Di r ecci ó n:Di r ecci ó n: Biblioteca Central Dr. Luis F. Leloir, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires. Intendente Güiraldes 2160 - C1428EGA - Tel. (++54 +11) 4789-9293

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Tesis de Posgrado

Estudio de la composición delEstudio de la composición delaceite esencial y resinoide de laaceite esencial y resinoide de la

Adesmia boronioides HookerAdesmia boronioides Hooker(Paramela)(Paramela)

Peltz, Leonor

1962

Tesis presentada para obtener el grado de Doctor en CienciasQuímicas de la Universidad de Buenos Aires

Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales y de maestría de la BibliotecaCentral Dr. Luis Federico Leloir, disponible en digital.bl.fcen.uba.ar. Su utilización debe seracompañada por la cita bibliográfica con reconocimiento de la fuente.

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Cita tipo APA:Peltz, Leonor. (1962). Estudio de la composición del aceite esencial y resinoide de la Adesmiaboronioides Hooker (Paramela). Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad deBuenos Aires. http://digital.bl.fcen.uba.ar/Download/Tesis/Tesis_1111_Peltz.pdf

Cita tipo Chicago:Peltz, Leonor. "Estudio de la composición del aceite esencial y resinoide de la Adesmiaboronioides Hooker (Paramela)". Tesis de Doctor. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.Universidad de Buenos Aires. 1962.http://digital.bl.fcen.uba.ar/Download/Tesis/Tesis_1111_Peltz.pdf

UNIVERSIDAD DE BUENOS AIRES

FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NAÏURALES

Estudio de la composición del aceite

esencial y resinoide de laAdesmia boronioides Hooker

(Pgramela)

Leonor Peltz

Tesis presentada para optar al titulo deDoctor en Quimica

l 9 6 2

7254'1111

k4

UNIVERSIDAD DE BUENOS ¿IRES

FACULTLD DE CIENCI.'.S EXACTLS Y NATURuLES

Estudio de la composición del aceite.

esencial y resinoido de la¿dosmia boronioides Hooker.

(Paramcla)

Leonor Peltz

Resumendo Tesis presentado para optar al título de

Dootc: en Química.

fiat7a.”!.'

(¡m*“m í

UBICAQIQN EN LA SLETEMÁIICá:

9135;; Dicotiledóneas; sub-clases Arquiclamídeas; orden: Rosales; familiasLeguminosas;sub-familia: Papilionoideas; tribut Soforeas.

Eggggggggggjgz Se trata de un genero exclusivamente sudamericano, que

comprendemas de 120 especies; su utilización esti afin poco estudiada, la

mayoría son forrajeras, las leñosas dan leña de bastante valor. Nose cono­cen especies tóxicas y ninguna se cultiva.

QBIEBQIQNDELMAEERLAL:Este arbusto, común en la Patagonia, fué facilita­

do por la Dirección le Parques Nacionales.I' CIONES NA IT C EN E TERI 8

Aguas en hojas: 11,3% en ramas: 12,5%

.,, A _, , .; ., ,7 . .; ,1 . ,_- , .— ,_ .p _,t_ g

¿91.12 extracto etóreo: 3,2%; extracto alcohólico: 25,3%; extracto alcohó­

lico secado a vacio y 40v: 23,0%

gamas: extracto alcohólico: 12,6%

Por consiguiente, estimóndose el extracto etóreo de poco valor, se

procedió a la obtención del resinoide de hojas y de ramas, por separado,

con alcohol y a reflujo.

QEBAE; de hojas: 16,17%; de ramas: 11,92%

ESEEQLL;(obtenida por arrastre con vapor de agua) de hojas 2,52%; ramas:

1,01%

W: dehojas39,64%;deramas4,94%DEL INOIDE J D a

EEEECEEOFOEOMEIBLADE AQQORCIONEN EL ELEBAVIOLETA: se efectuó con solucio­

nes líoo de resinoide en alcohol libre de aldehidos, obteniéndose para ra­

mas los siguientes máximosy minimos: Long. de onda en mu 250....E.0,62

(minimo) y long. de onda en mu 270...E.O,7O (máximo). Para el resinoide de

hojas no se ha observado extinciones máximas o minimas.

sygzgyg;¿¿ggygp;gg¿ Dada la anterior curVa de absorción hemos procedido a

1a separación de la sustancia fenólica en resinoide de ramas: 10,13%, de la

cual se efectuó una cromatografía monodimensionalen placa, cuya resolución

indica la presencia de por lo menosdos fenoles y la posibilidad de presen­

cia de polifenoles.NIFIC C N: (promediocb 4 determinaciones)

1.5. LE. LS.

Hojas 38,79 5,85 44,55

Ramas 17,08 82,77 99,86

EÉEUDIQQE; ¿CEIEE ESENCIA; DE ngég g DE gégég!

En amboscasos se trata de fluidos limpidos, ligeramente viscosos, de

olor a frutos maduros, mós penetrantes para la esencia de ramas, y de color

pardo rojizo.

¡E50 EgPECIFICOaa201G. Hojasz..1,0031 Ramas:..0,9785

IQIQ m 11523591635 ¡1,2,0 " 1,49305 " 1,49255

INDICE DE ÁCLQQ: " 44,21 " 39,97

INDICE DE 3511.3 s " 79,34 " 84,62

INDICE DE fiAEONIFICACION: ' 123,55 " 124,63

gggygzggggggg_ggsggggz Se observó poca resolución para hojas y ramas en con­

Junto.

AQQORQIOEQN'EL QyTRAVIOLETgsSe observó para ambos aceites esenciales un má

ximo para long. de onda 235 mu.

H0 S

Indice de óster fl OHalcohólico

Hojas 135,35 4,48

Ramas 159,79 4,71

CID IBRES:Por observación microscópica se encontró ác. propiónico en su

mayor parte y ¡cido isobutirico en menor cantidad, para ambaesenciai.

gogfiUEgTOSCAfigONILICOfi:Se obtuvieron las 2-4dinitrofenilhidrazonas, de co­

lor rojizo y P.F. 1429 para hojas y 142/30 para ramas, de los cuales se hizo

las curvas de absorción en el ultravioleta. Se procedió a separar los com­

puestos carbonilicos con sulfito de sodio y nuevamentese obtuvieron lo 2-4

dinitroderivados, de los cuales se efectuó una absorción ynseiaultraviolete

y una separación cromatográfica en placa. Se obtuvo asimismo, las semicarba­

zonas para hojas, cuyo P.F. es 14596.

naa.

En consecuencia, se deSprende de 1a observación de las curVas de ab­

sorción de compuestos carbonilicos, la existencia de cetonas que poseen

una doble ligadura conjugada respecto a la función cetónica. Las curvas de

absorción de los 2-4 dinitroderivados, correspondería a cetonas terpónicas.

FENOLEs se obtuvo los 3-5 dinitrobenzoatos de la sustancia fenólica pre­

viamente separada de ramas. Se trata de pequeñas placas y agudas que comien­

zan a fundir a 1459, 1589 y terminan de fundir a 1689.

De acuerdo a la separación cromatografica y a los P.F. de los 3-5 dini­

troderivados habria: - fenol de Rf 0,53, manchacolor amarillo y P.F. 1450;

isoeugenol, de Rf 0,745, color violeta y P.F. 1589 y presumiblemente m-cre­

sol, de Rf semejante al anterior, color amarillo í P3 F. 1689C.

¿CIDgg x ¿ggflgmg y¿o FENOEQEgTERIFICAQQfi:Se identificó acido propióni­

co e isobutirico; se consideró 1a posibilidad de presencia de l b fencholde P.F. 1570 o borneol de P.F. 156/79 para hojas y de isoborneol para ramas.

CROMATOG ' 0 DE CEITE É ¡NC L DE HOJ 8 Y DE z Nuevamente,

se observa poca resolución, con un pico alto para hojas, que correSpondería

a los'ósteres. Para ramas no se observa tal pico. Se consignaron además, las

curvas de absorción en el ultravioleta, para las distintas fracciones croma­tográficas.BEQQMENg CQNcLUfiIONEfizSe han determinado constantes fisicas y químicas,

se ha separado e identificado ácidos libres y combinados, cetonas, alcoho­

les libres y combinados, fenoles libres y combinados, que bien podrian ser

aprovechadosen posteriores estudios.

Se considera que no cabría su consideración desde el punto de vista de

producción de compuestos, pero si seria provechoso su estudio desde el pun­

to de vista farmacológico ya que se conoce la Adesmia localmente, comode

_/¿ Mi MJU/HH/’ _____> —'

Padrino dc Tesis

Dr. L. A. MCFTES

Mi más profundo y sincero agradeci­

miento al Df. A.L.Montcs, quien hizo po­

sible esto trabajo. Asimismo,dojo cons­

tancia dc que su libro "Analítica dc losProductos aromáticos", fué unaconstanto

guia, dc inestimable valor.

Agradezco asi también a todos aquellos

que en una u otra forma colaboraron para

llevar a feliz término esta tesis, con cs­pecial mención al Dr; Molfino y a la Lic.

-A. Vázquez.­

1'. MIS PQJDRES

"' ,I. p.) g a' . U 0.0 ¡.7 ví- : :0 0...0:1: .. :Oí o...oo 'o' ono . : . :.o.:.:.

-\-,-- h'fi _1'T_| '1‘erng G..;l‘;;;P¿.L ’

1.- ;_;_¿T_1ï.<3¿31.19CIC-;¿:

19) Clasificación Ju los productos arcnáticos...29) Mátodcs Go extracción ¿o las sust. aromática

3Q)Ccujcsición Cc los aceites cs;ncialcs.....o.39) Usosde les aceites oscncialcs.....,........HQ)Los aceites; csoncialcs cn la Lrgcntína.....

59)Explotacióninuustrial.....0................

II .—___AN.BQTÁQLIEÉ:19) Ubicación cn la sistemática....

¿dl onooooooonooooooIoo3Q)Descripciónbotánica.....................,..

UsosiooooooooooccOOoIOOOlQOQooaocon¡000000.0

....Ü.......G...°C.....l.HOSinOidoooOo'nocoooco-¡ooo-¡coo

B)Estudicdel aceite cssncial.................Y oovoeeooaOooooooooeno

Vo" EI_E;I1:[_C.GB¿1F.ELQOOOOOooloccccooooaoanooanan-on.

¡J

..pág.0...0..OOOOG

r'r'mmH

U1

COÑO\O\

. 11

315556

CLASIFICACIÓN DE LOS PRODUCTOS ARQQATICOS

WBajo el nombre de productos aromáticos se agrupa un enorme

número de sustancias de naturaleza quimica compleja, capaces de prg

vocar en el sentido del olfato sensaciones agradables, ejerciendo,

comoasi también, acciones sobre el gusto, vinculadas con aquella.

Tal es asi, que encuentran aplicación en perfumeria, cosmg

tica, condimento de alimentos, elaboración de bebidas, productos me

dicinales, confituras, jaboneria, etc.Su clasificación ha sido encarada con distintos criterios,

según su composicífn,'l m parte del vegetal del que se obtiene, la

familia botánica que les corresponde, etc.

Una clasificación general, basada en su origen, métodos de

obtención o use, seria la siguiente (l)f/ a) Especias: enteras y sus aceites

esencialesb) Aceites de expresión

1 c) Aceites esenciales, o volátilesny!

3 l, Tecetaícs: \ d) Concretos 33 AbsolutosC e) Resinoides }ro f) Posadas y sus concenbadosS

g Polvos aromatizadosA J > , .R ‘a) ue ma- de rumiantesC . miferos: de carnívorosM 1. Verte-_ de CetáceosÁ 'b) de avesT ¿quñ1 o brados:I 2° h' '“res° c) de reptilesC

o JÏ,inve1-Sa) de moluscosS tebra­» dos: lb) de insectos

3. LlntébICCSSreproóeccn los natarïles

e; Artificiales: imitan o nó el aromade naturales, siendo\ de composicióndistinta.

5.

6.moaoduoww

mOOHHuzow>

-2­

Perfumes complejos

Aguas de Colonia y agua floridaDerivados: r

Lociones

Licores

Accesorios:Fijadores: naturales, sintéticos y arti­ficiales.

METODOS DE EXTRAQQlQfi_pE LAS SUBSTANCIASWÉBQfigïggéí

Dado que el rendimiento de sustancias aromá+icas y sus canracteristicasclasificaci

1-wt

o

KH

La comp051c:

des fisicas

- Iaria???V ¿"0_¡. gún el método empleado, se opta por una

en de los mismos:

a) mediante esponja,EL-",15";r: LVI ex- .

b) a la ascudillaste: '2} ]

fc) co; rïehsask

(a) destilacion en agua»or ¿es 5, ¿ión:¿Íiz“ ' " a ‘b) ¿estilación mediante agua y vapor

5 i \ . .. .\cjunesï11aclón nor arrastre con va­por de agua.

J¿¿;hccién N'<;¿nte disolventes volátiles que nos per­q\Jah re: a, ccncretos (¿e vegetaJes frescos) y b) resi­

noiees (de vegetales secos)

Extracción naciente \a) "enfleurage" cn frío"enfleurage" en caliente o

(4) (5) l por digestión

Otros Métodos: a) Método neumático de Fiver (6)

Metodo de Verley (7)

tros métodos de patente elenacon anhídrido carbónico

60.} AC"'r'1'-r\’.\" a'.'.¡.l.h'L\4.".:'“vn” s ipsïras BSEFCIALES

de los aceites esenciaies es compleja; por afinida«se agrupan sustancias químicamente diferentes y en ca­

-3­

da tipo se hallan representadas las distintas funciones: hidrocar­

buros saturados y no saturados, alcoholes primarios, secundarios y

terciarios, aldehidos, cetonas, ácidos, ésteres, éteres óxidos, fenoles, lactonas, etc.

A los componentes conocidos, se los puede agrupar como si­

gue:

l) los compgggntes terppnicos: siendo los más importantes y

característicos los: aciclicos o ciclicos, monoterpénicos,sesqui­

terpénicos y diterpénicos, monoo biciclico; por ejemplo: limoneno,

pineno, canfenc, geraniol, citra , linalol, citronelas, cineol,mentol, mentona, carvona, alcanfcr, vetiverol, santalol, cedrol,

cedreno, etc.

2) los gmeonentes de núcleo bencénico: muyimportantes y

predominantes para algunos aceites esenciales ( por ejemplo en la

canela, tomillo, anís etc.), comoser: benzaldehido, vainillina,

pi;eronal,utimel, anetolymeueenol,-paeimene;wéeidoBenzoico, áci­

do cinámico, etc.

3) los gpmpgnentes alifáticos ge_cadena recta: que en gene­

ral son componentesmenores, siendo particularmente importantes

los ácidos; por ejemplo: fórmico, acético, isovaleriánico, caproi­

co, caprilico, etc. aldehido decilico, metilnonilcetona, metilhep­tenona, etc.

H) los gggpgnggtes sulfuïggggl_nitÏOgGQÉgRíJLÉEüÉEQPIClii

cos: asi comotambién los aún no idencii;cacos; entre ellos: iso­

cianato de alilo (comoonenteprincipal del aceite esencial de mos­

taza), los alil sulfuros (aceite esencial de ajos), sulfuro de bu­tilo y propenilo, sulfuro dicrotilico, antranilato de metilo, indol,furfural,wetcv—u

-h—

USOS DE LOS ACTITES BSEHCIALES9-.

En la antigüedad, los aceites esenciales fueron usados en

la vida religiosa, por distintos pueblos, y en numerosospreparados.

También en la misma época eran buy estimados como antisépticos por

los egipcios, griegos y romanos. El valor comotales, ha sido con­

firmado experimentalmente para algunos de ellos por sus componentes

preponderantes,(9) comoel de la esncla por el cinamaldehido; el de

clavos por el eugenol; el anceliptus9 el timol, cl isocienato de

alilo y los aceites esenciales que los COHÜiGHCJ.

No sólo los usan en Farmacologia conc antisépticos, Sino

también presentan otras propiedades: estimulantes, antineurnlgicos,

anties;asmódicos,"verïiflgos, etc.Algunos componentes han encontrado aplicaciones especiales,

comoen el caso del alcenfor, usado en el extremo oriente para obte­

ner el mejor negro de humopara preparar la tinta china, y en el nun­

do moderno, comoplastificante en la fabricación de peliculas cinemg

tográficas.

Asimismo,se los usa en perfumeria, cosmética, licoreria,

confituras, jabones, etc.

;¿É¿¿g;ggggigïggggggggí EH LA REPUBLIC; ¿363323312

Posibilideggs¿3¿jggtiïg:(lO)Po: sus regiones fitogeográficas de cli­mas variados, crece en la República Argentina, numerosas plantas aro­

máticas nativas, poco estudiadas aún, salvo unas pocas, que en épocas

distintas despertaron el interés de investigadoresaEspecialmente aptas para el cultivo, se consideran z Kisig

tz)(.nes (lemongrass, eucalipto citriodora, vetiver, citronela, mentasCorrientes ‘ Entre Rios (es ecialmente ara Rutáceas) Córdoba San7

Luis (peperina, poleo, yerbabuena, tomillo, Chinchilla, etc.), Saltay Jujuy (alpa mato y horco molle) Rio Negro y Mendoza (lavanda, euca­

-5­

liptus globulus y menta piperita). -ambión en la Provincia de Bue­

nos Aires se ha ensayado con resultado, el cultivo de diversas plan

tas aromáticas (salvia, aenjo, tomillo, perejil, apio, lavanda, men

ta japonesa, etc. y una planta productora de alcanfor: albahaca al­canforera . En el Bolsón (Prov. de Rio Negro) se han efectuado con

tode éxito, desde hace dos años, plantaciones de lúpulo.

Se ha hecho un estudio experimental de adaptación y rendi­

miento en aceites esenciales de diversos vegetales, para la zona de

Concordia (prev. de Entre Rios) (ll), recomendándoseel cultivo y

explotación de: malvarosa, vetiver, dedrón de le India y verbena,

romero, orégano, tomillo, 0to., y numerosas especies florales.

Explotación industrial: (12) La explotación nacional, se ha desa­

rrollado muy lentamente. En el año l9hl fué tan sólo de 11.28% kg.,

contra una importación de 102.866 kg., cantidad inferior con res­

pecto a otros años anteriores a la Segunda Guerra Mundial, puesto

que en 1937'haúïaéé importado 190.9É0 ké. y'éh'igjs 178.332 k¿.(l3)nEn los últimos años, impulsada por las diiicultades de im­

portación, toma incremento esta industria, y en 19h? la producción

sobrepasa las MOtoneladas, en 1953 de 78 a 88 toneladas y para el

ejercicio 1959/196C un total aproximado de 200 toneladas es esti­

mado.

Actualmente, y conforme a datos de reparticiones oficiales,

ha ido disminuyendo, hasta anularse para algunos renglones, la im­

portación de aceites esenciales, comoasi son numerosas las compa­

ñias comerciales e industriales que ubicadas en la Capital Federal,

Mendoza, Corrientes, Misiones, Buenos Aires, Entre Rios, Rio Negro,etc. trabajan aceites esenciales nacionales.

-6_.

DATOS BOTAHICOS QQLLA ADEfiglA BORONIOIDES

UBICACION EN LA SISTEMATICA:

CLASE: Diootiledóneas

SUB-CLASE: _Arquiclamideas

ORDEH: Rosales

FALILIA: Leguminosas

SUB-FALILIA: Papilionoideas

TRIBU: Soforeas (e)

(+) A. Engler y K. Prantl (1h), la ubican comopertinente al

género ngggggiug, dentro de la sub-tribu de las Hedysa­

reas, mientras que en la obra de Burkart (15), se encuen

tra ubicada comoSoforeas, debido a los estambres libres,

que les da un carácter de jerarquía superior, y a la for­

ma_delfrth-(parecido al de.¿gggngpggggg, razón de su encasillamiento en las Hedysareas).

un la tribu de las Soforeas, puede aceptarse la sub-tri­

bu fatagoniinae Taubert, para Adeggig.

FITOGECGRAFIA DEL GEEERQ:

Género exclusivamente sudamericano, comprende más de 120

especies;

El mayor número de ellas se encuentra en el centro de Chi

le y sur y oeste de la Argentina; desde alli irradia el área

marcada por los valles andinos, hasta Bolivia y sur del Perú,

hacia el centro y este argentino y más allá, llega un pequeño

número de especies (Córdoba, Buenos Aires, Mesopotamia Argenti

na, Uruguay, sur del Brasil).

- 7 _

Según un catálogo, Burkart 1939, c, se han citado más de

ochenta especies para la Flora argentina, y aunque esta cifra

requiera una revisión, demuestra que este género es el más nu­

meroso de las leguminosas argentinas.

Se trata de una planta sufrutcscente quebradiza, muygla­

bra, de tallo de 30 a ¿C cm., poco leñoso, articulado y con mu

chas glándulas a modode verrugas que segregan una resina ama­illa.H

Sus ramas son ascendentes, cilindricas, del grueso de una

pluma de cuervo y de 18 a 23 cm. de largo.

Sus hojas miden de 3 a 5 cm. de largo, con grueso peciolo

y 1C a 15 pares de hojuelas alternas u opuestas, orbiculares

trasaovadas, de 2 a 5 nm. de largo, groseramente dentadas, amg

rillentáé;“¿aïiácé¿é“9736n glanáulas gruesas en las márgenes

(16), estipulas algo aparentes, cortas, casi abrazadoras, es­tipelas ausentes. Racinos laterales y terminales obtusos (17)

de 7 a lO cm. de largo, algo valloso, hacia arriba y compuesto

de flores cortanente oblongas, pedicelos más cortos que el cá­

liz, que es ancho y campanulado con 5 dientes o lóbulos y cor­

tamente quinquefido, algo pubescente y tres veces más corto que

el estandarte, que es muyglabro.

Legumbre amplamente oval, muy comprimida, compuesta de tres

artículos algo separados unos de otros y punteada de gruesa

glándulas negruzcas.

Ecológicamente, son criófilas y mesófilas y numerosas espo­cies son xerófilas.

Por lo demás, la utilización de las numerosas especies de

Adesmia, está aún poco estudiada. La mayoria son forrajeras;

los ejemplares se ven a menudomutilados por el ganado y no

hay ninguna constancia de especies tóxicas. Hasta las espino­

sas son, en parte, forraje de cabras. .

Las especies leñosas, inclusive las en cojín, dan leña de

bastante valor, dadas las regiones semidesérticas donde pros­

peran (18).

{ingunaespecie se cultiva.

_ lo _

¿Emma

Estudio del rosínoidc de hojas y ramas do la Adesmia=Eï'

(parafilola)ooooo-o-rooo.ooo-oootonoouoooaooo

B: Estudio del aceite esencial de hojas y de ramas de

la boronioideslli.tO...GOOOOODUIOOOOOOOIOOOOO

ESTUDIO DEL ‘ESINOIDE QE.

-11...

——u — u —

1m

2Q)

3Q)

ha)

59)

69)

79)

8Q)

99)

109)

119)

12o)

13°)

¿030.339.1235 (plgagazs'm)

InatoriO-J...O0.000.000.000.IDeterminaciónde agua..........................Extraccióndel resinoidc.......................Ccras..........................................Absolutos......................................Esendïfi..¡...............................;;....Espectrofotomctría.............................Absorciónen cl u.v. de sol. de rosinoido......

Croln'ïtogrïtfiaooolooc0.000.000.000.UOUOOOOOOOOI.

Cromatografía monodimensicnal en placa de loscompuestosfenólicos.........................áciCÉCOÓCOQOOOOOOO.OIIOIOIOOO.OO00;...

65tcr......IOOOOIIOÓCDOCOOOOOUOIOI...

Indice¿osaponificación.......................

IIOJAé;¿zasRama,

12

12

12

13

13

14

15

19

22

28

29

29

29

Para la realización del presento trabaje, se utilizó elmaterial facilitado por la Dirección de Parques Nacionales, cg

rrespondiente a la especie Adesmiaboroeioides Hooker, conoci­

da comunmente con el nombre de "paramele"(l9) y cuyo nombre a­

raucano es el ¿e "yaqneu".

Se trata de un arbusto glutinoso inerme, comúnen la Patg

gonia, conocido localmente comode valor mediciral; es utilizg

¿o para vias respiratorias, comosaumerio, y tanbien comoageL

te digestivo.

semestres A614:Para la determinación de agua en el material vegetal, se

utilizó el aparato Go Biúwell y Sterling (20), donde le muestra

es destilada con un liquido inmiscible en agua (tolueno satu­

rado con agua).

Este aparato posee una trcnpa especial que colecta y mide

el agua condensada y donde el disolvente roba sa y vuelvo aldestilador.

Valor obtenido para hojas: 11,3 %

Valor obtenido para ramas: 12,5 %

EEBA®.LO;¿_QF¿_¿ELE

Conel propósito oe extraer los principios aromáticos

del material vege el, se ha procedido al cálculo del rendi­

miento en distintos disolventes, comoser: alcohol etílico yéter de petróleo.

Mrs.s-.c>_biea.i9_%=

Begin ide qe hoias:--.- 4... ...r-_.._“:cA‘...

- 13 _

Extracto etérec (sólido pastcso, aromático de color

eme-‘31? 'z e- "11) " 9.u...(..Ï ...,_...O «.11<..I311,]¿.(AO J, ._

Extracto alcoholico (sólido tastoso, aromático, de

color pardo) 25,3%

secado a vacio y a MOQ 23,05

Extracto alcohólico (sólido pastoso, aromático, de

color pardo vcrdoso) 12,C%

ol o:s'fuie-ce stinun” se - ¿ALJe ' ' - ocP r c v 1) n’ , e"L 1‘ o cl vtw cto etérco “e poco

alor, se prOCcdió, por separado, a la obtención de los extrag

tos alcohólicos ¿e hojas y de las ramas previamente molidas, e

reflujo.La separación del disolvente se efectuó luego del enfria­

miento en helaeera y posterior filtración, por cestilación cncolumna e presión reducida.

Por tratamiento con alcohol etílico en caliente, se di­'1suelven todos los componentes aromáticos ee los resinoides, prg

cipitando por enfriamiento las ceras y otros acompaïantes, se

filtre, retiene el precipitado, elimina el alcohol, obteniéndo­se:

Ceras de hojas 16,17%

Ceras de ramas 11,92%

¿ESQ-929.2:

Se procede a eliminar el alcohol Ce los liquidos del fil­

trado, que aún contienen de un 50 í a un 80 fl de roeuctos ce­

rosos solubles, que contribuyen a fijar los aromas y pigmentos.

Se trata de liquidos viscosos d: color pardo obscuro.

Efectuando el arrastre por vapor ee agua, sc separa elaceite esencial:

Esencia de hojas 2,52%

Esencia 19 ramas 1,01%

Rosiduo etéreo de hojas 39,6H%

Rosiduo etéreo de ramas H,9h%

.E.5'.E.I‘;2'CIA=

Una vez efectuado el arrastre con vapor do agua, se inso­

lubilizó la csoncia con cloruro de sodio y extrajo con éterctilíco.

- 15' ­

BSJJCTROFOTOEETRLA: ABSORCION EN EL ULTRAVIC ETA-wLa espectrofotometria de absorción está basada en la dis­

minución de intensidad de un rayo de luz monocromático al pa­

sar a través de una solución, debiéndose esto fundamentalmente,

a la absorción de la luz por la solución.

La propiedad que presentan ciertos compuestos orgánicos y

también inorganicos, de adsorber radiaciones de distinta lon­

gitud de onda, se debe a que poseen en su molécula grupos cro­

(

La absorción se llama gglggtiïa cuando se produce en forma

más intensa en ciertas regiones del es;ectro. Asi, la mayoriade los aceites esenciales muestran una absorción selectiva de

luz ultravioleta, por lo que se los estudia en la región delespectro que va desde h.0CO A a 2200 A. El primero es el limite

arbitrario que se‘confunde con la región-visible; el segundoe_tá fijado por los aparatos utilizados y la transparencia de losdisolventes usados.

Gaia aceite esencial, como asi los componentes del mismo,

presentan una absorción caracteristica, de nodo que el estudio

de la curva dada por el poder de absorción respecto de las di­

ferentes longitudes de onda, permite su identificación, como

también juzgar su pureza (22) (23)

luis-¡1992:La reducción de la intensidad de un haz de luz monocromá­

tica que pasa a través de un medio absorbente, depende:

a) de la concentración de la solución;

b) de la-longitud-del canino recorrido a través de ese me­

dio por el rayo incidente;

.'. 16_­

c) del poder de absorción de la sustancia o solución a

una determinada longitud de onda.Las relaciones cuantitativas de estos factores están de­

finidas en las leyes de Lambert y de Beer.

La ;¿Q¿533_ngbgrt establece que, si IO es la intensidadde la luz incidente de una determinada longitud de onda que pee

netra en un medio absorbente homogéneo, de espesor d (espesor de

la celda, en centimetros), e I es la intensidad de luz emergen­

te, su relación será:

siendo g el coeficiente de absorción.También:

log É, : E : D extinción o densidad óptica oabsorbancia del “odie.

La lg1¿a¿jïgr relaciona el coeficiente de absorción conla concentración-ée-la-sastancianabsorbente+w

¡.1a z 1 . c siendo g el coeficiente de proporcignalidad.

Relacionando ambas leyes se tiene:

E = D k log Ég a k.c.dadonde g es en este caso, la medida de la capacidad de absorción

..de la luz para una sustancia dada y a una determinada longitud

Es una constante pa‘: las sustancias cue obedezcan la leyL

ee Lambert-Beer, a cualquier dilución o espesor de capa absorben

Come la longitud G se expresa en centimetros, la defini­

ción de :.dependerá de cono se exprese la concentración g, Sien­de las siguientes las más comunes:

- 17 ­

a) si g está dada en mol-gramo por litro, g se llama ce;

ficientc molecular de absorción o extinción GE);

b) si g sc expresa en gramos por litro, g se llama coefim

ciente especifico de absorción o extinción ( K, k,aL);. . 1. 1%

c) Sl g se ineica en gramos por lOC ml, g es El/Cm.

Esta última puede transformarse cn el coeficiente eSpeCÍu

fico multiplicando per 0,1 y g se transforma enjÉ, multiplicando

por ;l peso molecular de l; sustancia absorbente.Comolos valores dc los coeficientes de extinción varian

con la longitud dc onCa, para obtener el espectro ¿e absorción7

se construye un gráfico en que figuren valores de coeficientes

de extinción comoordenadws, y las corresgonCientes longitt.i

de onda come abciszs; en la curva obtenida, los máximosineïca;

las longitudss se onda en las cua_es la sustancia present: ab; rción selectiva. .

Unade 1€:“cbnciaisnós requeríáas.á.rá la exactitud de las

determinaciOLcs es la elección d;l disolvente, wuecebc pre n“"r

absorción minima en la región estudiada.

Alarm s-32213245.Los cspectrofotómetros corscan esencialmente de:

a) un pri ma para d ispersar la luz;

o un sistema óptico que inclure los recipientms con la so­

'lución absorbente y con el solvente puro;

sara comparar las intensidades (Io) de laluz transmitida por al solvente y (I) transmitida por la so'ucion.

Al traba ar con luz ultravioleta, todo el sistema Gebe sar

En Luestro caso, se utilizó un Carl aciss PMQ II, C01 eeu¿

_ 18 _

Los aceites muestra“ una activida- variable (2%), de-pen­

Cu iendo dc su composición. Se ha comprobado el fuerte poder ab­

sorbentc que poseen los fenoles, sus'óstercs y los aceites eseg

ciales que los contienen, los aldehidos y cetonas y la influen­

cia que tiene la estructura del resto de la molécula, de los ng

cleos bencónieos, de los derivados de alcoholes y fenoles de los

3-5 dinitrobenzoatos por la introducción de esta agrupación ató­mica y semicarbazonas de a dehidos y cetonas. Comoasi también,

2 dinitrofenilhidrazonas de estos últimos.

Se ha observado también la variación notable que sufre la

curva de absorción del aceite esencial cuando Se lo priva e al­

guno de sus componentes, como asi también la influencia de un dg

terninado grupo cromófero sobre otros.

Es ¿e muchautilidad la sensibilidad que presentan los deri

vados de los compuestos nombrados anteriermente, sobre todo cuan

do se dispone de pequefas cantidades de muestra, que no alcanzan

para determinar los pratos de fusión de los derivados y además

un auxiliar poderoso para confirmar otros datos de identifica­ción.

De todo esto, sc infiere que la espectrofotometria er el

ultravioleta, es una valiosa técnica auxiliar para el estudio delos aceites esenciales ya sea en su identificación comoasi tam­

bién, para valorar algunos componentesy develar las adultera­ciones.

EÉKBPEEHFDLCÁ @.T..R_Ïix_:..É&Ï-3_S.O_R.C.ïïp.ïí .33}. .U.I¿.TÏ’LAÏI.9.I¿EÏÁ:

Las determinacionus fueron cfcctuuÜfis con soluciones

al 1%00de -csinoidc en alcohol libro de aldohidos.

SCutilizó a tal efecto el espectrofotómctro GoCarl

Zeiss PM Q II

El estudio Cc 1: tabla de valores obtenidos, que so coasirna a continuación muestra para :1 rasinoicc de ramas

7 - a

los siguientes máximos y minimos:

Longitud to onda cn mu: 250 E —0,62 niniwo

Oitud fic onda en mu: 270 a : ,70 máximo

Para el :csinoidc de hojas no su obscrvan cxtinciones

máximas o minimas

ngmígxymmág_11AA@QQHMENQAEEMmEEïAgggjfiïfijïggngfirRAMAS Y HOJAS DE LA ADESEIA BORONIOIQEQ

(PAR LA)

Longitudos de onda Extincionos ramas Extinciones hoja

mu (milimicras) log ¿EQ= E log _I__o___E

215 1,87 1,95

225 1,695 1,66230 1,57 1,57235 1,16 1,38245 0,655 1,05250 0,62 0,95255 0,625 0,88260 0,66 O,8’-:­0,69 0,83270 0,70 0,80272 0,70 0,785271-l 0,69 0,7657?"? 0,68 0,7h2.20 0,6% 0,693*: 0,59 0,6352.90 0,1}65 0,565¿VC 0,36 O,L:7310 0,305 0,H13M" 09235 09335330 0,195 . 0928300 0,175 ! 0,25350 0,165 0,235

si

- c­

CROMATOGMIA - EVOLUCIóg HISTÓRICA:

Al comienzodel presente siglo (1903), el investigador ru;

so Tswett, desarrolló un método de absorción para la separación

de pigmentos de plantas, al que denominó cromatografía, debido a

las bandas coloreadas que se formaban en cl adsorbcnte. Las o­

bras clásicas referentes al análisis cromatográfico, lo considg

ran comoiniciador del método (25) (26).

Previamente (1850) F.F.aunge analizó mezclas de colorantes

sobre papel secante y se interesó en las posibilidades del uso

del ascenso capilar de ciertas disoluciones en bloques de made­

ra, ya que así se produce la separación de los solutos.

Goppelsroeder, discípulo de Schonbein, investigó dicha po­

sibilidad coincidiendo sus publicaciones con las de Tswett.Schonbcil demostró que introduciendo tiras de papel cn agua

que contenga sales inorgánicas, avanza el-firente líquido arras­

trando cationes inorgánicos, los cua es se muevenindependiente­

mente, según su estado relativo de difusibilidad.

Ctros investigadores extendieron los métodos cromatografí­

cos por varios caminos, inclusive a sustancias incoloras, y si

bien el término cromatografía, tal comoes usado hoy, es erróneo.

está bien establecido y es difícil reemplazarlo por otro más de;criptivo.

Sin embargo, y a despecho de su simplicidad, es poco utili

zado, hasta que recién en el año 1931, Kuhn y Lederer lo aplica

ron para separar alfa y beta carotenos, recibiendo los métodos

de absorción cromatográfica un notable impulso y difusión. A ell<

contribuyeron_tamhión«los-estudios-sobre enzimas-de Willstater y

su escuela; se continuó con el estudio de otros carotenoides

-23­(Winterstein y Karrcr), se pasó al campode las vitaminas y sc

incursionó en el campode la quimica orgánica; se resolvieron

mezclas de elementos, de iones inorgánicos y aún de isótopos.

Es extraordinaria la forma que tiene su desarrollo, siem­

pre con una incrcmanada velocidad y son por fin numerosos'lostrabajos que periódicamente se publican en todo el mundo.

LÉMQS__CRC2;&JZOPELÁI_IQOS=

93.01:‘=.€-t<:.&r;«<afíasan. É.9.J:Ll*7‘nP-.._d..’fase.- lisLui_-- ---n— — —-..---—.- "-­

Adsorc1ón Tswctt l9C3

I":,1c_é; Haitin v Syng‘ 19hl

Cr ‘ e iónico v*1 "s tI-L j : -n 10H?

gggnntogrzfi: en papel:

Consden, Gordon y Martin/ 0

9301:: i .—‘ 5.9.5.9;.823.--.. .. __-._. .__

Adscrción Hesse l9h2

r:_cic-61 James y Eartin 1952Todos los métodos involucran una distribución del material

para ser separados entre dos fases con movimiento dc una con

respecto a otra. Generalmente, una fase es fija y la otra mó­

il. Le fase fija puede ser sólida o liquida, pues de otro modo<:

no es convenientemente fija. La fase móvil puede ser liquida o

Actualmente es aún utilizada la ;orma descripta por consden,

Mer in (27), quienes desarrollaron este proceso al noC.) 0 H D; O .5 k; d­

podcr sonarar_mezclas de aminoácidos_en columnas de sílice-gel._

¿n la celulosa del panel (papel de filtro WhatmannQ l, ya.I.

_ 2h _

que no todos son iguales en su eficacia), encontraron un adecua

do carrier cn que los aminoácidos puedenser separados por partición directa.

La mayorventaja respecto a la cromatografía de partición

en columna es que es posible trabajar con cantidades sumamente

pequeñas.

Las diferencias de velocidad de movimiento de los componentes son causadas por los distintos coeficientes de partición.

La distancia recorrida por la sustancia en un cierto disolvente

puede ser cuidadosamente determinada y cuando la rclacicnamos

cen la distancia recorrida por el mismoCisolv nte, habremos op

tenif: t;a pïïpiñifd intrínseca del mismo.

31 valer Ef es la relación entre la distancia desde el pun­zcncro de la manchay el punto de partida al

Jc; {a(:1 disolvente,“fran

Conocs riemart mayor el recorrido del disolvente, el valorIA.

de R? es siemnre menor de 1.J.

CROLATOGRÍFÍA EN PLfCA (CHROKATOSTRIP):

Su técnica, ideada por Kirchner, Miller f Keller, consistirA

Lcn cubrir con una caeafinisima de adsorbcnte, una tira de vi­

drio. Luego se estaba en presencia de una tira adsorbonte que SL

crematografiaba tal comouna tira de papel.

Sus autores la usaron con éxito para diversas sustancias;

tenia el inconveniente de variar el Rf de tira en tira. Standaarizado el método, se alcanzó una reproductividad de hasta cua­tro unidadgsn

Este mÉtOdo'fuó mejorado por Montes y Labat (28ïfl

Reitzema (29) utiliza un chromatoplatq que permite alreden

-25­dor de cuatro cromatografias independientes a la voz, eliminan

do, por consiguiente, 1a variación de los Rf. Utiliza, asimis­mo, una mezcla de ácido salicilico y almidón empastados a baño

Maria. La sílice es previamente tamizada por 200 mallas; la su

perficie de la placa debe ser uniforme, nunca áspera o rugosa.

El calentamiento de la placa adsorbente esla operación

más importante pues es cuando se activa. Cuanto mejor se activa

la silica al vacio, mayores el poder resolutorio de la placa.

Qüi'áïf sm. .I.A..E.PL_C_QI¿ÍIP¿TLA.=

A pesar de que los primeros trabajos fueron hechos sobre

papel, el método que desarrolló primero fuó el de columna;

Fundamentalmenteconsta de un tubo de vidrio con un esti­

ramiento en un extremc, con un pequeño tapón: de41ana de vidrio,

papel Ce filtro, alzocón, o un disco poroso y sobre éste el ma­terial adsorbente.

Los adsorbentas utilizados son en la mayoria de los casos

óxidos, hidróxidos, sales alcalino-tórreas, comeasi, substan­cias polares.

La dificultad principal en el desarrollo de una teoria

'matemática del análisis cromatográfico, estriba en que la formación del cromatograma es un fenómeno dinámico durante el cual

se produce una adsorción y una deserción simultáneas y conti­

nuan, alas que siguen una readsorción de la sustancia que se está separando en la columna.

El primer intento de una teoria cuantitativa pare.1a adsog

ción cromatográfica se debe a Wilson (30), quien recién en el

año 19H0formula una relación diferencial que rige el proceso de

adsorción en una columna cromatográfica.

En l9hl Martin y Synge (31), publican una teoria de la cro­

- 26 _

matografía de partición que puede aplicarse a la cromatogra­

fía común, comparando la columna cromatográfica con una colum­

na de destilación fraccionada que comprende un número de pla­

tos teóricos elementales sobre la base teórica de la inexis­

tencia de un equilibrio en todos los puntos de la columna y

considerando despreciables los efectos de difusión entre plato

y plato. Meyer y Tompkinsla perfeccionaron, pudiendo asi pre­

ver la composición del líquido que se escurre de la columna.

La teoría de Wilson ha sido completada por Weiss (32),

Offord (33), De Vault (34) y Glueckauf y sus colaboradores (35).

papi-aaoeaaiaEl principio de este método se encuentra descripto por Mar

tin y Synge en un trabajo de introducción para otra clase de cro­

natoqrafía (36). La idea del uso de una fase móvil gaseosa no.

lui ¿¿LICDÉQWCRteexplota a hasta que James y Martin (50, pubri­

caron su clásico trabajo.

Sus técnicas se encuentran en constante perfeccionamiento,

habiéndose alcanzado mayor sensibilidad para mínimas cantidades

de muestras ( del orden de los microlitros o inferiores).

La naturaleza de la fase fija, es base para subdivisiones

majores: si se trata de un sólido (comocarbón activado), el mé­

todo se llama cromatografía gas-sólido. Si la fase fija es un 1;quido se denominacromatografía gas-líquido o cromatografía de

partición gas-líquido.El líquido fijo es utilizado comoun delgado film sobre pa;

tículas sólidas o en la pared interior de una columnacapilar (38)

Los metodos empleados mas comunmente scn tres, a saber: E12

ción, desplazhïiento y análisis frontal.Analisiswfrgntal: la muestra pasa continuamente a través de la

-27.

columna con adsorbente. Los componentes emergen en el orden de

sus afinidades relativas por el adsorbente, pero sólo el primg

ro es separado del resto de los componentes.

Análisis por desplaquiento: la muestra es puesta sobre una te;minación de columna adsorbente. Un.cas carrier conteniendo el

vapor de una sustancia más fuertemente adsorbible que cualquier

componente de la muestra, es pasado a través de la columna. Es­

te desplaza la muestra por el adsorbente y cada uno de los com­

ponentes tiende a separarse de los otros que son menos fuerte­

mente adscrbidos y se ordenan en zonas bien definidas en orden

de su creciente afinidad por el adsorbente y eventualmente, eme;

gen en sucesión.

glugignz Esto método involucra el constante pzsaje de un gas

carrier a través del sistema.

la ¿n;stra, gaseosa o liquido volátil, es introducida a es­

:n y transportada sobre la columna de acsorbente. Cada con

abc ¿e Ois;ribuye de una manera caracteristica entre le fase

¿Ppposzy i: fiSe tija (sólida e liquida) y aquella porción que

está un gaseosa s; nueve con el ¿ortadcr. Los componentes

sel se : u: y ydsrn desde la columna a la corriente efluyen­

te a distintts tierpos.

El tiempo de retención ta es un medio de determinación cug

litativa y está vinculado a su tempetatura de ebullición y mag­

nitud molecular, y la altura del pico o el área encerrada es proporcional a las cantidades de sustancias que los producen.

-28...

comagsros FEI-IOLICOÉ:

De 1a observación de la curva de absorción, se desprende

una inflexión correspondiente a fenolos, procediéndose por con

siguiente, a la separación de los componentesfenólicos.

Tomar2 g. de resinoide, disolver en éter de petróleo li­

viano, cuyo papel es vehiculizar 1a esencia, y agitar con solg

ción acuosa al 5 % de KOH(dos porciones de 20 ml. e/u.). Sepé

rar la solución alcalina, filtrar, acidular con SOHHgal 20 %

y extraer con ótcr etílico. Secar con SOqNaQanh., evaporar y

La sustancia separada corresponderá a los fenolos.

Fcnoles presentes em el resinoide de ranas: 10,13%

lara el resinoido ¿e hojas no se observa a mencionada in­

%..*:ïfi.:I:1.

ego; 1_.'a_ï.-?_0¿¿_‘.—_'R_I-._I«_‘_Ï:L‘_I¡;01’=02)IDEELSÁOÍEAL E2; PLACA E LOS COMPUESTú s

findeJul-­_.. .._.

a)Conccntración de la solución etérea: 0,3 ng/ml.

b)Distancia cubierta por el solvente: 1%,9cm.c)Tiempo de desarrollo: 2 horas

d)Sc1vente: acetato de etilo-étor de petróleo 609/709aprox. 3:7

o)Reactivo: para nitroanilina diazotada

Rfm Rfa Rfr Color de la mancha

0,7H5 0,75 1,37 violeta rodeada de co­loración amarilla0,53 0,555 0,98 amarillo parsuzco

0,128 0,15% 0,23 amarillo

0,07H 0,0765 0,13 anaranjado

(+) Rfr: Rf relativo al fenol (Rf_fen01: 0,5%)La fracción fenólica centenaria por lo menosdos fenoles,

a los que corresponderían los deos primeros datos de Rf.

_29.

Además, 1a primera mancha de color violeta, rodeada de u­

na aureola amarilla, indicaria la presencia de una mezcla de

fenoles. Sobre la misma linea, las manchas de Rf pequeño, po­

drian smrdepolifenoles.

ÍNDICES DE ÁCIDCLÍÉSTER Y SAPONIFICACIÓN EN LOS REsgggrQEs DE

RAMAS Y HOJAQ:IIndlgp de ácido:

"Es el número de mg. de KOHnecesarios para neutralizar

los ácidos grasos libros de l gramodo resinoido".

gégngoa: 'n un orlenmoysr ¿o boca osmorilada se disuelven l grg1mouC r2sinoice on 5 ml. oo etanol noutralizado al rojo ¿onol.

So T‘ÏQÏÏ iv reidcz libro con solución acuosa C,lï de NaOH.l‘A. : --..:Luïngrga-lïéïíC>14;...._

poso del rosinoidc en g.

nero do mg. de KOHnecesarios para saponificar

los óstcrcs de l gramo de rosinoido"

Té nick: Luegode la valoración Co la acidez libre, se procede

a agregar 10 ml. de KOH0,5N en solución alcohólica, y so ca­

lienta a rcilujo durante 2 horas (en baño maría). Sc enfría y

valora ol enceso de álcali con solución do HCl 0,5N. So efectúa

paralelamente un blanco.

I.E.: 28.05 x ml. de KOH0,5Npeso del resinoido en gramos

Índico de saponificggign:

"Es ol número do mg. do KOHnecesarios para noutralizo“

los ácidos grasos libros y saponificar los óstoros de

l gramo do rosinoide"

1.8. = ICA + IDE.

u-30-o

CUADROCQEBARATIVO QQÏLOS DISTINTOS ÍNDIggg

n? de_goter— I.A. I.E. I.S.TÍnaCl n Hojgg Ragas Hojas Ramas Hojas +_nggg_

1 37,82 17,93 5,72 80,2% h3,5n 97,67

2 39,22 16,98 5,9+ h 92,09 HH,90 109,07

3 39,16 17,53 5,67 81,22 hu,83 98,75

h 38,97 16,H}_4__¿¿72 77,55 E3369 93,96_Promcdios 38,79 17,08 5,85 82,77 H4,65 99,80

_ 31 ­

ESTUDIO DEL ACEITE ESEI‘ECLLL HOJAS _13_EJ__R¿L_I‘E_¡¿5__D_E__L_¿Ï¿

ADESMIA BOROHIGIPBS Iflflnfianl

Obtencióndela eSencia................................Caracteresorganolópticos..............................Pesoespecífico........................................Indicederefracción...................................Indicesde ácido, óster y sapcnificación...............

del aceiteCromatografía U -e hojas y ramas......Absorc. en el u.v. de solución de aceite csencial......Determinacióndealcoholes.............................Identificación¿e ácidoslibres........................Determinaciónde compuestoscarbonílices...............Separaciónde compuestoscarbonílicos..................Investigacióndc compuestoscarboníliccs...............Investigacióndefenoles...............................Identificaciónde ácidoscsterifiCnlos.................

esterificados..Identificación de alcoholes y/o fenelus

Cromatografía gaseesa ¿el aceite es. de hojas...........1Absorc.en el ultra violeta del ac. es. o; hojas.......

Cromatografíadel aceite esencial de r:nas.............Absorciónen el u.v. del aceite esencial de ramas......

32

32

32

32

32

33

35

37

38

39

H2

50

52

53

OBTENCIÓN DQ:LA Esgygggz

Efectuado el arrastre con vapor de agua, como se indica en

la pág. 14, se procedió a insolubilizar la esencia con clorurode sodio y extrajo con éter etílico.

Recuperado ol éter, se terminó la eliminación del mismoe

presión reducida.

CARACTERQLORGANOLÉEIQOÉ:

HOJAS RAMAS

Color pardo rojizo pardo rojizontos maduros masOlor frutos maduros fru

penotrantos

En amboscasos se trata de fluidos Iirpidos, ligeramente

2

Rïsp.3;}BC;FICQ: (por duplicaJo) a 20°C

>'.;-L:‘).aoeoOIa;'.-ooot‘o

l:í-.:-ït'8-Sonontoooc0...0!-_"-._. ñ _. _ Y _.I‘ A o

a: of. ui;J‘-'RA(:C_LON_.5__29¿2¿J_: ns..._7. ... __—-....__.....«. .­

oe d ¿trainó con refrautómetro de Abbe (39), que permite

efectuar 1¿ ¿octuLo con luz blanca, puesto que dispone de un

sistema compensadorpozu obtener el dato para le linea D del

espectro, en el que so suele expresar:

I-Io.jas Ram as

migo 1,49305 1,h9255I 112919.3; (verpág.29)

I90OOOIOO go.o..'- 'l '. "1 ¿I 'n.v‘394.91-14;gm;= (ver pág. 29)

+' -'r, 31+ P 01+IiOdnS.soolueoooo79’J ¡{:{maSolnooooooU

ÍIZLJ'JE DE SAEOIÏIFICACION: (ver pág. 29)

Hojas..........l23,55 Ramas........12h,63

'33­SfiflyíïofifisïíLÁAfiáQïfa.DELWACïIlïfifiïï10.23-.QKQJAS...

Homesutilizado el método dc olución descripto oa la pág.

27, y para cllo el aparato Per¿in El:cr,Modolo 15HD.

So utilizó además nitrógeno como gas uluycnto y una colum­

na SAIB(diacctato hoxabutirato de sacarosa 10%sobre tierras Gp

diatcrncas).

lELu>01..

3 W/w í 3 WAY

| SOLENGAL)

V ALVE VALVE

_ r7

u \ L|QU|DPQESS RE GAUGEx SAMPLING

CARM“ VALVE

GA‘ 0wSuPPLY Fl. METER'\

|-—-—-- PRESSUREREGULATOR

\ FLOW SCHEMA‘HCOF MODEL 154-0 VAPOR FRACTOÁ’ER

:Longitudes de onda

- 35 ­

VALORES OBTENIDOS PARA LA ABSORCION EN EL ULTRAVIOLETA

DEL ACEITE ESENCIAL DE HOJAS Y RAMAS QE LA ADESMIA BO­

NIOIDES (PARIÉELÁQ

Extinciones hojas Extincioncs ramas1

f mu (milimicras) ¿ log:Ï°: E ¡ log. ¿0; E

215 1,67 r 1,63220 1,81 1,68225 2,07 ‘ 1,85230 2,37 1 1,98

2 5 2,53 2,032 0 2,h7 1,92h5 2,22 1,7%250 1,83 . 1,07255 1,27 1,12260 0,83 0,84265 0,56 0,6627g 0,h2 0,55275 , 0,3%5 ¡ o,h95280 n 0,305 s 0,155285 0,272 0,h229¿ 0,2h3 0,38505 0,22 0,3h7

300 0,1 —w —- 0,305310 0,152 0,225320 0,117 0,172330 0,087 0,1263+0 0,060 0,085350 0,0%0 I 0,060

-37­

ELEJJJLACJLQILQE.¿209.120.185

Los alcoholes presentes en las esencias puedenser: prima­

rios, secundarios y/o terciarios. Son en general de aromasuave,

dulce y persistente, en especial, los terpénicos y sesquiterpé­nicos.

El fundamentode los métodos de valoración es le esterifi­

cación mediante distintos radicales ácidos o sus derivados (anhi

dridos o cloruros, principalmente), variando las condiciones y elcataliZador utilizado.

Para le determinación de alcoholes totales, hemosaplicado

el metodode acetilación descripto por Fiore y adoptado por la

"Essential Oil Ass." of U.S.A.

ceá En un erlenmeyer con tapa esaerilada, se colocan, enfría

do con hielo, lO ml. de alcohol aislado o de aceite esencial (prev

Viamonte secado con SOMNeQehh.) y una vez bien frio se agregan

Ú.. ¿e iihubil-enilina (libre de monometilanilina, sueeptible

de ser ¿Cotilafia), se mezcle bien y agregan 8 ml. de cloruro de

ucetilo y 5 si. de anhídrido acético (sirve comodisolvente para

evitar le cristalización de le mesareaccionante). Se enfría unos

minutos y Ceja lue e a temperatura'ambiente por medie hora; se su»

merge en baño de esta a HOQC1 lQC, por 3 horas. Luego el aceite

acetilado se leva con 75 ml. de agua helada, por 3 veces y des­

pués con porciones de 25 ml. de SOhHQal 5%, para eliminar la di­

metil-enilina y con solución de CO3Na2al 10%para eliminar elácido y finalmente con agua destilada, hasta neutralidad. El acei­

te se seca con SOhNa2anh. y determina su indice de óster, segúnel procedimiento indicado para los ésteres cn la pág.29.

El resultado, cuando son varios los alcoholes presentes, se

exprese comoindice de óster, luego de acetilar:. . - 2 0 n 0‘ O WI.E. oespuósde acetller - ”-*°Éhrjíjílgfigí¿í*íáa-""“‘““- peso eel aceite acecllado en g.

-38­

:Tambiónpuede expresarse en porcentaje de hidroxilo al­cohólico:

OH % : 17 x ml. de KOH 0,5N20 (g. de aceite acetilado - 0,021 x ml.KOH0,5

El valor 0,021 corresponde al peso que se incorpore al acw

te durante la acetilación, por m1. de KOH0,5N gastados, (es le

cir, peso del radical de acetilo, menosun hidrógeno que pierd;

el alcohol por m1. de solución 0,5N).1Valores obteni-os:

Índice de ester % OHalcohólico

Hojas. 135,36 h,u8

Ramas 159,79 H,7l

QEEEIÏICÁQI'ÓH __D‘E‘¿-jLCIDOS GRASOS LIBRES:

Los aceites esenciales, por ser productos obtenidos por

arrastrr con vapor de agua, pueeen poseer ácidos grasos libres

Los más ccmunmcntepresentes en los aceites esenciales veulátiles sen:

a) solubles en agua: fórmico, prepiónico, butirico, isobutili­co e iseveleriánico.

b) pece solubles en agua: ceproico

c) inseluh es en agua: cáyrico y láurico (este último destila

parcialmente)

¿É_nicg: Se separen los ácidos con solución de CO3Na2el 5%yse hace le observación microscópica por el método de Deniges (MC

En un portaobjctcs se coloca una gota dc la solución de e­

senc'a a estudiar, y una gota de reactivo plata amoniacel (N03Ap

el 3%y NH3hasta redisclución de precipitado)Se deje difundir los dos líquidos. Se observa cristales

bien netos, de diferentes aspectos, según el ácido de que setr Citi?.

- 39 ­

En nuestro caso identificamos, en su mayor parte, ¿oigo

Brooiggigg, tanto para hojas como para ramas y en un menor por­

centaje ¿gigg_¿sggggirico.

_¿ggngFICACIóN Qg_COMPUEsrosCARBQrírrggs:

Se utilizó el metodo de Shrincr y Fuson (H1)

Eggnicg: Egggïilo: 0,Hg de sulfato de 2-hdinitrofenilnidrazi“

más 2 m1. de SOHH2conc.. Se hace unapasta y se agregan 3 ml.

agua, gota a gota, agitando hasta solución completa. A la mis­

ma aún caliente, se adicionan lO ml. de alcohol de 959, libre

(Dd- aldehides. Si no queda suficientemente limpida la solución,

se filtra. figlggiáfi¿¿y¿¿ygjgyygligg: 0,5g. de compuesto carbo­

niliOO ¡c disuelven en 20 m1. de alcohol de 959 libro de a1­dehiáos.r

Ala solución de cerbonilico se le agrega la solución del

ÏJCCtíVOy se Ceja a temperatura ambiente. En general la cris»

talización se produce entre 5 y lO minutos. Si asi no ceurrior'

a estar por una noche. Excepciona mente es necesario ca­

lentar a reflujo por unos minutos. Se recristaliza de alcoLol

etílico o de acetato dc etilo, ácido acético glacial, xilono (nitrobenceno.

Ennuestro caso se obtuvieron cristales d; color rojizo,cuyos puntos de fusión corrOSpondientes son:

Hojas......... 1H2oc Ramas.......1h2/3QC.Se preparó solución alcohólica al 2%00de los cristales

de ramas para la ulterior observación al espectrofotómetro,obteniéndose los valores y curva que se consignan a continua­ción

--—.­

- no ­

VALORES OBTENIDOS PARA LA ABSORCICNQ_EN EL ULTRAVIOLETA

DE DERIVADOSDE LA 2-h dinitrofenilhidrazina DE COMEHQE;

TOS CARBONILICOS DEL ACEITE ESENCIAL DE RAMAS DE LA

ADESMIA BOROHlolggfi (PARAMELJ9__

Longitudes de onda Extinciones E

mu(milimicras) log %”: EL__L J

215 0,258217 0,27218 0,275220 0,285225 0,255230 0,20223*; 0,1%2%0 1 0,122h5 0,117250 0,108255 0,12260 0,12265 0,115270 0,107275 0,105280 0,096285 - 0,082290 0,06h295 0,050300 0,038305 0,027310 0,022320 0,02333o 0,0383H0 0,058350 0,08360 0,111370 0,195375 0,1+5378 0,148380 a 0,1%9385 0,15239o 0,153 ¿395 0,1h7 sMCO 0,140 '

y

Í

y. (n “nm “4-. .,

w- .-,‘..,. ,.W.,¿...¿.._

H“Tumm.

¿EÏARACION DE LOS PRODUCTOS CARngrtrgqs (ALDE‘FHDOSY CETOEGAS):

fiátodo por absorción:

Los aldehidos y cetonas dan compuestos de adición con el

sulfito de sodio y con el bisulfito de sodio, de acuerdo a lassiguientes reacciones:

19) R-CH=O 4 SO3HNa = R-COSO3Na

2Q) R—CH=O+ SO3Na2 g R-CosogNa e OHNa

Estos derivados son doscompuestos por la acción de los á­

oidos minerales o bien por los álcalis, dejando en libertad al

aldeñido o cetona, que luego puede ser identificado.

En nuestro caso, hemos procedido a la absorción con sulfi­

tc neutro de sodio, en solución saturada, que pone en libertad

NaOHque se neutraliza con solución de acético 10%a la fenol­

ftaloina. Se prosigue neutralizando hasta que no hay producción

ie color, controlando, en esta forma, el final de reacción.Se alcaliniza y extrae con éter etílico.

EUSÉLTJEÁCJÉJLQE. 9923923.120; _ .QAFEIPLQSLI.L.IQ.0.S.=

A la sustancia asi separada, se le aplicó la técnica de

Schiner y Fuson, descripta en Ta página 39, obteniéndose cris­

tales rojizos cuyos puntos de fusión son:Hojas..........166° Ramas..........1639

Se preparó una solución alcohólica de los cristales, parala ulterior observación al espectrofotómetro, obteniéndose los

valores y curvas que sc consignan a continuación; asimismo, he­

mos efectuado la separación cromatográfica en placa, de estoscristales.

.--Ñ-......

“+3­

¿13341903 PAR};LA ABSCRCICN EL ULTRÁVICLBL;

DEn;__IVPDQS._D;3_.I¿-‘a2:}*.511-11.th 2.1.132_i_d2922.i.a21.9}3.291%.

eng-¿1005DEL¿aya ESENCIALDEagus YRA:1

-.—-...­asigna};;u:;3_s_I.:-.I_A_1.3.03 '._._

Longitudes de onda Extinciones Hojas Extinciones Ramas

mu (milimicras) log li: E H omHw.

trJll

215

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JWOMOOOHOÑWWÑHWWOHHH

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OONÑIÑ\1QO\G\\J'LJÏLU'Ml\.)I-'MMUJUJUJfrummmmmmmmflfiúü\J'1’»3<.)l—‘l-Jl--lOOO\Ñ\JO\ÑO\O

.45­

ggq-¿groomrm ¿LCDODIï-EÉÏSICÏEAL EN I-LACA‘ _L_¿¿.sg:_H__D_I_I'9_I,IfiQF_IQy_I_I¿

¿IpanemaSolvonte: 30%de acetato ue ctilo en solvente 7

Distancia cubierta por el solvente: 15,2 cm.

Rfm Rfa Color de la mancha

0,869 0,901 amarillo anaranjado

0,765 0,790 amarillo pálido

QQÉÏJEQIPLDe ¡zx.z­Aflicando el método de Guenthcr (H2), hemos obtenido la

semicarbazida para hojas:

gécgiggi A una solución de clorhidrato de semicarbazida, se agrg

ga una cantidaC equimolecular de acetato de sodio, y a esta so­

lución se añade una cantidad ligeramente menor que la equimole­

cular del aldehido o cetona; agitar, suele ser necesario agre-,

gar alcohol para obtener una solución clara. ( Si c1 compuesto

carbonílico es insoluble cn agua, conviene disolvcrlo previamen­

te en 5 ó lO ml. de alcohol libre de aldchidos).

En general la semicarbazona cristaliza en pocos minutos.

Otras veces, tarda más tiempo. A veces requiere ser calcntada.

Para una purificación final, se recristaliza de un disolventeadecuado, tal comoagua, alcohol o acctona.

Hemosobtenido un precipitado blanco grisáceo de punto de

fusión 14590, para hojas.

En consecuencia, de la observación de las curvas de absor­

ción en el ultravioleta, se desprende la existencia de cotonasque poseen una doble ligadura conjugada respecto a la funcióncarbonilica. Las curvas de absorción en cl ultravioleta de las

2-H dinitrcfenilhidrazonas, correspondcrian a cetonas tcrpéni­cas.

- hó _

II‘JVBSTIGACIOH D3 FzNQIigs

De la sustancia fenólica, separada del resinoide de ramas,

se procedió a efectuar el arrastre por vapor ¿e agua, a efectos

de obtener los feneles aromáticos, cuyes 3-5 dinitrobenzoatos

se separaron de acuerdo al método siguiente:

gggnigg: Se disuelve l g. de cloruro de 3-5 dinitrobenzoilo (pu­

ro; en lo posible de preparación reciente), en lO ml. dc benceno,

y a'esa solución se le agrega el equivalente de fenol a esterifi'

car, bien seco. Se agrega dimetilanilina y calienta suavemente.

Una vez frio, se agrega un exceso de éter y se procede a lavar

con ácido diluido, luego con álcali diluido y finalmente, con a­

gua hasta neutralidad. Se evapora la solución etárea a sequedad

y recristaliza de éter Ce petróleo, bencenou otro disolvente a­propiado.

En nuestro caso homes obtenido pequeñas places y agujas que

funden a lHEQ, 1589 y terminan de fundir a 1689C.‘

De acuerdo a la cromatografía efectuada en placa (pág. 28),

y a los puntos de fusión Ce los 3-5dinitrobenzoatos, habria:

7 fïbnol cuyo Rf ’C5.,0,53 manchacolor amarillo y P.F. 1h50;

isocugenol, do Rf 0,7h5, color violeta u P.F.15890, y presumible­

mente, m-cresol, de Rf semejante al anterior, color amarillo y P.F. 16890.

IDENTIFICACION DE ACIDOS Y ALCOHOLESY/O FENOLBS ssrggiriggpgg:

Previamente saponificados los ésteres con KOH0,5N. en solu­

ción alcohólica, se procedió a la identificación de los ácidos

por un lado, y los alcoholes y fenoles por otro lado, de acuerdo

a los métodos indicados para cada caso.

ACIDOS: Se determinaron per el método de Deniges descripto en

la página 38, para ácidos libres. Se identificó: ácido propiónicol

47-.y ácido isobutirico, cuyas nicrofotografias se observan a conti#nuación:

/‘oo a.

ALCOHOLEQ_I/OFENOLES: Para las hojas, hCMrs doscartaCo la po­

siblilidad dc prcscncia de fenoles, de acuerdo a las curvñs de ;absorción en el ultravioleta.

Yara la identificación do alcoholes, hemosobtenido los 3-5

dinitrodorivados y determinado sus respectivos puntos de fusión:

- #8 _

Hojas (placas marrones).....l569/157QC

Ramas(placas marrón claro).....l33QC

Consideramosentonces la posibilidad de l/Ü¡fonchol de P.F.

15700 ó borneol de P.F. 156/1579 para hojas y de isobornool, para

ramas.

QfiQEATOGRAFIA GASBOSA:

Respecto a la cromatografía gaseosa, podemosobservar poca

resolución, con un pico alto cn la fracción nQH de hojas, que

corresponde a los ésteres; para ranas no se observa tal pico.

A continuación, se consignan los gráficos obtenidos, como

así también, las curvas de absorción cn el ultravioleta y cuadros

de valores, para las distintas fracciones.

- 50 ­

yggggggiggyggïgyys_PAR1 LA ABSORCION31 3L ULngïgggggg

Qg_;¿s FR¿QQJ;;;;;¿;1_;¿MQR031100R¿FI¿ 0133051-3313193_

22;;533011L 33 HOJ1s DE LA ADE3NIABCRONICIDES'(P; pia

LA 2

Longitudes de onda fracción l * frac. 2‘ í frac.3‘ frac.h‘

mu (milizicras) log.¿93 E E E E

215 0,35 ‘ ¡ 1,6 2,2222o C730 1753 Qahh225 0,275 1,37 2,62230 0,26 1,25 2,72235 0,2%5 1,16 2,582h0 0,238 1,1h 2 522H5 0,23 1,1h 2,1250 0,22 1,17 1,8%255 0,21 1,0% 1,06260 0,125 0,86 1,13265 0,10 0,73 0,92329 0,167 0,67 0,83gg; -,:a -,-— -,——:7á 0,15 0,6% 0,78280 0,137 0:575 0:72285 0,12 0,51 0,65290 0,105 0,hh5 0,565295 - au0,003 a -0,h0 0,50300 0,074 ' 0,31 0,525305 -,-: ; ’a” '9"310 0,056 - 0,235 0,32320 0,0h2 0,18 ' 0,255330 ’l"? “7"" '7"340 0,028¡_ 0,096 0,15350 0,02% 0,072 0,108

0 Extinciones

,- 53,­

XÉLORES OBTEHIDCS FAHL LA ¿BSCRCICK EE EL ULTRATICLETA

UE LÁS FR¿”CICÏES D: LL CRCHLTOGRgïï; GASEOSADSL ¿CEI

¡—'.| LI'J ESEHCÏnL DE RAMAS DE L“ LDJSZIA ÉCIOHICIDES (PARAHE

LÁL.

Longitudcs de onda Extincioucs fqu.l Ext. frac.2 Ext. frac.3

mu (milimicras) los. %2-: E E E

215 0,006 0,75 1,50220 0,013 0,91 1,70225 0,018 1,10 2,06230 0,021 1,96 2,32235 0,020 1,16 2, g200 0,027 1,02 2,3205 0,029 1,20 2,10250 0,029 0,96 1,70255 0,02 0,655 1,20260 0,026 0,02 0,83265 0,020 0,295 0,615270 0,02"I -0,235 0,51275 0,018 0,203 0,05280 "“0,016 "M0;18“‘- 0,005290 0,0-0 -0,13 0,303C0 O,CCC C,O92 0,23310 0,00; 0,066 0,18330 0,0CC 0,028 0,13350 0,000 0,020 0,090

W.» H‘.4vu:.

-55­

RESUMENY CONCLUSIQïgfi:Nuestro trabajo ha teniúo por objeto e­

fectuar el estudio del resin(ide y aceite esencial d; la Adesmia

boronieiúes Hooker (paranela), no sólo Pcsde el pento de vista

cientifico, sino también comouna contribución al conocimiento

de los aceites esenciales y plantas en general, Ge nuestro pais;

La bibliografia existente sobre este tema es muyescasa ylos articulos encontrados no hacen referencia e su composición.

Hemoscomenzado con una reseña y clasificación de los pro­

ductos aromáticos y de los distintos grupos en que se dividen, en

tre los que encontramosa los aceites esenciales o volátiles.

Determinamosconstantes físicas y químicas, tanto del resinci

de comodel aceite esencial y a‘ dados ptr la ospectrofotomctria

y cromatografía en placas y en la e gaseosa, comoasi también perU1

las técnicas clásicas indicadas vara cada caso, procedimes a la separación e identificación de compuestos.

Respecto a las técnicas segui-as para 1a identificación de

compuestos, cabe señalar que en se mayoria son aplicables cuando

los productos son puros o se encuentran en cantidad apreciable,

por lo que se nos ha presentado muchas dificultades, ya qu; hemos

trabajado con muyescasa cantidad de nuestra.

A pesar Ge ello, hemos constataCo la resencia Ce ácidos li­

bres_y combinados, dejando asimismo constancia Ge puntos de fusión

dc derivados de cetonas, alcoholes, fenoles libres y ombinad

que prodrian ser aprovechadcs en posterirres cstuóios.

Teniendo encuenta que ;n las zonas (once se encuentra la Adeg

mia, se la conoce comode valor medicinal, debiera encararsc su es

tuCio desde el punto de vista farmacológico, ya que desfe el punto

de vista de producción de compuestos no cabría s consider;ción.

j (J,

(3)

(H)

(5)

(6)

(7)

(8)

(9)

(1C)

(11)

(12)

(13)

(14)

(15)

(16)

(17)

(18)

(19)

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