Embed Size (px)
Citation preview
0
1
Zulyeth
Margarita
Fragoso Betruz,
Jennyfer Esther
Meléndez Ortega
FACTORES DE RIESGO Y FRECUENCIA DE
Babesia spp. EN MÉDICOS Y
AUXILIARES VETERINARIOS
ADSCRITOS A VEPA BOLÍVAR, 2016.
UNIVERSIDAD DE SAN BUENAVENTURA
SECCIONAL CARTAGENA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE BACTERIOLOGIA
FACTORES DE RIESGO Y FRECUENCIA DE Babesia spp. EN MÉDICOS Y
AUXILIARES VETERINARIOS ADSCRITOS A VEPA BOLÍVAR, 2016
FRAGOSO BETRUZ, Z
MELÉNDEZ ORTEGA, J
UNIVERSIDAD DE SAN BUENAVENTURA
SECCIONAL CARTAGENA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE BACTERIOLOGÍA
CARTAGENA DE INDIAS, D. T. Y C
SEPTIEMBRE 2016
FACTORES DE RIESGO Y FRECUENCIA DE Babesia spp. EN MÉDICOS Y
AUXILIARES VETERINARIOS ADSCRITOS A VEPA BOLÍVAR, 2016
FRAGOSO BETRUZ ZULYETH
MELÉNDEZ ORTEGA JENNYFER ESTHER
TRABAJO DE GRADO PARA OPTAR EL TÍTULO DE BACTERIÓLOGO
CLAUDIA P. CONSUEGRA MAYOR
GRUPO DE INVESTIGACIÓN EN SALUD Y PRÁCTICAS SOCIALES - SYPRES
DIRECTORA
UNIVERSIDAD DE SAN BUENAVENTURA
SECCIONAL CARTAGENA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE BACTERIOLOGÍA
CARTAGENA DE INDIAS, D. T. Y C
CONTENIDO
GLOSARIO .............................................................................................................. 9
RESUMEN ............................................................................................................. 11
INTRODUCCIÓN ................................................................................................... 13
PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN ................................................................. 14
1.1 PLANTEAMIENTO Y FORMULACIÓN DEL PROBLEMA ........................ 14
1.2 JUSTIFICACIÓN ....................................................................................... 18
OBJETIVOS .................................................................................................... 21
2.1 OBJETIVO GENERAL .............................................................................. 21
2.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS .................................................................... 21
MARCO CONTEXTUAL .................................................................................. 22
MARCO TEÓRICO .......................................................................................... 23
4.1 INVESTIGACIONES PREVIAS ................................................................ 23
4.2 BASES TEÓRICAS .................................................................................. 25
4.2.1 Babesiosis .......................................................................................... 25
DISEÑO METODOLÓGICO ............................................................................ 33
5.1 TIPO DE INVESTIGACION ...................................................................... 33
5.2 DELIMITACION ESPACIAL Y TEMPORAL .............................................. 33
5.3 POBLACIÓN Y MUESTRA ....................................................................... 33
5.4 FUENTES DE INFORMACIÓN ................................................................. 34
5.5 ETAPAS DE LA INVESTIGACIÓN ........................................................... 34
5.5.1 Primera etapa: acercamiento a las oficinas de VEPA, Bolívar ........... 34
5.5.2 Segunda etapa: Visita a Clínicas y/o consultorios veterinarios .......... 35
5.5.3 Tercera etapa: toma de muestra ........................................................ 35
5.5.4 Cuarta etapa: Procesamiento de la muestra ...................................... 36
5.5.5 Quinta etapa: entrega de resultados .................................................. 38
5.5.6 Sexta etapa: tabulación de resultados ............................................... 38
5.6 OPERACIONALIZACIÓN DE VARIABLES .............................................. 40
CONSIDERACIONES ETICAS ....................................................................... 42
ADMINISTRACIÓN DEL PROYECTO ............................................................ 43
7.1 CRONOGRAMA ....................................................................................... 43
7.2 PRESUPUESTO ....................................................................................... 44
7.2.1 PRESUPUESTO GENERAL: ............................................................. 44
7.2.2 RECURSOS HUMANOS: ................................................................... 44
7.2.3 EQUIPOS: .......................................................................................... 44
7.2.4 REACTIVOS Y ELEMENTOS DE LABORATORIO: .......................... 45
7.2.5 MATERIAL DE OFICINA: ................................................................... 45
7.2.6 GASTOS DE TRANSPORTE: ............................................................ 46
RESULTADOS ................................................................................................ 47
DISCUSIÓN .................................................................................................... 52
CONCLUSIONES ........................................................................................ 56
BIBLIOGRAFÍA ............................................................................................ 61
LISTA DE ILUSTRACIONES
Ilustración 1. Mapa de distribución de localidades en Cartagena de Indias. 22
Ilustración 2 Ciclo de vida Babesia spp. obtenido de:
Http://Www.cdc.gov/parasites/babesiosis/ 30
Ilustración 3 Formas parasitarias de Babesia en tinción de Giemsa 32
Ilustración 4 Coloración de Wright. 37
Ilustración 5 Coloración de Diff-Quik. Fuente Propia 38
Ilustración 6 A la izquierda Trofozoito De Babesia Spp. En Coloración De Wright.
Fuente Propia 51
LISTA DE GRAFICOS
Grafico 1 Distribución porcentual de los centros veterinarios por localidad. 47
Grafico 2 Distribución porcentual de las residencias de los participantes por
localidad. 48
Grafico 3 Descripción porcentual de los factores de riesgo presentes en la
población de médicos y auxiliares veterinarios. 49
Grafico 4 Distribución porcentual de los síntomas presentes en la población de
médicos y auxiliares veterinarios. 50
LISTA DE ANEXOS
Anexo 1. Carta de convenio aval De Vepa 65
Anexo 2 Consentimiento informado 66
Anexo 3. Encuesta 69
Anexo 4 Formato de recolección de información 71
Anexo 5 Inserto de coloración de Wright 72
Anexo 6. Inserto de coloración de Diff Quik 73
Anexo 7. Formato de entrega de resultados 74
Anexo 8 Acta de trabajo conjunto 75
Anexo 9 Conevio de prácticas formativas y proyectos de investigacion entre la
Universidad De Cartagena y la Universidad De San Buenaventura Cartagena
79
9
GLOSARIO
Babesia: hemoparásito causante de Babesiosis. Transmitido por garrapatas,
que infestan los glóbulos rojos en animales y humanos.
Babesiosis: enfermedad parásitaria que afecta a los glóbulos rojos causada
por Babesia spp.
Vector: agente que transmite un patógeno de un organismo vivo a otro. En la
Babesiosis el vector son las garrapatas del género Ixodes.
Zoonósis: toda enfermedad en donde el hombre es incluido por accidente en
el ciclo de vida del microorganismo que causa la infección.
Epidemiología: estudio de distribución y determinantes de enfermedades
relacionadas con la salud.
Reservorio: hospedero donde se encuentra el agente causal de la enfermedad
y desarrolla parte de su ciclo de vida en este.
Malaria: enfermedad causada por parásitos del género Plasmodium.
Parasitosis: se denomina a toda enfermedad causada por parásitos ya sea
protozoos, vermes y/o artrópodos
Emergente: todo acontecimiento sin antecedentes, que presenta un aumento
repetitivo en la incidencia durante un periodo de tiempo.
Re- emergente: todo evento que en un momento de la historia se documentó y
en los últimos años su incidencia aumentó.
Tinción de Diff-quik: este método es considerado como una tinción
diferencial ya que permite la distinción de estructuras por la coloración según
su afinidad con tintes ácidos o alcalinos en una preparación, para su estudio
10
citológico. Tiene como principal ventaja sobre otros tipos de tinciones
similares, la sencillez y la rapidez en su utilización.
11
RESUMEN
Objetivo: Determinar la frecuencia de Babesia spp. y los factores de riesgo
presentes en médicos y auxiliares veterinarios adscritos a VEPA Bolívar.
Métodos: se analizaron 56 muestras en un censo de médicos y auxiliares
veterinarios adscritos a la asociación VEPA, Bolívar en la ciudad de Cartagena,
Bolívar, Colombia. Se realizó la lectura de frotis de sangre periférica con tinción de
Wright y Diff-Quik; además, se analizaron las variables sociodemográficas,
factores de riesgo y sintomatología en los últimos dos meses de la población en
estudio.
Resultados: se observaron estructuras sospechosas del género Babesia en los
extendidos con tinción de Wright y Diff-Quik, siendo la frecuencia de casos
positivos un 5,36 % (3/56). Dentro de las variables sociodemográficas se demostró
que en su mayoría los consultorios y/o clínicas veterinarias se ubican en la
localidad 1, Histórica y del Caribe en un 71%. De los factores de riesgo
establecidos, la presencia de vectores en el sitio de trabajo fue una constante en
el 89,29% del personal, seguido de la convivencia con animales 73,21% y la
presencia de vectores en las viviendas 46,43%; los síntomas más frecuentes en el
personal fueron cefalea 42,86%, seguido por fatiga 28,57%.
Conclusiones: En Colombia la Babesiosis no es una enfermedad de notificación
obligatoria, por lo que no se conoce la carga real de esta infección en el territorio.
El personal veterinario está constantemente expuestos a factores de riesgo que
aumentan las probabilidades de cursar una infección por Babesia spp. En relación
a los resultados obtenidos se pone en evidencia la necesidad que las autoridades
sanitarias tomen iniciativas de analizar la distribución, propagación, control de
poblaciones en riesgo, para desarrollar estrategias de diagnóstico y prevención
efectivas para este tipo de infecciones.
Palabras claves: Babesia, Babesiosis, Epidemiología, Colombia, Veterinarios
(Fuente: DeSC)
12
ABSTRAC
Objective: Determining the frequency of Babesia spp. and factors of risk in
medical and auxiliary veterinarian’s parts of VEPA, Bolívar.
Methodology: 56 samples a census of medical and auxiliary veterinarian’s from
Cartagena, Bolívar will be analyses. It was observed in extended of blood with
Wright and Diff Quick, also socio-demographic variables, risk factors and
symptoms in the last two months of the study population are analyzed.
Results: suspicious structures of genus Babesia were observed in the extended
with Wright and Diff Quik stain, being the frequency of positive cases 5,36%;
among the sociodemographic variables it demonstrated that most veterinary clinics
are located in locality 1, Historica y del Caribe by 71%. Of the established risk
factors for the presence of vectors in the workplace was a constant at 89.29% of
the staff, have animals at home with 73.21% and the presence of vectors in homes
46.43%; the most common symptoms were headache 42.86%, and 28.57% with
fatigue.
Conclusions: in Colombia Babesiosis it’s not a reportable disease, so there is not
known the real load of this infection in the territory. Veterinary staff is constantly
exposed to risk factors that increase the chance of making an infection with
Babesia spp.. In relation to the obtained results it puts in evidence the need for
health authorities take initiation of analyzing the distribution, propagation and
control of populations in risk, to develop effective strategies of diagnosis and
prevention for this type of infections.
Key words: Babesia, Babesiosis, Epidemiology, Veterinarians. (Source: MeSC)
13
INTRODUCCIÓN
La Babesiosis es una infección causada por los parásitos intracelulares del género
Babesia, que pueden afectar tanto animales como seres humanos. Se considera
una zoonósis reemergente debido al aumento en la incidencia a nivel mundial. La
escasa información epidemiológica de este fenómeno, dificulta los intentos por
conocer la carga real de Babesiosis en nuestro territorio. En Colombia existen muy
pocos estudios realizados en humanos, desconociendo la prevalencia real de esta
infección en poblaciones de riesgo, que están en constante exposición a los
vectores; la información es muy limitada, además, la atención en salud con
respecto a infecciones por hemoparásitos zoonóticos es poco contemplada y
terminan con un diagnóstico errado, por ende muchas personas con este tipo de
infección y con sintomatología, no tiene acceso a un correcto tratamiento, y en
algunos casos puede desencadenar la defunción del paciente, reportando el
evento como causa de muerte inespecífica; en los casos que se hace un
diagnóstico oportuno, el personal de salud no se ve en la obligación de notificar a
las entidades de salud competentes, pues no son considerados eventos de reporte
obligatorio. El propósito de este estudio es generar conocimiento acerca de la
realidad de la Babesiosis en nuestro medio al determinar la frecuencia de Babesia
spp. en médicos y auxiliares veterinarios como población susceptible a la infección
por este hemoparásito.
14
PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN
1.1 PLANTEAMIENTO Y FORMULACIÓN DEL PROBLEMA
Las zoonósis son todas las enfermedades que pueden ser transmitidas por
animales al ser humano en una condición natural, ya sea, por contacto directo,
inhalación, ingestión o por medio de algún vector. Estas enfermedades infecciosas
pueden concretar su ciclo de vida tanto en un contexto urbano conocidas
infecciones sinantrópicas y/o en un ambiente selvático conocidas como
exoantrópicas, claramente esto va estar relacionado a factores sociales como
estrato socioeconómico, cultura u ocupación y a factores ambientales como
cambios climáticos, ecología, número de la población animal, convivencia y
contacto con esta (1).
El impacto en salud pública muestra que de las infecciones transmisibles en un
60% corresponde a zoonósis que en su mayoría son provenientes de fauna
silvestre. Esto lleva considerablemente a una expansión de las enfermedades
emergentes y reemergentes a nivel mundial, quizás, una razón sea la invasión del
hombre a ecosistemas que mantenían un equilibrio natural, por ejemplo, la
actividad forestal, en consecuencia a la migración de animales y vectores hacia
otros espacios para vivir con un contacto más estrecho entre el hombre y la fauna
silvestre (2).
En Colombia particularmente hay una infinidad de especies animales y a su vez de
vectores distribuidos en todo el país, por su variedad geo-climática hace propicio
el ambiente para que el número de enfermedades emergentes y re-emergente
vaya en aumento cada año (3).
Dentro de esas enfermedades emergentes y re-emergentes, las zoonósis son
consideradas amenazas tanto para el ser humano como para los animales,
teniendo en cuenta la escasa respuesta eficaz por parte de las entidades
15
gubernamentales para ejercer el control y la prevención de enfermedades
zoonóticas que afectan el país (4).
Existen varios agentes capaces de transmitirse del reservorio de vida silvestre al
humano directamente como Francisella tularensis, que puede ser transmitida por
contacto con piel infectada del animal, mientras que otros agentes se trasmiten por
medio de la picadura del animal como el virus de la rabia por ejemplo (5).
El aumento en el número de personas que poseen mascotas o animales de
compañía se ha incrementado en los últimos años, sin tener en cuenta que estos
animales son reservorios de muchas enfermedades zoonóticas que pueden ser
transmitidas al hombre, aumentando el riego a desarrollar infecciones que
compliquen el estado de salud de los seres humanos que estén en contacto
frecuente con estas mascotas (6). Esto se hace más evidente en el individuo con
alteración de su estado inmune, sin embargo, en el hospedero inmunocompetente,
pueden desarrollarse alguna de estas infecciones en forma crónica (7).
Un vehículo para conducir la infección al humano son los vectores, estos
involucran accidentalmente al hombre en el ciclo de vida de los agentes causantes
de enfermedades. Usualmente estos vectores transmiten el microorganismo por la
picadura al humano, ya que es un medio para conseguir su alimento
específicamente los hematófagos, inoculando agentes infecciosos en la sangre de
los vertebrados. Dentro del grupo de enfermedades zoonóticas transmitidas por
vectores encontramos la Babesiosis, también conocida como Piroplasmosis(7).
La Babesiosis es la enfermedad causada por hemoparásitos del género Babesia,
se transmite a animales y humanos (este último entra al ciclo de manera
accidental) por picaduras de garrapatas del género Ixodes, aunque también
puede ser transmitida por transfusiones sanguíneas y vía transplacentaría en
menor proporción (8).
16
Los avances en salud de mascotas ha permitido que muchas enfermedades
transmitidas por garrapatas sean tratadas de manera correcta, sin embargo, este
contacto cercano con las mascotas, también implica el contacto frecuente con
vectores, lo que aumenta el riesgo de zoonosis y de desarrollar infecciones por
Babesia spp. (10).
En el personal veterinario, tanto médicos como auxiliares son considerados
población en riesgo por las condiciones de trabajo y contacto frecuente con
posibles reservorios del microorganismo o con vectores infectados (9).
La severidad de los síntomas presentes en la enfermedad puede variar
dependiendo de la especie que cause la infección; la sintomatología puede
persistir por semanas o meses, incluso llevar a la muerte de la persona por fallo
orgánico. El vacío de conocimiento presente en el personal de salud humana
dificulta el diagnóstico eficaz de la entidad. Los signos clínicos son fácilmente
confundidos con los de malaria incluyendo ictericia, fiebre no periódica, sudores,
temblores, dolor de cabeza, vómitos, diarrea, etc. Durante el periodo de
incubación del hemoparásito (de una a tres semanas) el paciente puede mostrar
síntomas inespecíficos como los antes mencionados, también es característico la
presencia de estados anémicos agudos. El inicio repentino de la enfermedad
grave se caracteriza por la presencia de hemoglobinuria, y se estima que un
porcentaje de las infecciones puede terminar en fallo multiorgánico y finalmente la
muerte de la persona, todo va a depender de la especie de Babesia que esté
infectando y del estado inmunológico del paciente (10). Sin embargo, hay evidencia
de infección crónica por especies de este género, siendo inadvertidas en su
mayoría por ser cuadros asintomáticos, o con presencia de sintomatología
inespecífica (11).
También la falta de reporte obligatorio ante las entidades estatales competentes,
dificulta el manejo de los datos epidemiológicos que se tengan sobre Babesia spp.
17
y su impacto en la sociedad, pues esta enfermedad bajo las leyes colombianas no
es de notificación obligatoria (12).
Contextualizando la situación actual de Babesiosis en la sociedad, la población
representativa para el estudio fueron médicos y auxiliares veterinarios adscritos a
VEPA de la ciudad de Cartagena de Indias, Bolívar. Donde se determinó la
frecuencia de Babesia spp., con el fin de brindar datos que establezcan una
aproximación de la frecuencia del hemoparásito actualmente en personas que
están en continuo contacto con el vector y los posibles reservorios, de manera tal
que ayude en el proceso de establecer métodos para la búsqueda y diagnóstico
de Babesiosis.
De acuerdo a lo anteriormente expuesto, surge el siguiente interrogante:
Pregunta problema
¿CUÁL ES LA FRECUENCIA DE Babesia spp. EN MÉDICOS Y AUXILIARES
VETERINARIOS ADCRITOS A VEPA BOLIVAR, Y LOS FACTORES DE RIESGO
PRESENTES EN ESTA POBLACIÓN?
18
1.2 JUSTIFICACIÓN
Los avances en la medicina veterinaria han concebido que se pueda mejorar la
salud de los animales, logrando tratar infecciones múltiples por microorganismos
como bacterias, hongos y parásitos que causan diferentes patologías en el animal.
Varias de estas infecciones son trasmitidas por vectores, siendo las garrapatas y
pulgas los más frecuentes. Estos artrópodos se alimentan de la sangre de los
animales y es en este proceso de nutrición, donde inoculan los agentes causales
de enfermedades incluyéndolos en su ciclo biológico (13).
Por las condiciones de temperatura, humedad y presión atmosférica que genera el
clima tropical, generan un ambiente propicio para la proliferación de ectoparásitos
como las garrapatas que infestan animales domésticos como perros, gatos y
animales de corral como el ganado, cerdo, gallinas, entre otros. La convivencia del
hombre con este tipo de animales aumenta las probabilidades de ser picado por
estos vectores y ser incluido accidentalmente en el ciclo biológico de
microorganismos, originando infecciones denominadas zoonósis (14). Por lo
anteriormente expuesto, uno de los grupos poblacionales con mayor riesgo de
padecer estas infecciones es el personal veterinario, tanto rural como urbano.
En la ciudad de Cartagena hay gran infestación por garrapatas gracias a las
condiciones ambientales del territorio, siendo la familia Ixodidae la más frecuente.
Esto se ve reflejado en parques de la ciudad donde se aprecian garrapatas
adheridas a las hojas, en las paredes de algunas viviendas o en la arena de la
playa (15).
Aunque se conoce que la Babesiosis es una enfermedad causada por el género
Babesia, hemoparásito transmitido por la garrapata del género Ixoides, poco se
sabe sobre la Babesiosis humana. Por lo anterior no existen datos reales de
prevalencia en nuestra región o en el País; no obstante, la literatura refiere que su
prevalencia es baja. Sin embargo, la prevalencia de Babesiosis canina en el país
19
es alta (15) y, además, preocupante el porcentaje de procesos febriles que llegan a
urgencias sin poder ser diagnosticados, quedando como “enfermedad febril sin
etiología aparente”.
En Latinoamérica no se han realizado muchos estudios significativos sobre
prevalencia en poblaciones en riesgo. En Venezuela se han ejecutado estudios
sobre la seroprevalencia de Babesia spp. en humanos, tomando como población,
trabajadores agropecuarios, médicos veterinarios y soldados de origen rural (16),
estudios descriptivos de casos de trabajadores agropecuarios y donantes de la
provincia de Ciego de Ávila en Cuba (17) y presentaciones de casos clínicos, siendo
el primer reporte en Colombia en el año 2003 (18), seguido por otro caso
presentado en el Estado de Lara, Venezuela en 2009 (9).
El cuadro clínico de Babesiosis es más agudo y severo que otras parasitosis que
se muestran con mayor frecuencia; en muchas ocasiones las personas son
diagnosticadas erróneamente con malaria y el personal médico se da cuenta por
el fracaso del tratamiento, o por la experticia de la persona que realice la lectura
microscópica del frotis sanguíneo y puede diferenciar las estructuras intracelulares
y hacer el correcto dictamen de Babesiosis (19). Por esta razón se quiere establecer
datos actuales de la frecuencia de Babesia spp. en la población de riesgo
establecida, para brindar información real de la situación epidemiológica de la
Babesiosis, principalmente profesionales y auxiliares en medicina veterinaria
porque son el personal en riesgo de contraer la infección por exposición a
reservorios infectados por el parásito. Es importante, entonces, conocer a
profundidad el comportamiento de las enfermedades transmitidas por dichos
vectores en zonas como Cartagena de Indias.
Con este trabajo se buscó, la frecuencia de Babesia spp., en el personal
veterinario, identificar factores de riesgo y proponer herramientas para la correcta
identificación directa de este microorganismo.
20
Este trabajo es coherente con los lineamientos establecidos en el Proyecto
Educativo Bonaventuriano (PEB), pues la investigación surge de un proceso de
formación, que le permite a las autoras, desarrollar competencias que orienten la
capacidad de aprender a investigar, plantear y resolver problemas; generando un
aporte a la comunidad teniendo como resultado la actualización del conocimiento y
la ética (20).
21
OBJETIVOS
2.1 OBJETIVO GENERAL
Determinar la frecuencia de Babesia spp. y los factores de riesgo, en
auxiliares y médicos veterinarios adscritos a VEPA Bolívar.
2.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS
Analizar las variables sociodemográficas en la población de estudio.
Determinar factores de riesgo en médicos y auxiliares veterinarios.
Identificar la sintomatología presentada en la población de estudio.
Detectar la presencia de Babesia spp. por microscopia utilizando dos tipos
de coloraciones.
22
MARCO CONTEXTUAL
Cartagena de Indias Distrito Turístico y Cultural, está localizado al norte de
Colombia, sobre el Mar Caribe dentro de las coordenadas 10° 26’ de latitud norte y
75° 33’ de longitud oeste. Capital del departamento de Bolívar. Tiene una
extensión aproximada de 629.937,5 Km², con aproximadamente, 768.199 Km² de
Suelo Urbano. La ciudad cuenta con una población aproximada de 967.103
habitantes en la cabecera municipal (21). Cartagena se encuentra sobre el nivel del
mar, además su posición geográfica le confiere un clima tropical cálido-húmedo,
con períodos de lluvia y períodos secos.
El distrito se divide en tres localidades según la Ley 768 de 2002, de la siguiente
forma:
Localidad 1, Histórica y del Caribe
Norte: 87 barrios (74 urbanos y 8
rurales).
Localidad 2, de la Virgen y Turística: 40
barrios (34 urbanos y 6 rurales).
Localidad 3, Industrial de la Bahía: 65
barrios (64 urbanos y 1 rural).
Localidad Histórica y del
Caribe Norte
Localidad de la Virgen y
Turística
Localidad Industrial de la
Bahía
c
v
v c
v
v c
v
v
Ilustración 1. Mapa de Distribución de Localidades en Cartagena de Indias.
Tomado de: Secretaria de Planeación Distrital http://www.cartagenacomovamos.org/
23
MARCO TEÓRICO
4.1 INVESTIGACIONES PREVIAS
Seroprevalencia de la Babesiosis humana en Venezuela, autores: R. López,
S. Montenegro-James, M. Toro, publicado en la revista Veterinaria Tropical,
volumen 13 en el año 1998.
En esta investigación se tomaron 294 sueros de individuos con profesiones u
oficios ligados al medio rural (soldados, médicos veterinarios y trabajadores
agrícolas), provenientes de zonas con altos riesgos de contacto con garrapatas,
con el fin de determinar los índices reactivos positivos para género Babesia. Los
resultados por técnica de IFI fueron: reactores positivos a B. bigemina 42,2%; B.
bovis, 22, 1 %; B. caballi, 30% y B. equi, 6%. Frecuencias relativas a reactores
positivos según las profesiones u oficios dieron el siguiente resultado: médicos
veterinarios, B. bigemina y B. bovis, un porcentaje de 21 %; trabajadores
agrícolas, B. bigemina, 50% y B. bovis, 36%; soldados de origen rural, B.
bigemina, 45% y B. bovis, 20%. Los estados de Venezuela con mayor porcentaje
de reactores positivos fueron: Lara, 70%; Aragua, 57%; Zulia, 55%; Guárico, 47%;
Anzoátegui, 40% y Carabobo, 38% (16).
Consideramos relevante la información aportada por la investigación, a pesar del
período, pues es la primera investigación en relación con el tiempo que
encontramos de seroprevalencia de Babesia en humanos, además de la similitud
en las condiciones ambientales de los territorios estudiados y el lugar propuesto,
los resultados del estudio son positivos en un porcentaje significativo, lo que
permite continuar con los estudios acerca de la epidemiologia y el comportamiento
del género Babesia en humanos en nuestro continente, teniendo en cuenta la
información escasa acerca del tema.
24
Estudio serológico y parasitológico, Reporte del primer caso de Babesiosis
humana en Colombia. Autores: Leonardo Ríos, Gonzalo Álvarez y Silvia
Blair, publicado en revista de Sociedade Brasileira de Medicina Tropical,
Vol.36, en el año 2003.
Fue un estudio realizado en Puerto Berrio, Antioquia, en el que se analizaron 194
individuos por técnica de IFI y los resultados arrojaron 7 personas seropositivos
para Babesia spp., y solo una persona fue parasitológicamente positivo y
seropositivo para Babesia bovis, siendo entonces el primer caso de Babesiosis
humana descrito en Latino América (18).
Consideramos significativo que el primer caso de Babesiosis humana fue hallado
en Colombia por lo que es importante mencionarlo en nuestras investigaciones
previas, además que fue resultado de un estudio serológico con resultados
seropositivos para varias especies del género Babesia, esta realidad nos permite
tener certeza que la Babesiosis humana en Colombia es una realidad y no debe
ser omitida por las entidades de control y prevención por enfermedades
zoonoticas transmitidas por vectores.
Alta Prevalencia de Anticuerpos contra Bartonella y Babesia microti en
poblaciones Rurales y Urbanas en dos provincias de Córdoba, Colombia.
Autores: Francisco Buelvas, Nelson Alvis, Indira Buelvas, Jorge Miranda y
Salim Mattar, publicado en la revista Salud Pública vol. 10 en el año 2008.
Para el desarrollo de la investigación se analizaron 80 sueros de personas en
poblaciones del sector agropecuario en municipios como Monteria y Cereté del
departamento de Córdoba, Colombia. Por medio de la técnica de IFI se buscó la
presencia de IgG especifica anti-Bartonella henselae, Bartonella quintana y
Babesia microti, siendo los resultados de seroprevalencia 30,6% para Babesia
microti, para Bartonella quintana la seropositividad fue de 45% y finalmente para
Bartonella henselae fue de 30% (22).
25
Como concluyen en el estudio “la alta seroprevalencia de Bartonella y Babesia
encontrada demuestra una infección subestimada en Colombia” de manera que se
hace necesario realizar aportes que permitan ver el comportamiento
epidemiológico en diferentes partes del territorio colombiano, y de esta forma
obtener datos concretos que permitan tomar las respectivas medidas en salud
pública y no se subestime. Además en este estudio al igual que en el realizado por
López et al, en 1998 en Venezuela nos muestran la técnica en investigación
utilizada para determinar seroprevalencia del género Babesia.
4.2 BASES TEÓRICAS
4.2.1 Babesiosis
La Babesiosis o piroplasmosis es una enfermedad hemolítica febril causada por el
parásito intracelular del género Babesia. Está relacionado con animales
domésticos y salvajes como los roedores, perros, ganado entre otros, la
enfermedad es trasmitida por la picadura de la garrapata del género Ixoides que
inocula el agente causal (23).
4.2.1.1 Antecedentes
El primer caso fue descrito en 1957 en Yugoslavia, tratándose del caso clínico de
un paciente agrícola con la sintomatología típica de malaria a quien post mortem
se confirmó por medio de frotis sanguíneo que la causa de muerte había sido por
Babesiosis bovina y no debido a malaria (18). En 1966 se reportó el primer caso de
Babesiosis en un paciente esplectomizado en el estado de California (EE.UU), la
especie infectante de Babesia no fue identificado en esta ocasión y el paciente
sobrevivió con tratamiento; posteriormente en 1969 se diagnosticó un caso
producido por B. microti en un paciente de Massachusetts (EE.UU.) (10).
En América Latina el primer reporte de esta enfermedad se reseñó en Colombia
en el año 2003 en un individuo que participó en un estudio realizado en puerto
26
Berrio, Antioquia que determinaba la seroprevalencia para Babesia spp. Y el cual
resultó ser parasitológicamente positivo para la especie Babesia bovis (18). En 1997
en la provincia de Ciego de Ávila, Cuba, se realizó un estudio serológico en
trabajadores agrícolas y donantes, por medio de la técnica de IFI se analizaron
781 sueros con antígenos contra Babesia bovis y Babesia bigemina, de los cuales
5,37% fueron seropositivos para Babesia spp. reflejando un predominio de
seroprevalencia por Babesia bovis (69%) en comparación con Babesia bigemina
(40%) (17). Otro reporte de caso clínico se presentó en el Estado de Lara,
Venezuela en el año 2009; una niña de 4 años de edad procedente de zona rural,
su madre refiere en la consulta que la infante presenta debilidad generalizada y
anemia con 2 meses de evolución aproximadamente, nuevamente en este caso el
diagnóstico se realiza teniendo en cuenta los signos y la presencia de trofozoítos
en el frotis de sangre periférica (9). En 2008 se realizaron estudios serológicos para
Babesia spp. en el departamento de Córdoba, en donde se obtiene como
resultado un 30,6% de seroprevalencia para B. microti, considerada una tasa alta
por los autores, al no ser esta una infección de notificación obligatoria, es además
el primer reporte serológico registrado de B. microti en la región Caribe
Colombiana (22).
El caso informado más reciente (en Diciembre de 2012) fue el de una paciente de
55 años de edad, que reside en el municipio de Arjona, Bolívar, e ingresa con
diversos signos y síntomas, posible impresión diagnóstica de cuadro febril
prolongado y anemia hemolítica, al realizar frotis de sangre periférica se observan
morfología compatible con Babesia spp. y Ehrlichia spp. siendo el primer caso de
coinfección por estas especies descritos en la Región Caribe Colombiana (24).
4.2.1.2 Zoonósis
Zoonósis se definió según la OMS en 1959 como “las enfermedades e infecciones
que se transmite de un animal vertebrado al ser humano y viceversa de modo
natural”, tal condición que los animales cumplen un papel fundamental en el ciclo
de la enfermedad como agente etiológico. Sin embargo, a esta definición se le han
27
añadido criterios para clasificar las zoonosis como: agente infeccioso que la
produce y el modo de transmisión (25).
Estas infecciones han tomado relevancia a nivel mundial, a pesar que en muchos
países han logrado controlar este fenómeno, la mayoría de los casos de
morbilidad y mortalidad se presentan en países en vía de desarrollo y con
poblaciones muy pobres. La importancia en salud pública radica en su persistencia
y el carácter emergente y reemergente. También observando los cambios que se
presentan constantemente en el ambiente, crean un desbalance entre la presencia
de los patógenos y la salud del hombre, por lo que en muchos países son
entidades de primer orden en salud pública (2).
Los países tropicales de América Latina como Colombia, demuestran un riesgo en
la presentación y difusión de la zoonosis; ya sea de una manera directa o indirecta
por factores que se encuentran asociados a la propagación de una zoonosis,
como por ejemplo: aumento en la población humana y animal, aumentando el
contacto animal-humano, y la falta de sistemas de protección para las personas
que se dedican a la zoocría y a la población en general (22).
4.2.1.3 Babesiosis humana
La Babesiosis humana es una infección producida por parásitos de género
Babesia, entre ellos están: Babesia microti, Babesia divergens y en ocasiones
Babesia bovis. En las personas puede variar desde infecciones asintomáticas
hasta enfermedad grave y la muerte. Está asociada a pacientes
inmunocomprometidos y esplenectomizados, presentando una anemia hemolítica
y en ocasiones esplenomegalia y hepatomegalia (25).
4.2.1.4 Cuadro clínico
En la mayoría de los casos los pacientes cursan la enfermedad sin síntomas o con
manifestaciones leves, parecidas a la gripa. Otros pacientes con complicaciones
más graves presentan dificultad al respirar, dolores de cabeza por la falta de
oxígeno debido a la hemolisis de los glóbulos rojos esta misma se manifiesta con
28
ictericia y en algunos casos hepatomegalia y esplenomegalia, también puede estar
acompañado de sudoración, escalofríos y fiebre, los síntomas se presentan
generalmente a los 8 días de la picadura de la garrapata (7).
La mayoría de los pacientes con infecciones por Babesia desarrollan síntomas
similares a la gripe caracterizado por malestar general y fatiga que puede
progresar para incluir los siguientes síntomas: erupción cutánea, fiebre,
escalofríos, sudoración, dolor de cabeza, artralgia, mialgias, anorexia, tos o
náuseas. En raras ocasiones, esplenomegalia leve o hepatomegalia puede
observar. Los síntomas clínicos pueden persistir por semanas o meses, pero rara
vez de más de un año (10).
4.2.1.5 Agente etiológico
Es un parásito intracelular que pertenece al filo Apicomplexa, de clase
Aconoidasida y del orden Piroplasmida, dentro de las especies que se han
identificado como patógenos humanos están B. microti, B. divergens y B. bovis.
Babesia spp. invade al glóbulo rojo en su fase de esporozoíto, multiplicándose y
formando un anillo similar al trofozoíto del Plasmodium falciparium agente
etiológico de la malaria (24). Babesia es uno de los hemoparásitos más comunes en
el mundo, sólo superada por los tripanosomas, y tienen una amplia gama de
huéspedes, incluyendo cientos de especies de mamíferos y un número limitado de
especies de aves (10).
4.2.1.6 Transmisión
La garrapata del género Ixoides se ha descrito como el principal vector de la
Babesiosis, por la trasmisión del protozoo a través de la saliva cuando este
muerde la piel del vertebrado incluyendo a los humanos para alimentarse de
sangre. Estas garrapatas no solo son los vectores de Babesia spp., si no que a su
vez, son vectores de otros microorganismos patógenos en humanos como Borrelia
spp. que es el agente etiológico de la enfermedad Lyme (18).
29
En casos menos frecuentes, la transmisión se ha presentado por transfusiones
sanguíneas de pacientes que presentaban sintomatología y características de la
enfermedad poco evidente, estos casos llevaron a que la cruz roja no aceptara
donantes que provinieran de zonas endémicas por Babesia spp. o donantes que
en su historia clínica hayan presentado un cuadro clínico de Babesiosis, también
se puede transmitir vía transplacentaría en una menor proporción (7).
4.2.1.7 Ciclo de vida
El ciclo de vida de Babesia spp. comprende una fase sexual (garrapata) y una fase
asexual (hospedero),(Ilustración 2) la garrapata muerde la piel del humano
inoculando los esporozoítos que van directo al torrente sanguíneo donde invaden
a los eritrocitos y se convierten en trofozoítos que se multiplican asexualmente en
el glóbulo rojo hasta estallarlo y liberar merozoítos, que van a invadir otros
eritrocitos, esto explica la hemolisis intravascular que lleva a una anemia y su
sintomatología (26).
En la garrapata tiene lugar la reproducción sexual que se da cuando la garrapata
muerde al organismo que este infectado para alimentarse de su sangre, ingiere
eritrocitos parasitados, que en su intestino pasan a ser gametos masculinos y
femeninos, estos gametos se unen para formar un zigoto, que migra a las
glándulas salivales de la garrapata y que se transforma en esporozoítos que están
listos para ser liberados nuevamente y repetir el ciclo (26).
30
Ilustración 2 Ciclo de Vida Babesia spp. Obtenido de: http://www.cdc.gov/parasites/babesiosis/
4.2.1.8 Diagnóstico
Para realizar el diagnóstico de la enfermedad es importante considerar y tener
información del paciente (si viene de una zona endémica, exposición a vectores,
esplenectomía previa, inmunocompetente o no, etc.) y los signos y síntomas
reconocidos en la exploración física y los resultados de los exámenes paraclínico
como el cuadro hemático (presencia de fiebre, adenopatías, anemia hemolítica,
hemogloburia, etc.). El diagnóstico definitivo se realiza por la observación directa
de estructuras compatibles con el género Babesia en frotis de sangre periférica
con tinción de Giemsa, Wright, Diff Quick o Hemacolor. La morfología puede
aparecer en forma de anillo pleomorfico (trofozoítos), o merozoítos en forma de
tétradas -denominado cruz de malta- que es una característica patognomónica de
31
este género dentro de los glóbulos rojos, (Ilustración 3). Frecuentemente estas
estructuras son confundidas con las de P. falciparum pero se atribuye a la
experticia de la persona observando el frotis y la capacidad de diferenciar entre las
dos especies. (10) (18).
Otras pruebas de laboratorio que es posible realizar cuando no existen estructuras
visibles al microscopio son: determinación de anticuerpos anti-Babesia por
inmunofluorescencia indirecta (IFI), con títulos de 1:256 que indican una infección
aguda y títulos menores de 1:64 que indican infección crónica o subclínica; sin
embargo esta técnica no es utilizada con frecuencia para diagnóstico, pero
frecuentemente se utiliza para investigaciones que buscan hallar la presencia o
exposición al agente (27).
También en la literatura refieren la disponibilidad de inmunoblot para diversas
especies del género Babesia. Cuando las pruebas de laboratorio no son
concluyentes y la sospecha de infección es alta, una muestra de sangre del
paciente puede ser inoculada en animales de laboratorio (como un hámster), y si
está presente el microorganismo aparecerá en sangre del animal dentro de 2 a 4
semanas. Cabe resaltar que este último método es muy poco utilizado en al
ámbito clínico, pues los resultados son requeridos en lapsos de tiempo cortos para
iniciar tratamiento y poder observar la evolución favorable del paciente lo más
pronto posible. (26) (28)
Otro método de detección es la reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
cuenta con un alto porcentaje de sensibilidad y especificidad para la detección
secuencias de ADN Babesia sp. en sangre (29).
32
Ilustración 3 Formas parasitarias de Babesia en tinción de Giemsa
Obtenido de: Michael J. Yabsley BCS. Natural history of Zoonotic Babesia: Role of wildlife reservoirs.
Internetional Journal for Parasitology. 2013; 2: p. 21.
4.2.1.9 Epidemiologia
Poco es lo que se conoce de la frecuencia de Babesia spp. sin embargo, se sabe
que la mayoría de los casos se han presentado en Estados Unidos causados por
Babesia microti, especialmente en las zonas costeras California, las cifras exactas
de casos reportados son muy remotas, entre los años de 1968 y 1993 se
reportaron 450 casos de Babesia por diagnóstico directo de examen de sangre
(27). En Europa son pocos los países que han reportado casos de Babesiosis.
En la universidad de Cartagena, se está adelantando un trabajo para identificar
por técnicas moleculares los casos sospechosos de Babesiosis, Anaplasmosis y
Ehrlichiosis, que se han presentado en la población de la ciudad de Cartagena de
Indias (Datos suministrado por el grupo GIMUC de Universidad de Cartagena).
Con estos dos trabajos se tendría mayor conocimiento de la epidemiología local.
33
DISEÑO METODOLÓGICO
5.1 TIPO DE INVESTIGACION
Cuantitativo, descriptivo, transversal, porque se busca establecer la frecuencia de
casos positivos de hemoparásitos y establecer factores de riesgo de la población
estudiada. Transversal porque se tomó una sola muestra en un momento
determinado.
5.2 DELIMITACION ESPACIAL Y TEMPORAL
Esta investigación se llevó a cabo en la ciudad de Cartagena de Indias. Las
muestras fueron recolectadas en las distintas clínicas y consultorios veterinarios
de la ciudad y fueron procesadas en los laboratorios de microbiología, ubicado en
la Universidad de San Buenaventura y el laboratorio de investigación de
maestrías, ubicado en la Facultad de Medicina de la Universidad de Cartagena.
Se realizó durante el segundo y tercer trimestre del año 2016.
5.3 POBLACIÓN Y MUESTRA
La población estuvo conformada por todos los médicos y auxiliares que laboran en
las clínicas y consultorios veterinarios adscritos a VEPA Bolívar (Veterinarios
especialistas en clínica y cirugía de pequeños animales), estos corresponden a 37
veterinarios y 43 auxiliares.
Se realizó un censo, por lo que no se aplicó fórmula de muestreo.
La muestra real fue de 56 individuos (26 médicos veterinarios y 30 auxiliares). La
diferencia en el número de muestra obedeció a los siguientes factores:
1. Algunos miembros se han trasladado a otras ciudades.
34
2. No quisieron hacer parte del estudio, lo que constituye una limitación del
mismo.
Participaron en el estudio aquellos que cumplieron con el siguiente criterio de
inclusión:
- Que no se encuentren en tratamiento con antimicrobianos como
Clindamicina, Quinina, Atovaquone y Azitromicina o que no se hayan
tratado en el último mes.
5.4 FUENTES DE INFORMACIÓN
Como fuente primaria tenemos la información adquirida de las muestras de
extracción sanguínea y los datos obtenidos en la encuesta de la población de
médicos y auxiliares adscritos a VEPA Bolívar.
Como fuente secundaria se dispone de la información almacenada en la dirección
de VEPA Bolívar sobre el número de veterinarios, auxiliares y ubicación de sus
centros veterinarios, consultorios o clínicas.
Fuentes bibliográficas: estas están representadas por revistas, libros, artículos de
investigación, etc.
5.5 ETAPAS DE LA INVESTIGACIÓN
5.5.1 Primera etapa: acercamiento a las oficinas de VEPA, Bolívar
Con el fin de obtener información de las diferentes clínicas y consultorios
veterinarios de la ciudad donde se encuentran vinculadas las personas objeto de
35
estudio, el grupo investigador se reunió con la presidente de VEPA, para exponer
el proyecto, posteriormente la presidencia en conjunto con la junta directiva
aprobaron la realización del trabajo. Además proporcionaron un listado con los
datos (dirección, teléfonos, veterinario adscrito a VEPA, etc.) de los centros, para
acercarnos a cada uno de los lugares que se encontraban ubicadas en la ciudad
de Cartagena. (Anexo 1)
5.5.2 Segunda etapa: Visita a Clínicas y/o consultorios veterinarios
Luego de obtener la información y los datos correspondientes a los centros de
atención y clínicas veterinarias, se realizaron las visitas correspondientes a estos
lugares, donde se explicó el propósito del estudio, se aplicó el Consentimiento
Informado (Anexo 2) las personas interesadas en participar. Una vez el veterinario
o auxiliar aceptó ser parte del estudio, se aplicó una encuesta (Anexo 3). donde
se obtuvo información relacionada con datos demográficos, sintomatología y
factores de riesgo.
Posteriormente diligenciados consentimiento y encuesta, se asigna un código que
solo los investigadores conocen (registrado en el formato de recolección de datos)
y se procedió a tomar la muestra de sangre.
5.5.3 Tercera etapa: toma de muestra
Una vez diligenciados los documentos pertinentes antes mencionados, se
ingresan los datos de la persona al formato de recolección de información (Anexo
4), y se asigna un código único con el que se marcan los tubos utilizados para el
almacenamiento de la muestra sanguínea. A cada individuo se le extrajeron 2 ml
de sangre, almacenados en un tubo con anticoagulante EDTA. Luego de la
obtención correcta de las muestras de sangre, son almacenadas en una gradilla
dentro de una nevera portátil a temperatura ambiente y fueron trasladas en el
menor tiempo posible al laboratorio de investigación de maestrías ubicado en la
36
facultad de medicina en la Universidad de Cartagena; una vez en el laboratorio
después de realizar los extendidos de sangre periférica de los tubos con
anticoagulante EDTA, se almacenaron a 4°C en la nevera del área de
microbiología.
5.5.4 Cuarta etapa: Procesamiento de la muestra
Se tomaron 7ul de sangre de los tubos con EDTA, con pipeta automatizada y
puntas amarillas, para realizar los extendidos de sangre periférica en láminas
portaobjetos nuevas, por cada una de las muestras se realizaron dos extendidos,
una para tinción de Diff-quik y otra para Wright.
Para la tinción de Wright se utilizó el colorante de la casa comercial Albor
Químicos (Anexo 5), siguiendo el protocolo estandarizado en el Laboratorio de
Atención a la Comunidad de la Universidad de San Buenaventura, que consiste en
cubrir la lámina del extendido sanguíneo con el colorante y añadir unas gotas de
agua de la llave, luego soplar hasta obtener el brillo metálico, contando a partir de
ese momento 3 minutos, enjuagar con agua y dejar secar. (ver Ilustración 4).
37
Ilustración 4 Coloración de Wright
Fuente propia
El procedimiento de la coloración se fue haciendo en pequeños ciclos de 5
láminas por vez y una lámina de control para la coloración.
En la coloración de Diff-Quik se utilizó el kit de la casa comercial MICROPTIC,
antes de teñir las láminas estas se fijaron primero con metanol, luego siguiendo
las instrucciones dadas en el inserto (Anexo 6) que concordaban con lo
establecido en el laboratorio de la Universidad de Cartagena, se inició el proceso
de tinción ubicando cada colorante en un tubo de centrifuga graduado y con ayuda
de una pinza esterilizada se tomaban las láminas y se sumergían en el colorante,
resaltamos que durante el procedimiento se emplearon 3 láminas de control en
diferentes momentos del proceso para verificar que los colorantes estuvieran en
correcto estado.(ver Ilustración 5).
38
Ilustración 5 coloración de Diff-Quik. Fuente propia
Se observaron cada una de las láminas de las diferentes coloraciones en
microscopio óptico marca Olympus CX21 en objetivo de 100x con aceite de
inmersión en el laboratorio de hematología de la Universidad de San
Buenaventura, en busca de las formas parasitarias de Babesia (trofozoítos,
merozoítos agrupado por tétradas o cruz de malta). Cabe resaltar que se hizo
revisión de todas las células sanguíneas por la posibilidad de encontrar otros
hemoparásitos transmitidos por el mismo vector. Todos los resultados obtenidos
se anotaron en el formato de recolección de información.
5.5.5 Quinta etapa: entrega de resultados
Una vez obtenidos y comprobados los resultados, se procedió a hacer entrega de
los mismos a cada persona por medio electrónico (obtenido en la encuesta) (
Anexo 7).
5.5.6 Sexta etapa: tabulación de resultados
39
En esta etapa se formó la tabulación de los resultados por medio de herramientas
como Microsoft Excel 2010 y Epi Info 7.0 empleado para revisar los datos de la
base de datos para identificar valores atípicos y datos inconsistentes; y nos
permite llevar a cabo un análisis descriptivo de los datos de la encuesta de forma
clara y confiable.
40
5.6 OPERACIONALIZACIÓN DE VARIABLES
Variable Indicador Naturaleza Escala Instrumento
Microorganismo: Babesia spp Presencia
Ausencia Cualitativa Nominal
Tinción de Diff-
quick, Wright
Hospedero veterinarios
Auxiliares Cualitativa Nominal Entrevista
So
cio
de
mo
grá
fica
s
Zona geográfica de la
veterinaria y de residencia
Localidad 1
Localidad 2
Localidad 3
Cualitativa Nominal Entrevista
Edad Años cumplidos Cuantitativa Discreta Entrevista
Género Masculino
Femenino Cualitativa Nominal Entrevista
Fa
cto
res d
e r
iesgo
Observación de vectores
en el sitio de trabajo
Si
No Cualitativa Nominal Entrevista
Convivencia con animales Si
No Cualitativa Nominal Entrevista
Presencia de vectores en
su residencia
Si
No Cualitativa Nominal Entrevista
Contacto con ganado Si
No Cualitativa Nominal Entrevista
Picadura por garrapatas Si
No Cualitativa Nominal Entrevista
Diagnóstico de Babesiosis
y/o enfermedad zoonótica
anteriormente
Si
No Cualitativa Nominal Entrevista
41
Individuos con enfermedad
de base
Si
No Cualitativa Nominal Entrevista
Casos de Babesiosis
canina
Si
No Cualitativa Nominal Entrevista
Época del año en que se
presenta el vector
Todo momento
Sequia
Lluvia
Cualitativa Nominal Entrevista
Sin
tom
ato
log
ía
Dificultad al respirar Si
No Cualitativa Nominal Entrevista
Dolores de cabeza Si
No Cualitativa Nominal Entrevista
Fiebre Si
No Cualitativa nominal Entrevista
Escalofríos Si
No Cualitativa Nominal Entrevista
Fatiga Si
No Cualitativa
Nominal Entrevista
Sudoración Si
No Cualitativa
Nominal Entrevista
Erupción cutánea Si
No Cualitativa
Nominal Entrevista
42
CONSIDERACIONES ETICAS
El estudio sigue los lineamientos jurídicos y éticos de los principios establecidos
en la Declaración de Helsinki y en la Resolución 008430 de 1993 de nuestro país y
debido a que esta investigación se consideró de riesgo mínimo y en cumplimiento
con los aspectos mencionados en el Título II, Capítulo 1, el Artículo 6 de la
presente Resolución, este estudio se desarrolló conforme a los siguientes
criterios:
Se conserva la integridad de los participantes en el estudio así como se
promoverá el respeto a su salud y derechos individuales, dando a cumplir todo los
principios enunciados en la declaración de Helsinki y estimando lo aspectos éticos
de la investigación en seres humanos contemplado en el título II capítulo I de la
resolución 008430.
La investigación no representa riesgo para la población ni genera efectos
inmediatos o tardíos del estudio, para esto los participantes, fueron informados,
por parte del equipo de investigación, de los procedimientos, que se le va realizar.
Agregando también a la información todos los puntos que contempla el artículo 15
del capítulo I, título II de la resolución de nuestro país; a fin de asegurarse que
éste ha entendido satisfactoriamente la información. Así mismo se dio
cumplimiento a la aplicación del consentimiento informado escrito diseñado para
tal fin. Por tanto, no se realizó ningún procedimiento o acción si no se contó con
la autorización previa del sujeto que confirme su aceptación y participación en la
investigación.
Estuvo presente personal profesional, competente y responsable para mantener la
confiabilidad e integridad del proyecto. Conjuntamente se contó con las
instalaciones necesarias y pertinentes para mantener la seguridad y ejecución
apropiada de la investigación.
Se tomaron todas las medidas necesarias para mantener la estricta
confidencialidad e intimidad de la información dada por la población a estudiar.
43
ADMINISTRACIÓN DEL PROYECTO
7.1 CRONOGRAMA
FECHAS
ACTIVIDAD
2014 – 2015 2016
Julio -
Diciembre
Enero -
Diciembre
Enero -
Marzo Abril Mayo Junio Julio Agosto Septiembre
1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4
Revisión bibliográfica
Desarrollo y presentación de la propuesta
Desarrollo del proyecto
Revisión ante comité ético-científico.
Obtención de datos de VEPA
Autorización de los participantes por consentimiento informado
Realización de entrevista a los participantes
Toma de muestra a la población de estudio
Procesamiento muestras
Tabulación de datos
Análisis e interpretación de los resultados
Presentación del informe final
Sustentación del informe final
44
7.2 PRESUPUESTO
7.2.1 PRESUPUESTO GENERAL:
En pesos $ Colombianos
Ítem presupuestario Valor Total
Recurso Humano $1.029.600
Equipos 790.000
Reactivos y elementos de laboratorio $413.486
Material de Oficina $168.800
Gastos de Transporte $600.000
Imprevistos $500.000
Total 3.088.400
7.2.2 RECURSOS HUMANOS:
En pesos $ Colombianos
Investigador/Experto/
Auxiliar
Formación
Académica
Función dentro del
Proyecto
Dedicación
Horas/Sema
na
Valor x
12 meses
Claudia Consuegra Mayor Bacterióloga
Magister
Director 2 1.029.600
Zulyeth Fragoso Betruz Estudiante
pregrado
Bacteriología
Investigadora 6
Jennyfer Meléndez Ortega Estudiante
pregrado
Bacteriología
Investigadora 6
Total 1.029.600
7.2.3 EQUIPOS:
En pesos $ Colombianos
Denominación
del equipo
Utilidad Valor Inicial Depreciación
por mes*
Total x 12
45
Computador
portátil
Recopilación
bibliográfica, Digitar
y archivar la
información de la
investigación.
1.300.000 25.000 300.000
Impresora Impresión de
bibliografía,
Formatos y
documento.
250.000 4.166 50.000
Microscopio óptico Observar
estructuras
4.400.000 37.000 440.000
Total 66.166 790.000
7.2.4 REACTIVOS Y ELEMENTOS DE LABORATORIO:
PRODUCTO UTILIDAD CANTIDAD VALOR
UNITARIO
VALOR TOTAL
Colorante de
Whright x 200ml
Tinción de laminas 1 30.000 30.000
Colorante de Diff
quik 3x500ml
Tinción de laminas 1 298.056. 298.056
Portaobjetos
x50und
Realizar extendidos 6 cajas 3.500 21.000
Algodón x500gr Asepsia 1 1.200 1.200
Tubos tapa lila 4ml
x 100 und
Recolectar la
muestra
1 29.230 29.230
Jeringa de 10ml
x100 und
Toma de muestra 1 14.500 14.500
Alcohol
antiséptico x700ml
Realizar asepsia 1 15.000 15.000
Guardián Descarte de material
cortopunsante con
riesgo biológico
1 4.500 4.500
Total 395.986 $413.486
7.2.5 MATERIAL DE OFICINA:
46
PRODUCTO UTILIDAD CANTIDAD VALOR
UNITARIO
VALOR TOTAL
Resmas de papel Impresión 1 9.000 9.000
Tinta de impresión
negra
Impresión 1 50.000 50.000
Tinta de impresión
color
Impresión 1 60.000 60.000
Lapiceros Tomar apuntes 3 600 1.800
Lápices Tomar apuntes 3 500 1.500
Borrador Borrar 3 500 1.500
Sacapuntas Sacar punta al lápiz 1 500 500
Carpetas Archivar los
trabajos
2 4.000 8.000
Engrapadora Grapar las hojas 1 6.500 6.500
Calculadora Calcular los datos 1 30.000 30.000
Total 168.800
7.2.6 GASTOS DE TRANSPORTE:
TRANSPORTE TIPO VALOR
Transporte
Interno 600.000
Externo : tiquetes aéreos 0.0
TOTAL 600.000
47
RESULTADOS
El estudio se realizó en 18 clínicas y centros veterinarios ubicados en la ciudad de
Cartagena de Indias, que se encuentran adscritos a VEPA Bolívar. La distribución
de los centros en las localidades establecidas en la ciudad por el POT, indica que
la mayoría se encuentra en la localidad 1, Histórica y del Caribe (ver GRÁFICO 1).
Con referencia a los sitios de residencia del personal veterinario distribuido en las
localidades, guarda relación con la ubicación de los sitios de trabajo, y que existe
un menor porcentaje de trabajadores que viven fuera de la ciudad (ver GRÁFICO
2).
Localidad 1; 71,43%
Localidad 2; 17,86%
Localidad 3; 10,71%
GRÁFICO 1 Distribución porcentual de los centros veterinarios por localidad.
48
El total de la muestra censada fue de 56 personas, discriminadas en 26 médicos
veterinarios y 30 auxiliares. El rango de edad de los participantes estuvo
comprendido entre 19 a 75 años cumplidos, con una edad promedio de 36,9 años,
predominando el género masculino (62,50%), frente al femenino (27,50%).
En relación a los factores de riesgo establecidos para la investigación el 89,29%
(50/56) del personal afirmó ver garrapatas en el sitio de trabajo, el 73,21% de la
muestra (41/56) convive con animales en su residencia y el 12,50% (7/56) de los
médicos y auxiliares veterinarios fue diagnosticado en algún momento de su vida
con infecciones zoonóticas (como Anaplasmosis, Giardiasis, Erlichosis,
leptospirosis, entre otras); por otra parte el 78,79% de las personas (43/56) niega
tener contacto directo con ganado (bovino, porcino, equino, etc.) (Ver GRAFICO 3)
Con respecto a sintomatología presentada en los últimos dos meses las personas
encuestadas negaron la presencia de algún tipo de síntoma en una gran
Localidad 1; 35,71%
Localidad 2; 25,00%
Localidad 3; 25,00%
Fuera de Cartagena;
14,29%
GRÁFICO 2 Distribución porcentual de las residencias de los participantes por localidad.
49
proporción, sin embargo, el síntoma que más se presentó fue la cefalea (42,86%)
seguido por la fatiga (28,57%) (Ver GRÁFICO 4 Distribución porcentual de los
síntomas ).
GRAFICO 3 Descripción porcentual de los factores de riesgo presentes en la población de médicos y auxiliares veterinarios.
0% 20% 40% 60% 80% 100%
Vectores en el sitio de trabajo
Convive con animales
Vectores en residencia
Picadura de Garrapatas
Contacto con ganado
Diagnóstico previo de zoonosis
SI
NO
50
0% 20% 40% 60% 80% 100%
FIEBRE
SUDORACIÓN
ESCALOFRIOS
CEFALEA
DIFICULTAD PARA RESPIRAR
FATIGA
ERUPCIÓN CUTANEA
SI
NO
El 100% (26/26) de los médicos veterinarios confirma la incidencia de infecciones
por Babesiosis durante el año. Con respecto a las temporadas en que se
presentan mayores casos de animales infectados por Babesia spp. el 62,93%
(35/56) afirma que se diagnostican durante todo el año, seguido de un 25,9%
(16/56) quienes indican que en épocas de sequía se presentan más casos.
La identificación directa fue realizada por 3 lectores, determinándose la presencia
o ausencia de parásitos del género Babesia en los extendidos de sangre
periférica. La frecuencia de infección de Babesia spp. por microscopía con tinción
de Wright fue de 5,36% (3/56), con Diff Quik la frecuencia fue igual (5,36%) . De
los individuos sospechosos con Babesia spp. el 66,6% de ellos presentaron
síntomas como cefalea y fiebre, mientas que el otro 33,3% estaban
completamente asintomáticos
GRÁFICO 4 Distribución porcentual de los síntomas presentes en la población de médicos y auxiliares veterinarios.
51
Ilustración 6 Trofozoito de Babesia spp. en coloración de Wright. Fuente propia
52
DISCUSIÓN
Debido a la falta de estudios que estimen la frecuencia real de Babesia spp. en
humanos en el país, se ha realizado esta investigación; con el fin de acercarnos a
la realidad epidemiológica de una de las poblaciones con mayores probabilidades
de contraer este tipo de infección zoonótica y esclarecer cuáles pueden ser otros
posibles factores de riesgo, tiendo en cuenta que la ocupación constituye uno de
ellos, se presentan con mayor frecuencia en este grupo de personas. Las
condiciones medioambientales de nuestra región favorecen la reproducción del
vector, que a su vez pueden infectar a los animales domésticos (30). La nuevas
tendencias en la sociedad han promovido las visitas frecuentes a los consultorios y
peluquerías veterinarias, teniendo como resultado que el personal que labora en
estos sitios esté en contacto frecuente con el vector y los posibles reservorios de
Babesia spp.
Los hallazgos obtenidos en este estudio ponen en evidencia la presencia
sospechosa de Babesia spp. en un 5,36 % (3/56) en individuos con un factor de
riesgo ocupacional, como los son los veterinarios y el personal que labora
directamente con ellos. Cabe resaltar que muchos de estos presentaban dos o
más factores de riesgo. Estos resultados difieren con los publicados recientemente
por González (31), en los que el porcentaje de Babesia spp. en humanos representó
sólo el 1% (3/300); aunque la población difiere en tamaño, ambas tenían un factor
de riesgo ocupacional y el parásito fue observado por microscopía.
Es importante resaltar que en 2012, Montes y colaboradores (24), publicaron un
caso de coinfección con Babesia spp. y Ehrilichia spp. en la ciudad de Cartagena,
lo que indica que en la ciudad tenemos el vector y que se están presentando
casos de Babesiosis humana. Este caso se presentó en un paciente sintomático,
con infección aguda a diferencia de nuestra población que corresponde a
individuos aparentemente sanos, algunos, con síntomas inespecíficos. A pesar de
que la infección por parásitos del género Babesia es habitualmente aguda, se ha
reportado infección crónica, sobretodo en personas inmunocomprometidas,
53
esplenectomizadas o en personal con riesgo (32), como es el caso de los médicos
veterinarios. Esto lo demuestran los resultados de nuestro estudio, al observar
formas parasitarias sospechosas con Babesia spp.; dos de tres individuos
positivos por microscopía, presentaron síntomas inespecíficos como cefalea y
cansancio. De todo esto podemos deducir que el personal veterinario esta en
mayor riesgo de padecer infecciones zoonóticas, no solo por parásitos del género
Babesia, sino que, además, por bacterias del género Ehrlichia, y Anaplasma, entre
otros.
No obstante, en la búsqueda del hemoparásito se encontraron estructuras
compatibles con mórulas de Ehrlichia spp. /Anaplasma spp. en un número
importante del personal estudiado. Debemos tener en cuenta que estos
microorganismos comparten las mismas especies de reservorios y vectores (14),
por tanto se pueden encontrar coinfección por estos agentes, aun con mayor
proporción en el tipo de población estudiada.
Cabe resaltar que la presencia de hemoparásitos no siempre indica ocurrencia de
enfermedad, es posible encontrar portadores crónicos, observándose pocas
estructuras parasitarias, pero ello no implica que estén enfermos (33).
Si bien la convivencia con animales, especialmente de la clase canina, tiene una
influencia positiva en la salud y bienestar de sus propietarios (34), puede ocasionar
infecciones zoonóticas tanto de tipo agudo como crónico, el primero en pacientes
esplenectomizados o inmunosuprimidos. Apoyando las conclusiones de Silva y
colaboradores (35) quienes resaltaron la necesidad de evaluar las zoonosis que
suelen pasar inadvertidas en el ser humano y la presencia de ectoparásitos
portadores de patógenos, se afirma nuevamente que los animales domésticos
pueden ser reservorios de microorganismos nocivos para la salud humana,
causantes de infecciones asintomáticas o bien generar un conjunto de síntomas
inespecíficos y no ser diagnosticada de forma oportuna. Este fenómeno
reemergente genera un llamado a la atención pública en salud ya que un alto
porcentaje de familias en el ámbito urbano poseen animales domésticos, no hay
54
un correcto control y prevención de artrópodos que afectan directamente a los
animales como las garrapatas.
No podemos definir exactamente en qué lugar fue adquirida la infección por estos
microorganismos, por la amplia distribución que tienen estos vectores en nuestro
entorno. Esto se refleja en los resultados de nuestra investigación donde el
89,29% de los empleados observaron vectores en el sitio de trabajo y el 46,43%
los veían en su residencia. En correlación con lo argumentado por Kjemtrup y
Conrad(36) que destacan como un factor de riesgo importante todo contacto con el
vector, desde la presencia de garrapatas en el hogar, el área de trabajo e incluso
en zonas recreacionales, incrementa la exposición de las personas a los agentes
causantes de Babesiosis.
En Colombia cada vez es más frecuente la actividad ganadera y el criadero de
especies de corral, llevando consigo una cohabitación con los animales
aumentando el riesgo de contraer zoonosis en más de una ocasión (34). Se ha
documentado que las especies de Babesia bovis, B. divergens y B. bigemina
tienen como reservorio fundamentalmente al ganado bovino (17), ante estos hechos
y la presencia constante de garrapatas en los establos y corrales, es considerado
un factor predisponente para los animales y el personal que trata con estos, de
padecer infecciones zoonóticas. Diferentes estudios han tomado a los
trabajadores agropecuarios como población en riesgo para establecer la
prevalencia de diferentes especies del género Babesia. El estudio más reciente en
2016, realizado en poblaciones del departamento de Córdoba, determinó que de
los 6 casos positivos para Babesia spp. 4 de las personas afectadas trabajaban en
el cuidado y suministrando alimentos al ganado, los dos restantes correspondían a
un menor de edad que apoyaba en las labores del cuidado del ganado bovino y
una ama de casa que ayudaba en el cuidado de animales (31). Mostrando evidencia
que el contacto con ganado parasitado por garrapatas aumenta la probabilidades
de padecer infecciones zoonóticas por Babesia spp., sin embargo, en el personal
estudiado el 23,21% (13/56) tienen contacto con ganado, el resto se dedica al
cuidado de pequeñas especies.
55
La investigación reveló que el 100% (26/26) de los veterinarios expresaron
encontrar casos de Babesiosis canina, sin embargo, no tenemos datos de la
frecuencia en cada clínica o centro veterinario, No obstante, el porcentaje indica
que los casos de Babesiosis canina son constantes durante todo el año.
Los casos de enfermedades zoonóticas han aumentado en los últimos años,
estando asociado a causas ambientales que permiten la proliferación de vectores
en diferentes épocas del año como es el caso de las enfermedades transmitidas
por mosquitos que se da mayormente en las épocas lluviosas; las garrapatas por
otro lado, su número aumenta con la sequía aumentando así los casos de
infecciones zoonóticos en perros, gatos u otros mamíferos (37). El 100% de
veterinarios encuestados afirmaron diagnosticar casos de Babesiosis canina, de
estos el 65,38% expresan tener casos en cualquier época del año. Lo que indica
que aunque el vector aumenta su población en ciertas épocas del año, la
enfermedad se puede presentar en cualquier periodo de tiempo, esto debido, muy
posiblemente, a los fenómenos ambientales.
56
CONCLUSIONES
En Colombia la Babesiosis no es una enfermedad de notificación
obligatoria, por lo que no se conoce la carga real de esta infección en el
territorio.
La frecuencia de infecciones sospechosas por Babesia spp. fue de 5,36%
(3/56) que a pesar de ser baja, aporta datos epidemiológicos de gran
interés para estimar la frecuencia de este hemoparásito en poblaciones en
riesgo.
El personal veterinario está expuesto de manera constante al vector en su
sitio de trabajo, pero de igual forma la cohabitación de mascotas en sus
viviendas, las visitas al parque, playas, al campo o el contacto con bovinos,
aumentan el riesgo de padecer zoonosis.
Debemos tener en cuenta que la Babesiosis cursa por lo general de forma
crónica y asintomática en personas inmunocompetentes, con recuentos
muy bajos de parásitos. Esto no significa que no se le preste la debida
atención en salud pública.
De acuerdo a la sintomatología no podemos concluir, porque los casos
positivos fueron pocos, argumentando sólo presentar síntomas
inespecíficos como cefalea y fatiga.
En relación a los resultados obtenidos se pone en evidencia la necesidad
que las autoridades sanitarias tomen iniciativas de analizar la distribución,
propagación, control de poblaciones en riesgo, para desarrollar estrategias
de diagnóstico y prevención efectivas para este tipo de infecciones.
57
RECOMENDACIONES
Debemos resaltar la importancia de realizar procesos de investigación en estas
poblaciones vulnerables, pues la deficiente atención en salud que se presenta en
la región nos impide tener un diagnóstico oportuno y acertado en personas con
sintomatología inespecífica, muy probablemente a causa de zoonosis emergentes
que son subestimadas, a esto hay que añadirle el hecho que no son de
notificación obligatoria por lo que no se poseen cifras reales de la incidencia y
prevalencia de estas infecciones. Durante el proceso de toma de muestra, al
hablar con el personal veterinario nos dimos cuenta que son muy pocos los que
toman la precaución de realizarse periódicamente exámenes para la búsqueda de
hemoparásitos, por ende no hay un control establecido en los centros veterinarios
o un conducto regular el cual seguir en caso de resultar afectados por las
actividades ejercidas en el campo laboral.
De acuerdo a lo planteado en el trabajo y a lo anteriormente expuesto, se realizan
las siguientes recomendaciones:
A las instituciones educativas:
Capacitar a los Bacteriólogos y laboratoristas clínicos en la identificación
microscópica de este parásito y en la forma de diferenciarlo de Malaria.
Capacitar a los futuros médicos en la identificación de estas infecciones
zoonóticas de manera que puedan considerarla dentro de los procesos
febriles.
Continuar con investigaciones que permitan caracterizar las diferentes
especies de Babesia, tanto a nivel serológico como molecular, ya que la
observación microscópica es muy subjetiva y requiere gran experiencia
para minimizar los falsos negativos y positivos.
A las entidades gubernamentales:
58
Incluir en los protocolos de manejo de pacientes con enfermedad febril la
búsqueda activa de Babesia y otros hemoparásitos zoonóticos.
Implementar la notificación obligatoria de los casos de Babesiosis y otras
zoonosis trasmitidas por el mismo vector, infecciones de las cuales no se
sabe mucho, para así poder conocer la realidad de nuestra ciudad con
respecto a esta enfermedad.
Como las garrapatas son los vectores de Babesia y otros hemoparásitos y
éstas poseen importancia sanitaria, se recomienda realizar fumigaciones en
zonas de mayor predominio de caninos callejeros con el fin de minimizar el
impacto de estas infecciones.
59
LIMITACIONES
En el desarrollo del trabajo se presentaron las siguientes limitaciones:
1. Información restringida y en ocasiones desactualizada de la temática.
2. Algunos de los miembros VEPA se encuentran fuera de la ciudad.
3. Algunos veterinarios y auxiliares decidieron no hacer parte del estudio.
60
INVESTIGACIONES QUE SE DERIVAN
Considerando que este estudio surge de un proyecto Macro, formalizado con un
convenio entre los grupos GIMUC de la Universidad de Cartagena y el grupo
SYPRES de la universidad de San Buenaventura, se proyecta finalizar las
siguientes investigaciones:
Caracterización de las infecciones zoonóticas por los géneros Babesia,
Anaplasma y Ehrlichia en la ciudad de Cartagena.
Comparar las técnicas de PCR, inmunofluorescencia y tinción en la
identificación de hemoparásitos zoonóticos.
Epidemiología de las infecciones trasmitidas por garrapatas: Babesia,
Anaplasma y Ehrlichia en el departamento de Bolívar.
Prevalencia de Babesia canis en caninos en caninos que consultan a las
diferentes clínicas y centros veterinarios de la ciudad.
61
BIBLIOGRAFÍA
1. P JD. Zoonosis. Chile infec. 2003; 20(1).
2. Suarez AA. Aproximación a la complejidad de las zoonosis en Colombia. Salud
publica. 2012 Abril; 14(2).
3. Monsalve , Mattar S, Gonzalez M. ZOONOSIS TRANSMITIDAS POR
ANIMALES SILVESTRES Y SU IMPACTO EN LAS ENFERMEDADES
EMERGENTES Y RE EMRGENTES. Monsalve Cordoba. 2009; 14(2).
4. Rist C ACRC. Prioritizing Zoonoses: A Proposed One Health Tool for
Collaborative Decision-Making. Plos ONE [serial on the Internet]. 2014 Oct;
9(10): p. 1-11.
5. Kruse H, Kirkemo A, Hande K. Wildlife as Source of Zoonotic Infections.
Emerging Infectious Diseases. 2004; 10(12): p. 67-72.
6. Fooks A, Johnson N. Jet set pets: examining the zoonosis risk in animal import
and travel across the European Union. Veterinary Medicine: Research and
Reports. 2015; 6: p. 17-25.
7. GUERRERO SVR. SALUD PÚBLICA Y BABESIOSIS. INFECCIÓN
EMERGENTE CON MANIFESTACIÓN CLÍNICA Y MORFOLOGÍA DE
MALARIA. In TESIS DE GRADO. Bogotá: PONTIFICIA UNIVERSIDAD
JAVERIANA; 2010.
8. Joseph JT, Purtill K, Wong SJ. Vertical Transmission of Babesia microti, Unites
States. Emerging infectius diseases. 2013 Agosto; 18(8).
9. Delmoral J, Traviezo-Valles L, Cár E. BABESIOSIS HUMANA POR Babesia
sp. (Piroplasmorida: Babesiidae). REPORTE DE UN CASO EN EL ESTADO
LARA. Salud, arte y cuidado. 2009; 2(2): p. 34-36.
10. Yabsley MJ, Shock BC. Natural history of Zoonotic Babesia: Role of wildlife
reservoirs. International Journal for Parasitology: Parasites and Wildlife. 2013;
2: p. 18-31.
11. HOMER MJ, AGUILAR-DELFIN I, TELFO S. Babesiosis. CLINICAL
MICROBIOLOGY REVIEWS. 2000 Julio; 13(3).
62
12. INSTITUTO NACIONAL DE SALUD. Instituto nacional de salud. [Online].; 2015
[cited 2016 Enero Lunes. Available from: http://www.ins.gov.co/tramites-y-
servicios/examenes-de-inter%C3%A9s-en-salud-publica/Paginas/default.aspx.
13. Benavides E. Perspectiva tropical de rickettsias y otros agentes transmitidos
por garrapatas en mascotas. Biomédica. 2011; 31: p. 11-73.
14. Pérez García L, González Fonseca Y, Guzmán R, cobs. Evaluation of the
perception of risk for zoonosis in a laboratory of ecotoxicological investigations
of Havana. REDVET. 2013; 14(4).
15. Cortés - Vecino J. Garrapatas: estado actual y perspectivas. Biomédica. 2011;
31(3): p. 268-274.
16. R. López SMJMT. SEROPREVALENCIA DE LA BABESIOSIS HUMANA EN
VENEZUELA. Veterinaria Tropical. 1988; 13: p. 93-101.
17. SUÁREZ HERNÁNDEZ M, ALONSO M, PELÁEZ R, SANCHÉZ B, BRAVO J,
SÁNCHEZ A. Pesquisaje de Babesia en trabajadores agropecuarios y
donantes en la provincia de Ciego de Ávila. Revista Cubana Medicina Tropical.
1997; 49(2).
18. Ríos L, Alvarez G, Blair S. Serological and parasitological study and report of
the first case of human babesiosis in Colombia. Revista da Sociedade
Brasileira de Medicina Tropical. 2003 jul-ago; 36(4): p. 493-498.
19. Zhou X, Li SG, Wang JZ, al e. Emergence of human babesiosis along the
border of China with Myanmar: detection by PCR and confirmation by
sequencing. Emerging Microbes and Infections. 2014; 3.
20. Universidad de San Buenaventura RG. Proyecto Educativo Bonaventuriano -
PEB Ferrucho L, editor. Bogotá: Editorial Bonaventuriana; 2010.
21. Velez Trujillo D. PLAN DE DESARROLLO AHORA SÍ CARTAGENA 2013 -
2015. Cartagena: Alcaldía Mayor, Bolívar; 2013.
22. Buelvas F, Alvis N, Buelvas I, Miranda J, Mattar S. Alta Prevalencia de
Anticuerpos contra Bartonella y Babesia microti en Poblaciones Rurales y
Urbanas en dos Provincias de Córdoba, Colombia. Salud Pública. 2008; 10(1):
p. 168-177.
63
23. Rodriguez A. Epidemiología de la Babesiosis: Zoonosis emergente. Acta
Científica Estudiantil. 2007; 5(4): p. 132-138.
24. Montes F, De la Vega F, Bello A, Fortich A. COINFECCIÓN DE BABESIOSIS
Y EHRLICHIOSIS: UN CASO EN CARTAGENA DE INDIAS, COLOMBIA.
CIENCIAS BIOMÉDICAS. 2012 Septiembre; 3(2): p. 339-345.
25. Vega Aragon RL. Zoonosis emergentes y reemergentes y principios básicos de
control de zoonosis. Revista de Medicina Veterinaria. 2009; 17: p. 85-97.
26. Botero D, Restrepo D. Parasitosis humana: incluye animales venenozos y
ponzoñosos. 5th ed. Medellín: Corporación para investigaciones biológicas;
2012.
27. Sarmiento JMH. Babesiosis Humana. MEDICINA UPB. 2006 Octubre; 25(2).
28. Vannier E, Krause P. Human Babesiosis. The new england journal of medicine.
2012 Jun;: p. 2397-2407.
29. Wilson M, Glase KC, Adams-Fis D. Development of droplet digital PCR for the
detection of Babesia microti and Babesia duncani. ELSEVIER. 2015; 149: p.
24-31.
30. Chomel BB. Control and prevention of emerging parasitic zoonoses.
ELSEVIER. 2008 Mayo; 38: p. 1211-1217.
31. González J. Babesiosis humana en regiones epidemiológicamente aptos para
la transmisión de malaria y Babesia humana: estudio molecular de garrapatas,
bovinos y humanos. Trabajo de grado. Medellin: Universidad de Antioquia,
Antioquia; 2016.
32. Selbartha KH, Tenterb AM, Bra V. First case of human babesiosis in Germany
– Clinical presentation and molecular characterisation of the pathogen.
ELSEVIER. 2007 Junio; 297: p. 197-204.
33. Homer MJ, Lodes MJ, Reynolds LD. Identification and Characterization of
Putative Secreted Antigens from Babesia microti. Journal of Clinical
Microbiology. 2003 Agosto; 41(2).
34. Gómez L, Aterhortua C, Orozco S. La influencia de mascotas en la vida
humana. Revista Colombiana de Ciencias Pecuarias. 2007; 20.
64
35. Silva ÁB, Canseco S, Gabriel M. Infección humana asintomática por contacto
con perros. Gaceta Médica de México. 2014; 150: p. 171-174.
36. Kjemtrup AM, Conrad PA. Human babesiosis: an emerging tick-borne disease.
ELSEVIER. 2000; 30: p. 1323-1337.
37. Cardona V, Peñuela J. Caracterización de las instituciones veterinarias y
evaluación restrospectiva de la causistica de enfermedades zoonoticas en
caninos en el municipio de Pereira. Trabajo de Pre-grado. Pereira: Universidad
Tecnologica de Pereira, Risaralda; 2015.
38. Jiang JF, Zheng YC, Jiang RR. Epidemiological, clinical, and laboratory
characteristics of 48 cases of “Babesia venatorum” infection in China: a
descriptive study. The Lancet Infectious Disases. 2015 Febrero; 15: p. 196-
203.
65
ANEXOS
Anexo 1. Carta de convenio Aval de VEPA
66
Anexo 2 Consentimiento informado
Factores de riesgo y Frecuencia de Babesia spp. en médicos y auxiliares veterinarios
adscritos a VEPA Bolívar, 2016
Nombre: ______________________________________ Edad:___ Fecha: __/__/20__
Dirección: _________________________________ Teléfono: ________________
En nuestro entorno se desconocen las cifras reales de infecciones producidas por hemopárasitos
en personal veterinario. Estos, al estar en contacto frecuente con animales son más propensos a
adquirir enfermedades transmitidas por vectores como las garrapatas y desarrollar infecciones con
síntomas inespecíficos que no son correctamente tratadas por el personal de atención en salud. En
esta investigación se busca hallar la frecuencia del parásito intracelular de género Babesia en
sangre, con el fin de tener un acercamiento a las cifras reales en nuestro territorio sobre las
infecciones por Babesia spp. sobre todo, en el grupo poblacional de riesgo como los son los
médicos veterinarios y los auxiliares que trabajan en la ciudad de Cartagena de Indias.
A cada persona que acepte ingresar como sujeto de investigación se le tomará una muestra de 2
ml de sangre, será obtenida tras la punción de una de las venas de su brazo; la sangre será
analizada para determinar la presencia del parásito intracelular Babesia spp. . Además, los
participantes responderán una entrevista para la recolección de datos que ayudan al análisis de los
resultados.
Este estudio no implica ningún riesgo físico o psicológico para usted. Sus respuestas no le
ocasionarán ningún riesgo ni tendrán consecuencias para su situación financiera, su empleo o su
reputación.
67
El procedimiento será realizado por personal capacitado para toma de muestras de sangre, no
representa riesgo para usted y puede generar una leve molestia en el sitio de la punción y en
ocasiones muy esporádicas se pueden causar hematomas, que pueden tratarse fácilmente.
El principal beneficio que usted recibirá por la participación en este estudio será la relacionada con
la determinación de la presencia del parásito intracelular Babesia sp.; además, los resultados de
este estudio se podrán utilizar para que los expertos en salud pública, las EPS, las IPS y las
organizaciones comunitarias conozcan los principales factores y grupos de riesgo que se ven
afectados por la infección sintomática o asintomática de este parásito y facilitar la formulación de
propuestas viables para minimizar su incidencia y a su vez reducir las infecciones en el personal.
Las únicas personas que sabrán que usted participó en el estudio somos los miembros del equipo
de investigación. Nosotros no divulgaremos ninguna información sobre usted, o proporcionada por
usted durante la investigación. Cuando los resultados de la investigación se publiquen o se
discutan en conferencias, no se incluirá información que pueda revelar su identidad. Nadie fuera
del equipo de investigación tendrá acceso a su información sin su autorización escrita.
No se le dará dinero a las personas que participen en esta investigación bajo ningún concepto,
como tampoco está establecido que las personas que decidan participar en la investigación deban
desembolsar cualquier cantidad de dinero para la realización del proyecto.
Su participación en esta investigación es voluntaria. Su decisión de participar o no en este proyecto
no afectará sus relaciones actuales o futuras con la Universidad de San Buenaventura. Si usted
decide participar, usted está en libertad de retirarse en cualquier momento sin tener ninguna
consecuencia. En el momento que solicite información relacionada con el proyecto los
investigadores se la proporcionarán.
Si bien se define la investigación como un proceso presente en todas las áreas del saber, que
facilita tanto el desarrollo de la ciencia y la tecnología, como otras áreas del conocimiento, cabe
resaltar que en esta investigación no se atenta contra la integridad o bienestar de los animales y el
medio ambiente, pues el estudio se realizará con muestras de sangre humana y tiene como fin
ampliar conocimientos sobre una problemática de salud que está siendo ignorada en nuestra
sociedad.
68
Los resultados podrán ser comunicados por medio del número de teléfono personal diligenciado o
por medio electrónico si posee correo electrónico. Si durante el diligenciamiento de la entrevista o
posterior a ella usted tiene alguna duda puede contactarse con los investigadores que realizan este
proyecto: Zulyeth Fragoso Betruz teléfono: 3106582417, correo electrónico:
[email protected]; Jennifer Meléndez Ortega, teléfono: 3187714155, correo electrónico:
[email protected], Claudia Consuegra Mayor, teléfono: 3114156697. Correo
electrónico: [email protected].
Con su firma usted acepta que ha leído o alguien le ha leído este documento, que se le ha
respondido satisfactoriamente a sus preguntas y aclarado las posibles dudas, y que acepta
participar voluntariamente en el estudio.
___________________________ _________________________ Nombre del Participante Firma No. de Cédula ___________________________ _________________________ Nombre del Testigo Firma No. de Cédula ___________________________ _________________________ Nombre del Testigo Firma No. de Cédula ___________________________ _________________________ Nombre del Investigador Firma No. de Cédula __________________________ _________________________ Nombre del Investigador Firma No. de Céd
69
Anexo 3. Encuesta
Factores de riesgo y frecuencia de Babesia spp. en médicos y auxiliares
veterinarios adscritos a VEPA Bolívar, 2016
Información general
Razón Social:
Dirección Veterinaria: Estrato: 1 2 3 4 5 6
Nombre completo:
Fecha de Nacimiento: Edad:
Sexo : femenino masculino: Localidad:
Teléfono: Correo:
Barrio de residencia: Estrato: 1 2 3 4 5 6
Ocupación
Médico veterinario Auxiliar
Evaluación de factores de riesgo
SI NO
Se observan garrapatas en el sitio de trabajo
Convive con animals
Presencia de garrapatas en su residencia
Contacto con ganado
¿En los últimos 8 días ha sido picado por
garrapatas?
¿Le han diagnosticado Babesiosis alguna
vez?
Código
Fecha: día ____ mes ____
Año: 2016
70
Ha tenido otra infección zoonótica?
¿Cuál? En cuántas ocasiones? 1 2 3 >3
¿Presenta alguna Enfermedad de base?: SI NO ¿Cuál?
¿Le llegan casos de Babesiosis canina? SI NO
¿Con qué frecuencia?
¿Le llegan casos de Ehrlichiosis canina? SI NO
¿Con qué frecuencia?
¿Le llegan casos de Anaplasmosis canina? SI NO
¿Con qué frecuencia?
¿Ha identificado en que temporada del año se aprecian
mayores casos de Babesiosis canina? SI NO Sequia Lluvia Todo momento
Ese mismo comportamiento se evidencia con otros hemoparásitos? Sí No
Evaluación de síntomas
En los últimos dos meses usted… SI NO
¿Presenta dificultad al respirar?
¿Ha tenido dolores de cabeza?
¿Fiebre?
¿Escalofríos?
¿Fatiga?
¿Sudoración?
¿Erupción cutánea?
Ha tenido algún diagnóstico de síndrome febril sin ninguna etiología aparente? SI NO
_______________________________
Firma
71
Anexo 4 Formato de recolección de información
RESULTADOS
CODIGO NOMBRES Y APELLIDOS
N° DE CEDULA
FECHA DE NACIMIENTO (DD/MM/AA) EDAD
DIRECCION DEL CENTRO VETERIANARIO
CORREO ELECTRONICO
Diff-quick Wrigth
72
Anexo 5 Inserto de coloración de
Wright
Fundamento Una de las coloraciones de Romanowsky que da
mejores resultados es la de WRIGHT. Este colorante
tiñe con el Azul de metileno (sustancia básica) las
estructuras ácidas del núcleo, y con la eosina (ácida),
las estructuras básicas del citoplasma y especialmente
la hemoglobina. Las preparaciones óptimas permiten
diferenciar gránulos, vacuolas, etc., y en consecuencia
son muy útiles en el reconocimiento de células
hematopoyéticas y sus variaciones patológicas.
Muestra Sangre ó exudado.
Reactivos
WRIGTH (ALBOR Ref.: 12101) BUFFER GIORDANO (ALBOR Ref.: 18003)
Procedimiento Colocar el extendido seco sobre un soporte para
coloración. Cubrir el extendido con colorante de WRIGHT
ALBOR y dejar durante 3 - 5 minutos.
Agregar sobre el colorante de Wright,
aproximadamente 1 ml de la solución tampónBUFFER GIORDANO ALBOR, y enseguida soplar la lámina de un extremo a otro hasta la aparición de brillo metálico. Dejar por 3 - 5 minutos.
Lavar el extendido con agua corriente y limpiar el
exceso de colorante de la parte inferior y de los bordes. Dejar secar en posición vertical.
Dispensar una gota de ACEITE DE INMERSION
ALBOR sobre la preparación y observar al microscopio.
COLORACION DE WRIGHT
Uso in vitro
Observación En una buena coloración el extendido es de color
rosado y los eritrocitos, en el microscopio aparecen
del mismo color. Los gránulos eosinófilos son
naranja, los núcleos muestran diversos grados de lila
o púrpura; y los gránulos neutrófilos son de color lila.
Las áreas entre las células deben ser claras y sin
colorante precipitado.
Recomendaciones Cada laboratorio debe estandarizar los tiempos de coloración. Procesar extendidos de pacientes con patologías conocidas como control. Filtrar el colorante periódicamente. Realizar extendidos delgados. Utilizar láminas bien limpias. No dejar secar el colorante.
Almacenamiento y Estabilidad Conservar el colorante de Wright a temperatura de 15 a 25º C y el Buffer de Giordano entre 2° y 8° C después de abierto. Estables hasta la fecha de expiración indicada en la etiqueta.
Presentación
200, 500 y 1000 ml.
Bibliografía RESTREPO, Alberto. Técnicas de Laboratorio en Hematología Clínica. 1 Edición. Medellín, 1975. LYNCH, Matthew. Métodos de Laboratorio. 2ª Edición. México, D. F. 19 Carrera 28ª N. 70 - 43 Bogotá D. C. Tel.: 542 6312 - 608 5439 Fax: 606 1472 e-mail: [email protected]
73
Anexo 6. Inserto de coloración de Diff Quik
LABORATORIO CLÍNICO CENTRO DE ATENCIÓN A LA COMUNIDAD
Anexo 7. Formato de entrega de resultados
MUESTRA:
Coloración de Wright
Se observan estructuras compatibles con / No se observaron estructuras
compatibles con hemoparasitos
Coloración de Diff Quik
Se observan estructuras compatibles con / No se observaron estructuras
compatibles con hemoparasitos
OBASERVACIONES:
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
___________________________________
CLAUDIA CONSUEGRA MAYOR
Bacterióloga Reg. 047
U. metropolitana
FECHA: NOMBRE: N°DI
CODIGO: SEXO: EDAD
RESULTADO DE EXAMEN MICROSCOPICO
75
Anexo 8 Acta de trabajo conjunto
76
77
78
79
Anexo 9 CONEVIO DE PRÁCTICAS FORMATIVAS Y PROYECTOS DE INVESTIGACION ENTRE LA UNIVERSIDAD DE CARTAGENA Y LA UNIVERSIDAD DE SAN BUENAVENTURA CARTAGENA
80
81
82
