
- 17 uiv-Hidroxiprogesterona(STERALOIDS,INC.).
- Heparina5% (LEO).
90
MATERIAL Y METODOS
- Instrumental
.
alta resolución (High PerformanceLiquid- Cromatógrafo líquido de
chromatography- HPLC):
BombaKONTRON 420.
DetectorKONTON 742.
IntegradorSPECTRA-PHYSICS.
- ColumnaCIS SPHERI-5RP-85 Micron 250 x 4,6 mm
(APPLIED-BIOSYSTEMS).
- PrecolumnaRP 18 (APPLIED-BIOSYSTEMS).
- Ordenador(IBM PS/1).
- Impresora(HEWLETI?
- Centrffuga(HERAEUS).
- Agitador (GRI-CEL).
- MicropipetasGILSON (1
- Concentradorde Muestras
- Congelador(ARISTON).
- Equipo de filtración MILIPORE.
- EspectofotómetroBECKMAN, DU.850.
- Ceposde Conejos.
PACKARD, LaserJet4L).
00, 200 Y 1000gL).
(TECHNE DB-3A).
92.
MATERIAL Y METODOS
- Reactivosy Funaibles
.
- CánulasEndovenosas(TERUMO 22gx1”).
- Agujasy Jeringasde 1 y 5 ml.
- Filtros de membranade MILLIPORE G.V. 0,22~m.
- Algodón Hidrófilo.
- Acetatode Etilo (PANREAC).
- Acetonitrilo calidad HPLC (PANREAC).
- Agua ultrapura.
- Metanol calidadHPLC (PANREAC).
- Hidróxido de Sodio 2,5 M (PANREAC).
- Helio (ARGON pureza4,8 %).
- Nitrógeno(ARGON pureza40%).
92
MATERIAL Y METODOS
111.2.2.-METODO
- Acondicionamientode los Animales
.
Se utilizaron 6 lotes (6 animales/lote)de conejos alojados en cámaras
cronobiológicas,bajo las condicionesestandarizadasde temperatura(240±1 0C) y
humedad(50 a 55 %).
Las mismasestabansincronizadasen períodosde luz-oscuridad(LO) de 12
horas (PHILIPPENS, 1976), con un desfasede 4 horas entre una cámaray la
siguiente(TABLA II. 1).
Los animalesse introducíanen las cámarasen los 15 díaspreviosala prueba
conobjetode variar su reloj biológico y de estaforma facilitar la tomade muestras
a “diferentes horas” en un mismo instante. La alimentación y bebida se
administraban“ad libitum”.
Antes de la realización de cada prueba se depilaban las orejas de los
animales,dejandovisibles las venasmarginales,se colocabaun catéter,fijado con
esparadrapoen unade ellas, y se dejabala otra oreja para la administracióndel
Acetatode Ciproterona.
93
MATERIAL Y METODOS
111.2.2.1.-Administracióndel fármacoy recosidade muestras
Seadministróunadosisde 4 mg/kg deacetatode ciproterona,apartir de una
solución de propilenglicolcon una concentraciónde 10 mg/ml.
Los volumenesde solución administradaa los animalesoscilabanentre0,6
y 0,8 mí, en función de los pesosde los mismos,ya que separtía siemprede una
misma solución madre.
La administraciónse realizabaa las 10 horas, por la vena marginal de la
oreja, de forma rápida(<1 mm) y la obtenciónde muestrasde sangreseefectuaba
a través del catétercolocadoen la venamarginal de la orejaopuesta.
Las muestrasde sangre(1 mí) se tomabanen jeringas heparinizadasa los
siguientes tiempos post-administración:5, 15, 30, 60, 90, 120, 180, 240 y 360
minutos. Posteriormente,la sangresecentrifugabaa 1000 g, durante10 minutos,
parasepararel plasma,queeramantenidoa -20”C hastasuanálisis(< 15 días). Las
muestrasdeplasmaconservadassedescongelabanlentamenteatemperaturaambiente
(25 0C) paraseranalizadas.
Debido a diferentesproblemasdurantela administracióny extracción de
muestras,se eligieron los datos de 5 animalespor lote para la comparaciónde
94
MATERIAL Y METODOS
resultados,exceptoen el lote 6 (horasde luz: 20 a 8h) dondesólo seaprovecharon
los datosde 4 animales.
95
MATERIAL Y METODOS
111.2.2.2.-Análisis de las Muestras
.
Preparaciónde las Muestras
.
Para detectarel Acetato de Ciproteronaen plasmase utilizó un método
específicode cromatografíalíquida de altaresolución(HPLC), descritopor Cannell
y col. (1981) y modificadopor nosotros.
A 0,25 ml de plasmase le añadían50 gl de una solución de 17 a-
Hidroxiprogesterona(75 gg/ml) como patrón interno (P.I.), 0,25 ml de Hidróxido
de Sodio (0,25 M) y 5 ml de Acetato de Etilo. Se agitaba la mezcladurante 5
minutosy sesometíaa centrifugacióndurante5 minutosa 1000g. Seextraían4 ml
de sobrenadantey seevaporabana 400C en atmósferade nitrógeno. Las muestras
desecadasse resconstituianen 0,20 ml de fase móvil (Acetonitrilo/Agua, 60/40)y
seprocedíaa la inyecciónen el cromatógrafo.
96
MATERIAL Y METODOS
AnálisisCromato2ráfico
.
Las muestrasfueronanalizadasen el HPLC, bajo las siguientescondiciones
de trabajo:
- ColumnaCiS SPHERI-5RP-8 5 Micron 250 x 4,6 mm.
- Elución Isocrática.
- FaseMóvil : acetonitrilo:agua(60:40).
- Flujo :1,5 mí/mm..
- Longitudde onda: 283 nm.
- Atenuación:32.
- Desgasificacióncon helio.
La longitudde ondase eligió sometiendoaespectofotometriaunamuestrade
Acetatode Ciproteronasolubilizadaen metanol.
La fasemóvil erapreparadadiariamentey sometidaa filtración en el equipo
MILLIPORE con un filtro G.V. 0,22¡im
En estascondicionesexperimentalesse estudia:
- Límite de detecciónalcanzadoen el procesocromatográficoparael Acetato
97
MATERIAL Y METODOS
de Ciproterona,que secalculacon un margende confianzade 3 vecesla desviación
típica de las soluciones patrónblancas,segúnla fórmula:
LD=KDT/m
donde:
LD: límite de detección(concentraciónmínima
detectable).
K: margende seguridad(3)
DT: desviacióntípica de la
m: pendientede la rectade
soluciónpatrón blanca.
regresión.
- Linealidad:
Acetatode Ciproterona;el estudiosehizo en un rangode concentraciones
que oscilabanentre0,1 y 10 hg/ml de metanol(n=36) (K=6).
17 c~-hidróxiprogesterona(P.I.); el rango de concentracionesutilizados
oscilabaentre 1 y 100 hg/ml de metanol (n=24) (K=4).
Los datosde concentracionesy áreasbajo la curva(ABC) seajustarona una
rectapor regresiónlineal.
- Recuperabilidad:secalculóa partir de muestrasde plasmade conejoa las
queseañadíaun pequeñovolumen(< 1 % de volumentotal) de soluciónconcentrada
98
MATERIAL Y METODOS
de Acetatode Ciproterona,paraconseguirconcentracionesen plasmade 0,1; 1; 2
y 5 pg/ml (n=24), y de 17a-hidróxiprogesterona(Pi.), para conseguir
concentracionesen plasmade 10, 30 y 50 ng/ml (n=24). Las muestrasse sometían
al procedimiento analítico mencionado. Los valores obtenidos de ABC se
comparabancon los obtenidosen soluciónmetanólicay se calculabael porcentaje
de recuperación. Las medias de las 6 recuperacionesobtenidas con cada
concentraciónsesometierona un test de comparaciónde mediasmuestrales.
- Reproducibilidad del ABC cromatográfica: se estudió realizando 6
preparacionesdecadaunade las concentracioneselegidas,2 decadadía, parapoder
evaluarlas variacionesinterdía; asímismo, los resultadossesometierona un test de
comparaciónde mediasmuestrales.
- Recta de Calibrado: se elaboróa partir del cocienteentre el ABC del
Acetato de Ciproterona y el P.I. (17 a-hidroxiprogesterona), frente a
concentracionesde Acetatode Ciproteronaen plasma.
Los valoresutilizadosde Acetatode Ciproteronafueron0,1; 0,2; 0,5; 1; 2
y 5 ng/ml (n=36, k=6) y de patrón internode 30 pg/ml.
La cuantificaciónde los resultadosse realizópor interpolaciónde la rectade
calibrado.
99
NIATERIAL Y METODOS
m.2.2.3.-TratamientoCronofarmacocinético
.
Los datosde concentraciónplasmáticadel Acetatode Ciproteronaobtenidos
se ajustaron matemáticamentea ecuaciones poliexponencialesde t, 2, y 3
exponentesmedianteel programaPKCALC (SHUMAKER, 1986).
En primer lugar se trataban los datos de cada conejo por separado. A
continuaciónseobteníala mediay el E.S.M de cadaparámetrocinético entre los
conejosque componíancadalote.
Los valoresde las mediasservíancomo parámetrosrepresentativosde los
diferenteshorarios(0; 4; 8; 12; 16; 20) que asu vezerancomparadasentresí para
observarlas posiblesdiferencias.
Se sometíana un estudiocronobiológico,con objeto de estudiarsu posible
ajuste a un tipo de ritmo determinado. Se realizaba un ajuste polinomial
triexponencialparadeterminarla existenciade unaperiodicidady con el método
COSENOR(HALBERG,1969) se intentabaajustara un ritmo circadiano.
100
MATERIAL Y METODOS
m.2.2.4.-Tratamiento estadístico
.
Las diferentespruebasde linealidad del fármacoy del patrón internoy el
calibradode la rectase realizó por ajuste medianteregresiónlineal de los datospor
mínimoscuadrados.
Todoslos resultadossehanexpresadocomomediaaritmética±E.S.M. Para
compararlos resultadosobtenidosen las distintaspruebasseha utilizado un testde
comparaciónindependientede medias muestrales,tomando siempre valores de
significaciónp <0,05, y unacomparaciónno paramétricapor la pruebade Mann-
Whitney, tomandocomo límite teóricode U p <0,05.
Los cálculosserealizarónconayudade los programasinformáticosSIGMA,
STAT WORK y COSENOR.
101
IV.- RESULTADOS
RESULTADOS
IV.- RESULTADOS
IV.1. ESTUDIO CRONOTOXICOLOGICO
IV.1.1.- CALCULO DE LA DL50.
La DL50 obtenida fue de 1,023,72 mg/Kg P.V. (Rangos 917,61 - 1,142,11).
La DL16 fue de 903,5 mg/kg y la DLMfue de 1,159,94 mg/kg de P.V. (FIGURA
IV.1)
1N.l.2.- ESTUDIO CRONOBIOLOGICO
El resultadosobtenidostras la administraciónde la DL50 a los animalesde
las diferentescámarascronobiológicasaparecenen la FIGURA IV.2A.
Los datos se ajustabande forma significativa (p<0,004) a un ritmo
circadiano. La acrofase(~) es de -4 rad (~229o), que correspondea las 15h 28
minutos. El mesor (M) es de 38,9 ±0,13 y la amplitud (A) de 14,2 + 0 18
(FIGURA IV.2B)
103
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RESULTADOS
IV.2.- ESTUDIO CRONOFARiMACOCINETICO
IN.2.1.- METODO ANALíTICO
Conel métodocromatográficoutilizado, la 17 a-Hidróxiprogesterona(P.I.)
y el Acetatode Ciproteronapresentabanun tiempode retenciónde 3 55 + 0,15 mm
y de 4,05 ±0,20mm respectivamente.No interferíanentresí, conlos picos de los
solventes,ni con los frentesde las muestrasbiológicas(FIGURA IV.3).
La reproducibilidaddel métodocalculadamedianteun estudioestadísticodió
comoresultadounavariación interdíadel 4,4%. Los resultadosde dicha variación
no presentaban diferencias estadísticamente significativas entre las concentraciones
testadas(p< 0,05).
El límite de deteccióndel Acetatode Ciproteronaen plasma,calculadocon
un coeficientede seguridadde tres vecesla desviaciónstandarddel blanco,era de
71 ng/ml
La recuperabilidaddel Acetatode Ciproterona y del patrón internoa partir
de muestrasde plasmade conejo,utilizando el procesodescritoen el apartadodel
método,fueronde 80,33 ±0,61 y de 91,09 ±1,04respectivamente(TABLA IV. 1
y IV.2).
106
RESULTADOS
Linealidad: en solución metanólica el Acetato de Ciproterona demostró
manteneruna relación directa y proporcionalentre concentracióny áreabajo la
curva entre valores de 0,1 y 10 gg/ml. Con los valores de estos parámetrosse
realizó un ajuste mediante regresión lineal por mínimos cuadrados,resultandola
siguiente ecuación:
y = 33469,19x + 285,54
y = ABC
x=CC
= 0,9978 (p<O,OOl) (FIGURA IV.4).
El patrón interno tambiéndemostró,en soluciónmetanólica,manteneruna
relacióndirectay proporcionalentreconcentracióny áreabajo la curvaentrevalores
de 10 y 100 ng/ml. Con los valores de estos parámetrosse realizó un ajuste
medianteregresiónlineal por mínimoscuadrados,resultandola siguienteecuación:
y = 1796,87x + 2016,94
y = ABC
x=CC
= 0,9942(p<O,OOl) (FIGURA DE IV.5).
La rectade calibradoelaboradasegúnel procesodescritoen el apartadodel
método,resultó tener la siguienteecuación:
y = 0,51 x + 0,02
107
RESULTADOS
y = ABCAC/ABCPI
x=CC
= 0,9788 (p<O,OOI) (TABLA IV.3; FIGURA IV.6)
La longitudde ondaa la quepresentabala máximaabsorbancia,obtenidapor
espectrofotometría fue de 283 nm (FIGURA IV.7).
108
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FIGURA IV.7. - Espectrofotograma de acetato de
ciproterona <1 mg/mi) e metanol (velocidad: 750
nm/min; rango de longitud de onda: 200-400 nm).
RESULTADOS
IV.2.2.- CRONOFARMACOCINETICA
Los valoresde concentraciónplasmáticadel Acetatode Ciproteronatras la
administraciónendovenosarápida en todos los conejosde los diferenteshorarios,
junto a las mediasy E.S.M. aparecenen las TABLAS IV.4; IV.5; IV.6; IV.7; IV.8
y IV.9 y representadosen las FIGURAS IV.8; IV.9; IV.10; IV.11; IV.12; IV.13
y IV.14.
El ajuste de las curvas de concentraciónplasmáticafrente al tiempo, se
efectuó en todos los individuos a ecuacionesbiexponencialessegún la fórmula
general:
CC = A < + B e~
Los coeficientes(A y B), exponentes(a y ¡3), t112 de a y ¡3, la K21, la K12, la
k,0, el ABC, el Vdc, el Cl, el MRT y lar2 aparecenen las TABLAS IV.10; IV.11;
IV. 12;.IV.13; IV.14 y IV.15.
De los diferentesparámetrosfarmacocinéticos,los elegidosparael estudio
cronobiológico fueron a, ¡3, t112 a, t112 ¡3, K21, K12, K10, ABC, Vdc y Cl. A
continuaciónseexponenlos resultadosobtenidosparacadauno de ellos.
117
RESULTADOS
a:
COSENOR(C): 1 -2 rad (7:38 h); M 0,064;A 0,015;p<O,l26;
Pr 65%
POLINOMIO TRIEXPONENCIAL (P.T.):
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R= 0,79 (FIGURA IV.15)
¡3:
~ -2 rad (7:38 h); M 0,004;A 0,001;p<O,442; Pr 35%.
P.T.: y= 0,002 + 2,272e~x -3,269e5”~2+ 9,666&x3
R= 0,62 (FIGURA IV.16)
~ -6 rad (22:55 h); M 24,47;A 2,24; P<0,184;Pr 57%.
P.T.: y= 14,7152- 1,2358x + 0,0996xA2 - 0,002<3
R= 0,79 (FIGURA IV.17)
t11g3:
.t~ -5 rad (19:05h); M 3361,68; A 13,36; P<0,229;Pr 45%.
P.T.: y= 175,6898 - 13,284x + 1,8674xA2 - 0,0547<3
R= 0,70(FIGURA IV.18)
118
RESULTADOS
C: .~ -2 rad (7:38 h); M 0,036; A 0,002; p<O,6OI; Pr 22%.
P.T.: y= 0,0332 + 9,087e4x - 9,l59e~Sx~2+ 2,322e6x’3
R= 0,40 (FIGURA IV.19)
~ -2 rad (7:38 h); M 0,007;A 0,002; p< 0,005; Pr 93%.
P.T.: y= 0,006 + 0,0012x- 1,198e~4x2+ 2,995e~3
R= 0,90 (FIGURA IV.20)
~ -2 rad (7:38 h); M 0,024; A 0,014; pc0,052;Pr 77%.
P.T.: y= 0,0121 + 0,0075x - 6,724e4x~2 + 1,512e5x”3
R= 0,86 (FIGURA IV.21)
119
RESULTADOS
Vdc:
~ -6 rad (22:55 h); M 3923; A 800; p<O,OOl; Pr 98%.
P.T.: y= 2293,2966 - 401,9938x+ 35,06302- 0,764203
R= 0,93 (FIGURA IV.22)
ABC:
q -4 rad (15:28 h); M 1794622; A 28813; p<O,l46; Pr 62%.
P.T.: y= 1,978e~5- 2773,6056x+ 941,852702- 34,3222x’3
R= 0,89 (FIGURA IV.23)
CI:
~ -1 rad (3:48 h); M 0,366, A 2,344;p<O,lii; Pr 61%.
P.T.: y= 20,6098+ 0,1025x - 0,0664xA2 + O,0026xA3
R= 0,89(FIGURA IV.24)
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V.1.- ESTUDIO CRONOTOXICOLOGICO
El motivo de realizaresteestudióprevio, fue comprobarel comportamiento
del Acetatode Ciproterona,administradoa horasdiferentes,medianteun sistemade
resultadosabsolutos(vida-muerte),paraproseguircon estudiosmásprofundos,si
el resultadoeraadecuadoa nuestrospropósitos.
Antesde realizarel estudiocronotoxicológico,fue necesariocalcularla DL~
del Acetato de Ciproterona para ratones homocigóticosC57BL/6, ya que las
referenciasprevias en otras especieso cepasmostrabanvariacionesque oscilaban
entre100 y 4.000mg/Kg PV. por vía intraperitoneal(GONZEL, 1971>.
Una vez obtenidala DL50 de 1023 mg/kg P.V. por via intraperitoneal,se
sometieronlos diferentes lotes de ratonesa un período de adaptaciónal nuevo
horario de 15 días. Tiempo que consideramossuficiente para modificar su reloj
biológico, coincidiendo con los datos aportadospor SILVAN y col. (1990) e
ILLERA y col.(1992),aunquealgunosautoressostienenque estetiempo tiene que
ser mayor (HILFENHAUS, 1976; PHILIPPENS, 1976).
El perfodo LO 12-12h, temperatura 250C y humedad50-55% coincidencon
:1-si
DISGUSION
los valoresde un día tipo medio en nuestralatitud (primavera-otoñoen Madrid).
Otros autores indican que los períodos de LO más idóneos son de 1O-14h
(NEUBERT y col., 1976; SILVAN y col., 1990),pero no hacenreferenciani a la
temperatura ni a la humedad.Existen trabajosen los que semodifican los horarios
y mantienenfija la temperaturay la humedad,observandocomo influyen estos
factoressobrela liberaciónde hormonas(SILVAN y col., 1990). Consideramosque
los tres se deben tratar en conjunto para que se asemejelo más posible a las
condicionesrealesy sobre todo paraestandarizarlas pruebas.
Los resultadosde nuestro estudio cronotoxicológico muestran un claro
comportamientorítmico, algo que erade esperardebidoa las variacioneshorarias
que los nivelesde testosteronapresentanen el organismo(MONSALTVAJE, 1981)
y en consecuencia,las posiblesmodificacionesen el comportamientode éstefrente
al metabolismo o bloqueo de la hormona.
La acrofase(momentode mayor mortalidad)se producea las 15h 28 mm,
que paraun animal nocturnocomoel ratón, es cuandosusconstantesorgánicasse
encuentranmásdeprimidas(MITRUKA y cok 1977).
Aunque cualquier extrapolaciónes siempre arriesgaday faltan muchas
pruebaspor realizar, creemosque estos resultadosabrennuevasexpectativas,para
adaptar los actualestratamientosexistentesen medicinahumana,a unas pautas
152
DISCUSION
cronoterapéuticas que permitan modificar las dosis terapeúticas, disminuyendo de
estaforma los efectossecundarios,sin perdereficacia.
Paraello decidimosprofundizaren las posiblesvariacionesfarmacocinéticas
quepresentaestecompuestoen función del horariode administración.
153
DTSGtJSON
V.2.- ESTUDIO CRONOFARMACOCINETICO
V.2.L.- Método
Para la detección y cuantificaciónde las concentracionesde AC en plasma,
se ha utlilizado un métodoanalíticoque consideramosválido, teniendoen cuentalos
resultados de las pruebas control. La linealidad (entre 0,1 y 10 ~gIml), la
reproducibilidad(cZ 5%) y el límite de detección(< 0,1 ng/ml) son apropiados,
teniendo en cuenta los niveles plasmáticosesperadosdel fármaco(0,1-2 pg/ml).
El método descrito permite separar claramente el frente de picos
cromatográficos debidos a los componentesplasmáticos,al patrón internoy al AC.
La proporción de fasemóvil 60:40de acetonitrilo:agua,coincideconla de SCOTT
y col. (1987), quienes determinaron el compuesto a partir de tabletas
comercializadas.En cambio,otros autoresque, al igual que nosotros,detectabanel
fármacoen plasmautilizaban acetonitrilo:agua(65:35) (FRITH y col., 1985> y
metanol:agua(70:30) (CANNELL y col., 1981).
La recuperacióna partir del plasmaes del 81% parael AC y del 91% para
el patrón interno. Estos porcentajesson más elevados que los conseguidospor
FRITH y co141985)de 78% parael AC y 84% parael patrón interno(Propionato
de Ciproterona)y no llegan a los valoresde CANNELL y col (1981) de 88% para
154
DISCUSION
el AC y 95% parael 17 a-Flidroxiprogesterona.No obstante,al intentarreproducir
esteúltimo métodono obtuvimoslos mismosresultadosquedescribenestosautores.
Debemosindicar queel métodoelegidopor nosotrosparaanalizarel AC en plasma
es suficientementeválido y no conlíevala complejidadque representabael método
descrito por CANNELLy col., (1981).
Las muestras de plasma podían mantenerse en congelación (-200C), sin
que se alterasela concentracióndel fármaco duranteal menos 15 días, lo que
permitió realizar las pruebas con un amplio margen de tiempo y de confianza.
La longitud de onda a la que el AC muestraunamáximaabsorbancia(X =
283nm) es igua¡ a la señalada por FRITH y col. (1985> y CANNELL y col. (1981).
El patrón interno elegido fue la 17 cx-hidroxiprogesterona utilizada por
CANNELL y col.(1981). Las diferentes pruebas realizadas (tiempo de retención,
resolución, linealidad, recuperabilidad, etc.) hacen que este compuesto, con la fase
móvil utilizada en nuestro método, cumpla con el fin asignado y de esta forma valide
el trabajo de procesado(HAEFELFINGER, 1981).
El procesado de las muestras se basó en las desproteinizaciónmedianteuna
solución alcalina (OHNa 2,5M) y una extracción con acetato de etilo. Este método
se diferencia del descrito por CANNELLy col. (1981) en la no utilización de la
155
DISGUSION
cromatografía en columnas de silicagel. A pesar de ello, los frentes biológicos no
interferían en ningún caso con los picos del Pi. y del Acetato de Ciproterona.
156
DISGUSION
V.2.2.- Acondicionamiento de los animales y toma de muestras
Al introducir a los animalesen cámarascronobiológicasy producirles un
desfasede 4 horasentrelos lotes, buscábamosfacilitar la toma de muestras,puesto
que despuésdel períodode adaptación,seteníaa los animalesen “distintas horas’
en un mismo instante.
Perono sólo es importanteel cambiode horario, sino que desdeel puntodc
vista de estandarización,conseguíamosque todos los animalesestuvieranen las
mismas condiciones de temperatura, humedad, alimentación, manejo, etc...,
disminuyendode estaformala influenciade otros factoresquepodríanmodificarel
ritmo (MAYERSBACH, 1976). Siendo inicialmente las diferenciasindividualesde
los animalesy el horario, los responsablesde las variacionesque sepuedendar en
los diferentesparámetrosfarmacocinéticos.
Pararealizarel estudiocronofarmacocinéticode un fármaco,sepuedenelegir
varias modalidadesde acuerdocon los diferentesautores: 2 administracionesen
horariosopuestos(con un intervalo de 12 horas) (LESKA y col., 1980; NAKANO
y col., 1982 y 1984; LEVI y col., 1985; RUSSELL y col., 1988), 3
administraciones (con un intervalo de 8 horas) (Altmayer y col., 1979;
HRUSHESKY y coL, 1982; GUISSOU y coL, 1987>, 4 administraciones(con un
intervalo de 6 horas) (OLLANGNIER y col., 1987) o 6 con intervalos de 4
157
DISGUSION
horas(COSTAS,E., 1989). Nosotros elegimos este último sistema,porqueante la
ausenciatotal de datos previos, cuantosmáspuntosseabarquen,consideramosque
se podríandefinir mejor las gráficasy en consecuenciael ritmo. Eligiendopocos
puntos se corría el riesgo de que los mismos no fueran valoresextremos y no
demostraríamosel posible comportamientocronobiológico.
Parala adaptaciónal nuevohorario,hemosutilizado un períodode 15 días,
tiempo que ha sido consideradoadecuadopor diferentesautores(SILVAN y col.,
1990; ILLERA y col., 1992). Aunqueotros indican que estetiempodebesermayor
(HILFENHAUS, 1976; PHILIPPENS,1976).Si bienescierto que a mayor tiempo
mayoradaptación,consideramosesteperiodode 15 días suficienteparaconseguir
un cambioeficaz del reloj biológico, variandonotablementesegúnlas especies.
El periódo LO de 12/12, temperatura250C y humedad 50-55% son
semejantesa los valoresde un díatipo medioen nuestralatitud (primavera-otoñoen
Madrid). Consideramosque los tres factores se deben tratar en conjunto para
reproducirmásfidedignamentelas condicionesrealesy sobretodo estandarizarlas
pruebas.
En distintos trabajosse hanprobadohorariosLO diferentes(10/14, 12/12,
14/10, 16/8, etc...) con unahumedady unatemperaturaconstantes,indicandocual
de ellos es el consideradocomo más adecuado (MAYERSBARCH, 1976;
158
DISGXJSION
NEUBERTy col., 1976; SILVAN y col., 1990; ILLERA y col., 1992), pero ya
hemosindicadoen variasocasionesque nuestropropósito es estandarizar y por esto
trabajamosbajo las condicionespreviamentedescritas.
159
DISGUSION
V.2.3.- Influencia del tiemPo sobre los procesosfarmacocinéticos
En cronobiologíaexistendos escuelas;la primera llamadade las leves de
transmisión,en la que pusierona punto un programa,con funcionesmatemáticas
cosenoidales(COSENOR), que sometíaa todas las constantesbiológicas a este
método, de tal maneraque las que se ajustabana este procedimientose podía
afirmar,quepresentabanvariacionesperiodicasinfluenciadasporel tiempo,mientras
que en las que no seajustabanel tiempono influía (HALBERG, 1969; REINBERG
y HALBERG, 1971; REINBERG, 1992).
La segundaescuela,denominadade basemolecular,aplica una estadística
clásica.Sometíaa los diferentesorganismosadesfasesde luz, posteriormentesacaba
las constantesestudiadasy las mediasde cadahorario,comparandolascon la “gran
media”. Si estaúltimateníaun desviacióntípicamuy grande,podríamosafirmarque
el tiempo modifica las constantesestudiadas.En pasosposterioreslas sometena
diferentesestudiosmatemáticos -fourier, espectral,series temporales- incluso el
COSENORparaestablecersi esasvariacionesdebidasal tiempo, tieneno no un
comportamientoperiódicoy rítmico (EDMUNDS, 1983).
Desdeel punto de vista farmacológicolo más importantees la modificación
del comportamientode los diferentesparámetrosfarmacocinéticosen función del
tiempo, no intentarajustarlosa un determinadoritmo, por ejemplo el circadiano.
160
nISGUSION
Debido fundamentalmente a que cada uno de los parámetros estudiados dependen a
su vez de distintos procesos: unión a proteínas, procesos metabólicos,activacióno
inactivaciónenzimática,variaciónen lasconcentraciones,niveleshormonales,etc....
que a su vez se rigen por diferentes ritmos (circadianos,ultradianose infradianos)
(REINBERGy HALBERG, 1971; REINBERG, 1992>.
Por estasrazonesenordende importancia,lo primeroesver si semodifican
los procesoscon el tiempo, despuéscomprobarsi son periódicos, y por último
intentarajustarlosa un ritmo.
161
DISGUSION
V.2.4.- Farmacocinética
La cinéticaque realizamosno fue completa, la elecciónde 6 horassedebió
a que no teníamosintenciónde realizarunafarmacocinéticaen el sentidoestrictode
la palabra,sino unacomparaciónde parámetros.
Teniendo en cuenta los resultados obtenidos de pruebas previas realizadas por
nosotrosen conejos,y el estudio farmacocinéticoen otras especies(1-IUMPEL y
col., 1980; BECKERy col., 1980; DUSTERBERGy col. 1981 y 1984), la semivida
del fármaco es superior a 24 horas. Sí nosotros hubieramos tenido que utilizar todo
este tiempo, se nos habrían presentado problemas de manejo que nos inducirían un
fuerte estres que podría alterar el reloj biológico del animal, con la consecuente
adición de factoresque influirían en los ritmos (MAYERSBASCH, 1976).
De hecho, tres de los siete conejos descartados, murieron en las últimas horas
del periódode extracción,por lo que decidimosretirar susdatos, ya que el fuerte
stres que habían sufrido es causa suficiente para alterar los resultados.
162
DISGUSION
V.2.5.-Elección de Darámetros
Los parámetros obtenidos fueron: A, B, a, /3, t~,2a, t11fi, K21, K12, K10,
MRT, Vdc, ABC y Cl, de los cuales elegimos para el estudio cronobiológico: a, ¡3,
t112deay/3,K21,K12, K10, Vdc, ABC y Cl.
Los parámetrosseleccionados son los utilizados normalmente por los
diferentesautoresque trabajanen cronofarmacocinética(NAKANO y col., 1982y
1984; LEVI y coL, 1985; GUISSOUy col., 1987; RACKLEYy col., 1988).
Los coeficientes A y B no se eligieron puesto que dependen directamente dc
a y /3, es decir son datos extrapolados de estos y sus modificaciones son
directamente proporcionales a a y /3 (WAGNER, 1983; PLA y col., 1982).
El MRT se descartóporque realizamosdurante6 horas la obtenciónde
muestras y para la validación de este parámetro es necesario realizar una
farmacocinéticacompleta.
El primer paso,segúnla teoríade Edmunds(1983), fue comprobarsi los
distintosparámetrosvariabanen funcióndel tiempo, por lo quesehicieronparacada
uno de ellos comparacionesparamétricas(t de Student) y no paramétricas(U de
Mann-Whitney); estableciendoasí, si las diferencias eran o no estadísticamente
163
DI SGUSION
significativas.
La existenciade estas diferencias, nos condujo a realizar un estudio
medianteel ajustea una ecuaciónpolinomial triexponencialde las medias de los
parámetros,paraconfirmarsi las variacionesen funcióndel tiempoeranperiódicas.
Debemosaclararque parauna mayorprecisiónde estemétodotendríamosque haber
valorado dos ciclos seguidos, pero en farmacocinética supondría repetir toda la
experimentación, pues cada ciclo supone una cinética y no era éste el objetivo
fundamental-
Por último se intentaron ajustar las medias de los parámetros a un ritmo
circadianopor el métodoCOSENOR(HALBERG, 1969).
Comoapareceenel apartadode resultados,unosparámetrosseajustanmejor
que otros a cada una de estas funciones, por lo que hemos realizado una discusión
pormenorizada de cada uno de ellos, para finalmente desarrollar una idea de
conjunto.
164
DISGUSION
V.2.6.-Estudio individualizado de los parámetros
a: observamos que en los animales con período de luz de 8 a 20 horas,
considerados como los que más se asemejan a los animales que se encuentran en
condiciones ambientales naturales, presentan diferencias estadísticamente
significativascon los lotes de luz de 4 a 16 h, 16 a 4 h y 20 a 8 h. El ajuste
polinomial esdel 79% y el COSENORdel 65%.
Esteparámetroal estarrelacionadocon la fasede eliminaciónrápida, no se
ve afectadopor la duración de la farmacocinética(6 horas) y reflejaríade forma
válida las modificacionesrealessufridas por estaconstantede eliminaciónsegúnla
horade inyección.
El tipo decurvaessemejanteal de los otrosprocesosde eliminación (/3, K12,
K10), presentandoun máximoalas 7:30 horasy un mínimoprácticamenteen horario
opuestoa este.
Las pequeñas diferencias pueden estar basadas, en que esta constante de
eliminación se produce antes de alcanzar el equilibrio de las concentraciones entre
los compartimentos.Existiendoun excesode fármacoen el compartimentocentral
(WAGNER, 1983).
165
DISGUSION
El hecho de tener un 79 % de ajuste polinomial reflejaría un buen
comportamientoperiódicoy el 20% dependeríade factoresexternoscomosistemas
de procesado,variacionesinterindividuales,etc...
El 65% de ajusteal métodoCOSENOR,tambiénimplica un ritmo circadiano
aceptable.
¡3: tiene el mismo tipo de diseñoque a en el ajuste polinomial, aunqueun
poco más bajo (70%), demostrando una periodicidadaceptable.En cambio, el
COSENOR presentaun mal ajuste(35%), pudiendoser debidoa queel ritmo a que
se adapta sea ultra o infradiano.
No obstante,¡3 es un parámetroquepuedeestarma] definido, teniendoen
cuentaque la cinética no fue completa, y esta constantede eliminación queda
definidaa partir del momentoque sealcanzael equilibrio entrelos compartimentos.
Los puntos utilizados para definir la curva, la pueden separar de su valor real; no
obstante,al cometerseel mismo error paratodas, la comparaciónes válida. Esta
comparaciónponede manifiestola diferenciasentrelos lotes con luz de 16 a 4 hs
y de 20 a 8 hs, entresí y con el restode los grupos,volviendo a quedarpatentela
influenciadel factor tiempo.
Los t112a y t1143 presentan un comportamiento opuesto a a y ¡3, puestoque
166
DISGUSION
son inversamenteproporcionalesa estasúltimas:
= Dosis/a t11fi = Dosis/fi
Los t112 presentanunaacrofasediferenteque paraa es de -5 rad (19:05 h) y para
¡3 es de -6 rad (22:55 h). Sin embargo,las acrofasede las constantesa y fi son
iguales,-2 rad (7:38 h). Esto podríaser debidoal tipo de ajusterealizado,que hace
que no esténtotalmenteajustadosa los valores,sobretodo si tenemosen cuentalos
índice de probabilidad (t1¡2a 57% y t1143 45%) obtenidoscon el COSENOR. En
cuantoa las representacionespolinomiales,practicamenteestáninvertidas,puesel
ajuste es el mismo paracadaconstantede eliminación.
K10: es una constante de eliminación del compartimento central al exterior.
Los lotes con luz de 20 a 8 h y de 16 a 4 h presentan diferencias estadísticamente
significativascon respectoa casi todos los demás lotes. El grupo de O a 12 h
presentadiferenciascon el de 8 a 20 h y conel de 12 a O h. En general,los lotes
conmás separaciónhorariapresentanmayoresdiferenciasque los máspróximos.
El ajuste tantopolinomial (90%) como COSENOR(93%) eselevado.Esto
indica la existenciade unainfluencia importantede la luz y ademásla presenciade
un ritmo circadiano,siendola acrofaseo momentode mayoreliminaciónde -2 rad
(7:38 h).
Los procesosde eliminacióndependende la fracciónde fármacolibre, y por
167
DISGUSTaN
tanto de la capacidadde unión a proteínas. También influyen los procesosde
metabolizaciónhepáticay la filtración glomerular (PLA y col., 1982). En todos
estos procesosse ha demostradopreviamentela existenciade ritmos circadianos
(VETMATSU y col., 1986; CLENCJ y col., 1981; NAKANO y col., 1984;
RACKLEY y col., 1988; TAYLORy col., 1983 y 1984). Estos hechos determinan
en gran medidalos valoresque hemosobtenido.
En trabajos que describen las modificaciones farmacocinéticas en
administraciónvía oral, indican que los procesosde absorción intestinal están
modificadosno sólo por la hora en que se toma el alimento, sino por el flujo de
sangrede la región intestinal en un momento dado (ritmos cardiacos, tensión
arterial, pH sanguíneoy urinario, temperatura,etc...) (Altmayer y coL, 1979;
CAVALLANI y col., 1987; KABASAKALIANy col., 1970). En un proceso de
eliminación sucedelo mismo con la sangreque llega al glomérulorenal ( PLA y
col., 1982; GUISSOUy col., 1987; WOODy GARRETTSON,1983).
K12: tiene un diseño similar a la K10; está influenciada por los mismos
procesos, pero en lugar de ser una eliminación hacia el exterior es hacia el
compartimentoperiférico.
El lote con horas de luz de 8 a 20 h poseediferencias estadísticamente
significativascon los demás.El ajuste polinomial esdel 86%, y el COSENORdel
168
DISGUSTaN
77%, con la acrofasea las 7:38 h.
Lo explicadoparala constanteanterior sepodríaaplicar a esteparámetro,
excepto lo referentea los procesosde eliminaciónrenal.
K21: esunaconstantede absorcióndel compartimentoperiférico al central.
Al no presentardiferenciasestadísticamentesignificativas entrelos lotes, no sería
necesariover el tipo deperiodicidad.Noobstante,al realizarlosecompruebala falta
de ajustepor cualquierde los métodosutilizados.
No disponemos de otra constante de absorción para comparar con ella y saber
si las mismaspresentabanun comportamientoperiódicocon ritmos ultra, infradianos
o circadianos, comose ha descritoen otros trabajos (ALTMAYER y col., 1979;
CLENCH y col., 1981; WOODy GARRETTSON,1983). Por ello, consideramos
que la falta de periodicidadse debeexclusivamentea la ausenciade diferencias
estadísticamentesignificativas.
Cl: por ser un procesode eliminación está intimamenteligado a las K10 y
K12. Los lotes de horas de luz de O a 12 h y de 4 a 16 h presentandiferencias
significativas con el de 16 a 4 h y con el de 20 a 8 h. El ajuste polinomial del
89%, implica un granperiodicidad,quees del mismo gradoque la descritapara la
K~0 y K12. De igual forma el COSENORpresentaunaprobabilidaddel 61%, que es
169
DISGUSTaN
inferior a las obtenidasparalas constantesmencionadas.Esto podríaser debidoa
que influyen un mayornúmerode factoressobreestaconstantede eliminacióny por
lo tanto que no sedebeexclusivamenteal tiempo.
También podría atribuirse a que es un valor sesgado,que se aleja de la
realidad. Como ya hemos indicado anteriormente la comparación entre ellos es
válida. Desde el valor mínimo (CI= 15,39 mí/mm del lote de 16-4 h) al máximo
(CI=20,83 mí/mm del lote de 0-12 h) hay unadiferencia del 26,11%, dejando
patenteque la cantidadde fármacoeliminado va a tenerunaclara influenciadel
factor tiempo.
ABC: es un valor inversoa la constantede eliminación(Cl), comopodemos
observartanto en la representacióngráfica como en los valores de dos ajustes
realizados.Los datosque nos aportahabitualmenteesteparámetrono sonobjeto de
nuestroestudio.
Vdc: de todos los valoresdescritoshastael momento, es el que mejor se
ajustatantopor el métodopolinomial (93%),comoel COSENOR(98%). Quedando
de manifiesto no sólo la periodicidad, sino su ritmo circadiano.Sus valores son
opuestos a los procesos de eliminación (RACKLEY y col., 1988; CHAUWANy
col., 1986; GUISSOUy col., 1987).
170
DISGUSION
Si comparamoslos valores mínimosy máximos observamos,que desdeel
lote de 8-20h con un valor de 1760 mí, al lote de 20-8 h con un valor de 3459 mí,
hay una diferencia del 49,12 %. Por tanto existe una diferencia de un 50 %
aproximadamente entre estos dos sistemas horarios opuestos.
Resultadosobtenidosen trabajospreviosrealizadosconTeofilina en distintas
especies,indican que la relaciónaparenteentrevolumenesde distribuciónde díay
de noche,es apenasde un 10%, siendonotablementeinferior a la variaciónque
experimentala concentraciónen equilibrio, que oscila entreel 20% y el 30%
(TAYLOR y col., 1984; RACKLEY y coL, 1985).
Clench(1981) indicaqueparala Indometacinalas concentracionesplamáticas
se reducena la mitad cuandola hora de administracióndifiere en 12 h.
Diversosautoresdescribenmarcadasdiferenciasentrelos nivelesplasmáticos
de teofilina, segúnla hora de comienzode la perfusiónendovenosa,despuésde 24
h de administración,cuandose suponenconstanteslos niveles (TAYLOR y col.,
1984; RACKLEY y col., 1985); evitandode esta forma la influenciade factores
distintosal tiempo.
En nuestros resultadosqueda igualmentepatente la influencia del factor
“tiempo de administración”.Ademásde la grandiferenciade valoresentrehorarios
171
DISGUSION
opuestos,que seríasuficientepara manifestarsu importancia,hay que destacarque
tanto para el ajuste polinomial (periodicidad) como para el COSENOR (ritmo
circadiano),tan sólo un 7% y un 2% respectivamentepuedeatribuirse a causasno
temporales.
172
DTSGUSICN
V.2.7.-Estudioalobalde los procesoscinéticos
Basandonosen los resultadosobtenidos,la influenciadel tiempo es patente
en los procesoscinéticos del Acetatode Ciproterona.
En los estudiospreviosdel cálculode la DL50, y suposteriorajustea ritmos
circadianospor el métodoCOSENOR,sepusode manifiestola gran influenciadel
tiempo sobre los efectosde dicho fármacoen el organismo. El hecho de utilizar
ratones homocigóticos con mínimas diferencias interindividuales, y el término
absoluto ‘muerte-vida’ hizo que fuera másfácil precisarestainfluencia.
En cambioen los parámetrosfarmacocinéticos,los resultadosobtenidosde
un 90% en cualquierade los procesosde ajuste polinomial o cosenoidal,deja un
escasomargende influenciaa los factores interindividualesy aotros tipos de hechos
concomitantes:extracciones,manipulaciones,interacciónentrediferentesprocesos
con ritmos igualeso distintos,etc.
En aquellosparámetrosen los que la probabilidadesalrededordel 60%, los
factores individualestienenunamayor incidencia,perosigue siendoimportantela
influenciadel tiempo.
En todos los procesosbiológicos son muchos los factoresque quedansin
173
DI 5CUSí QN
controlar,por muchoquepretendamosestandarizarlas pruebas.Concretamenteen
los procesos farmacocinéticos la implicación que tienen numerososprocesos
concomitantes(ritmos cardiacos, tensión arterial, rutas metabólicas, actividad
enzimática,númerode proteinasplasmáticas,temperatura,pH sanguíneoy urinario,
etc...). Cada uno de ellos tiene ritmos propios, estohaceque resulte muy dificil
analizar el porcentajede responsabilidadde cadauno sobre el resultadofinal. A
pesarde ello, nuestrosresultadosdemuestranque en mayor o menor grado los
organismosrespondende forma muy diferentepero predecible,segúnel momento
en el que se encuentrasu reloj biológico.
Todo ello nos inducea compartirel pensamientode Fernández-Rallada,que
opina que los sistemasdinámicos tienen, a la vez, comportamientosregularesy
caóticos,la nuevavisión queemergehoy es la de un mundoprobabilista,en la que
se imbrican y entreverancadenascausalesdeterministasque terminan cuandose
destruyetotalmentela cantidadde informaciónsobre el estadoinicial. La manera
de evitar estaperdida de la informaciónseríatenerunacantidad infinita de
datos; pero, siendolos hombrescriaturasfinitas, esto es imposible. Por eso dice
Prigogineque estamoscondenadosa verel mundoa travésde unaventanatemporal.
De este modo, orden y caos, determinismo y probabilidades se juntan y
complementanen un mundo que resultaasí máscomplejoy rico que la visión fría
del mecanicismoy cuyo comportanmientose siguede la acciónintimamenteligada
de azary necesidad(FERNANDEZ-RAÑADA, 1990).
1’74
VI.
GONCLUSIONES
VI.- CONCLUSIONES
1.- La DL50 del Acetatode Ciproteronaadministradopor vía intraperitoneala
ratoneshomocigóticosC57BL/6 es de 1023,7mg/kg P.V. y se ajustaa
un ritmo circadiano(p<0,04)con la acrofasea las 15h 28 mm.
2.- Las constantesde eliminaciónK10, K12 y el aclaramientoseajustana ritmos
circadianos en diferentes proporciones (93 %, 77% y 61 %,
respectivamente)y todas ellas presentanun elevado porcentajede
periodicidad (90%, 86% y 89%, repectivamente), que pone de
manifiestolas variacionesen la capacidadde eliminaciónorgánicasegún
la horade administración.
3.- El volumende distribucióncentralpresentavaloresextremosentrelos lotes
de luz 8-20h (1760mí) y 20-8h (3459 mí), conunadiferenciapróxima
al 50% entre ellos. Este parámetrose ajusta a ritmos circadianos
(p.C0,0O1)con la acrofasea las 22h SSmm.
4.- Los parámetros~3,t’A$ y t½ademuestranun alto grado de periodicidad
(62%, 70% y 79%, respectivamente)perono se ajustan a ritmos
circadianos.
176
CONCLUSIONES
5.- El Acetato de Ciproteronapresentavariaciones en su comportamiento
cinético(I.V. en conejo),dependiendode la horade administración.Este
factor se debe tener en cuenta en el tratamiento de los diferentes
procesosen los quese utilice.
177
VII.- RESUMEN
RESUMEN
VII.- RESUMEN
Se ha realizado un estudio para ver la influencia del factor “tiempo de
administración”sobre la Farmacocinéticadel Acetatode Ciproteronaen conejospor
vía endovenosa.
En primer lugarsedeterminaronla DL50 en ratoneshomocigóticosC57BL/6
(1023,7mg/kg)y la modificaciónde la mismasegúnla horade inyección,en 6 lotes
diferentes,con unadiferenciahorariade 4 h entrelotes, con resultadosque ponen
de manifiestoestainfluencia.
A continuaciónse realizó una cinéticaendovenosa(4mg/kg> de Acetatode
Ciproteronasobre 36 conejos,en 6 lotes. Cada lote seconsiderabacomoun valor
individualizado de hora (0-12, 4-16, 8-20, 12-0, 16-4 y 20-8) con el fin de
compararlosentresi.
Las muestrasde sangreseprocesaronparasu posterioranálisispor HPLC,
utilizandocomoP.I. la 17 a-hidroxiprogesterona.Los datosplasmáticosseajustaron
a ecuacionesbiexponenciales(PKCALC).
Los resultadosobtenidosdea. ~3,t½a,t1/213, K
10, K12, K21, ABC, Vdc y Cl,
sesometierona un análisisestadísticocon comparacionesparamétricas(t de Student)
179
RESUMEN
y no paramétricas(U de Mann-Whitney)y a un ajustepor los métodospolinomial
triexponencialy COSENOR,poniendode manifiestoel mayor o menorgrado de
influenciadel tiempo de administraciónsobreestosparámetros.
En todos los casoshuboclaro índicede periodicidad(del 62% para~3al 93 %
paraVdc, exceptoK21, 40%). El ajustea ritmos circadianosno seprodujoen todos
los casos (K21, 22% y ¡3, 35%), posiblementedebido a la falta de diferencia
estadísticamentesignificativa. En otros casos, la influencia de factores no
controlados llegó a ser del 20-35% (a, K12, ABC y Cl) y en el Vdc y K10 el
comportamientofue claramenterítmico (98% y 93%, respectivamente).
En conjunto,el AcetatodeCiproteronaestáfuertementeinfluido porel factor
“tiempo de administración”en su comportamientofarmacocinéticoendovenosoen
conejos.
180
RESUMEN
SUMMARY
A study about the influence of “administrationtime” on the endovenous
pharmacokineticsof the Cyproteroneacetatein rabbitshasbeenmade.
First, LD50 in homozygoticCS7BL/6 mice was calculated(1023.7 mglkg).
Modificationsof LD50 dueto theadministrationtime was studied,too. Six different
groups of mice, with 4 hours differenceswere used. The obtaineddatashow that
influence.
Afterwards,a endovenouslyadministration(4 mg/kg)of Cyproteroneacetate
was made. Rabbits (n=36) were distributed in six groups; each group was
consideratedas a single value of time (0-12, 4-16, 8-20, 12-0, 16-4 and 20-8). So,
pharmacokineticparameterscanbe comparingbetweencouplesof them.
Blood sampleswere processingfor HPLC analysis. 17 a-Hydroxyproges-
teronewas usedas Internal Standard.Plasmaticdatawere fitted to a biexponential
ecuation(PKCALC).
Parametric(Student’st) and non parametric(Mann Whitney’s U) test were
usedto comparethe obtaineddata for a, (3, 0/za, t½¡3,K10, K12, K21, AUC, Vdc
and Cl. Triexponentialpolynomial and cosinoidal (COSINOR)fittings were made
181
RESUMEN
to discoverthe degreeof influenceof the administrationtime on theseparameters.
AII of them showeda clear periodicity index (from 62% for ¡3 to 93% for
Vdc, exceptingK21, 40%). Someparameterscan not fit to acircadianrhythm (K11,
22% and (3, 35%). It may be due to the absenceof statisticaldifferences.In other
instances,the non controlledfactors influencewas about20-35% (a, AUC and Cl),
in another ones (Vdc and K10) rhytmic behaviourwas shown (98% and 93%,
respectively).
Finally, the pharmacokineticsbehaviourof the Cyproteroneacetate by
endovenousadministrationin rabbits is greatlyaffectedby the “administrationtime”
factor.
182
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