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UNIVERSIDAD DE MATANZAS
ESTACIÓN EXPERIMENTAL DE PASTOS Y FORRAJES INDIO HATUEY
Evaluación de tres variedades de Morus alba en la
crianza y producción del polihíbrido Chul Thai-6
de Bombyx mori
TESIS EN OPCIÓN AL TÍTULO ACADÉMICO DE MÁSTER EN PASTOS Y FORRAJES
Autora: Lic. Marlene Prieto Abreu Tutora: Dra.C. Maykelis Díaz Solares
JULIO, 2015
UNIVERSIDAD DE MATANZAS
ESTACIÓN EXPERIMENTAL DE PASTOS Y FORRAJES INDIO HATUEY
Evaluación de tres variedades de Morus
alba en la crianza y producción del
polihíbrido Chul Thai-6
de Bombyx mori
TESIS EN OPCIÓN AL TÍTULO ACADÉMICO DE MÁSTER EN PASTOS Y FORRAJES
Autora: Lic. Marlene Prieto Abreu Tutora: Dra.C. Maykelis Díaz Solares
JULIO, 2015
“Si buscas resultados distintos,
no hagas siempre lo mismo”.
Albert Einstein
Agradecimientos
__________________________________________________________________________________
AGRADECIMIENTOS
Es difícil resumir todas las vivencias, sensaciones y sentimientos que me han acompañado
durante esta etapa. La realización de esta tesis de maestría ha contado con el apoyo de
muchas personas a las que quiero hacer llegar mi más sincero agradecimiento.
A mi hijo Carly, quien me ha apoyado y acompañado durante todo este tiempo,
cocinando rico para mí. Siento no haber podido estar tan cerca de ti como hubiese
querido, en este tiempo.
A mi hijo Dayron, quien desde niño me ha acompañado en el desempeño de mi
trabajo, quizás por eso, por su formación y por su gran corazón, se sintió muy
comprometido con la realización de esta tesis. Gracias hijo, por tus exigencias, por tu
paciencia, comprensión e incomprensión; por tu entrega, dedicación y sacrificio,
gracias mi pichón de científico.
A los dos gracias por darme confianza, por ayudarme y colaborar para poder salir
adelante y superarme.
A mi madre, quien ha sido mi guía y me ha enseñado todo en la vida, brindándome
siempre su amor y apoyo incondicional.
A mi Oscar, de su mimi, que ojala y un día entienda el porqué de la desatención
durante este tiempo, y sea un hombre de bien.
A mi amiga y tutora, la Dra. Maykelis Días Solares, por haber sido la primera persona
en estimularme a matricular en la maestría; por confiar en mí, por apoyarme en todo
momento, por guiarme y brindarme sus conocimientos, por su paciencia, dedicación,
por consagrar parte de su valioso tiempo en agotadoras jornadas de trabajo, siempre
aferrada a que todo quedara bien y con buen gusto. Gracias, Mayke.
A la Dra. María del Carmen Pérez Hernández, por su constante exigencia que influyó
en el logro de este resultado, por toda la ayuda que me brindó en la obtención de la
información después de largas jornadas de trabajo, por su apoyo y colaboración para
la realización de las investigaciones, por sus sabias recomendaciones y por haber
confiado en mí.
A los compañeros Caridad Hidalgo Rojas y Roberto González Mulero, por su
colaboración en la ejecución del experimento, a los trabajadores del proyecto
nacional de sericultura y a todos los trabajadores del Plan 160, que de una forma u
otra contribuyeron con la realización de esta investigación.
A las muchachitas del laboratorio de Análisis Químico de la EEPF Indio Hatuey, Lic.
Rosa María Rodríguez, Suylan Serrano, Niurquis Delfín y Yosleidy Rodríguez, de las
cuales recibí todo el apoyo y colaboración.
A las incondicionales Yudit Lugo, Nancy Altunaga e Inelvis Castro, las que con buen
carácter, preparación y solidaridad, siempre estuvieron de mí lado. Yo sabía que
podía contar con ustedes.
A Magalys Ramírez, por su colaboración en la introducción de los datos en la
máquina.
Al personal del laboratorio de Suelo, Agua y Tejido Vegetal de la Estación Provincial
de Investigación de la Caña de Azúcar, Antonio Mesa, en especial a Daylis.
Al Dr. Rey Machado Castro, por sus señalamientos y sugerencias de gran
importancia para esta tesis.
Agradecimientos
__________________________________________________________________________________
Al Dr. Luis Lamela López, por sus oportunos y sabios consejos, por transmitirme
confianza y seguridad, por el valor que apreció en los resultados de esta tesis. Profe,
para mí su opinión tuvo mucho valor y me dio mucha confianza.
Al Dr. Félix Ojeda García, por su gentileza, colaboración y ayuda ante cada consulta
realizada.
Al Dr. Giraldo Jesús Martín Martín, por su apoyo y sugerencias, por aportarme
soluciones rápidas cuando algo me resultaba contradictorio. Gracias por confiar en
mí.
A Yolai Noda e Hilda Wencomo, por su ayuda con los temas de estadística.
A Nayda Armengol por su contribución en la revisión y organización de la bibliografía.
A Evelín Perdomo, por su entrega, consagración, paciencia y aporte en la corrección
y estilo para la terminación del documento de tesis. Tuvimos intensas y productivas
jornadas y nos divertimos, a pesar de todo.
A Alejandro y Ayelín, por su cooperación en la fotografía.
A Joisel Vázquez, por su apoyo con los medios de informática y por su preocupación
para que todo saliera bien.
A José Ramón Amador, por su entrega, comprensión y apoyo. Siempre con buen
carácter y el último en terminar en esta tarea.
A Dariel Medina, por su colaboración en los arreglos de gráficos y figuras.
A mi hermana de causa, Elvira Ortiz Sánchez, por su cooperación en los aspectos
económicos de la tesis, por toda su colaboración y apoyo en las prolongadas
jornadas de trabajo, también garantizándonos las meriendas y cenas. Gracias, mi
hermana.
A mis hermanas Mayra, Maricel y Mily, gracias por su comprensión y apoyo.
A mi hermano, Roberto C. Fiallo, mi compañero de buenos y malos momentos.
Gracias por tu colaboración y apoyo, siento mucho que no estés conmigo este día.
A Claribel Benítez, Marisel Castellanos y Maydel Pita, por su apoyo y preocupación
por la terminación de esta tesis.
A Giorgio Allara, por brindarme sus conocimientos, por su apoyo y colaboración para
realizar la tesis.
A Taymer Miranda, Milagros Milera, Maybe Campos, Yuván Contino, Marlen Navarro
y Juan C. Lezcano, por estar siempre al tanto de los avances de este trabajo y
dispuestos a colaborarme.
A los trabajadores del área de servicio, de posgrado y a todos los trabajadores de
Indio Hatuey.
A todas aquellas personas que, de una forma u otra, colaboraron en la realización de
este trabajo.
Resumen
__________________________________________________________________________________
RESUMEN
Las hojas de morera (Morus sp.) constituyen la fuente de alimento tradicional y casi
exclusiva de Bombyx mori, durante su ciclo de vida. La calidad nutricional de esta
planta influye en sus etapas de desarrollo, particularmente en la formación del
capullo. El objetivo de la investigación fue evaluar el comportamiento de tres
variedades de Morus alba L. (Tigreada, Universidad y Yu-62), en la crianza y
producción de capullos de B. mori. Se utilizaron huevos de la raza Chul Thai-6,
procedente de Tailandia, en los meses de enero y febrero de 2014. Las condiciones
controladas fueron: 23 ± 2°C de temperatura, 72 ± 3 % de humedad relativa y
fotoperiodo de 16 horas luz y 8 horas oscuridad. Se establecieron 3 réplicas por
variedad con 100 gusanos, tomados al azar. En las hojas se evaluaron la morfología,
la composición bromatológica, los flavonoides totales y los compuestos fenólicos
totales. Los índices nutricionales estudiados fueron las tasas de consumo, de
crecimiento y metabólicas relativas y las tasas estimadas de consumo de materia
seca, agua, proteína, fibra bruta y minerales. Se midió el peso del capullo, de la pupa
y de la corteza, así como los porcentajes de encapullado, mortalidad y los índices de
calidad. Para el análisis de los resultados se utilizó el programa estadístico
GraphPad Prism 5.01. La comparación de los valores medios de los indicadores se
realizaron mediante un ANOVA simple, seguido del Test de Tukey, con un 0,05 % de
significación. Se concluye que la variedad Yu-62 mostró los mejores valores en la
mayoría de los indicadores. Se recomienda esta variedad como alimento de calidad y
económicamente rentable para la crianza del gusano de seda en Cuba.
Índice
__________________________________________________________________________________
i
ÍNDICE
INTRODUCCIÓN ................................................................................................................... 1
CAPÍTULO 1. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA .......................................................................... 4
1.1 Generalidades de la morera .......................................................................................... 4
1.2 Ubicación taxonómica de Morus alba Linn .................................................................... 5
1.3 Características botánicas y reproductivas de la especie Morus alba L. ......................... 6
1.4 Producción de biomasa y bromatología de Morus alba L. ............................................. 7
1.5 Actividad antioxidante en las hojas de Morus alba L. .................................................... 9
1.6 Germoplasma de Morus alba L. en Cuba .................................................................... 10
1.7 Sericultura, su vínculo con Morus alba L. .................................................................... 10
1.8 Atención cultural al cultivo de la morera y su influencia en la producción de capullos . 11
1.9 Ciclo de vida de Bombyx mori L. ................................................................................. 13
1.9.1 Taxonomía ........................................................................................................... 13
1.10 Sistema digestivo y nutrición del gusano de seda ..................................................... 15
1.11 Morfología de la pupa del gusano de seda ............................................................... 17
1.12 Forma de reproducción de Bombyx mori L................................................................ 18
1.13 Aspectos generales sobre la producción y calidad del capullo del gusano de seda .. 19
1.13.1 Características del capullo .................................................................................. 20
1.13.2 Composición de los filamentos ........................................................................... 20
1.14 Breve historia de la sericultura .................................................................................. 20
1.15 Sericultura en Cuba .................................................................................................. 22
1.16 Morera y gusano de seda. Impacto económico y social en la actualidad .................. 24
1.16.1 Estado del arte ................................................................................................... 24
1.16.2 Informaciones acerca de la sericultura por países .............................................. 24
1.17 Producción de seda .................................................................................................. 24
1.17.1 Otros países productores de seda ...................................................................... 25
1.18 Aspectos biotecnológicos sobre el gusano de seda .................................................. 26
1.19 Otros aspectos de interés ......................................................................................... 27
CAPÍTULO 2. MATERIALES Y MÉTODOS ......................................................................... 28
2.1 Cultivo de la morera .................................................................................................... 28
2.2 Caracterización morfológica y química de las hojas de morera. .................................. 28
2.2.1 Determinación de la materia seca ........................................................................ 29
Índice
__________________________________________________________________________________
ii
2.2.2 Nitrógeno total y proteína bruta ............................................................................ 29
2.2.3 Fibra bruta ............................................................................................................ 29
2.2.4 Determinación del contenido de minerales ........................................................... 30
2.2.5 Cenizas ................................................................................................................ 31
2.3 Determinación de la actividad antioxidante en las hojas de morera ............................ 31
2.3.1 Preparación del extracto etanólico de la masa foliar seca .................................... 31
2.3.2 Determinación del contenido de fenoles totales .................................................... 31
2.3.3 Cuantificación de los flavonoides totales .............................................................. 32
2.4 Crianza del gusano de seda ....................................................................................... 32
2.4.1 Alimentación del gusano de seda ......................................................................... 33
2.4.2 Determinación de los índices nutricionales ........................................................... 33
2.5 Comportamiento de la mortalidad de las larvas ...................................................... 34
2.6 Evaluación de la calidad de los capullos de seda ....................................................... 35
2.7 Análisis estadístico ..................................................................................................... 36
2.8 Consideraciones económicas ..................................................................................... 36
CAPÍTULO 3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN ...................................................................... 37
3.1 Cultivo de M. alba y caracterización morfológica de sus hojas .................................... 37
3.2 Caracterización química de las hojas de las variedades de M. alba ............................ 39
3.2.1 Composición bromatológica ................................................................................. 39
3.2.1.1 Materia seca y humedad ................................................................................... 39
3.2.1.2 Proteína bruta .................................................................................................... 40
3.2.1.3 Fibra bruta ......................................................................................................... 41
3.2.1.4 Minerales ........................................................................................................... 42
3.2.2 Evaluación de la actividad antioxidante en las hojas de M. alba ........................... 43
3.2.2.1 Cuantificación de los fenoles totales .................................................................. 44
3.2.2.2 Cuantificación de flavonoides totales ................................................................. 45
3.3 Comportamiento de los índices nutricionales de Bombyx mori ................................... 46
3.3.1 Tasa de consumo de hojas de Morus alba durante la quinta edad ....................... 46
3.3.2 Consumo de nutrientes ........................................................................................ 49
3.3.2.1 Tasas estimadas del consumo de materia seca y agua ..................................... 50
3.3.1.1.2 Tasas estimadas del consumo de proteínas y de fibra bruta .......................... 51
3.3.1.1.3 Tasas estimadas del consumo de minerales .................................................. 52
Índice
__________________________________________________________________________________
iii
3.3.2 Tasas de crecimiento de las larvas de Bombyx mori ............................................ 53
3.3.2.1 Relación entre los caracteres morfológicos de las hojas de morera, la calidad
nutricional y el crecimiento de las larvas del gusano de seda ........................................ 55
3.4 Comportamiento de la mortalidad de las larvas y del proceso de encapullado............ 58
3.4.1 Mortalidad de las larvas del gusano de seda ........................................................ 58
3.4.2 Porcentaje de encapullado y peso de los capullos del gusano de seda ................ 60
3.4.3 Evaluación de la calidad de los capullos. .............................................................. 63
3.4.4 Consideraciones económicas ............................................................................... 64
CONCLUSIONES ................................................................................................................ 66
RECOMENDACIONES ........................................................................................................ 67
NOVEDAD CIENTÍFICA ...................................................................................................... 68
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS .................................................................................... 69
ANEXOS
Índice de Tablas
__________________________________________________________________________________
iv
ÍNDICE DE TABLAS
Tabla 1. Porcentaje de materia seca y humedad en hojas de variedades de morera. ......... 40
Tabla 2. Porcentaje de proteína bruta en la MS de las hojas de las variedades de morera.. 41
Tabla 3. Porcentaje de fibra bruta en hojas de variedades de M. alba. ................................ 42
Tabla 4. Porcentaje de cenizas, P, K y Ca en hojas de variedades de M. alba. ................... 42
Tabla 5. Tasas de consumo promedio de la hoja fresca de M. alba durante la quinta edad. 48
Tabla 6. Tasas de consumo de materia seca y de agua, durante la quinta edad de las larvas
del gusano de seda. ............................................................................................................. 50
Tabla 7. Tasas estimadas de ingestión de proteínas y de fibra bruta. .................................. 51
Tabla 8. Tasas estimadas de ingestión de P, K y Ca durante la quinta edad. ...................... 52
Tabla 9. Tasa de crecimiento de las larvas de Bombyx mori. ............................................... 54
Tabla 10. Tasa metabólica relativa de las larvas de B. mori durante la quinta edad. ............ 58
Tabla 11. Comportamiento de la mortalidad de las larvas del gusano de seda alimentadas
con M. alba........................................................................................................................... 59
Tabla 12. Evaluación de la calidad del capullo de seda. ...................................................... 63
Tabla 13. Consideraciones económicas sobre la producción de capullos de seda. ............. 65
Índice de Figuras
__________________________________________________________________________________
v
ÍNDICE DE FIGURAS
Figura 1. Ciclo de vida de Bombyx mori. ............................................................................. 14
Figura 2. Morfología de la larva del gusano de seda en el quinto ínstar. ............................. 17
Figura 3. Morfología de la pupa del gusano de seda. .......................................................... 18
Figura 4. Hojas de la variedad Yu-62................................................................................... 37
Figura 5. Hojas de la variedad Universidad. ........................................................................ 38
Figura 6. Hojas de la variedad Tigreada. ............................................................................. 38
Figura 7. A. Concentración de compuestos fenólicos en variedades de M. alba. B. Estructura
química de uno de los compuestos fenólicos presentes en las hojas de morera. ................. 45
Figura 8. A. Concentración de flavonoides totales en hojas de M. alba. B. Estructura básica
de los flavonoides y sistema de numeración. ....................................................................... 46
Figura 9. Sala de crianza de B. mori y termohigrómetro. ..................................................... 47
Figura 10. Consumo de las variedades de morera por larvas de B. mori en la quinta edad. A:
Tigreada; B: Yu-62; C: Universidad. ..................................................................................... 48
Figura 11. Peso promedio de las larvas de B. mori al quinto día de la quinta edad. ............ 54
Figura 12. Relación entre la tasa de crecimiento relativo y la tasa de consumo de proteína
bruta de las larvas de B. mori durante la quinta edad. .......................................................... 56
Figura 13. Larvas de gusano de seda que murieron durante la quinta edad. ....................... 59
Figura 14. Rodalinas utilizadas para el proceso de encapullado de B. mori......................... 60
Figura 15. Porcentaje de encapullado de las larvas de B. mori............................................ 60
Figura 16. A: Comportamiento del peso del capullo y B: Capullos producidos. .................... 61
Figura 17. A: Comportamiento del peso de la pupa y B: Pupa recién extraída del capullo. .. 62
Figura 18. A: Comportamiento del peso de la corteza y B: corteza del capullo. ................... 62
Abreviaturas
__________________________________________________________________________________
vi
ABREVIATURAS
Sigla Significado
g Gramo
ha Hectárea
kg Kilogramo
mg Miligramo
L Microlitro
mL Mililitro
mmeq Miliequivalente
nm Nanómetro
mm Milímetro
m Metro
cm Centímetro
°C Grado Celsius
min Minutos
% Porcentaje
MS Materia seca
PB Proteína bruta
FB Fibra bruta
P Fósforo
K Potasio
Ca Calcio
msnm Metros sobre el nivel del mar
T.C. Tasa de consumo
VPN Virus de la Poliedrosis Nuclear
ISC Comisión Internacional de Sericultura
Glosario de Términos
__________________________________________________________________________________
vii
GLOSARIO DE TÉRMINOS
Alimentación: Suministro de morera a los gusanos. El número y la cantidad de
alimentaciones al día varían según la etapa de desarrollo del gusano y el método de crianza.
Asepsia: Labores de aseo y desinfección con agentes químicos (alcohol, formol diluido y/o
cal) del lugar de crianza, para evitar el ataque de microorganismos que afectan o contaminan
a los gusanos de seda.
Canal alimentario: Tubo, desde la boca hasta el ano, por donde se ingiere, digiere y
absorbe material comestible. El canal alimentario del gusano de seda se divide en tres
partes: intestino anterior, medio y posterior.
Cantidad de alimento ingerido: Cantidad de morera suministrada menos residuo del
alimento.
Capullo: Cubierta protectora de muchas formas larvales antes de que lleguen al estado de
pupa.
Capullo fresco: Capullo que tiene la pupa viva sin tratamiento de secado.
Ciclo biológico o de vida de un insecto: Proceso continuo de acontecimientos que se
inician desde el estado de huevo y que se completan al alcanzar el estado de adulto. Son
todos los cambios morfológicos y etológicos que sufre el insecto desde el inicio de su vida
hasta su muerte. Los insectos, para completar su ciclo de vida, pasan por dos procesos de
desarrollo bien definidos: 1) el embrionario, que ocurre dentro del huevo; 2) el post-
embrionario, que ocurre a partir del nacimiento o eclosión de los huevos, y se le conoce
como metamorfosis.
Corteza del capullo: Capa del capullo que se compone de filamento de seda.
Crisálida: Pupa de insectos con metamorfosis completa, protegida por una cubierta.
Digestibilidad: Cantidad de alimento digerido entre la cantidad ingerido expresado en
porcentaje. La digestibilidad del alimento suministrado al gusano de seda difiere según la
variedad de morera, la etapa larval y la temperatura ambiental.
Dormida: Sinónimo de muda, rango de tiempo en el que la larva de gusano de seda no se
alimenta y sufre cambios morfológicos, asociados a la eliminación de la piel.
Glosario de Términos
__________________________________________________________________________________
viii
Eclosión: Ruptura del huevo para dar salida a la larva, salida de la mariposa del capullo o
cubierta de la pupa.
Encapullado: Hilado del gusano maduro durante 60 horas para formar un capullo.
Encapullador: Instrumento en el que los gusanos maduros forman capullos. Existen varios
tipos: rodalina plástica, seriframe, panel de cartón y los mismos influyen en la calidad del
capullo.
Estadio o edad: Intervalo de tiempo entre las mudas.
Fisiología: Estudio de los procesos físicos y químicos que ocurren en los organismos vivos
(o del gusano de seda) durante la realización de sus funciones vitales.
Glándula de seda o glándula sericígena: Glándula en la que se sintetiza y secreta la
sustancia de la seda. La glándula posterior secreta fibroína y la media, sericina.
Gusanaza: Estiércol producido por el gusano de seda.
Gusano adulto: Gusano que se encuentra entre la cuarta y quinta edad larval, en la que la
glándula sericígena alcanza su máximo desarrollo para producir la seda con que se forma el
capullo.
Gusano joven: Gusano que se encuentra entre la primera y segunda edad; a veces se
incluye también la tercera edad.
Huevo: Célula diploide formada por la unión de los núcleos del óvulo y del espermatozoide.
Ínstar: Forma que adopta el insecto durante un estadio.
Larva: Embrión que se independiza y autosustenta antes de presentar los rasgos
característicos de sus padres.
Muda: Proceso mediante el cual los insectos se deshacen de su tegumento, cada cierto
tiempo, para permitir su propio crecimiento. La muda se controla a través del sistema
hormonal presente en el organismo.
Polilla: Nombre común de numerosos lepidópteros, que poseen antenas ahusadas por un
punto en vez de presentar forma de masa.
Glosario de Términos
__________________________________________________________________________________
ix
Pupa: Tercera fase del ciclo de vida de los insectos con metamorfosis completa, después de
la fase larval. Al final de la etapa de pupa, el insecto sufre su última muda y emerge el adulto
o mariposa.
Purga: Proceso en el cual la larva elimina el contenido de orina y excremento, cambia el
color de la cutícula y se prepara para la formación del capullo.
Rendimiento de capullos cosechados: Peso de capullos (generalmente en kg) para una
caja de huevos (20 000) o para una hectárea de morera.
Rodalina: Tipo de encapullador plástico en forma de sol o semisol.
Seda bruta: Contenido de seda en el capullo e indicador de la calidad del capullo.
Termohigrómetro: Aparato para medir de la temperatura (°C) y la humedad (%). Los
equipos digitales tienen la capacidad de registrar las máximas y mínimas del día.
Unidad de crianza: Espacio de crianza o piso de la cama de crianza.
Introducción
__________________________________________________________________________________
1
INTRODUCCIÓN
La morera es una planta leñosa forrajera, utilizada en sistemas de corte y acarreo por
más de 5 000 años para alimentar al gusano de seda (Bombyx mori L.), que data en
Cuba desde el siglo XIX (Fernández, 1935). En la década del 30 del siglo pasado, se
realizaron esfuerzos para desarrollar un programa de sericultura en el país y, con
ello, el cultivo de la morera. Este programa, por causas aún no muy esclarecidas, no
tuvo continuidad y muchas áreas de morera que existían en ese momento
desaparecieron.
A mediados de la década del 90, la Estación Experimental de Pastos y Forrajes Indio
Hatuey (EEPF-IH) introdujo en Cuba el cultivo de la morera (Morus sp.) a partir de los
resultados que sobre las potencialidades de esta planta como alimento animal obtuvo
el MSc. Jorge Evelio Benavides Grutter, investigador del Centro Agronómico Tropical
para la Investigación y la Enseñanza (CATIE). Los estudios comenzaron con cuatro
variedades procedentes de Costa Rica y el propósito fundamental fue utilizar esta
planta en la alimentación del ganado, por el alto valor nutricional de la biomasa
comestible y a la gran aceptabilidad y consumo que presentaba cuando se ofrecía el
forraje fresco a las diferentes especies de animales, bovinos, caprinos, cerdos,
conejos, ovinos y aves. Además, por los resultados exitosos obtenidos, la tecnología
se introdujo en los módulos agroforestales para su uso como forraje, y se insertó en
los sistemas sostenibles de producción para la alimentación animal, lo que ha
permitido su fomento en fincas, módulos y empresas agropecuarias (Martín et al.,
2000).
En la actualidad, se han realizado investigaciones relacionadas con aspectos
agronómicos, valor nutritivo, respuesta animal, conservación en forma de harina y
ensilaje, entre otros (Martín et al., 2002).
Los avances obtenidos en los estudios sobre la morera permitieron que en el año
2001 se comenzara el fomento y el desarrollo de la sericultura en Cuba, para
propiciar un uso adicional de este cultivo.
Introducción
__________________________________________________________________________________
2
En 2005 la EEPF-IH elaboró un programa para la investigación-innovación-
producción en sericultura, cuyo principal propósito fue la introducción y el fomento de
la producción sostenible de capullos seda y de productos derivados de la sericultura.
La generación de productos exportables y la reducción de importaciones constituyen
prioridades socioeconómicas y políticas del Estado Cubano; el que, en su función
reguladora del progreso de la nación, tiene la misión de dar respuesta a los
Lineamientos del VI Congreso del PCC, a través de las instituciones y
organizaciones que a este responden.
Es importante señalar que la tecnología serícola es viable, debido a los pocos
recursos que necesita el proceso (combustible, fertilizantes y otros). La práctica de la
sericultura puede constituir una alternativa para la economía de las familias rurales
que viven con bajos ingresos, ya que representa una fuente de empleo para
hombres, mujeres, jubilados y discapacitados del sector. El periodo de crianza y
cosecha es muy corto, entre 30 y 40 días; además, posibilita la utilización de los
subproductos de esta actividad en labores como: la alimentación animal, el uso de
los residuos de crianza (gusanaza) como abono orgánico, la obtención del hilo y la
elaboración de artesanías, lo cual puede ser una fuente de ingreso para las familias y
el país.
Sin embargo, faltan aspectos por dilucidar, entre los que se encuentra la evaluación
de las diferentes variedades de Morus alba que son factibles para la crianza y
producción de capullos del gusano de seda.
Teniendo en cuenta estos antecedentes, la tesis de maestría tuvo la siguiente
hipótesis de trabajo:
Las variedades de M. alba inciden en el comportamiento del polihíbrido Chul Thai-6
de B. mori y en sus resultados productivos.
Introducción
__________________________________________________________________________________
3
Objetivo general:
Evaluar el comportamiento de tres variedades de Morus alba L., en la crianza y
producción de los capullos del polihíbrido Chul Thai-6 de Bombyx mori.
Objetivos específicos:
1. Determinar los caracteres morfológicos, bromatológicos y bioquímicos de las
hojas de las variedades Tigreada, Universidad y Yu-62.
2. Medir los índices nutricionales y el crecimiento de las larvas del gusano de
seda.
3. Evaluar el efecto que ejercen estas variedades sobre la mortalidad de las
larvas y el proceso de encapullado.
4. Comparar los indicadores de calidad del capullo que produce el gusano de
seda alimentado con las tres variedades de morera y su beneficio económico.
Revisión Bibliográfica
__________________________________________________________________________________
4
CAPÍTULO 1. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA
1.1 Generalidades de la morera
La morera es una planta dicotiledónea de la familia Moraceae, la cual comprende 4
subfamilias, 55 géneros, cerca de 950 especies y miles de variedades (Sibuya-Ku,
1975). Las especies de morera más estudiadas son Morus alba L., Morus nigra L.,
Morus rubra L., Morus tartarica L. y Morus indica L. (Cifuentes y Sohn, 1998).
Desde tiempos remotos los árboles de morera han crecido de forma individual y
silvestre (Sánchez, 2002). Los dos informes más antiguos que incluyen a la morera
en la historia de la humanidad provienen del año 1 123 a.C.; de ahí que se considere
uno de los cultivos más antiguos del mundo.
El desarrollo de la sericultura ha garantizado que el género Morus esté presente en
muchos países de diferentes continentes. El amplio rango de distribución de la
morera ratifica que la planta tiene una gran capacidad de adaptación a diversas
condiciones climáticas (Olivera y Noda, 2011).
La morera crece bien en diversos tipos de suelo, principalmente en aquellos que
presentan mayor fertilidad. Cifuentes y Sohn (1998) señalaron que los suelos
óptimos para el cultivo de morera son el franco arenoso y el franco arcilloso. Esta
planta no tolera encharcamiento prolongado; el pH adecuado del suelo es de 6,5 a 7,
por lo que los suelos ácidos deben ser encalados antes de establecer el cultivo.
Además, se debe tener en cuenta que el suelo presente de 2 a 3 % de materia
orgánica y que la topografía sea plana u ondulada, con pendiente inferior a 40 %.
Sin embargo, la morera se puede encontrar en suelos muy pobres, calcáreos o
silicios y salinos. Se puede adaptar a condiciones de secano, a ambientes desérticos
y al efecto costero. La especie M. alba L. tiende a adaptarse por sí sola a las
condiciones ambientales que se le impongan y su alta plasticidad la hace universal.
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Ha sido difícil situar con seguridad el lugar de origen de esta planta, no obstante,
varios autores coinciden en que el Himalaya es el sitio más probable (Benavides,
2000; Sánchez, 2001; Datta, 2002).
Li (2001) clasificó los lugares de origen de M. alba en cinco regiones: 1) Este del
continente asiático, 2) Archipiélago de Malasia, 3) Suroeste de Asia, 4) Oeste de
África y 5) Norte, Centro y Sur de América.
1.2 Ubicación taxonómica de Morus alba Linn
La especie M. alba Linn pertenece al género Morus, familia Moraceae, orden
Urticales, subclase Dicotiledónea, clase Angiosperma y división Spermatophyta. Es
una planta leñosa perenne, de porte bajo a medio, semicaducifolia en las
condiciones de Cuba, de rápido crecimiento, con un sistema radical profundo y es la
de mayor adaptación para la alimentación del gusano de seda. Cappellozza (2002)
refirió que la caracterización de M. alba L. ha sido engorrosa, debido a que las
especies y variedades de morera son llamadas con diferentes nombres locales, lo
que no ayuda al ordenamiento taxonómico y dificulta la homogeneidad de la
clasificación a nivel mundial.
En los siglos XVIII y XIX, se realizaron varias divisiones del género Morus, las que se
basaron, fundamentalmente, en la presencia o ausencia de estilo en la flor, la
protuberancia y vellosidad del estigma, la inflorescencia, la sorosis, la base del estilo
bilobulado y la morfología de la hoja, principalmente la forma de la base (García,
2003).
Según la clasificación taxonómica propuesta por Yongkang (2002), M. alba L. se
diferencia del resto de las especies del género Morus por presentar pistilos con
estilos largos distintivos, protuberancia dentro del estigma, hojas pequeñas
desprovistas de vellos o con protuberancias en la etapa joven, venas en la superficie
inferior y sorosis violácea obloide de 1 a 2,5 cm.
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1.3 Características botánicas y reproductivas de la especie Morus alba L.
Soria et al. (2001) hizo referencia a las características botánicas de la especie M.
alba L. relacionadas con el sistema de propagación. La forma en la que se
establece el cultivo condiciona el tipo de raíz que emite la planta. Si se parte de
semillas (reproducción sexual), se obtiene una raíz pivotante profunda, con
ramificaciones laterales. Si se realiza la multiplicación por estacas (reproducción
asexual), las raíces serán adventicias solamente, en forma de cabellera. Las raíces
permiten el anclaje, la absorción y el almacenamiento de nutrientes, y pueden llegar
a 1 m de profundidad; su tamaño se relaciona con la parte aérea, el tipo de suelo y
la fertilidad. En suelos livianos, con alto contenido de materia orgánica, se logra una
mayor cantidad de raíces que en suelos arcillosos, con poco contenido de ese
material.
Según Martín y Noda (2014), algunos investigadores del Instituto de Biotecnología
de Plantas (IBP) lograron la micropropagación de la variedad Criolla de M. alba en
casas de cultivo, por la técnica de corte de esquejes a partir de brotes revigorizados
de plantas donantes de estacas y de plantas cultivadas in vitro. Por ende,
consiguieron definir una metodología para la propagación masiva con la utilización
del corte de esquejes como método sostenible, con respecto a la tecnología de
propagación in vitro y al método convencional de siembra por estacas.
La evaluación en campo del rendimiento de biomasa forrajera de las plantas
procedentes del método de corte de esquejes fue similar a las plantas propagadas
por el método de cultivo in vitro, y superior a las plantas obtenidas por estaquillado.
Se demostró que esta técnica de corte de esquejes en la casa de cultivo tiene una
eficiencia superior al cultivo in vitro y garantiza su sostenibilidad económica.
Las hojas de M. alba son generalmente alternas, pecioladas, simples, íntegras,
brillantes y estipuladas de uno a cinco lóbulos, con el haz lampiño y el envés
ligeramente tomentoso en las axilas de los nervios principales. También pueden ser
de anchamente ovaladas a orbicupar-ovaladas, con ápice agudo o cortante
acuminado, y con base oblícua y semitruncada o subcordada (Yongkang, 2002).
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Rodríguez-Ortega et al. (2012) las definieron como hojas de tamaño medio, grandes
enteras, de color verde intenso y verde limón, de forma elíptica caudada, con base
acuñada y lineal, de borde aserrado no pendular, serrado mastoidal y liso ovales,
con lámina de grosor medio, lisa y gruesa de morfología caudada acorazonada,
pendulante, y ápice prolongado. El borde de la hoja es dentado o irregularmente
lobulado, de consistencia blanda. El peciolo es grande, de 12 x 8 cm en las ramas
con frutos y de 25 x 20 cm en las ramas sin frutos.
1.4 Producción de biomasa y bromatología de Morus alba L.
Cifuentes y Sohn (1998) señalaron que, durante los dos primeros años, el cultivo de
la morera está en establecimiento y, después del segundo año, se encuentra en
plena producción. Durante el primer año, el cultivo de una planta producirá alrededor
del 30 % de hoja con respecto a la producción plena; en el segundo año, se podrá
alcanzar aproximadamente el 65 %; y el 100 %, a partir del tercer año.
En la producción de forraje, algunos estudios demuestran que la morera presenta
altos rendimientos de materia seca (MS), a través de los ciclos anuales de cultivo. La
producción de biomasa total y la de sus componentes son afectadas por un grupo de
factores, entre los que se destacan la densidad de siembra, la fertilización, la edad
de la planta y la frecuencia de corte (Martín, 2004).
La morera puede producir entre 10 y 12 t de MS/ha/año (biomasa comestible) y de
20 a 25 % de proteína bruta (PB); la digestibilidad de la MS es superior al 80 %
(Cifuentes y Sohn, 1998).
En Cuba, se han realizado estudios sobre tecnología de manejo y frecuencias de
corte de las variedades Yu-62 y Universidad, a los 7 meses o 201 días de
sembradas (podadas y sin podar), en los que se demostró que, después de la poda,
la producción de biomasa fue superior a los 300 g/planta. También se observó la
existencia de una mayor relación hoja-tallo, un vigoroso sistema radicular con óptima
calidad fisiológica y no se detectaron afectaciones provocadas por plagas (Pérez et
al., 2012).
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Por su parte, Martín (2004) señala que existen numerosas investigaciones en las que
se ha determinado el contenido de PB, de fibra bruta (FB) y de minerales en las
hojas de morera, como alimento único del gusano de seda. La parte de la planta es
el factor que más diferencia las concentraciones de PB y de minerales, las hojas son
mucho más ricas en PB que los tallos tiernos y leñosos. La fertilización química u
orgánica (Benavides, 2002), así como la fertilización basal del suelo y el tipo de
fertilizante (Ramos et al., 2002), la época del año (González y Cáceres, 2002), la
altura de corte (Martín et al., 2002), la densidad de plantación (Boschini et al., 1998)
y la variedad (Huo, 2002) se encuentran entre los factores que más influyen en la
cantidad y concentración de PB y de minerales en las diferentes partes de la planta
de la morera (Martín, 2004).
Benavides (2002) encontró diferencias altamente significativas entre los contenidos
de PB en las hojas (20,9 y 19,2 %), para las frecuencias de corte de 90 y 120 días,
respectivamente. Además, halló resultados similares en el contenido de PB de hojas
(19,0-22,5 %) fertilizadas con diferentes dosis de abono orgánico, en comparación
con un fertilizante químico.
Con respecto al contenido de los minerales, Martín (2004) informó que las hojas de
las variedades Criolla, Cubana, Acorazonada y Tigreada presentaron 0,33 % de P;
2,04 % de K; 2,5 % de Ca; y 0,5 % de Mg.
En las regiones semiáridas de Tanzania, Shayo (1997) y Omar et al. (1998)
encontraron que la PB de las hojas puede variar entre 14 y 18 % y en las ramas,
entre 7,8 y 8,9 %, mientras que el contenido de minerales en las hojas estuvo entre
13,3 y 14,3 %.
Asimismo, en tres clones de morera, Schmidek et al. (2002) obtuvieron 21,7-23,6 %
de PB; 2,1 % de extracto etéreo y 9,1-10,2 % de minerales.
En la República Popular China, Liu et al. (2002) no encontraron grandes variaciones
en los contenidos de PB de las hojas de morera entre los periodos de primavera
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(21,1 %) y otoño (20,9 %); pero en otoño los valores de PB disminuyeron con el
aumento de la madurez de las hojas (22,3-18,9 %).
En lo referente al contenido de cenizas –minerales totales presentes en la planta– en
las variedades de morera, se encontraron valores adecuados desde el punto de vista
nutricional, pero difirieron entre las variedades, la frecuencia de corte y la época del
año. En los estudios realizados por Martín (2004), la variedad Tigreada fue superior
en valores numéricos en los dos años (11,91 y 12,31%), pero no difirió de la
Indonesia (11,76%) en el primer año ni de la Acorazonada en el cuarto año (11,66%).
La variedad Cubana obtuvo el valor más bajo (11,38 y 10,41%) de este indicador en
ambos años.
1.5 Actividad antioxidante en las hojas de Morus alba L.
El alto potencial antioxidante de las hojas de morera le confiere resistencia frente a
las enfermedades (Ginai, 1968; Habib, 2004; Younas et al., 2004).
La mayor parte de la actividad antioxidante en la morera proviene de los compuestos
fenólicos, los cuales constituyen un importante grupo de metabolitos secundarios
(Jyothi et al., 2014). Estas moléculas confieren protección directa contra el estrés
oxidativo, que puede causar la muerte celular mediante modificaciones irreversibles
sobre los ácidos nucleicos, las proteínas y los lípidos. Se considera que la actividad
antioxidante de los compuestos fenólicos es el resultado de la combinación de sus
propiedades quelantes de hierro con las secuestradoras de radicales libres. Otros
autores refieren, que, además de la inhibición a las enzimas oxidasas (como la
NADPH-oxidasa y la xantina oxidasa, evita la producción de especies reactivas del
oxígeno in vivo). Al mismo tiempo, los compuestos fenólicos estimulan la producción
de la catalasa y la superóxido dismutasa, las cuales son enzimas que procesan los
radicales libres derivados de peróxidos y superóxidos, respectivamente. De esta
forma, los compuestos fenólicos interfieren en las reacciones de propagación del
radical libre y en la formación del radical en sí (Pérez, 2003).
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Existen otras moléculas con actividad antioxidante en las hojas de morera, entre las
que se destacan pequeños péptidos, que influyen positivamente en el crecimiento de
las larvas del gusano de seda (Suchisree et al., 2014). En la actualidad, se han
realizado varias investigaciones en las que se recomienda la suplementación de las
hojas de morera con compuestos antioxidantes, para mejorar el rendimiento de la
producción del capullo de seda de B. mori (Balasundaram et al., 2013; Sudhakaran et
al., 2014).
1.6 Germoplasma de Morus alba L. en Cuba
Martín y Noda (2014) señaló que la EEPF-IH posee un germoplasma de 20
variedades de morera; las primeras (Indonesia, Tigreada, Acorazonada, Criolla) que
se introdujeron a partir de 1994 procedían de Costa Rica. Paralelamente, se
naturalizó la variedad Cubana que había sido introducida de Etiopía en 1980-1990.
El autor señala que en el año 2000 se introdujeron de Brasil dos selecciones (IZ-40
e IZ-64) y tres híbridos (IZ-15/7, IZ-13/6 e IZ-56/4), y en 2005 se incorporaron las
variedades Ichinose, Super morera, Cheongol y Ppong, provenientes de Corea del
Sur.
En 2011 se decidió realizar un escalado productivo de la sericultura, para lo que se
introducen de China otras variedades de la especie M. alba L. (Universidad,
Universidad Mejorada, Yu-12 y Yu-62) y de España, la variedad Murcia, las cuales
habían sido estudiadas y recomendadas para la crianza del gusano de seda.
1.7 Sericultura, su vínculo con Morus alba L.
Cifuentes y Sohn (1998) afirmaron que la morera es el único alimento de B. mori, por
lo que resulta fundamental para la crianza, ya que de sus hojas se obtienen los
nutrientes necesarios para que los gusanos crezcan y se desarrollen.
En forma natural, la morera es un árbol que puede alcanzar más de 18 m de altura y
tener más de 100 años de vida. Sin embargo, Pescio et al. (2009) señalaron que no
todas las plantas tienen la misma calidad nutritiva, por lo tanto, la introducción de
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nuevas variedades que hayan sido estudiadas con el propósito de alimentar al
gusano de seda presenta ventajas económicas para la producción de capullo.
Según Soria et al. (2001), la sericultura es una actividad agropecuaria que se dedica
al cultivo de la morera y a la crianza del gusano de seda para la producción de
capullos, a partir de los cuales se obtiene la seda. Esta condición productiva
requiere tres fases: agrícola, pecuaria y artesanal.
La sericicultura o sericultura es la combinación del cultivo de la morera y la crianza
del gusano de seda. Con esta tecnología se puede producir miles de metros del
finísimo hilo. Dicha actividad no necesita de mucha inversión ni esfuerzo físico, pero
sí de dedicación y de controlar la temperatura, la humedad, el tiempo, la limpieza de
las instalaciones de crianza y las plantaciones de morera.
1.8 Atención cultural al cultivo de la morera y su influencia en la producción de
capullos
Pescio et al. (2009) señalaron que las hojas le deben “gustar” a los gusanos, por lo
que este es uno de los primeros conceptos que se deben tener en cuenta para
alimentar al B. mori. Aunque todas las hojas se consumen, es frecuente que las de
una variedad sean preferidas con respecto a las de otra. Es por eso que si se
detectan variedades con estas particularidades, resulta importante que sean
evaluadas y multiplicadas.
La producción del forraje para alimentar el gusano de seda exige de la aplicación de
nutrientes en el suelo, fundamentalmente nitrógeno, por la influencia que ejerce en
la productividad de la morera aunque también incide en su palatabilidad, la cual se
relaciona, con el contenido proteico de la hoja.
Pescio et al. (2004) refirieren que los gusanos prefieren las hojas con más contenido
de PB y grosor y consideran que el P es imprescindible para garantizar el contenido
de aminoácidos importantes para su salud como es el caso de la arginina. También
señalan que la falta de Ca influye sobre la palatabilidad y que el K, aunque todavía
no son bien definidas sus funciones, influye en el equilibrio iónico de la hemolinfa y
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mejora el contenido de la corteza de seda del capullo, por lo que requiere del aporte
continuo de estos elementos químicos.
La fertilización orgánica al cultivo es una de las posibles soluciones para garantizar
el aporte de estos elementos nutricionales a suelos, a través del compostaje de los
desechos que se generan en el proceso de crianza (Martín et al., 2002).
Hanada y Watanabe (1986), Evangelista y Takahashi (2000) señalaron que la
calidad nutricional tienen gran influencia en el desempeño del gusano de seda, en
todas las etapas de su desarrollo y en la producción del capullo. Las larvas se
alimentan, únicamente, de hojas de morera porque ellas contienen el flavonoide
morina, semioquímico que actúa como kairomona que atrae a este lepidóptero hacia
la morera (Rodríguez-Ortega et al., 2013).
Sin embargo, como las características físicas, dureza, pilosidad y ceras y
nutricionales que presentan las variedades de morera son diferentes, ellas influyen
en el consumo de los gusanos (Roy et al., 2000), mientras que algunas sustancias
químicas, presentes en las ceras, estimulan la alimentación, por ejemplo, los
alcoholes hexacosanol (C26) y octacosanol (C28), los cuales se comportan como
fagoestimulantes para las larvas recién nacidas (Bemays y Chapman, 1994).
El gusano de seda necesita para su desarrollo morfológico y realizar sus funciones
fisiológicas, dos nutrientes importantes, proteína cruda y carbohidratos, los cuales se
encuentran en elevados porcentajes en las hojas jóvenes.
Los contenidos de proteínas, lípidos, hidratos de carbono, vitaminas, minerales y
agua, en las hojas de morera, dependen de la variedad, fertilidad del suelo, clima,
época del año, edad y la posición de las hojas. Pang-Chuan et al. (1992)
recomiendan alimentar las larvas adultas, cuarta y quinta edad, con ramas de
morera en crecimiento vegetativo, entre 75-100 días, etapa durante la cual
consumen más del 90 % del alimento ingerido en la etapa de crianza (Porto 2013).
Según Jyothi et al. (2014), se han realizado investigaciones sobre la respuesta
varietal, el efecto de los insumos agronómicos, las estaciones del año y los aspectos
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relacionados con la composición bioquímica de las hojas (Li y Sang, 1984;
Tangamani y Vivekanandan, 1984; Fotedar, 1985; Chaluvachari y Bongale, 1995), en
las que se ha discutido la importancia de la calidad de las hojas de morera para los
gusanos de seda.
1.9 Ciclo de vida de Bombyx mori L.
En la clase Insecta existen varias especies que producen fibras de sedas naturales,
la más importante de estas es B. mori, ya que contribuye con más del 95 % de la
producción mundial de seda (Cifuentes y Sohn, 1998).
1.9.1 Taxonomía
Nombre común: Gusano de seda
Nombre científico: Bombyx mori L.
Clase: Insecta
Orden: Lepidóptera
Familia: Bombycidae
Género: Bombyx
Especie: mori
Los huevos son pequeños, 1 mm de longitud, 1 mm de ancho y 0,5 mm de espesor
similar a la cabeza de un alfiler, 20 000 huevos pesan entre 10,5 a 12,5 g). La
duración de este estado depende de la raza y el tipo de diapausa.
Según el tipo de diapausa, las razas se clasifican en univoltinos, bivoltinos y
polivoltinos (Avendaño, 2001, Basavaraja, 2011).
La primera edad del ciclo larval se inicia con la eclosión del huevo (figura 1). El
tamaño inicial de la larva es de 3-5 mm de longitud; luego de 4 días, alcanza 7 mm
de longitud y comienza el primer proceso de muda, que dura 24 horas.
De inmediato, se inicia la segunda edad, que tiene una duración de 3 días, durante
la cual la larva alcanza 12 mm de longitud y empieza el segundo proceso de muda,
24 horas.
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En la tercera edad (4 días) el gusano llega a medir 25 mm e inicia la tercera muda,
con una duración aproximada de 24 horas. Esta etapa se conoce como gusano
joven (Sohn, 1997).
Durante la cuarta y quinta edad, es el periodo durante el cual el gusano presenta la
mayor rapidez de crecimiento y aumento de peso, se considera como gusano adulto.
Figura 1. Ciclo de vida de B. mori.
Duarte y Mercado. (2001) afirmaron que, en la fase adulta, el gusano consume el 98
% del total de alimento suministrado en su estado larval, el 10 % en el cuarto ínstar
(5 días) y el 88 % en el quinto (6-8 días). El estado larval es el ciclo más activo del
insecto, pues en este ocurren, con gran intensidad, una serie de transformaciones,
que incluyen, la muda, la secreción, purga, la excreción de seda y elaboración del
capullo.
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Al finalizar la quinta edad, se inicia la formación de la pupa o crisálida, 3 días,
seguida del proceso de encapullado, 4-5 días, la metamorfosis, transformación de la
pupa en mariposa, 10-15 días y la fase adulta, proceso de ovoposición,
4-6 días.
Cuando la mariposa emerge del capullo presenta alas blanquecinas y,
generalmente, desarrolladas, aunque a en ocasiones aparecen individuos con alas
pequeñas; sin embargo, ella no puede volar ni alimentarse y su función es
exclusivamente reproductiva.
El ciclo productivo del gusano de seda, desde la eclosión del huevecillo hasta la
cosecha del capullo, tiene una duración aproximada de 30-40 días, en dependencia
de la raza, las condiciones ambientales y el manejo.
Una vez que se cosecha el capullo, este se traslada a un secador, con una
temperatura superior a 50oC, en el que la pupa o crisálida muere, interrumpiendo su
ciclo biológico y a continuación, se extrae el hilo de seda del capullo.
1.10 Sistema digestivo y nutrición del gusano de seda
Según Porto (2002), el gusano de seda puede ser clasificado como: monófago, ya
que consume solo un tipo de alimento; fitófago, pues este alimento es de origen
vegetal, y filófago porque ingiere hojas, específicamente.
Durante la evolución, la larva del gusano se ha adaptado tanto a la morera, que la
puede reconocer entre muchas otras plantas. En este sentido, Sohn (1997) señala
que el gusano de seda posee sensores específicos, situados en la cabeza, que le
permiten reconocen químicamente la morera y que la larva utiliza el olfato para
distinguir lo que puede consumir.
En este sentido, se han realizado estudios para identificar los principales
fagoestimulantes; sin embargo, al parecer, existe un conjunto de sustancias que
actúan en sinergia para que el gusano reconozca la hoja de morera a nivel de la
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parte anterior del intestino, el gusano presenta sensores que le permiten intuir que
primero debe masticar y luego, deglutir (Cifuentes y Sohn, 1998).
De acuerdo con Akai (1976), los órganos internos del gusano son: intestino, glándula
de seda, tráquea, sistema nervioso, tubo de Malpighi, vaso dorsal y órganos
reproductores. En el quinto instar, el sistema digestivo ocupa la mayor parte del
cuerpo y para mantener el metabolismo en función del crecimiento y la
reproducción, es indispensable que durante la digestión, los alimentos ingeridos
sean triturados hasta alcanzar una forma que pueda ser asimilada por el gusano.
El alimento les proporciona a los gusanos, hidratos de carbono, proteínas y grasas,
pero para ello necesitan de un grupo de enzimas digestivas con la capacidad de
hidrolizar estas macromoléculas.
Los aminoácidos constituyen la unidad estructural de las proteínas, es por eso que
las hojas de morera deben presentar un elevado porcentaje de MS, 23-33 % (Porto,
2002) y de proteínas, 15-27,6 % (Sing y Makkar, 2002), para favorecer el
crecimiento de las larvas.
Estos autores señalan que los productos absorbidos por el canal alimenticio se
pueden utilizar, directamente, para satisfacer las necesidades metabólicas o para
acumular en depósitos, de los que pueden ser retirados en momentos de necesidad.
Por su parte, Parra (1991) señaló que la cantidad y calidad del alimento consumido
en la fase larval constituye una condición básica para el consumo, el crecimiento, el
desarrollo, la reproducción y el aprovechamiento del capullo. Ello también influye en
el peso corporal, la sobrevivencia, la fecundidad, la longevidad y la producción de
capullo durante la fase de crecimiento.
Para estudiar la morfología externa de la larva del gusano de seda, es preciso
analizar el quinto ínstar, ya que es el periodo de mayor crecimiento, consumo y
desarrollo y es donde se aprecian de manera más evidente varios caracteres
distintivos (figura 2).
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Al igual que otros insectos, el cuerpo de la larva está formado por cabeza, tórax y
abdomen. Los tres segmentos posteriores a la cabeza conforman el tórax y la parte
comprendida entre el cuarto y el treceavo segmento, el abdomen.
Figura 2. Morfología de la larva del gusano de seda en el quinto ínstar.
La cabeza está cubierta por quitina, la cual es un protector duro de color negro
marrón, mientras que el tórax y el abdomen están cubiertos por la cutícula, que es
más flexible.
1.11 Morfología de la pupa del gusano de seda
La quinta edad del gusano de seda dura aproximadamente 6-8 días. Cuando culmina
este periodo, la larva deja de comer, su cuerpo se torna transparente y comienza a
hilar para formar el capullo (figura 3).
Según Akai (1976), en la parte externa se aprecia una membrana protectora, que al
inicio es de color amarillo y de textura blanda, que con posterioridad se cambia a una
tonalidad marrón y se hace consistente dentro del capullo durante unos 10-12 días.
Después, durante esta una etapa de aparente quietud, se empieza a transformar en
pupa y a producirse grandes cambios en el gusano, que lo transforman en mariposa.
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Figura 3. Morfología de la pupa del gusano de seda.
Patiño (2008) halló que la pupa de B. mori está compuesta por proteína cruda, 49,3
%, grasa cruda, 26,99 %, carbohidratos, 5,6 %, quitina y corianina, 7,3 %, y ceniza,
5,7 %.
1.12 Forma de reproducción de Bombyx mori L.
La única función de la polilla es la reproducción. Las hembras ovopositan,
aproximadamente, 500-600 huevecillos, almacenados en su aparato reproductor y
después culminan su ciclo de vida. La fertilización puede ser interna o externa; en el
primer caso, se produce la cópula, y en el segundo, el macho fertiliza los huevos de
manera externa.
Existen técnicas especializadas para romper la dormición de los huevos (Pescio et
al., 2009) Los huevos hibernados o activados por tratamiento ácido se incuban
durante 10-12 días, a 25oC; mientras que los huevos sin diapausa eclosionan 1-2
días antes.
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1.13 Aspectos generales sobre la producción y calidad del capullo del gusano
de seda
De acuerdo con Cifuentes y Sohn (1998), al finalizar la etapa larval, los gusanos
comienzan a producir tenues hilos de seda y a buscar puntos altos para construir el
capullo. Este se torna de color amarillo o blanco en dependencia de la raza, y el
gusano que depone el contenido intestinal (purga). Durante esta etapa es importante
mantener adecuadas condiciones ambientales, ya que la humedad relativa del lugar
aumenta, ya que durante a la purga, 20 000 gusanos elimina, aproximadamente, 45
litros de agua, por lo que se debe garantizar una apropiada ventilación en el local de
crianza. Este es el momento ideal para colocar los encapulladores.
Al segundo día de encapullado, el gusano termina de formar la estructura de sostén
de los capullos, masa laxa de fibras de seda suelta que se llama borra (Miguel,
2014).
Durante el tercer día, las larvas continúan construyendo el capullo, pero ya no se les
puede ver. El capullo está listo al cuarto día, aunque la larva aún no se ha
transformado completamente en pupa.
Entre el séptimo y décimo día los capullos se pueden cosechar aunque con un
elevado contenido de humedad, 60 % aproximadamente. La mayor parte del agua se
encuentra en el cuerpo de la pupa (Pescio et al., 2009).
La calidad y la cantidad de alimento son los factores más importantes para lograr una
satisfactoria cosecha de capullos. En este sentido, Avendaño y Soria (1998)
definieron la calidad del capullo como un conjunto de características que determinan
su estructura y propiedades físicas, que definen su comportamiento al ser devanado.
El capullo está formado por cinco partes: borra, corteza, pupa, forro de la pupa y piel
del gusano. Del peso total del capullo fresco, la borra constituye entre 0,6 y 0,9 %, el
filamento de la borra es muy delgado, frágil y no se puede devanar y su contenido de
sericina es elevado. La corteza, que representa entre el 15-24 %, es la parte usada
para devanar y el forro de la pupa, el 25 %, que es lo último que se hila del capullo
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(Patiño, 2008). Cuando se cosechan los capullos y se le retira la borra, ella puede
servir como subproducto (Miguel, 2014).
1.13.1 Características del capullo
La forma del capullo es definida por la raza y de manera general, cada una tiene una
representación de capullo diferente lo cual influye en su calidad.
Vista por fuera puede ser redonda, elíptica, cónica y en huso, de cintura apretada y
poco apretada. La brillantez y el color del capullo, son dos características específicas
y esta última depende de la capacidad que posea el gusano para a través del
aparato digestivo y las glándulas sericígenas, sintetizar la proteína aspecto que
constituyen una característica propia de la raza. (Patiño, 2008).
1.13.2 Composición de los filamentos
El filamento está conformado por babas que segregan las glándulas sericígenas, las
cuales, a la salida de la glándula y entrar en contacto con el medio ambiente, se
solidifican en un solo filamento, compuesto por dos proteínas, fibroína y sericina,
75 % y 25 % de la corteza. La composición química del filamento es 97 % proteína
pura, cera 0,4-0,8 %, carbohidratos 1,2-1,6 %, factor de coloración 0,2 % y materia
inorgánica 0,7 % (Patiño 2008).
El peso del capullo, el porcentaje de seda bruta y el porcentaje de capullo de primera
son los principales indicadores a considerar en el rendimiento económico y la calidad
de la actividad de sericultura.
1.14 Breve historia de la sericultura
En el año 2698 A.C., la emperatriz Hsi-Ling-Shih descubrió fortuitamente el
devanado de los capullos de seda. En la leyenda que llegó hasta nuestros días se
comenta que, mientras bebía una taza de té a la sombra de las moreras de su
jardín, cayó en su taza un capullo y, por efecto del calor de la infusión, se
desprendieron varios hilos que asombraron a la noble dama. Los hilos suaves y
resistentes motivaron a la inquieta princesa a obtener más, empleando la misma
Revisión Bibliográfica
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21
técnica, o sea, sumergiéndolos en agua caliente para con ellos hacer tejer una tela
(Lacerca, 1983).
Según Pescio y Casadio (1994), la seda se descubrió en China hace más de 4 600
años, y la sericultura se introdujo en Corea alrededor del año 200 a.C., cuando
grupos de inmigrantes chinos arribaron allí. La seda llegó a Occidente a través de
numerosas rutas y en el año 300 a. C., la crianza del gusano de seda se estableció
en la India. La seda se convirtió en un material industrial y alcanzó gran valor; los
agricultores pagaban sus impuestos y agradecían favores especiales en grano y
seda.
Valero (2011) informa que investigaciones históricas evidencian que en una primera
etapa, la sericultura en Cuba se introdujo en el periodo comprendido entre 1824 y
1848. La Institución Agronómica de Santa Clara divulgó los resultados sobre la
agricultura y algunos hacendados se orientaron en la siembra de morera y en el
proceso fabril del gusano de seda. En la segunda etapa, 1875-1889, se dedicó al
cultivo de la morera como forraje y a la manufactura de la seda.
Entre 1920 y 1945 tuvo lugar la tercera etapa, en la que se introdujeron el cultivo de
la morera y la crianza del gusano de seda. Por interés de empresarios
estadounidenses, se asociaron más de 500 propietarios y productores de grandes
plantaciones y ayuntamientos de la Sociedad Amigos del Árbol.
El 10 de febrero de 1938 se creó la Estación Sericícola de Santa Clara, en la que
fungió como director Mario Tirelle, quien era en esos momentos subdirector de la
Estación de Bacología de la Universidad de Padova en Italia.
La falta de apoyo de los gobiernos de la época, la escasez de crédito, el empleo de
maquinarias artesanales, las deficiencias en las casas de los campesinos para la
crianza del gusano, insuficiencias de viveros y de plantaciones y la competencia de
la producción de la seda artificial llevaron esta actividad al fracaso.
Revisión Bibliográfica
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22
La cuarta etapa se inició en 2003, con el resurgimiento serícola cubano como una
alternativa de diversificación y desarrollo para el sector agrario, y con el fomento de
esta tecnología en la EEPF-IH.
1.15 Sericultura en Cuba
Las primeras crianzas de B. mori en la EEPF-IH, se iniciaron en abril de 2005, y los
primeros huevecillos que se utilizaron provinieron de Turquía, con el apoyo de la
Organización de las Naciones Unidas para la Alimentación y la Agricultura (FAO).
Comenzaron así las introducciones en Cuba, que posteriormente fueron de Japón,
Corea del Sur, China, Bulgaria, Italia y Colombia. En todos los casos, la Estación
contó con las licencias de importación de los huevos y de la explotación de
laboratorios otorgadas por los órganos rectores de esta actividad en Cuba, el Centro
Nacional de Seguridad Biológica y de Sanidad Vegetal (Fiallo y Prieto, 2012).
En la etapa 2005-2009, el peso promedio del capullo fue 1,66 g y el porcentaje de
seda bruta, de 20,58, con una duración del estado larval promedio de 25 días.
Durante los meses de marzo-abril de 2013, se registraron los índices más bajos de
peso del capullo: 1,41 g y porcentaje de seda bruta: 19,17 % (Fiallo, Informe
Introducción y Fomento a la sericultura en Cuba).
Entre los años 2006-2014 se han realizado 44 crianzas de B. mori, en las
instalaciones de la EEPF-IH, en las que se ha evaluado a escala experimenta, el
comportamiento del gusano en diferentes épocas del año. En los grupos
experimentales se registraron porcentajes de eclosión de 94,3; 95,0; 96,6; 96,1 y
95,3 % para los periodos enero-febrero, marzo-abril, junio-julio, septiembre-octubre y
noviembre-diciembre, respectivamente (Fiallo y Prieto, 2012).
En el periodo comprendido entre 2011-2013, se fomentó el escalado productivo de la
sericultura, a partir de la creación de un proyecto de Investigación y Desarrollo (I+D),
en el que participaron diferentes instituciones del país, con el objetivo de establecer
un área mayor de plantaciones de morera, con las variedades existentes y las de
nueva introducción; estandarizar la tecnología de crianza para la producción de
Revisión Bibliográfica
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capullos a gran escala, fomentar el uso del hilo de seda para la industria textil y los
diferentes subproductos de la sericultura, con usos en las empresas médico-
farmacéutica, cosmética y biotecnológica. También, se establecieron en diferentes
provincias áreas de morera con el fin de incorporar esta especie en la dieta de otros
animales.
Durante este periodo y, por primera vez, se estableció en Cuba la siembra de semilla
botánica de M. alba, en fase de vivero, lo que ha permitido fomentar las áreas de
este cultivo con diferentes fines, se hicieron investigaciones sobre tecnología de
manejo, frecuencias de corte y producción de semillas de las variedades Yu-62, Yu-
12, Universidad, Universidad mejorada, Murcia, Acorazona, Tigreada y Criolla y
estudios fisiológicos en Yu-62, Yu-12, Universidad, Murcia y Tigreada.
Asimismo, se realizaron crianzas con huevos de B. mori de diferentes orígenes,
Colombia, Brasil, España, Italia, India, Bulgaria, China, Corea del Sur y Tailandia, en
las cuales los huevos procedentes de Tailandia y China mostraron los mejores
comportamiento para nuestras condiciones. También se aislaron e identificaron los
virus y bacterias responsables de la enfermedad del gusano de seda en Cuba; se
purificaron filamentos de seda cruda y se compararon con los obtenidos a partir de
huevos procedentes de Italia, Bulgaria y Tailandia; y se obtuvieron hidrolizado de
sericina y proteína extraída y purificada de capullos de seda de B. mori (Pérez et al.,
2014).
Por otra parte, se formularon diferentes productos de la industria cosmética con
hidrolizado de sericina y se obtuvo aceite de crisálida, con el empleo de diferentes
condiciones de extracción.
En la actualidad, se realizan investigaciones sobre las salidas productivas de las
diferentes tecnologías derivadas de la sericultura.
Revisión Bibliográfica
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1.16 Morera y gusano de seda. Impacto económico y social en la actualidad
1.16.1 Estado del arte
La Comisión Internacional de Sericultura (ISC), surge en el año 1955 a partir de la
Comisión Intergubernamental de Sericultura fundada en el año 1948, con el objetivo
de promover el desarrollo científico-técnico y económico de la sericultura a nivel
internacional. Su secretaría radica en Lyon, Francia y en la actualidad se reporta
actividad de sericultura en 31 países.
1.16.2 Informaciones acerca de la sericultura por países
La sericultura es una cultura milenaria y sigue existiendo como una actividad de
tradición e importancia económica. No obstante manifiesta decadencia, motivado por
varias causas: decrecimiento de los productores en los diferentes países por falta de
incentivo económico, disminución de las áreas de morera por pasar a otros usos
(fundamentalmente urbanizaciones), poco uso de la seda por las nuevas
generaciones y los altos precios de este tejido. Sin embargo existe un
pronunciamiento por profundizar y sistematizar investigaciones de mercado a través
de la ISC, con búsqueda de nuevos usos y productos alternativos vinculados a la
sericultura, en la biomedicina, cosméticos, valorización de la cadena serícola, y
mediante la creación de un mercado de fibras y productos naturales.
Se trabaja además el mejoramiento de las razas de gusanos de seda buscando
resistencia a las principales enfermedades virales (baculovirus), logrando híbridos a
partir de cruzamientos de razas multivoltinos x bivoltinos, con mayores rendimientos
en la producción de seda, resistencia a enfermedades y readaptados a condiciones
tropicales (Pérez y Prieto, 2011).
1.17 Producción de seda
Los principales países productores de seda son China, India y Japón. China produce
680 000 toneladas de capullos y 130 000 t de seda, lo que representa el 74 % de la
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producción mundial, de ella el 90 % es para la exportación al mercado mundial y con
ingresos por 26 billones de USD (Xiaofeng, 2011).
La India es el segundo productor mundial, la sericultura es una actividad realizada en
lo fundamental por mujeres, que involucra a 7,25 millones de personas. En el período
2010-2011 se produjeron 20 410 t de seda cruda, de ellas, el 80 % a partir del
gusano de seda B. mori y el resto de las tres especies no dependientes de morera
que se crían en el país. La cadena serícola está soportada por fondos federales,
provinciales y de la iniciativa privada y se importan de China 10 006 t. Para el año
2016 se pronostica una producción de 32 mil toneladas (Roy, 2011).
Japón es el mayor consumidor de seda e importador de seda cruda y de productos
derivados de la sericultura. El consumo doméstico ha ido declinando por el
decrecimiento en la demanda de los kimonos tradicionales, la disminución del
número de productores de capullo y por la importación de otros textiles demás bajos
precios. En el 2010 la producción de capullo seco fue de 265 t, el 21 % de lo que se
produjo en el 2000 que fue de 1 244 t.
1.17.1 Otros países productores de seda
Wasan (2011) reporta que Tailandia retoma la actividad de la sericultura como un
programa importante en 1999, fundado por la Reina Sirikit para el rescate de esta
tradición en su economía y en el 2005 se creó el Instituto y el Departamento de
Sericultura subordinados al Ministerio de Agricultura y Cooperación. El consumo de
seda en un año es de 2 000 t, de ellas producen 1 520 t, 1 200 manufacturada y 320
industrial e importan entre 400 y 500 t. Su principal mercado es el nacional, seguido
del turismo y registran exportaciones hacia 38 países.
De los 65 millones de habitantes el 54 % trabaja en la agricultura y de ellos el 2,5 %
en la sericultura, en lo fundamental mujeres en las edades comprendidas entre 35 y
40 años, mientras que 91 530 productores alternan la sericultura con el cultivo del
arroz.
Revisión Bibliográfica
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En Brasil las principales regiones de la sericultura se desarrollan en el sur del país,
Paraná, con el 92 %, junto con Sao Paulo, Mato Grosso del Sur y Santa Catarina. El
promedio de área de morera por campesino es de 2,5 ha y realizan 10 crianzas al
año, de 1 a 2 cajas por familia en cada crianza. A partir de la década del 2 000 ha
habido una reducción importante de la sericultura y de las áreas de morera. Han
cerrado las industrias por falta de materia prima quedando solo la industria BRATAC.
El principal uso de la seda es para la exportación a Japón (42 %), Viet Nam (20 %) e
Italia (20 %) y desarrollan un pequeño proyecto para artesanos. También trabajan en
investigaciones de biotecnología molecular, para la obtención de líneas de híbridos
resistentes al virus de la polihedrosis (Pacheco de Lacerda, 2011).
Souad (2011) reporta que la sericultura egipcia ha disminuido en los últimos tres
años, su desarrollo agrícola y tecnológico es pobre, poseen dos millones de árboles
de morera diseminados en el país, pero solo 83 ha se encuentran bajo cultivo.
Poseen un banco de germoplasma de 54 variedades, los rendimientos de capullo
fresco por caja son de 16-18 kg y el principal destino de su producción 3 t es para
uso local.
En Bulgaria la Estación Experimental de Sericultura de Vratza es la de mayor
actividad en la industria. Posee el mayor germoplasma de Europa con 140
variedades de morera y 230 cepas de gusanos, También trabajan diferentes líneas
de investigación, mejoramiento genético, agrotecnia y manejo de la morera,
mejoramiento del gusano de seda, producción de huevos y control de las
enfermedades, del proceso de encapullado. Reportan una producción de 9,4 t de
seda por año. El precio de 1 kg de capullo fresco es de 6 euros y de una caja de
huevos de 12 euros (Panomir, 2011).
1.18 Aspectos biotecnológicos sobre el gusano de seda
En países como China y Japón se realizan investigaciones dirigidas a obtener la
secuencia del genoma del gusano de seda (Kazuei et al., 2011).
Revisión Bibliográfica
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Sus resultados se utilizan como modelo para el control de plagas, el desarrollo de
nuevos insecticidas, en trabajos de transgénesis, como biorreactor, en la producción
de proteínas recombinantes, como materia prima de la industria farmacéutica (Fei-
ming, 2011; Yan et al., 2009; Lu y Yang, 2012). También se emplean para el
restablecimiento del tejido de la córnea mediante el uso de nanofibras de seda y
como biomaterial con posibilidades de construir estructuras más complejas (Reddy y
Prasad, 2011). Además, ha sido reportado para la obtención de vacunas, usos
potenciales de la sericina y fibroina en tratamientos clínicos (Jigen, 2012; Xie et al.,
2011), para los tratamientos de afecciones de la piel, mejorar los rendimientos del
gusano de seda en la producción de seda y la obtención de seda fluorescente para la
elaboración de tejidos (Gui et al., 2010).
En el 2008, el gobierno de Japón presentó un programa para la regeneración de esta
industria, que incluye la producción de gusanos transgénicos, el estudio de las
propiedades físico-químicas de las proteínas de la seda y sus materiales,
principalmente para cosméticos y otros usos médicos. Recientemente se ha
desarrollado un polvo de seda protector de la piel, a partir del capullo amarillo
verdoso, rico en flavonoides. Del gusano transgénico se han obtenido antígenos
humanos, hormonas del crecimiento y seda fluorescente para el desarrollo de textiles
con altos precios (Toshiki et al., 2011).
1.19 Otros aspectos de interés
Según Gonzáles (2011), en Filipinas se desarrollan estrategias de control contra
plagas presentes en la morera que afectan los rendimientos en las crianzas,
principalmente el ácaro rojo, y cuentan con un banco de germoplasma con 19
cultivares (cv), donde el cv Alfonso demostró una resistencia aceptable contra la
plaga, 5 mostraron una resistencia moderada y 13 fueron susceptibles a esta.
Jaishankar y Dandi, (2011) reportan que mediante la combinación de la fertilización
química con la orgánica, se reduce hasta el 50 % de los fertilizantes químicos con
incremento en la calidad de la hoja. Los principales bioproductos utilizados son:
Azotobacter, Micorrizas, Trichoderma y Vermicompost.
Materiales y Métodos
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CAPÍTULO 2. MATERIALES Y MÉTODOS
2.1 Cultivo de la morera
Las variedades de M. alba (Tigreada, Universidad y Yu-62) se cultivaron en el Área
Experimental Norte, Campo # 4, en la provincia de La Habana. En la investigación se
emplearon plantaciones con dos años de establecimiento, en un marco de siembra
de 1,0 x 0,5 m, las cuales recibían una frecuencia de poda de 90 días a altura de
corte de 0,5 m.
Los suelos están clasificados como Ferralíticos Rojos, con un elevado nivel de
materia orgánica, 3,39 % (Instituto de Suelos, 2013).
Tres veces al año, recibieron una fertilización de N, P y K de 300, 120 y 300
kg/ha/año La biomasa en las hojas de las variedades de morera fue superior a los
300 g/planta y se seleccionaron teniendo en cuenta su buen comportamiento
agronómico.
2.2 Caracterización morfológica y química de las hojas de morera.
Para realizar el proceso de caracterización morfológica de las hojas de morera se
utilizaron como descriptores, la textura, el color del haz, el tipo de borde y la base
de la lámina foliar (Cifuentes y Sohn, 1998).
Se colectaron tres muestras representativas de las hojas maduras y frescas de las
variedades de morera, a razón de 100 g cada una.
Los análisis químicos se realizaron en el Laboratorio de Suelo, Agua y Tejido Vegetal
de la Estación Provincial de Investigación de la Caña de Azúcar “Antonio Mesa” y en
la EEPF-IH, ambas ubicadas en la provincia de Matanzas. Los estudios
bromatológicos se realizaron a partir de los procedimientos que se describen en la
AOAC (2000).
Materiales y Métodos
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2.2.1 Determinación de la materia seca
Las hojas de morera fresca se pesaron y se deshidrataron en una estufa de
ventilación forzada, modelo Memmert, a 60-80oC, hasta peso constante y por
diferencia entre el peso inicial y final, se calculó el porcentaje de MS en la hoja fresca
de cada variedad de morera.
La MS foliar se trituró en un molino, modelo Retsch GmbH, con una criba de 1 mm y
el polvo seco de color verde oscuro obtenido, se almacenó en un frasco de vidrio de
color ámbar, con tapa de metálica de rosca a 20°C.
2.2.2 Nitrógeno total y proteína bruta
La determinación del N total y de la PB se realizó mediante el método de Kjeldahl
(AOAC, 1995). Se analizaron tres muestras de cada variedad de morera y el
contenido de N total se estimó por la siguiente fórmula:
Donde:
V: volumen de H2SO4 usado en la valoración de la muestra problema, este valor se
corrige con el volumen usado en la valoración de la muestra blanco.
N: normalidad del H2SO4
14: peso en mg de 1 meq de N
100: para expresar en %
P: peso de la muestra de MS (mg)
El contenido de PB se estimó mediante la multiplicación del valor del % de N con el
factor empírico 6,25 (factor de convención del % N a PB).
2.2.3 Fibra bruta
Para la determinación de la FB se pesó 1 g de la muestra de MS y se colocó en un
vaso de precipitado de 400 mL. Se añadieron 100 mL de H2SO4 al 1 % (v/v),
seguidamente se colocó en una plancha calefactora para hervir durante 20 minutos.
Materiales y Métodos
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30
A continuación se filtró y se lavó con H2O hasta neutralizar. Una vez terminado este
proceso se pasó la muestra a un vaso de precipitado con NaOH al 1,25 % (m/v), para
hervir durante 20 minutos, se filtró y enjuagó hasta neutralizar. Se realizó otro filtrado
con succión, se enjuagó con alcohol, se filtró y se puso en estufa a una temperatura
de 100oC, durante 24 horas. Después, se depositó el crisol en la desecadora, se
enfrió y, finalmente, se pesó el residuo seco. El residuo seco se colocó en la Mufla
(modelo Muffle Furnace SX2 Series) a 500ºC durante 4 h. La determinación del
porcentaje de FB se realizó a partir de la siguiente fórmula:
% FB = P1 – P2 x 100
P3
Donde:
FB: fibra bruta
P1: peso del crisol más residuo seco (g)
P2: peso del crisol más cenizas (g)
P3: peso de la muestra (g)
2.2.4 Determinación del contenido de minerales
La determinación de P y K también se realizó por el método Kjeldahl (AOAC, 1995).
Se evaluó experimentalmente el contenido de las sales P2O5 y K2O, y se estimó el
nivel de P y K, multiplicando el valor de las sales por 2.
La muestra se mineralizó con una mezcla de H2SO4 y Selenio (Se), a una
temperatura de 390-410oC. Se determinó el porcentaje de P y K por destilación y
colorimetría de llama.
El contenido de Ca se estimó de la siguiente manera:
% Calcio = VCa + FCa
FCa = 2,5
V
Materiales y Métodos
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31
Donde:
VCa: volumen de solución de EDTA gastados en la titulación de la muestra
FCa: factor del Ca
V: volumen de solución de EDTA gastados en la titulación de la solución patrón de
Ca
2.2.5 Cenizas
Las cenizas comprenden todos los minerales de las hojas, después de que la materia
orgánica se ha quemado. Se pesaron tres réplicas de MS de las hojas antes de
colocarlas en la mufla (modelo Muffle Furnace SX2 Series), luego se pesaron las
cenizas y se determinó su porcentaje en la MS.
2.3 Determinación de la actividad antioxidante en las hojas de morera
2.3.1 Preparación del extracto etanólico de la masa foliar seca
Se pesaron 10 g de muestra de las tres variedades de morera, se maceraron en 150
mL de etanol absoluto y se incubaron en recipientes cerrados durante 24 horas. La
mezcla etanólica se filtró con papel de filtro cualitativo Whatman, con el auxilio de
una bomba de vacío; el filtrado se dejó en reposo y oscuridad durante 24 horas. El
material foliar separado en el filtro se sometió a una segunda extracción con etanol y
luego se filtró a las 24 horas. Se concentró el filtrado final hasta sequedad en un
rotoevaporador (modelo IKA®HB10 Basic) a presión reducida, 60oC y 105 rpm.
2.3.2 Determinación del contenido de fenoles totales
La concentración de compuestos fenólicos en los extractos etanólicos derivados de
la MS foliar se midió de acuerdo con el método de Folin-Ciocalteu (Gao et al., 2000).
Se mezclaron 0,5 mL de las muestras en las concentraciones comprendidas entre
100 y 1100 µg de extracto etanólico/mL, con 2,58 mL del reactivo de fenol Folin-
Ciocalteu. Pasado 3 minutos, se adicionó a las mezclas 0,3 mL de una disolución de
carbonato de sodio saturado. Las mezclas en reacción se incubaron a temperatura
ambiente (25ºC), durante 20 minutos. Se midió la absorbancia a 760 nm en un
Materiales y Métodos
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32
espectrofotómetro, modelo T70 UV/VIS Spectrometer PG Instruments Ltd UV-Visible.
Para la preparación de la curva de calibración se utilizaron soluciones de ácido
gálico, con concentraciones entre 25 y 400 µg/mL. Los niveles de compuestos
fenólicos se expresaron como equivalentes de ácido gálico (EAG), mg de EAG/g del
extracto etanólico. Las estimaciones se realizaron por triplicado, y los resultados se
expresaron como la media ± SD.
2.3.3 Cuantificación de los flavonoides totales
La cuantificación de los flavonoides se realizó mediante el método del cloruro de
aluminio (Yang et al., 2007). Se mezcló 0,5 mL de los extractos etanólicos con
2,5 mL de agua destilada y 150 µL de nitrito de sodio al 5 % (m/v). Se mezcló en
vortex por 10 segundos y se dejó en reposo a temperatura ambiente por 5 minutos.
Luego se añadieron 300 µL de cloruro de aluminio 10 % (m/v), 1 mL de NaOH 1 mM
y 550 µL de agua destilada. Las soluciones se mezclaron y se dejaron reposar por 15
minutos. La absorbancia de las muestras se leyeron a 510 nm en espectrofotómetro,
modelo T70 UV/VIS Spectrometer PG Instruments Ltd UV-Visible. Para obtener la
curva de calibración se preparó una solución estándar de quercetina, en un intervalo
de concentraciones de 25 a 400 µg/mL. Los resultados se expresaron como
miligramos de equivalentes de quercetina (EQ) por gramo de extracto etanólico de la
MS foliar.
2.4 Crianza del gusano de seda
La crianza del gusano de seda se realizó en los meses de enero y febrero del año
2014. Se utilizó el polihíbrido Chul Thai-6, el cual ya ha sido evaluado durante dos
años en Cuba.
Antes de comenzar, el local fue desinfestado con agentes bactericidas y fungicidas
(anexo 1). Estos productos se asperjaron en la sala y las literas de cuatro pisos, que
se utilizaron como camas. El operario empleó los medios de protección de acuerdo
con el nivel de toxicidad de los productos utilizados. Los pisos de las camas se
Materiales y Métodos
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33
vistieron con papel Kraft, los que se cambiaron al finalizar cada edad de la fase
larval.
Durante la crianza se mantuvieron las condiciones ambientales controladas: 23 ±
2°C, 72 ± 3 % de humedad relativa, con fotoperiodo de 16 horas luz y 8 horas
oscuridad (anexo 2).
2.4.1 Alimentación del gusano de seda
Se establecieron unidades de crianza de 100 gusanos, en un diseño experimental
completamente aleatorizado, con tres réplicas para cada variedad de morera. La
alimentación de las larvas con las variedades de morera comenzó a partir de la
tercera edad (Meneguim et al., 2007; Munhoz et al., 2009).
Se llevó a cabo un régimen de alimentación de tres comidas por día, 8:00 a.m., 1:00
p.m. y 7:00 p.m., con hojas frescas de cada variedad (Rodríguez-Ortega et al., 2013).
En los días de muda, que marcan el fin de cada etapa durante la fase larval, no se
les proporcionó alimento.
2.4.2 Determinación de los índices nutricionales
Se escogió el día cinco de la quinta edad para determinar los índices nutricionales
según las recomendaciones de Cifuentes y Sohn, 1998; Munhoz et al., 2009;
Meneguim et al., 2007.
Se determinó el peso verde del alimento ofrecido en cada alimentación, el peso del
material vegetal no consumido y de las heces fecales. Se registró el peso vivo de las
larvas en cada unidad de crianza, al primer y quinto día de la quinta edad (anexo 3).
Los índices nutricionales se determinaron, de manera independiente, en cada unidad
de crianza a través de las ecuaciones propuestas por Meneguim et al. (2010) y
Rodríguez-Ortega et al. (2013), con algunas modificaciones (los índices nutricionales
se expresaron en mg por individuo en vez de mg por mg de peso de la larva).
Materiales y Métodos
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34
Tasa de consumo de hoja fresca (T.C. hoja fresca):
Cantidad de hoja fresca que ingiere como promedio 1 gusano en 1 día
(mg/gusano/día).
Tasa de crecimiento relativo (TCr):
Crecimiento promedio de 1 gusano en 1 día (mg/gusano/día).
Tasa metabólica relativa (TMR):
Cantidad aproximada del alimento que necesita 1 gusano para obtener energía en 1
día (mg/gusano/día).
Las variables usadas para calcular los índices nutricionales fueron:
AF. Peso del alimento ofrecido (mg)
Ar. Peso del alimento no consumido (mg)
F. Peso de las heces fecales (mg)
G. Ganancia de peso de las larvas entre el primer y quinto día de la quinta edad (mg)
I. (AF-Ar): Peso del alimento ingerido (mg)
M. (I-F-G): Alimento metabolizado durante el período de alimentación (mg)
N. Número de gusanos
T. Duración del periodo de alimentación (días)
2.5 Comportamiento de la mortalidad de las larvas
Cada día se retiraron y contabilizaron las larvas enfermas y muertas (anexo 4).
Materiales y Métodos
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35
La extracción se efectuó con pinzas y se depositaron en un recipiente con una
solución de formaldehido al 3 %, y con posterioridad, se enterraron alejadas de la
sala de crianza.
2.6 Evaluación de la calidad de los capullos de seda
Una vez iniciado el proceso de purga y maduración de las larvas, se colocaron en las
rodalinas, para facilitar el proceso de construcción de capullos.
Pasado siete días del inicio del proceso de encapullado, se realizó la cosecha y se
les retiró de forma manual la borra. Después los capullos se pesaron de manera
independiente, se cortaron para extraer la pupa y la exuvia, y finalmente se pesaron
de manera independiente la pupa y la corteza de cada capullo.
El control de la calidad de los capullos de seda se hizo de acuerdo con el sistema de
clasificación y análisis usado en Colombia y Ecuador (Cifuentes y Kim, 1992;
Jaramillo, 2007).
A cada indicador se le asignó una puntuación y a partir de la suma total de las
calificaciones se estableció la calidad final del lote de capullos o el grado del lote.
Selección del capullo de primera
Se definió como capullo de primera aquel que tuviese un diámetro mayor a 15 mm,
seco, sin manchas externas ni deformaciones, limpio, sin talladuras y con la pupa
viva (Cifuentes y Sohn, 1998). Se contaron los capullos de primera y se calculó su
porcentaje con respecto al total de capullos obtenidos en las tres réplicas.
Número de capullos en 500 g de peso
Se estimó el número de capullos que se necesita para obtener 500 g a partir del peso
total que rindieron las tres unidades de crianza alimentadas para cada variedad de
morera.
Materiales y Métodos
__________________________________________________________________________________
36
Porcentaje de seda bruta
Se tomó una submuestra al azar de 50 capullos sanos con la pupa viva y sin
manchas en las tres unidades de crianza alimentadas con cada variedad de M. alba.
Para el cálculo del porcentaje de seda bruta y se aplicó la fórmula siguiente:
Se analizó el valor promedio entre las tres unidades de crianza correspondientes con
cada variedad de morera (Cifuentes y Sohn, 1998).
2.7 Análisis estadístico
Se realizó la comparación de los valores promedio de las diferentes variables
mediante un ANOVA simple, seguido del Test de Tukey, con 0,05 % de significación.
Se usó el paquete estadístico GraphPad Prism 5.01.
2.8 Consideraciones económicas
Para el cálculo de la relación costo-beneficio se estimó el costo de explotación de
una hectárea de morera, el costo de producción de una caja de huevos de gusano de
seda y los datos de calidad de los capullos, con empleo del software CASH, Version
3.5. Cash Flow and Sensitivity Analysis Program, Department of Forest, University of
Minnesota (Belli et al., 1985).
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
37
CAPÍTULO 3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
3.1 Cultivo de M. alba y caracterización morfológica de sus hojas
La cosecha de las variedades de M. alba, Tigreada, Universidad y Yu-62, se realizó
en el periodo de seca, enero-febrero de 2014. Las plantas mostraron calidad
fisiológica óptima, con hojas aprovechables en un 95 %, sin afectaciones por plagas
ni estrés abiótico. El manejo agronómico de la plantación permitió que las variedades
presentaran un rendimiento de hojas superiores a los 300 g/planta.
La variedad Yu-62 se caracterizó por poseer hojas grandes con color verde intenso y
lámina foliar entera, afilada en el borde superior, acuñada en la base, acutada-
serrada en el borde lateral y de consistencia suave (figura 4).
Figura 4. Hojas de la variedad Yu-62.
La variedad Universidad se caracterizó también por tener hojas grandes, aunque un
poco más pequeñas y de una coloración menos intensa que las de Yu-62. La lámina
foliar de esta variedad es de morfología entera, afilada en el borde superior,
emarginada en la base, serrada mastoidal en el borde lateral y de consistencia no tan
suave como la de Yu-62 (figura 5).
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
38
Figura 5. Hojas de la variedad Universidad.
Las hojas de la variedad Tigreada presentan la lámina foliar pentalobulada, de
longitud media y de color verde intenso. El borde superior del lóbulo central es de
forma caudada; la base, acuñada y el borde lateral, serrado mastoidal. Las hojas
mostraron una consistencia relativamente dura (figura 6).
Figura 6. Hojas de la variedad Tigreada.
La importancia de evaluar las características morfológicas de las hojas de morera,
radica en que algunas como la dureza, pueden influir en el consumo de las larvas del
gusano de seda (Rodríguez-Ortega et al., 2013). Las variedades de morera en
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
39
estudio presentaron algunas diferencias morfológicas, por tanto, es probable que las
diferencias en su consumo se asocien a este factor.
3.2 Caracterización química de las hojas de las variedades de M. alba
3.2.1 Composición bromatológica
Actualmente, existen muchos estudios que abordan los aspectos relacionados con la
composición bromatológica de diferentes variedades de morera presentes en Cuba
(Domínguez, 2001; Martín, 2004; Noda et al., 2004; Olivera y Noda, 2011).
La productividad de la variedad Tigreada ha sido evaluada en diferentes zonas de
cultivo y estrategias de manejo agronómico, lo que ha permitido identificar las
condiciones más convenientes para su aprovechamiento como alimento animal
(Martín, 2004; González et al., 2011).
En contraste, las variedades Yu-62 y Universidad, provenientes de China, por ser de
reciente introducción en Cuba, solo se dispone como criterio el de su país de origen,
donde se les consideran como adecuadas para alimentar al gusano de seda (Li
Long, comunicación personal).
3.2.1.1 Materia seca y humedad
El porcentaje de MS y de humedad que presentaron las variedades permiten que
puedan ser calificadas como adecuadas para alimentar las larvas en la quinta edad
(Porto y Okamoto, 2002). En la tabla 1 se muestran los valores promedios de estas
variables.
La variedad Tigreada mostró el mayor porcentaje de MS en las hojas (31,0 %),
mientras que González et al. (2011) reportaron un 28,13 %, en condiciones de cultivo
similares a las utilizadas en la presente investigación, pero en la EEPF-IH.
Las diferencias en el porcentaje de MS de las hojas pudieron estar condicionadas por
una interacción genotipo ambiente, a diferentes tipos de suelos y al contenido de
materia orgánica de estos.
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
40
Tabla 1. Porcentaje de materia seca y humedad en hojas de variedades de morera.
Variedad MS (%) H (%)
Tigreada 31,0a ± 0,3 69,0c ± 0,3
Universidad 27,5b ± 1,3 72,5b ± 1,3
Yu-62 24,1c ± 1,0 75,9a ± 1,0
a, b, c: valores con diferentes superíndices en cada fila difieren a p < 0,05 (test de Tukey). Se presenta el valor promedio con la desviación estándar, a partir de tres muestras de hojas tomadas aleatoriamente.
El porcentaje de humedad en las hojas fue mayor para la variedad Yu-62, 75,9 %. En
este sentido, Porto (2000) refirió que las larvas de quinta edad muestran mejor
desempeño cuando se alimentan con hojas que contienen entre 75 y 90 % de
humedad, y que cuando el porcentaje de agua es insuficiente, el gusano de seda no
aprovecha de forma adecuada el alimento, porque presenta afectaciones directas en
el proceso digestivo.
3.2.1.2 Proteína bruta
El manejo del cultivo de la morera influye de manera marcada en el contenido de PB
de las hojas. La fertilización química u orgánica (Benavides, 2002), la época del año
(González y Cáceres, 2002), la altura de corte (Martín et al., 2002), la densidad de
plantación (Boschini et al., 1998) y la variedad (Huo, 2002).
El mayor valor de PB se encontró en la variedad Yu-62, 20,10 %, seguida por
Universidad, 18,29 % y Tigreada, 17,85 % (tabla 2).
Los porcentajes de PB de estas variedades fueron superiores a los informados por
otros autores, como Noda (comunicación personal, resultados no publicados), quien
halló un 16,6 y 13,8 % en las variedades Yu-62 y Universidad, respectivamente. Por
otra parte, González et al. (2002) obtuvieron un 8,29 % de PB en las hojas de la
variedad Tigreada, mientras que Martín (2004) cuando empleó un tratamiento
agronómico similar a este estudio, poda cada 90 días y la misma fertilización
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
41
nitrogenada, halló valores de PB más cercanos a los de la presente
investigación,16,9 y 17,9 %.
Tabla 2. Porcentaje de proteína bruta en la MS de las hojas de las variedades de morera.
Variedad de M. alba PB
Tigreada 17,85c ± 0,01
Universidad 18,29b ± 0,03
Yu-62 20,10a ± 0,03
a, b, c: valores con diferentes superíndices en cada fila difieren a p < 0,05 (test de Tukey). MS: materia seca; PB: proteína bruta Se presenta el valor promedio, con la desviación estándar.
Los aminoácidos, como unidades estructurales de las proteínas, son los nutrientes
que más requieren los insectos fitófagos, ya que necesitan altas concentraciones
para un crecimiento óptimo (Porto, 2002).
Singh y Makkar (2002) plantearon que, en la India para alimentar el gusano de seda,
las hojas de morera deben tener entre 15,0 y 27,6 % de PB, por lo que se estimó que
los valores de PB obtenidos son adecuados.
3.2.1.3 Fibra bruta
En la tabla 3 se presenta el porcentaje de FB encontrado en la MS de las hojas de
las variedades de M. alba sin que se detectaran diferencias significativas entre las
variedades.
Los niveles de FB fueron superiores a los obtenidos por otros autores en Cuba, como
Noda (comunicación personal, resultados no publicados), quien encontró entre 14,28
y 14,74 % de FB en la MS de las hojas de las variedades Yu-62 y Universidad,
respectivamente.
Por su parte, Martín (2004) obtuvo en la variedad Tigreada un 12,69 y 11,02 % de
FB, y González et al. (2002) hallaron valores de FB mayores, durante el periodo poco
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
42
lluvioso, 36,35 %; sin embargo, el valor alcanzado en la época de lluvia se asemeja
al de esta investigación (15,14 %).
Tabla 3. Porcentaje de fibra bruta en hojas de variedades de M. alba.
Variedad de M. alba FB
Tigreada 17,78a ± 2,27
Universidad 19,25a ± 1,36
Yu-62 15,33a ± 1,3
Valores con una letra común no son significativamente diferentes a p < 0,05 (test de Tukey). FB: fibra bruta Se presenta el valor promedio, con la desviación estándar.
Aunque no hubo diferencias significativas entre el porcentaje de FB de las
variedades, es importante señalar que el contenido de FB en las hojas de Yu-62,
15,33 %, se encuentra en el límite superior del rango propuesto por Singh y Makkar
(2002). Estos autores recomiendan valores entre 9,1 y 15,3 % de FB para alimentar
los gusanos de seda en la India. Sin embargo, las hojas de las variedades Tigreada y
Universidad no cumplieron con este criterio, ya que lo sobrepasaron, 17,78 y 19,25 %
de FB, respectivamente.
3.2.1.4 Minerales
La variedad Tigreada presentó valores altos de cenizas, P y Ca. En estos tres
indicadores, superó de forma significativa a Universidad y Yu-62, pero mostró menor
porcentaje de K (tabla 4).
Tabla 4. Porcentaje de cenizas, P, K y Ca en hojas de variedades de M. alba.
Variedad de M. alba Cenizas P K Ca
Tigreada 14,4a ±0,2 1,64a ±0,04 3,92c ±0,1 2,65a ±0,1
Universidad 13,1b ±0,3 0,66b ±0,01 4,44a ±0,1 2,24b ±0,1
Yu-62 10,0c ±0,2 0,58c ± 0,01 4,18b ±0,1 2,17c ±0,1
a, b, c: valores con diferentes superíndices en cada fila difieren a p < 0,05 (test de Tukey). Se presenta el valor promedio con la desviación estándar, partiendo de tres réplicas de MS.
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
43
Los valores de ceniza hallado en las variedades Tigreada y Universidad fueron
superiores a los reportados por Martín (2004), 11,91-12,43 %, mientras que la Yu-62
presentó los porcentajes más bajos.
Meneguim et al. (2010) al evaluar siete cultivares de M. alba en Brasil, hallaron que
la ceniza oscilaba entre el 11,6 y 12,0 % mientras que Rodríguez-Ortega et al. (2013)
obtuvieron valores superiores, 16,2 % a los encontrados en esta investigación.
Los contenidos de P y de K de las variedades fue superior al reportado por Martín
(2004), entre 0,16-0,23 % para el P y entre 1,89-2,53 % para el K. Sin embargo, los
porcentajes de Ca fueron muy similares.
Singh y Makkar (2002) sugirieron que los porcentajes óptimos para alimentar al
gusano de seda son para el P entre 0,23-0,97 y para el K entre 1,66-3,25 %.
Estos valores no coinciden con los considerados según Porto (2002) quién planteó
que en el caso de las larvas de B. mori de quinta edad, las cantidades óptimas de P
están entre el 0,16 y 0,34 %, mientras que para el K, oscila entre 2,5-3,3 %.
En este sentido, los niveles de P en las variedades Yu-62 y Universidad presentaron
valores favorables, 0,58 y 0,66 %, respectivamente; sin embargo, la Tigreada tuvo un
valor significativamente alto, 1,64 %.
Cifuentes y Sohn (1998) señalan que un elevado contenido de P provoca
endurecimiento de las hojas y una disminución en la palatabilidad.
En relación con el contenido de K, las tres variedades mostraron valores superiores a
los estándares sugeridos.
3.2.2 Evaluación de la actividad antioxidante en las hojas de M. alba
Las plantas se consideran como una fuente rica de compuestos antioxidantes que
interfieren en el ciclo de vida de diferentes insectos (Jyothi et al., 2014). El estrés
oxidativo creado por los radicales libres puede inhibir directa o indirectamente la
síntesis de proteínas en las larvas del gusano de seda (Suchisree et al., 2015).
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
44
En el cuerpo de la larva es importante la formación de las proteínas de la seda que
conforman el capullo y la presencia de radicales libres, puede inhibir su crecimiento y
afectar la producción de seda.
Por ello, es importante que haya altas concentraciones de compuestos antioxidantes
en las hojas de morera para neutralizar los radicales libres, y que, además, se
puedan relacionar con diferentes enfermedades.
3.2.2.1 Cuantificación de los fenoles totales
Existe una correlación directa entre la cantidad de compuestos fenólicos y la
actividad antioxidante de las hojas de morera (Balasundaram et al., 2013;
Sudhakaran et al., 2014).
En este trabajo, por primera vez se mostraron en Cuba, evaluaciones de metabolitos
secundarios para las variedades Yu-62 y Universidad y la primera fue la de mayor
concentración de compuestos fenólicos (figura 7). También García (2003) detectó
altos contenidos cualitativos en las hojas de la variedad Tigreada.
Un pequeño cambio en el metabolismo de los fenoles, que implique un incremento
de estas moléculas en el tejido foliar, afecta severamente muchos procesos
esenciales para el crecimiento normal y el desarrollo de las plantas; se ha informado
que las variedades resistentes a enfermedades poseen un mayor contenido de
fenoles que aquellas que son más susceptibles (Memon et al., 2010; Jyothi et al.,
2014).
Resultados y Discusión
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45
Figura 7. A. Concentración de compuestos fenólicos en variedades de M. alba. B. Estructura química de uno de los compuestos fenólicos presentes en las hojas de morera.
Se presenta el valor promedio con la desviación estándar entre tres réplicas. Los superíndices diferentes indican diferencias estadísticas entre los valores según el test de Tukey (p ≤ 0,05).
3.2.2.2 Cuantificación de flavonoides totales
Los flavonoides son un grupo de metabolitos secundarios de las plantas, que
pertenecen a la familia de los compuestos fenólicos. Se destacan por poseer una
elevada actividad antioxidante, y son importantes para el desarrollo y el buen
funcionamiento de las plantas, ya que las protegen de agentes agresores externos,
como la radiación ultravioleta, los microorganismos y los animales herbívoros (García
y Medina, 2005; Wang et al., 2012). Además, pueden actuar como señalizadores
químicos, al indicar a los insectos cual planta es apropiada para su alimentación o,
simplemente, para guiar y facilitar la polinización (Pérez, 2003; Khan et al., 2013).
En la cuantificación de los flavonoides totales se apreció que existen diferencias
significativas entre las tres variedades (figura 8).
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
46
Figura 8. A. Concentración de flavonoides totales en hojas de M. alba. B. Estructura básica de los flavonoides y sistema de numeración.
Se presenta el valor promedio con la desviación estándar entre tres réplicas. Los superíndices diferentes señalan diferencias estadísticas entre los valores, según el test de Tukey (p ≤ 0,05).
La concentración de flavonoides totales fue superior en la variedad Yu-62, y fue
significativamente diferente con respecto a las variedades Universidad y Tigreada.
El flavonoide morina atrae hacia las hojas de morera a la larva del gusano de seda
(Schoonhoven et al., 1998), es por eso que la abundancia de esta molécula puede
condicionar la tasa de consumo (T.C.) del alimento, y repercutir en el estado
nutricional y la salud de las larvas.
3.3 Comportamiento de los índices nutricionales de Bombyx mori
3.3.1 Tasa de consumo de hojas de Morus alba durante la quinta edad
En la alimentación de las larvas de B. mori influyen, de forma simultánea, diferentes
factores intrínsecos que pueden estar presentes en las hojas de morera como son la
dureza, olor y calidad nutricional, junto con factores externos como la iluminación y la
temperatura de las salas de crianza.
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
47
En la figura 9 se muestran las unidades utilizadas de crianza de las larvas del
gusano de seda.
Figura 9. Sala de crianza de B. mori y termohigrómetro.
Se conoce que las larvas de B. mori prefieren hojas de morera con mayor humedad
(Porto, 2002) y que los flavonoides, en específico la morina, los carbohidratos y
algunos terpenoides estimulan el apetito de estos insectos (Meneguim et al., 2010;
Rodríguez-Ortega et al., 2013).
Un déficit de nutrientes en las hojas puede acarrear respuestas compensatorias en el
consumo del gusano (Petkov y Mircheva, 1979 y Parra, 1991). El incremento de la
temperatura aumenta las funciones orgánicas de las larvas y provoca una mayor
ingestión de hojas de morera; mientras que una insuficiente iluminación en la sala de
crianza desfavorece el consumo (Pescio et al., 2009).
Según Cifuentes y Sohn (1998), el apetito del gusano de seda es débil cuando
comienza la quinta edad hasta el segundo día. Durante el tercero, cuarto y quinto
días este consume la mayor cantidad de alimento de todo su ciclo biológico. Por
tanto, se escogió la quinta edad para evaluar los índices de consumo.
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
48
Los gusanos mostraron diferencias en la ingestión de cada variedad (figura 10 y tabla
5).
Figura 10. Consumo de las variedades de morera por larvas de B. mori en la quinta edad. A: Tigreada; B: Yu-62; C: Universidad.
Tabla 5. Tasas de consumo promedio de la hoja fresca de M. alba durante la quinta edad.
a,b,c: valores con diferentes superíndices en cada fila difieren a p < 0,05 (test de Tukey). Se presenta el valor promedio con la desviación estándar entre las tres unidades de crianza, correspondiente a cada variedad de morera.
Aunque el consumo diario de morera varía durante la quinta edad; los valores de la
tabla 5 son útiles para comparar el comportamiento de la ingestión durante la etapa
(Porto, 2002; Rodríguez-Ortega et al., 2013).
Tasa de consumo específico
(g/gusano/día) Tigreada Universidad Yu-62
T.C. hoja fresca
1,34c ± 0,05 1,64a ± 0,03 1,43b ± 0,04
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
49
Las larvas del gusano de seda tuvieron una mayor tasa de consumo cuando se
alimentaron con las variedades Universidad y Yu-62, mientras que la Tigreada fue la
menos consumida.
Según Cifuentes y Sohn (1998), una larva de gusano de seda consume de 20 a 22 g
de morera verde durante su ciclo de vida. El 86 % del consumo lo ejerce en la quinta
edad, lo que equivale a 17,2 y 18,9 g de hoja fresca.
Si se considera que las larvas se alimentan hasta el séptimo día de la quinta edad, le
corresponde un consumo promedio de 2,5 a 2,7 g al día. Por tanto, en esta
investigación, el consumo diario de morera quedó por debajo de los valores
señalados por la literatura, lo que puede ser atribuido a que la frecuencia de
alimentación fue solo tres veces al día. Para alcanzar estándares más elevados de
consumo de morera, se sugiere aplicar hasta cinco alimentaciones diarias (Cifuentes
y Sohn, 1998).
Debido a la experiencia alcanzada por el grupo de trabajo, se reconoce que aplicar
una misma cantidad de morera, con una mayor frecuencia de alimentación, permite
incrementar las tasas de consumo de hojas frescas.
Al comparar el efecto que ejerce el consumo de las variedades de morera en la
nutrición de B. mori, se sugiere que esta sea inferior al nivel máximo de ingestión de
las larvas. Cuando se ofrece menor cantidad de morera, se garantiza que las larvas
exploten al máximo los nutrientes del alimento. Por tanto, si existen diferencias en la
calidad nutricional de las hojas se podrá apreciar mejor, pues repercutirán con más
sensibilidad en el crecimiento de las larvas.
3.3.2 Consumo de nutrientes
Los nutrientes son sustancias que aportan energía o son precursores en la síntesis
de macromoléculas, que se requieren para el mantenimiento, la diferenciación, el
recambio, la reparación, el crecimiento y la defensa de un organismo vivo (Voet et
al., 2013).
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
50
Las larvas del gusano de seda adquieren los nutrientes a partir de las hojas de
morera, proteínas, carbohidratos, lípidos, agua, minerales y vitaminas. Además, de
otras sustancias como los antioxidantes y la fibra bruta o fibra dietética que si bien no
son nutrientes, se requieren para el mantenimiento de la homeostasia de las larvas
(Porto, 2002).
El balance de los nutrientes en las hojas de M. alba es una característica particular
de las variedades de esta especie (Martín, 2004; Meneguim et al., 2010). En la
actualidad no se conoce el balance ideal para controlar la nutrición del gusano de
seda entre las biomoléculas, los minerales y el agua en las hojas de morera. Por
tanto, la variedad de mayor calidad nutricional será aquella que presente un balance
de nutrientes capaz de satisfacer mejor las necesidades fisiológicas del insecto.
3.3.2.1 Tasas estimadas del consumo de materia seca y agua
Teniendo en cuenta las T.C. de hoja fresca (tabla 5), junto con los porcentajes de MS
y de humedad en las hojas de cada variedad de morera (tabla 1), se estimaron las
T.C. de MS y T.C. de agua de cada una de ellas (tabla 6).
Tabla 6. Tasas de consumo de materia seca y de agua, durante la quinta edad de las larvas del gusano de seda.
Tasas de consumo
(mg/gusano/día) Tigreada Universidad Yu-62
T.C. MS 413,70b ± 15,19 450,63a ± 9,16 344,46c ± 9,66
T.C. Agua 920,82c ± 33,81 1 188,02a ± 24,14 1 084,85b ± 30,45
a,b,c: valores con diferentes superíndices en cada fila difieren a p ≤ 0,05 (test de Tukey). Se presenta el valor promedio con la desviación estándar entre tres réplicas.
La MS de las hojas de morera incluye los principales nutrientes, biomoléculas y
minerales, para la alimentación de las larvas.
Existieron diferencias significativas (p ≤ 0,05) entre la T.C. de MS y la T.C. de agua
para las tres variedades de morera (tabla 6).
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
51
Las larvas que consumieron la variedad Universidad mostraron la mayor T.C. de MS
y de agua, mientras que las alimentadas con la Yu-62 ingirieron más agua que las
del tratamiento con Tigreada, las cuales, a su vez, consumieron más MS que
aquellas que recibieron Yu-62.
El agua es esencial para el crecimiento de las larvas de B. mori, en la medida que el
contenido de agua en la hoja de morera es mayor, se logra una mayor eficiencia de
conversión de los nutrientes en biomasa del gusano (Cromo y Parra, 1985).
Porto (2002) señala que el nivel insuficiente de agua es más perjudicial para el
aprovechamiento de las hojas de morera por B. mori que el nivel de nitrógeno
orgánico.
3.3.1.1.2 Tasas estimadas del consumo de proteínas y de fibra bruta
La cantidad de proteínas y de FB ingeridas se estimó teniendo en cuenta los
porcentajes de estos compuestos en la MS (tablas 2 y 3) y en la T.C. de MS (tabla 6).
En la tabla 7 se muestran las T.C. estimadas de proteínas y FB.
Tabla 7. Tasas estimadas de ingestión de proteínas y de fibra bruta.
Tasa estimada de consumo
(mg/gusano/día) Tigreada Universidad Yu-62
T.C. PB
73,85b ± 2,71 82,42a ± 1,68 69,23b ± 1,94
T.C. FB
73,56b ± 2,70 86,75a ± 1,76 52,81c ± 1,48
a,b,c: valores con diferentes superíndices en cada fila difieren a p ≤ 0,05 (test de Tukey). T.C.: tasa de consumo; PB: proteína bruta; FB: fibra bruta. Se presenta el valor promedio con la desviación estándar entre tres réplicas.
Las larvas alimentadas con la variedad Universidad consumieron, más proteína y FB,
mientras que las del tratamiento con la Yu-62 tuvieron la menor tasa de consumo de
FB.
Existe una relación entre los contenidos de proteína y los porcentajes de
hemicelulosa, celulosa y lignina. Cuando las hojas presentan mayor contenido de
proteína y menores niveles de las fracciones fibrosas presentan una mejor calidad
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
52
nutricional, y a niveles elevados de FB, se reduce la digestibilidad de los nutrientes
(Meneguim et al., 2010, Kalaivani et al., 2013).
Porto (2002) también observó un decrecimiento en el peso vivo de las larvas en la
medida que recibieron hojas de morera con edades de corte superiores a 90 días y
menores contenidos de proteínas.
3.3.1.1.3 Tasas estimadas del consumo de minerales
Para estimar las cantidades de P, K y Ca ingeridos por las larvas (tabla 8), se tuvo en
cuenta los porcentajes de estos minerales en la materia seca (tabla 4) y la T.C. de
MS (tabla 6).
Los minerales desempeñan diferentes funciones asociadas al metabolismo celular,
en el gusano de seda (Porto, 2002).
Parra (1991) afirma que los insectos necesitan cantidades considerables de distintos
minerales (potasio, fósforo, magnesio, calcio, sodio y cloro) y señaló que la
importancia de estos radica en que son los protagonistas en el balance iónico y en la
permeabilidad de la membrana celular, además de actuar como activadores de las
enzimas y formar parte de pigmentos respiratorios.
Tabla 8. Tasas estimadas de ingestión de P, K y Ca durante la quinta edad.
Tasa estimada de consumo
(mg/gusano/día) Tigreada Universidad Yu-62
T.C. P 6,78a ± 0,26 2,98b ± 0,06 2,00c ± 0,01
T.C. K 16,22b ± 0,60 20,00a ± 0,40 14,40b ± 0,4
T.C. Ca 10,96a ± 0,40 10,09b ± 0,21 7,48c ± 0,21
a,b,c: valores con diferentes superíndices en cada fila difieren a p ≤ 0,05 (test de Tukey). Se presenta el valor promedio con la desviación estándar entre tres réplicas.
Las larvas de B. mori tuvieron un consumo de P, dentro del rango óptimo, 1,6-3,4
mg/gusano/día, sugerido por Porto (2002), en las variedades Yu-62 y Universidad.
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
53
Sin embargo, el consumo de este mineral en la variedad Tigreada fue superior a lo
recomendado.
El P es un mineral importante para el crecimiento y desarrollo de las larvas porque
forma parte de los ácidos nucleicos que constituyen el material genético de las
células, del ATP (derivado del inglés, Adenosin triphosphate), que es un sustrato
energético trascendental en los procesos metabólicos, de los fosfolípidos de las
membranas celulares y de otras funciones secundarias.
Las larvas alimentadas con la variedad Universidad consumieron más K que el resto,
aunque quedaron por debajo del rango óptimo, 25-33 mg/gusano/día, sugerido por
Porto (2002).
La mayor T.C. de Ca la presentaron las larvas que consumieron la variedad
Tigreada, seguidas por las que ingirieron Universidad y Yu-62.
Según Cifuentes y Sohn (1998), el K y el Ca intervienen en el mantenimiento del
equilibrio iónico celular, en el funcionamiento del sistema nervioso del gusano de
seda, y como cofactores de múltiples enzimas.
3.3.2 Tasas de crecimiento de las larvas de Bombyx mori
Al quinto día de la quinta edad, las larvas alimentadas con la variedad Yu-62
mostraron el mayor peso promedio, seguido por aquellas que recibieron las hojas de
Universidad y Tigreada (figura 11).
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
54
Figura 11. Peso promedio de las larvas de B. mori al quinto día de la quinta edad.
Se presenta el valor promedio con la desviación estándar en las tres unidades de crianza. Los superíndices a, b y c difieren estadísticamente según el test de Tukey (p ≤ 0,05).
Generalmente, la larvas de B. mori con alto peso corporal presentan, también,
glándulas de seda más desarrolladas. Esta glándula crece de manera acelerada en
la quinta edad, y ocupa hasta el 40 % del cuerpo del insecto, lo que indica la
importancia que tiene para la producción de capullos, la cantidad y la calidad de la
morera que consuma en esta fase (Cifuentes y Sohn, 1998).
Las larvas alimentadas con la Yu-62 mostraron una T.Cr diaria mayor que las que
ingirieron las variedades Universidad y Tigreada (tabla 9).
Tabla 9. Tasa de crecimiento de las larvas de B. mori.
Tasa de
crecimiento relativo
(mg/gusano/día)
Tigreada Universidad Yu-62
T.Cr 466,59c ± 87,97 586,38b ± 144,3 638,95a ± 114,2
a,b,c: valores con diferentes superíndices difieren a p ≤ 0,05 (test de Tukey).
Se presenta el valor promedio con la desviación estándar entre tres réplicas.
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
55
El crecimiento de B. mori varía de acuerdo con la raza, la época de crianza, la
temperatura y la calidad de la morera (Meneguim et al., 2010).
Aproximadamente el 80-90 % del peso total del cuerpo del gusano está formado por
agua; pero, durante la quinta edad, se activa su eliminación a medida que se acerca
el encapullado, hasta representar el 75 % del peso vivo.
Las biomoléculas que más se acumulan en el gusano de seda son las grasas y el
glucógeno, las que alcanzan hasta 33 y 50 % del peso seco total de las larvas,
respectivamente (Cifuentes y Sohn, 1998). A pesar de que las proteínas son menos
abundantes que los carbohidratos y los lípidos, son mucho más determinantes para
el crecimiento y desarrollo de estos insectos, ya que regulan el crecimiento celular a
partir de sus funciones como enzimas, canales iónicos y elementos estructurales
celulares.
3.3.2.1 Relación entre los caracteres morfológicos de las hojas de morera, la
calidad nutricional y el crecimiento de las larvas del gusano de seda
El crecimiento de las larvas del gusano de seda está estrechamente relacionado con
la calidad nutricional de la variedad de M. alba que consume (Parra, 1991; Porto,
2002; Meneguim et al., 2007).
En esta investigación se obtuvieron evidencias que sugieren la existencia de un
vínculo entre la calidad nutricional y la morfología de las hojas de Yu-62, Universidad
y Tigreada. Las larvas que se alimentaron con hojas de lámina foliar entera y con
tendencia a ser ligeramente más suaves, Yu-62 y Universidad, mostraron un mayor
crecimiento en comparación con la de lámina foliar lobulada y de consistencia
endurecida, Tigreada.
Plante et al. (2003) señalan que cuando hay mayor cantidad de células externas en
las hojas, es porque contienen un mayor contenido de lignina y de otros compuestos
que son utilizados como mecanismo de defensa de la planta, los que a su vez las
endurecen y las hacen menos palatables para el gusano.
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
56
La relación entre la morfología y la calidad nutricional de las hojas de morera es más
evidente en el caso de las variedades Yu-62 y Tigreada. Las larvas alimentadas con
ellas consumieron cantidades equivalentes de proteínas; sin embargo, mostraron un
crecimiento con marcadas diferencias. Un factor nutricional de gran importancia es la
calidad de las proteínas, que depende de su composición aminoacídica y de su
biodisponibilidad. Si se tiene en cuenta la relación que existe entre la ganancia de
peso vivo y la cantidad de proteínas ingeridas, se puede inferir que las larvas
alimentadas con la variedad Yu-62 consumieron un alimento nutricionalmente
superior, sinergia que también pudo estar vinculada a otros factores como una menor
ingestión de FB (figura 12), pues los componentes químicos presentes en ella
dificulta la digestibilidad de las proteínas y su biodisponibilidad (Meneguim et al.,
2010).
Figura 12. Relación entre la tasa de crecimiento relativo y la tasa de consumo de proteína bruta de las larvas de B. mori durante la quinta edad.
Se presenta el valor promedio con la desviación estándar entre tres réplicas. Los superíndices a y b difieren estadísticamente según el test de Tukey (p ≤ 0,05).
También se observó que la variedad Universidad promovió un consumo superior de
proteína; sin embargo, las larvas mostraron una menor conversión en peso vivo que
las alimentadas con Yu-62, mientras que fue similar en el caso de la Tigreada (figura
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
57
15). Una posible explicación a estos resultados pudiera estar vinculada al hecho que
las larvas alimentadas con la variedad Universidad consumieron más FB.
Hasta el momento, se desconocen los procesos moleculares que conducen a la
producción de hojas con diferente morfología en las variedades Yu-62 y Tigreada
(figuras 4 y 6). Es probable que estas desigualdades tengan su origen en la
expresión de determinados genes. De ser así, pudieran estar determinadas por
diferentes secuencias aminoacídicas de las proteínas estructurales o por cambios en
la proporción de los grupos de proteínas estructurales en las hojas.
En cualquiera de los casos, lo más importante es determinar si las características
morfológicas propician diferencias a favor de mayores concentraciones de los
aminoácidos esenciales para el gusano de seda y si esto se refleja en las
propiedades nutricionales de las hojas. Este planteamiento pudiera ser esclarecido
en investigaciones futuras.
Es importante destacar que de existir bajas disponibilidades de lípidos o
carbohidratos en las hojas en cualquiera de las variedades estudiadas, esto provoca
que una parte de las proteínas ingeridas se destinen a las vías catabólicas del
metabolismo celular. El uso de los aminoácidos para obtener energía mediante su
degradación en el Ciclo de Krebs afecta directamente la síntesis de nuevas proteínas
en las larvas, y dificulta su crecimiento y desarrollo (Voet et al., 2013).
El índice nutricional de tasa metabólica relativa (TMR), da una medida de la cantidad
del alimento ingerido que las larvas destinaron a obtención de energía. Bajo este
criterio se puede inferir que las que alimentaron con la variedad Universidad
destinaron una cantidad de alimento, mucho mayor que el resto, para realizar los
procesos catabólicos celulares (tabla 10).
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
58
Tabla 10. Tasa metabólica relativa de las larvas de B. mori durante la quinta edad.
Tasa metabólica relativa
(mg/gusano/día) Tigreada Universidad Yu-62
TMR
669,6b ± 79,8 1010,73a ± 40,89 577,98b ± 191,25
a,b,c: valores con diferentes superíndices difieren a p ≤ 0,05 (test de Tukey). Se presenta el valor promedio con la desviación estándar entre tres réplicas.
Por tanto, es probable que las hojas de la variedad Universidad presenten menor
abundancia o una menor biodisponibilidad de los compuestos ricos en energía,
azúcares y lípidos, y tienen que dedicar más alimento a este fin.
Esta suposición justifica la menor conversión en peso vivo de acuerdo a las proteínas
ingeridas por las larvas alimentadas con dicha variedad en comparación con las que
consumieron Yu-62 (figura 15). Asimismo, como el valor de la TMR no difirió
significativamente entre las variedades Tigreada y Yu-62, ello sugiere que las
diferencias nutricionales están más acentuadas y que existe una correlación positiva
entre la variedad con mayor T.C. de PB y la de menor T.C. de FB.
El comportamiento de los índices nutricionales y del crecimiento de las larvas del
gusano de seda sugiere que las variedades Yu-62 y Universidad tienen mayor
calidad nutricional que la Tigreada y permite afirmar que la Yu-62 fue la más
favorable para la alimentación de las larvas. Probablemente, la mayor actividad
antioxidante detectada en las hojas de la Yu-62 también contribuyó a que las larvas
mostraran un mejor desarrollo.
3.4 Comportamiento de la mortalidad de las larvas y del proceso de
encapullado
3.4.1 Mortalidad de las larvas del gusano de seda
Existe una relación estrecha entre las condiciones de crianza, la calidad nutricional
de la morera, la temperatura atmosférica y la mortalidad de las larvas del gusano de
seda (Sudhakaran et al., 2014).
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
59
En concordancia con la mayor calidad nutricional de la variedad Yu-62, las larvas
presentaron un menor porcentaje de mortalidad, mientras que las más afectadas
fueron las alimentadas con la variedad Universidad (tabla 11).
Tabla 11. Comportamiento de la mortalidad de las larvas del gusano de seda alimentadas con M. alba.
a,b: valores con diferentes superíndices en cada fila difieren a p ≤ 0,05 (test de Tukey). Se presenta el valor promedio con la desviación estándar entre las tres unidades de crianza.
La principal causa de muerte fue la infección causada por el virus de la poliedrosis
nuclear (VPN). Las larvas enfermas mostraron síntomas de exudaciones, cuerpo y
anilla hinchada, cambios de coloración a amarillo grasiento, licuado de los órganos
intestinales, diarreas y muerte de las larvas (Martínez et al., 2014). En la figura 13 se
muestran algunas larvas muertas durante la crianza por esta causa.
Los valores de la mortalidad son similares a los obtenidos en otras crianzas
realizadas por el grupo de trabajo y a los informados por otros autores (Rodríguez-
Ortega et al., 2013).
Figura 13. Larvas de gusano de seda que murieron durante la quinta edad.
Variedad de M. alba % de mortalidad
Tigreada 26,3ab ± 0,58
Universidad 33,3a ± 3,51
Yu-62 25,6b ± 3,79
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
60
3.4.2 Porcentaje de encapullado y peso de los capullos del gusano de seda
A partir del séptimo día de la quinta edad se cosecharon los gusanos maduros y se
colocaron en la rodalina para iniciar el proceso de encapullado (figura 14).
Figura 14. Rodalinas utilizadas para el proceso de encapullado de B. mori.
Las larvas que consumieron la variedad Yu-62 presentaron un mayor porcentaje de
encapullado que las alimentadas con la Universidad, mientras que las que ingirieron
la Tigreada no mostraron diferencias significativas con respecto a las otras
variedades. (Figura 15).
Figura 15. Porcentaje de encapullado de las larvas de B. mori.
Se presenta el valor promedio con la desviación estándar entre tres réplicas. Los superíndices a y b difieren estadísticamente según el test de Tukey (p ≤ 0,05).
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
61
Las unidades de crianza mostraron un porcentaje de encapullado superior al 60 %,
pero los mejores resultados se alcanzaron en las unidades alimentadas con la Yu-62,
76 %, además de presentar los mayores pesos totales, de la pupa y de la corteza
(Figuras 16, 17 y 18).
Es importante destacar que a pesar de que las larvas alimentadas con la Yu-62
tuvieron un consumo de hoja fresca inferior al recomendado, se obtuvieran capullos
con un peso promedio similar a los hallados en otros trabajos, que emplearon una
mayor frecuencia de alimentación, 1,8 g, Singh y Makar, (2002); 1,7-1,9 g Rodríguez-
Ortega et al., (2013).
Figura 16. A: Comportamiento del peso del capullo y B: Capullos producidos.
Se presenta el valor promedio con la desviación estándar entre tres réplicas. Los superíndices a y b difieren estadísticamente según el test de Tukey (p ≤ 0,05).
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
62
Figura 17. A: Comportamiento del peso de la pupa y B: Pupa recién extraída del capullo.
Se presenta el valor promedio con la desviación estándar entre tres réplicas. Los superíndices a y b difieren estadísticamente según el test de Tukey (p ≤ 0,05).
Figura 18. A: Comportamiento del peso de la corteza y B: corteza del capullo.
Se presenta el valor promedio con la desviación estándar entre tres réplicas. Los superíndices a y b difieren estadísticamente según el test de Tukey (p ≤ 0,05).
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
63
Los pesos de la corteza fueron similares a los encontrados por Rodríguez-Ortega et
al. (2013).
Hubo correspondencia entre el crecimiento que alcanzaron las larvas y el peso de los
capullos (figuras 11 y 16), lo cual indica que hubo un desarrollo diferencial de las
glándulas sericígena en función a la variedad de morera ofertada y que el mayor
desarrollo correspondió a las alimentadas con la variedad Yu-62.
3.4.3 Evaluación de la calidad de los capullos.
La calidad de los capullos también estuvo en correspondencia con el peso de las
larvas y de la calidad nutricional de las variedades de morera.
El porcentaje de capullos de primera fue superior en las unidades alimentadas con la
Yu-62, 95,7, seguido por las que recibieron las hojas de la Universidad, 57,3 y la
Tigreada, 31,5 (tabla 12).
El número de capullos necesarios para obtener un lote de 500 g fue menor en las
unidades alimentadas con la Yu-62, 297, seguido por aquellas que consumieron la
Universidad, 331 y la Tigreada, 358. Este resultado corrobora que los capullos
alcanzaron mayor peso cuando las larvas consumieron las hojas de la variedad
Yu-62.
Tabla 12. Evaluación de la calidad del capullo de seda.
Puntuaciones de los Indicadores de calidad: el porcentaje de capullos de primera de 0-40, número de capullos en 500 g de 0-10 y el porcentaje de seda bruta de 0-50 (Cifuentes y Kim, 1992). El valor del indicador de calidad se representa a la izquierda y la puntuación, a la derecha.
Indicadores de calidad Tigreada Universidad Yu-62
% de capullos de primera 31,5 0 57,3 7 95,7 40
# de capullos en 500 g 358 0 331 0 297 1
% de seda bruta 20,8 40 19,9 35 19,8 35
Puntuación total - 40 - 42 - 76
Grado del lote - 5 - 4 - 1
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
64
El porcentaje de seda bruta, entre las variedades presentó poca variación, sin
embargo, este fue mayor para los capullos producidos con la variedad Tigreada. No
obstante, este valor solo da una medida de cuanto aportó la corteza al peso total del
capullo, y no significa que los capullos obtenidos con esta variedad produjeran más
seda bruta.
3.4.4 Consideraciones económicas
La sericultura es una actividad agroindustrial, lo que significa que lo más importante
es producir capullos de calidad para que contribuyan a que el productor pueda
alcanzar una rentabilidad óptima.
El costo de la producción de un capullo se estimó teniendo en cuenta el manejo de la
morera, la crianza de las larvas y las tasas salariales aplicadas a la fuerza de trabajo
(anexo 5).
El precio internacional del capullo de primera y de segunda se estableció a partir de
la tasa de venta del mes de julio de 2015, emitidas en Italia y Colombia.
En la tabla 13 se muestran algunas consideraciones económicas relacionadas con la
producción del capullo de seda.
La producción de 1 kg de capullos de seda con la utilización de la variedad Yu-62 fue
la menos costosa. Asimismo, en esta se obtuvo una mayor cantidad de capullos de
primera, lo que propició que aumentara el precio de venta y que la ganancia fuera
superior.
Por otra parte, con el empleo de la variedad Universidad se alcanzó una menor
cantidad de capullos de primera, por lo que la ganancia fue cuatro veces menor que
la de Yu-62.
El uso de la variedad Tigreada causó pérdidas en la producción de seda, ya que se
obtuvo una cantidad inferior de capullos de primera respecto a las otras variedades.
Resultados y Discusión
__________________________________________________________________________________
65
Tabla 13. Consideraciones económicas sobre la producción de capullos de seda.
Indicadores Tigreada Universidad Yu-62
Número de capullos para obtener 1 kg 716 662 594
Costo de producción de un capullo (CUP) 0,17 0,17 0,17
Costo de producción de 1 kg de capullo (CUP) 121,72 112,54 100,98
Precio de Venta de 1 kg de capullo de primera
(CUP) 200,00 200,00 200,00
Precio de Venta de 1 kg de capullo de segunda
(CUP) 50,00 50,00 50,00
Número de capullos de primera 226 379 568
Número de capullos de segunda 490 283 26
Kg de capullos de primera 0,315 0,572 0,956
Kg de capullos de segunda 0,685 0,428 0,044
Venta de capullos de primera (CUP) 63,00 114,40 191,00
Venta de capullos de segunda (CUP) 34,28 21,40 2,20
Venta de capullos totales (CUP) 97,28 135,80 193,20
Ganancia de la producción de 1 kg de capullo
(CUP) -24,44 23,26 92,22
Ganancia de producción de 21 kg de capullos
(CUP) -513,24 488,46 1936,62
CUP: Pesos cubanos. Nota: El precio de 1 kg de capullo de primera y de segunda es de 8,00 y $ 2,00, lo que equivale a 200 y 50 CUP, respectivamente.
Finalmente, la producción de capullos de primera es un factor que influye
directamente en la rentabilidad; por tanto, se obtendrá una mayor ganancia mientras
más capullos de primera se cosechen.
Conclusiones
__________________________________________________________________________________
66
CONCLUSIONES
1. La variedad Yu-62 presentó los mejores caracteres morfológicos y
bromatológicos, y la mayor actividad antioxidante.
2. Los índices nutricionales de Yu-62 mostraron que esta variedad fue el
alimento que más incidió en el crecimiento del gusano de seda (Chul
Thai-6).
3. Las larvas alimentadas con Yu-62 tuvieron menor mortalidad y mayor
porcentaje de encapullado.
4. Los indicadores de calidad más elevados se obtuvieron con la Yu-62,
fundamentalmente el mayor porcentaje de capullos de primera.
5. El menor costo de producción de capullos por caja y, por ende, la mayor
ganancia económica se adquirió con la variedad Yu-62.
6. La variedad Universidad también puede ser empleada para la crianza
del polihíbrido Chul Thai-6 de Bombyx mori.
Recomendaciones
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67
RECOMENDACIONES
1. Continuar estos estudios en diferentes épocas del año para estas y otras
variedades establecidas en Cuba.
2. Corroborar si la variedad Yu-62 induce resistencia al virus de la poliedrosis nuclear
(VPN).
3. Determinar si las características morfológicas propician diferencias a favor de
mayores concentraciones de los aminoácidos esenciales para el gusano de seda
4. Determinar la disponibilidad de lípidos y carbohidratos en las hojas de las
variedades estudiadas.
5. Evitar el uso de la variedad Tigreada para la crianza del polihíbrido Chul Thai-6 de
Bombyx mori.
6. Identificar los principales compuestos químicos de la hoja de morera que atraen al
gusano de seda.
7. Utilizar la metodología descrita en esta investigación para la evaluación de otras
variedades de morera promisorias para la sericultura.
Novedad Científica
__________________________________________________________________________________
68
NOVEDAD CIENTÍFICA
Por primera vez en Cuba:
Se investiga y evalúan los efectos que ejercen las variedades de Morus
alba L.Yu-62, Universidad y Trigreada en la alimentación y la producción de
capullos de seda del polihíbrido Chul Thai-6 de Bombyx mori
Se realizan estudios de antioxidantes en hojas de M. alba y sobre su
implicación en el desarrollo serícola.
Se establecen los principios de manejo y utilización de las variedades Yu-
62, Universidad y Tigreada para la crianza de gusano de seda y la
producción de capullos de calidad.
Se asientan las bases para la realización de futuras investigaciones en el
campo de la sericultura.
Referencias Bibliográficas
__________________________________________________________________________________
69
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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Anexos
__________________________________________________________________________________
78
ANEXOS
ANEXO 1. Esquema de desinfección aplicado en la sala de crianza
Día 1.
Desinfección con Formol al 3%
1. En un tanque con 16 L de agua
2. Añadir 480 ml de formol
3. Agitar
4. Echar en una mochila la solución
5. Asperjar la solución en el techo, las paredes, camas de cría e instrumentos
que se encuentren en la sala de cría.
Día 3.
Desinfección con Hipoclorito de Sodio al 2,5%
1. En un tanque con 16 L de agua
2. Añadir 400 ml de hipoclorito de sodio
3. Agitar
4. Echar en la mochila esta solución
5. Asperjar en el techo, las paredes, camas e instrumentos que se encuentren en
la sala de crianza.
Día 5.
Desinfección con solución de Hidróxido de Calcio 5%
1. En un tanque con 16 L de agua
2. Añadir 800 g de Hidróxido de Calcio
3. Agitar.
4. Dejar en reposo por 2 horas.
5. Echar en la mochila la solución sobrenadante
6. Asperjar en el techo, las paredes, camas e instrumentos que se encuentren en
la sala de crianza.
Anexos
__________________________________________________________________________________
79
ANEXO 2. Registro de la Temperatura y Humedad
Fecha Hora Temperatura Humedad
9:00 am
2:00 pm
7:00 pm
Promedio
9:00 am
2:00 pm
7:00 pm
Promedio
9:00 am
2:00 pm
7:00 pm
Promedio
9:00 am
2:00 pm
7:00 pm
Promedio
9:00 am
2:00 pm
7:00 pm
Promedio
9:00 am
2:00 pm
7:00 pm
Anexos
__________________________________________________________________________________
80
ANEXO 3. Monitoreo del peso del gusano
Fecha:
Variedad de morera:
Edad:
Replica I Réplica II Réplica III
P. inicio P. final P. inicio Final Inicio P. final
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
Anexos
__________________________________________________________________________________
81
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
100
Anexos
__________________________________________________________________________________
82
ANEXO 4. Control de la mortalidad de los gusanos por día
Fecha:
Edad:
Variedad:
Gusanos muertos/día
R. I Piso Superior
R.II Piso Intermedio
R.III Piso Bajo
Observaciones
Total
Anexos
__________________________________________________________________________________
83
ANEXO 5. Ficha de costo estimada para la producción de Bombyx mori.
EMPRESA: EEPF ·Indio Hatuey" Código: 223.0.6787 CODIGO:
Organismo: MES
Producto o Servicio: Capullo de seda.
Código Prod. o Serv.: UM: 1 caja Producc. Period. 28 días
CONCEPTOS DE GASTOS Fila TOTAL UNITARIO De ello: CUC
1 2 3 4
Materia Prima y Materiales 1 376,01 0
Materia Prima y materiales fundamentales 1,1 308,01
Combustibles y lubricantes 1,2 34,00
Energía eléctrica 1,3 26,00
Agua 1,4 8,00
Subtotal (Gastos de elaboración) 2 2058,03
Otros Gastos directos 3 36,12
Depreciación 3,1 36,12
Arrendamiento de equipos 3,2
Ropa y calzado ( trabajadores directos) 3,3
Gastos de fuerza de trabajo 4 1863,6
Salarios 4,1 1350,45
Vacaciones 4,2 122,76
Impuesto utilización de la Fuerza de trabajo 4,3 368,3
Contribución a la seguridad Social 4,4 22,09
Estimulación en pesos convertibles 4,5
Gastos indirectos de producción 5
Depreciación 5,1
Mantenimiento y reparación 5,2
Gastos generales y de administración 6 158,31
Combustible y lubricantes 6,1
Energía eléctrica 6,2
Depreciación 6,3
Ropa y Calzado ( trabajadores indirectos ) 6,4
Alimentos 6,5
Otros 6,6 158,31
Gastos de Distribución y Ventas 7
Combustible y lubricantes 7,1
Energía eléctrica 7,2
Depreciación 7,3
Ropa y Calzado ( trabajadores. indirectos ) 7,4
Otros 7,5
Gastos Bancarios 8
Gastos Totales o Costo de producción 9 2434,04 0,00
Margen utilidad S/ base autorizada 10 340,00
PRECIO : 11 2774,04
1 caja = 20000 capullos * 80 % = 16000 2774.04/ 16000 = 0.17 1 capullo: 0.17