Final Trabajo de Aplicacion

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    TRABAJO DE APLICACIN

    I. GENERALIDADES

    1. Ttulo:EVALUACION DE LA PROBLEMTICA AMBIENTAL DE ACUERDO A LOS

    ANLISIS QUMICO-BIOLGICOS REALIZADOS EN EL PERIODO ENERO JUNIO

    DEL 2011 POR LA EMPRESA SEDALIB S.A. Y ALTERNATIVAS PARA LA MEJORA

    DEL PROCESO DE SANEAMIENTO DE LAS AGUAS RESIDUALES EN LA PLANTA

    DE TRATAMIENTO COVICORTI

    2. Autor:

    1. Nombre: Grupo 3Sistemas de saneamiento en la ciudad de Trujillo.

    Tratamiento de sus aguas residuales

    2. Grado Acadmico: Pregrado3. Ttulo Profesional: Ninguno4. Direccin: Universidad Nacional de Trujillo5. Programa de inters: Saneamiento Ambiental

    3. Asesor

    a. Nombre: Dra. Ana Marlene Guerrero Padillab. Grado Acadmico: Doctora en Ciencias e Ingenierac. Ttulo Profesional: Bilogo- Microbilogod. Direccin Laboral y/o domiciliaria: Docente de Postgrado de la Universidad

    Nacional de Trujillo

    4. Tipo de Investigacin

    a. De acuerdo al fin que se persigue: Bsicab. De acuerdo al diseo de investigacin: Descriptiva

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    5. Localidad e Institucin donde se desarrollar el proyecto

    a. Localidad: Trujillo

    b. Institucin:

    Empresa de Saneamiento de Agua Potable y Alcantarillado de LaLibertad Sociedad Annima (SEDALIB S.A).

    Planta de Tratamiento de Aguas Residuales Covicorti (PTARC).

    6. Duracin de la ejecucin del proyecto (en meses): 3 meses

    Fecha de inicio: 07/09/2011 Fecha de trmino: 02/11/2011

    7. Cronograma de Trabajo:

    El cronograma de trabajo es anexado al final del informe.

    8. Recursos

    a. Personal:

    Investigadores:

    i. Autores: Corcuera Vega, Vannia Chvez Pelez, Robert Gonzales Espinoza, Anais Leiva Pereyra, Claudia Lpez Rodrguez, Leslie Morn Montoya, Arturo

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    Ramrez Moreno, Jehyni Rodrguez Garca, Maricarmen Saldaa lvarez, Carito Vsquez Correa, Jorge Vivanco Peche, Karol

    ii. Asesor: Dra. Ana Marlene Guerrero Padilla El ingeniero k les ayudo: D

    b. Bienes:

    i. De consumo Papel Bond A4 Tintas de Inyeccin Folders Manila Cuaderno de Campo Engrapador Grapas Perforador Lapiceros Lpices Corrector CD-R Faster Resaltador Tajador Libreta de Notas

    ii. De inversin Memoria USB Cmara Digital SONY Computadora Personal Core 2 Duo GPS Mvil LG

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    c. Servicios: Internet LAN Telefona Mvil Telefona Fija Transporte Publico Energa Elctrica Impresiones Fotocopiado Espiralado

    9. Presupuesto

    CLASIFICADO

    DE GASTOSARTCULO UNIDAD

    PRECIO

    UNI.

    (S/.)

    CANTIDAD

    SUMA

    TOTAL

    (S/.)

    TOTAL

    (S/.)

    VIAJE DOMESTICO

    56.60

    PASAJES Y

    GASTOS DE

    TRANSPORTE

    Pasajes de

    Transporte Pblico

    (Autobs)

    Pasaje 0.70 38 26.60

    Pasajes de

    Transporte Pblico

    (Taxi)

    Pasaje 5.00 6 30.00

    MATERIALES Y TILES58.40

    TILES DE

    OFICINA Y

    RECURSOS

    Papel Bond A4 Millar 15.00 1 15.00

    Folders Manila Docena 5.00 1 5.00

    Cuaderno de Campo Unidad 0.80 1 0.80

    Engrapador Unidad 2.50 1 2.50

    Grapas Caja 2.00 1 2.00

    Perforador Unidad 2.50 1 2.50

    Lapiceros Unidad 1.50 4 6.00

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    Lpices Unidad 1.00 4 4.00

    Corrector Unidad 2.50 1 2.50

    CD-R Unidad 1.00 4 4.00

    Faster Docena 3.60 1 3.60

    Resaltador Unidad 3.00 1 3.00

    Tajador Unidad 1.50 1 1.50

    Libreta de Notas Unidad 3.00 2 6.00

    SERVICIO DE COMUNICACIN150.00

    SERVICIO DECOMUNICACIN

    Servicio de Telefona

    MvilRecarga 10.00 4 40.00

    Servicio de Telefona

    FijaTarjeta 5.00 2 10.00

    Servicio de Internet Hora 1.00 100 100.00

    SERVICIO DE IMPRENTA105.00

    SERVICIOS DE

    IMPRESIN,

    FOTOCOPIADO,

    ETC.

    ImpresinUnidad 0.10 500 50.00

    FotocopiadoUnidad 0.10 500 50.00

    EspiraladoUnidad 2.50 2 5.00

    ADQUISICIN DE EQUIPO INFORMTICOS Y DE COMUNICACIN2630.00

    EQUIPOS DE

    COMPUTACIN

    Y PERIFRICOS

    ComputadoraPersonal Core 2 Duo

    Unidad 1750.00 1 1700.00

    Cmara Digital SONYUnidad 500.00 1 400.00

    Memoria USBUnidad 30.00 1 30.00

    GPS Mvil LGUnidad 600.00 1 500.00

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    TOTAL 3000.00

    a. Recursos Disponibles

    Todo lo anterior que asciende a la suma de S/. 3000 (tres mil nuevossoles)

    Los anlisis de las muestras qumico- biolgicas de aguas residuales dela Planta de Tratamiento Covicorti, fueron brindados por la Empresa

    de SEDALIB S.A.

    10. Financiamiento:

    Con recursos propios Recursos de la Empresa SEDALIB S.A.

    II. PLAN DE INVESTIGACIN:

    1. Antecedentes y justificacin del problema

    a. Antecedentes

    En los pases de Amrica Latina, al igual que en muchos otros del mundo, se presenta

    con frecuencia el problema de que las comunidades no cuentan con sistemas

    adecuados para la disposicin de sus aguas residuales. Esta es la causa principal del

    bajo grado de saneamiento ambiental que existe en nuestros pases, y tiene su origen

    en el factor econmico; nuestras poblaciones son de recursos econmicos muy

    limitados, por lo que no pueden cubrir los costos de las plantas de tratamiento de

    aguas servidas del tipo convencional con tcnicas modernas. (Senz, 1970)

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    La problemtica del tratamiento de aguas en el planeta es por una gran cantidad de

    agua residual producto de las actividades del hombre, agua que no recibe un

    tratamiento adecuado, y que contamina lagos, lagunas y ocanos, y afecta los

    ecosistemas y arrecifes. Adems, los sistemas de alcantarillado no tienen la capacidad

    hidrulica suficiente para manejar los flujos de aguas residuales, especialmente en los

    barrios pobres, lo que redunda en problemas de desborde. En 2008, el 26% de las

    aguas residuales generadas en el pas recibi algn tipo de tratamiento. El restante

    75% de las aguas se descarga sin ningn tipo de tratamiento.

    Estas aguas residuales albergan microorganismos que causan enfermedades como

    diarrea, clera y la gastroenteritis que se encuentran entre las tres principales causas

    de muerte en el mundo y en la regin latinoamericana.

    Las aguas residuales son responsables del 80% de la morbilidad de los pases en va de

    desarrollo, esta situacin se encuentra estrechamente relacionada con las bajas

    coberturas en alcantarillado y el inadecuado tratamiento y disposicin final de aguas

    residuales (OPS/OMS 2000).

    La opcin tecnolgica corresponde a las lagunas de estabilizacin, es un trmino

    genrico para todos los tipos de lagunas que describe a un estanque en el cual se

    descargan aguas residuales y en donde se produce la estabilizacin de materia

    orgnica y la mortalidad bacteriana. Cuando las aguas residuales son descargadas en

    lagunas de estabilizacin, se realiza de forma espontanea un proceso conocido como

    el nombre de autodepuracin o estabilizacin natural, en el que ocurren fenmenos

    de tipo fsico, qumico, bioqumico y biolgico. (Senz, 1985)

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    El uso de lagunas de estabilizacin comenz a introducirse al final de la dcada de los

    aos cincuenta en los pases de Amrica Latina y el Caribe. Y al ao 1993, en el Per se

    registra la existencia de 51 lagunas de tipo facultativo o aireada. (INEI 1993)

    Respecto a la problemtica de la ciudad de Trujillo, entre 1984 y 1986 el consorcio

    GITEC-DECOPISA elabor el plan maestro y estudios de factibilidad de abastecimiento

    de agua potable y desage para la ciudad de Trujillo y centros aledaos con un

    horizonte de diseo a losa los 1995 y 2005 respectivamente. En aquella oportunidad,

    determino la existencia de zonas no conectadas al sistema de alcantarillado y la

    descarga de las aguas residuales crudas directamente al mar. Con el propsito de

    mejorar la infraestructura sanitaria, se recomend la construccin de siete sistemas de

    lagunas de estabilizacin del tipo anaerbico seguido de facultativas situadas en los

    alrededores de la ciudad de Trujillo. (GMK CONSULT /SANIPLAN 1996)

    La empresa SEDALIB, administradora del servicio de agua potable y alcantarilladlo de

    Trujillo, a partir de 1990 ejecuto el diseo de cinco sistemas de tratamiento de aguas

    residuales por una combinacin de lagunas anaerbicas y facultativas; pero por

    carencia de estudios de mecnica de suelos, de caracterizacin de aguas residuales, los

    proyectos no se implementaron. Luego en 1995 y 1996, SEDALIB encarga al Consorcio

    GKW/ SANIPLAN la ejecucin del proyecto definitivo quienes finalmente desarrollan el

    proyecto para tres sistemas de tratamiento: El Cortijo, Covicorti y la Encalada.

    Conseguido el financiamiento se inicia los trabajos de construccin en agosto de 1998

    del sistema de Covicorti. Adems SEDALIB inicio las gestiones de financiamiento,

    concretadas finalmente con el Banco Alemn GMK por un monto de 24 millones de

    marcos, dando pasea grandes inversiones para construir, operar y mantener las

    lagunas de tratamiento de los sistemas El Cortijo y Covicorti, las ms importantes

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    lagunas de tratamiento de desages en la ciudad de Trujillo y entre los principales en

    el Per. (SEDALIB S.A., 2008)

    Por la limitacin del presupuesto, el proyecto fue desarrollado para un tratamiento

    pasivo de las aguas residuales mediante lagunas de estabilizacin de naturaleza

    aerbica; y como tales, se afronto el inconveniente de limitacin de reas, aspecto que

    fue superado por la utilizacin de aireadores mecnicos para incrementar el ingreso de

    oxigeno. El proyecto fue concebido y desarrollado para tratar principalmente desages

    domsticos, sin embargo, a partir de 1992 la naturaleza de las aguas residuales de

    Trujillo cambia considerablemente por el aporte cada vez mayor de efluentes

    industriales y comerciales. Esta realidad conduce a caracterizar las aguas residuales de

    Trujillo como aguas residuales domestico-industrial y comercial que van a afectar

    seriamente la operacin de las plantas de tratamiento diseadas para depurar aguas

    residuales domesticas.

    El tratamiento de las aguas servidas del continuo urbano de Trujillo se realiza a travs

    de un sistema de lagunas de oxidacin. En el caso de Covicorti, se tiene una

    combinacin de lagunas aireadas y facultativas. El tratamiento de las aguas servidas en

    las lagunas de oxidacin es incompleto, debido al alto DBO5, consideradndo que

    Trujillo recibe en el mismo sistema los efluentes industriales y hospitalarios que se

    juntan con los domsticos. As mismo, se puede observar como el porcentaje de agua

    tratada, con respecto a la cantidad de agua recolectada, cada ao es menos en todos

    los distritos del continuo urbano. Una de las causales es la operacin y mantenimiento

    de las pozas de tratamiento en ptimas condiciones. (ECCO_Trujillo, 20119)

    Las aguas residuales tiene una DBO5 entre 350 y 410 mg/L y las lagunas fueron

    proyectadas con una DBO5 de diseo de 320 mg/L, el alto nivel de carga orgnica

    respecto de los parmetros de diseo implica una reduccin en la capacidad de

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    tratamiento en trminos de caudal. Esta situacin se agrava si se considera que la

    calidad de las aguas servidas comerciales e industriales superan los lmites permisibles

    y que SEDALIB dispone de escasa capacidad para monitorear una mayor cantidad de

    usuarios y aplicar los derechos que le corresponde. (SUNASS, 2007)

    De acuerdo con lo manifestado por el jefe de la Planta de Tratamiento de Covicorti, la

    planta esta trabajando a un 60 % de capacidad de diseo. Esto se debe, por un lado, al

    tiempo de vida de las lagunas de requieren mantenimiento y, por otro, a que aun no se

    cuenta con un sistema tarifario para el pago del servicio. (ECCO_Trujillo, 20119)

    b. Justificacin

    El problema ocasionado por la deficiente prestacin del servicio de saneamiento es de

    vital importancia pues atenta contra la dignidad humana, afectando la salud pblica,

    las posibilidades de supervivencia infantil y agudizando los niveles de pobreza. As

    mismo, limita las posibilidades de desarrollo econmico y atenta contra el medio

    ambiente, especialmente la disponibilidad de los recursos hdricos de buena calidad,

    creando una problemtica ambiental. Por lo tanto es trascendental, que se evalu la

    calidad del servicio ofrecido por la empresa de saneamiento de SEDALIB S.A.; adems

    que se busque alternativas de mejora de este servicio para poder crear una gestin

    eficiente del agua.

    2. Problema:

    Cul es la problemtica ambiental de acuerdo a los anlisis qumico-biolgicos

    realizados en el periodo Enero-Junio del 2011 por la empresa SEDALIB S.A. y cules son

    las alternativas para mejorar el proceso de saneamiento de las aguas residuales en la

    Planta de Tratamiento Covicorti?

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    3. Hiptesis

    3.1 General:

    Los efluentes producto del proceso fisicoqumico de la Planta de Tratamiento deAguas Residuales de Covicorti sobrepasan los Lmites Mximos Permisibles

    aprobados mediante Decreto Supremo N 003-2010-MINAM; y adems, estas

    aguas residuales no son tratadas en su totalidad, generando una problemtica

    ambiental.

    3.2 Implcita:

    El diseo de la Planta de Tratamiento de Aguas Residuales Covicorti de acuerdo alos anlisis qumico-biolgicos realizados por la Empresa SEDALIB S.A. no es el

    adecuado para tratar el volumen total del afluente, logrando as una eficiencia no

    mayor al 70 %.

    Las aguas residuales tratadas mediante procesos fsico-qumicos en la Planta deTratamiento Covicorti de acuerdo a los anlisis qumico-biolgicos realizados por

    la Empresa SEDALIB S.A. presentan una elevada concentracin de DBO (demanda

    bioqumica de Oxgeno) y de DQO (demanda qumica de Oxgeno), las cuales se

    encuentran por encima de los Lmites Mximos Permisibles aprobados mediante

    Decreto Supremo N 003-2010-MINAM.

    Las aguas residuales tratadas mediante procesos fsico-qumicos en la Planta deTratamiento Covicorti de acuerdo a los anlisis microbiolgicos realizados por la

    Empresa SEDALIB S.A. presentan una elevada concentracin de Coliformes Totales

    y de Coliformes Termotolerantes, las cuales se encuentran por encima de los

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    Lmites Mximos Permisibles aprobados mediante Decreto Supremo N 003-2010-

    MINAM

    4. Objetivos

    Evaluar si la Planta de Tratamiento Covicorti proporciona un tratamientoadecuado a las aguas residuales de acuerdo a los anlisis qumico-biolgicos

    realizados por la Empresa SEDALIB S.A.

    Determinar las caractersticas qumico-biolgicas de las aguas procesadas en laPlanta de Tratamiento Covicorti segn los Lmites Mximos Permisibles aprobados

    mediante Decreto Supremo N 003-2010-MINAM

    Proponer tratamientos qumicos y biolgicos adicionales a las aguas ya tratadasen la Planta de Tratamiento de Covicorti para el mejoramiento de la calidad de

    estas.

    5. Diseo de Investigacin

    5.1Material de Estudio

    El material de estudio estar constituido por los resultados del anlisis

    qumico-biolgico realizados por la Empresa SEDALIB S.A. durante el periodo

    Enero- Junio del 2011; de las aguas residuales de la Planta de Tratamiento

    Covicorti, cuyo afluente proviene de los distritos de Trujillo, Porvenir, Florencia

    de Mora, Vctor Larco Herrera y parte de la Esperanza.

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    La Planta de Tratamiento Covicorti se encuentra ubicada al oeste de la ciudad

    de Trujillo de la provincia del mismo nombre, regin La Libertad. Sus

    coordenadas UTM son: Este 715000; Norte 9102000.

    El volumen aproximado anual de agua a tratada es de 1043215 m3.

    Las instalaciones de la PTARC ocupan un rea total de 21.6 ha; de las cuales,

    3.12 ha lo ocupan dos lagunas aireadas (actualmente una se encuentra

    inhabilitada) y 15.23 ha ocupada por las cuatro lagunas facultativas.

    5.2Mtodos y tcnicas

    5.2.1 Diseo:En el presente trabajo de aplicacin se evaluara la problemtica

    ambiental de la Planta de tratamiento de aguas residuales Covicorti,

    tomando como referencia los anlisis qumico-biolgicos

    proporcionados por la Empresa SEDALIB S.A. para el semestre Enero-

    Junio 2011.

    5.2.2 Determinacin de los puntos de muestreoPara la determinacin de los lugares de toma de muestras de estos

    anlisis se tuvo en cuenta la importancia de los puntos de muestreo

    con respecto a la evaluacin de la eficiencia para el funcionamiento

    del proceso de tratamiento.

    Los puntos seleccionados para la toma de muestras de los anlisis

    fsico-qumicos y biolgicos, son:

    Afluente a la planta de tratamiento, Inmediatamente despusdel repartidor de caudal (Agua cruda)

    Efluente de la laguna aireada

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    Efluente de la laguna facultativa N1 Efluente de la laguna facultativa N2 Efluente de la laguna facultativa N3 Efluente total de las lagunas facultativas

    La ubicacin de estos puntos se observan en la Imagen N1, N 2, N3,

    N4, N5, N6 (ANEXO 2)

    5.2.3 Determinacin de ParmetrosLos mtodos utilizados para la evaluacin de los parmetros

    siguientes, se muestran explicados en el ANEXO 1.

    Ensayos Qumicos-biolgicos-DQO

    -DBO5

    - Slidos Suspendidos Totales (SST)

    Ensayos microbiolgicos- Coliformes totales

    - Coliformes termotolerantes

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    6. Referencias Bibliogrficas

    RODRGUEZ VSQUEZ, Oswaldo Desideno. Nivel de concentracin de aceites y grasasen el circuito de la Planta de Aguas Residuales Covicorti en Trujillo. Ao 2000.

    BOLETN INFORMATIVO SEDALIB S.A. Servicio de agua potable y alcantarillado de laLibertad S.A. Tratamiento de Aguas Residuales en Trujillo. Noviembre 2008. Oficina de

    Imagen Institucional. Pag 11-13

    ECCO_Trujillo. Perspectivas del Ambiente y Cambio Climtico en el Medio Urbano.Municipalidad Provincial de Trujillo. Impreso Grupo Matisse S.A.C Mayo 2011.

    Senz,R. Lagunas de estabilizacin y otros sistemas simplificados para el tratamientode aguas residuales. Manual DTIAPA N C-14, CEPIS. Segunda edicin. 1985

    Senz, R. Consideraciones en relacin con el uso de lagunas de estabilizacin para eltratamiento de aguas residuales. Hojas de divulgacin tcnica, N33. CEPIS (Lima.

    Per). 1986

    Blga. Margarita Aurazo de Zumaeta .II Curso Nacional Entrenamiento en Control deCalidad del Agua en Sistemas de Agua Potable. Octubre 2002.[citado 26/09/2011]

    .Disponible en : http://bvs.per.paho.org/texcom/cd048437/aurazote.pdf

    Demanda Qumica de Oxigeno. [On Line] Disponible en:http://www.drcalderonlabs.com/Metodos/Analisis_De_Aguas/Determinacion_de_DQ

    O.htm[Consulta] 27 de Setiembre del 2011. 12:06 am

    Demanda Bioqumica de Oxgeno: [On Line] Disponible en:http://www.drcalderonlabs.com/Metodos/Analisis_De_Aguas/Determinacion_de_DB

    O5.htm[Consulta] 26 de Setiembre del 2011. 22:35 pm

    Problemtica De Las Aguar Residuales: [On Line] Disponible en:http://www.slideshare.net/MarisolGmzSlns/tratamiento-de-aguas-residuales-5671589

    [Consulta] 26 de Setiembre del 2011. 22:35 pm

    http://bvs.per.paho.org/texcom/cd048437/aurazote.pdfhttp://bvs.per.paho.org/texcom/cd048437/aurazote.pdfhttp://www.drcalderonlabs.com/Metodos/Analisis_De_Aguas/Determinacion_de_DQO.htmhttp://www.drcalderonlabs.com/Metodos/Analisis_De_Aguas/Determinacion_de_DQO.htmhttp://www.drcalderonlabs.com/Metodos/Analisis_De_Aguas/Determinacion_de_DQO.htmhttp://www.drcalderonlabs.com/Metodos/Analisis_De_Aguas/Determinacion_de_DBO5.htmhttp://www.drcalderonlabs.com/Metodos/Analisis_De_Aguas/Determinacion_de_DBO5.htmhttp://www.drcalderonlabs.com/Metodos/Analisis_De_Aguas/Determinacion_de_DBO5.htmhttp://www.slideshare.net/MarisolGmzSlns/tratamiento-de-aguas-residuales-5671589http://www.slideshare.net/MarisolGmzSlns/tratamiento-de-aguas-residuales-5671589http://www.slideshare.net/MarisolGmzSlns/tratamiento-de-aguas-residuales-5671589http://www.drcalderonlabs.com/Metodos/Analisis_De_Aguas/Determinacion_de_DBO5.htmhttp://www.drcalderonlabs.com/Metodos/Analisis_De_Aguas/Determinacion_de_DBO5.htmhttp://www.drcalderonlabs.com/Metodos/Analisis_De_Aguas/Determinacion_de_DQO.htmhttp://www.drcalderonlabs.com/Metodos/Analisis_De_Aguas/Determinacion_de_DQO.htmhttp://bvs.per.paho.org/texcom/cd048437/aurazote.pdf
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    ANEXO 1:

    DETERMINACIN DE PARMETROS

    DQO:

    Para el anlisis de la Demanda Qumica de Oxgeno, se deben tomar en cuenta las

    siguientes consideraciones:

    Tratamiento de muestras con DQO > 50 mg O2/L: Colocar 50,0 mL de muestra enun baln de reflujo de 500-mL (para muestras con DQO > 900 mg O2/L, usar una

    porcin ms pequea de muestra y diluirla a 50,0 mL); agregar 1 g de HgSO 4, en

    presencia de perlas de vidrio para controlar la ebullicin, y muy lentamente

    agregar 5,0 mL del reactivo de cido sulfrico, mientras se agita para disolver el

    HgSO4. Enfriar y agitar para evitar la posible prdida de materiales voltiles;

    agregar 25 mL de solucin de K2Cr2O7 0,0417 M y mezclar. Acoplar el baln al

    condensador y abrir el flujo de agua refrigerante; agregar el remanente del

    reactivo de cido sulfrico (70 mL) a travs del extremo superior del condensador.

    Continuar la agitacin mientras se agrega el reactivo de cido sulfrico.

    PRECAUCIN:Agitar muy bien la mezcla de reflujo antes de suministrar calor para

    prevenir el sobrecalentamiento en el fondo del baln y la formacin de espuma.

    Cubrir el extremo superior del condensador con un vaso pequeo para prevenir laentrada de materiales extraos a la mezcla y dejar en reflujo durante 2 h. Enfriar y

    enjuagar el condensador desde la parte superior con agua destilada; desconectar

    el condensador y diluir la muestra al doble de su volumen con agua destilada.

    Enfriar hasta temperatura ambiente y valorar el exceso de K 2Cr2O7 con FAS en

    presencia de 0,10 a 0,15 mL (2 o 3 gotas) de indicador de ferroina; aunque la

    cantidad de ferroina no es crtica, usar el mismo volumen para todas las

    titulaciones. Tomar como punto final de la titulacin el primer cambio ntido de

    color azul-verdoso a caf-rojizo; el color azul-verdoso puede reaparecer. El cambio

    de color no es tan marcado como en la titulacin del blanco de reactivos debido a

    la mayor concentracin de cido en la muestra. De la misma manera, someter a

    reflujo y titular un blanco que contenga los reactivos y un volumen de agua

    destilada igual al volumen de muestra.

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    DBO5:

    Para el anlisis de la Demanda Bioqumica de Oxgeno a 5 das, se deben tomar en cuenta

    las siguientes consideraciones:

    Preparacin del agua de dilucin: Colocar la cantidad de agua necesaria en unabotella y agregar por cada litro, 1 mL de cada una de las siguientes soluciones:

    tampn fosfato, MgSO4, CaCl2, y FeCl3.

    Llevar el agua de dilucin a una temperatura de 20C antes de su uso; saturarla

    con OD por agitacin en una botella parcialmente llena, por burbujeo de aire

    filtrado libre de materia orgnica, o guardarla en botellas lo suficientemente

    grandes con tapn de algodn, para permitir su saturacin. Emplear material de

    vidrio bien limpio para proteger la calidad del agua.

    Si el agua consume ms de 0,2 mg de oxgeno/L se debe mejorar su purificacin o

    emplear agua de otra fuente; si se usa el procedimiento de inhibicin de la

    nitrificacin, el agua de dilucin inoculada, se debe guardar en un sitio oscuro a

    temperatura ambiente hasta que el consumo de oxgeno se reduzca lo suficiente

    para cumplir el criterio de verificacin. Confirmar la calidad del agua de dilucin

    almacenada que est en uso, pero no agregar semilla para mejorar su calidad. El

    almacenamiento no es recomendable cuando se va a determinar la DBO sin

    inhibicin de nitrificacin, ya que los organismos nitrificantes se pueden

    desarrollar en este perodo. Revisar el agua de dilucin para determinar la

    concentracin de amonio, y si es suficiente despus del almacenamiento; de lo

    contrario, agregar solucin de cloruro de amonio para asegurar un total de 0,45

    mg de amonio como nitrgeno/L. Si el agua de dilucin no ha sido almacenada

    para mejorar su calidad, agregar la cantidad suficiente de semilla para producir un

    consumo de OD de 0,05 a 0,1 mg/L en cinco das a 20C. Llenar una botella de DBOcon agua de dilucin, determinar el OD inicial, incubar a 20C por 5 das y

    determinar el OD final. El OD consumido en este lapso no debe ser mayor de 0,2

    mg/L y preferiblemente menor de 0,1 mg/L.

    Chequeo con glucosa-cido glutmico: Debido a que la prueba de la DBO es unbioensayo, sus resultados pueden estar muy influenciados por la presencia de

    sustancias txicas o por el uso de semillas de mala calidad. Muchas veces el agua

    destilada puede estar contaminada con cobre, o algunos inculos de aguasresiduales pueden ser relativamente inactivos, y si se emplean tales aguas o

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    inculos siempre se van a obtener bajos resultados. Controlar peridicamente la

    calidad del agua de dilucin, la efectividad de las semillas y la tcnica analtica, por

    mediciones de la DBO para compuestos orgnicos puros y muestras con adiciones

    conocidas. En general, para determinaciones de la DBO que no requieran una

    semilla adaptada, usar como solucin estndar de chequeo una mezcla de 150 mg

    de glucosa/L y 150 mg de cido glutmico/L. La glucosa tiene una velocidad de

    oxidacin excepcionalmente alta y variable, pero cuando es empleada con cido

    glutmico se estabiliza, y es similar a la obtenida con aguas residuales municipales.

    Si un agua residual contiene un constituyente mayoritario identificable, que

    contribuye a la DBO, usar este compuesto en remplazo de la mezcla de glucosa-

    cido glutmico.

    Determinar la DBO5 a 20C de una dilucin al 2% de la solucin estndar de

    chequeo glucosa-cido glutmico.

    Inoculacina. Origen del inculo: Es necesario que en la muestra est presente una

    poblacin de microorganismos capaces de oxidar la materia orgnica

    biodegradable. Las aguas residuales domsticas no cloradas, los efluentes

    no desinfectados de plantas de tratamiento biolgico, y las aguas

    superficiales que reciben descargas residuales contienen poblaciones

    satisfactorias de microorganismos. Algunas muestras no contienen una

    poblacin microbiana suficiente (por ejemplo, efluentes industriales sin

    tratamiento, aguas desinfectadas, efluentes con elevada temperatura o

    con valores extremos de pH), por tanto deben inocularse por adicin de

    una poblacin adecuada de microorganismos. La semilla o inculo

    preferible es el efluente de un sistema de tratamiento biolgico, en su

    defecto, el sobrenadante de aguas residuales domsticas despus dedejarlas decantar a temperatura ambiente por lo menos 1 h pero no ms

    de 36 h. Cuando se emplee el efluente de un proceso de tratamiento

    biolgico, se recomienda aplicar el procedimiento de inhibicin de la

    nitrificacin.

    Algunas muestras pueden contener materiales no degradables a las tasas

    normales de trabajo de los microorganismos; inocular tales muestras con

    una poblacin microbiana adaptada, obtenida a partir de efluentes sin

    desinfectar de un proceso de tratamiento biolgico de aguas residuales.

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    Tambin se puede obtener la semilla en el cuerpo de agua receptor del

    vertimiento, preferiblemente de 3 a 8 Km despus del punto de descarga.

    Cuando no se disponga de ninguna de dichas fuentes del inculo,

    desarrollar en el laboratorio una semilla adaptada, por aireamiento

    continuo de una muestra clarificada de agua residual domstica y adicin

    de pequeos incrementos diarios de aguas residuales. Para obtener la

    poblacin microbiana inicial, usar una suspensin de suelo, un lodo

    activado, o una preparacin a partir de semilla comercial. Ensayar el

    rendimiento de la semilla haciendo pruebas de la DBO en las muestras

    hasta obtener una poblacin satisfactoria. Si los valores de la DBO

    aumentan con el tiempo hasta un valor constante, se consideran como un

    indicio de la adaptacin sucesiva de la semilla o inculo.

    b. Control de inculos. Determinar la DBO del material inoculante como si setratara de una muestra. De este valor y del conocimiento del dato del agua

    de dilucin determinar el OD consumido. Hacer las diluciones necesarias

    hasta obtener una disminucin de por lo menos el 50% del OD. La grfica

    de la disminucin de OD expresada en miligramos por litro contra los

    mililitros de inculo, origina una recta cuya pendiente debe interpretarse

    como la disminucin de OD por mililitro de inculo. La intercepcin de la

    recta con el eje de los valores de reduccin del OD representa la

    disminucin del oxgeno provocada por el agua de dilucin, valor que debe

    ser inferior a 0,1 mg/L. Con el objeto de corregir el valor de OD consumido

    por una muestra, se debe restar a ste el consumido por el inculo. El

    consumo de OD del agua de dilucin ms el inculo puede estar en el

    intervalo de 0,6 a 1,0 mg/L.

    c. Blanco de agua de dilucin. Con el objeto de verificar la calidad del aguade dilucin sin inculo y la limpieza de los materiales, usar una porcin de

    la misma y llevarla junto con las muestras a travs de todo el

    procedimiento. El OD consumido por el agua de dilucin debe ser menor

    de 0,2 mg/L y preferiblemente no mayor de 0,1 mg/L.

    Pre tratamiento de la Muestra

    a. Muestras con alcalinidad custica o acidez. Neutralizar las muestras a pHentre 6,5 y 7,5 con una solucin de cido sulfrico (H2SO4) o hidrxido de

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    sodio (NaOH) de concentracin tal que la cantidad de reactivo no diluya la

    muestra en ms de 0,5%. La menor dilucin de muestra no debe afectar el

    pH dado por el agua de dilucin inoculada.

    b. Muestras con compuestos residuales de cloro. Evitar las muestras quecontengan cloro residual; tomarlas antes del proceso de cloracin; si la

    muestra ha sido clorada pero no presenta cloro residual detectable,

    inocular el agua de dilucin; si hay cloro residual, declorar la muestra e

    inocular el agua de dilucin (ver 6.7). No ensayar las muestras que han

    sido decloradas, sin inocular el agua de dilucin. En algunas muestras, el

    cloro se elimina si se dejan 1 o 2 h a la luz, lo cual puede suceder durante

    el transporte y manejo de la muestra. Para muestras en las cuales el cloro

    residual no se disipa en un tiempo razonablemente corto, eliminar el cloro

    residual por adicin de solucin de Na2SO3. El volumen de

    Na2SO3 requerido se determina en una porcin de 100 a 1 000 mL de la

    muestra, previamente neutralizada, por la adicin de 10 mL de cido

    actico 1 + 1 o H2SO4 1 + 50, 10 mL de solucin de yoduro de potasio (10

    g KI/100 mL), por cada 1000 mL de muestra; el volumen resultante se

    titula con solucin de Na2SO3 hasta su punto final, determinado por el

    indicador almidn-yodo. Se agrega a la muestra neutralizada, el volumen

    relativo de solucin de Na2SO3 determinado, se mezcla bien y se deja en

    reposo cerca de 10 a 20 minutos. Ensayar la muestra para determinar el

    cloro residual. (NOTA: Un exceso de Na2SO3 en la muestra, consume

    oxgeno y reacciona con ciertas cloraminas orgnicas que pueden estar

    presentes en muestras tratadas).

    c. Muestras contaminadas con sustancias txicas. Las muestras de aguasresiduales provenientes de industrias, por ejemplo electroqumicas,

    contienen metales txicos. Estas muestras requieren de estudios

    especiales y deben ser tratadas antes de medirles la DBO.

    d. Muestras sobresaturadas con OD. En muestras procedentes de aguas muyfras o de aguas en que la produccin primaria es alta, los valores de OD a

    20C suelen ser mayores de 9 mg de OD/L. Para prevenir prdidas de

    oxgeno durante la incubacin, llevar la temperatura de la muestra a 20C

    en una botella parcialmente llena, mientras se sacude fuertemente o se

    burbujea aire comprimido filtrado y limpio.

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    e. Ajuste de temperatura de la muestra. Llevar las muestras a 20 1C antesde hacer las diluciones.

    f. Inhibicin de la nitrificacin. A las muestras contenidas en botellas de 300mL se agregan 3 mg de 2-cloro-6-(triclorometil)-piridina (TCMP) o se

    puede agregar directamente al agua de dilucin para lograr una

    concentracin final de aproximadamente 10 mg de TCMP/L. (NOTA: Es

    posible que la TCMP se disuelva lentamente y permanezca flotando en la

    superficie de la muestra; algunas formulaciones comerciales se disuelven

    ms fcilmente pero no son 100% puras, por lo que se debe ajustar la

    dosificacin). Las muestras que requieren el procedimiento de inhibicin

    de la nitrificacin incluyen: efluentes tratados biolgicamente, muestras

    inoculadas con efluentes tratados biolgicamente, y aguas de ro, pero no

    se limitan necesariamente a estas. En el reporte de los resultados registrar

    el uso del procedimiento de inhibicin de la nitrificacin.

    Tcnica de Dilucin

    Los resultados ms acertados se obtienen con diluciones de muestra en las

    que los valores de OD residual son por lo menos 1 mg/L y un consumo de

    OD de por lo menos 2 mg/L despus de los 5 das de incubacin. La

    experiencia con muestras de diferente origen permiten optimizar el

    nmero de diluciones requeridas; la correlacin de la DQO con la DBO

    puede constituir una gua efectiva para la seleccin de las diluciones ms

    convenientes. Si no se dispone de esta metodologa, se pueden emplear

    las diluciones de 0,0 a 1,0 % para efluentes lquidos industriales, 1 a 5 %

    para efluentes industriales no tratados y decantados, 5 a 25 % para

    efluentes con tratamiento secundario o biolgico, y 25 a 100 % para

    corrientes contaminadas.

    Las diluciones se efectan en probetas y luego se transfieren a las botellas

    de DBO, o se preparan directamente en las botellas. Cualquiera de los dos

    mtodos de dilucin puede combinarse con cualquier tcnica para

    medicin de OD. El nmero de botellas a ser preparadas para cada

    dilucin depende de la tcnica de anlisis del OD y del nmero de rplicas

    deseadas. Cuando sea necesaria la inoculacin, agregar la semilla

    directamente al agua de dilucin o a cada probeta o botella de DBO antes

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    de la dilucin. La inoculacin en las probetas evita la disminucin de la

    relacin semilla: muestra cuando se hace un incremento en las diluciones.

    1. Diluciones preparadas en probeta. Si se emplea el mtodo modificado dela azida para la medicin de OD, transvasar cuidadosamente el agua de

    dilucin -inoculada si es necesario-, hasta llenar la mitad de una probeta

    de 1 a 2 L de capacidad por medio de sifn para evitar la entrada de aire.

    Agregar la cantidad deseada de muestra cuidadosamente mezclada y diluir

    al nivel apropiado con agua de dilucin; mezclar bien con una varilla tipo

    mbolo y evitar la entrada de aire. Trasvasar la dilucin a dos botellas de

    DBO por medio de sifn. Determinar el OD inicial en una de estas botellas.

    Tapar hermticamente la segunda botella, con sello de agua, e incubar por

    5 d a 20C. Si se determina el OD por el mtodo de electrodo de

    membrana, transvasar la mezcla de dilucin a una botella DBO por medio

    de sifn. Determinar el OD inicial en esta botella, descartar el residuo y

    llenar nuevamente la botella con la muestra diluida. Tapar

    hermticamente la botella, con sello de agua, e incubar por 5 d a 20C.

    2. Diluciones preparadas directamente en botellas DBO. Con una pipeta deboca ancha agregar el volumen de muestra deseado a diferentes botellas

    para DBO de volumen conocido. Agregar, a cada botella o al agua de

    dilucin, las cantidades apropiadas de semilla; llenar las botellas con

    suficiente agua de dilucin, inoculada si es necesario, de tal manera que al

    insertar el tapn se desplace todo el aire, sin dejar burbujas. Para

    diluciones mayores de 1:100 hacer una dilucin preliminar en una probeta

    antes de hacer la dilucin final. Preparar dos botellas de cada dilucin

    cuando se empleen los mtodos y/o domsticos de volumetra para la

    medicin del OD; determinar el OD inicial en una de las dos botellas, tapar

    hermticamente la segunda botella, con sello de agua, e incubar por 5 d a

    20C. Si se emplea el mtodo de electrodo de membrana para la medicin

    de OD, preparar solamente una botella de DBO por cada dilucin;

    determinar el OD inicial en esta botella y remplazar cualquier contenido

    desplazado con agua de dilucin para llenar la botella. Tapar

    hermticamente, con sello de agua, e incubar por 5 d a 20C. Enjuagar el

    electrodo de OD entre determinaciones para prevenir la contaminacin

    cruzada de las muestras

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    Determinacin del OD inicial. Si la muestra contiene sustancias que reaccionanfcilmente con el OD, es necesario determinar el OD antes de llenar la botella de

    DBO con la muestra diluida. Si el consumo de OD inicial es insignificante, el

    perodo entre la preparacin de la dilucin y la medida del OD inicial no es crtico.

    Emplear el mtodo modificado de la azida (mtodo yodomtrico) o el mtodo de

    electrodo de membrana, para determinar el OD inicial en todas las muestras

    diluidas, testigos y, si se considera necesario, en los controles de semilla.

    Incubacin. Incubar a 20 1C las botellas que contienen las diluciones, loscontroles de semilla, los blancos de agua de dilucin y los patrones de glucosa-

    cido glutmico. Hacer un sello de agua.

    Determinacin del OD final. Determinar el OD en las muestras diluidas, losblancos y los patrones despus de 5 das de incubacin.

    COLIFORMES TERMOTOLERANTES

    Preparar los tubos de Caldo Lauryl tryptosa ( o sulfato) (C.L.T) o Caldo Lactosado (C.L.)en concentracin simple requeridos para la prueba y colocarlos en filas de 5 tubos,

    tener la precaucin de que en el momento de iniciar la prueba no estn a la

    temperatura de refrigeracin. Para las inoculaciones de las porciones de 10ml de

    muestra, usar el C.L.T o C.L. en concentracin doble

    Proceder al marcado de los tubos, anotando el nmero designado por el laboratorioen la ficha de registro de exmenes, el volumen seleccionado de muestra a ser

    inoculados y el da. Esta marcacin podr ser hecha solamente en el primer tubo de la

    derecha en la 1 fila. En los primeros tubos de las hileras siguientes se pueden

    simplificar las marcaciones, colocando slo el volumen de la muestra inoculada.

    Identificar tambin los frascos de aguas de dilucin.

    Homogenizar la muestra no menos de 25 veces inclinando el frasco, formando unngulo de aproximadamente de 45 entre el brazo y el antebrazo.

    Con una pipeta esterilizada de 10ml y obedeciendo los cuidados de asepsia, transferir10ml de muestra para un frasco conteniendo 90 2ml de agua de dilucin temperada,anticipadamente identificado. Prepara as la 1 dilucin decimal (10), sabiendo que

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    1ml de la misma corresponde a 0.1 ml de muestra. 1.5 Con la misma pipeta, sembrar

    10ml de muestra en cada uno de los tubos do C.L.T (en CL.) de concentracin doble,

    cuando este volumen fuera requerido para la prueba.

    Descartar la pipeta de 10ml y con una pipeta de 5ml, inocular 1ml de muestra en cadauno de los 5 tubos correspondientes a estas cantidades de inoculo.

    Homogenizar el frasco conteniendo la primera dilucin (10) y con una nueva pipetaesterilizada, transferir 10ml para un frasco con 902ml de agua de dilucin

    temperada, consignando as la segunda dilucin decimal (10), sabiendo que 1ml de

    la misma corresponde a 0.01ml de muestra.

    Proceder de esa manera en las secuencias de diluciones deseadas (10)

    Lectura

    Despus de ese periodo de incubacin retirar los tubos de la incubadora para efectuarla primera lectura de los resultados. Para eso, agitar suavemente cada tubo y

    examinar la produccin de gas. Retirar los tubos con resultado positivo (produccinde cualquier cantidad de gas, retenida en el tubo Durham) y anotar los resultados.

    Retornar a la incubadora los tubos con resultado negativos, por un periodo adicional

    de 241 hora.

    A la segunda lectura (483h) ser hecha en las misma condiciones, sabiendo que lostubos de C.L.T.(o C.L) con resultado positivo sern separadas y los negativos sern

    descartados.

    Para la realizacin del ensayo confirmativo, todos los tubos con resultado positivo enC.L.T (o C.L.) en las lecturas de 242h y 483h seran sometidas a la confirmacin

    inmediatamente despus de las respectivas lecturas. Como procedimiento alternativo,

    cuando varias diluciones sembradas dieron resultado positivo, se procede a someter

    a la confirmacin solamente en la ultima serie de tubos correspondientes a la mayor

    dilucin que presenta resultados positivos en todos los tubos en 242h y los tubos

    positivos de las series siguientes. Descartar las series anteriores con resultado

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    positivo, considerando para las mismas resultado confirmativo positivo. Todos los

    resultados con resultado presuntivo positivo en 483h sern sometidas a la

    confirmacin. Este procedimiento alternativo ser aplicado para muestras de

    residuales en relacin a las cuales se tiene comprobacin anterior consistente sobre la

    confirmacin de los resultados presuntivos positivos.

    El ensayo confirmativo se efectuara usando el Caldo E.C. para determinacin decoliformes termotolerantes (fecales).

    La diferenciacin se efecta a partir de los tubos positivos de Caldo Lauryl Triptosa odel Caldo Lactosado.Efectuar la marcacin de tubos E.C (previamente temperados en

    Bao Mara a 440.2C, durante un mnimo de 30 minutos) con los nmeros

    correspondientes a cada tubo de medio presuntivo (C.L.T o C.L.) en que se verifican

    formacin de gas.

    Agitar bien cada tubo de C.L.T (o C.L.) con resultado presuntivo positivo y en una asade nquel-cromo (estril), coger un inoculo de cultivo y transferirse al tubo de E.C

    correspondiente, evitando la pelcula superficial que pueda formarse en cultivo

    presunto positivo.

    Incubar todos los tubos de E.C. inoculados (no ms de 30 minutos despus de lainoculacin) la incubacin se efecta en bao de Maria a 44.50.2C durante 242

    horas.

    Proceder a la lectura considerando como resultado positivo para la prueba, todos lostubos que presentaron formacin de gas en el tubo Durham. Con los datos obtenidos,

    calcular el MNP de coliformes fecales.

    En el caso de coniformes termotolerantes expresar como NMP de coliformestermotolerantes expresar como NMP de coliformes totales /100 ml /100 ml

    COLIFORMES TOTALES

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    Los microorganismos coliformes constituyen un grupo heterogneo con hbitat

    primordialmente intestinal para la mayora de las especies que involucra. El grupo de

    bacterias coliformes totales comprende todos los bacilos Gram negativos aerobios o

    anaerobios facultativos, no esporulados, que fermentan la lactosa con produccin de

    gas en un lapso mximo de 48 h. a 35C 1C. Este grupo est conformado por 4

    gneros principalmente: Enterobacter, Escherichia, Citrobacter y Klebsiella.

    El grupo de coliformes fecales, est constituido por bacterias Gram-negativas capaces

    de fermentar la lactosa con produccin de gas a las 48 h. de incubacin a 44.5 0.1C.

    Este grupo no incluye una especie determinada, sin embargo la ms prominente es

    Escherichia coli.

    La demostracin y el recuento de organismos coliformes, puede realizarse mediante el

    empleo de medios de cultivo lquidos y slidos con caractersticas selectivas y

    diferenciales.

    Escherichia coli es un bacilo corto Gram negativo que se encuentra clasificado dentro

    de la familia Enterobacteriaceae (bacterias entricas), existe como comensal en el

    intestino delgado de humanos y animales. Sin embargo, hay algunas cepas de E. coli

    patgenas que provocan enfermedades diarreicas. Estas E. coli se clasifican con base

    en las caractersticas que presentan sus factores de virulencia nicos, cada grupo

    provoca la enfermedad por un mecanismo diferente. Las propiedades de adherencia a

    las clulas epiteliales de los intestinos grueso y delgado son codificadas por genes

    situados en plsmidos. De manera similar las toxinas son mediadas por plsmidos o

    fagos.

    Fundamento

    La determinacin de microorganismos coliformes totales por el mtodo del Nmero

    ms Probable (NMP), se fundamenta en la capacidad de este grupo microbiano de

    fermentar la lactosa con produccin de cido y gas al incubarlos a 35C 1C durante

    48 h., utilizando un medio de cultivo que contenga sales biliares. Esta determinacin

    consta de dos fases, la fase presuntiva y la fase confirmativa.

    En la fase presuntiva el medio de cultivo que se utiliza es el caldo lauril sulfato de sodio

    el cual permite la recuperacin de los microorganismos daados que se encuentren

    presentes en la muestra y que sean capaces de utilizar a la lactosa como fuente de

    carbono. Durante la fase confirmativa se emplea como medio de cultivo caldo

    lactosado bilis verde brillante el cual es selectivo y solo permite el desarrollo de

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    aquellos microorganismos capaces de tolerar tanto las sales biliares como el verde

    brillante.

    La determinacin del nmero ms probable de microorganismos coliformes fecales se

    realiza a partir de los tubos positivos de la prueba presuntiva y se fundamenta en la

    capacidad de las bacterias para fermentar la lactosa y producir gas cuando son

    incubados a una temperatura de 44.5 0.1C por un periodo de 24 a 48 h.

    La bsqueda de Escherichia coli se realiza a partir de los tubos positivos de caldo EC,

    los cuales se siembran por agotamiento en medios selectivos y diferenciales (Agar Mac

    Conkey, Agar eosina azul de metileno) y posteriormente realizando las pruebas

    bioqumicas bsicas (IMViC) a las colonias tpicas.

    Procedimiento

    1. Agua y hielo

    1.1 Prueba presuntiva

    Agitar la muestra y transferir volmenes de acuerdo con el cuadro 1, a cadauno de los tubos con caldo lauril sulfato de sodio que se hayan seleccionado.

    Agitar los tubos para homogeneizar la muestra.

    CUADRO 1. Preparacin de inculo con caldo lauril sulfato de sodio

    Incubar los tubos a 35 0,5C. Examinar los tubos a las 24 h. y observar si hayformacin de gas (desplazamiento del medio en la campana de Durham); si no

    se observa produccin de gas, incubar 24 h. ms.

    1.2 Prueba confirmativa de microorganismos coliformes totales

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    Transferir de 2 a 3 asadas de cada tubo positivo obtenido durante la pruebapresuntiva, a otro tubo de 16 x150 mm que contiene caldo de bilis verde

    brillante (brila), con campana de Durham.

    Agitar los tubos para su homogeneizacin. Incubar a 35 2C durante 24 a 48 h.. Registrar como positivos aquellos tubos en donde se observe turbidez

    (crecimiento) y produccin de gas despus de un perodo de incubacin de 24

    a 48 h.

    Consultar la tabla 1 2 de NMP para conocer el nmero ms probable deorganismos coliformes totales/100 mL.

    1.3 Prueba confirmativa de microorganismos coliformes fecales.

    Transferir de 2 a 3 asadas de cada tubo positivo obtenido durante la pruebapresuntiva (caldo lauril sulfato de sodio) a un tubo de 16 x 150 mm, con caldo

    EC conteniendo campana de Durham.

    Agitar los tubos para su homogeneizacin. Incubar a 44.5 0.1C en incubadora o un bao de agua durante 24 a 48 h. Registrar como positivos todos los tubos en donde se observe crecimiento y

    produccin de gas despus de un perodo de incubacin de 24 a 48 h.

    Consultar la tabla 1 2 de NMP para conocer el nmero ms probable derganismos coliformes fecales/ 100 mL.

    Control de calidad:

    1. Inocular a dos tubos con caldo EC una cepa de E. coli como control positivo y una de

    Enterobacter aerogenes como control negativo e incubar con las muestras.

    1.4 Prueba confirmativa para Escherichia coli

    Tomar una asada de cada uno de los tubos positivos en caldo EC y sembrar porestra cruzada en agar eosina azul de metileno para su aislamiento.

    Incubar las placas invertidas a 35C por 18-24 h. Seleccionar dos colonias de cada placa con la siguiente morfologa colonial:

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    Colonias con centro negro, planas con o sin brillo metlico. Si no hay coloniascon morfologa tpica, probar una o ms colonias lo ms parecido E. coli de

    cada placa y sembrarlas en agar cuenta estndar para realizar las pruebas de

    morfologa microscpica y pruebas bioqumicas.

    Incubar las placas a 35C por 18-24 h. Hacer un frotis y teirlo por Gram. Observar al microscopio la presencia de

    bacilos cortos o cocobacilos Gram-negativos.

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    ANEXO 2:

    PUNTOS DE MUESTREO EN LA PLANTA DE TRATAMIENTO COVICORTI

    Imagen N1: Imagen satelital de la PTAR Covicorti Google Earth 2011

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    Punto de Muestreo E:

    Imagen N2: Imagen satelital del Primer punto de muestreo en la PTAR Covicorti

    Google Earth 2011

    Punto de Muestreo A:

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    Imagen N3: Imagen satelital del Segundo punto de muestreo en la PTAR Covicorti

    Google Earth 2011

    Punto de Muestreo B:

    Imagen N4: Imagen satelital del Tercer punto de muestreo en la PTAR Covicorti

    Google Earth 2011

    Punto de Muestreo C:

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    Universidad Nacional de Trujillo Ing. Ambiental

    VI ciclo Pgina 33

    Imagen N5: Imagen satelital del Cuarto punto de muestreo en la PTAR Covicorti

    Google Earth 2011

    Punto de Muestreo D:

    Imagen N6: Imagen satelital del Quinto punto de muestreo en la PTAR Covicorti

    Google Earth 2011

    PUNTOS DE MUESTREO UBICACIN

    Punto de Muestreo E: Afluente a la planta de

    tratamiento, (Agua cruda)

    Punto de Muestreo A: Efluente de la laguna aireada

    (Zona de desborde)

    Punto de Muestreo B: Efluente de la laguna

    facultativa N1

    Punto de Muestreo C: Efluente de la laguna

    facultativa N2

    Punto de Muestreo D: Efluente de la laguna

    facultativa N3

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    AFLUENTE: Constituido por una tubera de 1300 mm. De aproximadamente 600m de longitud.

    LAGUNAS AEREADAS: Se encuentran equipadas con 6 equipos de aireacin de75 Hp cada uno , con las siguientes dimensiones:

    a. Largo: 153 mb. Ancho: 102 mc. Profundidad: 4.0 md. Volumen unitario: 54.452 m3

    LAGUNAS FACULTATIVAS: LA PTRA Covicorti cuenta con 4 lagunas facultativasrevestidas en la parte lateral superficial para evitar la erosin del terreno

    ,cuenta adems con dos vertederos de salida protegidos con una pantalla que

    evita la salida del material flotante. Las lagunas facultativas cuentan con las

    siguientes dimensiones:

    a. Largo: 276 mb. Ancho: 138 mc. Profundidad: 210 md. Volumen unitario: 76 208 m3

    EFLUENTE: Se encuentra constituido por un canal abierto revestido conconcreto los primeros 800m .El afluente recoge las aguas de los 8 vertederos de

    evacuacin .Las aguas residuales tratadas son conducidas al ocano pacifico y

    parte de ellas estn siendo utilizadas para el riego de plantaciones de tallo alto

    como maz, rboles frutales y caa azcar.

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    ANEXO 3:

    Decreto Supremo N 003-2010-MINAM que aprueba los Lmites Mximos Permisibles para los

    afluentes de Plantas de Tratamiento de Aguas Residuales Domesticas o municipales.